CN103563748B - 一种培育马铃薯脱毒试管苗壮苗的方法 - Google Patents

一种培育马铃薯脱毒试管苗壮苗的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103563748B
CN103563748B CN201310534612.4A CN201310534612A CN103563748B CN 103563748 B CN103563748 B CN 103563748B CN 201310534612 A CN201310534612 A CN 201310534612A CN 103563748 B CN103563748 B CN 103563748B
Authority
CN
China
Prior art keywords
potato
medium
strong sprout
virus
concentration
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201310534612.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103563748A (zh
Inventor
秦廷豪
阳翠
黄运军
李晓梅
龙小蓉
彭晓玲
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
SICHUAN ACADEMY OF BOTANICAL ENGINEERING
Original Assignee
SICHUAN ACADEMY OF BOTANICAL ENGINEERING
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by SICHUAN ACADEMY OF BOTANICAL ENGINEERING filed Critical SICHUAN ACADEMY OF BOTANICAL ENGINEERING
Priority to CN201310534612.4A priority Critical patent/CN103563748B/zh
Publication of CN103563748A publication Critical patent/CN103563748A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103563748B publication Critical patent/CN103563748B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • Y02P60/216—

Landscapes

  • Cultivation Of Plants (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明涉及马铃薯脱毒试管苗壮苗技术，特别是一种培育马铃薯脱毒试管苗壮苗的方法，主要包括培养基的配制、脱毒苗的快繁、脱毒苗的移栽步骤。本发明用改良1/2MS为基本培养基，以自来水和食用白糖为原料，在马铃薯组培快繁不同阶段附加不同浓度的B9，使继代培养周期变短，试管苗更健壮；在脱毒试管苗快繁增殖阶段添加B9的浓度为4-8mg.L-1，有效的促进了脱毒试管苗茎粗、有效茎节数及根数的增加，并且叶片增厚、叶色浓绿，继代周期从传统的3-4周减到只需14-18天，极大的提高了马铃薯脱毒试管苗的繁殖效率，在脱毒苗移栽前的培养基内添加B9的浓度为10-15mg.L-1，脱毒试管苗其茎变得更粗壮、节间较短、茎木质化程度更高，可提高其移栽成活率。

Description

一种培育马铃薯脱毒试管苗壮苗的方法
技术领域
本发明涉及马铃薯脱毒试管苗壮苗技术，特别是一种培育马铃薯脱毒试管苗壮苗的方法。
背景技术
马铃薯脱毒及种薯生产体系的建立从根本上解决了马铃薯种薯退化的问题，而脱毒试管苗的生产快繁是整个体系中极其关键的环节之一。采用传统培养基进行马铃薯脱毒试管苗的生产容易出现试管苗生长过旺、苗茎径细小、节间长、叶小、“烧尖”及须根较多等现象,这不仅影响了脱毒苗接种、移栽的工作效率更降低了脱毒苗的繁殖系数及移栽成活率，因此进行马铃薯脱毒试管苗促壮研究，从而培育健壮、优质脱毒试管苗显得尤为重要。
中国专利申请CN200710066315.6公开了一种马铃薯脱毒试管薯漂浮苗的方法，此方法提高了试管薯的出苗率，但是需要建苗池，成本较高，不适宜大规模育苗，操作不方便。中国专利申请CN201210589941.4公开了一种马铃薯脱毒试管薯室内培养架育苗的方法，主要包括育苗托盘的设计、培养基质配方、营养液配方和育苗步骤。育苗步骤为：把已发芽的脱毒试管薯播种于托盘上，然后把已播种的托盘放于无菌半开放LED灯培养室培养架上培养，在光强为2500-3500lux的红蓝光LED灯下每天光照8小时，红蓝光比为6:4，保持温度25℃；播种15-20天后，将幼苗从穴盘上拔出，根系带着培养基质移栽，小号试管薯育苗视具体情况适当延长时间，此方法营养液配方大量元素KNO3，NH4NO3，KH2PO4，MgSO4，CaCl2浓度较高，成本较高，出苗率达95％以上。中国专利申请CN201210450346.2公开了一种脱毒马铃薯试管薯循环生产工艺，包括如下步骤：试管苗壮苗培养、试管薯诱导，在所述试管苗壮苗培养步骤之后，将试管苗壮苗培养的脱毒马铃薯试管苗剪取顶芽后，再将去顶芽的脱毒马铃薯试管苗加入试管薯诱导培养基，进行试管薯诱导生产；剪取的顶芽则继续进行试管苗壮苗培养，此工艺中固体壮苗培养基配方为MS+10mg·L-1B9+3.5g/L琼脂粉+30g/L白糖，诱导培养基中配方为MS+8mg·L-1BA+100g/L白糖，MS培养基中的KNO3，NH4NO3，KH2PO4,MgSO4,CaCl2浓度较高，成本较高，此工艺周期长，液体壮苗培养25天左右。
发明内容
本发明提供了一种培育马铃薯脱毒试管苗壮苗的方法。
本发明培育马铃薯脱毒试管苗壮苗的方法，步骤如下：
(1)培养基的配制：
配制含有950mg·L-1KNO3，825mg·L-1NH4NO3，100mg·L-1KH2PO4,185mg·L-1MgSO4,220mg·L-1CaCl2，27.8mg·L-1FeSO4·7H2O，37.3mg·L-1Na2·EDTA·2H2O，0.83mg·L-1KI，6.2mg·L-1H3BO3，22.3mg·L-1MnSO4·4H2O，8.6mg·L-1ZnSO4·7H2O，0.25mg·L-1Na2MO4·2H2O，0.025mg·L-1CuSO4·5H2O，0.025mg·L-1CoCl2·2H2O，100mg·L-1肌醇，2mg·L-1甘氨酸，0.1mg.·L-1盐酸硫胺素，0.5mg·L-1盐酸吡哆醇，0.5mg·L-1烟酸，30g·L-1食用白糖，5.4g·L-1琼脂，0～25mg·L-1B9的培养基，调节pH5.8；
(2)脱毒苗的快繁：
按每个茎节为一个外植体正向插入步骤(1)中的培养基内，于23℃，2000lx光照条件下培养，在脱毒试管苗增殖阶段添加B9的浓度为4-8mg·L-1，15天继代一次，出瓶移栽前添加B9的浓度为10-15mg·L-1，得到马铃薯脱毒试管壮苗；
(3)脱毒苗的移栽：
将步骤(2)的马铃薯脱毒试管壮苗剪掉根须部，冲洗净培养基后于1000倍75％多菌灵中浸泡10min后，移栽入珍珠岩：蛭石＝1:10的基质中，浇足定根水后覆膜，每天喷施0.1％～0.2％磷酸二氢钾2次，7天后马铃薯脱毒试管苗壮苗成活。
本发明通过改良1/2MS的大量元素，通过在脱毒苗繁殖的两个不同阶段添加不同浓度的B9，优选B9浓度是在脱毒试管苗增殖阶段添加B9的浓度为4-8mg·L-1，出瓶移栽前添加B9的浓度为10-15mg·L-1，有效的培育了脱毒马铃薯试管苗壮苗。
与现有技术相比，本发明具有如下优点：
1.壮苗培养周期短：本发明壮苗培养周期为15天左右，而其他类似文献的液体壮苗培养周期为25天左右。
2.生产成本低：本发明改良1/2MS的大量元素，用自来水和食用白糖为原料，继代周期短，极大的降低了马铃薯脱毒试管壮苗生产成本。
3.显著提高各项生理指标，移栽成活率达97％以上：在脱毒试管苗快繁阶段添加B9的浓度为4-8mg·L-1，有效的促进了脱毒试管苗茎粗、有效茎节数及根数的增加，并且叶片增厚、叶色浓绿，使每代继代周期从传统的3-4周减到只需14-18天，极大的提高了马铃薯脱毒试管苗的繁殖效率，在脱毒苗移栽前的培养基内添加B9的浓度为10-15mg·L-1，脱毒试管苗其茎变得更粗壮、节间较短、茎木质化程度更高，提高了其移栽成活率。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明做进一步的详细描述，但并非对本发明的限制，凡依照本发明公开内容所做的任何本领域的等同替换，均属于本发明的保护范围。
实施例1马铃薯“费乌瑞它”脱毒苗快繁及移栽
(1)培养基的配制：
配制含有950mg·L-1KNO3，825mg·L-1NH4NO3，100mg·L-1KH2PO4,185mg·L-1MgSO4,220mg·L-1CaCl2，27.8mg·L-1FeSO4·7H2O，37.3mg·L-1Na2·EDTA·2H2O，0.83mg·L-1KI，6.2mg·L-1H3BO3，22.3mg·L-1MnSO4·4H2O，8.6mg·L-1ZnSO4·7H2O，0.25mg·L-1Na2MO4·2H2O，0.025mg·L-1CuSO4·5H2O，0.025mg·L-1CoCl2·2H2O，100mg·L-1肌醇，2mg·L-1甘氨酸，0.1mg·L-1盐酸硫胺素，0.5mg·L-1盐酸吡哆醇，0.5mg·L-1烟酸，30g/L食用白糖，5.4g/L琼脂，0～25mg·L-1B9的培养基，调pH5.8；
(2)脱毒苗的快繁：
按每个茎节为一个外植体正向插入步骤(1)中的培养基内，于23℃，2000lx光照条件下培养15天，统计脱毒苗茎长、茎粗、有效叶片数，根长、根数，在不同B9浓度下马铃薯各项生理指标如下表1所示：
表1不同B9浓度对马铃薯“费乌瑞它”脱毒苗生长的影响
注：a、b、c、d、e、f为统计分析中差异性，不同字母表示处理间差异达显著水平。
(3)脱毒苗的移栽：
将步骤(2)中的不同处理的马铃薯“费乌瑞它”脱毒试管苗剪掉根须部，冲洗净培养基后于1000倍75％多菌灵中浸泡10min后，移栽入珍珠岩：蛭石＝1:10的基质中，每处理移栽100苗，浇足定根水后覆膜，每天喷施0.1％-0.2％磷酸二氢钾2次，7天后马铃薯脱毒试管苗壮苗成活，统计成活率，结果如下表2所示：
表2不同B9浓度处理对马铃薯“费乌瑞它”试管苗移栽成活率的影响
实施例2马铃薯“米拉”脱毒苗快繁及移栽
(1)培养基的配制：
配制含有950mg·L-1KNO3，825mg·L-1NH4NO3，100mg·L-1KH2PO4,185mg·L-1MgSO4,220mg·L-1CaCl2，27.8mg·L-1FeSO4·7H2O，37.3mg·L-1Na2·EDTA·2H2O，0.83mg·L-1KI，6.2mg·L-1H3BO3，22.3mg·L-1MnSO4·4H2O，8.6mg·L-1ZnSO4·7H2O，0.25mg·L-1Na2MO4·2H2O，0.025mg·L-1CuSO4·5H2O，0.025mg·L-1CoCl2·2H2O，100mg·L-1肌醇，2mg·L-1甘氨酸，0.1mg·L-1盐酸硫胺素，0.5mg·L-1盐酸吡哆醇，0.5mg·L-1烟酸，30g/L食用白糖，5.4g/L琼脂，0～25mg·L-1B9的培养基，调pH5.8；
(2)脱毒苗的快繁：
按每个茎节为一个外植体正向插入步骤(1)中的培养基内，于23℃，2000lx光照条件下培养15天，统计脱毒苗茎长、茎粗、有效叶片数，根长、根数，在不同B9浓度下马铃薯各项生理指标如下表3所示：
表3不同B9浓度对马铃薯“米拉”脱毒苗生长的影响
注：a、b、c、d、e、f为统计分析中差异性，不同字母表示处理间差异达显著水平。
(3)脱毒苗的移栽：
将步骤(2)中的不同处理的马铃薯“米拉”脱毒试管苗剪掉根须部，冲洗净培养基后于1000倍75％多菌灵中浸泡10min后，移栽入珍珠岩：蛭石＝1:10的基质中，每处理移栽100苗，浇足定根水后覆膜，每天喷施0.1％-0.2％磷酸二氢钾2次，7天后马铃薯脱毒试管壮苗成活，统计成活率，结果如下表4所示：
表4不同B9浓度处理对马铃薯“米拉”试管苗移栽成活率的影响

Claims (1)

1.一种培育马铃薯脱毒试管苗壮苗的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)培养基的配制：
由950mg·L-1KNO3，825mg·L-1NH4NO3，100mg·L-1KH2PO4,185mg·L-1MgSO4,220mg·L-1CaCl2，27.8mg·L-1FeSO4·7H2O，37.3mg·L-1Na2·EDTA·2H2O，0.83mg·L-1KI，6.2mg·L-1H3BO3，22.3mg·L-1MnSO4·4H2O，8.6mg·L-1ZnSO4·7H2O，0.25mg·L-1Na2MO4·2H2O，0.025mg·L-1CuSO4·5H2O，0.025mg·L-1CoCl2·2H2O，100mg·L-1肌醇，2mg·L-1甘氨酸，0.1mg·L-1盐酸硫胺素，0.5mg·L-1盐酸吡哆醇，0.5mg·L-1烟酸，30g·L-1食用白糖，5.4g·L-1琼脂，0～25mg·L-1B9配制培养基，调节pH5.8；
(2)脱毒苗的快繁：
按每个茎节为一个外植体正向插入步骤(1)中的培养基内，于23℃，2000lx光照条件下培养，在脱毒试管苗增殖阶段B9的浓度为4-8mg·L-1，15天继代一次，出瓶移栽前B9的浓度为10-15mg·L-1，得到马铃薯脱毒试管壮苗；
(3)脱毒苗的移栽：
将步骤(2)的马铃薯脱毒试管壮苗剪掉根须部，冲洗净培养基后于1000倍75％多菌灵中浸泡10min后，移栽入珍珠岩：蛭石＝1:10的基质中，浇足定根水后覆膜，每天喷施0.1％～0.2％磷酸二氢钾2次，7天后成活。
CN201310534612.4A 2013-11-01 2013-11-01 一种培育马铃薯脱毒试管苗壮苗的方法 Expired - Fee Related CN103563748B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310534612.4A CN103563748B (zh) 2013-11-01 2013-11-01 一种培育马铃薯脱毒试管苗壮苗的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310534612.4A CN103563748B (zh) 2013-11-01 2013-11-01 一种培育马铃薯脱毒试管苗壮苗的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103563748A CN103563748A (zh) 2014-02-12
CN103563748B true CN103563748B (zh) 2016-04-13

Family

ID=50037149

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310534612.4A Expired - Fee Related CN103563748B (zh) 2013-11-01 2013-11-01 一种培育马铃薯脱毒试管苗壮苗的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103563748B (zh)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103947552A (zh) * 2014-04-28 2014-07-30 内蒙古嘉恒农业科技有限责任公司 马铃薯脱毒瓶苗培养基及其制备方法
CN105103894B (zh) * 2015-08-26 2018-01-09 华中农业大学 一种高效节能的马铃薯试管薯生产方法
CN105145356A (zh) * 2015-09-10 2015-12-16 宁波市农业科学研究院 紫马铃薯微型薯的快速繁殖方法
CN105706880A (zh) * 2016-03-15 2016-06-29 宁夏农林科学院 一种紫薯脱毒苗水培快繁的方法
CN106386056B (zh) * 2016-08-31 2021-06-15 山西省农业科学院高寒区作物研究所 一种马铃薯的栽培方法
CN108124771A (zh) * 2018-01-10 2018-06-08 丽江市农业科学研究所 一种马铃薯试管苗免扦插的繁殖方法
CN108207630A (zh) * 2018-01-10 2018-06-29 丽江市农业科学研究所 一种马铃薯脱毒基础苗二次培养方法
CN111374049A (zh) * 2018-12-30 2020-07-07 甘肃康勤薯业有限公司 一种水培马铃薯脱毒苗的培养基及应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102919126A (zh) * 2012-11-12 2013-02-13 达州市农业科学研究所 一种脱毒马铃薯试管薯循环生产工艺

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102919126A (zh) * 2012-11-12 2013-02-13 达州市农业科学研究所 一种脱毒马铃薯试管薯循环生产工艺

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
B9 对马铃薯试管苗培养的效应研究初报;许端祥等;《福建农业科技》;20041231(第6期);第19页最后一段 *
PP333、B9和 CCC对脱毒马铃薯试管繁殖的影响;赵建萍等;《植物生理学通讯》;20031231;第39卷(第6期);第571-574页 *
不同MS和B 9浓度对马铃薯脱毒试管苗生长的研究;崔翠等;《西南农业大学学报》;20011031;第23卷(第5期);摘要 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN103563748A (zh) 2014-02-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103563748B (zh) 一种培育马铃薯脱毒试管苗壮苗的方法
CN102150624B (zh) 半夏属植物的组培快繁方法
CN101720670B (zh) 旱半夏组织培养快速繁殖方法
CN107155898B (zh) 一种铁皮石斛利用茎段薄片进行扩繁的方法
CN101731144B (zh) 一种在试管中进行番茄组织培养的方法
CN102870680A (zh) 一种适宜脱毒兔眼蓝莓的高效快繁技术
CN101889547A (zh) 齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法
CN102845313A (zh) 狗枣猕猴桃的离体快速繁殖方法
CN104813939A (zh) 一种荷花再生体系的构建方法
CN101897297B (zh) 一种萱草组织培养两步成苗的快繁方法
CN1255022C (zh) 兜兰的无菌播种和组织培养方法
CN101715730B (zh) 甘蔗新台糖10号组织培养快速繁殖方法
CN103493738B (zh) 一种朱顶红标准化离体培养种苗的方法
CN111066654A (zh) 一种多肉植物的组培快繁方法
CN112715367B (zh) 一种利用硝酸镧进行毛梾组培继代增殖的方法
CN103155869A (zh) 甜樱桃砧木Colt组织培养方法
CN106818488B (zh) 一种长瓣兜兰的组织培养快速繁殖方法
CN102577972A (zh) 心叶球兰组织培养方法
CN111165354B (zh) 文冠果的一种组织培养繁殖方法
CN111557242B (zh) 一种莲组培苗培养与快速扩繁的方法
CN103125384A (zh) 南海杜鹃的组织培养与快速繁殖方法
CN102715091A (zh) 一种油棕组织培养的繁殖方法
CN106613973A (zh) 利用组培苗叶片再生不定芽快速繁育羊踯躅的方法
CN102144557A (zh) 通过植物组织培养黄金宝树进行优良植物体的诱导、继代增殖培养的方法
CN102308749B (zh) 一种红王子锦带花药诱导花粉植株培养基

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20160413

Termination date: 20171101