CN103550754A - 一种用于辅助降血糖的益生菌发酵中药复方组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于辅助降血糖的益生菌发酵中药复方组合物及其制备方法和应用,所述的益生菌发酵中药复方组合物以中药复方粉葛、山药、桑叶、枸杞子、马齿苋、干姜、苦荞麦、西洋参,甘草、蚕蛹、猪胰脏的提取物为发酵底物,经益生菌发酵后制得,该益生菌发酵中药复方组合物可用于制备治疗糖尿病的药物或保健食品或食品。本发明的益生菌发酵中药复方组合物具有口感易于接受,不刺激胃肠道,同时由于含有益生菌菌体及其代谢产物,能够调理胃肠道环境,增加了对药物的吸收,减轻了盐酸小檗碱对胃肠道的刺激。
Description
技术领域
本发明涉及益生菌发酵中药提取物制剂及制备方法,进一步涉及由粉葛、山药、桑叶、枸杞子、马齿苋、干姜、苦荞麦、西洋参、甘草、蚕蛹、猪胰脏提取物经肠道益生菌发酵后制得的发酵组合物,以及该发酵组合物在制备用于降低高血糖病人食品、保健品、药品中的应用,属于生物发酵技术领域。
背景技术
糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)是一种常见的内分泌代谢性疾病,在中国传统医学中属于“消渴病”的范畴。它是一组由于胰岛素分泌缺陷,或胰岛素作用缺陷,或者两者兼而有之引起的高血糖代谢为特征的代谢疾病。糖尿病的慢性高血糖带来氧化应激增加,引起多脏器的长期损害,功能减退和衰竭,尤其是眼、肾脏、神经、心脏和血管,危害健康。目前,中国每年约增加100万新的糖尿病患者。糖尿病流行的原因主要包括以下几个方面:种族和遗传、单基因突变遗传性糖尿病、生活方式的变化以及人口老龄化糖尿病常伴随各种并发症。
对糖尿病基础研究的深入,越来越多的治疗药物研制成功并投入临床使用。西药降血糖作用强、起效快.但往往缺乏整体的协调性,且具有明显的副作用,不利于糖尿病患者长期使用。我国历代医学书籍中所述的消渴症与糖尿病类同.且证明患者尿甜。中医认为,阴虚内热,日久则阴损于阳,瘀血阻络,气阴两虚,是本病及其并发症的病理基础。近年来现代中医药对糖尿病的研究有了进一步的深入,诸多研究表明中药治疗糖尿病多途径、多靶点、多环节.是综合治疗作用的体现。因此,从中药中寻找新的降血糖药物。对提高患者的整体状况有独特的优势。
近年来,有关中草药及其成分用于治疗实验性糖尿病的研究甚为活跃。中草药的某些活性成分可以保护β细胞的功能,延缓β细胞功能衰竭,纠正胰岛素分泌缺陷,缓解糖毒性。中草药治疗糖尿病的同时,不增加低血糖、体重增加等风险。目前微生态学研究表明,糖尿病人的肠道菌群失调,有害菌增加,而有益菌减少,很多慢性病的发生发展与肠道菌群结构失调有密切关系,并且近年来的药代动力学表明,口服的天然药物其药理作用的发挥,很大程度上依赖于肠道菌群对其的分解代谢,因此,利用肠道有益菌群对中草药进行发酵转化,提高药物的活性成分,调理人体的肠道功能,提高药物的吸收率,是药物研发的重要手段。
近20年的大量研究表明,人体内的低度、全身性的慢性炎症是肥胖、糖尿病、冠心病、衰老和老年性疾病以及很多癌症的重要诱发因素。重新建立合理的菌群结构,消除慢性炎症,就可能修复我们的身体。微生态学研究表明,糖尿病等一些慢性疾病,均可导致菌群失调,而促使疾病发生发展。
小檗碱(Berberine,BBR)是一种异喹啉,分子式[C20H18ON4]+,广泛存在于小檗科等许多植物中。由于对多种革兰阳性及阴性菌具有抑菌作用,同时又能增强白细胞及肝网状内皮系统的吞噬能力,临床现广泛用于治疗胃肠炎、细菌性痢疾等感染性疾病。小檗碱是中药黄连的主要有效成分之一,故盐酸小檗碱又称黄连素。黄连尽管为清热解毒的代表药物,但早在魏晋时期,《名医别录》就有“黄连止消渴”的记载;《肘后备急方》、《本草纲目》也有记载,在治疗消渴的方剂配伍中,不少含有黄连。目前,小檗碱应用于糖尿病及其并发症的治疗已经超过20年,现代药理证明,黄连具有明显的降血糖作用。由于黄连的大苦、大寒之性使黄连尤其是大剂量并未在治疗糖尿病得到广泛使用。黄连口感差、并且容易造成胃肠功能紊乱,主要表现在腹泻和便秘。黄连为苦寒之品,易伤胃阳,易致脾胃虚寒出现胃脘胀满不舒。
发明内容
本发明的一个目的是克服现有药物治疗糖尿病症的缺陷,提供一种用于辅助降血糖的益生菌发酵中药复方组合物。
本发明的技术方案为:
一种用于辅助降血糖的益生菌发酵中药复方组合物,由益生菌发酵中药复方制得,所述中药复方的成分及含量为:每1000ml益生菌发酵中药复方组合物中含:粉葛50g-100g、山药20g-600g、桑叶20g-60g、枸杞子20g-60g、马齿苋30g-90g、干姜10g-40g、苦荞麦50-150、西洋参10g-60g、甘草4g-10g、蚕蛹10g-50g、猪胰脏30g-90g。
优选方案为:每1000ml益生菌发酵中药复方组合物中含:粉葛80g、山药40g、桑叶40g、枸杞子40g、马齿苋60g、干姜25g、苦荞麦100g、西洋参50g(细粉),甘草8g、蚕蛹24g、猪胰脏60g。
所述的益生菌为双歧杆菌和乳杆菌。
所述的双歧杆菌选自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌;所述的乳杆菌选自嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌。菌种来源于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)(中国,武汉)或中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)(中国,北京)或者从正常人的粪便或肠粘膜组织中分离得到这些细菌菌株。
本发明的另一个目的是提供一种制备上述用于辅助降血糖的益生菌发酵中药复方组合物的方法,其步骤如下:
a.制备脱脂蚕蛹粉液:按中药复方取蚕蛹洗净,100℃烘干至水分小于5.0%,粉碎,过40目筛,加入蚕蛹粉重量/体积比3倍量的95%乙醇,60℃脱脂2.0小时,抽滤后,80℃烘干,过40目筛,得脱脂蚕蛹粉,加入重量/体积比6倍的水,浸泡30分钟,加热煮沸30分钟,冷却至45℃,即得脱脂蚕蛹粉液;
b.制备蚕蛹酶解液:取新鲜猪胰脏去掉脂肪筋膜,打浆后与脱脂蚕蛹粉液混合,用氢氧化钠调pH值为8.0,酶解3小时左右,pH降至6.5—6.8时,加热灭酶,结束酶解;将酶解液用盐酸调pH值为4.5,加热至沸10分钟,过滤后得蚕蛹酶解液;
c.制备中药复方提取物:将西洋参粉碎,过100目筛,得西洋参粉;将中药粉葛、山药、桑叶、枸杞子、马齿苋、干姜、苦荞麦、西洋参粉、甘草加重量/体积比8倍的饮用水,浸泡1小时后,并于100℃提取1小时,过滤,再向滤渣中加重量/体积比6倍的水,100℃提取1小时后,过滤后合并滤液,并与步骤b制备的蚕蛹酶解液混合,减压下浓缩至所需体积,即得中药复方提取物;
d.制备益生菌发酵用的中药复方提取物底物:在步骤c得到的中药复方提取物中加入重量/体积比为0.25%~1.5%的葡萄糖、重量/体积比为0.1%~0.6%的蛋白胨、重量/体积比为0.05 %~0.2%的酵母粉、重量/体积比为0.1%~0.4%的酵母膏、重量/体积比为0.01%~0.03%的三氯蔗糖、无机盐、三氯化铬CrCl3·6H2O 0.77mg/100ml,调整pH值7.0并于115℃下灭菌40分钟后,得到益生菌发酵用的中药复方提取物底物;
e. 制备益生菌发酵中药复方组合物:当步骤d得到的益生菌发酵用的中药复方提取物底物灭菌后温度降至39℃左右时,接种预培养的体积百分比各约0.5%的一种或者两种双歧杆菌的菌液,常规培养约2~6小时,再次接种预培养的体积百分比各约0.5%的两种或者三种乳杆菌的菌液,继续发酵20~22小时,pH值降至4.0以下时结束发酵,稳定化处理后即得到本发明所述的益生菌发酵中药复方组合物。
步骤d中所述的无机盐为FeSO4·7H2O 1.0mg/100ml、ZnSO4·7H2O 4.4mg/100ml、Na2SeO3·5H2O 0.024 mg/100ml、MgSO4·7H2O 70mg/100ml、K2HPO4·3H2O 100mg/100ml、KH2PO4 100mg/100ml。
步骤e中所述的接种的方式为同时接种预培养的体积百分比各约0.5%的一种或者两种双歧杆菌的菌液和预培养的体积百分比各约0.5%的两种或者三种乳杆菌的菌液;所述发酵的时间为常规发酵16~48小时,当pH降至4.0以下时结束发酵,稳定化处理后即得本发明所述的益生菌发酵中药复方组合物。
本发明的再一个目的是提供本发明的益生菌发酵中药复方组合物在制备治疗糖尿病的药物或保健食品或食品中的应用。
可按照制药工业中已知的方法(如参见Remington,s Pharmaceutical Science.15th ed., Mack Publishing Company,1980 )将本发明的益生菌发酵中药复方组合物与一种或多种医药上可接受的载体或赋形剂或稀释剂按适当的比例混合,并按已知方法除菌后,制成药剂学上可接受的胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、片剂、口服液制剂。
可将本发明的发酵组合物直接制成保健食品或药物,适于患有高血糖的人预防或治疗使用。
一般说来,本发明的发酵组合物的口服给药剂量可根据待治疗的病症或病理状态的性质、严重程度、病人或动物的年龄、体重、一般健康状态,以及病人或动物对所用药物的敏感性、耐受性和给药方式等因素,按照个体化的原则由临床医生确定。
本发明的益生菌发酵中药组合物具有口感易于接受、不刺激胃肠道,同时由于含有益生菌菌体及其代谢产物,能够调理胃肠道环境,增加了对药物的吸收。
利用肠道益生菌发酵中药提取物,产生的酸性代谢物可以中和黄连的苦,使患者能够坚持服用。并且益生菌发酵中药组合物可以调理胃肠道功能,减轻盐酸小檗碱对胃肠道的刺激。
肠道益生菌参与了人体的生理、生化、病理和药理过程。因此,益生菌发酵中药组合物用于糖尿病人的辅助治疗,具有重大的社会和经济效益。
具体实施方式
实施例1:益生菌发酵中药复方组合物中蚕蛹提取方法
取蚕蛹24g,100℃将洗净后的蚕蛹烘干至水分小于5.0%,粉碎,过40目筛,加入蚕蛹粉3倍量的(重量/体积)95%乙醇,60℃脱脂2.0小时,抽滤后,80℃烘干,过40目筛,得脱脂蚕蛹粉,将脱脂蚕蛹粉中加入6倍的水(重量/体积),浸泡30分钟,加热煮沸30分钟,冷却至45℃备用。此为脱脂蚕蛹粉液。取新鲜的猪胰脏60g,去掉脂肪筋膜,打浆后与脱脂蚕蛹粉液混合,用氢氧化钠调pH值为8.0,酶解3小时左右,pH降至6.5—6.8时,加热灭酶,结束酶解。将酶解液用盐酸调pH值为4.5,加热至沸10分钟,过滤后得蚕蛹酶解液。或者直接购买脱脂的蚕蛹粉,加水浸泡后同样方法酶解,即得。
实施例2 益生菌发酵中药复方组合物的制备
将西洋参粉碎,过100目筛,得西洋参粉;按下列重量称取各味中药:粉葛80g、山药40g、桑叶40g、枸杞子40g、马齿苋60g、干姜25g、苦荞麦100g、西洋参50g(细粉)、甘草8g,加8倍水浸泡1小时,并于100℃提取1小时,过滤,再向滤渣中加6倍量水,100℃提取1小时后,过滤并合并滤液,并加入实施例1中提取的蚕蛹酶解液,减压下浓缩至1000ml,即得中药复方提取物。然后再加入葡萄糖(重量/体积比0.5%)、蛋白胨(重量/体积比0.2%)、酵母粉(重量/体积比0.1%)、酵母膏(重量/体积比0.2%)、三氯蔗糖(重量/体积比0.017%)、无机盐(FeSO4·7H2O 1.0mg/100ml、ZnSO4·7H2O 4.4mg/100ml、Na2SeO3·5H2O 0.024 mg/100ml、MgSO4·7H2O 70mg/100ml、K2HPO4·3H2O 100mg/100ml、KH2PO4 100mg/100ml),三氯化铬(CrCl3·6H2O)0.77mg/100ml,调整pH7.0左右,并于115℃下灭菌40分钟。当温度降至39℃左右时,接种预培养的各约0.5%(体积百分比)的两歧双歧杆菌(正常人体分离,经中国科学院微生物研究所鉴定)和短双歧杆菌(AS 1.2213)的菌液,37℃培养约6小时后,再接种各约0.5%(体积百分比)的嗜酸乳杆菌(AS 1.1854)、植物乳杆菌(AS 1.19)和德氏乳杆菌(AS 1.1480)的菌液,37℃发酵16小时检测pH值,当pH值降至4.0以下时结束发酵, 70℃稳定化处理4小时。即得到益生菌发酵中药复方组合物。
本发明中使用的益生菌包括双歧杆菌和乳杆菌,其中双歧杆菌是人或哺乳动物体内最重要的生理性细菌,主要分布于小肠下部和结肠内。乳杆菌是人体内分布最为广泛的益生菌。在胃肠道中,该细菌主要分布于迥肠部。这些益生菌产生出的乳酸、醋酸等酸性物质能刺激肠道分泌大量肠液,对粪便起到软化作用。益生菌作用所形成的酸性环境也能使结肠蠕动增强,有利于粪便排泄。因此,本发明选用两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌、植物乳杆菌等常见益生菌菌株。我们之所以选择这些细菌,主要是基于它们在人或动物肠道内分布的总体广泛性,以及它们生理学活性的互补性。
菌株可以从中国典型培养物保藏中心(CCTCC)(中国,武汉)和中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)(中国,北京)购得,或者从正常人的粪便或肠粘膜组织中分离得到这些细菌菌株。
为检测本发明的益生菌发酵中药复方组合物、以及与盐酸小檗碱联合应用对糖尿病的功能作用,本发明通过以下对比试验,以证明经过益生菌发酵中药复方组合物,对大鼠高血糖模型的空腹血糖和葡萄糖耐受量和体重等的影响。结果表明,本发明的益生菌发酵中药复方组合物与盐酸小檗碱联合应用可以显著性的降低大鼠的空腹血糖、葡萄糖耐量指标,与模型组比较,有明显的降低血糖的作用,具有显著性差异。并且,益生菌发酵中药复方组合物与盐酸小檗碱联合应用于高血糖大鼠可以减轻盐酸小檗碱对大鼠体重的影响。实验结果表明益生菌发酵中药复方组合物可以减轻盐酸小檗碱对胃肠道的刺激,不影响大鼠的代谢、生长。
实验例1:本发明益生菌发酵中药复方组合物辅助降血糖及糖耐量实验
本实施例旨在利用大鼠的高血糖模型,举例描述按本发明方法制备益生菌发酵中药复方组合物降血糖效果。
空腹降血糖实验:取实施例2制备的益生菌发酵中药复方组合物和盐酸小檗碱(青岛黄海制药有限公司),作为供试样品。强生血糖测定仪测定血糖值。
取体重180±20g的雄性大鼠80只,适应性饲养3天,随机取出10只单独喂养,为空白对照组,其余70只按照60mg/kg的剂量尾静脉注射链尿霉素,48小时后测定空腹血糖,若低于12mmol/L,适量补加注射链尿霉素,6天后禁食3小时,测血糖,血糖值大于15 mmol/L为高血糖模型成功动物。选高血糖模型成功动物60只,按照禁食3小时的血糖水平,随机分为6组,每组10只。分别为高血糖模型组、发酵组合物高剂量组、发酵组合物中剂量组、发酵组合物高剂量+盐酸小檗碱组、发酵组合物中剂量+盐酸小檗碱组、盐酸小檗碱组。高剂量组为人体推荐量的20倍,即每日每只大鼠口服2.9ml(浓缩,相当于原组合物5.8ml);低剂量组为人体推荐量的10倍,即每日每只大鼠口服2.9ml;盐酸小檗碱组大鼠口服剂量为150mg/kg。高血糖模型组和空白对照组给予蒸馏水 ,连续给药30天后,禁食3小时后测定空腹血糖值,比较各组动物血糖值。具体实验结果见表1。
表1 益生菌发酵中药复方组合物对大鼠空腹血糖实验结果
与空白对照组相比:* p<0.05;与高血糖模型比:s p<0.05,与盐酸小檗碱组比较:y p<0.05
给药前:空白对照组与其他组间有显著性差异,各实验组间无显著性差异,说明造模成功。给药四周后,高血糖模型组与发酵高剂量组、发酵中剂量组、发酵高剂量组+盐酸小檗碱组、发酵中剂量组+盐酸小檗碱组、盐酸小檗碱组有显著性差异,并且发酵高剂量组+盐酸小檗碱组大鼠血糖值低于盐酸小檗碱组,降血糖作用明显提高。
糖耐量试验:选高血糖模型成功动物60只(造模方法同空腹血糖实验),禁食3小时,按随机分组,分组情况同空腹血糖测定实验,每组10只,取10只正常动物为空白对照组。 高、中两个剂量组给予不同剂量的样品,高血糖模型组和正常动物对照组给予蒸馏水。20分钟后经口给予葡萄糖2.0g/kg,测定给予葡萄糖0、0.5、1.0、2.0、小时的血糖值,观察高血糖模型、正常动物对照组和各实验组各时间点血糖值,具体试验结果见表2。
表2 益生菌发酵中药复方组合物对大鼠糖耐量实验结果
与空白对照组相比:* p<0.05;与高血糖模型比:s p<0.05
口服葡萄糖0小时血糖值:空白对照组与其他组间有显著性差异;各实验组间无显著性差异。
从本实验结果可以看出,口服葡萄糖2小时后血糖值:空白对照组与其他组间有显著性差异;高血糖模型组与其他实验组间有显著性差异;盐酸小檗碱组与发酵高剂量组、发酵中剂量组有显著性差异。说明益生菌发酵中药组合物可以提高大鼠的对葡萄糖的耐受能力,与盐酸小檗碱合用可以提高机体对葡萄糖的吸收和利用。
空腹血糖实验对大鼠体重的影响见表3。
表3益生菌发酵中药复方组合物对大鼠空腹血糖实验体重的变化结果
与空白对照组相比:* p<0.05;与高血糖模型比:s p<0.05,与盐酸小檗碱组比较:y p<0.05
给药前,空白对照组大鼠体重与其他组间均无显著性差异。
给药两周后,空白对照组大鼠体重与其他组间有显著性差异;盐酸小檗碱组与发酵高剂量组、发酵中剂量组、发酵高剂量组+盐酸小檗碱组、发酵中剂量组+盐酸小檗碱组有显著性差异。实验结果说明,益生菌发酵中药组合物可以减轻盐酸小檗碱对大鼠胃肠道的刺激,减轻盐酸小檗碱的副作用。
实验例2:本发明益生菌发酵中药复方组合物对高血糖模型大鼠肠道菌群的影响
肠内菌群测定:肠道菌群分析以无菌方法取大鼠粪便0.1-0.2g,置于带玻璃珠的无菌小瓶内,按1:10加入适量稀释液,然后将小瓶置于振荡器上充分振荡,使其混合均匀后,再依次进行10倍系列稀释至10-7。按选择培养基选择适宜的稀释度用取液器(25μl)滴种,然后分别进行需氧和厌氧培养。双歧杆菌,改良BL 培养基,37℃,48-72小时, 厌氧培养;乳酸菌,LBS培养基,37℃,48小时%培养;肠杆菌,EMB培养基,37℃,24小时 培养;肠球菌,EC 培养基,37℃,24小时 培养。最后计数各目的菌菌落数。计算每克粪便中的细菌菌落数。
选取空腹血糖实验时高血糖模型组、发酵高剂量组、发酵中剂量组、正常空白对照组,检测给药2周后肠道菌群的数量,具体试验结果见表4。
表4 益生菌发酵中药复方组合物对高血糖模型大鼠肠道菌群的影响
与空白对照组相比:* p<0.05;与高血糖模型比: sp< 0.05
高血糖模型组大鼠双歧杆菌、乳杆菌菌落数明显低于正常对照组,服用益生菌发酵中药组合物2周后双歧杆菌、乳杆菌数目与高血糖模型组相比明显增加(s p<0.05)。
Claims (9)
1.一种用于辅助降血糖的益生菌发酵中药复方组合物,其特征在于,由益生菌发酵中药复方制得,所述中药复方的成分及含量为:每1000ml益生菌发酵中药复方组合物中含:粉葛50g-100g、山药20g-600g、桑叶20g-60g、枸杞子20g-60g、马齿苋30g-90g、干姜10g-40g、苦荞麦50-150、西洋参10g-60g、甘草4g-10g、蚕蛹10g-50g、猪胰脏30g-90g;所述的益生菌为双歧杆菌和乳杆菌。
2.根据权利要求1所述的用于辅助降血糖的益生菌发酵中药复方组合物,其特征在于,所述的中药复方的成分及含量为:每1000ml益生菌发酵中药复方组合物中含:粉葛80g、山药40g、桑叶40g、枸杞子40g、马齿苋60g、干姜25g、苦荞麦100g、西洋参50g(细粉),甘草8g、蚕蛹24g、猪胰脏60g。
3.一种用于辅助降血糖的益生菌发酵中药复方组合物的制备方法,其特征在于,步骤如下:
a.制备脱脂蚕蛹粉液:按中药复方取蚕蛹洗净,100℃烘干至水分小于5.0%,粉碎,过40目筛,加入蚕蛹粉重量/体积比3倍量的95%乙醇,60℃脱脂2.0小时,抽滤后,80℃烘干,过40目筛,得脱脂蚕蛹粉;加入重量/体积比6倍的水,浸泡30分钟,加热煮沸30分钟,冷却至45℃,即得脱脂蚕蛹粉液;
b.制备蚕蛹酶解液:取新鲜猪胰脏去掉脂肪筋膜,打浆后与脱脂蚕蛹粉液混合,用氢氧化钠调pH值为8.0,酶解3小时左右,pH降至6.5—6.8时,加热灭酶,结束酶解;将酶解液用盐酸调pH值为4.5,加热至沸10分钟,过滤后得蚕蛹酶解液;
c.制备中药复方提取物:将西洋参粉碎,过100目筛,得西洋参粉;将中药粉葛、山药、桑叶、枸杞子、马齿苋、干姜、苦荞麦、西洋参粉、甘草加重量/体积比8倍的饮用水,浸泡1小时后,并于100℃提取1小时,过滤,再向滤渣中加重量/体积比6倍的水,100℃提取1小时后,过滤后合并滤液,并与步骤b制备的蚕蛹酶解液混合,减压下浓缩至所需体积,即得中药复方提取物;
d.制备益生菌发酵用的中药复方提取物底物:在步骤c得到的中药复方提取物中加入重量/体积比为0.25%~1.5%的葡萄糖、重量/体积比为0.1%~0.6%的蛋白胨、重量/体积比为0.05 %~0.2%的酵母粉、重量/体积比为0.1%~0.4%的酵母膏、重量/体积比为0.01%~0.03%的三氯蔗糖、无机盐、三氯化铬CrCl3·6H2O 0.77mg/100ml,调整pH值7.0,并于115℃下灭菌40分钟后,得到益生菌发酵用的中药复方提取物底物;
e. 制备益生菌发酵中药复方组合物:当步骤d得到的益生菌发酵用的中药复方提取物底物灭菌后温度降至39℃左右时,接种预培养的体积百分比各约0.5%的一种或者两种双歧杆菌的菌液,常规培养约2~6小时,再次接种预培养的体积百分比各约0.5%的两种或者三种乳杆菌的菌液,继续发酵20~22小时,pH值降至4.0以下时结束发酵,稳定化处理后即得到本发明所述的益生菌发酵中药复方组合物;
所述中药复方的成分及含量为:每1000ml益生菌发酵中药复方组合物中含:粉葛50g-100g、山药20g-600g、桑叶20g-60g、枸杞子20g-60g、马齿苋30g-90g、干姜10g-40g、苦荞麦50-150、西洋参10g-60g、甘草4g-10g、蚕蛹10g-50g、猪胰脏30g-90g。
4.根据权利要求3所述的用于辅助降血糖的益生菌发酵中药复方组合物的制备方法,其特征在于,步骤d中所述的无机盐为FeSO4·7H2O 1.0mg/100ml、ZnSO4·7H2O 4.4mg/100ml、Na2SeO3·5H2O 0.024 mg/100ml、MgSO4·7H2O 70mg/100ml、K2HPO4·3H2O 100mg/100ml、KH2PO4 100mg/100ml。
5.根据权利要求3或4所述的用于辅助降血糖的益生菌发酵中药复方组合物的制备方法,其特征在于,步骤e中所述的接种的方式为同时接种预培养的体积百分比各约0.5%的一种或者两种双歧杆菌的菌液和预培养的体积百分比各约0.5%的两种或者三种乳杆菌的菌液;所述发酵的时间为常规发酵16~48小时,当pH降至4.0以下时结束发酵,稳定化处理后即得本发明所述的益生菌发酵中药复方组合物。
6.根据权利要求3或4所述的用于辅助降血糖的益生菌发酵中药复方组合物的制备方法,其特征在于,步骤e中所述的双歧杆菌选自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌;所述的乳杆菌选自嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌。
7.根据权利要求5所述的用于辅助降血糖的益生菌发酵中药复方组合物的制备方法,其特征在于,步骤e中所述的双歧杆菌选自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌;所述的乳杆菌选自嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌。
8.一种权利要求1或2所述的用于辅助降血糖的益生菌发酵中药复方组合物的应用,其特征在于,所述的益生菌发酵中药复方组合物在制备治疗糖尿病的药物或保健食品或食品中的应用。
9.根据权利要求8所述的用于辅助降血糖的益生菌发酵中药复方组合物的应用,其特征在于,所述的辅助治疗糖尿病的药物为:将益生菌发酵中药复方组合物按照制药工业中已知的方法与一种或多种医药上可接受的载体或赋形剂或稀释剂按适当的比例混合,并按已知方法除菌后,制成药剂学上可接受的胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、片剂、口服液制剂。
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