CN103535187A - 一种用于食品添加剂的高硒灵芝的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于食品添加剂的高硒灵芝的培育方法，即通过种子富硒驯化与中性粘土或高粘凹土负载亚硒酸钠作为硒缓释剂的复合方法栽培高硒灵芝，将灵芝种子首先通过一系列的含硒浓度的固体平板培养基对其进行逐级富硒驯化，得到最优硒耐受浓度下的灵芝菌种后进行扩大培养制得栽培时所需的原种。随后，进行正常的灵芝栽培管理，即可以获得灵芝孢子粉的总硒含量达到30-1630mg/kg(干重)、灵芝子实体总硒含量可达30-2060mg/kg(干重)，是普通对照组硒含量的16000-20000倍。而且，其中积累的有机硒比例在70％以上，可作为食品添加剂广泛使用。

Description

一种用于食品添加剂的高硒灵芝的制备方法

技术领域

本发明涉及一种一种用于食品添加剂的高硒灵芝的制备方法，属于硒资源的生物转化技术领域。

背景技术

硒是人体所必需的一种微量元素，被科学界誉为人体微量元素中的“抗癌之王”，具有抗氧化、抗衰老、增强免疫力、防止糖尿病、防止肝病、保护肝脏、解毒排毒等多种重要的生理功效。据不完全统计，世界上有40多个国家和地区缺硒，而我国有72％的地区属于缺硒地区，因此，寻找和开发富硒产品，以保证人体摄入充足的硒，正被各国科学工作者关注。目前，通过食物补硒是公认的最好的一种补硒方式，它能将无机硒转化为在毒理安全性、生理活性和吸收率上更优越的有机硒。而食用菌因其含有丰富的蛋白质、多糖及其他生理活性成分，本身具有很高的食用和药用价值，具有提高人体免疫力、抗衰老、抗肿瘤等多种功效，同时对硒有很好的富硒能力，而且更因其生长周期短、生物量高等独特的特性，富硒食用菌的培育将成为食物补硒的重要而经济的方式。

灵芝是担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌赤芝和紫芝的总称，具备很高的药用价值，经过科研机构数十年的现代药理学研究证实，灵芝对于增强人体免疫力，调节血糖，控制血压，辅助肿瘤放化疗，保肝护肝，促进睡眠等方面均具有显著疗效。研究表明灵芝对于硒具有很好的吸收富集作用。“有机富硒灵芝保健食品及其制备方法”(专利号：ZL200810073463.5)的技术方案中采用无机亚硒酸钠为硒源，混入栽培料中培育富硒灵芝，硒含量可达69.04mg/kg。“一种富硒段木灵芝孢子粉的培育方法”(专利号：ZL200810109660.8)中介绍了利用亚硒酸钠为硒源，首先培育富硒灵芝种子，然后将富硒灵芝种子接种于含亚硒酸钠的栽培料中，然后通过段木栽培的方式培育富硒灵芝的方法，最终得到的灵芝孢子粉其硒含量可达51-130mg/kg。

这两种技术方案中均存在灵芝对硒的累积与吸收利用效率不高的问题，最终得到的灵芝其体内的硒含量较低，不利于用于食品添加等对硒含量要求较高的场合。“富硒灵芝培育方法”(专利申请号：201110462256.0)介绍的是利用有机酵母硒为硒源，通过椴木打孔的方法培育富硒灵芝。“有机硒灵芝孢子粉的生产方法”(专利申请号：200910144893.6)则首先将无机硒通过EM菌经过发酵转化得到有机硒生物液，然后制成有机硒剂喷洒于灵芝培养基上，培育富硒灵芝，得到硒含量在10-30μg/g的有机硒灵芝孢子粉。“栽培富硒灵芝的培养基添加剂的配制方法”(专利号：ZL200710077982.4)利用栽培过富硒蘑菇的培养基菌糠，加入各种营养素配置成富硒灵芝培养基添加剂，然后将该添加剂按比例混入栽培料中培育富硒灵芝，得到硒含量为30mg/kg的富硒灵芝粉。

这几种技术方案中采用有机硒为硒源，成本相对较高，在技术方法上实现较为困难，而且最终得到的灵芝其硒含量也较低。为提高灵芝对硒的累积与吸收利用效率，使灵芝体内的硒含量累积到一个比较高的水平。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的是提供一种用于作为用于食品添加剂的高硒灵芝的制备方法。

本发明提供一种灵芝的高硒栽培方法，旨在解决现有技术中存在的灵芝富硒过程中出现的对于硒的累积与吸收利用效率低、灵芝子实体内硒含量低的问题。

为解决现有技术中的这些问题，本发明提供的技术方案如下：

(1)首先对灵芝菌种进行富硒驯化，得到硒耐受浓度下的灵芝母种，(2)经过扩大培养，得到栽培用的富硒灵芝原种；(3)在栽培料拌料时按1-10％的比例混入灵芝高硒缓释添加剂，(4)按照正常的灵芝培育方法培育高硒灵芝。

所述的灵芝菌种富硒驯化方法为：以亚硒酸钠为硒源，利用一系列的含硒浓度为1-50mg/kg的固体平板培养基对灵芝菌种进行逐级富硒驯化，得到耐受浓度下的灵芝菌种，然后在硒浓度为20mg/kg的培养基中对灵芝进行扩大培养制得栽培时所需的原种。

优选的，所述的用以灵芝菌种富硒驯化的固体培养基配方为：

20％马铃薯浸出液、2％葡萄糖、0.3％磷酸二氢钾、0.15％七水硫酸镁、1.5％琼脂、0.001％维生素B1，pH＝6.0。

优选的，所述的用于灵芝菌种扩大培养的培养基配方如下：

89％棉籽壳，10％麦麸或米糠，1％石膏，水适量(含水量65％左右)。

优选的，所述的灵芝高硒缓释添加剂以组分的重量份数计如下：

亚硒酸钠    0.22-0.66重量份数

粘土        100重量份数

优选的，所述的粘土为纳米级的中性粘土或高粘凹土。

优选的，所述的高硒缓释添加剂其硒浓度范围为1000-3000mg/kg。

优选的，所述的高硒缓释添加剂的制备方法为：将亚硒酸钠溶于水中配置成溶液，然后与粘土均匀混合后于50-60℃进行低温烘干，然后进行超微粉碎，制成所述的灵芝高硒缓释添加剂。

优选的，所述的灵芝栽培料以组分的重量份数计如下：

优选的，所述的正常的灵芝培育方法包括将混有灵芝高硒缓释添加剂的栽培料按照料水比1∶1.5加入自来水，然后充分搅拌均匀，经过一段时间的堆料发酵后装袋，然后进行高温蒸汽灭菌，制得最终的栽培料，最后接种富硒灵芝菌种，然后培育得到高硒灵芝。

本发明所用到的灵芝高硒缓释添加剂，经过本申请人的研究证实，所述的灵芝高硒缓释添加剂在溶液状态下，经过2小时达到稳定释放状态，溶液中硒溶度可达硒缓释添加剂中原始硒浓度的50％以上，而且稳定释放状态可维持60-90天，起到对硒的缓控释放的作用。

本发明采用的技术方案的具体步骤可以为：

灵芝菌种的富硒驯化：以亚硒酸钠为硒源，利用含硒浓度为1-50mg/kg的固体平板培养基对灵芝菌种进行富硒驯化，得到耐受浓度下的灵芝菌种，然后在硒浓度为20mg/kg的培养基中对灵芝菌种进行扩大培养作为栽培料所需的原种。

制备高硒灵芝培养所需的栽培料高硒缓释添加剂，配方如下：

亚硒酸钠    0.22-0.66份

粘土        100份

将亚硒酸钠溶于水中配置成溶液，然后与粘土均匀混合后于50-60℃进行低温烘干，然后进行超微粉碎，制成所述的纳米级的高硒缓释添加剂，硒含量范围为1000-3000mg/kg。

高硒灵芝子实体的培养

在灵芝栽培料拌料时，按照1-10％的比例混入高硒缓释添加剂，然后搅拌均匀，使栽培料硒含量在10-300mg/kg范围内。然后按料水比1∶1.5加入自来水，充分搅拌，再次混匀，堆积发酵，装袋后采用高温蒸汽灭菌，制得最终的栽培袋，然后接种富硒灵芝菌种，培育高硒灵芝。

灵芝孢子粉和子实体成熟时，分别进行采收。然后对灵芝孢子粉和子实体进行总硒和形态的检测。灵芝孢子粉的总硒含量可达30-1630mg/kg(DW)，与普通对照组相比，最高可提高16000倍以上。灵芝子实体总硒含量可达30-2060mg/kg(DW)，与普通对照组相比，最高可提高20000倍以上。根据形态检测结果，灵芝孢子粉和子实体中硒均以有机结合态为主，有机硒比例在70％以上。而且同一批次的灵芝其孢子粉和子实体的硒含量的相对标准偏差在20％以下。

相对于现有技术方案，本发明的优点在于：

本发明实现了灵芝的高硒栽培，通过粘土负载的方式实现了硒源的缓释，在生长过程中不会对灵芝产生毒害，且通过缓释作用显著的提高了灵芝孢子粉和子实体中的总硒含量，培养得到的灵芝总硒最高可达2060mg/kg(DW)，而现有技术方案中灵芝的总硒仅在10-130mg/kg(DW)范围内，通过本发明，可提高15倍以上。

本发明中制备的灵芝高硒缓释添加剂具有对硒的缓控释放的作用，使得栽培料内硒浓度在很长的一段时间内维持动态平衡的状态，通过这种方法培育得到的同一批次的高硒灵芝其孢子粉和子实体的硒含量可以控制其相对偏准偏差在20％以下，保证了高硒灵芝硒含量的稳定性。

本发明还采用了灵芝种子富硒驯化的方法，通过硒驯化得到了硒耐受能力强的灵芝菌种，该灵芝菌种在高硒培养过程中可以耐受更高浓度的栽培料硒含量，而且对硒的吸收累积明显优于未驯化菌株。

以下实施例用于说明本发明，但不能用来限制本发明的范围。实施例中采用的实施条件可以根据具体条件作进一步调整，未说明的实施条件通常为常规实验中的条件。

实施例1高硒灵芝栽培实例

灵芝菌种的富硒驯化：以亚硒酸钠为硒源，利用含硒浓度为1-50mg/kg的固体平板培养基对灵芝菌种进行富硒驯化，得到耐受浓度下的灵芝菌种，然后在硒浓度为20mg/kg的培养基中对灵芝菌种进行扩大培养作为栽培料所需的原种。

制备高硒灵芝培养所需的栽培料高硒缓释添加剂，配方如下：

亚硒酸钠    0.22份

粘土        100份

将亚硒酸钠溶于水中配置成溶液，然后与粘土均匀混合后于50-60℃进行低温烘干，然后进行超微粉碎，制成所述的纳米级的高硒缓释添加剂，硒含量范围为1000mg/kg。

(3)高硒灵芝子实体的培养

在灵芝栽培料拌料时，按照5％的比例混入高硒缓释添加剂，然后搅拌均匀，使栽培料硒含量为50mg/kg。然后按料水比1∶1.5加入自来水，充分搅拌，再次混匀，堆积发酵，装袋后采用高温蒸汽灭菌，制得最终的栽培袋，然后接种富硒灵芝菌种，培育高硒灵芝。

实施效果：

灵芝孢子粉和子实体成熟时，分别进行采收。然后对灵芝孢子粉和子实体进行总硒和形态的检测。灵芝孢子粉的总硒含量可达254mg/kg(DW)，与普通对照组相比，最高可提高2500倍以上。灵芝子实体总硒含量可达325mg/kg(DW)，与普通对照组相比，最高可提高3000倍以上。根据形态检测结果，灵芝孢子粉和子实体中硒均以有机结合态为主，有机硒比例在70％以上。而且同一批次的灵芝其孢子粉和子实体的硒含量的相对标准偏差在20％以下。

实施例2高硒灵芝栽培实例

灵芝菌种的富硒驯化：以亚硒酸钠为硒源，利用含硒浓度为1-50mg/kg的固体平板培养基对灵芝菌种进行富硒驯化，得到耐受浓度下的灵芝菌种，然后在硒浓度为20mg/kg的培养基中对灵芝菌种进行扩大培养作为栽培料所需的原种。

制备高硒灵芝培养所需的栽培料高硒缓释添加剂，配方如下：

亚硒酸钠    0.22份

粘土        100份

将亚硒酸钠溶于水中配置成溶液，然后与粘土均匀混合后于50-60℃进行低温烘干，然后进行超微粉碎，制成所述的纳米级的高硒缓释添加剂，硒含量范围为1000mg/kg。

(3)高硒灵芝子实体的培养

在灵芝栽培料拌料时，按照10％的比例混入高硒缓释添加剂，然后搅拌均匀，使栽培料硒含量为100mg/kg。然后按料水比1∶1.5加入自来水，充分搅拌，再次混匀，堆积发酵，装袋后采用高温蒸汽灭菌，制得最终的栽培袋，然后接种富硒灵芝菌种，培育高硒灵芝。

实施效果：

灵芝孢子粉和子实体成熟时，分别进行采收。然后对灵芝孢子粉和子实体进行总硒和形态的检测。灵芝孢子粉的总硒含量可达730mg/kg(DW)，与普通对照组相比，最高可提高7000倍以上。灵芝子实体总硒含量可达811mg/kg(DW)，与普通对照组相比，最高可提高8000倍以上。根据形态检测结果，灵芝孢子粉和子实体中硒均以有机结合态为主，有机硒比例在70％以上。而且同一批次的灵芝其孢子粉和子实体的硒含量的相对标准偏差在20％以下。

实施例3高硒灵芝栽培实例

灵芝菌种的富硒驯化：以亚硒酸钠为硒源，利用含硒浓度为1-50mg/kg的固体平板培养基对灵芝菌种进行富硒驯化，得到耐受浓度下的灵芝菌种，然后在硒浓度为20mg/kg的培养基中对灵芝菌种进行扩大培养作为栽培料所需的原种。

制备高硒灵芝培养所需的栽培料高硒缓释添加剂，配方如下：

亚硒酸钠    0.66份

粘土        100份

将亚硒酸钠溶于水中配置成溶液，然后与粘土均匀混合后于50-60℃进行低温烘干，然后进行超微粉碎，制成所述的纳米级的高硒缓释添加剂，硒含量范围为3000mg/kg。

(3)高硒灵芝子实体的培养

在灵芝栽培料拌料时，按照10％的比例混入高硒缓释添加剂，然后搅拌均匀，使栽培料硒含量为300mg/kg。然后按料水比1∶1.5加入自来水，充分搅拌，再次混匀，堆积发酵，装袋后采用高温蒸汽灭菌，制得最终的栽培袋，然后接种富硒灵芝菌种，培育高硒灵芝。

实施效果：

灵芝孢子粉和子实体成熟时，分别进行采收。然后对灵芝孢子粉和子实体进行总硒和形态的检测。灵芝孢子粉的总硒含量可达1630mg/kg(DW)，与普通对照组相比，最高可提高16000倍以上。灵芝子实体总硒含量可达2060mg/kg(DW)，与普通对照组相比，最高可提高20000倍以上。根据形态检测结果，灵芝孢子粉和子实体中硒均以有机结合态为主，有机硒比例在70％以上。而且同一批次的灵芝其孢子粉和子实体的硒含量的相对标准偏差在20％以下。

上述实例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人是能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所做的等效变换或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种用于食品添加剂的高硒灵芝的制备方法，其特征在于包含以下步骤：(1)对灵芝菌种进行富硒驯化，得到硒耐受浓度下的灵芝母种，(2)扩大培养得到栽培用的富硒灵芝原种；(3)在栽培料拌料时按1-10％的比例混入灵芝高硒缓释添加剂，(4)按照正常的灵芝培育方法培育高硒灵芝。 

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述灵芝菌种富硒驯化方法为：以亚硒酸钠为硒源，利用一系列的含硒浓度为1-50mg/kg的固体平板培养基对灵芝菌种进行逐级富硒驯化，得到耐受浓度下的灵芝菌种。 

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述富硒驯化过程所用的固体培养基配方为：20％马铃薯浸出液、2％葡萄糖、0.3％磷酸二氢钾、0.15％七水硫酸镁、1.5％琼脂、0.001％维生素B1，pH＝6.0。 

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述富硒驯化过程所用的固体培养基配方为：89％棉籽壳，10％麦麸或米糠，1％石膏。 

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述扩大培养方法为在硒浓度为20mg/kg的培养基中对灵芝进行扩大培养制得栽培时所需的原种。 

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述灵芝高硒缓释添加剂以组分的重量份数计如下：亚硒酸钠0.22-0.66重量份数，粘土100重量份数，硒浓度范围为1000-3000mg/kg。 

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述灵芝高硒缓释添加剂中所用粘土为纳米级的中性粘土或高粘凹土。 

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的高硒缓释添加剂的制备方法为：将亚硒酸钠溶于水中配置成溶液，然后与粘土均匀混合后于50-60℃进行低温烘干，然后进行超微粉碎。 

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的灵芝栽培料以组分的重量份数计如下：木屑74重量份数，玉米粉24重量份数，蔗糖1重量份数，石膏粉1重量份数。 

10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的常规灵芝培育方法包括将混有灵芝高硒缓释添加剂的栽培料按照料水比1∶1.5加入自来水，充分搅拌均匀后进行堆料发酵后装袋，然后进行高温蒸汽灭菌，制得最终的栽培料，最后接种富硒灵芝菌种，然后培育得到高硒灵芝。