CN103518624B - 一种马铃薯脱毒组培苗提纯复壮方法 - Google Patents

一种马铃薯脱毒组培苗提纯复壮方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种马铃薯脱毒组培苗提纯复壮的方法，其特征在于：用MS培养基+复合卡拉胶+α-萘乙酸钠配制适宜马铃薯组培苗生长的培养基，将经过预培养的脱毒组培苗置于本发明的固体培养基中培养12天，脱毒马铃薯组培苗根茎健壮，炼苗移栽成活率高。与现有马铃薯组培苗培养基相比，本发明培养基具有成本低、经济效益好的优点。

Description

一种马铃薯脱毒组培苗提纯复壮方法
技术领域
本发明属于植物栽培培养技术领域，尤其涉及一种马铃薯脱毒组培苗提纯复壮的方法。
背景技术
通过马铃薯原原种脱毒可以有效提供产量和改善品质，从而马铃薯原原种脱毒技术受到越来越广泛的应用。然而，马铃薯脱毒原原种薯必须采用组织培养的方法才能得到，目前，马铃薯组织培养技术采用的培养基投资成本高，严重影响了经济效益，主要是合成培养基成分中必须添加植物生长必需的各种元素，尤其是价格昂贵的微量元素，造成了脱毒马铃薯原原种薯生产成本过高而不能广泛应用。同时，马铃薯脱毒组培苗分化培养后直接炼苗移栽，组培苗的健壮程度及品质优劣严重影响栽培的成活率及马铃薯的品质。
发明内容
本发明的目的在于：提供一种马铃薯脱毒组培苗提纯复壮的方法，采用MS培养基+复合卡拉胶+α-萘乙酸钠配制适宜马铃薯组培苗生长的培养基，实现马铃薯脱毒组培苗快速生长、根茎健壮、生命力强的目的。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一、一种马铃薯脱毒组培苗提纯复壮方法所用的培养基，其特征在于：马铃薯脱毒组培用培养基组成包括：
复合卡拉胶：100～120g/L；
大量元素：NH4NO31.0～1.2g/L、KNO31.3～1.5g/L、CaCl2·4H2O0.3～0.35g/L、MgSO4·7H2O0.2～0.25g/L、KH2PO40.1～0.12g/L；
微量元素：KI0.2～0.25mg/L、H3BO31.0～1.5mg/L、MnSO4·4H2O5.5～6.0mg/L、ZnSO4·4H2O2.0～2.5mg/L、Na2MoO4·2H2O0.04～0.05mg/L、CuSO4·5H2O0.008～0.01mg/L、CoCl2·6H2O0.008～0.01mg/L、FeSO4·7H2O9.5～10.0mg/L、CrCl3·6H2O0.009～0.01mg/L；
生长调节剂：α-萘乙酸钠7.5mg/L；
有机成分：肌醇25mg/L、苯甲酸钠24～25mg/L；
其他：蔗糖30g/L、适量去离子水。
所述的复合卡拉胶由40%鸡粪和60%卡拉胶复合而成，其中，所述的卡拉胶为ι型卡拉胶，复合卡拉胶的制作方法是：（1）回收的鸡粪高温干燥除臭；（2）卡拉胶中加入适量去离子水，升温至70～80℃至其完全溶解；（3）经干燥除臭的鸡粪加入去离子水至其含水量为35%；（4）步骤（2）中的卡拉胶和步骤（3）中的鸡粪混合搅拌均匀后，冷却至室温，待用。
二、马铃薯脱毒组培用培养基的制备方法，具体步骤如下：
1、称取除复合卡拉胶以外的培养基其余成分，加入去离子水溶解，为了加快溶解，可加热升温50～60℃直至所有组分彻底溶解；
2、将步骤1所制备的溶液加入复合卡拉胶中，加热升温70～80至卡拉胶完全溶解，搅拌混合5分钟；
3、分别用1mol/L的盐酸和1mol/L的氢氧化钠调节培养基pH值为5.8～6.0；
4、将制备的培养基在120℃、1.2MPa条件下高温高压消毒20～30分钟，即可制得本发明固体培养基。
三、马铃薯脱毒组培苗培养方法：
马铃薯脱毒组培苗预培养：将马铃薯脱毒组培苗置于15%蔗糖水溶液中进行培养，其中，控制温度为25～27℃，光照控制2000～3000lx，光照时长15小时，经过15～18天的培养后，然后转入所述的培养基中进行培养；
马铃薯脱毒组培苗培养基复壮培养：经过预培养的马铃薯脱毒组培苗放入所述的密封的培养基中进行培养，其中，接种密度为20～30%，培养基温度控制：昼温20～25℃最适宜，夜温10～12℃；空气相对湿度控制50～70％；日光照15～17小时，光照强度为2000～3000lx。经过12天复壮培养，马铃薯脱毒组培苗生长健壮，生命力强。
与现有马铃薯脱毒组培苗提纯复壮方法相比，本发明培养的马铃薯脱毒组培苗长势良好，根茎健壮，生命力顽强；本发明采用回收鸡粪代替部分营养元素，降低了投资成本，提高经济效益，同时实现了经济循环利用；采用卡拉胶代替琼脂，成本低且组培苗长势更优，生长速度更快；配方中添加CrCl3·6H2O，促进组培苗生长；采用α-萘乙酸钠为生长调节剂，增强组培苗抗旱能力，同时使组培苗健壮优异。
具体实施方式
为了说明本发明的的技术方案，下面结合具体实例做进一步说明。
实施例1
1、马铃薯脱毒组培用培养基组成包括：
复合卡拉胶：100g/L；
大量元素：NH4NO31.0g/L、KNO31.3g/L、CaCl2·4H2O0.3g/L、MgSO4·7H2O0.2g/L、KH2PO40.1g/L；
微量元素：KI0.2mg/L、H3BO31.0mg/L、MnSO4·4H2O5.5mg/L、ZnSO4·4H2O2.0mg/L、Na2MoO4·2H2O0.04mg/L、CuSO4·5H2O0.008mg/L、CoCl2·6H2O0.008mg/L、FeSO4·7H2O9.5mg/L、CrCl3·6H2O0.009mg/L；
生长调节剂：α-萘乙酸钠7.5mg/L；
有机成分：肌醇25mg/L、苯甲酸钠24mg/L；
其他：蔗糖30g/L、适量去离子水。
制作复合卡拉胶：（1）回收的鸡粪经高温干燥除臭；（2）卡拉胶中加入适量去离子水，升温至70～80℃至其完全溶解；（3）经干燥除臭的鸡粪加入去离子水至其含水量为35%；（4）步骤（2）中的卡拉胶和步骤（3）中的鸡粪混合搅拌均匀后，冷却至室温，待用。
2、马铃薯脱毒组培用培养基的制备方法，具体步骤如下：
（1）称取除复合卡拉胶以外的培养基其余成分，加入去离子水溶解，为了加快溶解，可加热升温50～60℃直至所有组分彻底溶解；
（2）将步骤（1）所制备的溶液加入复合卡拉胶中，加热升温70～80至卡拉胶完全溶解，搅拌混合5分钟；
（3）分别用1mol/L的盐酸和1mol/L的氢氧化钠调节培养基pH值为5.8～6.0；
（4）将制备的培养基在120℃、1.2MPa条件下高温高压消毒20～30分钟，即可制得本发明固体培养基。
3、马铃薯脱毒组培苗培养方法：
马铃薯脱毒组培苗预培养：将马铃薯脱毒组培苗置于15%蔗糖水溶液中进行培养，其中，控制温度为25～27℃，光照控制2000～3000lx，光照时长15小时，经过15～18天的培养后，然后转入所述的培养基中进行培养；
马铃薯脱毒组培苗培养基复壮培养：经过预培养的马铃薯脱毒组培苗放入所述的密封的固体培养基中进行培养，其中，接种密度为20～30%，培养基温度控制：昼温20～25℃最适宜，夜温10～12℃；空气相对湿度控制50～70％；日光照15～17小时，光照强度为2000～3000lx。经过12天复壮培养，马铃薯脱毒组培苗生长健壮，生命力强，即可进行炼苗移栽。
采用本发明提供的马铃薯脱毒组培苗提纯复壮方法培养后，以3天为期限测定组培苗的株高、叶片数、根数、根长、茎粗、苗鲜重、叶色。
随机抽选20株组培苗进行测定，测定其各项指标，平均结果见下表1：
从表1可以看出，通过本发明提纯复壮培养后，马铃薯脱毒组培苗长势良好，幼苗生长速度快，可缩短培养时间。
实施例2
马铃薯脱毒组培用培养基组成包括：
复合卡拉胶：110g/L；
大量元素：NH4NO31.1g/L、KNO31.4g/L、CaCl2·4H2O0.33g/L、MgSO4·7H2O0.22g/L、KH2PO40.11g/L；
微量元素：KI0.22mg/L、H3BO31.3mg/L、MnSO4·4H2O5.8mg/L、ZnSO4·4H2O2.2mg/L、Na2MoO4·2H2O0.04mg/L、CuSO4·5H2O0.009mg/L、CoCl2·6H2O0.009mg/L、FeSO4·7H2O9.8mg/L、CrCl3·6H2O0.009mg/L；
生长调节剂：α-萘乙酸钠7.5mg/L；
有机成分：肌醇25mg/L、苯甲酸钠24.5mg/L；
其他：蔗糖30g/L、适量去离子水。
马铃薯脱毒组培用培养基的制备方法同实例1。
马铃薯脱毒组培苗培养方法同实例1。
实施例3
马铃薯脱毒组培用培养基组成包括：
复合卡拉胶：120g/L；
大量元素：NH4NO31.2g/L、KNO31.5g/L、CaCl2·4H2O0.35g/L、MgSO4·7H2O0.25g/L、KH2PO40.12g/L；
微量元素：KI0.25mg/L、H3BO31.5mg/L、MnSO4·4H2O6.0mg/L、ZnSO4·4H2O2.5mg/L、Na2MoO4·2H2O0.05mg/L、CuSO4·5H2O0.01mg/L、CoCl2·6H2O0.01mg/L、FeSO4·7H2O10.0mg/L、CrCl3·6H2O0.01mg/L；
生长调节剂：α-萘乙酸钠7.5mg/L；
有机成分：肌醇25mg/L、苯甲酸钠25mg/L；
其他：蔗糖30g/L、适量去离子水。
马铃薯脱毒组培用培养基的制备方法同实例1。
马铃薯脱毒组培苗培养方法同实例1。
采用实例1的测定方法，统计不同培养基元素添加量时，马铃薯脱毒组培苗的生长情况，如下表2：
从表2统计结果来看，采用不同的配方比例，马铃薯脱毒组培苗的长势及品质有差异，实例2配方获得了最好的效果，因此本发明优选的技术方案是：马铃薯脱毒组培用培养基组成包括：
复合卡拉胶：100～120g/L
大量元素：NH4NO31.1g/L、KNO31.4g/L、CaCl2·4H2O0.33g/L、MgSO4·7H2O0.22g/L、KH2PO40.11g/L；
微量元素：KI0.22mg/L、H3BO31.3mg/L、MnSO4·4H2O5.8mg/L、ZnSO4·4H2O2.2mg/L、Na2MoO4·2H2O0.04mg/L、CuSO4·5H2O0.009mg/L、CoCl2·6H2O0.009mg/L、FeSO4·7H2O9.8mg/L、CrCl3·6H2O0.009mg/L；
生长调节剂：α-萘乙酸钠7.5mg/L；
有机成分：肌醇25mg/L、苯甲酸钠24.5mg/L；
其他：蔗糖30g/L、适量去离子水。

Claims (4)

1.一种马铃薯脱毒组培苗提纯复壮方法，其特征在于：将马铃薯脱毒组培苗置于15％蔗糖水溶液中进行预培养，温度控制为25～27℃，光照控制2000～3000lx，光照时长15小时；经过15～18天的预培养后，马铃薯脱毒组培苗放入密封的培养基中进行培养，接种密度为20～30％，培养基温度控制：昼温20～25℃最适宜，夜温10～12℃，空气相对湿度控制50～70％，日光照15～17小时，光照强度为2000～3000lx，培养12天，其中，所述的培养基组分为：
复合卡拉胶：100～120g/L；
大量元素：NH4NO31.0～1.2g/L、KNO31.3～1.5g/L、CaCl2·4H2O0.3～0.35g/L、MgSO4·7H2O0.2～0.25g/L、KH2PO40.1～0.12g/L；
微量元素：KI0.2～0.25mg/L、H3BO31.0～1.5mg/L、MnSO4·4H2O5.5～6.0mg/L、ZnSO4·4H2O2.0～2.5mg/L、Na2MoO4·2H2O0.04～0.05mg/L、CuSO4·5H2O0.008～0.01mg/L、CoCl2·6H2O0.008～0.01mg/L、FeSO4·7H2O9.5～10.0mg/L、CrCl3·6H2O0.009～0.01mg/L；
生长调节剂：α-萘乙酸钠7.5mg/L；
有机成分：肌醇25mg/L、苯甲酸钠24～25mg/L；
其他：蔗糖30g/L、适量去离子水。
2.如权利要求1所述的一种马铃薯脱毒组培苗提纯复壮方法，其特征在于：所述的培养基的制备方法如下：
(1)称取除复合卡拉胶以外的培养基其余成分，加入去离子水溶解，为了加快溶解，加热升温50～60℃直至所有组分彻底溶解，得到溶解液；
(2)将步骤(1)的溶解液加入复合卡拉胶中，加热升温70～80至卡拉胶完全溶解，搅拌混合5分钟；
(3)分别用1mol/L的盐酸和1mol/L的氢氧化钠调节培养基pH值为5.8～6.0；
(4)将制备的培养基在120℃、1.2MPa条件下高温高压消毒20～30分钟，制得固体培养基。
3.如权利要求2所述的培养基的制备方法，其特征在于：所述的复合卡拉胶由40％的鸡粪和60％的ι型卡拉胶复合而成。
4.如权利要求2、3所述的培养基的制备方法，其特征在于：所述的复合卡拉胶的制作方法是：
(1)回收的鸡粪高温干燥除臭；
(2)卡拉胶中加入适量去离子水，升温至70～80℃至其完全溶解；
(3)经干燥除臭的鸡粪加入去离子水至其含水量为35％；
(4)步骤(2)中的卡拉胶和步骤(3)中的鸡粪混合搅拌均匀后，冷却至室温，待用。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102657081A (zh) * 2012-04-28 2012-09-12 四川省农业科学院作物研究所 一种水培方式培育马铃薯脱毒试管苗的方法

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010076954A2 (ko) * 2008-11-10 2010-07-08 (주) 마이크로프랜츠 바이오리액터 배양기에 의한 조직배양 감자종서의 대량생산 및 씨감자 생산방법
JP2011083235A (ja) * 2009-10-16 2011-04-28 Kinjirushi Kk 培養苗から多芽体の形成方法およびウイルスフリー種芋の生産方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102657081A (zh) * 2012-04-28 2012-09-12 四川省农业科学院作物研究所 一种水培方式培育马铃薯脱毒试管苗的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
马铃薯试管薯诱导因子研究;白淑霞等;《中国马铃薯》;20011231;第15卷(第5期);第271页摘要，第2.2.1节 *

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