CN104026018B - 一种改进的鸟巢蕨快速繁殖组织培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种改进的鸟巢蕨快速繁殖组织培养基,属于植物组织培养技术领域;该培养基包括鸟巢蕨两个不同生长阶段的培养基配方:增殖培养基、生根壮苗培养基;增殖培养基:包括1/2MS、6‑BA 0.5~3mg/L、KT 0.05~0.2mg/L、2,4‑D 0.1~0.4mg/L、椰子汁100~350ml/L、蔗糖15~40g/L、AC 1~2g/L;生根壮苗培养基:1/2MS、蛋白胨0.3~0.8g/L、土豆汁15~45g/L、椰子汁30~80ml/L、蔗糖15~30g/L;利用本发明的培养基进行鸟巢蕨的组织培养,增殖倍数可达7.6,生根率100%。组培苗对环境适应能力强,移栽成活率高。
Description
技术领域
本发明涉及植物组织培养领域,尤其涉及一种改进的鸟巢蕨快速繁殖组织培养基。
背景技术
鸟巢蕨是一种附生的蕨类植物,原生于亚洲东南部、澳大利亚东部、印度尼西亚、印度和非洲东部,又称巢蕨、山苏花、王冠蕨,为铁角蕨科,属多年生阴生草本观叶植物。鸟巢蕨株形丰满,叶色葱绿,喜阴凉环境,较耐低温,养护管理较为简单,抗病害能力强,可连续多年栽培,近年来被用作高档叶菜栽培,已成为道地的原生蔬菜。其嫩叶鲜绿,炒食质脆爽口,无苦涩味,颇受消费者喜爱。鸟巢蕨主要靠孢子繁殖,但要求条件高,自然条件下难以萌发出苗,不易获得批量苗木,而采用植物组织培养技术,可以在短期内实现鸟巢蕨的规模化生产以满足市场需求。
发明内容
本发明的目的是提供一种改进的鸟巢蕨快速繁殖组织培养基,该培养基改变传统的配方,在培养基中加入不同的物质,不仅能促进鸟巢蕨的大量增殖,而且使得鸟巢蕨的生根率得到显著提高,通过本发明培养基培养的鸟巢蕨组培苗对环境适应能力强,移栽成活率高。
为了达到上述目的,本发明所采用的技术方案如下:
一种改进的鸟巢蕨快速繁殖组织培养基,包括鸟巢蕨两个不同生长阶段培养基:
(1)增殖培养基: 1/2MS、6-BA 0.5~3mg/L、KT 0.05~0.2mg/L、2,4-D 0.1~0.4mg/L 、椰子汁 100~350ml/L、蔗糖 15~40g/L、AC 1~2g/L,琼脂5.0g/L,增殖培养基用以诱导鸟巢蕨块茎快速大面积繁殖;
(2)生根壮苗培养基:1/2MS、蛋白胨 0.3~0.8g/L、土豆汁 15~45g/L、椰子汁 30~80ml/L、蔗糖 15~30g/L,琼脂5.0g/L,生根壮苗培养基对鸟巢蕨幼苗进行生根及壮苗培养,用以增强鸟巢蕨苗木对外界的抵抗力。
作为优选,包括鸟巢蕨两个不同生长阶段培养基:(1)增殖培养基:1/2MS、6-BA1.5~2.5mg/L、KT 0.07~0.15mg/L 、2,4-D 0.1~0.3mg/L 、椰子汁 150~250ml/L、蔗糖20~30g/L、AC 1~2g/L,琼脂5.0g/L;(2)生根壮苗培养基:1/2MS、蛋白胨 0.4~0.6g/L、土豆汁 20~40g/L、椰子汁 40~60ml/L、蔗糖 18~25g/L,琼脂5.0g/L。
作为优选, 6-BA为6-苄氨基腺嘌呤、KT为激动素、2,4-D为二氯苯氧乙酸、AC为活性炭。
作为优选,所述增殖培养基与所述生根壮苗培养基需进行高温灭菌处理,在两者中加入蔗糖之前,先将蔗糖溶解于水后进行过滤灭菌,然后再加到灭过菌的两个所述培养基。
作为优选,两个培养基中的椰子汁是直接将椰子水加热至80℃以上,然后用至少三层纱布过滤后加入到培养基中。
作为优选,所述增殖培养基与所述生根壮苗培养基的PH值范围均在5.8~6.2之间。
本发明的有益效果是:本发明在传统的鸟巢蕨增殖培养基中加入了KT-激动素,2,4-D,椰子汁;激动素不仅能促进细胞分裂,还具有延缓离体叶片和切花衰老,诱导芽分化和发育及增加气孔开度的作用;2,4-D能促进根的形成和配合细胞分裂素使用,还能诱导组织脱分化,促进愈伤组织的增殖,其效果要明显好于2,4-D-萘乙酸;所述鸟巢蕨生根培养基中加入土豆汁,土豆汁一般含有都含有植物生长所需的碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水,能促进鸟巢蕨高效成长;所述鸟巢蕨增殖和生根壮苗培养基中均含有椰子汁,椰子汁含有蛋白质、脂肪、维生素C及钙、磷、铁、钾、镁、钠等矿物质,营养极为丰富,结合了鸟巢蕨生长所需的各种大量元素,有利于培育优质鸟巢蕨幼苗。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步的描述。
本发明提出一种改进的鸟巢蕨快速繁殖组织培养基,包括鸟巢蕨两个不同生长阶段培养基:
增殖培养基: 1/2MS、6-BA 0.5~3mg/L、KT 0.05~0.2mg/L、2,4-D 0.1~0.4mg/L、椰子汁 100~350ml/L、蔗糖 15~40g/L、AC 1~2g/L,增殖培养基用以诱导鸟巢蕨块茎快速大面积繁殖;
生根壮苗培养基:包括1/2MS、蛋白胨 0.3~0.8g/L、土豆汁 15~45g/L、椰子汁30~80ml/L、蔗糖 15~30g/L,生根壮苗培养基对鸟巢蕨幼苗进行生根及壮苗培养,用以增强鸟巢蕨苗木对外界的抵抗力。
其中,6-BA为6-苄氨基腺嘌呤、KT为激动素、2,4-D为二氯苯氧乙酸、AC为活性炭。
实施例一:
(1)外植体:鸟巢蕨组织培养丛生芽;(2)增殖培养:在无菌环境中将上述丛生芽切成包含1或2个芽点的小块接种到增殖培养基中,培养基配方为:1/2MS、6-BA 2.0mg/L、KT0.1mg/L、2,4-D 0.2mg/L、椰汁 200ml/L、蔗糖 25g/L、AC 1g/L、琼脂5.0g/L,PH 6.0;(3)生根壮苗培养:增殖培养35d左右,将具有3片以上叶、株高1.5cm以上的增殖苗分成单株,置于生根壮苗培养基中培养,培养基配方为:1/2MS、蛋白胨 0.5g/L、椰汁 50ml/L、土豆 30g/L、蔗糖 20g/L、琼脂5.0g/L,PH 5.8;(4)培养过程环境条件:温度为24±2℃,光照强度为2500~3500Lx,光照时间为10h/d,所述增殖培养基与所述生根壮苗培养基需进行高温灭菌处理,在两者中加入蔗糖之前,先将蔗糖溶解于水后进行过滤灭菌,然后再加到灭过菌的两个所述培养基,防止蔗糖产生水解反应。
利用本发明的培养基进行鸟巢蕨的组织培养,增殖倍数可达7.6,生根率100%。组培苗对环境适应能力强,移栽成活率高。
实施例二:
与实施例一不同的是:
增殖培养基配方为: 6-BA 2.5mg/L、KT 0.15mg/L 、2,4-D 0.3mg/L 、椰汁250ml/L、糖 30g/L、AC 2g/L,PH 5.8;
生根壮苗培养基配方为:蛋白胨 0.6g/L、土豆 40g/L、椰汁 60ml/L、蔗糖 25g/L,PH 6.2。
实施例三:
与实施例一不同的是:
增殖培养基配方为: 6-BA 1.5mg/L、KT 0.07mg/L 、2,4-D 0.1mg/L 、椰汁150ml/L、糖 20g/L、AC 1g/L,PH 6.0;
生根壮苗培养基:蛋白胨 0.4g/L、土豆 20g/L、椰汁 40ml/L、蔗糖 18g/L,PH6.0。
实施例四:
与实施例一不同的是:增殖培养基配方为: 6-BA 0.5mg/L、KT 0.2mg/L 、2,4-D0.4mg/L 、椰汁 350ml/L、糖 15g/L、AC2g/L,PH 5.9;
生根壮苗培养基:蛋白胨 0.8g/L、土豆 15g/L、椰汁 80ml/L、蔗糖 15g/L,PH5.9。
实施例五:
与实施例一不同的是:增殖培养基配方为: 6-BA3mg/L、KT 0.05mg/L 、2,4-D0.1mg/L 、椰汁 100ml/L、糖 40g/L,PH 6.1;
生根壮苗培养基:蛋白胨 0.3g/L、土豆45g/L、椰汁30ml/L、蔗糖30g/L,PH6.1。
本发明的有益效果是:本发明在传统的鸟巢蕨增殖培养基中加入了KT-激动素,2,4-D,椰子汁;激动素不仅能促进细胞分裂,还具有延缓离体叶片和切花衰老,诱导芽分化和发育及增加气孔开度的作用;2,4-D能促进根的形成和配合细胞分裂素使用,还能诱导组织脱分化,促进愈伤组织的增殖,其效果要明显好于2,4-D-萘乙酸;所述鸟巢蕨生根培养基中加入土豆汁,土豆汁一般含有都含有植物生长所需的碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水,能促进鸟巢蕨高效成长;所述鸟巢蕨增殖和生根壮苗培养基中均含有椰子汁,椰子汁含有蛋白质、脂肪、维生素C及钙、磷、铁、钾、镁、钠等矿物质,营养极为丰富,结合了鸟巢蕨生长所需的各种大量元素,有利于培育优质鸟巢蕨幼苗。
Claims (2)
1.一种改进的鸟巢蕨快速繁殖组织培养基,其特征在于,包括鸟巢蕨两个不同生长阶段培养基:
(1)增殖培养基: 1/2MS、6-BA 0.5~3mg/L、KT 0.05~0.2mg/L、2,4-D 0.1~0.4mg/L、椰子汁 100~350ml/L、蔗糖 15~40g/L、AC 1~2g/L,琼脂5.0g/L,增殖培养基用以诱导鸟巢蕨块茎快速大面积繁殖;
(2)生根壮苗培养基:1/2MS、蛋白胨 0.3~0.8g/L、土豆汁 15~45g/L、椰子汁 30~80ml/L、蔗糖 15~30g/L,琼脂5.0g/L,生根壮苗培养基对鸟巢蕨幼苗进行生根及壮苗培养,用以增强鸟巢蕨苗木对外界的抵抗力;
其中,6-BA为6-苄氨基腺嘌呤、KT为激动素、2,4-D为二氯苯氧乙酸、AC为活性炭;
所述增殖培养基与所述生根壮苗培养基需进行高温灭菌处理,在两者中加入蔗糖之前,先将蔗糖溶解于水后进行过滤灭菌,然后再加到灭过菌的两个所述培养基;
两个培养基中的椰子汁是直接将椰子水加热至80℃以上,然后用至少三层纱布过滤后加入到培养基中;
所述增殖培养基与所述生根壮苗培养基的pH值范围均在5.8~6.2之间。
2.根据权利要求1所述的改进的鸟巢蕨快速繁殖组织培养基,其特征在于,步骤(1)增殖培养基为:1/2MS、6-BA 1.5~2.5mg/L、KT 0.07~0.15mg/L 、2,4-D 0.1~0.3mg/L、椰子汁 150~250ml/L、蔗糖 20~30g/L、AC 1~2g/L,琼脂5.0g/L;(2)生根壮苗培养基为:1/2MS、蛋白胨 0.4~0.6g/L、土豆汁 20~40g/L、椰子汁 40~60ml/L、蔗糖 18~25g/L,琼脂5.0g/L。
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