CN102986532A - 一种红芽芋微型块茎愈伤组织诱导、分化和植株再生方法 - Google Patents

一种红芽芋微型块茎愈伤组织诱导、分化和植株再生方法 Download PDF

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洪森荣
肖月土
尹明华
王艾平
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Abstract

一种红芽芋微型块茎愈伤组织诱导、分化和植株再生方法，(1)愈伤组织诱导：选取红芽芋脱毒苗微型块茎作为外植体，在无菌条件切成小块，接种于愈伤组织培养基上进行培养，得到红芽芋脱毒苗微型块茎的愈伤组织块；(2)丛生芽诱导：将诱导的愈伤组织块接种到丛生芽诱导培养基上进行培养，得到丛生芽组织块；(3)丛生芽的增殖培养：将丛生芽组织块接种到丛生芽增殖培养基上进行培养，得到大量的红芽芋不定芽；；(4)不定芽的生根成苗：选取红芽芋不定芽接到生根培养基上进行培养，可获得红芽芋的小苗。利用本发明可在短期内形成大量优质的红芽芋试管苗，可进行规模化、工厂化生产，解决红芽芋农业生产中所存在的问题。

Description

一种红芽芋微型块茎愈伤组织诱导、分化和植株再生方法
技术领域：
本发明涉及一种植物种苗繁育方法，特别是一种红芽芋微型块茎愈伤组织诱导、分化和植株再生的方法。
背景技术：
红芽芋是芋属天南星科多年生宿根性草本植物，以地下球茎子芋为主要收获物的蔬菜，其食用部分球茎富含淀粉、粗纤维、粗脂肪、蛋白质、VC、钙、磷、铁，是芋中之珍品，可作蔬菜或主食，具有无公害、产量高、商品价值高、耐贮运等优点。红芽芋属生理碱性食物，被推荐为功能食品。随着种植业结构调整和人们对无公害蔬菜及品种多样化的需求，红芽芋的身价也相对提高，特别是优质、反季节的芋头上市后倍受青睐，一直是国内外市场上紧俏的抢手货。目前，随着生产不断发展，植株无性繁殖积累病毒逐渐增多，红芽芋品种普遍出现早衰现象，病害严重，产量和品质下降。因而，利用试管苗快速繁殖已成为红芽芋生产急需解决的问题。本研究以红芽芋微型块茎为试材，通过植物组织培养技术，获得愈伤组织并再分化出大量丛生芽，对充分发挥和利用我国红芽芋资源优势，保护、开发我国道地蔬菜和丰富特色蔬菜种类有重要意义。
发明内容：
本发明的目的是提供一种红芽芋微型块茎愈伤组织诱导、分化和植株再生的方法。实现本发明目的的技术方案是，(1)愈伤组织诱导：选取红芽芋微型块茎作为外植体，在无菌条件切成小块，接种于愈伤组织培养基(MS+2.0～3.0mg/L 6-BA+0.1～0.5mg/L 2，4-D+0.2～0.3％AC)上进行培养；培养基中蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7.5g/L，培养基pH值为5.8～6.0，培养条件为：黑暗培养，培养温度25±1℃，培养50～60d后，即可得到红芽芋脱毒苗微型块茎的愈伤组织块；(2)丛生芽诱导：将诱导的愈伤组织块接种到丛生芽诱导培养基(MS+2.0～4.0mg/L KT+0.1～0.5mg/L NAA)上进行培养，培养基中蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7.5g/L，培养基pH值为5.8～6.0，培养条件为：光照时间14h/d，光强约1500～2000lx，培养温度25±1℃，培养40～60d后，即可得到丛生芽组织块；(3)丛生芽的增殖培养：将丛生芽组织块接种到丛生芽增殖培养基(MS+1.0～2.0mg/L KT+0.1～0.2mg/L NAA)上进行培养，培养基中蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7.5g/L，培养基pH值为5.8～6.0，培养条件为：光照时间14h/d，光强约1500～2000lx，培养温度25±1℃，培养30～60d后，即可得到大量的红芽芋不定芽；；(4)不定芽的生根成苗：选取红芽芋不定芽接到生根培养基(1/2MS+0.5～1.0mg/L NAA+0.5～1.0mg/L PP333)上进行培养，培养基中蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7.5g/L，培养基pH值为5.8～6.0，培养条件为：光照时间14h/d，光强约1500～2000lx，培养温度25±1℃，培养30～60d后，即可获得红芽芋的小苗。本发明与现有技术比较具有成本低、丛生芽繁殖数量多等优点。
具体实施方式：
结合下述实施例对本发明作进一步说明：
(1)红芽芋微型块茎愈伤组织的诱导
选取红芽芋微型块茎作为外植体，在无菌条件切成小块，接种于愈伤组织培养基(MS+2.0～3.0mg/L 6-BA+0.1～0.5mg/L 2，4-D+0.2～0.3％AC)上进行培养；培养基中蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7.5g/L，培养基pH值为5.8～6.0，培养条件为：黑暗培养，培养温度25±1℃，培养50～60d后，即可得到红芽芋微型块茎的愈伤组织块。
(2)丛生芽诱导
将诱导的愈伤组织块接种到丛生芽诱导培养基(MS+2.0～4.0mg/L KT+0.1～0.5mg/L NAA)上进行培养，培养基中蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7.5g/L，培养基pH值为5.8～6.0，培养条件为：光照时间14h/d，光强约1500～2000lx，培养温度25±1℃，培养40～60d后，即可得到丛生芽组织块。
(3)丛生芽的增殖培养
将丛生芽组织块接种到丛生芽增殖培养基(MS+1.0～2.0mg/L KT+0.1～0.2mg/LNAA)上进行培养，培养基中蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7.5g/L，培养基pH值为5.8～6.0，培养条件为：光照时间14h/d，光强约1500～2000lx，培养温度25±1℃，培养30～60d后，即可得到大量的红芽芋不定芽。
(4)不定芽的生根成苗
选取红芽芋不定芽接到生根培养基(1/2MS+0.5～1.0mg/L NAA+0.5～1.0mg/LPP333)上进行培养，培养基中蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7.5g/L，培养基pH值为5.8～6.0，培养条件为：光照时间14h/d，光强约1500～2000lx，培养温度25±1℃，培养30～60d后，即可获得红芽芋的小苗，可直接驯化移栽，用于大田种植。

Claims (1)

1.本发明公开了一种红芽芋微型块茎愈伤组织诱导、分化和植株再生方法，其特征在于有以下步骤：(1)愈伤组织诱导：选取红芽芋脱毒苗微型块茎作为外植体，在无菌条件切成小块，接种于愈伤组织培养基(MS+2.0～3.0mg/L 6-BA+0.1～0.5mg/L 2，4-D+0.2～0.3％AC)上进行培养；培养基中蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7.5g/L，培养基pH值为5.8～6.0，培养条件为：黑暗培养，培养温度25±1℃，培养50～60d后，即可得到红芽芋脱毒苗微型块茎的愈伤组织块；(2)丛生芽诱导：将诱导的愈伤组织块接种到丛生芽诱导培养基(MS+2.0～4.0mg/L KT+0.1～0.5mg/L NAA)上进行培养，培养基中蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7.5g/L，培养基pH值为5.8～6.0，培养条件为：光照时间14h/d，光强约1500～2000lx，培养温度25±1℃，培养40～60d后，即可得到丛生芽组织块；(3)丛生芽的增殖培养：将丛生芽组织块接种到丛生芽增殖培养基(MS+1.0～2.0mg/L KT+0.1～0.2mg/L NAA)上进行培养，培养基中蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7.5g/L，培养基pH值为5.8～6.0，培养条件为：光照时间14h/d，光强约1500～2000lx，培养温度25±1℃，培养30～60d后，即可得到大量的红芽芋不定芽；(4)不定芽的生根成苗：选取红芽芋不定芽接到生根培养基(1/2MS+0.5～1.0mg/L NAA+0.5～1.0mg/L PP333)上进行培养，培养基中蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7.5g/L，培养基pH值为5.8～6.0，培养条件为：光照时间14h/d，光强约1500～2000lx，培养温度25±1℃，培养30～60d后，即可获得红芽芋的小苗。
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