CN103494775A - 京尼平交联壳聚糖载药微球的制备方法 - Google Patents

Abstract

一种京尼平交联壳聚糖载药微球的制备方法，采用乳化化学交联法，将与水互不相溶的油性成分与表面活性剂充分搅拌均匀作为油相混合物后，将均匀混有壳聚糖和负载的水溶性药物的混合溶液作为水相加入该油相混合物中，并充分的搅拌，形成油包水（W/O）型混合物，充分搅拌后用注射器逐滴加入交联剂进行交联固化，静置后除去上层溶液，下层沉淀体系分别用有机溶剂离心洗涤、干燥后，即可得到负载有相应药物的本发明壳聚糖载药微球。本发明制备的壳聚糖载药微球克服了传统制备方法中存在的缺陷和不足，工艺简单易行，毒副作用低、机械强度高，可作为药用缓控释载体，可广泛的应用于食品、生物、医药工程等领域。

Description

京尼平交联壳聚糖载药微球的制备方法

 

技术领域

本发明属于食品、生物、医药工程领域，具体的说是涉及一种粒径可控、表面状态可控、溶胀性可控、可生物降解并可作为药用缓控释载体的壳聚糖载药微球，及其制备方法。

背景技术

壳聚糖（chitosan）是生物界存在的唯一一种碱性氨基多糖，化学名称是（1,4）-2-氨基-2-脱氧-β-D-葡聚糖，是自然界储存量丰富的甲壳素脱乙酰基产物，因其具有许多独特的性质，如良好的生物相容性、生物降解性、生物粘附性、无毒性及抗菌性等，受到食品、医药及生物工程材料等领域的广泛重视。与此同时，最近其已被证明在微球或者纳米球的结构中为活性剂的控制运载系统。以壳聚糖为原料制备的壳聚糖微球，具有亲水性和较大的表面积体积比，作为药物载体可起到控制药物释放和维持其稳定性的作用；一定粒径的壳聚糖微球具有靶向作用，可将药物浓集于病灶，提高治疗效果并减少药物的毒副作用；此外，它还可以增加药物的包封率和载药量。关于壳聚糖微球载药性能的研究，已经有不同的探索和成果，但具有市场潜力的大多成果尚处于研究阶段。因此壳聚糖微球的制备研究已经成为目前的一个研究热点。

制备壳聚糖微球的方法，目前，壳聚糖微球的制备方法主要有乳化化学交联法、溶剂挥发法、凝聚法和喷雾干燥法等。乳化化学交联法可以得到圆形的且具有一定机械强度的壳聚糖微球，但是传统的乳化化学交联法必须引入戊二醛、甲醛等有一定毒性的化学交联剂。溶剂挥发法在制备壳聚糖微球的过程中要加入对人体有害的有机溶剂，有机溶剂残留使该法制备的壳聚糖微球存在较大的安全问题。凝聚法是通过使壳聚糖与三聚磷酸钠、海藻酸钠等与壳聚糖带有相反电荷的物质相作用来形成微球，但得到的产品的机械强度不高，球形不好，必须另外加入交联剂。喷雾干燥法是将药物、壳聚糖分别溶于冰乙酸/水/丙酮混合溶剂中得到不同浓度的壳聚糖溶液，在惰性的热气流中喷雾，溶剂迅速蒸发，形成壳聚糖微球，该法制备的微球机械强度也不高，给应用带来很多问题。因此，寻找到一种反应过程温和、不使用有毒性物质及制备出的壳聚糖微球机械强度高的微球制备方法是很有意义的。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术制备壳聚糖微球时引入了有毒交联剂或有机溶剂、制备出的壳聚糖微球机械强度不高的缺陷，提供一种安全可靠、粒径可控、表面状态可控、可生物降解的壳聚糖载药微球的制备方法，使微球机械强度显著提高；与此同时，进一步开发利用壳聚糖的应用价值、拓宽壳聚糖微球的应用潜力，通过对壳聚糖药物微球制备技术和理论的不断改进，制备出更多疗效更好的药物。

为了达到上述目的本发明包括下列步骤：

（1）含油相分散系的制备：在液体石蜡中加入表面活性剂，其比值为50:1，所述表面活性剂为Tween-80或Tween-20 和Span-80，且Tween-80或Tween-20 与Span-80的质量比为1:1，在30℃条件下，搅拌30 min，转速为660-720rpm，制成含油分散系；

（2）水相的制备：将壳聚糖加入到浓度为2%的乙酸溶液中，壳聚糖与乙酸溶液的比值为6:1，再加入红景天苷，且壳聚糖与红景天苷的质量比为12:1，超声溶解后作为水相；

（3）交联剂的制备：将京尼平加入到无水乙醇中，京尼平与无水乙醇的比值为70:1，制备成交联剂；

（4）将步骤（2）制备的水相匀速加入到步骤（1）制备的含油相分散系中，且含油分散系与水相的体积比为5:1，在30℃条件下，搅拌30-50min，转速为660-720rpm；

（5）将步骤（3）制得的交联剂缓慢加入到步骤（4）所得溶液中，交联剂与壳聚糖乙酸溶液的体积比为3:5，在30℃条件下，搅拌3-4h，转速为660-720rpm，然后静置2h，弃去上清液得到下层沉淀物；

（6）将步骤（5）所得沉淀物离心，分别用石油醚、丙酮、无水乙醇各洗涤三次；

（7）在常温下，真空干燥12h，即得本发明所述壳聚糖载药微球。

与现有技术相比，本发明提供的壳聚糖微球制备方法的有点在于：

（1）制备过程温和，工艺简单易行，得到的壳聚糖微球形状均一、表面积大、具有良好的吸附性；

（2）采用天然化合物京尼平作为生物交联剂，京尼平毒性低、交联能力强、生物相容性好，解决了目前乳化化学交联法、溶剂挥发法等制备壳聚糖微球的过程中使用毒性化学交联剂的问题；

（3）采用乳化化学交联法，制备的微球结构较为致密，球形和载药量都比较理想，克服了传统方法所得微球骨架密度较低，难以包载药物，药物只能吸附在微球的表面，难以避免突释效应的缺点。

（4）通过对制备过程中反应条件的控制和调整，例如对搅拌时间、交联剂用量等的考察，可以制备出球形、分散性良好的壳聚糖微球，以满足实际需要。

附图说明  

图1为壳聚糖与京尼平的反应机理示图；

图2为壳聚糖微球相对于200μm的大小示图；

图3 为壳聚糖微球相对于10μm的大小。

具体实施方式

实施例1、取50mL液体石蜡于烧杯中，加入Tween-80和Span-80各0.5g，在30℃条件下，搅拌30min，转速为660r/m，制成含油分散系。将60mg壳聚糖加入到10mL浓度为2%的乙酸溶液中，再加入红景天5mg，超声溶解后，将其匀速加入到上述含油分散系中，在30℃条件下搅拌30min，转速为660r/m，然后缓慢加入6mL比值为70:1的京尼平无水乙醇溶液，并在30℃下搅拌3h，转速为660r/m，静置2h后弃去上清液得到下层沉淀物进行离心，分别用石油醚、丙酮和无水乙醇各洗涤三次。最后在常温下，真空干燥12h，即得本发明所述壳聚糖载药微球。

实施例2、取100mL液体石蜡于烧杯中，加入Tween-80和Span-80各1g，在30℃条件下，搅拌30min，转速为690r/m，制成含油分散系。将120mg壳聚糖加入到20mL浓度为2%的乙酸溶液中，再加入红景天苷10mg，超声溶解后，将其匀速加入到上述含油分散系中，在30℃条件下搅拌40min，转速为690r/m，然后缓慢加入12mL比值为70:1的京尼平无水乙醇溶液，并在30℃下搅拌3.5h，转速为690r/m，静置2h后弃去上清液得到下层沉淀物进行离心，分别用石油醚、丙酮和无水乙醇各洗涤三次。最后在常温下，真空干燥12h，即得本发明所述微球。

实施例3、取150mL液体石蜡于烧杯中，加入Tween-20和Span-80各1.5mL，在30℃条件下，搅拌30min，转速为720r/m，制成含油分散系。将180mg壳聚糖加入到30mL浓度为2%的乙酸溶液中，再加入15mg红景天苷，超声溶解后，将其匀速加入到上述含油分散系中，在30℃条件下搅拌50min，转速为720r/m，然后缓慢加入18mL比值为70:1的京尼平无水乙醇溶液，并在30℃下搅拌4h，转速为720r/m，静置2h后弃去上清液得到下层沉淀物进行离心，分别用石油醚、丙酮和无水乙醇各洗涤三次。最后在常温下，真空干燥12h，即得本发明所述微球。

Claims (1)

1.一种京尼平交联壳聚糖载药微球的制备方法，其特征在于：

（1）含油相分散系的制备：在液体石蜡中加入表面活性剂，其比值为50:1，所述表面活性剂为Tween-80或Tween-20 和Span-80，且Tween-80或Tween-20 与Span-80的质量比为1:1，在30℃条件下，搅拌30 min，转速为660-720rpm，制成含油分散系；

（2）水相的制备：将壳聚糖加入到浓度为2%的乙酸溶液中，壳聚糖与乙酸溶液的比值为6:1，再加入红景天苷，且壳聚糖与红景天苷的质量比为12:1，超声溶解后作为水相；

（3）交联剂的制备：将京尼平加入到无水乙醇中，京尼平与无水乙醇的比值为70:1，制备成交联剂；

（4）将步骤（2）制备的水相匀速加入到步骤（1）制备的含油相分散系中，且含油分散系与水相的体积比为5:1，在30℃条件下，搅拌30-50min，转速为660-720rpm；

（5）将步骤（3）制得的交联剂缓慢加入到步骤（4）所得溶液中，交联剂与壳聚糖乙酸溶液的体积比为3:5，在30℃条件下，搅拌3-4h，转速为660-720rpm，然后静置2h，弃去上清液得到下层沉淀物；

（6）将步骤（5）所得沉淀物离心，分别用石油醚、丙酮、无水乙醇各洗涤三次；

（7）在常温下，真空干燥12h，即得本发明所述壳聚糖载药微球。

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