CN103463564B - 一种外用莪术油温敏凝胶及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种莪术油温敏凝胶及其制备方法，属于中药技术领域范围，所述莪术油温敏凝胶由有效量的莪术油及适当辅料制备而成，具有行气活血、消积止痛、活血化瘀、去腐生肌增强机体免疫的功能，具有良好的杀菌抑菌作用。并且携带、使用方便，局部无刺激性，不影响皮肤正常生理功能。本发明的莪术油温敏凝胶在体表35℃及以上温度胶凝，可用于皮肤表皮细菌性感染治疗，特别适用于湿热瘀滞所致的带下病，症见带下量多、色黄、时有阴部瘙痒；霉菌性阴道炎、老年性阴道炎、宫颈糜烂见上述证候者。

Description

一种外用莪术油温敏凝胶及其制备方法

技术领域

本发明属于中药技术领域范围，主要涉及一种莪术油温敏凝胶及其制备方法。

背景技术

温敏型原位凝胶是一种近年来较为活跃的剂型之一，是随着药用高分子材学的发展而产生的新颖剂型，贮藏条件和用药部位的温度差异可以使某些高分子溶液发生溶液-凝胶的转变，由溶液状态形成凝胶。这些聚合物在结构上均包含一定比例的疏水和亲水嵌段，其热敏型的胶凝行为与不同性质的嵌段间、以及嵌段与溶剂间的相互作用有关。利用对热敏感的聚合物，可以研制成黏膜给药的制剂，如口腔，鼻腔，阴道，直肠等部位的给药。

莪术油(Zedoaryturmericoil，ZTO)是从中药莪术中提取出来的挥发油，其主要成分为多种倍半萜类，包括莪术醇、莪术二酮、吉马酮、α-蒎烯、β-蒎烯、榄香烯等。临床研究具有抗菌、抗炎、抗病毒等作用。制备成温敏凝胶后具有对温度的变化响应速度快、渗透性好、与用药部位尤其是黏膜组织亲和力强、滞留时间长和用量小等优点，特别是在妇科炎症疾病领域都具有广泛应用的前景。

发明内容

本发明通过以下技术方案实现：

在第一方面中，本发明提供一种制备莪术油温敏凝胶剂的方法，所述方法包括如下的步骤：

1、各组分及其配方质量百分比(质量％)：

(1)所述的药物为莪术油；

(2)所述的增溶剂为吐温-80；

(3)所述的增稠剂为透明质酸；

(4)所述的凝胶基质为泊洛沙姆407：泊洛沙姆188＝17.25质量％：6质量％的组合物；

2、操作步骤：

(1)制备A液：

按照配比质量百分数依次加入药物和表面活性剂，室温搅拌混合均匀，然后在磁力搅拌器上边搅拌边加入余量的双蒸水，得到透明澄清液体，即得A液；

(2)制备B液：

按照配比质量百分数将增稠剂加入双蒸水中，室温搅拌后静置，使其充分溶解。得到透明澄清液体，即得B液；

(3)制备C液：

其中柠檬酸缓冲液的组分和质量百分比：

十二水合磷酸氢二钠1％-5％

柠檬酸1％-5％

水余量

按照配比质量百分数将十二水合磷酸氢二钠和柠檬酸加入双蒸水中，室温搅拌后静置，使其充分溶解。调节pH值至4.0，即得柠檬酸缓冲液；然后，然后，按照C液的配比质量百分数和所述凝胶基质的质量配比比例将泊洛沙姆407和泊洛沙姆188加入柠檬酸缓冲液中，搅拌充分，置于4℃充分溶胀，分散均匀，即得C液；

(4)制备温敏凝胶剂：

将A液和B液缓缓加入C液中，A液∶B液∶C液(W/W/W，即质量比)＝0.5％-5％∶0.5％-5％∶25％-30％，搅拌均匀后，于4℃冷藏，即制得所述莪术油温敏凝胶剂。

其中，在步骤(4)中，优选地，A液∶B液∶C液(W/W/W)＝1∶1∶28。

本发明中所用的莪术油可以按照常规提取方法从中药莪术中提取，或者直接使用市售产品，例如，本发明实施例中所用的莪术油购于浙江瑞天药业有限公司，批号：5090703，其中吉马酮含量为8.4％。本发明对于莪术油的来源没有特别的限制，但必须符合现行《中国药典》对莪术油的质量要求。

本发明中所用的吐温-80、透明质酸、泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、十二水合磷酸氢二钠和柠檬酸等试剂均为市售适合药用的试剂。例如，本发明中所用的透明质酸购于山东福瑞达生物化工有限公司，国药准字F20040001。

在第二方面中，本发明涉及由本发明第一方面的制备方法制得的莪术油温敏凝胶。

本发明的莪术油温敏凝胶胶凝温度为35℃，在体表温度35℃及以上温度胶凝，可以通过外用方式用于治疗受试者的皮肤表皮细菌性感染，还可以通过阴道给药的方式用于湿热瘀滞所致的带下病，症见带下量多、色黄、时有阴部瘙痒；霉菌性阴道炎、老年性阴道炎、宫颈糜烂见上述证候者。

在第三方面中，本发明涉及莪术油在制备用于治疗受试者的阴道炎和皮肤表皮细菌性感染的温敏凝胶剂中的应用。

其中所述温敏凝胶剂包含有效量的莪术油，通过本发明第一方面的方法制备。

其中所述受试者为哺乳动物，优选人。

其中所述阴道炎例如，但不限于，湿热瘀滞所致的带下病，症见带下量多、色黄、时有阴部瘙痒；霉菌性阴道炎、老年性阴道炎、宫颈糜烂见上述证候者。

在后续实施例中应用的阴道炎动物模型为由金黄色葡萄球菌和/或大肠杆菌引起的大鼠阴道炎模型。

综上所述，本发明提供下述各项：

1.一种制备莪术油温敏凝胶剂的方法，所述方法包括下述步骤：

(1)制备A液：

A液的配方质量百分比如下：

药物1％-5％

A液增溶剂10％-15％

水余量

其中所述药物为莪术油，所述增溶剂为吐温-80，

按照A液的配比质量百分数依次加入药物和增溶剂，室温搅拌混合均匀，然后在磁力搅拌器上边搅拌边加入余量的双蒸水，得到透明澄清液体，即得A液；

(2)制备B液：

B液的配方质量百分比如下：

B液增稠剂0.5％-2％

水余量

其中所述增稠剂为透明质酸，

按照B液的配比质量百分数将增稠剂加入双蒸水中，室温搅拌后静置，使其充分溶解。得到透明澄清液体，即得B液；

(3)制备C液：

C液的配方质量百分比如下：

凝胶基质20％-25％

C液

柠檬酸缓冲液余量

其中所述凝胶基质为泊洛沙姆407：泊洛沙姆188＝17.25质量％：6质量％的组合物，所述柠檬酸缓冲液的组分和质量百分比如下：

十二水合磷酸氢二钠1％-5％

柠檬酸1％-5％

水余量

将十二水合磷酸氢二钠和柠檬酸加入双蒸水中，室温搅拌后静置，使其充分溶解。调节pH值至4.0，即得柠檬酸缓冲液；然后，按照C液的配比质量百分数和所述凝胶基质的质量配比比例将泊洛沙姆407和泊洛沙姆188加入柠檬酸缓冲液中，搅拌充分，置于4℃充分溶胀，分散均匀，即得C液；

(4)制备温敏凝胶剂：

将A液和B液缓缓加入C液中，A液∶B液∶C液(W/W/W)＝0.5-5∶0.5-5∶25-30，搅拌均匀后，于4℃冷藏，即制得所述莪术油温敏凝胶剂。

2.根据第1项所述的方法，其中步骤(4)中A液∶B液∶C液(W/W/W)＝1∶1∶28。

3.通过第1或2项所述的方法制备的莪术油温敏凝胶剂。

4.根据第3项所述的莪术油温敏凝胶剂，其胶凝温度为35℃。

5.根据第3项所述的莪术油温敏凝胶剂，其用于治疗皮肤表皮细菌性感染，或用于治疗湿热瘀滞所致的带下病，症见带下量多、色黄、时有阴部瘙痒；霉菌性阴道炎、老年性阴道炎、宫颈糜烂见上述证候者。

6.根据第5项所述的莪术油温敏凝胶剂，其中所述受试者为哺乳动物，优选人。

7.莪术油在制备用于治疗受试者的阴道炎和皮肤表皮细菌性感染的温敏凝胶剂中的应用。

8.根据第7项所述的应用，其中所述受试者为哺乳动物，优选人。

9.根据第7项所述的应用，其中所述阴道炎为湿热瘀滞所致的带下病，症见带下量多、色黄、时有阴部瘙痒；霉菌性阴道炎、老年性阴道炎、宫颈糜烂见上述证候者。

10.根据第7项所述的应用，其中所述温敏凝胶剂包含有效量的莪术油，通过第1或2项所述的方法制备。

本发明的莪术油温敏凝胶剂的有益效果如下：

莪术油温敏凝胶剂同时具备了莪术油良好的抗菌消炎能力以及温敏凝胶对温度的变化响应速度快、渗透性好、与用药部位尤其是阴道黏膜组织亲和力强且无刺激性、滞留时间长和用量小等优点。很大程度上改善了体外用药渗透性差、吸收差而导致的生物利用率低等问题。且不存在药液外溢的现象，清洗，携带方便。具有良好的市场前景。

附图说明

从下面结合附图的详细描述中，本发明的上述特征和优点将更明显，其中：

图1显示本发明的莪术油温敏凝胶对细菌性阴道炎动物模型炎症影响，所用的动物模型为雌性大鼠，阴道炎由金黄色葡萄球菌和大肠杆菌引起，其中空白组给予1g/kg生理盐水，模型组给予等量的生理盐水，溶媒组给予等量的不含莪术油的凝胶剂基质，消糜栓组给予阳性对照药消糜栓(购自吉林修正药业股份有限公司)50mg/kg体重，莪术油温敏凝胶给药量分别为0.5g/kg体重(低剂量组)、1g/kg体重(中剂量组)和2g/kg体重(高剂量组)；每天给药1次，连续6天阴道给药。停药后第4天取大鼠阴道分泌物进行鉴定，停药后第5天将大鼠处死解剖，取阴道标本进行肉眼观察。阴道标本按充血、水肿、出血3项指标进行评分。详细数据对应表2。

图2显示本发明的莪术油温敏凝胶对细菌性阴道炎细菌抑制率的影响，详细数据对应表3。

具体实施方式

下面参照具体的实施例进一步描述本发明，但是本领域技术人员应该理解，本发明并不限于这些具体的实施例。

并且，本领域技术人员应该理解，除非另外指明，实施例中所用的试剂均为市售药用级别的试剂。

实施例1：制备莪术油温敏凝胶剂

(1)制备A液：

具体地，A液的配方质量百分比如下：

莪术油1％

A液吐温-8010％

水余量

其中莪术油购于浙江瑞天药业有限公司，批号：5090703，其中吉马酮含量为8.4％；吐温-80用作增溶剂；

按照上述配比质量百分数依次加入莪术油0.1ml和吐温-801ml，室温搅拌混合均匀，然后在磁力搅拌器上边搅拌边加入余量的双蒸水至总重量10g，得到透明澄清液体，即得A液。

(2)制备B液：

具体地，B液的配方质量百分比如下：

透明质酸0.5％

B液

水余量

其中透明质酸用作增稠剂；

按照上述配比质量百分数称取透明质酸0.1g，加入双蒸水至总重量20g，室温搅拌后静置，使其充分溶解，得到透明澄清液体，即得B液。

(3)制备C液

具体地，C液的配方质量百分比如下：

凝胶基质23.25％

C液

柠檬酸缓冲液余量

称取十二水合磷酸氢二钠34.5g和柠檬酸12.9g，加入双蒸水至总重量1000g，室温搅拌后静置，使其充分溶解。调节pH值至4.0，即得柠檬酸缓冲液。称取泊洛沙姆407172.5g和泊洛沙姆18860g，加入柠檬酸缓冲液至总重量1000g，搅拌充分，置于4℃充分溶胀，分散均匀，即得C液。

(4)制备莪术油温敏凝胶剂

将A液和B液缓缓加入C液中，A液∶B液∶C液(W/W/W)＝1∶1∶28搅拌均匀后，于4℃冷藏，即得莪术油温敏凝胶剂。本实施例制得的温敏凝胶剂的胶凝温度为35℃。

实施例2：莪术油温敏凝胶体外抑菌实验

采用平皿二倍稀释法，将已稀释好的不同梯度浓度的温敏凝胶分别加入培养基平板中。取金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌等实验菌悬液(菌液密度1×10⁵CFU/mL)，分别划种于不同浓度的含药平板，37℃培养18h，观察记录最小抑菌浓度(MIC)。

表1莪术油温敏凝胶体外抑菌实验

表1结果表明，莪术油温敏凝胶体外对引起阴道炎的多种致病菌具有显著的抑制作用。其中对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌效果最为显著。

实施例3：莪术油温敏凝胶对细菌性阴道炎动物模型的作用

取SD大鼠(购自广东省实验动物中心，实验动物合格证号：SCXK(粤)2008-0002)56只，8周龄，体重200-250g，雌性，随机分为7组，每组8只，其中一组为正常组大鼠，其余5组大鼠从阴道注入金黄色葡萄球菌(3×10⁵CFU/mL)和大肠杆菌(1.6×10⁶CFU/mL)的混合菌液，菌液注入量为0.05mL/100g体重，隔日再接种1次。第5天及第7天分别取阴道分泌物做镜检、细菌培养，并分别分离出金葡萄球菌和大肠杆菌，再分别接种于培养基中，经培养后，做菌株鉴定。镜检及菌株鉴定均为阳性者为感染成功的大鼠。取感染成功的大鼠随机分为6组。其中3组分别阴道给予(相当于莪术油生药量)0.5g/kg体重、1g/kg体重、2g/kg体重的实施例1制得的莪术油温敏凝胶；1组给予阳性对照药消糜栓(购自吉林修正药业股份有限公司)50mg/kg体重；另外两组分别为模型组和溶媒组，分别给予等量的生理盐水和不含莪术油的凝胶剂基质。每天给药1次，连续6天阴道给药。停药后第4天取大鼠阴道分泌物进行鉴定，2次鉴定病原体均为阴性定为转阴。停药后第5天将大鼠处死解剖，取阴道标本进行肉眼观察。阴道标本按充血、水肿、出血3项指标进行评分。无充血、水肿、无出血评0分；阴道黏膜尚平滑有轻度充血，评为1分；阴道黏膜尚平滑中度充血，可见点状出血点，评为2分；阴道黏膜不平滑，重度充血，可见大量出血点，组织轻度水肿，评为3分。以模型对照组的分值定为100％(炎症程度)，药物组与模型对照组比较，可得出药物组炎症抑制率。

表2莪术油温敏凝胶对细菌性阴道炎动物模型炎症影响(mean±SD，n＝8)

与模型组比较^*P＜0.05

表3莪术油温敏凝胶对细菌性阴道炎细菌抑制率的影响(n＝8)

表2以及表3结果表明：本发明的莪术油温敏凝胶对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌引起的细菌性阴道炎具有明显的抑制作用。抗菌抗炎效果显著。表2和表3的结果也看见于图1和2，更直观地显示了本发明的莪术油温敏凝胶对阴道细菌的抑制作用。

应该理解，尽管参考其示例性的实施方案，已经对本发明进行具体地显示和描述，但是本领域的普通技术人员应该理解，在不背离由后附的权利要求所定义的本发明的精神和范围的条件下，可以在其中进行各种形式和细节的变化，可以进行各种实施方案的任意组合。

Claims (7)

1.一种制备莪术油温敏凝胶剂的方法，所述方法为：

步骤(1)制备A液：

A液的配方质量百分比如下：

药物1％-5％

A液增溶剂10％-15％

水余量

其中所述药物为莪术油，所述增溶剂为吐温-80，

按照A液的配比质量百分数依次加入药物和增溶剂，室温搅拌混合均匀，然后在磁力搅拌器上边搅拌边加入余量的双蒸水，得到透明澄清液体，即得A液；

步骤(2)制备B液：

B液的配方质量百分比如下：

增稠剂0.5％-2％

B液

水余量

其中所述增稠剂为透明质酸，

按照B液的配比质量百分数将增稠剂加入双蒸水中，室温搅拌后静置，使其充分溶解，得到透明澄清液体，即得B液；

步骤(3)制备C液：

C液的配方质量百分比如下：

凝胶基质20％-25％

C液

柠檬酸缓冲液余量

其中所述凝胶基质为泊洛沙姆407：泊洛沙姆188＝17.25质量％：6质量％的组合物，所述柠檬酸缓冲液的组分和质量百分比如下：

十二水合磷酸氢二钠1％-5％

柠檬酸1％-5％

水余量

将十二水合磷酸氢二钠和柠檬酸加入双蒸水中，室温搅拌后静置，使其充分溶解，调节pH值至4.0，即得柠檬酸缓冲液；然后，按照C液的配比质量百分数和所述凝胶基质的质量配比比例将泊洛沙姆407和泊洛沙姆188加入柠檬酸缓冲液中，搅拌充分，置于4℃充分溶胀，分散均匀，即得C液；

步骤(4)制备温敏凝胶剂：

将A液和B液缓缓加入C液中，其中A液、B液和C液的质量比为0.5-5∶0.5-5∶25-30，搅拌均匀后，于4℃冷藏，即制得所述莪术油温敏凝胶剂。

2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(4)中A液、B液和C液的质量比为1∶1∶28。

3.通过权利要求1或2所述的方法制备的莪术油温敏凝胶剂。

4.根据权利要求3所述的莪术油温敏凝胶剂，其胶凝温度为35℃。

5.根据权利要求3所述的莪术油温敏凝胶剂，其用于治疗受试者的皮肤表皮细菌性感染，或用于治疗湿热瘀滞所致的带下病，症见带下量多、色黄、时有阴部瘙痒；霉菌性阴道炎、老年性阴道炎、宫颈糜烂见上述证候者。

6.根据权利要求5所述的莪术油温敏凝胶剂，其中所述受试者为哺乳动物。

7.根据权利要求6所述的莪术油温敏凝胶剂，其中所述受试者为人。