CN103405639B - 一种桑黄多糖与中药复方降血糖口服液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种桑黄多糖与中药复方降血糖口服液及其制备方法，以桑黄液体菌为出发菌，进行巨菌草固体发酵，获得大量的桑黄菌丝；采用热水浸提法提取桑黄多糖，去杂﹑醇沉﹑浓缩后冷冻干燥成多糖粉末；最后将多糖粉末与中药复方浓缩液混合配制成不同剂量的复合物。该工艺操作简便，成本价格低，安全可靠，适合工业规模化生产。桑黄多糖与中药复方降血糖复合物经药效学实验，表明高剂量组的血糖下降率高达44.62%，具有很强的降血糖效果。

Description

一种桑黄多糖与中药复方降血糖口服液及其制备方法

技术领域

本发明属于保健品领域，具体涉及一种桑黄多糖与中药复方降血糖口服液及其制备方法。

背景技术

桑黄（Phellinus igniarius(L.ex Fr.)Quel），属担子菌纲、多孔菌目、多孔菌科、针层孔菌属(Phellinus)，俗称火木层孔菌、针层孔菌、桑耳、桑臣、胡孙眼等，是一种珍贵的药用真菌。从食药用真菌子实体﹑菌丝体以及发酵液中分离提取出来的真菌多糖，具有“生物反应调节剂”的美称，能控制细胞的分裂分化﹑调节细胞的生长﹑具有抗氧化﹑抗病毒﹑抗肿瘤﹑降血糖﹑提高免疫力等多种生物活性。很多研究表明，某些具有特定结构的多糖具有明显的降血糖效果，多糖的降血糖作用具有多效应﹑多途径﹑多靶点等特点。

糖尿病（diabetes mellitus, DM）是因基因遗传和环境相互作用而导致的一种内分泌代谢疾病，胰岛素分泌绝对或相对不足以及靶组织细胞对胰岛素敏感性降低而引起的代谢混乱和生理稳态的失常。糖尿病的主要特征是：高血糖﹑糖尿﹑葡萄糖耐量降低及胰岛素释放试验异常。

目前关于多糖的降血糖作用研究甚少，关于巨菌草固体发酵桑黄菌丝体多糖的研究的报道几乎没有，而中药复方也具有降血糖的潜质，结合中药配伍理论，探讨多糖和中药复方与多糖复合物的降血糖活性研究甚是必要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种桑黄多糖与中药复方降血糖口服液及其制备方法，工艺操作简便，成本价格低，安全可靠，适合工业规模化生产。桑黄多糖与中药复方降血糖复合物经药效学实验，表明高剂量组的血糖下降率高达44.62%，具有很强的降血糖效果。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种桑黄多糖与中药复方降血糖口服液的制备方法包括以下步骤：

（1）桑黄菌的固体发酵：

A、将桑黄液体保存菌种（福建农林大学食品生物技术实验室保存）活化﹑复化，于26-30℃恒温摇床中110-150r/min培养5-10d，经两次扩大培养得到生产摇瓶二级种；

活化培养基配方：黄豆粉10-30 g/L、玉米粉20-40 g/L、小麦麸粉1-10 g/L、酵母浸出汁1-10 g/L、KH₂PO₄ 0.1-1.0 g/L、ZnSO₄·7H₂O 0.1-1.0 g/L，VB₁ 0.1 g/L，pH自然；

B、将生产摇瓶二级种转接入菌草固体培养基中发酵培养25-40d，待原基形成取出；

菌草固体培养基配方：五节芒 30-50 g/100g，巨菌草 5-15 g/100g，象草5-15 g/100g，玉米粉 10-15 g/100g，麸皮 13-18 g/100g，石膏粉 1-5 g/100g，含水量40%-70%，pH为5-8；

培养条件为：接种量1-10%，培养温度25-32℃；

（2）桑黄多糖粉末的制备：

A、在形成原基后的桑黄发酵产物中加入20-60倍重量的水，于80-100℃水浴锅中提取1-3h，经过滤得提取液和滤渣；将滤渣重复提取1-3次，合并提取液；

B、将提取液置于陶瓷膜过滤器中过滤处理，再于40-80℃、0.05-0.095MPa条件下浓缩至糖度2-5，得浓缩液，经冷冻干燥得桑黄多糖粉末；

（3）中药复方浓缩液的制备：

取玉竹 40-60g、黄芪40-60g、桑叶 20-40g、三七 40-60g和枸杞子40-60g，于砂锅中用水浸过药材表面2-3cm，浸泡10-30min，煮沸后文火煎煮20-40min，冷却至室温，用纱布过滤、2500-4500r/min离心并浓缩至150-300mL，得中药复方浓缩液；

（4）桑黄多糖与中药复方降血糖口服液的制备：

A、将桑黄多糖粉末与中药复方浓缩液混合得到初始保健浓缩液；

B、将初始保健液煮沸，离心去除其中的不溶物质后，按重量比加入阿斯巴甜200-500 ppm和苹果酸0.1-0.5%；

C、调配好的口服液趁热用盐水瓶灌装、锁盖，经水浴杀菌并检验合格后即成为产品。

本发明的显著优点在于：

（1）该工艺操作简便，成本价格低，安全可靠，适合工业规模化生产。

（2）桑黄多糖与中药复方降血糖复合物经药效学实验，表明高剂量组的血糖下降率高达44.62%，具有很强的降血糖效果。

（3）本发明通过将液体菌种转接巨菌草固体发酵培养的方法，获得大量的桑黄菌丝，用热水提取法提取获得多糖浓缩液，冷冻干燥成多糖粉末，与中药复方浓缩液配制成具有降血糖效果的复合物。该工艺的运用，能缓解野生桑黄的短缺现状，保护物质资源，同时能开发功能性食品和降血糖药物。

具体实施方式

实施例1

一种桑黄多糖与中药复方降血糖口服液的制备方法包括以下步骤：

（1）桑黄菌的固体发酵：

A、将桑黄液体保存菌种（福建农林大学食品生物技术实验室保存）活化﹑复化，于26℃恒温摇床中110r/min培养5d，经两次扩大培养得到生产摇瓶二级种；

活化培养基配方：黄豆粉10 g/L、玉米粉20 g/L、小麦麸粉1 g/L、酵母浸出汁1 g/L、KH₂PO₄ 0.1 g/L、ZnSO₄·7H₂O 0.1 g/L，VB₁ 0.1 g/L，pH自然；

B、将生产摇瓶二级种转接入菌草固体培养基中发酵培养25d，待原基形成取出；

菌草固体培养基配方：五节芒 30 g/100g，巨菌草 5g/100g，象草5g/100g，玉米粉 10g/100g，麸皮 13 g/100g，石膏粉 1 g/100g，含水量40%，pH为5；

培养条件为：接种量1%，培养温度25℃；

（2）桑黄多糖粉末的制备：

A、在形成原基后的桑黄发酵产物中加入20倍重量的水，于80℃水浴锅中提取1h，经过滤得提取液和滤渣；将滤渣重复提取1次，合并提取液；

B、将提取液置于陶瓷膜过滤器中过滤处理，再于40℃、0.05MPa条件下浓缩至糖度2，得浓缩液，经冷冻干燥得桑黄多糖粉末；

（3）中药复方浓缩液的制备：

取玉竹 40g、黄芪40g、桑叶 20g、三七 40g和枸杞子40g，于砂锅中用水浸过药材表面2cm，浸泡10min，煮沸后文火煎煮20min，冷却至室温，用纱布过滤、2500r/min离心并浓缩至150mL，得中药复方浓缩液；

（4）桑黄多糖与中药复方降血糖口服液的制备：

A、将桑黄多糖粉末与中药复方浓缩液混合得到初始保健浓缩液；

B、将初始保健液煮沸，离心去除其中的不溶物质后，按重量比加入阿斯巴甜200ppm和苹果酸0.1%；

C、调配好的口服液趁热用盐水瓶灌装、锁盖，经水浴杀菌并检验合格后即成为产品。

实施例2

一种桑黄多糖与中药复方降血糖口服液的制备方法包括以下步骤：

（1）桑黄菌的固体发酵：

A、将桑黄液体保存菌种活化﹑复化，于30℃恒温摇床中150r/min培养10d，经两次扩大培养得到生产摇瓶二级种；

活化培养基配方：黄豆粉30 g/L、玉米粉40 g/L、小麦麸粉10 g/L、酵母浸出汁10 g/L、KH₂PO₄ 1.0 g/L、ZnSO₄·7H₂O 1.0 g/L，VB₁ 0.1 g/L，pH自然；

B、将生产摇瓶二级种转接入菌草固体培养基中发酵培养40d，待原基形成取出；

菌草固体培养基配方：五节芒 50 g/100g，巨菌草 15 g/100g，象草15 g/100g，玉米粉 15 g/100g，麸皮 18 g/100g，石膏粉 5 g/100g，含水量70%，pH为8；

培养条件为：接种量10%，培养温度32℃；

（2）桑黄多糖粉末的制备：

A、在形成原基后的桑黄发酵产物中加入60倍重量的水，于100℃水浴锅中提取3h，经过滤得提取液和滤渣；将滤渣重复提取3次，合并提取液；

B、将提取液置于陶瓷膜过滤器中过滤处理，再于80℃、0.095MPa条件下浓缩至糖度5，得浓缩液，经冷冻干燥得桑黄多糖粉末；

（3）中药复方浓缩液的制备：

取玉竹60g、黄芪60g、桑叶 40g、三七60g和枸杞子60g，于砂锅中用水浸过药材表面3cm，浸泡30min，煮沸后文火煎煮40min，冷却至室温，用纱布过滤、4500r/min离心并浓缩至300mL，得中药复方浓缩液；

（4）桑黄多糖与中药复方降血糖口服液的制备：

A、将桑黄多糖粉末与中药复方浓缩液混合得到初始保健浓缩液；

B、将初始保健液煮沸，离心去除其中的不溶物质后，按重量比加入阿斯巴甜500 ppm和苹果酸0.5%；

C、调配好的口服液趁热用盐水瓶灌装、锁盖，经水浴杀菌并检验合格后即成为产品。

实施例3

一种桑黄多糖与中药复方降血糖口服液的制备方法包括以下步骤：

（1）桑黄菌的固体发酵：

A、将桑黄液体保存菌种活化﹑复化，于28℃恒温摇床中130r/min培养7d，经两次扩大培养得到生产摇瓶二级种；

活化培养基配方：黄豆粉20g/L、玉米粉30 g/L、小麦麸粉5g/L、酵母浸出汁5g/L、KH₂PO₄ 0.5 g/L、ZnSO₄·7H₂O 0.5g/L，VB₁ 0.1 g/L，pH自然；

B、将生产摇瓶二级种转接入菌草固体培养基中发酵培养30d，待原基形成取出；

菌草固体培养基配方：五节芒 40 g/100g，巨菌草 10 g/100g，象草10 g/100g，玉米粉 12g/100g，麸皮15 g/100g，石膏粉3g/100g，含水量55%，pH为7；

培养条件为：接种量5%，培养温度28℃；

（2）桑黄多糖粉末的制备：

A、在形成原基后的桑黄发酵产物中加入40倍重量的水，于90℃水浴锅中提取2h，经过滤得提取液和滤渣；将滤渣重复提取2次，合并提取液；

B、将提取液置于陶瓷膜过滤器中过滤处理，再于60℃、0.07MPa条件下浓缩至糖度3，得浓缩液，经冷冻干燥得桑黄多糖粉末；

（3）中药复方浓缩液的制备：

取玉竹 50g、黄芪50g、桑叶 30g、三七 50g和枸杞子50g，于砂锅中用水浸过药材表面2.5cm，浸泡20min，煮沸后文火煎煮30min，冷却至室温，用纱布过滤、3500r/min离心并浓缩至200mL，得中药复方浓缩液；

（4）桑黄多糖与中药复方降血糖口服液的制备：

A、将桑黄多糖粉末与中药复方浓缩液混合得到初始保健浓缩液；

B、将初始保健液煮沸，离心去除其中的不溶物质后，按重量比加入阿斯巴甜350ppm和苹果酸0.3%；

C、调配好的口服液趁热用盐水瓶灌装、锁盖，经水浴杀菌并检验合格后即成为产品。

所得口服液呈棕色稠状，具有多糖甜味和中药味，具有明显的降血糖的作用。

以上所用的巨菌草由福建农林大学菌草中心提供，粉碎后用；所有配方中的化学药品均为分析纯。

将本发明的桑黄多糖与中药复方复合物，按照《保健食品审评专家培训资料汇编》（三）方法进行降血糖的药效学实验，所得结果如下：

1﹑桑黄多糖与中药复方复合物对小鼠血糖的影响（见表1）：

通过与正常组﹑模型对照组﹑阳性对照组相比，桑黄多糖与中药复方复合物具有很强的降血糖作用；灌胃盐酸二甲双胍缓释片（200mg/kg）的阳性对照组的血糖下降百分率为51.99%，复方低剂量组（100mg/kg）的血糖下降百分率达30.28%，复方高剂量组（400mg/kg）达44.62%；复方高剂量组的降血糖快接近药物组，随着灌胃时间的延长，小鼠得血糖值不断下降，缓慢接种正常组，说明桑黄多糖与中药复方复合物具有降血糖的作用。

表1桑黄多糖与中药复方复合物对小鼠血糖的影响(n=10)

注：同一列中不同字母表明差异显著（p<0.05）

2﹑桑黄多糖与中药复方复合物对小鼠体重的影响(见表2)

随着喂养时间的延长，各试验组的体重指标不断上升，小鼠的精神状况好转和“三多一少” 得到缓慢治疗。

表2  桑黄多糖与中药复方复合物对小鼠体重的影响（n=10）  

注：组号1-5分别是正常组﹑模型对照组﹑阳性对照组﹑复方低剂量组和高剂量组

3﹑桑黄多糖与中药复方复合物的耐糖量指标（见表3）

高血糖模型小鼠禁食5h，给予受试样品15-20min后，经口给予2.0g/kg葡萄糖，测得0﹑0.5﹑2h的血糖值。根据统计学方法求得耐糖量，与正常组相比，各受试样品组的耐糖量都降低，表明糖耐量指标结果呈现阳性。

表3  桑黄多糖与中药复方复合物的耐糖量指标（n=10） 

 

以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims (1)

1.一种桑黄多糖与中药复方降血糖口服液，其特征在于：其制备方法包括以下步骤：

（1）桑黄菌的固体发酵：

A、将桑黄液体保存菌种活化﹑复化，经两次扩大培养得到生产摇瓶二级种；

B、将生产摇瓶二级种转接入菌草固体培养基中发酵培养25-40d，待原基形成取出；

菌草固体培养基配方：五节芒 30-50 g/100g，巨菌草 5-15 g/100g，象草5-15 g/100g，玉米粉 10-15 g/100g，麸皮 13-18 g/100g，石膏粉 1-5 g/100g，含水量40%-70%，pH为5-8；

培养条件为：接种量1-10%，培养温度25-32℃；

（2）桑黄多糖粉末的制备：

A、在形成原基后的桑黄发酵产物中加入20-60倍重量的水，于80-100℃水浴锅中提取1-3h，经过滤得提取液和滤渣；将滤渣重复提取1-3次，合并提取液；

B、将提取液置于陶瓷膜过滤器中过滤处理，再于40-80℃、0.05-0.095MPa条件下浓缩至糖度2-5，得浓缩液，经冷冻干燥得桑黄多糖粉末；

（3）中药复方浓缩液的制备：

取玉竹 40-60g、黄芪40-60g、桑叶 20-40g、三七 40-60g和枸杞子40-60g，于砂锅中用水浸过药材表面2-3cm，浸泡10-30min，煮沸后文火煎煮20-40min，冷却至室温，用纱布过滤、2500-4500r/min离心并浓缩至150-300mL，得中药复方浓缩液；

（4）桑黄多糖与中药复方降血糖口服液的制备：

A、将桑黄多糖粉末与中药复方浓缩液混合得到初始保健浓缩液；

B、将初始保健液煮沸，离心去除其中的不溶物质后，按重量比加入阿斯巴甜200-500 ppm和苹果酸0.1-0.5%；

C、调配好的口服液趁热用盐水瓶灌装、锁盖，经水浴杀菌并检验合格后即成为产品。