CN103402540A - 抗体的非水性高浓度低粘度混悬剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及抗体的非水性高浓度低粘度混悬剂及其制备和使用方法。

Description

抗体的非水性高浓度低粘度混悬剂
技术领域
本发明涉及非水性高浓度低粘度混悬剂及其制备和使用方法。
背景技术
单克隆抗体(mAb)已成为重要的蛋白类治疗剂，可用于治疗多种人类疾病例如癌症、感染性疾病、炎症和自身免疫疾病。目前，超过20种单克隆抗体产品已获得美国食品药品监督管理局批准，并且目前正在临床试验中评估的所有生物药剂中有大约20％都是单克隆抗体(Daugherty等人，Adv.Drug Deliv.Rev.58：686-706，2006)。
抗体可以例如通过肠胃外途径给药，例如通过静脉注射(IV)、皮下注射(SC)或肌内注射(IM)给药。SC或IM途径可降低治疗成本并改善给药期间患者和医疗保健提供者的便利性。为了提供有效性和可药用性，肠胃外给药制剂应优选地为无菌、稳定、可灌注、可注射和无刺激性的。这些特性产生了对制造、储存和使用的要求，使得注射用制剂剂型难以开发，尤其是具有高蛋白质浓度的制剂。
与任何蛋白质治疗剂一样，抗体会受到物理和化学不稳定性诸如聚集、变性、交联、脱酰胺化、异构化、氧化和剪切的影响(Wang等人，J.Pharm.Sci.96：1-26，2007)。因此，确定对抗体稳定性起关键作用的因子的制剂开发在市售抗体药物的开发中最为重要。
SC或IM注射剂所需的小体积(通常为0.5至2mL)提出了另外的制剂挑战，因为给药需要通常在100mg至1g蛋白质/剂之间的高浓度抗体制剂，以在患者中实现治疗水平。高度浓缩的蛋白质制剂通常导致增加的蛋白质聚集、弱稳定性和增加的粘度，损害可注射性并在加工、制造和储存期间产生负面后果(Shire等人，J.Pharm.Sci.93：1390-1402，2004)。
目前通过SC或IM途径给药的商业化单克隆抗体产品通常与赋形剂或表面活性剂(例如甘露糖醇、蔗糖或聚山梨醇酯80)配制在含水缓冲液(例如磷酸盐或L-组氨酸缓冲液)中，以防止聚集并改善稳定性。报道的含水制剂中的抗体浓度高达100mg/mL(Wang等人，J.Pharm.Sci.96：1-26，2007)。含水制剂的粘度通过添加盐(美国专利No.7,666,413)或有机或无机酸(美国专利No.7,740,842)而降低。
非水性抗体或蛋白质制剂已有所描述。WO2006/071693描述了制剂中单克隆抗体高达100mg/mL的非水性混悬液，该制剂具有粘度增强剂(聚乙烯基吡咯烷酮，PVP)和溶剂(苯甲酸苄酯(BB)或PEG400)。WO2004/089335描述了含有PVP、三缩四乙二醇(GF)、BB、苄醇(BA)或PEG400的约100mg/mL的非水性溶菌酶混悬剂。US2008/0226689A1描述了100mg/mL人类生长激素(hGH)单相、三载体组分(聚合物、表面活性剂和溶剂)非水性粘性制剂。美国专利No.6,730,328描述了用于蛋白质制剂的具有低反应性的非水性、疏水、非极性载体(例如全氟萘烷)。这些制剂具有(例如)有碍加工、制造和注射的高粘度，在制剂中存在多种载体组分，以及与使用未经批准的聚合物相关的潜在法规挑战，因此不是最佳的。
因此，需要开发改善的高浓度非水性制剂。
附图说明
图1：在+40℃下储存1和4周时的抗TNFαmAb混悬剂的稳定性。每个制剂中的抗体浓度指示为重量％(％w/w)。
图2：随着制剂中降粘剂的量的增加，制剂的注射力(N)降低。A.BSA；B.抗TNFαmAb制剂。
图3：随着制剂中A.和B.抗TNFαmAb以及C.BSA浓度的增加，注射力和粘度增加。
图4：抗TNFαmAb制剂的注射力和粘度之间的相关性。A.含20％抗TNFαmAb的制剂；B.研究的所有抗TNFαmAb制剂。
图5：注射力对制剂中的蛋白质浓度和粒度的依赖性。载体：油酸乙酯(EO)/芝麻油(SO)/50/50。
图6：A.增加剪切速率可降低高浓度蛋白质制剂的粘度。A.载体的选择影响粘度对剪切速率的依赖性。B.蛋白质浓度影响粘度对剪切速率的依赖性。抗TNFαmAb EO/SO/50/50制剂。
图7：注射速度对注射力的作用。A.在制剂中以不同浓度的BSA颗粒；B.在EO载体中具有不同大小的BSA颗粒；C.在EO/SO/50/50中以不同浓度的抗TNFαmAb。
图8：通过SE-HPLC在25℃下测量的CNTO148A)喷雾干燥的100mg/mL混悬剂与B)100mg/mL和200mg/mL混悬剂的稳定性。Nt＝不用氧化铝处理的混悬液。Form-1、Form-5和Form-7是表7中的实验SD_1的喷雾干燥制剂。SO/EO＝EO/SO/50/50。
图9：通过SE-HPLC在40℃下测量的CNTO148A)喷雾干燥的100mg/mL混悬剂与B)100mg/mL和200mg/mL混悬剂的稳定性。Nt＝不用氧化铝处理的混悬液。Form-1、Form-5和Form-7是表7中的实验SD_1的喷雾干燥制剂。SO/EO＝EO/SO/50/50。SD＝喷雾干燥的。
图10：表7中的实验SD_1的CNTO148喷雾干燥的Form-1制剂和Form-1 100mg/mL混悬剂的生物活性％。SD＝喷雾干燥的。SO/EO＝EO/SO/50/50。
图11：在25℃下收集的表7中的实验SD_1的CNTO148喷雾干燥的Form-1制剂和Form-1 100mg/mL混悬剂的远UV CD扫描。SD＝喷雾干燥的。SO/EO＝EO/SO/50/50。
图12：A)抗TNFα抗体TVN14(SEQ ID NO：1)、TVN15(SEQ IDNO：2)、TVN148(SEQ ID NO：3)、TVN148B(SEQ ID NO：4)和TVN196(SEQ ID NO：5)的重链可变区序列，以及B)抗TNFα抗体TVN14(SEQ ID NO：6)、TVN15(SEQ ID NO：6)、TVN148(SEQ IDNO：7)、TVN148B(SEQ ID NO：7)和TVN196(SEQ ID NO：7)的轻链可变区序列。
发明内容
本发明的一个实施例是非水性高浓度混悬剂，其包含载体和生物活性分子，所述载体包含疏水剂和降粘剂。
本发明的另一个实施例是非水性高浓度混悬剂，其包含载体和生物活性分子，所述载体包含芝麻油和油酸乙酯。
本发明的另一个实施例是使制剂的注射力降低至约45牛顿(N)或更小的方法，所述制剂含有在包含疏水剂的载体中≥50mg/ml蛋白质，所述方法包括：向包含疏水剂的载体中加入按体积计至少28％的降粘剂；或利用具有介于约2μm-13μm之间的粒度的蛋白质颗粒来制备制剂，其中所述注射力使用配有0.5英寸
Figure BDA00003794187900041
号针头的具有0.25英寸内径的1mL刚性针头护帽玻璃注射器以250mm/min的注射速度测得。
本发明的另一个实施例是制备生物活性分子的非水性高浓度混悬剂的方法，其包括提供生物活性分子；提供疏水剂；提供降粘剂；将疏水剂和降粘剂混合以形成载体；以及将生物活性分子加入到形成的载体中。
具体实施方式
本说明书中所引用的所有出版物(包括但不限于：专利和专利申请)均以引用方式并入本文，如同在本文中完整给出。
应当理解，本文所用的术语只是为了描述具体实施例，并非旨在进行限制。除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语的含义与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同。
虽然与本文所述的那些方法和材料相似或等效的任意方法和材料都可以用于检验本发明的实践中，然而本文中描述示例性材料和方法。在描述和要求保护本发明时，将使用以下术语。
如本文所用，“疏水剂”是指亲水-亲脂平衡(HLB)值为0至13的材料。示例性疏水剂为植物油、具有8至24个碳的脂肪酸、蜡、可生物降解的聚合物和两亲材料。示例性植物油为杏仁油、茴香油、杏仁油、花生油、阿甘油、鳄梨油、琉璃苣油、玉树油、卡诺拉油、藏茴香油、桂皮油、蓖麻油、肉桂油、香茅油、丁香油、椰子油、芫荽油、玉米油、棉籽油、桉树油、月见草油、小茴香油、老鹳草油、葡萄籽油、榛子油、大麻油、霍霍巴油、杜松子油、薰衣草油、柠檬油、澳洲坚果油、肉豆蔻衣油、白千层油、印度楝树油、橙花油、绿花白千层油、肉豆蔻油、橄榄油、橙油、棕榈油、棕榈仁油、松油、罂粟籽油、胡薄荷油、南瓜籽油、油菜籽油、米糠油、蔷薇油、迷迭香油、芸香油、红花油、芝麻油(SO)、留兰香油、大豆油、向日葵油、百里香油、胡桃油或麦芽油。示例性脂肪酸为辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、花生酸、亚油酸、肉豆蔻脑酸、棕榈油酸、十六碳烯酸、油酸、α-亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、芥酸、二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸、二十二碳五烯酸以及具有不同链长的甘油酯(甘油单酯；甘油二酯；甘油三酯)。示例性可生物降解的聚合物为聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚ε-己内酯(PCL)、聚原酸酯、聚羟基丁酸酯(PHB)、聚对二氧杂环己酮、聚酸酐、聚三亚甲基碳酸酯和聚磷腈。示例性两亲材料为聚乙氧基化蓖麻油或其衍生物(统称为“聚乙氧基化蓖麻油”)、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧乙烯硬脂酸酯、聚环氧乙烷(“PEO”)-聚环氧丙烷(“PPO”)-PEO嵌段共聚物、PPO-PEO-PPO嵌段共聚物、PEO-PPO四官能化嵌段共聚物例如(PEO-PPO)2-(PPO-PEO)2或PPO-PEO四官能化嵌段共聚物例如(PPO-PEO)2-(PEO-PPO)2。示例性疏水剂及其特性在表1中示出。粘度在25℃下测得，除非在括号中指出。
如本文所用，术语“粘度”是流体的流动阻力的量度。粘度可以是“运动粘度”或“绝对粘度”。“运动粘度”是在重力的影响下流体的流动阻力量度。当将两种相等体积的流体置于相同的毛细管粘度计中并允许通过重力流动时，粘性流体流经毛细管所需的时间比粘性较小的流体更长。运动粘度的量纲是L2/T，其中L是长度，T是时间。通常，运动粘度以厘沲(cSt)表示。运动粘度的国际单位制(SI)单位是mm2/s，即1cSt。“绝对粘度”有时称为“动态粘度”或“简单粘度”，是运动粘度和流体密度的乘积。绝对粘度以单位厘泊(cP)表示。绝对粘度的SI单位是毫帕-秒(mPa-s)，其中1cP＝1mPa-s。粘度可以使用例如粘度计在给定的剪切速率下测量。粘度也可以通过粘度与注射力的正相关关系评估，如图4中所示。
表1：
Figure BDA00003794187900061
如本文所用，“剪切速率”意指材料变形的速度。对于经典牛顿流体，粘度不依赖于剪切速率。对于非牛顿流体，粘度随着剪切速率的增加而减小或增大，如流体分别为“剪切致稀”或“剪切增稠”流体。
如本文所用，“注射力”意指以250mm/分钟的注射速度推动载体或制剂通过配有0.5英寸
Figure BDA00003794187900062
号针头的内径为0.25英寸的1mL刚性针头护帽玻璃注射器所需的力(单位为牛顿(N))，其中使用Zwick/Roell(2005型)测量仪器(Zwick Roell，Kennesaw，GA)进行测量。示例性注射器是配有0.5英寸
Figure BDA00003794187900063
号针头的BD(Becton，Dickinson and Company，NJ)注射器(BD Hypak SCFTM 1mL刚性针头护帽玻璃预灌封注射器)(产品编号PIR6-001 SCF1MLL 26GA1/2RNSFM27 EB LTP.8268589)。
如本文所用，“可注射性”是指在注射期间非水性高浓度混悬剂通过配有某号针头的注射器的注射性能。可注射性包括诸如注射所需的压力或力量、流动均匀性、吸取质量和无堵塞等因素。本发明制剂的可注射性通过将包含降粘剂的制剂的注射力与相同的但不含降粘剂的制剂相比较而评估。包含降粘剂的制剂的注射力减小反映该制剂的可注射性得到改善。当与相同的但缺乏降粘剂的制剂比较，注射力减小至少10％，例如10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％时，则包含降粘剂的制剂具有改善的可注射性。
如本文所用，“降粘剂”是指当存在于载体或制剂中时，与缺乏降粘剂的载体或制剂的粘度或注射力相比，可降低载体或制剂的粘度或注射力的试剂。本发明低粘度载体或制剂中存在的降粘剂的量可在疏水剂中每体积降粘剂的约0.2％至99.9％的范围内，例如1％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％。在一些情况下，载体可由100％的降粘剂组成。降粘剂可降低载体或制剂的粘度或注射力至少10％，例如10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％。示例性降粘剂为癸二酸二乙酯、二甘醇单乙基醚、乙醇、油酸乙酯(EO)、异丙醇(IPA)、肉豆蔻酸异丙酯、亚油酸、丙酸、柠檬酸三乙酯、丙二醇、乙醇、丙醇、异丙醇、聚乙二醇、聚全氟醚、氟烃(氟烷、甲氧氟烷、安氟醚、异氟烷、七氟烷和地氟烷等)、氟化酮、全氟萘烷、全氟丙烯酸酯、全氟甲基丙烯酸酯、苄醇、月桂醇、全氟萘烷、N-甲基-2-吡咯烷酮、三缩四乙二醇、聚乙二醇(PEG)、烷基酮、柠檬酸低级烷基酯、苯甲酸苄酯、苯甲酸甲酯、苯甲酸乙酯、苯甲酸正丙酯、苯甲酸异丙酯、苯甲酸丁酯、苯甲酸异丁酯、苯甲酸仲丁酯、苯甲酸叔丁酯和苯甲酸异戊酯。示例性降粘剂的特性在表2中示出。
与不含降粘剂的相应载体相比，降粘剂的添加导致降低载体的粘度或注射力时，含降粘剂的载体是“低粘度载体”。包含低粘度载体的制剂是“低粘度制剂”。与用于测定且测量粘度或注射力的方法无关，与不含降粘剂的相同载体或制剂相比，低粘度载体或制剂的粘度或注射力中的减少百分比在给定剪切率时将保持大致相同。
术语“化学稳定性”意指形成可接受百分比的通过化学途径例如氧化、脱酰胺化或水解产生的降解产物。如果在4℃下18个月后形成不超过5％的降解产物，则将制剂视为化学稳定的。
术语“物理稳定性”意指通过生物活性试剂形成可接受百分比的聚集体(如二聚体、三聚体或其他多聚形式的聚集体)。如果在4℃下18个月后形成不超过约5％的聚集体，则将制剂视为物理稳定的。
如本文所用，术语“稳定的制剂”或“稳定的”意指在+4℃下储存18个月后或在同等条件的高温下，例如在+40℃下储存1个月后，制剂中仍保留至少约95％、96％、97％、98％、99％或100％物理稳定的生物活性分子。示例性的稳定制剂为30％抗TNFαmAb EO/SO/50/50制剂，其在+40℃下储存一个月后至少98％的抗体保持单体形式。
表2：
Figure BDA00003794187900081
术语“生物活性分子”包括蛋白质、抗体、肽、核苷酸等等。通过合成制得的、天然衍生的或重组产生的部分也包括在该术语中。生物活性分子可以是生物活性分子的类似物、衍生物、激动剂、拮抗剂或可药用盐。
术语“蛋白质”意指包含至少两个由肽键连接形成多肽的氨基酸残基的分子。少于50个氨基酸的小蛋白质可称作“肽”。蛋白质也可称作“多肽”。
术语“抗体”包括整个抗体及其任何片段。抗体片段构成免疫球蛋白分子的至少一部分，例如来自抗体重链或轻链的互补决定区(CDR)、可变区(V)、恒定区(C)或骨架区(FR)。根据重链恒定区的氨基酸序列，可将免疫球蛋白分为五大类，即IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。IgA和IgG进一步再被分为同种型IgA1、IgA2、IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。任何脊椎动物物种的抗体轻链可以基于其恒定域的氨基酸序列被指定为两种明显不同类型之一，即κ和λ。
抗体可为Fab、F(ab′)、F(ab′)2、scFv、dsFv或双价抗体。抗体可为单克隆抗体(mAb)、嵌合抗体、人源化或人源性抗体、双价抗体、四价抗体或多价抗体。上述抗体片段的结构、制备技术、以及所述抗体及其片段的用途是本领域众所周知的(Ausubel等人编辑，Current Protocols in MolecularBiology，John Wiley&Sons，Inc.，NY 1987-2001；Sambrook等人，Molecular Cloning：A Laboratory Manual，第2版，Cold Spring Harbor，NY，1989；Harlow和Lane，Antibodies，a Laboratory Manual，Cold SpringHarbor，NY，1989；Colligan等人编辑，Current Protocols in Immunology，John Wiley&Sons，Inc.，NY 1994-2001；Colligan等人，Current Protocols inProtein Science，John Wiley&Sons，NY，NY，1997-2001；Kohler等人，Nature 256：495-7，1975；Queen等人，Proc Natl Acad Sci USA，86：10029-33，1989；美国专利No.4,816,567)。
如本文所用的“高浓度”意指制剂中的生物活性分子的最终浓度等于或大于50mg/mL。生物活性分子的浓度可为50至1000mg/mL、50至500mg/mL或50至250mg/mL。
如本文所用的“非水性”意指在生理pH(约7.4)和约25℃下，载体具有小于0.1mg/g的水中低溶解度。
如本文所用的“混悬剂”意指生物活性分子不溶于载体。
如本文所用“粒度”意指制剂中的生物活性分子颗粒的平均直径(D50)，其通过熟知的颗粒粒度测量仪(例如激光衍射粒度分析仪)测定。
本发明描述可用于通过肠胃外途径实现生物活性分子(例如抗体)给药的非水性高浓度低粘度混悬剂。高蛋白质浓度制剂的高粘度特性可能使得难以将所需的剂量从注射器注射到患者体内。本发明的制剂在保持生物活性分子的高浓度的同时具有改善的通过制剂的注射力进行衡量的可注射性，这将提供用于实现合意疗效的所需剂量。本发明的制剂的注射力等于或低于45牛顿(N)，该力是手部健全的大多数医疗保健专业人员和患者在采用手动注射时能够对注射器施加的最大力。可接受的注射力水平取决于具体的药物应用和产品中所用的递送装置。一些装置可能能够产生比其他装置更大的注射力。
除非另外具体指出，否则制剂中的生物活性分子的浓度以重量％(％w/w)示出，而载体中的降粘剂的量以体积％(％v/v)示出。载体组成以降粘剂和疏水剂的体积％之比的形式示出。例如，EO/SO/50/50是指具有按体积计50％油酸乙酯(EO)和50％芝麻油(SO)的载体。
本发明的一个实施例为非水性高浓度混悬剂，包含：
a.载体，其包含疏水剂和降粘剂；和
b.生物活性分子。
可通过将液体形式的疏水剂与降粘剂组合，然后将混合物加热以形成单相材料，从而制备载体。可使用标准方法(诸如差示扫描量热法)来确认载体中所含的组分已组合使得形成了单相材料。示例性的疏水剂和降粘剂在上文有所描述。基于芝麻油的示例性载体在表4中示出。可将芝麻油替换为其他示例性疏水剂，只要降粘剂可与所选的疏水剂可混溶即可。
可使用任何合适的颗粒形成方法来提供包含在本发明的制剂中的颗粒状生物活性分子。示例性的熟知方法包括喷雾干燥法、喷雾-冷冻-干燥法、冻干法、干燥法、制粒法、碾磨法、研磨法、沉淀法、超临界流体技术或均化工艺。可将通过这些方法制备的颗粒置于Waring搅拌器中进一步磨碎，然后使其通过一系列具有确定目尺寸的筛网。所得的生物活性分子颗粒的大小可为(例如)0.2至250μm、0.2至100μm、0.2至50μm、0.2至20μm或2至13μm。可将粒度表达为制剂中的生物活性分子颗粒的平均直径(D50)，其通过使用熟知的颗粒粒度测量仪(例如，激光衍射粒度分析仪(Malvem Mastersizer 2000，Malvem))测定，或表达为颗粒未能通过的筛孔的直径。
生物活性分子可以纯形式提供，或可以与不干扰生物活性分子的疗效的赋形剂进行配制。例如，可能期望使用赋形剂来减缓非水性制剂中生物活性分子的聚集和氧化、增强生物活性分子从非水性载体向使用环境的转移，或改善生物活性分子成为颗粒的可成形性。此类赋形剂为(例如)碳水化合物、非离子表面活性剂、缓冲液、盐、抗氧化剂和/或氨基酸、防腐剂等等。
生物活性分子可与(例如)作为赋形剂的碳水化合物、非离子表面活性剂和缓冲液进行配制。示例性碳水化合物为蔗糖、海藻糖、甘露糖醇、右旋糖酐和山梨糖醇。示例性的非离子表面活性剂为聚山梨醇酯20(PS-20)、聚山梨醇酯80(PS-80)、Triton X-100、Brij-35、Brij-30和PluronicF127。可将生物活性分子配制在具有所需pH的缓冲液中然后再形成蛋白质颗粒，目的是防止在配制和储存过程中发生生物活性分子的氧化、脱酰胺化、水解、变性或聚集，并维持生物活性分子的生物活性。示例性缓冲液为乙酸盐、柠檬酸盐、甲酸盐、组氨酸、琥珀酸盐、磷酸盐、碳酸盐、苹果酸盐、HEPPSO、HEPES、硼酸盐、甘氨酸、天冬氨酸、脯氨酸和Tris缓冲液。
制剂中的另外赋形剂可包括氨基酸。示例性氨基酸为组氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、甘氨酸、精氨酸、赖氨酸、L-亮氨酸、三亮氨酸、丙氨酸、谷氨酸、L-苏氨酸和2-苯丙氨酸。
另外的赋形剂可包括盐。示例性盐为氯化钠、氯化钙和氯化镁。
另外的赋形剂可包括聚合物。示例性聚合物为聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、右旋糖酐和聚乙二醇。
制剂中的赋形剂量可基于赋形剂的活性和所需制剂特征以实验方法确定，所述所需制剂特征例如在喷雾干燥过程中的稳定性、最低限度氧化和颗粒形成。
可将生物活性分子和赋形剂溶解为溶液，对此溶液进行(例如)冻干、喷雾干燥或喷雾冷冻干燥以产生生物活性分子的颗粒。
示例性生物活性分子是抗体或其抗体片段。示例性抗体是抗肿瘤坏死因子α(TNFα)抗体，例如图12中所示的TNV14、TNV15、TNV148、TNV148B和TNV196，其包含SEQ ID NO：1(TNV14)、2(TNV15)、3(TNV148)、4(TNV148B)和5(TNV196)中所示的重链可变区序列，以及SEQ ID NO：6(TNV14和TNV15)和7(TNV148、TNV148B和TNV196)中所示的轻链可变区序列。TNV148B也称为CNTO148。另一示例性抗TNFα抗体是在美国专利6,258,652中所述的
Figure BDA00003794187900111
品牌的抗人TNFα抗体(阿达木单抗)；CAS登记号331731-18-1)。抗TNFα抗体可变区可联接到任何恒定区，例如分别的IgG1和κ型恒定区。示例性IgG1恒定区显示于SEQ ID NO：8中，并且示例性κ恒定区显示于SEQ ID NO：9中。
生物活性分子例如抗肿瘤坏死因子α(TNFα)抗体的示例性制剂可包括下述赋形剂中的一种或多种：以约0-3、0.5-3、1-3或1-2之间的碳水化合物：蛋白质比的碳水化合物；以约0-2或0.3-1.8之间的氨基酸：蛋白质比的氨基酸；以其中碳水化合物和氨基酸与蛋白质的合并重量比是约0-3、0.5-3、1-3或1-2的比的氨基酸；约0-40mM、5-40mM、5-20mM或5-10mM组氨酸缓冲液；约0-20mM、5-20mM或5-10mM柠檬酸盐缓冲液；其中赋形剂：蛋白质比指示为w/w比，并且为约0-0.1％(％w/v)、0.01-0.1％(％w/v)或0.01-0.05％PS-80(％w/v)。pH可调整为约5.5。示例性抗TNFα抗体制剂是含有下述的CNTO148喷雾干燥制剂：32.5mg/mlCNTO148、10mM组氨酸、55mg/ml蔗糖、10mg/ml异亮氨酸、0.01％PS-80，pH5.5；32.5mg/ml CNTO148、10mM组氨酸、65mg/ml蔗糖、0.01％PS-80，pH5.5；32.5mg/ml CNTO148、5mM组氨酸/5mM柠檬酸盐、65mg/ml蔗糖、0.01％PS-80，pH5.5；32.5mg/ml CNTO148、10mM组氨酸、5mg/ml蔗糖、22.5mg/mL甘露糖醇、0.01％PS-80，pH5.5；或32.5mg/ml CNTO148、10mM组氨酸、55mg/ml海藻糖、10mg/ml异亮氨酸、0.01％PS-80，pH5.5；或65mg/ml CNTO148、10mM组氨酸、55mg/ml蔗糖、0.01％PS-80，pH5.5。PS-80浓度在本申请自始至终指示为％w/v。喷雾干燥技术是本领域技术人员已知的。示例性技术在下文实例2中描述。
要形成生物活性分子的混悬剂，通过搅拌将具有或不具有赋形剂的固态(例如粉末、结晶、或无定形状态)生物活性分子的干燥颗粒物质分散在载体中。制剂中包含的颗粒状生物活性分子的量可以根椐例如生物活性分子的效价和给药途径而变化。例如，生物活性分子可以占制剂的约0.1％至70％(％w/w)之间，同时载体占制剂的约30％和99.9％(％w/w)之间。生物活性分子可以按约50mg/mL至1000mg/mL、50mg/mL至500mg/mL、或50mg/mL至250mg/mL的浓度存在于载体的混悬液中。示例性制剂由以下组分组成：40％(％w/w)抗TNFαmAb颗粒，其通过喷雾干燥65mg/mL抗TNFαmAb、55mg/mL蔗糖、10mM L-组氨酸、0.01％PS-80的pH值为5.5的溶液制成，以及60％(％w/w)具有芝麻油和油酸乙酯(体积比50∶50)的载体。由于生物活性分子以如此高的浓度存在，因此非水性混悬剂可用于递送具有低效价的生物活性分子。由于生物活性分子保持为其固体形式，因此预期可具有较长的架藏稳定性。
尽管实例中所示的实施例包含CNTO148制剂，但其他抗体和其他抗TNFα抗体也可代替CNTO148用于开发与例示的CNTO148制剂具有相似特征的制剂，例如具有高稳定性和良好可注射性、保留与水性制剂相似的生物活性的非水性高浓度低粘度混悬剂。
可使用熟知的流变学仪器(如流变仪)测量本发明的载体和制剂的粘度。可使用AR2000流变仪(TA Instruments)，并计算测得的剪切速率之间的平均粘度，或作为限定的剪切速率(例如250s-1)的函数，测量载体或制剂的粘度，该粘度为剪切速率的函数，在25℃下介于例如200-500s-1之间。还可通过测量与粘度正相关(图4)的注射力，评估本发明的载体和制剂的粘度。可通过如下方法测量注射力，例如将制得的制剂装载到1mL刚性针头护帽玻璃注射器(内径为0.25英寸，配有0.5英寸
Figure BDA00003794187900131
号针头)内，并将注射速度设定在例如250mm/分钟，并使用Zwick/Roell(2005型)测试仪器(Zwick Roell，Kennesaw，GA)记录活塞行进力。示例性注射器是配有0.5英寸
Figure BDA00003794187900132
号针头的BD(Becton，Dickinson and Company，NJ)注射器(BD Hypak SCFTM 1mL刚性针头护帽玻璃预灌封注射器)(产品编号PIR6-001 SCF1MLL 26GA1/2RNSFM27 EB LTP.8268589)。测量粘度或注射力的降低百分比(％)，以评估降粘剂对本发明制剂的粘度和可注射性的影响。例如，与不含降粘剂的制剂相比，本发明的非水性高浓度蛋白质制剂的粘度可降低81％或注射力可降低76％。
本发明的非水性高浓度混悬剂的粘度可进一步降低，因此制剂的可注射性通过更改剪切速率而得到改善。通过分析粘度对剪切速率的依赖性，可分析本发明的制剂的牛顿或非牛顿特性。制剂的非牛顿特性可取决于制剂中的蛋白质浓度和降粘剂的量。增加本发明制剂中的蛋白质浓度可将制剂特性转变为非牛顿剪切致稀，因此在制造过程中增加剪切速率可降低粘度并改善这些制剂的加工。增加制剂中的降粘剂含量可以将制剂特性转变为牛顿型，在这种情况下，剪切速率的调节对粘度几乎没有或没有影响。本发明的制剂的制备包括评估剪切速率对粘度的影响，以及将剪切速率调节至例如介于10-10001/s或50-5001/s之间，以获得具有适当粘度值的制剂。
本发明的生物活性分子的制剂相对于含水制剂显示出改善的稳定性，并且在+40℃下储存一个月后至少95％的生物活性分子保留稳定形态。可使用熟知的方法测量制剂的稳定性。例如，可通过以下方法测量蛋白质聚集的量：视觉观察浊度、测量具体波长下的吸光度、尺寸排阻色谱法(其中与天然活性状态的蛋白质相比，蛋白质聚集体将在不同馏分中洗脱)、HPLC或其他色谱法。可使用其他测量构象变化的方法，包括使用差示扫描量热法(DSC)(例如以测定变性温度)或使用圆二向色性法(CD)(其测量蛋白质的摩尔椭圆率)。
本发明的另一个实施例是非水性高浓度混悬剂，其包含载体和生物活性分子，所述载体包含芝麻油和油酸乙酯。
本发明的另一个实施例是使制剂的注射力降低至约45牛顿(N)或更小的方法，所述制剂含有在包含疏水剂的载体中≥50mg/ml蛋白质，所述方法包括：向包含疏水剂的载体中加入按体积计至少28％的降粘剂；或利用具有介于约2μm-13μm之间的粒度的蛋白质颗粒来制备制剂，其中所述注射力使用配有0.5英寸号针头的具有0.25英寸内径的1mL刚性针头护帽玻璃注射器以250mm/min的注射速度测得。
为了将本发明的非水性高浓度混悬剂的注射力维持在45牛顿(N)或以下，可改变若干参数。这些参数为例如蛋白质浓度、粒度和制剂中的降粘剂的量，以及用于具有指定针头号数的选定注射器的注射速度。注射力为45N或以下的制剂中的降粘剂的量可以为(例如)介于0.2％-99.9％之间，蛋白质的量可以为介于1-40％(％w/w)之间，粒度可以为约2μm-13μm。含有疏水剂、降粘剂和生物活性分子且具有低于45N的注射力的示例性非水性制剂是这样的制剂，其具有至少20％(％w/w)蛋白质浓度，伴随约2μm-13μm的粒度，和在载体中的至少28％EO；在EO/SO/28/72、EO/SO/50/50或100％EO中的20％(％w/w)2μm BSA颗粒；在EO/SO/50/50、EO/SO/73/30、EO/SO/85/15或100％EO中的20％(％w/w)抗TNFαmAb混悬液；在EO/SO/50/50中的30％和40％(％w/w)抗TNFαmAb混悬液；在EO/SO/50/50中的40％13μm BSA颗粒混悬液；在100％EO中的50％(％w/w)2μm BSA颗粒混悬液，具有50mm/分钟的注射速度；和50％(％w/w)13μm BSA颗粒混悬液，具有在50-250mm/分钟之间的注射速度。
本发明的另一个实施例是制备生物活性分子的非水性高浓度混悬剂的方法，其包括提供生物活性分子；提供疏水剂；提供降粘剂；将疏水剂和降粘剂混合以形成载体；以及将生物活性分子以等于或大于50mg/mL的浓度加入到步骤d.中形成的载体中。
可以使用熟知的方法将本发明的制剂预装入注射器或任何合适的小体积容器中，因此，注射已就绪，无需混合、再调制或任何额外制备。预装注射器中的本发明制剂可以手动注射或作为另外一种选择使用自动注射器(如自动注射笔、自动进样器)、多种自动注射泵(包括贴片式泵)以及无针注射装置注射。可以通过肠胃外给药途径，如通过皮下注射(SC)或肌内注射(IM)将本发明的制剂引入宿主。可通过内径在133至604微米范围内的约1/2至2英寸长、介于20-31号之间的针头施用制剂。准备注射的本发明的非水性高浓度混悬剂可具有有利的局部耐受性(或生物相容性)、低注射力和制剂灵活性。可在准备注射的非水性混悬剂中实现生物活性分子的高浓度，这不受生物活性分子的分子结构和分子量的支配。
本发明现结合以下具体的、非限制性实例进行描述。
实例1
非水性载体的降粘剂筛选
以按体积计0.2％-50％的浓度将降粘剂加入芝麻油。所有降粘剂均为GRAS(公认安全)材料。将混合物置于密闭的20mL闪烁瓶中并涡旋30秒，然后目测检查任何不混溶性。发现一些降粘剂不可与芝麻油混溶，不对其进行进一步筛选。表3示出了示例性降粘剂与芝麻油的可混溶性。Y和N代表在被测浓度下，被测降粘剂相应地可与芝麻油混溶或不可与芝麻油混溶。
表3：
Figure BDA00003794187900161
一些降粘剂，如油酸乙酯、异丙醇、亚油酸和丙酸在被测浓度范围内可与芝麻油混溶，而丙二醇完全不可混溶。一些试剂仅在某些降粘剂与芝麻油的比率下可与芝麻油混溶。
对于载体粘度的测量，一旦形成均匀溶液，就用移液器将290μL的每种待测载体吸取到AR2000流变仪(TA Instruments)上
表4：
Figure BDA00003794187900162
Figure BDA00003794187900171
*标准差
**与SO载体相比
配有40mm、1°丙烯酸树脂锥体几何形状。剪切应力记录为在25℃下高达500s-1的剪切速率的函数。粘度由软件自动计算，并且报道在200-500s-1之间的平均粘度。
对每个样品进行三次平行分析。使用不含降粘剂的芝麻油作为对照物。表4示出了生成的示例性载体的平均粘度值。
所得载体的粘度下降与加入的降粘剂的体积分数或重量分数成比例。由于芝麻油(SO)、油酸乙酯(EO)、乙醇(EtOH)和异丙醇(IPA)已用于市售肠胃外给药产品，因此选择它们进行进一步测试。
实例2
非水性高浓度低粘度制剂的制备
生物活性分子颗粒的制备
冻干：
将牛血清白蛋白(BSA)(Sigma-Aldrich，St.Louis，MO，USA)和人抗TNFα单克隆抗体(mAb)溶于pH值为6.0的6.5mM磷酸钠缓冲液中，蛋白质浓度为65mg/mL。任选地将药学上可接受的赋形剂如蔗糖和Tween 80(或聚山梨酸酯80，PS-80)加入蛋白质溶液，使最终溶液中蔗糖和Tween 80的浓度分别为0-9.0％和0-0.01％(％w/v)。使用标准方案冻干蛋白质溶液。
在Waring搅拌器中进一步研磨冻干的蛋白质或mAb粉末，并使其通过一系列具有确定目尺寸的筛。研磨/筛选工艺得到粒度为0.2-250μm的蛋白质或mAb颗粒。
喷雾干燥：
使用喷雾干燥方法制备牛血清白蛋白(BSA)(Sigma-Aldrich，St.Louis，MO，USA)和人抗TNFα单克隆抗体的颗粒。制剂(表5)使用Yamato Mini Spray dryer以下述工艺参数进行喷雾干燥：雾化空气：2磅/平方英尺，入口温度：120℃，抽吸器刻度盘：7.5，溶液泵：2-4，主气阀：40-45磅/平方英尺。通过激光衍射粒度分析仪(Malvem Mastersizer 2000，Malvem)测量喷雾干燥的生物活性分子微粒的平均直径(D50)，并且获得具有1～20μm大小范围的颗粒。示例性制剂示于表5中。
表5：
Figure BDA00003794187900181
非水性载体的制备
用氧化铝粉末清洗芝麻油以降低过氧化物含量，然后通过无菌的0.2μmPTFE过滤器过滤。将降粘剂以0.2-85体积％(％v/v)的浓度加入芝麻油，或者在某些情况下使用不含芝麻油的降粘剂。对于一些制剂，向载体中加入约0.2-10体积％的乙醇。将混合物置于密闭容器中并在室温下混合1小时，以形成均匀溶液。表4示出了制备的非水性载体。
制剂的制备
将制得的非水性载体与通过冻干或喷雾干燥制得的生物活性分子的颗粒混合。在室温下，使用具有不锈钢刮刀片的搅拌器以50-1000rpm将颗粒共混到载体中持续5至30分钟。颗粒载荷为约1-50重量％，导致最终制剂中的蛋白质浓度为约10-500mg/mL。形成均匀混悬液后，将制剂填充到玻璃注射器中。注射前将制剂储存在冷藏温度(4℃)下。表6示出了制得的制剂。
实例3
非水性载体中的冻干生物活性分子的稳定性
将油酸乙酯(EO)或中链甘油三酯(MCT；LABRAFACTM LipophileWL 1349，Gattefossé，France)以按体积计2-50％的浓度加入芝麻油(SO)中。将混合物置于密闭的20mL闪烁管中并涡旋30分钟。混合完成后，将抗TNFα抗体冻干粉末称取到3mL vacutainer管中，并向管中加入足量的载体，使最终蛋白质含量为10或20％(％w/w)，这分别对应于53.6或107.2mg/mL抗TNFα抗体浓度。
通过短暂涡旋使得混悬液均化；随后将管密封。将混悬液储存于37℃下。在储存一和四周后，提取样品。
表6：
Figure BDA00003794187900201
*混悬剂中的最终浓度
简言之，将1mL在-20℃下预冷过的丙酮/二氯甲烷的1∶1混合物加入管中，并在4℃下在振荡器上将内容物混合20分钟。将2900g的管旋转4分钟，然后移除上清液。重复提取工艺两次，然后使用SpeedVac将蛋白质沉淀干燥2小时。将沉淀溶于流动相(0.2M磷酸盐缓冲液，pH 6.8)，达到10mg/mL的使用浓度。以1mL/分钟的流速将20μL溶液注入Agilent SEC-HPLC系统中。通过BioSil SEC250色谱柱(BioRad，Hercules，CA)分离天然的、聚集的和分段形式的抗TNFα抗体，并在214和280nm波长下在尺寸排阻色谱(SEC)上进行监测。
包含抗TNFα抗体颗粒的被测混悬剂的储存稳定性示于图1中，将其测量为样品中保留的单体内容物(如天然mAb)的百分比。作为对照，制备并分析pH值为7.4的在PBS中包含抗TNFαmAb的含水制剂。与含水制剂相比，每种非水性混悬剂显示出较高的稳定性，并且它们在相同应力条件下具有与蛋白质冻干粉末相当的蛋白质单体含量。在4周的储存时间内，向芝麻油中加入降粘剂油酸乙酯(EO)或将芝麻油替换为中链甘油三酯(MCT)(例如LabrafacTM Lipophile WL 1349(Gattefossé))，对蛋白质稳定性没有影响。
实例4
高浓度制剂的可注射性受到载体组成、蛋白质浓度和粒度的影响。
将活塞行进力(如注射力)的测量结果作为评估，以测量不同参数对本发明的非水性高浓度混悬剂的可注射性的影响。
载体组成的影响
通过使用Zwick/Roell(2005型)测试仪器测量推动混悬液通过某号针头所需的力，来评估20％(％w/w)BSA和20％(％w/w)抗TNFα抗体制剂的可注射性。通过喷雾干燥100mg/mL BSA的水溶液制得BSA颗粒，并通过喷雾干燥65mg/mL蛋白质、55mg/mL蔗糖、10mM L-组氨酸、0.01％PS-80(pH为5.5)制得抗TNFαmAb颗粒。通过将上述蛋白质颗粒与包含更大体积量的降粘剂油酸乙酯(0％、3％、9.5％、17％、20％、25％、28％、30％、40％、50％、75％、85％、或100％(％v/v))的芝麻油混合，制得蛋白质制剂。然后将制得的制剂装入BD(Becton，Dickinson andCompany，NJ)注射器(BD Hypak SCFTM 1mL刚性针头护帽玻璃预灌封注射器，配有0.5英寸
Figure BDA00003794187900211
号针头)(产品代码PIR6-001 SCF1MLL 26GA1/2RNSFM27 EB LTP.8268589)。除非另外具体指明，否则用大约0.5cc的制剂填充注射器，将注射速率设定在大约250mm/分钟，并记录活塞行进力。在室温下进行注射测试。
芝麻油(SO)中更大量的油酸乙酯(EO)显著降低了注射力，因此改善了2μm和13μm尺寸蛋白质颗粒的混悬剂的可注射性。2μm BSA颗粒在EO/SO/28/72中的20％(w/w)(200mg/mL)混悬液的注射力为35.3N，在EO/SO/50/50中的20％(w/w)(200mg/mL)混悬液的注射力为21.5N，后者与不含降粘剂的芝麻油对照物相比(64.65N)下降67％(图2A)。使用100％EO载体将注射力进一步降低到12.1N。在芝麻油中具有更大量的油酸乙酯的抗TNFαmAb制剂表现出类似的注射力下降。例如，3.1μm抗TNFαmAb颗粒在EO/SO/50/50中的20％(％w/w)(108.6mg/mL)混悬液的注射力，从抗TNFαmAb在SO中20％(％w/w)混悬液的注射力71.3N下降到29.5N，并且在EO/SO/70/30中的混悬液的注射力下降到21.1N(图2B)。结果表明，在载体中加入降粘剂通过降低注射力显著改善了非水性高浓度混悬剂的可注射性。因此，可通过如下方法制备注射力等于或小于约45N的非水性高浓度混悬剂：将制剂中包含的芝麻油载体中的油酸乙酯的量增加至等于或大于28体积％。
蛋白质浓度的影响
注射力受到非水性混悬剂中的蛋白质浓度的影响。图3A显示了增加的8.2μm抗TNFα颗粒抗体浓度(20-40％(％w/w)，108.3-216.7mg/mL)和增加的降粘剂的量在制剂的注射力中的组合效应。X轴表示每个实验中所用的抗TNFα抗体的浓度。在EO/SO/50/50中使用至多30％的mAb浓度获得42.8N的注射力。该抗体浓度下的注射力可通过使用100％EO作为载体而降低至20.5N。图3B显示了在EO/SO/50/50制剂中增加浓度的抗TNFαmAb(0-40％(％w/w；0216.7mg/mL)在注射力和粘度中的效应。图3C显示了在100％SO、EO/SO/50/50和100％EO载体中增加浓度的BSA(粒度2μm，0-40％(％w/w)；0-400mg/mL)的效应。为了将注射力降低至等于或小于约45N，制剂可以包含约20％(％w/w)或更少的蛋白质并且载体中包含至少28％的EO，30％或更少的蛋白质并且载体中包含至少50％的EO，或者100％EO中蛋白质的蛋白质浓度为约40％或更小。所进行的实验还表明了，非水性高浓度混悬剂的注射力和粘度是相关的。图4a显示了20％(％w/w)抗TNFαmAb混悬剂的相关性。图4b显示了所有被测抗TNFαmAb混悬剂的相关性。因此，可使用注射力作为粘度以及可注射性的量度。适当更改非水性高浓度混悬剂中的蛋白质浓度和降粘剂的量对制剂的可注射性有积极影响。
粒度的影响
通过测量不同粒度对被测制剂的注射力的影响，评估粒度对可注射性的影响。在EO/SO/50/50载体中制备包含浓度范围为1-50％(％w/w)(10-500mg/mL)的2μm和13μm BSA颗粒的制剂。在这些制剂中，注射力随蛋白质浓度增大而增大，并随粒度增大而减小(图5)。例如，要达到等于或小于45N的注射力，可使用具有13μm粒度的蛋白质在EO/SO/50/50中的40％(％w/w)制剂。维持混悬液中的颗粒恒量的同时增大固相的粒度，导致体系中的颗粒数减小。因此，粒度增大的混悬液具有更小的颗粒间相互作用和减小的流动阻力，从而导致注射力减小。结果表明，在较高的蛋白质浓度下，如在40％(％w/w)下，非水性混悬剂中的粒度选择对制剂的注射力具有显著影响，并因此对制剂的可注射性具有显著影响。例如，具有40％(5w/w)13μm蛋白质颗粒的制剂的注射力为40.5N，然而具有2μm蛋白质颗粒的相同制剂的注射力为57N。因此，通过优化制剂中的蛋白质浓度和粒度以及降粘剂的量，可改善本发明的混悬剂的可注射性。
实例5
非水性高浓度混悬剂的粘度可通过增大剪切速率而降低
研究载体选择和蛋白质浓度对不同剪切速率下的粘度的影响。将290μL在EO/SO/50/50或在SO中包含1-40％(％w/w)抗TNFα抗体的制剂用移液管吸取到配有40mm、1°丙烯酸树脂锥体几何形状的AR2000流变仪(TA仪器公司)上。当剪切速率从～8s-1增大到5000s-1时，在25℃下测量每个制剂的粘度扫描。
根据所用载体，20％(％w/w)抗TNFαmAb制剂表现出牛顿剪切致稀(EO/SO/50/50中的抗TNFα)或非牛顿剪切致稀(SO中的抗TNFαmAb)行为(图6a)。在30％(％w/w)或更高的蛋白质浓度下，抗TNFαmAbEO/SO50/50制剂从牛顿剪切致稀行为变为非牛顿剪切致稀行为(图6b)。
评估本发明制剂的剪切致稀行为对其下游加工和制造至关重要。高度浓缩的蛋白质制剂通常导致粘度增大，从而在加工、制造和储存过程中造成重大挑战。如图6a和6b所示，评估剪切速率对粘度的影响，在本发明制剂的加工和制造过程中适当地增大剪切速率可显著降低粘度，并因此改善制剂的可加工性。
实例6
调节注射速度以更改注射力
使用不同注射速度，评估EO中的40-50％(％w/w)(400-500mg/mL)2μm和13μm BSA颗粒(图7A、7B)以及EO/SO/50/50中的20-40％(％w/w)(108.33-216.67mg/mL)抗TNFα抗体的注射力(图7C)。在蛋白质浓度依赖型方式中，注射速度影响注射力。在40％(％w/w)BSA中，注射力对注射速度的依赖性更小。然而，在50％(％w/w)BSA浓度下，将注射速度从250mm/min降低至50mm/min将注射力从111.4N显著减小到32.4N(图7A)。注射速度对注射力的影响还受到粒度的影响。具有较大粒度的制剂的注射力受到注射速度的影响较小，而具有较小粒度的制剂的注射力受到注射速度的显著影响(图7B)。使用注射速度介于50-250mm/min之间的13μm BSA颗粒导致注射速度等于或小于45N。注射速度还影响抗TNFα抗体制剂的注射力，降低注射速度，从而减小注射力(图7C)。
实例7
干颗粒制剂的最佳化
通过如实例2中所述的喷雾干燥法或冻干法制备抗TNFα抗体CNTO148的制剂，例如表7中所示的那些。CNTO148的喷雾干燥或冻干制剂可包括下述赋形剂中的一种或多种：以约0-3之间的蔗糖∶蛋白质比的蔗糖，以0-3之间的(蔗糖+氨基酸)∶蛋白质比的蔗糖+氨基酸，约0-40mM组氨酸缓冲液，约0-10mM柠檬酸盐缓冲液，以约0-1.8之间的海藻糖∶蛋白质比的海藻糖，以约0-1.8之间的甘露糖醇∶蛋白质比的甘露糖醇，以约0-1.8之间的山梨糖醇∶蛋白质比的山梨糖醇，以约0-1.8之间的(氨基酸)∶蛋白质比的氨基酸；上文的比指示为w/w比和约0.01-0.1％PS-80(％w/v)。pH可调整为约5.5。
表7：
Figure BDA00003794187900251
Figure BDA00003794187900261
表7中所示的某些制剂在5℃、25℃或40℃下测试稳定性0-6个月。将所选制剂悬浮于非水性载体中用于实例8中的更多研究。
实例8
CNTO148混悬剂
来自实例7的所选制剂以100mg/mL或200mg/mL悬浮于非水性载体SO、EO或EO/SO/50/50中(表8)。在5℃、25℃或40℃下储存0、1、2、3、4、5和6个月后，使用尺寸排阻HPLC(SE-HPLC)、毛细管SDS-PAGE、毛细管等电聚焦(cIEF)、圆二向色性(CD)、或经由质谱法的肽作图，测试喷雾干燥制剂和混悬剂的稳定性。使用标准方法用氧化铝处理所选制剂，以去除过氧化物。在SE-HPLC中，随着时间过去的主要HPLC峰的保留％作为制剂中的CNTO148稳定性的指示物进行评估。
表8：
Figure BDA00003794187900271
*(无过氧化物去除处理)
图8A和8B以及图9A和9B显示了根据SE-HPLC主峰稳定性的测量，在25℃(图8A和8B)和40℃下(图9A和9B)储存高达6个月后，在SO、EO和SO/EO/50/50中的所选喷雾干燥制剂及其混悬液的稳定性。制剂看起来基于喷雾干燥(SD)制剂类型(表7中的实验SD_1的Form-1相对于Form-5相对于Form-7)集合，暗示如使用SE-HPLC评估的，装载％和载体组成可对稳定性具有较小作用。与对照水性制剂(101mg/mL蛋白质、10mM组氨酸、4.5mg/mL蔗糖、0.015％PS-80，pH 5.6)相比，喷雾干燥(SD)制剂和混悬剂是更稳定的。
最初以及在25℃下储存高达6个月和在40°下C储存高达4.5个月后，测量来自喷雾干燥制剂和100mg/mL SO/EO/50/50混悬剂的CNTO148生物活性(使用常规方法对细胞的TNFα活性的抑制)。CNTO148生物活性在喷雾干燥后，以及在25℃下储存6个月后的喷雾干燥制剂和混悬剂中得到保留(图10)。
使用远UV CD扫描估计在喷雾干燥制剂和混悬剂中的二级结构中的可能变化(图11)。在喷雾干燥后或在喷雾干燥制剂和混悬剂的储存后，未鉴定到变化。
实例9
CNTO148制剂
CNTO148用作实例1-7中的抗TNFα抗体。使用实例7中所述的喷雾干燥的CNTO148颗粒制剂，制备如表9中所示的另外的CNTO148混悬剂。使用本文描述的方法估计所得的混悬剂的稳定性和可注射性。
表9：
Figure BDA00003794187900281
Figure IDA00003794188300011
Figure IDA00003794188300021
Figure IDA00003794188300031
Figure IDA00003794188300051
Figure IDA00003794188300061
Figure IDA00003794188300071
Figure IDA00003794188300081
Figure IDA00003794188300091
Figure IDA00003794188300101

Claims (24)

1. 一种非水性高浓度混悬剂，包含：
a. 载体，其包含疏水剂和降粘剂；和
b. 用赋形剂配制的抗体。
2. 根据权利要求1所述的制剂，其中所述抗体为抗TNFα抗体。
3. 根据权利要求1所述的制剂，其中所述疏水剂为芝麻油。
4. 根据权利要求1所述的制剂，其中所述降粘剂为油酸乙酯。
5. 根据权利要求1所述的制剂，其中所述载体中降粘剂的量介于按所述载体体积计（%v/v）0.2%-95%之间。
6. 根据权利要求2所述的制剂，其中所述抗TNFα抗体以按所述制剂重量计（%w/w）约0.5%、1%、5%、10%、20%、30%、40%、50%或60%存在。
7. 根据权利要求2所述的制剂，其中所述抗TNFα抗体是喷雾干燥的或冻干的。
8. 根据权利要求2所述的制剂，其中所述抗TNFα抗体包含SEQ ID NO: 6的轻链可变区（VL）和SEQ ID NO: 1或2的重链可变区（VH），或者SEQ ID NO: 7的VL和SEQ ID NO: 3、4或5的VH。
9. 根据权利要求8所述的制剂，其中所述抗TNFα抗体为IgG1/κ型。
10. 根据权利要求1所述的制剂，其中所述制剂的注射力等于或小于45牛顿（N），其中所述注射力使用配有0.5英寸26 ?号针头的具有0.25英寸内径的1mL刚性针头护帽玻璃注射器以250mm/min的注射速度测得。
11. 根据权利要求2所述的制剂，其在40℃下至少一个月是稳定的。
12. 根据权利要求2所述的制剂，其中所述赋形剂为碳水化合物、氨基酸、缓冲液或非离子表面活性剂。
13. 根据权利要求12所述的制剂，其中所述碳水化合物为蔗糖、海藻糖、甘露糖醇或山梨糖醇，所述氨基酸为组氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、甘氨酸、精氨酸或赖氨酸，所述缓冲液为组氨酸缓冲液或柠檬酸盐缓冲液，并且所述非离子表面活性剂为PS-80。
14. 根据权利要求12所述的制剂，其中所述碳水化合物与所述抗TNFα抗体的重量比（w/w）介于约0-3或约1-2之间，所述氨基酸与所述抗TNFα抗体的重量比介于约0-2或约0.3-1.8之间，所述组氨酸缓冲液浓度为约0-40mM或约5-10mM，所述柠檬酸盐缓冲液浓度为约0-10mM或约5-10mM，并且所述非离子去污剂以约0%-0.5%（%w/v）或约0.01-0.1%（%w/v）存在。
15. 一种包含抗TNFα抗体的颗粒制剂的混悬剂，所述抗TNFα抗体具有SEQ ID NO: 6的轻链可变区（VL）和SEQ ID NO: 1或2的重链可变区（VH），或者SEQ ID NO: 7的VL和SEQ ID NO: 3、4或5的VH，所述混悬剂包含：
a. 32.5mg/mL抗TNFα抗体、10mM组氨酸、27.5mg/mL蔗糖、0.01%（%w/v）PS-80；
b. 16.25mg/mL抗TNFα抗体、10mM组氨酸、27.5mg/mL蔗糖、0.01%（%w/v）PS-80；
c. 32.5mg/mL抗TNFα抗体、10mM柠檬酸盐、27.5mg/mL蔗糖、0.01%（%w/v）PS-80；
d. 32.5mg/ml抗TNFα抗体、10mM组氨酸、55mg/ml蔗糖、10mg/ml异亮氨酸、0.01%（%w/v）PS-80；
e. 32.5mg/ml抗TNFα抗体、10mM组氨酸、65mg/ml蔗糖、0.01%（%w/v）PS-80；
f. 32.5mg/ml抗TNFα抗体、5mM组氨酸、5mM柠檬酸盐、65mg/ml蔗糖、0.01%（%w/v）PS-80；
g. 32.5mg/ml抗TNFα抗体、10mM组氨酸、5mg/ml蔗糖、22.5mg/mL甘露糖醇、0.01%（%w/v）PS-80；
h. 32.5mg/ml抗TNFα抗体、10mM组氨酸、55mg/ml海藻糖、10mg/ml异亮氨酸、0.01%（%w/v）PS-80；或
i. 65mg/ml抗TNFα抗体、10mM组氨酸、55mg/ml蔗糖、0.01% PS-80，
其中在a-i中所示的制剂分散在包含芝麻油和油酸乙酯的非水性载体中，其中所述载体中油酸乙酯的量介于按所述非水性载体体积计（%v/v）0.2%-95%之间。
16. 根据权利要求15所述的混悬剂，其中所述载体中油酸乙酯的量为所述非水性载体的5%、10%、15%、30%或50%（%v/v）。
17. 根据权利要求15所述的混悬剂，其中所述抗TNFα抗体为IgG1/k型。
18. 一种包含抗TNFα抗体的颗粒制剂的混悬剂，所述抗TNFα抗体具有SEQ ID NO: 6的轻链可变区（VL）和SEQ ID NO: 1或2的重链可变区（VH），或者SEQ ID NO: 7的VL和SEQ ID NO: 3、4或5的VH，所述混悬剂包含：
a. 32.5mg/mL抗TNFα抗体、10mM组氨酸、27.5mg/mL蔗糖、0.01%（%w/v）PS-80；
b. 16.25mg/mL抗TNFα抗体、10mM组氨酸、27.5mg/mL蔗糖、0.01%（%w/v）PS-80；
c. 32.5mg/mL抗TNFα抗体、10mM柠檬酸盐、27.5mg/mL蔗糖、0.01%（%w/v）PS-80；
d. 32.5mg/ml抗TNFα抗体、10mM组氨酸、55mg/ml蔗糖、10mg/ml异亮氨酸、0.01%（%w/v）PS-80；
e. 32.5mg/ml抗TNFα抗体、10mM组氨酸、65mg/ml蔗糖、0.01%（%w/v）PS-80；
f. 32.5mg/ml抗TNFα抗体、5mM组氨酸、5mM柠檬酸盐、65mg/ml蔗糖、0.01%（%w/v）PS-80；
g. 32.5mg/ml抗TNFα抗体、10mM组氨酸、5mg/ml蔗糖、22.5mg/mL甘露糖醇、0.01%（%w/v）PS-80；
h. 32.5mg/ml抗TNFα抗体、10mM组氨酸、55mg/ml海藻糖、10mg/ml异亮氨酸、0.01%（%w/v）PS-80；或
i. 65mg/ml抗TNFα抗体、10mM组氨酸、55mg/ml蔗糖、0.01%（%w/v）PS-80，
其中在a-i中所示的制剂分散在包含油酸乙酯的非水性载体中。
19. 根据权利要求18所述的混悬剂，其中所述抗TNFα抗体为IgG1/k型。
20. 一种使制剂的注射力降低至约45牛顿（N）或更小的方法，所述制剂含有在包含疏水剂的载体中≥50mg/ml抗TNFα抗体，所述方法包括：
a. 向包含疏水剂的载体中加入按体积计至少28%的降粘剂；或
b. 利用具有介于约2μm-13μm之间的粒度的蛋白质颗粒来制备所述制剂，
其中所述注射力使用配有0.5英寸26 ?号针头的具有0.25英寸内径的1mL刚性针头护帽玻璃注射器以250mm/min的注射速度测得。
21. 根据权利要求20所述的方法，其中所述抗TNFα抗体具有SEQ ID NO: 6的轻链可变区（VL）和SEQ ID NO: 1或2的重链可变区（VH），或者SEQ ID NO: 7的VL和SEQ ID NO: 3、4或5的VH。
22. 根据权利要求21所述的方法，其中所述抗TNFα抗体为IgG1/k型。
23. 一种制备抗TNFα抗体的非水性高浓度混悬剂的方法，所述抗TNFα抗体具有SEQ ID NO: 6的轻链可变区（VL）和SEQ ID NO: 1或2的重链可变区（VH），或者SEQ ID NO: 7的VL和SEQ ID NO: 3、4或5的VH，所述方法包括：
a. 提供所述抗TNFα抗体；
b. 提供疏水剂；
c. 提供降粘剂；
d. 将所述疏水剂和所述降粘剂混合以形成载体；以及
e. 将所述抗TNFα抗体以等于或大于50mg/mL的浓度加入到步骤d中形成的载体中。
24. 根据权利要求23所述的方法，其中所述抗TNFα抗体为IgG1/k型。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107167613A (zh) * 2017-06-22 2017-09-15 深圳清华大学研究院 用于等离子体金芯片的蛋白点样缓冲液
WO2018184540A1 (zh) 2017-04-07 2018-10-11 浙江海正药业股份有限公司 包含组氨酸缓冲体系的英夫利西单抗组合物
CN112601518A (zh) * 2018-08-23 2021-04-02 詹森生物科技公司 用在大分子治疗制剂中的抗脂肪酶降解的表面活性剂
CN113164378A (zh) * 2018-11-21 2021-07-23 瑞泽恩制药公司 高浓度蛋白质制剂
WO2021233408A1 (zh) * 2020-05-21 2021-11-25 迈威(上海)生物科技股份有限公司 抗α-溶血素的抗体及其稳定制剂

Families Citing this family (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX2012010684A (es) 2010-03-17 2012-11-06 Novaliq Gmbh Composicion farmaceutica para el tratamiento de la presion intraocular incrementada.
EP2444063A1 (en) 2010-10-20 2012-04-25 Novaliq GmbH Liquid pharmaceutical compositions for the delivery of active ingredients
EP2462921A1 (en) 2010-11-11 2012-06-13 Novaliq GmbH Liquid pharmaceutical compositions for the treatment of a posterior eye disease
BR112013023062B1 (pt) 2011-03-10 2022-01-18 Xeris Pharmaceuticals, Inc Solução estável para a injeção parenteral e método de fabricação da mesma
EA201391488A1 (ru) * 2011-04-07 2014-01-30 ГЛЭКСОСМИТКЛАЙН ЭлЭлСи Композиции со сниженной вязкостью
CA2834855C (en) 2011-05-25 2020-12-29 Novaliq Gmbh Topical pharmaceutical composition based on semifluorinated alkanes
MX361681B (es) 2012-01-23 2018-12-13 Novaliq Gmbh Composiciones de proteína estabilizadas basadas en alcanos semifluorados.
RU2711089C2 (ru) * 2012-05-18 2020-01-15 Дженентек, Инк. Высококонцентрированные составы моноклональных антител
EP2863951A1 (en) * 2012-06-12 2015-04-29 Boehringer Ingelheim International GmbH Pharmaceutical formulation for a therapeutic antibody
US9125805B2 (en) 2012-06-27 2015-09-08 Xeris Pharmaceuticals, Inc. Stable formulations for parenteral injection of small molecule drugs
MY172561A (en) * 2012-07-17 2019-12-03 Bayer New Zealand Ltd Injectable antibiotic formulations and their methods of use
ES2974663T3 (es) 2012-09-12 2024-07-01 Novaliq Gmbh Alcanos semifluorados para uso en la solubilización de meibomio
CA2883003C (en) 2012-09-12 2021-11-16 Novaliq Gmbh Semifluorinated alkane compositions
JP2016515515A (ja) * 2013-03-15 2016-05-30 バイエル・ヘルスケア・エルエルシーＢａｙｅｒ ＨｅａｌｔｈＣａｒｅ ＬＬＣ 抗プロラクチン受容体抗体製剤
CA2918419C (en) 2013-07-23 2022-05-03 Novaliq Gmbh Stabilized antibody compositions
RU2675824C2 (ru) 2013-09-11 2018-12-25 Игл Байолоджикс, Инк. Жидкие белковые составы, содержащие ионные жидкости
ES2572919T3 (es) 2014-05-23 2016-06-03 Ares Trading S.A. Composición farmacéutica líquida
HUE029849T2 (en) 2014-05-23 2017-04-28 Ares Trading Sa Liquid pharmaceutical composition
EP2946767B1 (en) 2014-05-23 2016-10-05 Ares Trading S.A. Liquid pharmaceutical composition
CA2952609A1 (en) * 2014-06-26 2015-12-30 Amgen Inc. Solid protein formulations comprising stabilizer, sugar alcohol, sugar and surfactant
AU2015300944B2 (en) 2014-08-06 2019-07-11 Xeris Pharmaceuticals, Inc. Syringes, kits, and methods for intracutaneous and/or subcutaneous injection of pastes
US9649364B2 (en) 2015-09-25 2017-05-16 Xeris Pharmaceuticals, Inc. Methods for producing stable therapeutic formulations in aprotic polar solvents
SI3337502T1 (sl) * 2015-08-19 2020-10-30 Astrazeneca Ab Stabilna formulacija proti-IFNAR1
US11590205B2 (en) 2015-09-25 2023-02-28 Xeris Pharmaceuticals, Inc. Methods for producing stable therapeutic glucagon formulations in aprotic polar solvents
AU2016329261B2 (en) 2015-09-30 2020-05-07 Novaliq Gmbh Semifluorinated compounds for ophthalmic administration
DK3355990T3 (da) 2015-09-30 2019-09-16 Novaliq Gmbh Semifluorinerede forbindelser og disses sammensætninger
PT3442480T (pt) 2016-06-23 2019-12-23 Novaliq Gmbh Método de administração tópica
MX2019003363A (es) 2016-09-22 2019-10-02 Novaliq Gmbh Composiciones farmaceuticas para usarse en la terapia de la blefaritis.
AU2017329983B2 (en) 2016-09-23 2022-05-05 Novaliq Gmbh Ophthalmic compositions comprising ciclosporin
EP3522918A1 (en) 2016-10-06 2019-08-14 Amgen Inc. Reduced viscosity protein pharmaceutical formulations
CN108686205B (zh) * 2017-04-07 2021-12-10 海正生物制药有限公司 英夫利西单抗冻干制剂
EP3612228B1 (en) 2017-04-21 2023-08-23 Dermaliq Therapeutics, Inc. Iodine compositions
US11278503B2 (en) 2017-05-12 2022-03-22 Novaliq Gmbh Pharmaceutical compositions comprising semifluorinated alkanes for the treatment of contact lense-related conditions
CA3063324A1 (en) 2017-05-16 2018-11-22 Bhami's Research Laboratory, Pvt. Ltd. High concentration protein formulations with reduced viscosity
CN110709061B (zh) 2017-06-02 2023-09-08 Xeris药物公司 抗沉淀的小分子药物制剂
JP2020535156A (ja) 2017-09-27 2020-12-03 ノバリック ゲーエムベーハー 眼疾患の治療に使用するためのラタノプロストを含む眼科用組成物
CN111182893A (zh) 2017-10-04 2020-05-19 诺瓦利克有限责任公司 包含f6h8的眼用组合物
JP7353292B2 (ja) 2018-03-02 2023-09-29 ノバリック ゲーエムベーハー ネビボロールを含む医薬組成物
WO2019236435A1 (en) * 2018-06-07 2019-12-12 Merck Sharp & Dohme Corp. Lyosphere critical reagent kit
JP7500550B2 (ja) 2018-10-12 2024-06-17 ノバリック ゲーエムベーハー 乾性眼疾患の治療のための眼科用組成物
CN113661006A (zh) 2019-02-05 2021-11-16 林迪生物科学公司 分离的细胞培养物组分以及用于从液体细胞培养基中分离其的方法
CN113474360A (zh) 2019-02-18 2021-10-01 伊莱利利公司 治疗性抗体制剂
EP4065082A1 (en) * 2019-11-27 2022-10-05 Novaliq GmbH Suspension comprising a protein particle suspended in a non-aqueous vehicle

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3639587A (en) * 1969-11-07 1972-02-01 Eastman Kodak Co Medicinal compositions for administration to animals and process for administering same
CN1649567A (zh) * 2002-03-12 2005-08-03 爱的发制药集团 用于生物活性物质持续输送的具有凝胶化性能的组合物
TW200635610A (en) * 2004-12-23 2006-10-16 Alza Corp Injectable non-aqueous suspension
US20090022727A1 (en) * 2007-01-26 2009-01-22 Alza Corp. Injectable, nonaqueous suspension with high concentration of therapeutic agent
CN101827608A (zh) * 2007-06-14 2010-09-08 伊兰制药公司 冻干的免疫球蛋白制剂和制备方法

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
DE19638045A1 (de) * 1996-09-18 1998-03-19 Bayer Ag Injektionsformulierungen von Avermectinen und Milbemycinen
IN184589B (zh) * 1996-10-16 2000-09-09 Alza Corp
US6169320B1 (en) 1998-01-22 2001-01-02 Raytheon Company Spiral-shaped inductor structure for monolithic microwave integrated circuits having air gaps in underlying pedestal
US7919109B2 (en) * 1999-02-08 2011-04-05 Intarcia Therapeutics, Inc. Stable non-aqueous single phase viscous vehicles and formulations utilizing such vehicles
UA81743C2 (uk) * 2000-08-07 2008-02-11 Центокор, Инк. МОНОКЛОНАЛЬНЕ АНТИТІЛО ЛЮДИНИ, ЩО СПЕЦИФІЧНО ЗВ'ЯЗУЄТЬСЯ З ФАКТОРОМ НЕКРОЗУ ПУХЛИН АЛЬФА (ФНПα), ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ, ЩО ЙОГО МІСТИТЬ, ТА СПОСІБ ЛІКУВАННЯ РЕВМАТОЇДНОГО АРТРИТУ
DE60139944D1 (de) * 2000-10-12 2009-10-29 Genentech Inc Niederviskose konzentrierte proteinformulierungen
GB0113179D0 (en) * 2001-05-31 2001-07-25 Novartis Ag Organic compounds
CA2520775A1 (en) 2003-03-31 2004-10-21 Alza Corporation Non-aqueous single phase vehicles and formulations utilizing such vehicles
DE10330235A1 (de) * 2003-07-04 2005-01-20 Bayer Healthcare Ag Neues Eimeria Gen und Protein sowie deren Verwendung
US8728525B2 (en) * 2004-05-12 2014-05-20 Baxter International Inc. Protein microspheres retaining pharmacokinetic and pharmacodynamic properties
US20060141040A1 (en) 2004-12-23 2006-06-29 Guohua Chen Injectable non-aqueous suspension
BRPI0717335A2 (pt) * 2006-10-27 2013-12-10 Abbott Biotech Ltd Anticorpos anti-htnfalfa cristalinos
US8563527B2 (en) * 2007-08-20 2013-10-22 Pharmain Corporation Oligonucleotide core carrier compositions for delivery of nucleic acid-containing therapeutic agents, methods of making and using the same
JP5711138B2 (ja) * 2008-11-16 2015-04-30 ボード・オブ・リージエンツ，ザ・ユニバーシテイ・オブ・テキサス・システム 高濃度の低粘度懸濁液
CN103096934A (zh) * 2010-03-09 2013-05-08 詹森生物科技公司 非水性高浓度低粘度混悬剂

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3639587A (en) * 1969-11-07 1972-02-01 Eastman Kodak Co Medicinal compositions for administration to animals and process for administering same
CN1649567A (zh) * 2002-03-12 2005-08-03 爱的发制药集团 用于生物活性物质持续输送的具有凝胶化性能的组合物
TW200635610A (en) * 2004-12-23 2006-10-16 Alza Corp Injectable non-aqueous suspension
US20090022727A1 (en) * 2007-01-26 2009-01-22 Alza Corp. Injectable, nonaqueous suspension with high concentration of therapeutic agent
CN101827608A (zh) * 2007-06-14 2010-09-08 伊兰制药公司 冻干的免疫球蛋白制剂和制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
S.R.WICKS等: "Effect of formulation on the pharmacokinetics and efficacy of doramectin", 《VETERINARY PARASITOLOGY》, vol. 49, 31 December 1993 (1993-12-31), pages 17 - 26, XP023712220, DOI: doi:10.1016/0304-4017(93)90219-D *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018184540A1 (zh) 2017-04-07 2018-10-11 浙江海正药业股份有限公司 包含组氨酸缓冲体系的英夫利西单抗组合物
CN107167613A (zh) * 2017-06-22 2017-09-15 深圳清华大学研究院 用于等离子体金芯片的蛋白点样缓冲液
CN112601518A (zh) * 2018-08-23 2021-04-02 詹森生物科技公司 用在大分子治疗制剂中的抗脂肪酶降解的表面活性剂
CN113164378A (zh) * 2018-11-21 2021-07-23 瑞泽恩制药公司 高浓度蛋白质制剂
WO2021233408A1 (zh) * 2020-05-21 2021-11-25 迈威(上海)生物科技股份有限公司 抗α-溶血素的抗体及其稳定制剂

Also Published As

Publication number Publication date
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EP2683403B1 (en) 2019-06-19
BR112013023006A8 (pt) 2017-12-19
MX2013010335A (es) 2013-10-03
ZA201307513B (en) 2018-12-19
JP2014510077A (ja) 2014-04-24
US20110223208A1 (en) 2011-09-15
ES2743687T3 (es) 2020-02-20
KR101949707B1 (ko) 2019-02-19
JP5881748B2 (ja) 2016-03-09
ZA201600811B (en) 2016-11-30
KR20140145942A (ko) 2014-12-24
SG193278A1 (en) 2013-10-30

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