CN103393736B - 一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，包括神经酸24‑60重量份，三七总皂苷48‑90重量份。本发明药物组合物对阿尔茨海默病具有显著的治疗效果，且无毒副作用。本发明还提供了所述药物组合物的制备方法和用途。

Description

一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物及其制备方法和用途。

背景技术

阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)是一种神经退行性疾病，主要发生在老年前期及老年期，其病理学特征为老年斑、神经原纤维缠结及神经元凋亡，其发病率不断高升，成为一种老年人的常见病和多发病。AD患者的主要临床表现为记忆力丧失和认知功能障碍，许多患者甚至有精神疾病的临床症状，如幻觉、妄想和失去思考能力等。AD发病机制复杂，至今尚未完全阐明。治疗AD的西药多针对其某一特定病理环节进行干预，虽有一定疗效，但易出现耐药性及副作用。现在被批准临床使用的治疗AD药物主要是胆碱酯酶抑制剂，如他克林、多奈哌齐、卡巴斯汀、加兰他敏、石杉碱甲等，尽管这类药物具有改善AD患者学习记忆能力的功效，但其副作用明显，治疗范围狭窄，因此，寻找新的有效的治疗药物势在必行。

针对AD发生机理的各种假说，已有报道的有望治疗AD的药物有：Aβ抑制剂、糖原合成酶-3β抑制剂、兴奋性氨基酸受体拮抗剂、免疫球蛋白IVIG、胰岛素等；在中药或天然药物中，已有报道的有人参、远志、千层塔、三七、灯盏细辛、银杏、胡黄连等。上述药物的研究多集中于理论推导、体外或动物药理实验，但未取得满意的临床实验结果。

神经酸(Nervonic Acid)，又名鲨鱼酸，分子式C₂₄H₄₆O₂，最早发现于哺乳动物的神经组织，是神经组织中生物膜的组成成分，是脑甙中髓质的标志性成分。侯镜德等认为，神经酸具有改善记忆，提高理解、联想、判断能力，改善情绪，改善运动能力和语言能力等作用，因而对AD具有一定的治疗作用(《神经酸与脑健康》，中国科学技术出版社，2006年10月出版，第90-91页)。然而，神经酸单独使用对于阿尔茨海默病的治疗作用并不理想，目前仅在保健食品中添加，用于辅助改善记忆力。

三七(Panax notoginseng)是五加科人参属植物，以根部入药，含有皂苷、多糖、黄酮、三七素以及氨基酸等多类物质。药理研究表明，三七皂苷能改善大鼠的学习和记忆功能，三七总皂苷还可提高痴呆模型大鼠的大脑皮质内与记忆和学习密切相关的肾上腺素、多巴胺和五羟色胺的含量；三七总皂苷可抑制作为导致AD的重要物质的β-淀粉样肽段的毒性作用，并可阻止其产生；三七总皂苷可保护老年痴呆模型大鼠免受自由基氧化破坏作用，从而减少神经细胞损伤，防止脑的老化和AD的进一步发展，还可通过维护脑血管和脑组织的功能，防止AD的发生和发展(陈超杰等，三七治疗阿尔茨海默氏病的研究进展，时珍国医国药，2008年第19卷第7期，第1559-1560，1564页)。三七总皂苷对于阿尔茨海默病的治疗作用目前多集中于理论推导和药理实验阶段，其临床效果并不确切。

现有技术中没有公开将神经酸与三七总皂苷相结合治疗AD的报道，更没有公开任何二者以何种用量配比才能获得良好治疗效果的报道。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物。

所述发明目的是通过如下技术方案实现的：

一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，包括：

神经酸24-60重量份，三七总皂苷48-90重量份。

优选地，所述药物组合物还包括乳糖180-228重量份。

优选地，所述药物组合物包括：

神经酸40重量份，三七总皂苷60重量份。

所述神经酸可以从植物中提取，例如从元宝枫(Acer truncatum Bunge)、蒜头果(Malania oleifera Chun et Lee)等植物中提取获得，也可以通过其他方法，比如通过化学合成、生物合成等方法获得。

在一种优选的实施方式中，所述神经酸从蒜头果油中提取制备，制备方法包括如下步骤：

(1)向蒜头果油中加入2-5倍量70-100％的乙醇，搅拌成均匀溶液，向所述溶液中加入蒜头果油质量1-3倍量的20-40％的氢氧化钠或氢氧化钾溶液，加热搅拌至皂化反应完全，滤过，滤液酸化至pH3-4，静置，收集上层凝固皂化物，水洗至中性，滴尽水分，得神经酸粗品；

(2)取所述神经酸粗品，进行如下结晶操作：

向所述神经酸粗品中加入3.8～4.2倍量的无水乙醇与丙酮的体积比为1∶1的混合溶液，60～70℃加热回流使溶解，滤过，收集滤液并于-5～-10℃静置，离心，收集结晶；

所述结晶操作得到神经酸初结晶；

(3)取所述神经酸初结晶，重复进行步骤(2)中的结晶操作2-7次，至所得结晶中神经酸单体的含量不低于85％，即得。

其中，所述蒜头果油可采用任何常规方法从蒜头果果仁中提取，比如冷榨法、冷浸法、有机溶剂提取法、超临界提取法、亚临界提取法等。

步骤(1)中所述的“向蒜头果油中加入2-5倍量70-100％的乙醇”，该表述具有本领域常规的含义，其中“蒜头果油“/“70-100％的乙醇”为质量/体积，单位为g/mL或kg/L。例如，若蒜头果油的质量为1g，则加入的70-100％的乙醇溶液的体积为2-5mL。此外，步骤(1)中所述的“1-3倍量”和步骤(2)中的“3.8-4.2倍量”以及下文的类似表述也具有与之相同的含义，这是本领域技术人员容易理解的。

所述步骤(1)中的滤液酸化可使用任何常规的酸溶液，例如盐酸、硫酸等，优选为盐酸溶液。

优选地，所述神经酸的制备方法包括如下步骤：

(1)向蒜头果油中加入3倍量95％的乙醇，搅拌成均匀溶液，向所述溶液中加入蒜头果油质量4/3倍量的25％的氢氧化钠或氢氧化钾溶液，加热搅拌至皂化反应完全，滤过，滤液用盐酸酸化至pH3-4，静置，收集上层凝固皂化物，水洗至中性，滴尽水分，得神经酸粗品；

(2)取所述神经酸粗品，进行如下结晶操作：

向所述神经酸粗品中加入4倍量的无水乙醇与丙酮的体积比为1∶1的混合溶液，60～70℃加热回流使溶解，滤过，收集滤液并于-5～-10℃静置，离心，收集结晶；

所述结晶操作得到神经酸初结晶；

(3)取所述神经酸初结晶，重复进行步骤(2)中的结晶操作3-5次，至所得结晶中神经酸单体的含量不低于85％，即得。

上述制备方法可使蒜头果油皂化完全，酸化彻底，皂化物水洗到中性，为神经酸的结晶纯化奠定了基础；采用无水乙醇与丙酮的体积比为1∶1的混合溶液作为重结晶溶剂，取得了良好的重结晶效果；-5～-10℃条件下静置结晶，缩短了结晶时间，便于产业化生产。

所述三七总皂苷为本领域公知的术语，可采用任何常规方法制备，只要质量符合2010版中国药典一部收载的“三七总皂苷”质量标准即可。

在一种优选的实施方式中，所述三七总皂苷的制备方法为：

将三七药材粉碎成粗粉，用12-20倍量50-90％乙醇回流提取2-4次，每次1-3小时，提取液滤过后合并，减压回收乙醇，得提取物，向所述提取物中加入投料三七药材质量0.5-2倍量的水，滤过，滤液上AB-8大孔吸附树脂柱吸附，水洗至流出液基本无色，然后用50-80％乙醇洗脱，所得洗脱液过层析用中性氧化铝柱脱色除杂，减压回收乙醇，真空干燥，得三七总皂苷，检验符合2010年版中国药典三七总皂苷质量标准后，即得。

更优选地，所述三七总皂苷的制备方法为：

将三七药材粉碎成粗粉，用16倍量70％乙醇回流提取3次，每次2小时，提取液滤过后合并，减压回收乙醇，得提取物，向所述提取物中加入投料三七药材质量1倍量的水，滤过，滤液上AB-8大孔吸附树脂柱吸附，水洗至流出液基本无色，然后用75％乙醇洗脱，所得洗脱液过层析用中性氧化铝柱脱色除杂，减压回收乙醇，真空干燥，得三七总皂苷，检验符合2010年版中国药典三七总皂苷质量标准后，即得。

本发明的另一目的在于提供所述药物组合物的制备方法。

本发明药物组合物的制备可采用本领域的常规方法，例如将神经酸与三七总皂苷按照所述比例混合均匀，加入或不加入辅料制成药学上可接受的剂型，比如片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂等。

优选地，所述药物组合物的制备方法为：取神经酸24-60重量份、三七总皂苷48-90重量份、乳糖180-228重量份，制成片剂、丸剂或颗粒剂。

本发明的再一目的是提供所述药物组合物在制备治疗阿尔茨海默病的药物中的用途。

目前国内外对于治疗阿尔茨海默病的药物进行了大量研究，也报道了许多可能有效的药物，但这些药物的实际治疗效果并不令人满意。尽管目前的体外实验和动物药理研究表明，神经酸和三七总皂苷可能通过不同的机理对阿尔茨海默病具有治疗作用，但是经过多年的临床实践，发明人发现，神经酸和三七总皂苷分别单独应用于临床时，实际治疗效果并不明显；发明人将二者以多种不同比例配伍后用于治疗阿尔茨海默病时，二者以多数比例配伍的组合都不具有显著的治疗作用。由于人体是个复杂的系统，阿尔茨海默病的发病机制也十分复杂，至今尚未完全阐明，而仅从某一环节或病理现象着手，难以取得令人满意的疗效。在医药领域，体外实验和药理实验有效的药物未必在临床上显示药效，这也是为什么每年大量体外实验和动物药理实验筛选有效的药物难以通过临床实验而上市的原因。

经过多年研究，特别是临床一手资料，发明人意外地发现，神经酸和三七总皂苷以本发明公开的特定比例配伍组成的组合物，对阿尔茨海默病症状的改善具有十分显著的效果，远胜于二者单独使用，也明显优于二者以其他比例配伍的临床效果。发明人继而对所述组合物的治疗效果进行了临床验证，取得了令人满意的结果，并且未发现任何毒副作用。

具体实施方式

以下通过临床试验数据来说明本发明药物组合物对阿尔茨海默病的治疗作用，但并不构成对本发明的限制。

本临床试验使用的神经酸为胶囊剂，每粒胶囊含神经酸40mg；其中神经酸的制备方法为：

(1)向蒜头果油中加入3倍量95％的乙醇，搅拌成均匀溶液，向所述溶液中加入蒜头果油质量4/3倍量的25％的氢氧化钠溶液，加热搅拌至皂化反应完全，滤过，滤液酸化至pH3-4，静置，收集上层凝固皂化物，水洗至中性，滴尽水分，得神经酸粗品；(2)取所述神经酸粗品，进行如下结晶操作：向所述神经酸粗品中加入4倍量的无水乙醇与丙酮的体积比为1∶1的混合溶液，60～70℃加热回流使溶解，滤过，收集滤液并于-5～-10℃静置，离心，收集结晶，滴尽水分；得神经酸初结晶；(3)取所述神经酸初结晶，重复进行步骤(2)中的结晶操作3次，至所得结晶中神经酸单体的含量不低于85％，即得。

三七总皂苷是采用上述优选的制备方法制备而成的胶囊剂，每粒胶囊含三七总皂苷60mg；

本发明药物组合物是采用上述优选的配方制备而成的，即神经酸40重量份、三七总皂苷60重量份，制成胶囊剂，每粒胶囊含神经酸40mg，三七总皂苷60mg；其中神经酸和三七总皂苷的制备方法同上。

1.患者诊断标准

1.1诊断标准：参考1990年5月中国中医药学会老年学会和中国中医药学会内科学会修订的《老年呆病的诊断及疗效评定标准》纳入。

1.2排除标准：排除患有严重的神经系统疾病、内分泌疾病、严重代谢疾病、严重肝肾和心肺疾病、假性痴呆、重度痴呆、精神发育迟滞或老年良性健忘症及依从性差的患者。

2.临床资料

共录入90例患者，男性54例，女性36例，年龄60-85岁，病程0.5-4年，受教育程度(11.7±5.4)年，均符合以上诊断标准。随机分为三组，每组30例，三组的性别、年龄、病程、受教育程度等一般资料均无显著性差异，具有可比性。

3.治疗方法

神经酸组：口服，每日3次，每次1-2粒；

三七总皂苷组：口服，每日3次，每次1-2粒；

本发明组：口服，每日3次，每次1-2粒；

三组均配合康复训练，3个月为一疗程，3个月后观察疗效。

4.疗效评定标准

4.1疗效评定指标：采用1990年5月中国中医药学会老年学会和中国中医药学会内科学会修订的《老年呆病的诊断及疗效评定标准》进行评定。

显效：主要症状基本恢复，神志清醒，定向健全，回答问题正确，反应灵敏，生活自理，能进行一般的社会活动；

有效：主要精神症状有所减轻或部分消失，生活基本自理，回答问题基本正确，但反应迟钝，智力和人格仍有部分障碍；

无效：主要症状无改变或病情加重，生活不能自理，回答问题不正确，神智呆傻。

4.2安全性指标：一般体检项目，血、尿、便常规检查；心、肝、肾功能检查及不良反应等。

5.治疗结果

神经酸组：显效3例、有效13例、无效14例，总有效率53.3％；

三七总皂苷组：显效2例、有效9例、无效19例，总有效率36.7％；

本发明组：显效9例、有效16例、无效5例，总有效率83.3％。

三组均未见明显的毒副作用。

6.结论

对于轻、中度阿尔茨海默病患者的治疗，单独使用神经酸或三七总皂苷疗效均不理想，而二者以特定比例配伍组成的本发明组合物取得了十分显著的治疗效果，症状改善十分明显，总有效率达到了83.3％，且安全性指标未见异常。

实施例

以下通过实施例对本发明进行进一步说明，但实施例并不限制本发明的保护范围。

实施例1

取神经酸40重量份，三七总皂苷60重量份，乳糖200重量份，取上述组分加入适量淀粉，制成片剂；其中神经酸的制备方法为：

(1)向蒜头果油中加入3倍量95％的乙醇，搅拌成均匀溶液，向所述溶液中加入蒜头果油质量4/3倍量的25％的氢氧化钠溶液，加热搅拌至皂化反应完全，滤过，滤液用盐酸酸化至pH3-4，静置，收集上层凝固皂化物，水洗至中性，滴尽水分，得神经酸粗品；

(2)取所述神经酸粗品，进行如下结晶操作：

向所述神经酸粗品中加入4倍量的无水乙醇与丙酮的体积比为1∶1的混合溶液，60～70℃加热回流使溶解，滤过，收集滤液并于-5～-10℃静置，离心，收集结晶，得神经酸初结晶；

(3)将所述神经酸初结晶干燥，重复进行步骤(2)中的结晶操作3次，得结晶中神经酸单体的含量为90.6％。

三七总皂苷的制备方法为：

将三七药材粉碎成粗粉，用70％乙醇回流提取3次，每次2小时，提取液滤过后合并，减压回收乙醇，得提取物，向所述提取物中加入投料三七药材质量1倍量的水，滤过，滤液上AB-8大孔吸附树脂柱吸附，水洗至流出液基本无色，然后用75％乙醇洗脱，所得洗脱液过层析用中性氧化铝柱脱色除杂，减压回收乙醇，真空干燥，得三七总皂苷，检验符合2010年版中国药典三七总皂苷质量标准。

实施例2

取神经酸24重量份，三七总皂苷48重量份，制成胶囊剂；其中神经酸的制备方法为：

(1)向蒜头果油中加入2倍量90％的乙醇，搅拌成均匀溶液，向所述溶液中加入蒜头果油质量2倍量的20％的氢氧化钾溶液，加热搅拌至皂化反应完全，滤过，滤液用硫酸酸化至pH3-4，静置，收集上层凝固皂化物，水洗至中性，滴尽水分，得神经酸粗品；

(2)取所述神经酸粗品，进行如下结晶操作：

向所述神经酸粗品中加入4.2倍量的无水乙醇与丙酮的体积比为1∶1的混合溶液，60～70℃加热回流使溶解，滤过，收集滤液并于-5～-10℃静置，离心，收集结晶；得神经酸初结晶；

(3)将所述神经酸初结晶干燥，重复进行步骤(2)中的结晶操作5次，所得结晶中神经酸单体的含量为88.3％。

三七总皂苷的制备方法采用2010年版中国药典“三七总皂苷”项下的提取方法，且质量符合药典标准。

实施例3

取神经酸60重量份，三七总皂苷80重量份，乳糖228重量份，取上述组分加入适量淀粉，制成片剂；其中神经酸的制备方法为：

(1)向蒜头果油中加入5倍量70％的乙醇，搅拌成均匀溶液，向所述溶液中加入蒜头果油质量1倍量的40％的氢氧化钠溶液，加热搅拌至皂化反应完全，滤过，滤液用盐酸酸化至pH3-4，静置，收集上层凝固皂化物，水洗至中性，干燥，得神经酸粗品；

(2)取所述神经酸粗品，进行如下结晶操作：

向所述神经酸粗品中加入3.8倍量的无水乙醇与丙酮体积比为1∶1的混合溶液，60～70℃加热回流使溶解，滤过，收集滤液并于-5～-10℃静置，离心，收集结晶，得神经酸初结晶；

(3)将所述神经酸初结晶干燥，重复进行步骤(2)中的结晶操作6次，所得结晶中神经酸单体的含量为89.6％。

三七总皂苷的制备方法为：

将三七药材粉碎成粗粉，用90％乙醇回流提取2次，每次1小时，提取液滤过后合并，减压回收乙醇，得提取物，向所述提取物中加入投料三七药材质量2倍量的水，滤过，滤液上AB-8大孔吸附树脂柱吸附，水洗至流出液基本无色，然后用75％乙醇洗脱，所得洗脱液过层析用中性氧化铝柱脱色除杂，减压回收乙醇，真空干燥，得三七总皂苷，检验符合2010年版中国药典“三七总皂苷”项下质量标准。

Claims (4)

1.一种药物组合物在制备治疗阿尔茨海默病的药物中的用途，其特征在于：

所述药物组合物包括：神经酸24-60重量份，三七总皂苷48-90重量份。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物组合物还包括乳糖180-228重量份。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物组合物包括：神经酸40重量份，三七总皂苷60重量份。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物组合物还包括乳糖200重量份。