CN105943619A - 全麻素在制备防治老年痴呆症药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了全麻素在制备防治老年痴呆症的药物中的应用。所述的全麻素由工业大麻火麻仁提取物0.3份～99.7份和工业大麻火麻素99.7份～0.3份混匀制成。实验证实全麻素对老年痴呆症和脑缺血引起的空间认知障碍和学习记忆功能下降有明显的改善效果，能增加老年性痴呆大鼠大脑皮层抑制性氨基酸天冬氨酸、甘氨酸及γ‑氨基丁酸的含量，降低兴奋性谷氨酸的毒性，并能减少AD大鼠海马组织中β‑AP的产生，对脑缺血引起的学习记忆功能下降也有明显的改善作用；还能明显改善NaNO₂所致小鼠记忆障碍。各作用效果均优于大麻二酚。全麻素对防治老年痴呆症有确实显著的效果，具有良好的推广应用前景。

Description

全麻素在制备防治老年痴呆症药物中的应用

技术领域

本发明属于工业大麻利用技术领域，具体地说是涉及一种以工业大麻为主要原料制备得到的药物组合物在制备治疗或预防老年痴呆症的药物中的应用。

背景技术

大麻的种植历史悠久，古代大麻主要用于制作加工绳索、渔网、服装和造纸原料，以及油脂、食品等。随着社会的发展和进步，人们发现大麻中含有一种毒性成分(四氢大麻酚)可使人致幻成瘾，欧美许多国家曾在相当长时期内禁种大麻。由于大麻的经济利用价值高，到20世纪80年代，一些欧洲国家研究培育出了低毒大麻品种并获得推广种植。1990年欧共体率先紧急修订农业政策，废除了禁种大麻的禁令，开始恢复大麻的生产和研究。随后美国、加拿大、澳大利亚等国解除了大麻种植的禁令，全球大麻种植面积和纤维产量有了迅速增长，欧美国家对工业大麻的开发利用再次掀起，国际市场对生态大麻的需求也在迅速增长。根据大麻的经济属性，为充分利用其为人类服务，1988年联合国明确规定不具备提取毒性成分(四氢大麻酚THC)价值或直接作为毒品吸食的，专供工业用途的原料大麻，工业大麻(其生长期大麻花叶中的四氢大麻酚含量小于0.3％)，可以合法进行规模化种植与工业化开发利用。

工业大麻是独具特色、比较优势突出的生物资源。工业大麻与传统有毒大麻具有本质差别，工业大麻是一类无毒化的工业原料产品，具有极高的经济利用价值。到2003年末世界各国先后一共选育出25个工业大麻品种，而且欧盟的法、德、英等七国也都成为工业大麻主要种植生产国，以工业大麻纤维和麻籽及其花、叶、根、茎为原料进行系列产品研发与产业化综合开发，已在工业大麻初级加工主产品麻皮纤维、秆芯纤维、麻籽油脂和籽粕蛋白、药用标准化提取物实现产业化生产的基础上，进一步进行深加工利用，派生出来的产品已达到二万五千种以上，包含了人类的衣、食、住、行、用各大类产品。工业大麻产业的研究、开发和生产主要集中在欧洲、加拿大、美国等技术发达国家。工业大麻产业的发展，首先是从选育无毒或低毒化的工业大麻新品种开始的，并以此为基础实现了规模化的种植和高技术产业化的综合开发利用，形成了一个“新兴绿色产业群”和新型工业经济的快速增长点。

火麻仁为大麻干燥成熟果实，古代通常将火麻仁入药，食疗亦有记载。国家卫生部已将火麻仁纳入“既是药品又是食品”——“药食两用”名单。火麻仁的药性及药理为：甘，平。归脾、胃、大肠经。功能主治：润燥，滑肠，通淋，活血。治肠燥便秘，消渴，热淋，风痹，痢疾。月经不调，疥疮，癣癞。在医书中有详细疗效记载，如《本经》：“补中益气。”；《唐本草》：“主五劳。”；《肘后方》：“治大渴，日食数斗，小便赤涩者：麻子一升，水三升，煮三、四沸，取汁饮之。”；《日华子本草》：“补虚劳，长肌肉，下乳，止消渴，催生。治横逆产。”；《本草拾遗》：“下气，利小便，去风痹皮顽，炒令香捣碎，小便浸取汁服；妇人倒产吞二七枚。”；《食疗本草》：“取汁煮粥，去五脏风、润肺。治关节不通、发落，通血脉。”。

大麻的花叶均供药用。麻叶的药性及药理为：辛；有毒。归肺；膀胱；大肠经。功能主治：止痛，定喘，驱蛔。主治气喘，跌扑疼痛，蛔虫病。麻花的药性及药理为：苦；辛；性温；有毒。功能主治：祛风；活血；生发。主风病肢体麻木；遍身瘙痒；妇女经闭。

老年痴呆症是发生在早老期及老年期的以进行性痴呆为特征的脑功能障碍而产生的智能损害综合征。包括老年性痴呆------阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease AD)和脑血管性痴呆(Vascular dementia，VD)两类。AD是一种多源性因素引起的原发性大脑神经退行性病变，伴有胆碱酯酶AchE活性降低、单胺类、氨基酸类神经递质含量的改变等。VD则多与反复的脑缺血或脑梗塞造成的脑损害密切相关。老年痴呆患者表现为大脑皮层获得性高级障碍，包括记忆、语言、感觉和运动等功能的进行性损害，并常伴有人格、性格和情感控制等方面的异常。

近年来，国内外临床研究表明，乙酰胆碱酯酶抑制剂是治疗AD最有效的药物，另外对青光眼、重症肌无力、肠梗阻等症的治疗也有较好的作用(金有豫.药理学(第五版)，2001；54-55.)。目前FDA批准的乙酰胆碱酯酶抑制剂(acetylocholinesterase inhibitor,ACEhI)有他克林(tacrine)多奈哌齐(donepezil)、加兰他敏(galanthamine)和石杉碱甲，这类药物通过抑制乙酰胆碱酯酶的活性，提高乙酰胆碱水平，增强中枢乙酰胆碱神经的功能，在一定程度上改善AD早期患者的病情。

但上述抑制剂仍存在一定缺陷，主要是对肝脏的毒性较大，有恶心和呕吐的副作用及体内乙酰胆碱利用度低等。

大麻二酚(CBD)是从大麻花叶中萃取的一种无毒的可用于药品、化妆品、保健食品的一种高附加值的酚类物质。目前，以色列、美国、英国等发达国家已用其做原料并开发出多种特效药品和化妆品。CBD是大麻中的非成瘾性成分，能阻碍THC对人体神经系统影响，并具有抗痉挛、抗风湿性关节炎、抗焦虑等药理活性，亦有在治疗精神疾病方面的报道。大麻二酚在治疗老年痴呆症方面也有记载，但其治疗效果并不理想。因此开发新的活性高，毒副作用小的治疗AD的药物显得非常必要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以工业大麻为主要原料制备的药物组合物—全麻素在制药中的应用。

实际上，本发明涉及全麻素在制备治疗或预防老年痴呆症的药物中的应用，所述的全麻素由0.3份～99.7重量份的工业大麻火麻仁提取物和99.7份～0.3重量份的工业大麻火麻素混匀制成。

所述的全麻素的原料组成优选为工业大麻火麻仁提取物40份和工业大麻火麻素60份。

其中，所述的工业大麻火麻仁提取物通过以下方法制备而成：

(1)取成熟的工业大麻火麻仁，经烘干、除杂，粉碎后备用；

(2)在20～85℃条件下，用乙醇对粉碎火麻仁料进行提取，乙醇浓度为95％～100％(V/V)，料液比为1:5～1:20；

(3)滤出浸提液，减压浓缩后即为工业大麻火麻仁提取物。

在用乙醇对工业大麻火麻仁进行提取时，可采用以下多种方式进行：如室温下浸提，每批物料浸提2次，每次7～10天；在60～85℃条件下，加热提取2次，每次1～3小时；超声波辅助提取，超声波频率30～60kHz，功率100～1000W，提取时间30～60min，浸提温度25～50℃；亦可采用微波辅助提取等其它现有技术。

所述的工业大麻火麻素通过以下方法制备而成：

(1)取工业大麻的花、叶、麻糠或三者的混合物，经烘干、除杂、粉碎至10～60目；

(2)超临界二氧化碳萃取：将上述粉碎好的工业大麻原料投入超临界二氧化碳萃取装置的萃取釜中，控制萃取温度40～50℃，萃取时间30～90min，萃取压力25～35Mpa，二氧化碳流量40kg/h，分离釜出口收集萃取物；

(3)萃取物用0.2～10倍体积的95％～100％(V/V)的乙醇洗脱，洗脱次数为1～3次；

(4)收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥，粉碎后即得工业大麻火麻素。

所述的工业大麻的花、叶、麻糠三者混合物的优选配比为1:3:2。

普通的麻叶、麻花均具有毒性(含有四氢大麻酚THC—毒品大麻的至幻物质)。为排除原料药的毒性，本发明优选采用云南生长的工业大麻品种——“云麻1号”的花、叶、麻糠和火麻仁作为原料。按我国相关法律文件规定，“云麻1号”只能在云南境内种植，并且其花、叶、麻糠只能在云南境内加工。

本发明的药物组合物—全麻素可进一步制成不同的药物制剂，包括口服剂和针剂，其中口服剂包括胶囊剂、口服液、片剂、滴丸、颗粒剂等，针剂包括注射液剂型及注射用冻干粉针剂型等。在制备口服制剂时可选用的辅型剂可以是淀粉、糊精或环糊精、蔗糖、硬脂酸盐等常规充填剂。冻干粉针剂可以通过无菌喷雾干燥、低温真空干燥、冷冻干燥等方法制备。各制剂的后期制备工艺及设备均属制药领域的常规技术，本发明对此不作限定，故在此不予详述。

本发明的药物组合物--全麻素对老年痴呆症和脑缺血引起的空间认知障碍和学习记忆功能下降有明显的改善效果，能增加老年性痴呆大鼠大脑皮层抑制性氨基酸天冬氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸的含量，降低兴奋性谷氨酸的毒性，并能减少AD大鼠海马组织中β-AP的产生，对脑缺血引起的学习记忆功能下降也有明显的改善作用；还能明显改善NaNO₂所致小鼠记忆障碍。各作用效果均优于大麻二酚。本发明的药物对防治老年痴呆症有确实显著的效果，具有良好的推广应用前景。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明作进一步的详细说明，但实施例并不是对本发明技术方案的限定。

实施例1

采用云南生长的工业大麻品种——“云麻1号”的花、叶、麻糠和火麻仁作为原料。取成熟的工业大麻火麻仁，经烘干、除杂，粉碎后备用；用乙醇对粉碎火麻仁料进行提取(在60～85℃条件下，加热提取2次，每次1～3小时)，乙醇浓度为95％～100％(V/V)，料液比为1:5～1:20；滤出浸提液，减压浓缩后即为工业大麻火麻仁提取物。

取工业大麻的花、叶、麻糠1:3:2质量比的混合物，经烘干、除杂、粉碎至10～60目；超临界二氧化碳萃取：将上述粉碎好的工业大麻原料投入超临界二氧化碳萃取装置中，控制萃取温度40～50℃，萃取时间30～90min，萃取压力25～35Mpa，二氧化碳流量40kg/h，分离釜出口收集萃取物；萃取物用0.2～10倍体积的95％～100％(V/V)的乙醇洗脱，洗脱次数为1～3次；收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥，粉碎后获得工业大麻火麻素。

取工业大麻火麻仁提取物40份，工业大麻火麻素60份，混匀，得所需防治老年痴呆症的全麻素B。

实施例2

重复实施例1，有以下不同点：在用乙醇对工业大麻火麻仁进行提取时，室温下浸提，每批物料浸提2次，每次7～10天。取工业大麻的花、叶、麻糠1:1:1质量比的混合物作为工业大麻火麻素的提取原料。

取工业大麻火麻仁提取物0.3份，工业大麻火麻素99.7份，混匀，得所需防治老年痴呆症的全麻素A。

实施例3

重复实施例1，有以下不同点：在用乙醇对工业大麻火麻仁进行提取时，采用超声波辅助提取，超声波频率30～60kHz，功率100～1000W，提取时间30～60min，浸提温度25～50℃。取工业大麻的花、叶、麻糠3:2:1质量比的混合物作为工业大麻火麻素的提取原料。

取工业大麻火麻仁提取物99.7份，工业大麻火麻素0.3份，混匀，得所需防治老年痴呆症的全麻素C。

实施例4

取实施例1所得药物100克(过80目筛)，加入60克微晶纤维素，过80目筛三遍，混合均匀，喷入95％乙醇溶液，制软材，过40目筛制粒，60℃干燥半小时，分装于3#胶囊中，铝塑复合包装，制得全麻素胶囊剂。

实施例5

取实施例1所得药物，加入物料量5～20％的干淀粉及1～5％的硬脂酸镁等，经混合，制粒，干燥，压片，制得全麻素片剂。

实施例6

取实施例1所得药物，加入蔗糖水及常规量的防腐剂，稳定剂等辅料。过滤、灭菌，分装入10mL瓶中，制成全麻素口服液。

实施例7

取实施例1所得药物，加入注射用水溶解，加入2.0‰活性炭，搅拌，过滤，继以用0.45μm、0.22μm微孔滤膜分级过滤，补充注射用水，分装于西林瓶中，冷冻干燥，回充高纯度氮气，加塞，压盖，包装，制得全麻素注射液。

应用实施例1全麻素对实验性AD的防治作用

1、全麻素对老年性痴呆动物模型空间认知障碍改善的影响(Morris水迷宫行为学实验)

选取体重300-380g SD大鼠，雌雄各半，采用Ibotenic acid(IBO)致动物老年性痴呆模型，造模方法参照有关文献(徐叔云，等主编.药理实验方法学，第三版.人民卫生出版社。2002：848。胡镜清，赖世隆，等.中华老年医学杂志2000；19(2)：5-6)。模型建成后，将存活动物随机分为6组：手术对照组组；模型对照组；大麻二酚组；全麻素A、B、C组。各组连续灌胃2个月。此后进行Morris水迷宫行为学实验，连续6天，实验分为两个阶段：

(1)1-5天训练大鼠；(2)第6天进行有关行为学实验，结果见下表。

表1：全麻素对老年性痴呆动物模型空间认知障碍改善的影响(n＝10)

注：与模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01，***P＜0.001；与大麻二酚组比较△P＜0.05。

上述实验结果表明：全麻素A、B、C组对AD大鼠的空间认知障碍有明显的改善作用，与模型组比较有显著性差异(P＜0.05～0.001)，效果优于大麻二酚组。

2、全麻素对老年性痴呆动物记忆功能障碍改善的影响(大鼠避暗箱实验：徐叔云，等主编.药理实验方法学，第三版.人民卫生出版社.2002：827.)

将上述实验动物在给药2个月后，先将实验用大鼠置于避暗箱明箱内，当大鼠进入暗箱后，电击1秒，然后取出动物，1周后重复实验，记录大鼠由明箱进入暗箱的时间及次数、个数，结果如下表。

表2：全麻素对老年性痴呆动物记忆功能障碍改善的影响(n＝10)

注：与模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01，***P＜0.001；与大麻二酚组比较，△P＜0.05。

结果表明，全麻素对AD大鼠的记忆功能障碍有明显的改善作用，与模型组比较均有显著性差异(P＜0.05～0.001)，大麻二酚也有一定的作用，但效果不及本发明。

3、全麻素对老年性痴呆大鼠大脑皮层组织匀浆氨基酸类神经递质的影响。

上述实验结束后，取大鼠大脑皮层超声匀浆，用HPLC方法测氨基酸类神经递质的含量，结果如下。

表3：全麻素对老年性痴呆大鼠大脑皮层组织匀浆氨基酸类神经递质的影响(n＝10)

注：与模型组比较，*p＜0.05；与大麻二酚组比较，△P＜0.05。

结果表明，与模型组比较，全麻素对实验性AD大鼠大脑皮层谷氨酸的升高有明显的抑制作用，能增加AD大鼠大脑皮层抑制性氨基酸天冬氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸的含量，经统计学处理差异有显著性(P＜0.05)。与大麻二酚组比较，全麻素对实验性AD大鼠大脑皮层谷氨酸升高的抑制作用，以及增加AD大鼠大脑皮层抑制性氨基酸天冬氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸含量的作用均优于大麻二酚。

4、全麻素对老年性痴呆大鼠大脑海马组织匀浆β-淀粉样肽(β-AP)的影响。

实验结束后，取大鼠大脑海马超声匀浆，用放免法测β-AP的含量，结果如下：

表4：全麻素对老年性痴呆大鼠大脑海马组织匀浆β‐AP的影响(n＝10)

注：与模型组比较，**p＜0.01，***p＜0.001；与大麻二酚组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。

结果表明，与模型组比较，全麻素对实验性AD大鼠大脑组织中β-AP的升高有明显的抑制作用，经统计学处理差异有显著性(P＜0.00～0.001)。与大麻二酚组比较，全麻素对实验性AD大鼠大脑组织中β-AP的升高的抑制作用大于大麻二酚，经统计学处理差异有显著性(P＜0.05～0.01)。

应用实施例2全麻素对实验性血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆功能的影响。

选取体重260～290g雄性Wistar大鼠，置于避暗箱明箱内，当大鼠进入暗箱后，电击1秒，然后取出动物。次日用10％水合氯醛(0.3ml/100g)体重腹腔麻醉，固定于手术板上，先于头顶部开口，暴露第一颈椎横突翼小孔，用电烙铁烧灼双侧椎动脉，造成永久性闭塞，缝合皮肤。翻过大鼠，暴露并游离双侧颈总动脉，用微动脉夹夹闭双侧颈总动脉5min，再灌注1h，反复3次，缺血再灌，造成严重的学习记忆障碍，术后缝合肌肉、皮肤，肌注青霉素2天抗感染(朱愉主编.实验动物的疾病模型.天津科技翻译出版社.1997年304页)。实验用60只大鼠，随机分成6组，每组10只，即假手术对照组；模型对照组；大麻二酚组；本发明A、B、C组。术后第二天开始用药，连续给药10天，最后一次给药后1小时，将大鼠依次放入避暗箱明箱内，每次一只，记录5分钟内进入暗箱的次数、只数及潜伏期，结果如下。

表5：全麻素对血管性痴呆动物记忆功能障碍改善的影响

注：与模型组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；与大麻二酚组比较，△P＜0.05。

结果表明，与模型组比较，全麻素组5分钟内进入暗箱的次数明显降低，潜伏期明显增加，经统计学处理差异有显著性(P＜0.05～0.01)。与大麻二酚组比较，全麻素组5分钟内进入暗箱的次数低于大麻二酚组，潜伏期高于大麻二酚组。结论：全麻素对脑缺血引起的学习记忆功能下降有明显改善作用，效果优于大麻二酚。

应用实施例3全麻素对NaNO₂所致小鼠记忆障碍的影响

选取体重18～22g昆明种小鼠60只，雌雄各半，随机分为6组，每组10只，即正常对照组；模型对照组；大麻二酚组；本发明A、B、C组。各组灌胃给药7天后，除正常对照组外各组于训练后立即皮下注射NaNO₂ 120mg/kg，各组于训练后24小时末次给药，并于给药后1h进行跳台试验，记录动物犯错误的潜伏期和错误次数。结果如下：

表6：全麻素对NaNO₂所致小鼠记忆障碍的影响

注：与模型组比较，**p＜0.01，***p＜0.001；与大麻二酚组比较，△P＜0.05。

结果表明，与模型组比较，全麻素组对NaNO₂所致小鼠记忆障碍均有明显的改善作用，能明显减少小鼠犯错误的次数，延长小鼠犯错误的潜伏期，经统计学处理差异有显著性(P＜0.05～0.01)。与大麻二酚比较，全麻素对NaNO₂所致小鼠记忆障碍的改善作用、减少小鼠犯错误的次数及延长小鼠犯错误的潜伏期的作用均优于大麻二酚，经统计学处理差异有显著性(P＜0.05)。

通过上述实验，我们证实了全麻素对老年性痴呆症和脑缺血引起的空间认知障碍和学习记忆功能下降均有明显的改善效果，能增加老年性痴呆大鼠大脑皮层抑制性氨基酸甘氨酸及γ-氨基丁酸的含量，降低兴奋性谷氨酸的毒性，并能减少AD大鼠海马组织中β-AP的产生，对脑缺血引起的学习记忆功能下降也有明显的改善作用；还能明显改善NaNO₂所致小鼠记忆障碍。各作用效果均优于大麻二酚。

Claims (6)

1.全麻素在制备治疗或预防老年痴呆症的药物中的应用，所述的全麻素由0.3～99.7重量份的工业大麻火麻仁提取物和99.7～0.3重量份的工业大麻火麻素混匀制成。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的全麻素原料组成为工业大麻火麻仁提取物40份和工业大麻火麻素60份。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的工业大麻火麻仁提取物通过以下方法制备而成：

(1)取成熟的工业大麻火麻仁，经烘干、除杂，粉碎后备用；

(2)在20～85℃条件下，用乙醇对粉碎火麻仁料进行提取，乙醇浓度为95％～100％(V/V)，料液比为1:5～1:20；

(3)滤出浸提液，减压浓缩后即为工业大麻火麻仁提取物。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的工业大麻火麻素通过以下方法制备而成：

(1)取工业大麻的花、叶、麻糠或三者的混合物，经烘干、除杂、粉碎至10～60目；

(2)超临界二氧化碳萃取：将上述粉碎好的工业大麻原料投入超临界二氧化碳萃取装置中，控制萃取温度40～50℃，萃取时间30～90min，萃取压力25～35Mpa，二氧化碳流量40kg/h，分离釜出口收集萃取物；

(3)萃取物用0.2～10倍体积的95％～100％(V/V)的乙醇洗脱，洗脱次数为1～3次；

(4)收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥，粉碎后得工业大麻火麻素。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述的工业大麻的花、叶、麻糠三者混合物的优选配比为1:3:2。

6.根据权利要求1或2或3或4或5所述的应用，其特征在于：所述的工业大麻的品种优选为“云麻1号”。