CN105998194A - 一种抗血栓的药物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种抗血栓的药物。由0.3份～99.7重量份的工业大麻火麻仁提取物和99.7份～0.3重量份的工业大麻火麻素混匀制成。实验证明该药物具有明显的抗血栓作用，可明显抑制大鼠体内血栓的形成，对大鼠血小板聚集具有明显的抑制作用，能明显延长小鼠凝血时间，可降低大鼠全血粘度、血浆粘度和红细胞压积，且作用效果优于大麻二酚。具有良好的应用前景。

Description

一种抗血栓的药物
技术领域
本发明属于血栓治疗药物领域，具体地说是涉及一种以工业大麻为主要原料制备的抗血栓的药物组合物。
背景技术
大麻的种植历史悠久，古代大麻主要用于制作加工绳索、渔网、服装和造纸原料，以及油脂、食品等。随着社会的发展和进步，人们发现大麻中含有一种毒性成分(四氢大麻酚)可使人致幻成瘾，欧美许多国家曾在相当长时期内禁种大麻。由于大麻的经济利用价值高，到20世纪80年代，一些欧洲国家研究培育出了低毒大麻品种并获得推广种植。1990年欧共体率先紧急修订农业政策，废除了禁种大麻的禁令，开始恢复大麻的生产和研究。随后美国、加拿大、澳大利亚等国解除了大麻种植的禁令，全球大麻种植面积和纤维产量有了迅速增长，欧美国家对工业大麻的开发利用再次掀起，国际市场对生态大麻的需求也在迅速增长。根据大麻的经济属性，为充分利用其为人类服务，1988年联合国明确规定不具备提取毒性成分(四氢大麻酚THC)价值或直接作为毒品吸食的，专供工业用途的原料大麻，工业大麻(其生长期大麻花叶中的四氢大麻酚含量小于0.3％)，可以合法进行规模化种植与工业化开发利用。
工业大麻是独具特色、比较优势突出的生物资源。工业大麻与传统有毒大麻具有本质差别，工业大麻是一类无毒化的工业原料产品，具有极高的经济利用价值。到2003年末世界各国先后一共选育出25个工业大麻品种，而且欧盟的法、德、英等七国也都成为工业大麻主要种植生产国，以工业大麻纤维和麻籽及其花、叶、根、茎为原料进行系列产品研发与产业化综合开发，已在工业大麻初级加工主产品麻皮纤维、秆芯纤维、麻籽油脂和籽粕蛋白、药用标准化提取物实现产业化生产的基础上，进一步进行深加工利用，派生出来的产品已达到二万五千种以上，包含了人类的衣、食、住、行、用各大类产品。工业大麻产业的研究、开发和生产主要集中在欧洲、加拿大、美国等技术发达国家。工业大麻产业的发展，首先是从选育无毒或低毒化的工业大麻新品种开始的，并以此为基础实现了规模化的种植和高技术产业化的综合开发利用，形成了一个“新兴绿色产业群”和新型工业经济的快速增长点。
火麻仁为大麻干燥成熟果实，古代通常将火麻仁入药，食疗亦有记载。国家卫生部已将火麻仁纳入“既是药品又是食品”——“药食两用”名单。火麻仁的药性及药理为：甘，平。归脾、胃、大肠经。功能主治：润燥，滑肠，通淋，活血。治肠燥便秘，消渴，热淋，风痹，痢疾。月经不调，疥疮，癣癞。在医书中有详细疗效记载，如《本经》：“补中益气。”；《唐本草》：“主五劳。”；《肘后方》：“治大渴，日食数斗，小便赤涩者：麻子一升，水三升，煮三、四沸，取汁饮之。”；《日华子本草》：“补虚劳，长肌肉，下乳，止消渴，催生。治横逆产。”；《本草拾遗》：“下气，利小便，去风痹皮顽，炒令香捣碎，小便浸取汁服；妇人倒产吞二七枚。”；《食疗本草》：“取汁煮粥，去五脏风、润肺。治关节不通、发落，通血脉。”。
大麻的花叶均供药用。麻叶的药性及药理为：辛；有毒。归肺；膀胱；大肠经。功能主治：止痛，定喘，驱蛔。主治气喘，跌扑疼痛，蛔虫病。麻花的药性及药理为：苦；辛；性温；有毒。功能主治：祛风；活血；生发。主风病肢体麻木；遍身瘙痒；妇女经闭。
血栓性疾病是一种常见病，常表现为心肌梗死、缺血性脑梗死、静脉血栓栓塞。每年每千人中有1～3人发生不同形式的血栓性疾病，这是一类严重影响健康的疾病。目前临床上治疗血栓性疾病的药物主要分为抗血小板类药物、抗凝血药物和溶血栓药物。
抗血小板类药物具有抑制血小板的粘附、聚集和释放功能，从而防止血栓形成。抗血小板药物可以有效地防止心血管疾病的发生，并可延长患者的生存期，抗血小板药物在临床应用日益广泛。从天然活性物质中寻找新的抗血小板药物是筛选新型抗血小板聚集药物或药物前体的一个重要策略。
大麻二酚(CBD)是从大麻花叶中萃取的一种无毒的可用于药品、化妆品、保健食品的一种高附加值的酚类物质。目前，以色列、美国、英国等发达国家已用其做原料并开发出多种特效药品和化妆品。CBD是大麻中的非成瘾性成分，能阻碍THC对人体神经系统影响，并具有抗痉挛、抗风湿性关节炎、抗焦虑等药理活性。亦有在抗血栓疾病方面的报道，但单独使用大麻二酚(CBD)的治疗效果并不理想。因此开发新的活性高，毒副作用小的治疗药物显得非常必要。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种以工业大麻为主要原料制备的抗血栓的药物组合物。
本发明的目的通过以下技术方案予以实现。
除非另有说明，本发明所采用的百分数均为质量百分数。
一种抗血栓的药物，其特征在于，由下述重量份的原料混匀制成：工业大麻火麻仁提取物0.3份～99.7份，工业大麻火麻素99.7份～0.3份。
所述的抗血栓药物的原料组成优选为工业大麻火麻仁提取物40份和工业大麻火麻素60份。
其中，所述的工业大麻火麻仁提取物通过以下方法制备而成：
(1)取成熟的工业大麻火麻仁，经烘干、除杂，粉碎后备用；
(2)在20～85℃条件下，用乙醇对粉碎火麻仁料进行提取，乙醇浓度为95％～100％(V/V)，料液比为1:5～1:20；
(3)滤出浸提液，减压浓缩后即为工业大麻火麻仁提取物。
在用乙醇对工业大麻火麻仁进行提取时，可采用以下多种方式进行：如室温下浸提，每批物料浸提2次，每次7～10天；在60～85℃条件下，加热提取2次，每次1～3小时；超声波辅助提取，超声波频率30～60kHz，功率100～1000W，提取时间30～60min，浸提温度25～50℃；亦可采用微波辅助提取等其它现有技术。
所述的工业大麻火麻素通过以下方法制备而成：
(1)取工业大麻的花、叶、麻糠或三者的混合物，经烘干、除杂、粉碎至10～60目；
(2)超临界二氧化碳萃取：将上述粉碎好的工业大麻原料投入超临界二氧化碳萃取装置中，控制萃取温度40～50℃，萃取时间30～90min，萃取压力25～35Mpa，二氧化碳流量40kg/h，分离釜出口收集萃取物；
(3)萃取物用0.2～10倍体积的95％～100％(V/V)的乙醇洗脱，洗脱次数为1～3次；
(4)收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥，粉碎后即得工业大麻火麻素。
所述的工业大麻的花、叶、麻糠三者混合物的优选配比为1:3:2。
普通的麻叶、麻花均具有毒性(含有四氢大麻酚THC—毒品大麻的至幻物质)。为排除原料药的毒性，本发明优选采用云南生长的工业大麻品种——“云麻1号”的花、叶、麻糠和火麻仁作为原料。按我国相关法律文件规定，“云麻1号”只能在云南境内种植，并且其花、叶、麻糠只能在云南境内加工。
本发明的药物组合物可进一步制成不同的药物制剂，包括口服剂和针剂，其中口服剂包括胶囊剂、口服液、片剂、滴丸、颗粒剂等，针剂包括注射液剂型及注射用冻干粉针剂型等。在制备口服制剂时可选用的辅型剂可以是淀粉、糊精或环糊精、蔗糖、硬脂酸盐等常规充填剂。冻干粉针剂可以通过无菌喷雾干燥、低温真空干燥、冷冻干燥等方法制备。各制剂的后期制备工艺及设备均属制药领域的常规技术，本发明对此不作限定，故在此不予详述。
本发明的药物组合物具有明确的抗血栓作用。实验发现，该药物可明显抑制大鼠体内血栓的形成，对大鼠血小板聚集具有明显的抑制作用，能明显延长小鼠凝血时间，可降低大鼠全血粘度、血浆粘度和红细胞压积，且作用效果优于大麻二酚。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步的详细说明，但实施例并不是对本发明技术方案的限定。
实施例1
采用云南生长的工业大麻品种——“云麻1号”的花、叶、麻糠和火麻仁作为原料。取成熟的工业大麻火麻仁，经烘干、除杂，粉碎后备用；用乙醇对粉碎火麻仁料进行提取(在60～85℃条件下，加热提取2次，每次1～3小时)，乙醇浓度为95％～100％(V/V)，料液比为1:5～1:20；滤出浸提液，减压浓缩后即为工业大麻火麻仁提取物。
取工业大麻的花、叶、麻糠1:3:2质量比的混合物，经烘干、除杂、粉碎至10～60目；超临界二氧化碳萃取：将上述粉碎好的工业大麻原料投入超临界二氧化碳萃取装置中，控制萃取温度40～50℃，萃取时间30～90min，萃取压力25～35Mpa，二氧化碳流量40kg/h，分离釜出口收集萃取物；萃取物用0.2～10倍体积的95％～100％(V/V)的乙醇洗脱，洗脱次数为1～3次；收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥，粉碎后获得工业大麻火麻素。
取工业大麻火麻仁提取物40份，工业大麻火麻素60份，混匀，得本发明药物B。
实施例2
重复实施例1，有以下不同点：在用乙醇对工业大麻火麻仁进行提取时，室温下浸提，每批物料浸提2次，每次7～10天。取工业大麻的花、叶、麻糠1:1:1质量比的混合物作为工业大麻火麻素的提取原料。
取工业大麻火麻仁提取物0.3份，工业大麻火麻素99.7份，混匀，得本发明药物A。
实施例3
重复实施例1，有以下不同点：在用乙醇对工业大麻火麻仁进行提取时，采用超声波辅助提取，超声波频率30～60kHz，功率100～1000W，提取时间30～60min，浸提温度25～50℃。取工业大麻的花、叶、麻糠3:2:1质量比的混合物作为工业大麻火麻素的提取原料。
取工业大麻火麻仁提取物99.7份，工业大麻火麻素0.3份，混匀，得本发明药物C。
实施例4
取实施例1所得药物100克(过80目筛)，加入60克微晶纤维素，过80目筛三遍，混合均匀，喷入95％乙醇溶液，制软材，过40目筛制粒，60℃干燥半小时，分装于3#胶囊中，铝塑复合包装，制得抗血栓药物胶囊剂。
实施例5
取实施例2所得药物，加入物料量5～20％的干淀粉及1～5％的硬脂酸镁等，经混合，制粒，干燥，压片，制得抗血栓药物片剂。
实施例6
取实施例3所得药物，加入蔗糖水及常规量的防腐剂，稳定剂等辅料。过滤、灭菌，分装入10mL瓶中，制成抗血栓药物口服液。
实施例7
取实施例1所得药物，加入注射用水溶解，加入2.0‰活性炭，搅拌，过滤，继以用0.45μm、0.22μm微孔滤膜分级过滤，补充注射用水，分装于西林瓶中，冷冻干燥，回充高纯度氮气，加塞，压盖，包装，制得抗血栓药物注射液。
应用实施例1本发明对大鼠体内血栓形成的影响
选取体重180～220gWistar雄性大鼠50只，随机分为5组，每组10只，即本发明A、B、C组(20mg/kg)，大麻二酚组(20mg/kg)和空白对照组。各组动物连续给受试样品15天，第16天禁食12小时，给受试样品1小时后，用4％戊巴比妥钠42mg/kg腹腔注射麻醉，分离右侧颈总动脉及左颈外静脉，在聚乙烯管中放入一根长5cm已称重的七号丝线，以含肝素钠(50U/ml)的生理盐水溶液充满聚乙烯管，聚乙烯管的一端插入左颈外动脉，另一端插入右颈总动脉。打开夹闭的血管的动脉夹，使血液从右总静脉流入聚乙烯管后返回左颈外静脉，开放血流15min后迅速取出丝线称重，减去丝线重量即血栓湿重。
表1本发明对大鼠体内血栓形成的抑制作用
组别 剂量(mg/Kg) 血栓湿重(mg) 血栓抑制率(％)
空白对照组 等容量0.5％CMC‐Na 88.4±5.5 ‐
大麻二酚组 20 56.6±3.8*** 31.3
本发明A组 20 50.4±3.8*** 38.8
本发明B组 20 49.5±4.9*** 39.9
本发明C组 20 53.3±4.1*** 35.3
注：与空白对照组比较：***P＜0.001。
实验表明，本发明可明显抑制大鼠体内血栓的形成，效果优于大麻二酚。
应用实施例2本发明对大鼠血小板聚集的影响
选取体重180～220gWistar雄性大鼠50只，随机分为5组，每组10只，即本发明A、B、C组(20mg/kg)，大麻二酚组(20mg/kg)和空白对照组。各组动物连续给受试样品5天，第6天禁食12小时，给受试样品1小时后，用4％戊巴比妥钠42mg/kg腹腔注射麻醉。每只大鼠心脏取血3ml，以3.8％枸橼酸钠抗凝，650r/min离心10分钟，移出上层血浆即富血小板血浆(PRP)0.5ml，余下部分再以3000r/min离心10分钟，取上层清液即为贫血小板血浆(PPP)。用PPP调整PRP，使血小板数记数为60-90万/mm2，移取0.3ml调整好浓度的PRP至比浊管内，将比浊管放入用PPP调零后的血小板聚集仪中，加入10μl ADP诱导血小板聚集，10min内测定血小板聚集率。
表2本发明对大鼠血小板聚集率的影响
组别 剂量(mg/Kg) 血小板聚集率(％) 抑制率(％)
空白对照组 等容量0.5％CMC‐Na 76.37±5.62
大麻二酚组 20 59.04±5.67* 22.7
本发明A组 20 30.65±5.73***# 59.9
本发明B组 20 29.79±4.91***# 61.0
本发明C组 20 32.13±4.89***# 57.9
注：与空白对照组比较：*P＜0.05，***P＜0.001；与大麻二酚组比较：#P＜0.05。
实验表明，本发明对大鼠血小板聚集具有明显的抑制作用，效果优于大麻二酚。
应用实施例3本发明对小鼠凝血时间的影响
选取体重18～22g昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只，即本发明A、B、C组(20mg/kg)，大麻二酚组(20mg/kg)和空白对照组。各组动物分别于尾静脉注射相应的药物，15min后，眼眶取血，用玻片法测定凝血时间。
表3本发明对小鼠凝血时间的影响
组别 剂量(mg/Kg) 凝血时间(秒)
空白对照组 等容量生理盐水 58.52±10.95
大麻二酚组 20 393.80±44.98***
本发明A组 20 491.80±26.07***#
本发明B组 20 505.41±34.27***#
本发明C组 20 485.37±22.75***#
注：与空白对照组比较：***P＜0.001；与大麻二酚组比较：#P＜0.05。
实验表明，本发明能明显延长小鼠凝血时间，效果优于大麻二酚。
应用实施例4本发明对大鼠血液流变性的影响
选取体重180～220gWistar雄性大鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只，即本发明A、B、C组(20mg/kg)，大麻二酚组(20mg/kg)和空白对照组。各组动物水合氯醛(350mg/kg)麻醉，于舌下静脉注射给药，15min后，心脏采血5ml/只，以0.5％肝素钠抗凝，用血液流变学测试仪测定全血粘度、血浆粘度等指标。
表4本发明对大鼠血液流变性的影响
注：与空白对照组比较：**P＜0.01。
实验表明，本发明可降低大鼠全血粘度、血浆粘度和红细胞压积，效果优于大麻二酚。因此，本发明通过显著降低全血粘度、血浆粘度和红细胞积压，而有利于防治血栓形成。

Claims (6)

1.一种抗血栓的药物，其特征在于，由下述重量份的原料混匀制成：工业大麻火麻仁提取物0.3份～99.7份，工业大麻火麻素99.7份～0.3份。
2.根据权利要求1所述的抗血栓的药物，其特征在于：所述药物的原料组成优选为工业大麻火麻仁提取物40份和工业大麻火麻素60份。
3.根据权利要求1所述的抗血栓的药物，其特征在于：所述的工业大麻火麻仁提取物通过以下方法制备而成：
(1)取成熟的工业大麻火麻仁，经烘干、除杂，粉碎后备用；
(2)在20～85℃条件下，用乙醇对粉碎火麻仁料进行提取，乙醇浓度为95％～100％(V/V)，料液比为1:5～1:20；
(3)滤出浸提液，减压浓缩后即为工业大麻火麻仁提取物。
4.根据权利要求1所述的抗血栓的药物，其特征在于：所述的工业大麻火麻素通过以下方法制备而成：
(1)取工业大麻的花、叶、麻糠或三者的混合物，经烘干、除杂、粉碎至10～60目；
(2)超临界二氧化碳萃取：将上述粉碎好的工业大麻原料投入超临界二氧化碳萃取装置中，控制萃取温度40～50℃，萃取时间30～90min，萃取压力25～35Mpa，二氧化碳流量40kg/h，分离釜出口收集萃取物；
(3)萃取物用0.2～10倍体积的95％～100％(V/V)的乙醇洗脱，洗脱次数为1～3次；
(4)收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥，粉碎后即得工业大麻火麻素。
5.根据权利要求4所述的抗血栓的药物，其特征在于：所述的工业大麻的花、叶、麻糠三者混合物的优选配比为1:3:2。
6.根据权利要求1或2或3或4或5所述的抗血栓的药物，其特征在于：所述的工业大麻的品种优选为“云麻1号”。
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