CN103387873B - 烟用无花果浸膏的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种烟用无花果浸膏的制备方法，该方法包括无花果前处理、提取、酶解、醇沉、层析纯化等步骤。本发明节能环保、针对性强，实现无花果浸膏的分段式开发与利用，能同时得到五种不同的无花果浸膏，且制备的到的无花果浸膏香气浓郁，在卷烟中的应用效果理想。
Description
技术领域
本发明属于烟用香精香料技术领域，具体涉及一种烟用无花果浸膏的制备方法。
背景技术
随着人们对健康的不断重视，在烟用香精香料使用上，都在尝试由天然提取类替代化学合成类。天然植物中所含化学成分种类繁多，经研究发现，植物中的某些成分会给卷烟口感带来负面影响，即并非植物中所有成分均适合添加到卷烟当中。
无花果是一种无公害绿色健康食品，能补脾益胃，润肺利咽，润肠通便，同时还具有美容皮肤的作用，深受大家喜爱。目前无花果及其相关制品主要应用于食品领域，在烟用香精香料领域涉及并不多。其中两项中国专利（申请号200910306280.8和申请号201010200915.9）均利用微生物对无花果提取液进行生物发酵处理，来提升无花果浓缩液在卷烟中的应用效果，但该法较为粗放，未能对发酵液中对卷烟口感不利的化学成分（比如大部分的蛋白质、果胶、鞣质、大分子多糖等）进行分离、去除，也没有对无花果提取液进行分段式开发与利用。
发明内容
本发明目的在于克服现有技术中存在的不足，提供一种烟用无花果浸膏的制备方法，该法能制备五种烟用无花果浸膏，实现了无花果浸膏的分段式开发与利用，且制备的到的无花果浸膏香气浓郁，在卷烟中的应用效果理想。
上述目的是通过以下技术方案实现的：
一种烟用无花果浸膏的制备方法，包括以下步骤：
（1）前处理：将无花果切成厚度为3~7mm的片状，利用旋转式烘烤机在55~80℃条件下不断搅动烘烤8~16h，直至无花果片具有特征烤甜香；
（2）提取：向步骤（1）烘烤后的无花果片中按重量加入6~12倍的水，浸泡12~24h，然后在60-90℃条件下回流提取4~7h，得到无花果片和提取液的混合物；
（3）酶解：将无花果片和提取液的混合物放置在酶解罐中，按混合物重量的0.1~0.8%加入纤维素酶，在35~50℃、搅拌下酶解0.5~3h；纤维素酶酶解结束后，加热至90℃，持续2h，消除纤维素酶活性，然后冷却至室温；再按混合物重量的0.3~1.5%加入非淀粉多糖酶，在35~50℃、搅拌下酶解1~4h；非淀粉多糖酶酶解结束后，加热至90℃，持续2h，消除非淀粉多糖酶活性，然后冷却至室温，用滤布过滤，得到发酵液；
（4）醇沉：用反渗透膜将发酵液浓缩至相对密度1.08~1.20，然后向浓缩液中按重量加入2~4倍的70~95%乙醇，搅拌均匀，室温下放置18~24h，然后采用100nm陶瓷膜进行过滤处理，得到滤液，将滤液减压浓缩至无乙醇味，然后再加入1~4倍量的纯净水稀释，得到稀释液；
（5）层析纯化：在柱温35~45℃，上样量6500ml，洗脱速度70~80ml/min的条件下，利用聚丙烯酰胺凝胶柱对稀释液进行分离纯化并分别在0~20min、21~35min、36~50min、51~65min、66~80min五个时间段收集洗脱液，并分别减压浓缩至相对密度为1.18~1.20，得到五种烟用无花果浸膏。
优选地：步骤（2）中所述加水量为无花果片重量的8倍，浸泡时间为18小时，所述回流提取的温度为75℃，回流提取的时间为5h。
优选地：所述纤维素酶的活力为10000U/g，所述非淀粉多糖酶的活力为6000U/g。
进一步优选地：所述纤维素酶的加入量为混合物重量的0.5%，所述非淀粉多糖酶的加入量为混合物重量的0.9%。
优选地：步骤（4）中，用反渗透膜将发酵液浓缩至相对密度1.12，然后向浓缩液中加入3倍80%乙醇，搅拌均匀，室温下放置18h。
通过对以上五种无花果浸膏产品进行卷烟应用效果评价，其中洗脱0~20min分离纯化的无花果浸膏可增加卷烟的刺激性和干燥感；洗脱21~35min分离纯化的无花果浸膏可增加卷烟香气浓度，降低烟气的刺激性；洗脱36~50min分离纯化的无花果浸膏可增加卷烟烟气的甜润感；洗脱51~65min分离纯化的无花果浸膏可掩盖烟叶的木质气味，改善了口腔余味；洗脱66~80min分离纯化的无花果浸膏能够烘托烟草本香，提升卷烟香气质量。
本发明的优点是：节能环保、针对性强，实现无花果浸膏的分段式开发与利用，同时得到五种不同的无花果浸膏，且制备的到的无花果浸膏香气浓郁，在卷烟中的应用效果理想。
具体实施方式
实施例1：
一种烟用无花果浸膏的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）前处理：将无花果切成厚度为3mm的片状，利用旋转式烘烤机在60℃条件下不断搅动烘烤12h，直至无花果片具有特征烤甜香；
（2）提取：向步骤（1）烘烤后的无花果片中按重量加入6倍的纯净水，浸泡18h，然后在90℃条件下回流提取4h，得到无花果片和提取液的混合物；
（3）酶解：将无花果片和提取液的混合物放置在酶解罐中，按混合物重量的0.5%加入纤维素酶，在50℃、搅拌（60r/min）下酶解3h；纤维素酶酶解结束后，加热至90℃，持续2h，消除纤维素酶活性，然后冷却至室温；再按混合物重量的1%加入非淀粉多糖酶，在45℃、搅拌（90r/min）下酶解2h；非淀粉多糖酶酶解结束后，加热至90℃，持续2h，消除非淀粉多糖酶活性，然后冷却至室温，用滤布（400目）过滤，得到发酵液；
（4）醇沉：用反渗透膜（RO膜）将发酵液浓缩至相对密度1.08，然后向浓缩液中按重量加入2倍的70%乙醇（体积浓度），搅拌均匀，室温下放置18h，以除去失活的生物酶、淀粉、蛋白质等大分子物质；然后采用100nm陶瓷膜进行过滤处理，进一步去除提取物中的大分子物质，得到滤液，将滤液减压浓缩至无乙醇味，然后再加入3倍量的纯净水稀释，得到稀释液。
（5）层析纯化：在柱温40℃，上样量6500ml，洗脱速度80ml/min的条件下，利用聚丙烯酰胺凝胶柱对稀释液进行分离纯化并分别在0~20min、21~35min、36~50min、51~65min、66~80min五个时间段收集洗脱液，并分别减压浓缩至相对密度为1.18~1.20，得到五种烟用无花果浸膏。
实施例2
一种烟用无花果浸膏的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）前处理：将无花果切成厚度为7mm的片状，利用旋转式烘烤机在55℃条件下不断搅动烘烤16h，直至无花果片具有特征烤甜香；
（2）提取：向步骤（1）烘烤后的无花果片中按重量加入8倍的纯净水，浸泡12h，然后在60℃条件下回流提取6h，得到无花果片和提取液的混合物；
（3）酶解：将无花果片和提取液的混合物放置在酶解罐中，按混合物重量的0.8%加入纤维素酶，在35℃、搅拌下酶解3h；纤维素酶酶解结束后，加热至90℃，持续2h，消除纤维素酶活性，然后冷却至室温；再按混合物重量的0.3%加入非淀粉多糖酶，在40℃、搅拌下酶解4h；非淀粉多糖酶酶解结束后，加热至90℃，持续2h，消除非淀粉多糖酶活性，然后冷却至室温，用滤布过滤，得到发酵液；
（4）醇沉：用反渗透膜（RO膜）将发酵液浓缩至相对密度1.10，然后向浓缩液中按重量加入4倍的80%乙醇（体积浓度），搅拌均匀，室温下放置18h，以除去失活的生物酶、淀粉、蛋白质等大分子物质；然后采用100nm陶瓷膜进行过滤处理，进一步去除提取物中的大分子物质，得到滤液，将滤液减压浓缩至无乙醇味，然后再加入4倍量的纯净水稀释，得到稀释液。
（5）层析纯化：在柱温45℃，上样量6500ml，洗脱速度75ml/min的条件下，利用聚丙烯酰胺凝胶柱对稀释液进行分离纯化并分别在0~20min、21~35min、36~50min、51~65min、66~80min五个时间段收集洗脱液，并分别减压浓缩至相对密度为1.18~1.20，得到五种烟用无花果浸膏。
实施例3
一种烟用无花果浸膏的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）前处理：将无花果切成厚度为5mm的片状，利用旋转式烘烤机在70℃条件下不断搅动烘烤10h，直至无花果片具有特征烤甜香；
（2）提取：向步骤（1）烘烤后的无花果片中按重量加入6倍的纯净水，浸泡18h，然后在75℃条件下回流提取4h，得到无花果片和提取液的混合物；
（3）酶解：将无花果片和提取液的混合物放置在酶解罐中，按混合物重量的0.1%加入纤维素酶，在50℃、搅拌下酶解3h；纤维素酶酶解结束后，加热至90℃，持续2h，消除纤维素酶活性，然后冷却至室温；再按混合物重量的1.2%加入非淀粉多糖酶，在40℃、搅拌下酶解1h；非淀粉多糖酶酶解结束后，加热至90℃，持续2h，消除非淀粉多糖酶活性，然后冷却至室温，用滤布过滤，得到发酵液；
（4）醇沉：用反渗透膜（RO膜）将发酵液浓缩至相对密度1.12，然后向浓缩液中按重量加入4倍的95%乙醇（体积浓度），搅拌均匀，室温下放置18h，以除去失活的生物酶、淀粉、蛋白质等大分子物质；然后采用100nm陶瓷膜进行过滤处理，进一步去除提取物中的大分子物质，得到滤液，将滤液减压浓缩至无乙醇味，然后再加入2倍量的纯净水稀释，得到稀释液。
（5）层析纯化：在柱温45℃，上样量6500ml，洗脱速度70ml/min的条件下，利用聚丙烯酰胺凝胶柱对稀释液进行分离纯化并分别在0~20min、21~35min、36~50min、51~65min、66~80min五个时间段收集洗脱液，并分别减压浓缩至相对密度为1.18~1.20，得到五种烟用无花果浸膏。
实施例4
一种烟用无花果浸膏的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）前处理：将无花果切成厚度为3mm的片状，利用旋转式烘烤机在60℃条件下不断搅动烘烤8h，直至无花果片具有特征烤甜香；
（2）提取：向步骤（1）烘烤后的无花果片中按重量加入10倍的纯净水，浸泡14h，然后在80℃条件下回流提取6h，得到无花果片和提取液的混合物；
（3）酶解：将无花果片和提取液的混合物放置在酶解罐中，按混合物重量的0.6%加入纤维素酶，在35℃、搅拌下酶解0.5h；纤维素酶酶解结束后，加热至90℃，持续2h，消除纤维素酶活性，然后冷却至室温；再按混合物重量的1 %加入非淀粉多糖酶，在50℃、搅拌下酶解3h；非淀粉多糖酶酶解结束后，加热至90℃，持续2h，消除非淀粉多糖酶活性，然后冷却至室温，用滤布过滤，得到发酵液；
（4）醇沉：用反渗透膜（RO膜）将发酵液浓缩至相对密度1.20，然后向浓缩液中按重量加入2倍的95%乙醇（体积浓度），搅拌均匀，室温下放置24h，以除去失活的生物酶、淀粉、蛋白质等大分子物质；然后采用100nm陶瓷膜进行过滤处理，进一步去除提取物中的大分子物质，得到滤液，将滤液减压浓缩至无乙醇味，然后再加入1倍量的纯净水稀释，得到稀释液。
（5）层析纯化：在柱温35℃，上样量6500ml，洗脱速度70ml/min的条件下，利用聚丙烯酰胺凝胶柱对稀释液进行分离纯化并分别在0~20min、21~35min、36~50min、51~65min、66~80min五个时间段收集洗脱液，并分别减压浓缩至相对密度为1.18~1.20，得到五种烟用无花果浸膏。
实施例5
一种烟用无花果浸膏的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）前处理：将无花果切成厚度为6mm的片状，利用旋转式烘烤机在70℃条件下不断搅动烘烤8h，直至无花果片具有特征烤甜香；
（2）提取：向步骤（1）烘烤后的无花果片中按重量加入8倍的纯净水，浸泡18h，然后在75℃条件下回流提取5h，得到无花果片和提取液的混合物；
（3）酶解：将无花果片和提取液的混合物放置在酶解罐中，按混合物重量的0.5%加入纤维素酶（活力为10000U/g），在40℃、搅拌下酶解2h；纤维素酶酶解结束后，加热至90℃，持续2h，消除纤维素酶活性，然后冷却至室温；再按混合物重量的0.9%加入非淀粉多糖酶（活力为6000U/g），在40℃、搅拌下酶解1.5h；非淀粉多糖酶酶解结束后，加热至90℃，持续2h，消除非淀粉多糖酶活性，然后冷却至室温，用滤布过滤，得到发酵液；
（4）醇沉：用反渗透膜（RO膜）将发酵液浓缩至相对密度1.12，然后向浓缩液中按重量加入3倍的80%乙醇（体积浓度），搅拌均匀，室温下放置18h，以除去失活的生物酶、淀粉、蛋白质等大分子物质；然后采用100nm陶瓷膜进行过滤处理，进一步去除提取物中的大分子物质，得到滤液，将滤液减压浓缩至无乙醇味，然后再加入2倍量的纯净水稀释，得到稀释液。
（5）层析纯化：在柱温40℃，上样量6500ml，洗脱速度80ml/min的条件下，利用聚丙烯酰胺凝胶柱对稀释液进行分离纯化并分别在0~20min、21~35min、36~50min、51~65min、66~80min五个时间段收集洗脱液，并分别减压浓缩至相对密度为1.18~1.20，得到五种烟用无花果浸膏。
将实施例1~5得到的五种无花果浸膏进行卷烟应用效果评价，其中洗脱0~20min分离纯化的无花果浸膏可增加卷烟的刺激性和干燥感；洗脱21~35min分离纯化的无花果浸膏可增加卷烟香气浓度，降低烟气的刺激性；洗脱36~50min分离纯化的无花果浸膏可增加卷烟烟气的甜润感；洗脱51~65min分离纯化的无花果浸膏可掩盖烟叶的木质气味，改善口腔余味；洗脱66~80min分离纯化的无花果浸膏能烘托烟草本香，提升卷烟香气质量。
Claims (5)
1.一种烟用无花果浸膏的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）前处理：将无花果切成厚度为3～7mm的片状，利用旋转式烘烤机在55～80℃条件下不断搅动烘烤8～16h，直至无花果片具有特征烤甜香；
（2）提取：向步骤（1）烘烤后的无花果片中按重量加入6～12倍的水，浸泡12～24h，然后在60-90℃条件下回流提取4～7h，得到无花果片和提取液的混合物；
（3）酶解：将无花果片和提取液的混合物放置在酶解罐中，按混合物重量的0.1～0.8%加入纤维素酶，在35～50℃、搅拌下酶解0.5～3h；纤维素酶酶解结束后，加热至90℃，持续2h，消除纤维素酶活性，然后冷却至室温；再按混合物重量的0.3～1.5%加入非淀粉多糖酶，在35～50℃、搅拌下酶解1～4h；非淀粉多糖酶酶解结束后，加热至90℃，持续2h，消除非淀粉多糖酶活性，然后冷却至室温，用滤布过滤，得到发酵液；
（4）醇沉：用反渗透膜将发酵液浓缩至相对密度1.08～1.20，然后向浓缩液中按重量加入2～4倍的70～95%乙醇，搅拌均匀，室温下放置18～24h，然后采用100nm陶瓷膜进行过滤处理，得到滤液，将滤液减压浓缩至无乙醇味，然后再加入1～4倍量的纯净水稀释，得到稀释液；
（5）层析纯化：在柱温35～45℃，上样量6500ml，洗脱速度70～80ml/min的条件下，利用聚丙烯酰胺凝胶柱对稀释液进行分离纯化并分别在0～20min、21～35min、36～50min、51～65min、66～80min五个时间段收集洗脱液，并分别减压浓缩至相对密度为1.18～1.20，得到五种烟用无花果浸膏。
2.根据权利要求1所述的烟用无花果浸膏的制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述加水量为无花果片重量的8倍，浸泡时间为18小时，所述回流提取的温度为75℃，回流提取的时间为5h。
3.根据权利要求1所述的烟用无花果浸膏的制备方法，其特征在于：所述纤维素酶的活力为10000U/g，所述非淀粉多糖酶的活力为6000U/g。
4.根据权利要求3所述的烟用无花果浸膏的制备方法，其特征在于：所述纤维素酶的加入量为混合物重量的0.5%，所述非淀粉多糖酶的加入量为混合物重量的0.9%。
5.根据权利要求1所述的烟用无花果浸膏的制备方法，其特征在于：步骤（4）中，用反渗透膜将发酵液浓缩至相对密度1.12，然后向浓缩液中加入3倍80%乙醇，搅拌均匀，室温下放置18h。
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