CN1778211A

CN1778211A - 一种添加到卷烟中的天然植物提取物及提取方法及在卷烟中的应用

Info

Publication number: CN1778211A
Application number: CN 200410052448
Authority: CN
Inventors: 李忠
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2004-11-26
Filing date: 2004-11-26
Publication date: 2006-05-31

Abstract

本发明涉及一种添加到卷烟中的天然植物提取物及提取方法及在卷烟中的应用，其在烟丝中添加从豆科植物补骨脂中获得的天然植物提取物，其含有多种对人体有益的活性成分。提取物可采用有机溶剂提取、渗漉法提取或浸提，再重结晶获得，而后配成一定浓度提取液喷洒或混合至普通烟丝后，采用常规卷烟工艺制成添加天然植物提取物的功能性卷烟。采用本发明的天然植物提取物的香烟，在烟支燃烧的同时能降低焦油量，自由基清除率和亚硝胺含量大幅降低，明显抑制苯并芘的致突变性，从而及时地预防和缓解吸烟引起的咳嗽、气喘、瘀痰等各种不良反应，减少吸烟对人体的危害，同时能与烟香协调，增强烟香、烟气丰满度，口感甜润，保持了香烟原有的气味和风格。

Description

一种添加到卷烟中的天然植物提取物及提取方法及在卷烟中的应用

技术领域

本发明涉及一种卷烟添加物及提取方法及在卷烟中的应用。

背景技术

吸烟会对人体健康造成危害，大量资料表明，在卷烟烟气中含有一些有害物质，可导致人体癌症、动脉血栓性疾病、免疫功能降低、呼吸道疾病、性功能减退等方面的疾病，但是烟草又是一种嗜好性消费品，在全世界每个国家都有着众多的消费者，于是有关人员一直致力于研究烟草的降焦减害技术。长期以来，国外对降焦减害的研究主要是物理方式，而我国多年来致力于研究中草药降低香烟中的有害物质，开发含有对人体健康有益的微量元素和中药成分的复合添加剂，使卷烟具有消炎、止咳、顺气等方面的功效，使吸烟者在吸烟过程中能吸入中草药中有益的成分，以削弱或减少香烟的危害。实验证明其效果更优于物理降焦减害，是一种更为绿色、更为环保的解决之道。

我国中草药资源丰富，有着悠久的中医药研究历史。选择药物烟剂作为防治疾病的方法，在我国古代医药文献中早有记载。受祖国医药学中“烟熏疗法”等理论启发，向烟草中添加中草药提取物可能开发出具有降低毒害，风格独特的“中式卷烟”。提取物组分可与自由基络合成∏络合物，形成络合吸附，被吸附的大分子化合物均可在烟丝表面作短暂的停留而获得再次燃烧的机会，有效降低了不完全燃烧物的生成。

进一步发挥中国传统中草药优势，赋予了中式卷烟更鲜明的特色，将是值得加倍重视和深入研究的。

补骨脂是我国传统的中草药，为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实。补骨脂性辛、苦、温。归肾、脾经。其功能主治为：温肾助阳，平喘止咳、纳气，止泻。用于阳痿遗精，遗尿尿频，腰膝冷痛，肾虚作喘，五更泄泻；外用治白癜风，斑秃。临床用于治疗支气管哮喘、遗尿、外阴白斑、妇科出血疾患、白细胞减少症、银屑病、扁平疣、寻常疣、尖锐湿疣、白癜风、斑秃、慢性湿疹、皮下硬结。其已知的化学成分有：1.呋喃香豆素类：补骨脂素(psoralen)，异补骨脂素(isopsoralen)，补骨脂定(psoralidin)，异补骨脂定(iso-psoralidin)，双羟异补骨脂定(corylidin)，Bavacoumestan A，BavacoumestanB，sophoracoumestan等；2.黄酮类：补骨脂甲素(bavachin)，异补骨脂甲素(isobavachin)，补骨脂甲素甲醚(bavachinin)，补骨脂宁(corylin)，新补骨脂异黄酮(neobravaisoflavone)，补骨脂乙素(isobavachalcone)，补骨脂查耳酮(bavachalcone)，新补骨脂查耳酮(neobavachalcone)，异新补骨脂查耳酮(isoneobavachalcone)，补骨脂呋喃查耳酮(bakuchalcone)等；3.单萜酚类成分：补骨脂酚(bakuchiol)等；4.脂肪类：甘油三酯(triacylglycerols)，游离脂肪酸(freefatty acids)，甘油二酯(diacylglycerols)，甘油单酯(monoacylglycerols)，烃类(hydrocarbons)，腊脂(waxesters)，极性类脂(polar-lipids)等；5.其它：三十烷(triacontane)，棉子糖(affinose)，葡萄糖(glucose)，豆甾醇(stigmasterol)，β-谷甾醇-D-葡萄糖苷(β-sitosterol-D-glucoside)等。

补骨脂的药理作用如下：

(一)对呼吸系统的作用

1.1补骨脂对组织胺引起的气管收缩有明显舒张作用；

1.2补骨脂对支气管哮喘有一定的治疗作用；

1.3对支气管平滑肌，补骨脂酒浸膏、补骨脂素有舒张作用，补骨脂定亦有收缩作用；

(二)对心血管系统的作用

2.1补骨脂冲剂对垂体后叶素所致小鼠急性心肌缺血有显著的保护作用；

2.2补骨脂的有效成分补骨脂乙素具有强心和扩张冠状动脉、增加冠脉血流量的作用；对人体月经过多、子宫出血、鼻、牙龈出血等多种出血症均有止血作用；

(三)促进皮肤色素增生的作用

3.195％乙醇的补骨脂提取物对对酪氨酸酶有明显的激活作用；

3.2补骨脂素和异补骨脂素能促进皮肤黑色素的合成，并使之沉积于皮下，临床上利用此作用治疗白癜风以恢复白斑处的皮肤颜色；

3.3异补骨脂素加黑光照射有抗皮肤移植排斥效应的作用；

(四)抗肿瘤作用

4.1补骨脂素对癌细胞有杀伤作用；

4.2补骨脂中多种成分均有抗肿瘤作用；补骨脂素和异补骨脂素还对小鼠肺泡上皮的增生有明显的抑制作用，而肺泡上皮细胞的重度异型增生可演变为肺泡上皮细胞癌和早期癌变，因此有学者认为补骨脂有减轻肺部癌前病变演化的可能；

4.3补骨脂素对白血病细胞有较强的杀伤作用，且杀伤作用对急性淋巴细胞型白血病细胞与急性粒细胞型白血病细胞无明显差异；

(五)抗菌作用

5.1补骨脂对金黄色葡萄球菌、结核杆菌、金枝杆菌及多种霉菌有抑制作用；

5.2补骨脂提取物对葡萄球菌及抗青霉素的葡萄球菌均有抑制作用，其乙醇提取物对红色毛癣菌、石膏样小孢子菌等有抑制作用；

5.3补骨脂素及异补骨脂素对某些细菌如狗小孢子菌、石膏样小孢子菌、铁锈色小孢子菌、红色毛癣菌、须癣毛癣菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、乙型链球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌等在加黑光照射下有较强抑菌作用；

(六)补骨脂提取物有显著增强机体免疫功能的作用。

发明内容

本发明的第一个目的在于，提供一种添加到卷烟烟丝中的含有多种生物活性成分的天然植物提取物，该天然植物提取物可降低卷烟对人体的危害，从而可提高卷烟的安全性。

本发明的第二个目的在于，提供上述天然植物提取物的提取方法。

本发明的第三个目的在于，把上述天然植物提取物应用于卷烟。

本发明的第一个目的是这样实现的：

提供一种添加到卷烟中的天然植物提取物，其中：该天然植物提取物是从豆科植物补骨脂中提取获得。

本发明的天然植物提取物的主要成分为香豆素类和黄酮类化合物，另外还含有单萜酚类、脂类、挥发油、树脂、皂苷等成分。

本发明的天然植物提取物的主要活性成分为下列结构式(1)，(2)，另外还含有天然抗氧化活性成分，结构式为(3)，(4)。

本发明的天然植物提取物加入烟丝中的生物活性成分的含量为0.005％～1％。

本发明的第二个目的是这样实现的：

提供一种所述天然植物提取物的提取方法，其中：先取天然植物补骨脂以制成粗粉，将该粗粉采用有机溶剂提取、渗漉法提取或浸提，再重结晶获得该提取物。

本发明提取物中活性成分的提取方法有如下七种：

方法一：新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量50％～90％乙醇溶液用渗漉法提取，浸泡过夜，渗漉液减压回收至无醇味，放置过夜，倾去上清液，取其黑色粘稠物，加入20倍量甲醇分6～7次加热回流溶解，趁热过滤，所得滤液静置过夜，抽滤，即得粗结晶，再用适量甲醇溶解，加少许活性碳，加热回流5分钟左右，趁热抽滤，滤液放冷即析出结晶，80℃以下干燥即得。

方法二：取新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量50％～90％乙醇溶液用渗漉法提取，提取两次，每次1～24小时，把提取液滤过，回收溶剂后浓缩成膏状，再用超临界二氧化碳萃取分离，得到结晶物再精制或重结晶，即得。

方法三：取新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，用超临界二氧化碳提取，得到结晶物再精制或重结晶，即得。

方法四：新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量50％～90％乙醇冷浸提取三次(72小时，24小时，24小时)合并提取液，浓缩回收溶剂至无醇味后加适量水使混溶，再加乙酸乙酯萃取3次，萃取液经回收溶剂至干，得总浸膏，进行柱层析分离，吸附剂为硅胶H，采用石油醚-丙酮(20∶1)洗脱，寻找含有活性成分的流份，得到粗品，然后再用石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，用乙醇重结晶即得。

方法五：新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量50％～90％乙醇冷浸提取三次(72小时，24小时，24小时)合并提取液，回收溶剂至无醇后加水使混溶，再加乙酸乙酯萃取3次，取乙酸乙酯液用1％NaHCO₃水溶液萃取后回收溶剂至干，得总浸膏，进行柱层析分离，吸附剂为硅胶H，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，收集合并相同流分，回收溶剂即得。

方法六：新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，用石油醚、氯仿依次浸提三次(72小时，24小时，24小时)，浸提液减压回收溶剂，将氯仿提取物进行硅胶柱层析，以不同比例的石油醚-乙酸乙酯混合溶液梯度洗脱，收集合并相同流分，回收溶剂即得。

方法七：新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，以20U/g药材的量加入纤维素酶，加H₂SO₄调PH4.5，充分搅拌后于30～50℃恒温水浴上加热3～5小时，放冷至室温，所得酶解物用0.1mol/L NaOH调PH至中性，加10倍量50％～90％乙醇，浸泡，所得浸提液过滤，滤渣洗涤，所得洗液与滤液合并，回收乙醇，所得残渣用乙醇溶解过滤，回收乙醇至干，即得干膏。

本发明的第三个目的是这样实现的：

提供一种上述天然植物提取物在卷烟中的应用，其中：在香烟烟丝中添加该天然植物提取物。

本发明的提取物与50％～95％乙醇溶液配成0.1％浓度的提取液，将该提取液按提取物的加入量为烟丝重量的0.025％～5％的比例均匀喷洒在普通烟丝上。由专业评香师评吸后发现提取物以0.1％的浓度加入烟丝后，能与烟香谐调，提高烟香气质，使烟气细腻、圆润甜醇，口感舒畅，余味干净。

补骨脂的提取物降低香烟危害的原理：

把补骨脂提取物按一定浓度添加到烟丝中，当接火燃烧后，利用香烟在抽吸燃烧过程中从燃烧头到过滤嘴之间存在温度越来越底的温度梯度，使补骨脂中的香豆素类、黄酮类、单萜酚类等有效成份在还未被高温破坏之前就随主流烟气一起吸入人体，从而发挥其药理作用。

添加了本发明天然提取物的低危害香烟保持了香烟原有的香味和风格，达到了“烟香”、“药香”、“香料香”三香合一、协调一致、增强烟香、口感醇和、余味舒适的理想效果。本发明的补骨脂低危害香烟在烟支燃烧的同时能降低焦油量、还可降低自由基、亚硝胺的含量、明显抑制苯并芘的致突变性，及时地预防和缓解吸烟引起的咳嗽、气喘、瘀痰等各种不良反应。

为了证实烟丝中补骨脂的有效成分可随烟气进入人体，使用玻璃纤维滤片收集卷烟主流烟气中的中草药有效成分，滤片中的有效成分用适宜的溶剂萃取出来，然后采用反相高效液相色法对有效成分进行分析测定，从而计算出转移率，结果表明：有效成分含量为18.55μg/支的卷烟，其烟气中有效成分含量为5.22μg/支，转移率为28.14％以上。进一步的实验表明：慢性吸实验烟小鼠的血清中也有有效成分存在，说明本发明的天然植物提取物的主要成分能通过口腔等吸收入血液中。

补骨脂是一种传统的中药，其制成的补骨脂低危害香烟，对人体无任何毒副作用。

研究结果表明：本发明的卷烟添加物对挥发性亚硝胺及烟草特有的亚硝胺合成有明显阻断作用；对苯并[a]芘的致突变性有显著的抑制作用。卷烟添加剂在高于应用浓度1000倍时，动物和体外细胞试验均未观察到毒副作用，表明本发明的卷烟添加物安全无毒。

本申请人还对本发明的天然植物提取物应用于卷烟中可以降低卷烟危害的作用进行了研究，对添加了本发明提取物的卷烟进行了系统的烟气化学分析和生物学评价。结果表明：与未添加本发明提取物的同品质对照卷烟相比，能显著缓解吸烟所致咳嗽、气喘、瘀痰等不良反应，明显降低呼吸道疾病的发病率；自由基水平减少30％，对小鼠的急性毒性反应明显减轻，表现在小鼠的半数致死量增加了48％，半数死亡时间为同品质对照烟的1.48倍，特别是当吸烟对照组烟组动物全部死亡时，添加提取物烟组动物存活率高达85％以上；小鼠的急性毒性反应明显减轻，表现在动物的存活时间延长1倍以上，致死吸烟量显著增加；肺组织病理观察结果表明：同为吸烟急性或慢性致死动物，添加提取物烟组肺组织损伤程度明显减轻，表现在淋巴细胞浸润、肺泡壁增厚、出血、大支气管上皮变薄、肺囊泡和大血管及大支气管管周水肿等多项病理损伤指标均明显好于对照烟组；添加提取物烟组生殖毒性明显降低，显著抑制卷烟凝聚物所致姐妹染色体交换和骨髓微核发生率；对SHE细胞和BEAS-2B细胞的毒性作用明显降低，半数细胞存活剂量为同品质对照烟的1.7和4倍；在添加提取物卷烟烟气中能被P₄₅₀酶活化的有害物质含量明显低于同品质对照烟；诱发细胞产生的ROS的水平明显降低，表现在诱发细胞内H₂O₂的能力仅为同品质对照烟的1/45，诱发细胞内O₂ ^-增高的能力仅为同品质对照烟的1/11，表明对细胞的氧化损伤显著低于同品质对照烟；诱发BEAS-2B细胞内外产生的ROS水平均明显低于同品质空白烟，提示添加提取物烟组烟气中的细胞毒素含量比空白烟明显减少。对SHE细胞的毒性作用明显降低，半数细胞存活剂量为空白烟的2倍，诱发SHE细胞转化的能力比空白烟降低约1倍；添加植物提取物卷烟烟气诱发的细胞氧化、细胞膜损伤、染色体基因突变和细胞转化作用明显降低。

以上研究结果表明：应用本发明的天然植物提取物可显著降低卷烟的危害，明显提高卷烟的安全性。

具体实施方式

下文，将详细描述本发明。

实施例一

新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量50％乙醇溶液用渗漉法提取，浸泡过夜，渗漉液减压回收至无醇味，放置过夜，倾去上清液，取其黑色粘稠物，加入20倍量甲醇分6次加热回流溶解，趁热过滤，所得滤液静置过夜，抽滤，即得粗结晶，再用适量甲醇溶解，加少许活性碳，加热回流4.5分钟，趁热抽滤，滤液放冷即析出结晶，80℃以下干燥即得。

取以上所得提取物0.25g加入至1000ml浓度为50％的乙醇溶液中，即制成0.025％浓度的提取液。把该提取液随表香一起均匀喷洒在999.75g普通烟丝上晾干，再用常规卷烟工艺即制成低危害香烟。所述天然植物提取物添加到烟丝中的加入量为烟丝重量的0.025％，其中生物活性成分的含量为0.005％。一支香烟重0.7g，每支保健烟含天然植物提取物175μg。

实施例二

新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量60％乙醇溶液用渗漉法提取，浸泡过夜，渗漉液减压回收至无醇味，放置过夜，倾去上清液，取其黑色粘稠物，加入20倍量甲醇分7次加热回流溶解，趁热过滤，所得滤液静置过夜，抽滤，即得粗结晶，再用适量甲醇溶解，加少许活性碳，加热回流5分钟，趁热抽滤，滤液放冷即析出结晶，80℃以下干燥即得。

取以上所得提取物1g加入至1000ml浓度为60％的乙醇溶液中，即制成0.1％浓度的提取液。把该提取液随表香一起均匀喷洒在399g普通烟丝上晾干，再用常规卷烟工艺即制成低危害香烟。所述天然植物提取物添加到烟丝中的加入量为烟丝重量的0.25％，其中生物活性成分的含量为0.05％。一支香烟重0.7g，每支保健烟含天然植物提取物1750μg。

实施例三

新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量90％乙醇溶液用渗漉法提取，浸泡过夜，渗漉液减压回收至无醇味，放置过夜，倾去上清液，取其黑色粘稠物，加入20倍量甲醇分7次加热回流溶解，趁热过滤，所得滤液静置过夜，抽滤，即得粗结晶，再用适量甲醇溶解，加少许活性碳，加热回流5.5分钟，趁热抽滤，滤液放冷即析出结晶，80℃以下干燥即得。

取以上所得提取物50g加入至950ml浓度为95％的乙醇溶液中，即制成5％浓度的提取液。把该提取液随表香一起均匀喷洒在950g普通烟丝上晾干，再用常规卷烟工艺即制成低危害香烟。所述天然植物提取物添加到烟丝中的加入量为烟丝重量的5％，其中生物活性成分的含量为1％。一支香烟重0.7g，每支保健烟含天然植物提取物35000μg。

实施例四

取新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量50％乙醇溶液用渗漉法提取，提取两次，每次1小时，把提取液滤过，回收溶剂后浓缩成膏状，再用超临界二氧化碳萃取分离，得到结晶物再精制或重结晶，即得。

实施例五

取新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量70％乙醇溶液用渗漉法提取，提取两次，每次12小时，把提取液滤过，回收溶剂后浓缩成膏状，再用超临界二氧化碳萃取分离，得到结晶物再精制或重结晶，即得。

取以上所得提取物1g加入至1000ml浓度为65％的乙醇溶液中，即制成0.1％浓度的提取液。把该提取液随表香一起均匀喷洒在199g普通烟丝上晾干，再用常规卷烟工艺即制成低危害香烟。所述天然植物提取物添加到烟丝中的加入量为烟丝重量的0.5％，其中生物活性成分的含量为0.1％。一支香烟重0.7g，每支保健烟含天然植物提取物3500μg。

实施例六

取新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量90％乙醇溶液用渗漉法提取，提取两次，每次24小时，把提取液滤过，回收溶剂后浓缩成膏状，再用超临界二氧化碳萃取分离，得到结晶物再精制或重结晶，即得。

实施例七

取新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，用超临界二氧化碳提取，得到结晶物再精制或重结晶，即得。

实施例八

取以上所得提取物1g加入至1000ml浓度为70％的乙醇溶液中，即制成0.1％浓度的提取液。把该提取液随表香一起均匀喷洒在124g普通烟丝上晾干，再用常规卷烟工艺即制成低危害香烟。所述天然植物提取物添加到烟丝中的加入量为烟丝重量的0.8％，其中生物活性成分的含量为0.16％。一支香烟重0.7g，每支保健烟含天然植物提取物5600μg。

实施例九

实施例十

新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量50％乙醇冷浸提取三次(72小时，24小时，24小时)合并提取液，浓缩回收溶剂至无醇味后加适量水使混溶，再加乙酸乙酯萃取3次，萃取液经回收溶剂至干，得总浸膏，进行柱层析分离，吸附剂为硅胶H，采用石油醚-丙酮(20∶1)洗脱，寻找含有活性成分的流份，得到粗品，然后再用石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，用乙醇重结晶即得。

实施例十一

新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量70％乙醇冷浸提取三次(72小时，24小时，24小时)合并提取液，浓缩回收溶剂至无醇味后加适量水使混溶，再加乙酸乙酯萃取3次，萃取液经回收溶剂至干，得总浸膏，进行柱层析分离，吸附剂为硅胶H，采用石油醚-内酮(20∶1)洗脱，寻找含有活性成分的流份，得到粗品，然后再用石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，用乙醇重结晶即得。

取以上所得提取物10g加入至990ml浓度为75％的乙醇溶液中，即制成1％浓度的提取液。把该提取液随表香一起均匀喷洒在990g普通烟丝上晾干，再用常规卷烟工艺即制成低危害香烟。所述天然植物提取物添加到烟丝中的加入量为烟丝重量的1％，其中生物活性成分的含量为0.2％。一支香烟重0.7g，每支保健烟含天然植物提取物7000μg。

实施例十二

新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量90％乙醇冷浸提取三次(72小时，24小时，24小时)合并提取液，浓缩回收溶剂至无醇味后加适量水使混溶，再加乙酸乙酯萃取3次，萃取液经回收溶剂至干，得总浸膏，进行柱层析分离，吸附剂为硅胶H，采用石油醚-丙酮(20∶1)洗脱，寻找含有活性成分的流份，得到粗品，然后再用石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，用乙醇重结晶即得。

实施例十三

新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量50％乙醇冷浸提取三次(72小时，24小时，24小时)合并提取液，回收溶剂至无醇后加水使混溶，再加乙酸乙酯萃取3次，取乙酸乙酯液用1％NaHCO₃水溶液萃取后回收溶剂至干，得总浸膏，进行柱层析分离，吸附剂为硅胶H，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，收集合并相同流分，回收溶剂即得。

实施例十四

新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量70％乙醇冷浸提取三次(72小时，24小时，24小时)合并提取液，回收溶剂至无醇后加水使混溶，再加乙酸乙酯萃取3次，取乙酸乙酯液用1％NaHCO₃水溶液萃取后回收溶剂至干，得总浸膏，进行柱层析分离，吸附剂为硅胶H，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，收集合并相同流分，回收溶剂即得。

取以上所得提取物1g加入至1000ml浓度为80％的乙醇溶液中，即制成0.1％浓度的提取液。把该提取液随表香一起均匀喷洒在399g普通烟丝上晾干，再用常规卷烟工艺即制成低危害香烟。所述天然植物提取物添加到烟丝中的加入量为烟丝重量的0.25％，其中生物活性成分的含量为0.05％。一支香烟重0.7g，每支保健烟含天然植物提取物1750μg。

实施例十五

新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量90％乙醇冷浸提取三次(72小时，24小时，24小时)合并提取液，回收溶剂至无醇后加水使混溶，再加乙酸乙酯萃取3次，取乙酸乙酯液用1％NaHCO₃水溶液萃取后回收溶剂至干，得总浸膏，进行柱层析分离，吸附剂为硅胶H，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，收集合并相同流分，回收溶剂即得。

实施例十六

新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，用石油醚、氯仿依次浸提三次(72小时，24小时，24小时)，浸提液减压回收溶剂，将氯仿提取物进行硅胶柱层析，以不同比例石油醚-乙酸乙酯混合溶液梯度洗脱，收集合并相同流分，回收溶剂即得。

实施例十七

取以上所得提取物1g加入至1000ml浓度为85％的乙醇溶液中，即制成0.1％浓度的提取液。把该提取液随表香一起均匀喷洒在399g普通烟丝上晾干，再用常规卷烟工艺即制成低危害香烟。所述天然植物提取物添加到烟丝中的加入量为烟丝重量的0.25％，其中生物活性成分的含量为0.05％。一支香烟重0.7g，每支保健烟含天然植物提取物1750μg。

实施例十八

实施例十九

新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，以20U/g药材的量加入纤维素酶，加H₂SO₄调PH4.5，充分搅拌后于30℃恒温水浴上加热5小时，放冷至室温，所得酶解物用0.1mol/L NaOH调PH至中性，加10倍量50％乙醇，浸泡，所得浸提液过滤，滤渣洗涤，所得洗液与滤液合并，回收乙醇，所得残渣用乙醇溶解过滤，回收乙醇至干，即得干膏。

实施例二十

新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，以20U/g药材的量加入纤维素酶，加H₂SO₄调PH4.5，充分搅拌后于43℃恒温水浴上加热3小时，放冷至室温，所得酶解物用0.1mol/L NaOH调PH至中性，加10倍量70％乙醇，浸泡，所得浸提液过滤，滤渣洗涤，所得洗液与滤液合并，回收乙醇，所得残渣用乙醇溶解过滤，回收乙醇至干，即得干膏。

取以上所得提取物1g加入至1000ml浓度为90％的乙醇溶液中，即制成0.1％浓度的提取液。把该提取液随表香一起均匀喷洒在399g普通烟丝上晾干，再用常规卷烟工艺即制成低危害香烟。所述天然植物提取物添加到烟丝中的加入量为烟丝重量的0.25％，其中生物活性成分的含量为0.05％。一支香烟重0.7g，每支保健烟含天然植物提取物1750μg。

实施例二十一

新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，以20U/g药材的量加入纤维素酶，加H₂SO₄调PH4.5，充分搅拌后于50℃恒温水浴上加热4小时，放冷至室温，所得酶解物用0.1mol/L NaOH调PH至中性，加10倍量90％乙醇，浸泡，所得浸提液过滤，滤渣洗涤，所得洗液与滤液合并，回收乙醇，所得残渣用乙醇溶解过滤，回收乙醇至干，即得干膏。

Claims

1.一种添加到卷烟中的天然植物提取物，其特征在于：该天然植物提取物是从豆科植物补骨脂中提取获得。

2.根据权利要求1所述的添加到卷烟中的天然植物提取物，其特征在于：该天然植物提取物的主要成分为香豆素类和黄酮类化合物，另外还含有单萜酚类、脂类、挥发油、树脂、皂苷。

3.根据权利要求1或2所述的添加到卷烟中的天然植物提取物，其特征在于：所述天然植物提取物中含有多种生物活性成分，主要活性成分结构式为(1)、(2)、(3)、(4)。

4.根据权利要求3所述的添加到卷烟中的天然植物提取物，其特征在于：所述天然植物提取物加入烟丝中的生物活性成分的含量为0.005％～1％。

5.一种权利要求1所述的添加到卷烟中的天然植物提取物的提取方法，其特征在于：先取天然植物补骨脂制成粗粉，将该粗粉采用有机溶剂提取、浸提或渗漉法提取，再重结晶以获得该提取物。

6、根据权利要求5所述的天然植物提取物的提取方法，其特征在于，先取新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量50％～90％乙醇溶液用渗漉法提取，浸泡过夜，渗漉液减压回收至无醇味，放置过夜，倾去上清液，取其黑色粘稠物，加入20倍量甲醇分6～7次加热回流溶解，趁热过滤，所得滤液静置过夜，抽滤，即得粗结晶，再用适量甲醇溶解，加少许活性碳，加热回流5分钟左右，趁热抽滤，滤液放冷即析出结晶，80℃以下干燥即得。

7、根据权利要求5所述的天然植物提取物的提取方法，其特征在于，先取新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量50％～90％乙醇溶液用渗漉法提取，提取两次，每次1～24小时，把提取液滤过，回收溶剂后浓缩成膏状，再用超临界二氧化碳萃取分离，得到结晶物再精制或重结晶，即得。

8、根据权利要求5所述的天然植物提取物的提取方法，其特征在于，先取新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，用超临界二氧化碳提取，得到结晶物再精制或重结晶，即得。

9、根据权利要求5所述的天然植物提取物的提取方法，其特征在于，先取新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量50％～90％乙醇冷浸提取三次，分别提取72小时，24小时，24小时，合并提取液，浓缩回收溶剂至无醇味后加适量水使混溶，再加乙酸乙酯萃取3次，萃取液经回收溶剂至干，得总浸膏，进行柱层析分离，吸附剂为硅胶H，采用20∶1比例的石油醚-丙酮洗脱，寻找含有活性成分的流份，得到粗品，然后再用石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，用乙醇重结晶即得。

10、根据权利要求5所述的天然植物提取物的提取方法，其特征在于，先取新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，加适量50％～90％乙醇冷浸提取三次，分别提取72小时，24小时，24小时，合并提取液，回收溶剂至无醇后加水使混溶，再加乙酸乙酯萃取3次，取乙酸乙酯液用1％NaHCO₃水溶液萃取后回收溶剂至干，得总浸膏，进行柱层析分离，吸附剂为硅胶H，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，收集合并相同流分，回收溶剂即得。

11、根据权利要求5所述的天然植物提取物的提取方法，其特征在于，先取新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，用石油醚、氯仿依次浸提三次，分别浸提72小时，24小时，24小时，浸提液减压回收溶剂，将氯仿提取物进行硅胶柱层析，以不同比例的石油醚-乙酸乙酯混合溶液梯度洗脱，收集合并相同流分，回收溶剂即得。

12、根据权利要求5所述的天然植物提取物的提取方法，其特征在于，先取新鲜补骨脂洗净、干燥、粉碎得粗粉，以20U/g药材的量加入纤维素酶，加H₂SO₄调PH4.5，充分搅拌后于30～50℃恒温水浴上加热3～5小时，放冷至室温，所得酶解物用0.1mol/L NaOH调PH至中性，加10倍量50％～90％乙醇，浸泡，所得浸提液过滤，滤渣洗涤，所得洗液与滤液合并，回收乙醇，所得残渣用乙醇溶解过滤，回收乙醇至干，即得干膏。

13.一种权利要求1所述的天然植物提取物在卷烟中的应用，其特征在于，在香烟烟丝中添加该天然植物提取物。

14.根据权利要求13所述的天然植物提取物在卷烟中的应用，其特征在于：所述天然植物提取物添加到烟丝中的加入量为烟丝重量的0.025％～5％。