CN103385804A - 防治口腔疾病的纳米银漱口水及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及用于杀灭口腔咽喉中有害细菌、病毒、真菌，防治口腔疾病的清洁、防治口腔疾病的日用消费品技术领域，尤其是涉及一种防治口腔疾病的纳米银漱口水及其制备方法。其特点是包括0.1ppm-1000ppm纳米银和以下组分（质量百分比）：止血剂：0.01%-5%；局麻剂：0.01%-5%；抑菌剂:0.01%-10%；分散剂:0.1%-25%；增稠剂:0.1%-25%；润湿剂:0.1%-15%；清凉剂:0.1%-10%；附着剂:0.1%-35%；矫味剂:0.01%-5%；着色剂:0.01%-5%。其原理为直径在10-50纳米的银颗粒能够吸附在有害微生物的细胞膜上，通过干扰其新陈代谢，损伤蛋白质衣壳及DNA分子导致其死亡，其具有广谱杀菌抑菌的作用，作用持久有效，无毒副作用，不产生抗药性，安全可靠，使用方便，生产制备简单，对牙周病、急慢性咽炎、口腔粘膜疾病有非常好的防治的效果。

Description

防治口腔疾病的纳米银漱口水及其制备方法

技术领域

本发明涉及用于杀灭口腔咽喉中有害细菌、病毒、真菌，防治口腔疾病的清洁、防治口腔疾病的日用消费品技术领域，尤其是涉及一种防治口腔疾病的纳米银漱口水及其制备方法。

背景技术

口腔咽喉部位滋生有害微生物有一百种余种，常见病毒有腺病毒、疱疹病毒、流行性感冒病毒、流行性腮腺炎病毒、副流感病毒、肝炎病毒和肺炎衣原体等。常见有害细菌主要有粘膜炎球菌、牙龈二氧化碳噬纤维菌、溶血二氧化碳噬纤维菌、生痰二氧化碳噬纤维菌、白喉棒杆菌、溃疡棒杆菌、大肠杆菌、龈沟梭杆菌、溶血嗜血菌、流感嗜血菌、幽门螺杆菌、粘液奈瑟菌、淋病奈瑟菌、酿脓链球菌、粘滑口腔球菌等，常见真菌主要有白色念珠菌、克柔念球菌等。口腔疾病和全身性疾病相互关联，互相影响。当身体某一部分受到细菌感染或病毒侵害时，口腔咽喉内粘膜也会出现化脓、发炎等病变并通过唾液、飞沫进行传播。于此同时，当口腔咽喉部位出现病变，细菌也会通过血液、淋巴系统进行全身循环累及全身健康。口腔咽喉有害微生物环境非常复杂，病变种类繁多，可以组合成复杂多样的损害。由于口腔咽喉部分温湿度适宜，养分充足，致病微生物数量巨大，种类繁多，相互影响，使得口腔咽喉疾病防治困难，加上产生耐药性的细菌越来越多、有害细菌的代谢物大量覆盖在口腔粘膜，药物有效成分难以到达病灶，药效持续时间短等不利因素，因此，药物在防治口腔咽喉疾病存在着适应范围小，局部浓度不够，对产生耐药性的细菌无效，毒副作用大等问题。现有技术中的牙膏和漱口水多为清洁口腔产品，主要针对牙齿和牙周组织进行清洁和护理，药物牙膏和含有药物有效成分的漱口水也存在着和药物防治同样的不良效果。

发明内容

本发明的目的在于避免现有技术的防治效果差，毒副作用大的缺陷提供一种防治口腔疾病的纳米银漱口水及其制备方法。从而有效解决了现有技术存在的问题。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水，其特点是包括含有0.1ppm-1000ppm纳米银的去离子水，去离子水中还包含以下组分（质量百分比）：

止血剂：0.01%-5%；局麻剂：0.01%-5%；抑菌剂:0.01%-10%；分散剂:0.1%-25%；增稠剂:0.1%-25%；润湿剂:0.1%-15%；清凉剂:0.1%-10%；附着剂:0.1%-35%；矫味剂:0.01%-5%；着色剂:0.01%-5%。

所述的止血剂为氨甲环酸，缓解牙龈出血的症状；所述的局麻剂为苯佐卡因，缓解口腔粘膜溃疡，牙龈红肿引起的疼痛；所述的抑菌剂为复合尼泊酯、聚维酮碘中的一种或二种组合，持续抑制口腔咽喉细菌、病毒、真菌的繁殖或复制；所述的分散剂为交联低取代羟丙基纤维素、交联羧甲基淀粉钠、泊洛沙姆中的一种或多种组合，使得纳米银形成更均匀的混悬液而不沉淀，克服了纳米银易沉淀的问题；所述的增稠剂为海藻酸钠、聚乙二醇、倍他环糊精中的一种或多种组合，解决了纳米银难溶于水的问题，使得纳米银能够制成混悬液，进而制成漱口水；润湿剂为吐温、十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠中的一种或多种组合，提高纳米银在口腔唾液里的析出度，迅速起效，加快了杀菌效率，同时该成分组合表面活性剂中的活性物质，吸附纳米银的正负电荷，减弱纳米银在制备过程中携带的极性，提高纳米银杀灭有害微生物的效率；所述的清凉剂剂为薄荷醇，使口腔清凉舒适；所述的附着剂为微粉硅胶、微晶纤维素、预胶化淀粉中的一种或多种组合，提高纳米银在口腔粘膜吸附时间，提高了生物利用率；所述的矫味剂为阿司帕坦；所述的着色剂为亮蓝。

所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水的制备方法，其特点是包括如下步骤：

步骤一：取纳米银、氨甲环酸、苯佐卡因按比例称重，混合。

步骤二：将抑菌剂、分散剂、增稠剂、润湿剂、清凉剂、附着剂按比例称重，混合，投入到25-60摄氏度去离子水中搅拌均匀，形成混悬液，冷却，备用。

步骤三：将步骤一制成的混合物投入到步骤二制成的混悬液中搅拌均匀。

步骤四：步骤三制成的混悬液加入按比例配好的矫味剂，着色剂，搅拌均匀，灌装封盖即得。

所述的纳米银以混悬液为载体，纳米银使用可溶性银盐采用溶胶-凝胶法、微乳液法、反向胶束法中的任一方法获得，或采用金属银的块体或粉体获得。

采用上述的技术方案，本发明的有益效果为：所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水及其制备方法，其采用的纳米银漱口水，其杀灭有害微生物的机理为物理杀灭，直径在10-50纳米的银颗粒能够吸附在有害微生物的细胞膜上，通过干扰其新陈代谢，损伤蛋白质衣壳及DNA分子导致其死亡。因此具有杀菌、抑菌的双重效果。当微生物失去活性后，纳米银能够游离出来，重新进行杀菌作用。本发明具有广谱杀菌抑菌的作用，作用持久有效，无毒副作用，不产生抗药性，安全可靠，罕见禁忌症，使用方便，适用人群广，生产制备简单，对牙周病、急慢性咽炎、口腔粘膜疾病有非常好的防治的效果。

具体实施方式

以下对本发明的实施原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。

实施例1：所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水，其包括以下组分：

含有0.1ppm-1000ppm的去离子水10000g；止血剂：氨甲环酸1g-500g；局麻剂：苯佐卡因1g-500g；抑菌剂：复合尼泊酯1g-1000g；分散剂：交联低取代羟丙基纤维素5g-1250g，交联羧甲基淀粉钠5g-1250g；增稠剂：海藻酸钠5g-1250g，聚乙二醇5g-1250g；润湿剂：吐温5g-750g，十二烷基硫酸钠5g-750g；清凉剂：薄荷醇10g-1000g；附着剂：微粉硅胶5g-1750g，微晶纤维素5g-1750g；矫味剂：阿司帕坦1g-500g；着色剂：亮蓝1g-500g。

其制备工艺，具体如下：

步骤一：取纳米银、氨甲环酸、苯佐卡因按比例称重，混合。

步骤二：将抑菌剂、分散剂、增稠剂、润湿剂、清凉剂、附着剂按比例称重，混合，投入到25-60摄氏度去离子水中搅拌均匀，形成混悬液，冷却，备用。

步骤三：将步骤一制成的混合物投入到步骤二制成的混悬液中搅拌均匀。

步骤四：步骤三制成的混悬液加入按比例配好的矫味剂，着色剂，搅拌均匀，灌装封盖即得。

上述实施例所得防治口腔疾病的纳米银漱口水共制成20瓶，总重：10000g。

实施例2：所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水，其包括以下组分：

含有0.1ppm-1000ppm的去离子水10000g；止血剂：氨甲环酸1g-500g；局麻剂：苯佐卡因1g-500g；抑菌剂：复合尼泊酯1g-1000g；分散剂：交联低取代羟丙基纤维素5g-1250g，泊洛沙姆5g-1250g；增稠剂：聚乙二醇5g-1250g，倍他环糊精5g-1250g；润湿剂：吐温5g-750g，十二烷基苯磺酸钠5g-750g；清凉剂：薄荷醇10g-1000g；附着剂：微晶纤维素5g-1750g，预胶化淀粉5g-1750g；矫味剂：阿司帕坦1g-500g；着色剂：亮蓝1g-500g。

其制备工艺，具体如下：

步骤一：取纳米银、氨甲环酸、苯佐卡因按比例称重，混合。

步骤二：将抑菌剂、分散剂、增稠剂、润湿剂、清凉剂、附着剂按比例称重，混合，投入到25-60摄氏度去离子水中搅拌均匀，形成混悬液，冷却，备用。

步骤三：将步骤一制成的混合物投入到步骤二制成的混悬液中搅拌均匀。

步骤四：步骤三制成的混悬液加入按比例配好的矫味剂，着色剂，搅拌均匀，灌装封盖即得。

上述实施例所得防治口腔疾病的纳米银漱口水共制成20瓶，总重：10000g。

实施例3：所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水，其包括以下组分：

含有0.1ppm-1000ppm的去离子水10000g；止血剂：氨甲环酸1g-500g；局麻剂：苯佐卡因1g-500g；抑菌剂：复合尼泊酯1g-1000g；分散剂：交联羧甲基淀粉钠5g-1250g，泊洛沙姆5g-1250g；增稠剂：海藻酸钠5g-1250g，倍他环糊精5g-1250g；润湿剂：十二烷基硫酸钠5g-750g，十二烷基苯磺酸钠5g-750g；清凉剂：薄荷醇10g-1000g；附着剂：微粉硅胶5g-1750g，预胶化淀粉5g-1750g；矫味剂：阿司帕坦1g-500g；着色剂：亮蓝1g-500g；

其制备工艺，具体如下：

步骤一：取纳米银、氨甲环酸、苯佐卡因按比例称重，混合。

步骤二：将抑菌剂、分散剂、增稠剂、润湿剂、清凉剂、附着剂按比例称重，混合，投入到25-60摄氏度去离子水中搅拌均匀，形成混悬液，冷却，备用。

步骤三：将步骤一制成的混合物投入到步骤二制成的混悬液中搅拌均匀。

步骤四：步骤三制成的混悬液加入按比例配好的矫味剂，着色剂，搅拌均匀，灌装封盖即得。

上述实施例所得防治口腔疾病的纳米银漱口水共制成20瓶，总重：10000g。

实施例4：所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水，其包括以下组分：

含有0.1ppm-1000ppm的去离子水10000g；止血剂：氨甲环酸1g-500g；局麻剂：苯佐卡因1g-500g；抑菌剂：聚维酮碘1g-1000g；分散剂：交联低取代羟丙基纤维素5g-1250g，交联羧甲基淀粉钠5g-1250g；增稠剂：海藻酸钠5g-1250g，聚乙二醇5g-1250g；润湿剂：吐温5g-750g，十二烷基硫酸钠5g-750g；清凉剂：薄荷醇10g-1000g；附着剂：微粉硅胶5g-1750g，微晶纤维素5g-1750g；矫味剂：阿司帕坦1g-500g；着色剂：亮蓝1g-500g。

其制备工艺，具体如下：

步骤一：取纳米银、氨甲环酸、苯佐卡因按比例称重，混合。

步骤二：将抑菌剂、分散剂、增稠剂、润湿剂、清凉剂、附着剂按比例称重，混合，投入到25-60摄氏度去离子水中搅拌均匀，形成混悬液，冷却，备用。

步骤三：将步骤一制成的混合物投入到步骤二制成的混悬液中搅拌均匀。

步骤四：步骤三制成的混悬液加入按比例配好的矫味剂，着色剂，搅拌均匀，灌装封盖即得。

上述实施例所得防治口腔疾病的纳米银漱口水共制成20瓶，总重：10000g。

实施例5：所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水，其包括以下组分：

含有0.1ppm-1000ppm的去离子水10000g；止血剂：氨甲环酸1g-500g；局麻剂：苯佐卡因1g-500g；抑菌剂：聚维酮碘1g-1000g；分散剂：交联低取代羟丙基纤维素5g-1250g，泊洛沙姆5g-1250g；增稠剂：聚乙二醇5g-1250g，倍他环糊精5g-1250g；润湿剂：吐温5g-750g，十二烷基苯磺酸钠5g-750g；清凉剂：薄荷醇10g-1000g；附着剂：微晶纤维素5g-1750g，预胶化淀粉5g-1750g；矫味剂：阿司帕坦1g-500g；着色剂：亮蓝1g-500g。

其制备工艺，具体如下：

步骤一：取纳米银、氨甲环酸、苯佐卡因按比例称重，混合。

步骤二：将抑菌剂、分散剂、增稠剂、润湿剂、清凉剂、附着剂按比例称重，混合，投入到25-60摄氏度去离子水中搅拌均匀，形成混悬液，冷却，备用。

步骤三：将步骤一制成的混合物投入到步骤二制成的混悬液中搅拌均匀。

步骤四：步骤三制成的混悬液加入按比例配好的矫味剂，着色剂，搅拌均匀，灌装封盖即得。

上述实施例所得防治口腔疾病的纳米银漱口水共制成20瓶，总重：10000g。

实施例6：所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水，其包括以下组分：

含有0.1ppm-1000ppm的去离子水10000g；止血剂：氨甲环酸1g-500g；局麻剂：苯佐卡因1g-500g；抑菌剂：聚维酮碘1g-1000g；分散剂：交联羧甲基淀粉钠5g-1250g，泊洛沙姆5g-1250g；增稠剂：海藻酸钠5g-1250g，倍他环糊精5g-1250g；润湿剂：十二烷基硫酸钠5g-750g，十二烷基苯磺酸钠5g-750g；清凉剂：薄荷醇10g-1000g；附着剂：微粉硅胶5g-1750g，预胶化淀粉5g-1750g；矫味剂：阿司帕坦1g-500g；着色剂：亮蓝1g-500g。

其制备工艺，具体如下：

步骤一：取纳米银、氨甲环酸、苯佐卡因按比例称重，混合。

步骤二：将抑菌剂、分散剂、增稠剂、润湿剂、清凉剂、附着剂按比例称重，混合，投入到25-60摄氏度去离子水中搅拌均匀，形成混悬液，冷却，备用。

步骤三：将步骤一制成的混合物投入到步骤二制成的混悬液中搅拌均匀。

步骤四：步骤三制成的混悬液加入按比例配好的矫味剂，着色剂，搅拌均匀，灌装封盖即得。

上述实施例所得防治口腔疾病的纳米银漱口水共制成20瓶，总重：10000g。

实施例7：所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水，其包括以下组分：

含有0.1ppm-1000ppm的去离子水10000g；止血剂：氨甲环酸1g-500g；局麻剂：苯佐卡因1g-500g；抑菌剂：复合尼泊酯0.5g-500g，聚维酮碘0.5g-500g；分散剂：交联低取代羟丙基纤维素5g-1250g，交联羧甲基淀粉钠5g-1250g；增稠剂：海藻酸钠5g-1250g，聚乙二醇5g-1250g；润湿剂：吐温5g-750g，十二烷基硫酸钠5g-750g；清凉剂：薄荷醇10g-1000g；附着剂：微粉硅胶5g-1750g，微晶纤维素5g-1750g；矫味剂：阿司帕坦1g-500g；着色剂：亮蓝1g-500g。

其制备工艺，具体如下：

步骤一：取纳米银、氨甲环酸、苯佐卡因按比例称重，混合。

步骤二：将抑菌剂、分散剂、增稠剂、润湿剂、清凉剂、附着剂按比例称重，混合，投入到25-60摄氏度去离子水中搅拌均匀，形成混悬液，冷却，备用。

步骤三：将步骤一制成的混合物投入到步骤二制成的混悬液中搅拌均匀。

步骤四：步骤三制成的混悬液加入按比例配好的矫味剂，着色剂，搅拌均匀，灌装封盖即得。

上述实施例所得防治口腔疾病的纳米银漱口水共制成20瓶，总重：10000g。

实施例8：所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水，其包括以下组分：

含有0.1ppm-1000ppm的去离子水10000g；止血剂：氨甲环酸1g-500g；局麻剂：苯佐卡因1g-500g；抑菌剂：复合尼泊酯0.5g-500g，聚维酮碘0.5g-500g；分散剂：交联低取代羟丙基纤维素5g-1250g，泊洛沙姆5g-1250g；增稠剂：聚乙二醇5g-1250g，倍他环糊精5g-1250g；润湿剂：吐温5g-750g，十二烷基苯磺酸钠5g-750g；清凉剂：薄荷醇10g-1000g；附着剂：微晶纤维素5g-1750g，预胶化淀粉5g-1750g；矫味剂：阿司帕坦1g-500g；着色剂：亮蓝1g-500g。

其制备工艺，具体如下：

步骤一：取纳米银、氨甲环酸、苯佐卡因按比例称重，混合。

步骤二：将抑菌剂、分散剂、增稠剂、润湿剂、清凉剂、附着剂按比例称重，混合，投入到25-60摄氏度去离子水中搅拌均匀，形成混悬液，冷却，备用。

步骤三：将步骤一制成的混合物投入到步骤二制成的混悬液中搅拌均匀。

步骤四：步骤三制成的混悬液加入按比例配好的矫味剂，着色剂，搅拌均匀，灌装封盖即得。

上述实施例所得防治口腔疾病的纳米银漱口水共制成20瓶，总重：10000g。

实施例9：所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水，其包括以下组分：

含有0.1ppm-1000ppm的去离子水10000g；止血剂：氨甲环酸1g-500g；局麻剂：苯佐卡因1g-500g；抑菌剂：复合尼泊酯0.5g-500g，聚维酮碘0.5g-500g；分散剂：交联羧甲基淀粉钠5g-1250g，泊洛沙姆5g-1250g；增稠剂：海藻酸钠5g-1250g，倍他环糊精5g-1250g；润湿剂：十二烷基硫酸钠5g-750g，十二烷基苯磺酸钠5g-750g；清凉剂：薄荷醇10g-1000g；附着剂：微粉硅胶5g-1750g，预胶化淀粉5g-1750g；矫味剂：阿司帕坦1g-500g；着色剂：亮蓝1g-500g。

其制备工艺，具体如下：

步骤一：取纳米银、氨甲环酸、苯佐卡因按比例称重，混合。

步骤二：将抑菌剂、分散剂、增稠剂、润湿剂、清凉剂、附着剂按比例称重，混合，投入到25-60摄氏度去离子水中搅拌均匀，形成混悬液，冷却，备用。

步骤三：将步骤一制成的混合物投入到步骤二制成的混悬液中搅拌均匀。

步骤四：步骤三制成的混悬液加入按比例配好的矫味剂，着色剂，搅拌均匀，灌装封盖即得。

上述实施例所得防治口腔疾病的纳米银漱口水共制成20瓶，总重：10000g。

上述实施例的样品所得防治口腔疾病的纳米银漱口水,混悬的微粒细微均匀、下沉缓慢、其速度不影响纳米银剂量的正确量取；下沉后的纳米银微粒不结块，稍加振摇即能均匀分散；在长期贮存中粒子大小保持不变、纳米银颗粒无极性；纳米银、抑菌剂能长时间附着在口腔粘膜上，持续发挥药效；不太粘稠，易倾倒；外形美观，味道可口。

其防治口腔疾病的原理是：对腺病毒、疱疹病毒、流行性感冒病毒、流行性腮腺炎病毒、副流感病毒、肝炎病毒等口腔内常见病毒损伤其蛋白质衣壳及DNA分子导致其死亡。对粘膜炎球菌、牙龈噬纤维菌、溶血噬纤维菌、生痰噬纤维菌、白喉棒杆菌、溃疡棒杆菌、龈沟梭杆菌、溶血嗜血菌、流感嗜血菌、幽门螺杆菌、淋病奈瑟菌、粘滑口腔球菌等口腔常见细菌具有很强的的杀灭作用，起作用机理为通过干扰其新陈代谢，损伤其蛋白质衣壳及DNA分子导致其死亡。同时也能有效杀灭白色念球菌、克柔念球菌等真菌。

通过高分子附着剂，纳米银附着在粘膜表面，杀菌效果持久。提高纳米银在口腔粘膜吸附时间，提高了生物利用率。

本发明提供的防治牙周病、急慢性咽炎、口腔粘膜病纳米银漱口水利用纳米银进入细胞膜内，干扰其新陈代谢，损伤蛋白质衣壳及DNA分子导致其死亡。当菌体失去活性后，纳米银会游离出来，重新进行杀菌作用，因此抗菌效果持久。同时，纳米银杀菌效果不受耐药性影响，因作用机理原因，对产生耐药性的病菌杀灭效果好，同时不产生新的耐药性。

纳米银的安全性是国际医学界公认的，因为微量的银元素本身就是人体必需的重要元素之一。纳米银不带电荷，不会与人体内多种生物活性物质结合而，并会从体内完全排除，无蓄积性，不会产生毒副作用。在美国，纳米银的安全性与食品同级别。通过纳米银安全性的大量动物实验，经实验考察发现小鼠在口服最大耐受量925mg/kg，无任何毒副反应。

纳米银是通过微粉载体中溶出释放银颗粒来达到杀菌目的。但是纳米银具有难溶于水，易沉淀，易氧化的特点，此外，纳米银在制备过程能够中，不可避免的带有正负电荷，带有极性的纳米银颗粒其杀菌能力低、效果差。上述特点一直制约着纳米银杀菌应用。本发明经过长期研究后，根据纳米银等有效成分的性质，针对性的添加辅料，主辅协同作用，相辅相成，以混悬液作为纳米银等有效成分的载体，以表面活性剂中的活性成分消除纳米银在制备过程中所携带的极性，快速到达病灶，迅速析出，分散均匀，高效杀菌，并能克服纳米银难溶性、易沉淀、易氧化、电荷分布不均匀的特点，生物利用度高，剂量精确，使用方便。能够有效解决长期以来牙周病、急慢性咽炎，口腔粘膜病对人体健康危害这一难题。

所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水，对杀灭口腔内常见病毒、有害细菌、和真菌的实验过程如下：

试验采用标准：中华人民共和国GB4789.28,食品卫生细菌学检验。

试验目的：对不同种类口腔内常见病毒、有害细菌、和真菌进行培养，经过对比试验，通过细菌菌落总数的测定，得出防治牙周病、急慢性咽炎、口腔粘膜病的纳米银漱口水对口腔内常见病毒、有害细菌、和真菌杀灭效果。实验用口腔内上皮组织样本，选取含有疱疹病毒、溃疡棒杆菌、幽门螺杆菌、淋病奈瑟菌、白色念球菌样本。

试验1：含有细菌的口腔上皮组织细菌总数培养检测

（1）实验设备和材料：

温箱：36±1℃，冰箱：0～4℃，恒温水浴：46±1℃，广口瓶或三角瓶：容量为500mL，玻璃珠：直径约5mm，平皿：直径为90mm，天平，电炉，吸管，试管，放大镜，菌落计数器，酒精灯，均质器或乳钵，试管架，灭菌刀或剪子，灭菌镊子，培养基和试剂，生理盐水，75%乙醇。

营养琼脂培养基：按GB4789.28中4.7规定，

磷酸盐缓冲稀释液：按GB4789.28中3.22规定，

（2）检验程序：

菌落总数的检验程序如下，

第一步：检样（25g(mL)样品+225mL稀释液，均质）；

第二步：10倍系列稀释；

第三步：选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液，各取1mL分别加入无菌培养皿内；

第四部：每皿中加入15mL～20mL，平板计数琼脂培养基，混匀；

第五步：培养；

第六步：计数各平板菌落；

第七部：计数菌落总群；

第八步：报告。

（3）操作步骤：

①检样稀释及培养

以无菌操作，将检样25g(或mL)放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1∶10的均匀稀释液。

固体检样在加入稀释液后，最好置均质器中以8000～10000r/min的速度处理1min，做成1∶10的均匀稀释液。

用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液)，振摇试管，混合均匀，做成1∶100的稀释液。

另取1mL灭菌吸管，按上条操作顺序，做10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1mL灭菌吸管。

根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。

稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基(可放置于46±1℃水浴保温)注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。

待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h。

②菌落计数

做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

③菌落数报告

（4）平板菌落数的选择：

选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线)，若仅有一条链，可视为一个菌落；如果有不同来源的几条链，则应将每条链作为一个菌落计。

（5）稀释度的选择：

应选择平均菌落数在30～300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之。

若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等于2，应报告其平均数；若大于2则报告其中较小的数字。

具体分为以下几种情况：

（1）若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

（2）若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

（3）若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之。

(6)菌落数的报告：

菌落数在100以内时，按其实有数报告，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数，也可用10的指数来表示。

本试验检测的菌落总数见表1。

表1：

所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水

试验2：浸泡于防治牙周病、急慢性咽炎、口腔粘膜病纳米银漱口水溶液样品菌落总数培养检测

将样品浸泡于纳米银浓度分别为20ppm、30ppm、40ppm的纳米银漱口水中，在浸泡10分钟后得到对比样品。按照试验1中操作步骤进行操作

采用中华人民共和国农业行业标准中华人民共和国GB4789.28，食品卫生细菌学检验对样品进行再次检验。

采用试验效果最佳一组数据检测最低检出浓度见表2。

表2：

实验结论：

所述的一种防治口腔疾病的纳米银漱口水，能够大幅的杀灭口腔内滋生的病毒，真菌和有害细菌，杀灭效果能够达到99.5%以上，当纳米银浓度为40ppm时，效果最佳。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种防治口腔疾病的纳米银漱口水，其特征是包括含有0.1ppm-1000ppm纳米银的去离子水，去离子水中还包含以下组分（质量百分比）：

止血剂：0.01%-5%；局麻剂：0.01%-5%；抑菌剂:0.01%-10%；分散剂:0.1%-25%；增稠剂:0.1%-25%；润湿剂:0.1%-15%；清凉剂:0.1%-10%；附着剂:0.1%-35%；矫味剂:0.01%-5%；着色剂:0.01%-5%。

2.如权利要求1所述的防治口腔疾病的纳米银漱口水，其特征在于：所述的止血剂为氨甲环酸，缓解牙龈出血的症状；所述的局麻剂为苯佐卡因，缓解口腔粘膜溃疡，牙龈红肿引起的疼痛。

3.如权利要求1所述的防治口腔疾病的纳米银漱口水，其特征在于：所述的抑菌剂为复合尼泊酯、聚维酮碘中的一种或二种组合，持续抑制口腔咽喉细菌、病毒、真菌的繁殖或复制；所述的分散剂为交联低取代羟丙基纤维素、交联羧甲基淀粉钠、泊洛沙姆中的一种或多种组合，使纳米银形成更均匀的混悬液而不沉淀，克服了纳米银易沉淀的问题。

4.如权利要求1所述的防治口腔疾病的纳米银漱口水，其特征在于：所述的增稠剂为海藻酸钠、聚乙二醇、倍他环糊精中的一种或多种组合，使得纳米银能够制成混悬液，进而制成漱口水；润湿剂为吐温、十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠中的一种或多种组合，提高纳米银在口腔唾液里的析出度，迅速起效，加快了杀菌效率。

5.如权利要求1所述的防治口腔疾病的纳米银漱口水，其特征在于：所述的清凉剂剂为薄荷醇，使口腔清凉舒适；所述的附着剂为微粉硅胶、微晶纤维素、预胶化淀粉中的一种或多种组合；所述的矫味剂为阿司帕坦；所述的着色剂为亮蓝。

6.一种权利要求1所述的防治口腔疾病的纳米银漱口水的制备方法，其特征是包括如下步骤：

步骤一：取纳米银、氨甲环酸、苯佐卡因按比例称重，混合；

步骤二：将抑菌剂、分散剂、增稠剂、润湿剂、清凉剂、附着剂按比例称重，混合，投入到25-60摄氏度去离子水中搅拌均匀，形成混悬液，冷却，备用；

步骤三：将步骤一制成的混合物投入到步骤二制成的混悬液中搅拌均匀；

步骤四：步骤三制成的混悬液加入按比例配好的矫味剂，着色剂，搅拌均匀，灌装封盖即得。

7.如权利要求3所述的防治口腔疾病的纳米银漱口水的制备方法，其特征在于：所述的纳米银以混悬液为载体，纳米银使用可溶性银盐采用溶胶-凝胶法、微乳液法、反向胶束法中的任一方法获得，或采用金属银的块体或粉体获得。

8.一种权利要求1所述的防治口腔疾病的纳米银漱口水的应用，其特征在于应用于杀灭口腔咽喉中的有害细菌、病毒、真菌。