CN103364517B - 一种苯噻菌胺·烯酰吗啉复配制剂中有效成分含量的分析方法 - Google Patents

一种苯噻菌胺·烯酰吗啉复配制剂中有效成分含量的分析方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种苯噻菌胺·烯酰吗啉复配制剂中有效成分含量的分析方法,采用柱长为250mm、柱内径为4.6mm的硅胶柱,以体积分数为35-55%的甲醇-水溶液为流动相,流速为0.8-1.2mL/min,柱温为10~50℃,采用紫外检测器或二极管阵列检测器,检测波长为240~260nm,以高效液相色谱外标法同时对复配制剂中的有效成分苯噻菌胺和烯酰吗啉进行定量分析。该方法精密度高,重现性好,准确度高,重复性好,为苯噻菌胺·烯酰吗啉复配制剂中有效成分的定量分析提供了依据,对其在农业生产实践中的应用有重要的实用价值。

Description

-种苯喔菌胺稀醜吗嘟复配制剂中有效成分含量的分析 方法
技术领域
[0001] 本发明属于农药分析技术领域,具体设及一种苯唾菌胺•締酷吗咐复配制剂中有 效成分含量的分析方法。
背景技术
[0002] 苯唾菌胺•締酷吗咐复配制剂由苯唾菌胺和締酷吗咐两种杀菌剂混配而成,具有 高效广谱,同时兼具良好的保护和治疗作用。本品可提高作物的产量和保证品质,比常规杀 菌剂持效期长;具有高度的选择性,对作物、人畜及有益生物安全,对环境基本无污染。关于 苯唾菌胺•締酷吗咐复配制剂的制备和应用,相关科技文献已有报道。
[0003] 在实际生产中按照配方来生产苯唾菌胺•締酷吗咐复配制剂,大量复配生产后要 检测复配制剂中苯唾菌胺和締酷吗咐的实际含量是否与理论含量相符,所W需要对苯唾菌 胺•締酷吗咐复配制剂中的有效成分苯唾菌胺和締酷吗咐进行定量分析。
[0004] 现有技术中对締酷吗咐含量的测定大多采用高效液相色谱法,而有关苯唾菌胺含 量的测定方法鲜有报道。因为苯唾菌胺•締酷吗咐复配制剂的有效成分为苯唾菌胺和締酷 吗咐,对于同时测定苯唾菌胺和締酷吗咐的含量尚未有报道,而采用现有技术中的分析方 法又无法同时准确分析出苯唾菌胺•締酷吗咐复配制剂中苯唾菌胺和締酷吗咐的含量。
发明内容
[0005] 针对现有技术中没有对苯唾菌胺和締酷吗咐的含量同时进行有效分析的方法,本 发明提供了一种分析方法,采用高效液相色谱对苯唾菌胺•締酷吗咐复配制剂中有效成分 苯唾菌胺和締酷吗咐的含量同时进行有效分析的方法,该方法具有简便、准确、快速、可靠 的特点,为苯唾菌胺•締酷吗咐复配制剂中有效成分的定量分析提供了依据。
[0006] 本发明的具体技术方案是:
[0007] 一种苯唾菌胺•締酷吗咐复配制剂中有效成分含量的分析方法,采用高效液相色 谱外标法进行定量分析,具体步骤包括:
[000引(1)先用纯甲醇配置苯唾菌胺和締酷吗咐的混合标准储备溶液,再用纯甲醇对上 述混合标准储备溶液稀释配置成苯唾菌胺和締酷吗咐的混合标准溶液A、B、C、D、E,采用高 效液相色谱仪进样分析,并同时分别记录苯唾菌胺和締酷吗咐的峰面积;采用外标法分别 绘制苯唾菌胺和締酷吗咐的质量浓度-峰面积标准曲线,分别得出苯唾菌胺的标准曲线回 归方程;Yi=19263Xi+12290,Ri2=0. 9997,式中Yi表示峰面积,X1表示质量浓度,单位为mg/L, Ri为线性相关系数;締酷吗咐的标准曲线回归方程;Y2=6935.3X2+20349,R22=0. 9997,式中 Y,表示峰面积,X2表示质量浓度,单位为mg/L,R2为线性相关系数;
[0009] (2)先用纯甲醇溶解苯唾菌胺•締酷吗咐复配制剂样品溶液,再用超声波震荡1~ lOmin后定容,过滤后得待测样品溶液,采用高效液相色谱仪进样分析,并同时分别记录苯 唾菌胺和締酷吗咐的峰面积,根据步骤(1)的标准曲线回归方程计算得苯唾菌胺和締酷吗 咐的质量浓度,然后计算得到苯唾菌胺和締酷吗咐的含量。
[0010] 本发明除特别说明外,所述的含量均指质量分数。
[001U 所述的液相色谱仪为AgilentllOO高效液相色谱仪;采用的色谱柱为硅胶柱,柱 长为250mm,柱内径为4. 6mm,流动相为甲醇-水溶液,流动相流速为0. 8-1. 2mL/min,柱箱温 度为10~50°C,采用紫外检测器或二极管阵列检测器,检测波长为240~265nm。
[0012] 本发明所述检测条件除特别说明外,均为常规设置条件。
[0013] 本发明所用的溶剂为色谱纯甲醇,用来溶解标样和样品,之所W选择纯甲醇,是因 为纯甲醇可W完全溶解样品,又因为流动相中含有甲醇,该样避免了引入其他有机物质而 影响分析结果。
[0014] 所述步骤(2)中采用超声波进行震荡,W便使得纯甲醇和样品混合均匀,待样品在 纯甲醇中充分溶解后,再用纯甲醇定容。而先定容再震荡可能会造成纯甲醇的加入量小于 实际所需量,对分析结果的准确性造成一定的影响。
[0015] 步骤(2)中所述的过滤采用的是有机膜过滤,有机膜的孔径为0.45um,是为了除 去苯唾菌胺•締酷吗咐复配制剂样品中一些微小的固体不溶物及纤维物质,W避免堵塞色 谱柱和进样阀,对色谱柱和仪器起到保护作用,同时消除不溶性杂质对分析结果的影响,使 得分析结果更准确。
[0016] 通过过滤,除去了复配制剂中的不溶性杂质,而除有效成分苯唾菌胺和締酷吗咐 之外的其他可溶性杂质,在所述检测条件下能够使得杂质与苯唾菌胺、締酷吗咐达到基线 分离,从而确保分析结果的准确性。
[0017] 所述流动相为甲醇-水溶液,其中甲醇的体积分数为35-55%,在该个范围内可W 使得締酷吗咐和苯唾菌胺达到基线分离。
[0018] 目前对于苯唾菌胺含量的测定方法未有报道,对于同时测定締酷吗咐和苯唾菌胺 含量的方法也没有报道,所W采用高效液相色谱同时测定締酷吗咐和苯唾菌胺含量的检测 波长也是未知的,对此发明人确定了采用高效液相色谱同时测定締酷吗咐和苯唾菌胺含量 的检测波长。所述检测波长为240~265nm,在该个波长范围内,能够使得締酷吗咐、苯唾菌 胺与杂质达到基线分离;所述检测波长优选为254nm,此波长处,苯唾菌胺与締酷吗咐均有 较大吸收。
[0019] 所述进样体积为25uL。
[0020] 所述的复配制剂为悬浮剂或水剂或乳油的一种。
[0021] 为了使得检测结果更准确,在其他分析条件不变的前提下,发明人给出了最佳分 析条件:
[0022] 所述流动相中甲醇的体积分数为50%,流动相流速为1.OmL/min,所述柱温为 30°C,检测波长为254nm。在该样的色谱条件下同时检测締酷吗咐和苯唾菌胺的质量浓度, 所需成本最少,分析时间较短,分析结果最佳。
[0023] 为了达到更好的检测效果和准确度,开启机器自检通过后,在规定的操作条件下, 仪器基线稳定后连续注入数针标样,计算各针相对响应值,达到相邻两针相对响应值变化 小于1.0%时再进行依次进样,该样可W有效的降低由于仪器开机后的不稳定而造成的误 差,提高最终检测结果的准确度。
[0024] 本发明苯唾菌胺和締酷吗咐的质量浓度-峰面积标准曲线的绘制采用的是外标 法,分别得出苯唾菌胺和締酷吗咐的质量浓度-峰面积标准曲线的回归方程;采用高效液 相色谱仪分析得到复配制剂样品中苯唾菌胺和締酷吗咐的峰面积,然后将苯唾菌胺和締酷 吗咐的峰面积分别带入其标准曲线的回归方程方程计算得出苯唾菌胺和締酷吗咐的质量 浓度,然后计算得到苯唾菌胺和締酷吗咐的质量分数。
[0025] 本发明采用高效液相色谱对苯唾菌胺•締酷吗咐复配制剂中有效成分苯唾菌胺和 締酷吗咐的含量进行分析,在特定的波长下,采用特定的检测条件能够将苯唾菌胺•締酷吗 咐复配制剂中的可溶性杂质和待测物分离,该方法精密度高,重现性好,准确度高,重复性 好,能够对复配制剂中的有效成分苯唾菌胺和締酷吗咐进行定量分析,为苯唾菌胺•締酷吗 咐复配制剂中有效成分的定量分析提供了依据,对其在农业生产实践中的应用有重要的实 用价值。
附图说明
[0026] 图1是实施例1中所述标准溶液的高效液相色谱图;
[0027]图2是实施例1中所述样品溶液的高效液相色谱图;
[002引图3是实施例2中所述标准溶液的高效液相色谱图;
[0029]图4是实施例2中所述样品溶液的高效液相色谱图;
[0030] 图5是实施例3中所述标准溶液的高效液相色谱图;
[0031]图6是实施例3中所述样品溶液的高效液相色谱图;
[0032] 由于締酷吗咐存在顺反两种构型,所W在色谱图中存在两个谱峰,那么締酷吗咐 的峰面积为两个峰面积的加和。
具体实施方式 [003引实施例1
[0034] 现生产一批苯唾菌胺•締酷吗咐悬浮剂,为了检测有效成分苯唾菌胺和締酷吗咐 的含量,采用高效液相色谱外标法对苯唾菌胺•締酷吗咐悬浮剂进行定量分析,所述检测条 件为;所述的液相色谱仪为Agilent1100高效液相色谱仪;采用的色谱柱为硅胶柱,柱长 为250mm,柱内径为4. 6mm,流动相为体积分数为35%的甲醇-水溶液,流动相流速为1. 2mL/ min,柱箱温度为10°C,采用紫外检测器,检测波长为240nm。
[0035] 具体步骤包括:
[0036] (1)配置标准储备溶液
[0037] 精密称取苯唾菌胺25mg、締酷吗咐25mg置于25mL容量瓶中,加适量纯甲醇溶解, 用纯甲醇定容摇匀得母液;
[003引(2)配置标准溶液
[0039] 用移液器精确移取一定体积的母液,稀释配置成质量浓度分别为10mg/L、20mg/L、 40mg/L、80mg/L、160mg/L、240mg/L、320mg/L的一系列混合标准溶液A、B、C、D、E、F、G;
[0040] (3)标准曲线绘制
[004U 将标准溶液A、B、C、D、E、F、G摇匀后,利用液相色谱仪上25uL的定量环进样分析, 并同时记录峰面积;采用外标法分别绘制苯唾菌胺和締酷吗咐的质量浓度-峰面积标准曲 线,分别得出苯唾菌胺的标准曲线回归方程;Yi=19263Xi+12290,Ri2=0. 9997,式中Yi表示峰 面积,Xi表示质量浓度,单位为mg/L,Ri为线性相关系数;締酷吗咐的标准曲线回归方程:Y2=6935. 3X2+20349, R22=0. 9997,式中Y2表示峰面积,X 2表示质量浓度,单位为mg/L,R 2为线 性相关系数;
[0042] (4)配置苯唾菌胺•締酷吗咐悬浮剂样品溶液
[0043] 精密称取苯唾菌胺•締酷吗咐悬浮剂样品25mg(m),采用纯甲醇溶解,用超声波震 荡1~lOmin后定容至25血(V),过滤后得待测样品溶液,采用同样的色谱条件在高效液相 色谱仪上W25uL的定量环进样分析,并同时分别记录苯唾菌胺和締酷吗咐的峰面积;
[0044] (5)计算苯唾菌胺和締酷吗咐的含量
Figure CN103364517BD00061
[0047] 上式中;
[0048] 待测样品中苯唾菌胺的质量分数,% ;
[0049] Yi-待测样品中苯唾菌胺的峰面积;
[0050] V-待测样品的定容体积,mL ;
[CK)5Um-待测样品的质量,mg;
[005引《2-待测样品中締酷吗咐的质量分数,%;
[0053]Y2-待测样品中締酷吗咐的峰面积。
[0054] 实施例2
[0化5] 现生产一批苯唾菌胺•締酷吗咐水剂,为了检测有效成分苯唾菌胺和締酷吗咐的 含量,采用高效液相色谱外标法对苯唾菌胺•締酷吗咐水剂进行定量分析,所述检测条件 为;所述的液相色谱仪为AgilentllOO高效液相色谱仪;采用的色谱柱为硅胶柱,柱长为 250mm,柱内径为4. 6mm,流动相为体积分数为50%的甲醇-水溶液,流动相流速为1.OmL/ min,柱箱温度为30°C,采用二极管阵列检测器,检测波长为254nm。
[0化6] 具体步骤包括:
[0化7] (1)配置标准储备溶液
[0化引精密称取苯唾菌胺25mg、締酷吗咐25mg置于25血容量瓶中,加适量纯甲醇溶解, 用纯甲醇定容摇匀得母液;
[0化9] (2)配置标准溶液
[0060] 用移液器精确移取一定体积的母液,稀释配置成质量浓度分别为10mg/L、20mg/L、 40mg/L、80mg/L、160mg/L、240mg/L、320mg/L的一系列混合标准溶液A、B、C、D、E、F、G;
[0061] (3)标准曲线绘制
[006引将标准溶液A、B、C、D、E、F、G摇匀后,利用液相色谱仪上的定量环W25uL进样分 析,并同时记录峰面积;采用外标法分别绘制苯唾菌胺和締酷吗咐的质量浓度-峰面积标 准曲线,分别得出苯唾菌胺的标准曲线回归方程;Yi=19263Xi+12290,Ri2=0. 9997,式中Yi表 示峰面积,Xi表示质量浓度,单位为mg/L,Ri为线性相关系数;締酷吗咐的标准曲线回归方 程;Y2=6935. 3X2+20349,R22=0. 9997,式中Y2表示峰面积,X2表示质量浓度,单位为mg/L,Ra 为线性相关系数;
[0063] (4)配置苯唾菌胺•締酷吗咐水剂样品溶液
[0064] 精密称取苯唾菌胺•締酷吗咐水剂样品50mg (m),采用纯甲醇溶解,用超声波震荡 1~lOmin后定容至50血(V),过滤后得待测样品溶液,采用同样的色谱条件在高效液相色 谱仪上同体积进样分析,并同时分别记录苯唾菌胺和締酷吗咐的峰面积;
[00化](5)计算苯唾菌胺和締酷吗咐的含量
Figure CN103364517BD00071
[0068] 上式中;
[0069] -待测样品中苯唾菌胺的质量分数,% ;
[0070]Yi-待测样品中苯唾菌胺的峰面积;
[0071] V-待测样品的定容体积,mL ;
[007引 m-待测样品的质量,mg;
[007引 《2-待测样品中締酷吗咐的质量分数,% ;
[0074]Y2-待测样品中締酷吗咐的峰面积。
[0075] 实施例3
[0076] 现生产一批苯唾菌胺•締酷吗咐乳油,为了检测有效成分苯唾菌胺和締酷吗咐的 含量,采用高效液相色谱外标法对苯唾菌胺•締酷吗咐乳油进行定量分析,所述检测条件 为;所述的液相离子色谱仪为AgilentllOO高效液相色谱仪;采用的色谱柱为硅胶柱,柱长 为250mm,柱内径为4. 6mm,流动相为体积分数为55%的甲醇-水溶液,流动相流速为0. 8mL/ min,柱箱温度为50°C,采用二极管阵列检测器,检测波长为265nm。
[0077] 具体步骤包括;
[007引 (1)配置标准储备溶液
[0079] 精密称取苯唾菌胺25mg、締酷吗咐25mg置于25mL容量瓶中,加适量纯甲醇溶解, 用纯甲醇定容摇匀得母液;
[0080] (2)配置标准溶液
[0081] 用移液器精确移取一定体积的母液,稀释配置成质量浓度分别为10mg/L、20mg/L、 40mg/L、80mg/L、160mg/L、240mg/L、320mg/L的一系列混合标准溶液A、B、C、D、E、F、G;
[0082] (3)标准曲线绘制
[008引将标准溶液A、B、C、D、E、F、G摇匀后,利用液相色谱仪上的定量环W25uL进样分 析,并同时记录峰面积;采用外标法分别绘制苯唾菌胺和締酷吗咐的质量浓度-峰面积标 准曲线,分别得出苯唾菌胺的标准曲线回归方程;Yi=19263Xi+12290,Ri2=0. 9997,式中Yi表 示峰面积,Xi表示质量浓度,单位为mg/L,Ri为线性相关系数;締酷吗咐的标准曲线回归方 程;Y2=6935. 3X2+20349,R22=0. 9997,式中Y2表示峰面积,X2表示质量浓度,单位为mg/L,Ra 为线性相关系数;
[0084] (4)配置苯唾菌胺•締酷吗咐乳油样品溶液
[0085] 精密称取苯唾菌胺•締酷吗咐乳油样品50mg(m),采用纯甲醇溶解,用超声波震荡 1~lOmin后定容至50血(V),过滤后得待测样品溶液,采用同样的色谱条件在高效液相色 谱仪上W25uL进样分析,并同时分别记录苯唾菌胺和締酷吗咐的峰面积;
[0086] (5)计算苯唾菌胺和締酷吗咐的含量
Figure CN103364517BD00081
[0089] 上式中;
[0090] -待测样品中苯唾菌胺的质量分数,% ;
[0091] Yi-待测样品中苯唾菌胺的峰面积;
[009引 V-待测样品的定容体积,mL ;
[009引 m-待测样品的质量,mg;
[0094] «2-待测样品中締酷吗咐的质量分数,%;
[0095]Y2-待测样品中締酷吗咐的峰面积。
[0096] 试验例
[0097] 为验证本发明所述检测方法的可行性和准确性,现W实施例2为例进行如下验证 试验:
[009引(1)精密度考察
[0099] 液相色谱条件:色谱仪为AgilentTechnologies,llOOInfinity;采用的色谱柱为 硅胶柱,柱长为250mm,柱内径为4. 6mm,流动相为体积分数为50%的甲醇-水溶液,流动相 流速为0. 8mL/min,柱箱温度为10°C,采用紫外检测器,检测波长为240皿。
[0100] 在上述稳定的色谱操作条件下,对同一含量的实施例2中的苯唾菌胺•締酷吗咐 水剂样品进行5次重复测定,测试本方法的精密度。结果发现苯唾菌胺和締酷吗咐的平均 质量分数(%)分别为4. 98、29. 99,标准偏差(%)分别为0. 039、0. 045,相对标准偏差分别为 0. 79%、0. 17%,说明本方法的精密度良好。
[0101] 表1本发明所述方法的精密度考察结果
[0102]
Figure CN103364517BD00082
[0103] (2)准确度考察
[0104] 回收率常被用来评价方法的准确度,将苯唾菌胺、締酷吗咐按苯唾菌胺:締酷吗咐 =1:6 (质量比)的比例配制后测定其含量。测定结果表明;苯唾菌胺和締酷吗咐的回收率分 别为99. 88%、100. 03%,说明本方法的准确度良好。
[0105] 表2本发明所述方法准确度考察结果
[0106]
Figure CN103364517BD00091
[0107] (3)重现性考察
[0108] 在不同的实验室,分别由5名不同的分析人员分析测定同一苯唾菌胺•締酷吗咐 水剂样品中有效成分的质量分数。测定结果表明;苯唾菌胺和締酷吗咐的变异系数分别为 0. 63%、0. 21%,说明本方法的重现性良好。
[0109] 表3本发明所述方法重现性考察结果
[0110]
Figure CN103364517BD00092
[0111] (4)加标回收率考察
[0112] 分别在已知质量浓度均为100.OOmg/L的締酷吗咐和苯唾菌胺溶液中加入高、中、 低3种质量浓度的混合标准溶液进行加标回收实验。测定结果表明;苯唾菌胺和締酷吗咐 的回收率分别为100. 〇3%、99. 96% ;变异系数分别为0. 18%、0. 19%,说明本方法的准确度良 好。
[0113] 表4本发明所述方法加标回收率考察结果
[0114]
Figure CN103364517BD00101

Claims (1)

1. 一种苯噻菌胺•烯酰吗啉复配制剂中有效成分含量的分析方法,其特征在于:采用 高效液相色谱外标法进行定量分析,具体步骤包括: (1) 先用纯甲醇配置苯噻菌胺和烯酰吗啉的混合标准储备溶液,再用纯甲醇对上述混 合标准储备溶液稀释配置成苯噻菌胺和烯酰吗啉的混合标准溶液A、B、C、D、E,采用高效液 相色谱仪进样分析,并同时分别记录苯噻菌胺和烯酰吗啉的峰面积;采用外标法分别绘制 苯噻菌胺和烯酰吗啉的质量浓度-峰面积标准曲线,分别得出其标准曲线的回归方程; (2) 先用纯甲醇溶解苯噻菌胺•烯酰吗啉复配制剂样品溶液,再用超声波震荡l~10min 后定容,过滤后得待测样品溶液,采用高效液相色谱仪进样分析,并同时分别记录苯噻菌胺 和烯酰吗啉的峰面积,根据步骤(1)的标准曲线回归方程计算得苯噻菌胺和烯酰吗啉的质 量浓度,然后计算得到苯噻菌胺和烯酰吗啉的含量; 所述的液相离子色谱仪为Agilent 1100高效液相色谱仪;采用的色谱柱为硅胶柱,柱 长为250mm,柱内径为4. 6mm,流动相为甲醇和水组成的混合液,流动相流速为I. 0 mL/min, 柱箱温度为30°C,检测波长为254 nm ; 所述流动相中甲醇的体积分数为50% ; 所用检测器采用紫外检测器或二极管阵列检测器; 所述进样体积为25 uL ; 所述的复配制剂为悬浮剂或水剂或乳油的一种。
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