CN103349737B - 治疗头痛的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于治疗头痛的中药组合物及其制备方法，该中药组合物由川芎、天麻、白芷、白芍、元胡及全蝎制备而成。本发明提供了有效部位集中、服用剂量小、患者服用方便的经现代药理研究证实，疗效确切、安全可靠、不良反应少的用于治疗头痛的中药组合物及其制备方法。该中药组合物具有活血祛风、通络止痛的功效，可用于偏头痛、紧张性头痛等多种头痛的预防和治疗。

Description

治疗头痛的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体而言，本发明涉及用于治疗头痛的中药组合物、制剂及其制备方法和应用等。 

背景技术

头痛是一种临床上常见的多发病，高发病，经常性的头痛能引起视力减退，疲劳，发热，食欲不振，消瘦，失眠，烦躁不安，记忆力减退，行为异常等症状。中国原发性头痛流行病学调查数据显示：在18～65岁人口中，原发性头痛发病率为23.8%，其中最常见的两种头痛：紧张性头痛为10.77%，偏头痛为9.3%，偏头痛患者人均治疗费用为728元/年。值得注意的是：偏头痛会增加并发症风险，可使缺血性卒中风险增加2.16倍，使发生脑白质异常风险增加3.9倍，还可引发重度抑郁症、恐怖障碍等症。严重的偏头痛被世界卫生组织定为最致残的慢性疾病之一，类同于脑呆、四肢瘫痪和严重精神疾病。 

目前，西医并无治疗头痛、偏头痛的专用特效药物，必须诊断明确引起头痛、偏头痛是何疾病，才可给药，有时即使诊断出引起头痛、偏头痛是何疾病，也无有效药物给予，只能使用去痛片之类的一般止痛药。另外，多数西药都具有成瘾性和其他毒副作用，如去痛片会带来胃肠道等多方面的严重问题，且其往往对患者的头痛、偏头痛无显著改善。 

相较于西医，中医在治疗头痛方面具有毒性低、副作用少，治疗效果明显且复发率低的特点。目前已经有相关治疗头痛、偏头痛的药方公开。如中国专利201110003329.X公开了一种治疗偏头痛的药物，该药物疗效确切效果明显，能够有效地治疗偏头痛；另一方面其中原料包括：白芷、菊花、桂圆、蔓荆子、三七、川芎、天麻、地肤子、夏枯草、石菖蒲、玫瑰花、苍耳子、决明子、莲房、荜茇及益智仁，16种原料，增加原料成本不说，如此之多的原料种类不易在生产中控制药品质量，造成生产成本上升和/或疗效不稳定。 

又如中国专利申请201210416622.3公开了一种治疗偏头痛的药物其中原料 包括生地黄、天麻、蚯蚓、红花、赤芍、川芎、羌活、菊花、龙胆、紫草、车前子、白芍、防风、细辛、肉桂等十几种药物也具有上述缺点。 

为此，本发明人经过长期而艰苦的研究和实践，令人意外地获得了一种中药组合物配方不但能够高效地治疗偏头痛、紧张性头痛等多种头痛，还具有镇痛作用、镇静作用和/或改变血液流变性的作用，具有活血祛风、通络止痛之功效。另外，本发明人还探索了该中药组合物的制备方法，在不影响药物疗效和稳定性的情况下，很大程度地简化了制备流程，尽量将不同的原料同时处理，节约了潜在的并行设备的投入，节省了生产成本，缩短了制备流程。 

发明内容

本发明要解决的技术问题在于提供新的中药组合物，其用于治疗偏头痛、紧张性头痛等多种头痛。另外，本发明还提供了基于该中药组合物的制剂、制备方法和应用等。 

具体而言，在第一方面，本发明提供了用于治疗头痛的中药组合物，其是由川芎7～8份、天麻5.5～6.5份、白芷2.5～3.5份、白芍2.5～3.5份、元胡（即，延胡索）5.5～6.5份及全蝎0.4～0.5份制备而成。 

优选本发明第一方面的中药组合物是由川芎7.5份、天麻6份、白芷3份、白芍3份、元胡6份及全蝎0.45份制备而成。 

为了保证疗效的稳定和有效，本发明人摸索出了本发明第一方面的中药组合物的质量评价标准，尽管中药组合物中的活性成分非常复杂，但是经大量批次研究，发现其中天麻素非常适合作为质量指标。因此优选本发明第一方面的中药组合物的天麻素含量不低于10mg/g，更优选不低于14mg/g。 

本发明人经过长期摸索，得出了在不影响疗效、安全性的情况下便于大规模生产的制备工艺，而且其中便于质量控制，制备的中药组合物质量稳定。因此，优选本发明第一方面的中药组合物由如下制备方法制备： 

1）取处方比例的川芎、天麻、白芷、白芍及元胡，加水煎煮，滤过，合并并收集滤液得水煎液； 

2）将步骤1）获得的水煎液减压浓缩得流浸膏； 

3）将步骤2）所得的流浸膏加乙醇沉淀，收集滤液，浓缩、干燥并粉碎成 细粉； 

4）取处方比例的全蝎粉碎成细粉； 

5）将步骤3）及步骤4）所得的细粉混合均匀，和， 

6）检测步骤5）的混合产物中的天麻素含量，保留天麻素含量不低于10mg/g，优选不低于14mg/g的混合产物，即得中药组合物。 

本发明人经研究进一步优化了制备工艺。例如上述制备方法中： 

在步骤1）中，加水的总重量为所煎煮药材量的5～15倍，优选为10倍。 

或者，上述制备方法中： 

在步骤1）中，煎煮是分2～4次煎煮，优选分3次煎煮。 

或者，上述制备方法中： 

在步骤1）中，每次煎煮的时间为0.5～3h，优选每次煎煮时间为1～2h。 

或者，上述制备方法中： 

在步骤2）中，流浸膏的60℃的相对密度为1.0～1.5，优选为1.10～1.3。 

或者，上述制备方法中： 

在步骤3）中，沉淀时加乙醇至乙醇浓度为60～80%（V/V），优选为70%（V/V）。 

或者，上述制备方法中： 

在步骤3）中，沉淀的时间是12～36h，优选为24h。 

或者，上述制备方法中： 

在步骤3）中，浓缩为浓缩至60℃的相对密度为1.30～1.35的稠膏。 

或者，上述制备方法中： 

在步骤6）中，合格的产物经HPLC检测天麻素含量不低于10mg/g，优选不低于14mg/g。 

在第二方面，本发明相应地提供了本发明第一方面的中药组合物的制备方法，其包括： 

1）取处方比例的川芎、天麻、白芷、白芍及元胡，加水煎煮，滤过，合并并收集滤液得水煎液； 

2）将步骤1）获得的水煎液减压浓缩得流浸膏； 

3）将步骤2）所得的流浸膏加乙醇沉淀，收集滤液，浓缩、干燥并粉碎成细粉； 

4）取处方比例的全蝎粉碎成细粉； 

5）将步骤3）及步骤4）所得的细粉混合均匀，和， 

6）检测步骤5）的混合产物中的天麻素含量，保留天麻素含量不低于10mg/g，优选不低于14mg/g的混合产物，即得中药组合物。 

优选在本发明第二方面的制备方法中 

在步骤1）中，加水的总重量为所煎煮药材量的5～15倍，优选为10倍； 

在步骤1）中，煎煮是分2～4次煎煮，优选分3次煎煮； 

在步骤1）中，每次煎煮的时间为0.5～3h，优选每次煎煮时间为1～2h； 

在步骤2）中，流浸膏的相对密度为1.0～1.5（60℃），优选为1.10～1.3（60℃）； 

在步骤3）中，沉淀时加乙醇至乙醇浓度为60～80%（V/V），优选为70%（V/V）； 

在步骤3）中，沉淀的时间是12～36h，优选为24h；在步骤3）中，浓缩为浓缩至相对密度为1.30～1.35（60℃）的稠膏；和/或， 

在步骤6）中，合格的产物经HPLC检测天麻素含量不低于10mg/g，优选不低于14mg/g。 

在第三方面，本发明提供了用于治疗头痛（如，偏头痛，紧张性头痛等多种头痛）的药物制剂，其包括本发明第一方面的中药组合物和药学上可接受的辅剂。 

在本文中，药学上可接受的辅剂包括药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂等，它们与活性成分相容。运用药学上可接受的辅剂制备药物制剂对本领域普通技术人员来说是公知的。本发明的药物制剂将活性成分（中药组合物）和药学上可接受的辅剂组合在一起，配制成各种制剂，优选为固体制剂和液体制剂，更优选为固体制剂。本发明的制剂可以为单位剂量形式，如片剂、丸剂、胶囊剂(包括持续释放或延迟释放形式)、粉剂、混悬剂、颗粒剂、酊剂、糖浆剂、乳液剂、悬浮液、针剂、等剂型以及各种缓释剂型，从而适合各种给药方式，例如口服、非肠道注射、粘膜、肌肉、静脉内、皮下、眼内、皮内或经过 皮肤等的给药形式。 

优选本发明第三方面的药物制剂是口服药物制剂，如颗粒剂、片剂、丸剂和/或胶囊剂，更优选为片剂。 

药物制剂的用量可以根据其中的活性成分（中药组合物）的含量并结合具体剂型、给药方式以及给药对象的情况而定，也可以根据动物实验来推定人的剂量并确定所需的含量。在本发明的具体实施方式中，药物制剂的用量通常以川芎、天麻、白芷、白芍、元胡及全蝎等生药（原料）的量来计，不考虑其中的药学上可接受的辅剂量。现存的药学上可接受的辅剂数量众多，根据本发明人实验，优选在本发明第三方面的药物制剂中，药学上可接受的辅剂包括淀粉、羧甲淀粉钠和/或二氧化硅。 

在另一方面，本发明提供了本发明第一方面的中药组合物在制备具有镇痛作用、镇静作用和/或改善血液流变性作用的药物中的应用及在治疗或预防偏头痛、紧张性头痛等多种头痛的药物中的应用，优选提供本发明第一方面的中药组合物在制备用于治疗和/或改善本发明具体实施方式所述症状的药物制剂中的应用。优选其中药物制剂是本发明第三方面的药物制剂。 

本发明取得的优异效果包括： 

1.组方新颖合理、简单有效：方中川芎味辛性温，归肝、胆、心包经，辛温升散而能上行头目，善于祛风活血而止头痛，长于治少阳、厥阴经头痛（头顶或两侧痛），为诸经头痛之要药；天麻味甘性平，既息肝风，又平肝阳，祛风通络，与川芎为伍，其力倍增，共为君药。白芷辛散而不燥，长于治阳明经头痛（前额及眉心痛），元胡辛散温通，能活血行气止痛，二者协助君药以增强疏风止痛之效，共为臣药。风药多燥，白芍苦、甘、酸，微寒，能养血柔肝，缓急止痛，使祛风而不伤阴血，防止生发太过，为佐药。全蝎辛平，善于搜风通络止痛，可引诸药直达病所，为使药。诸药合用，共奏活血祛风、通络止痛之功。 

2.有效部位集中、服用剂量小、患者服用方便。本发明所采用水煎醇沉的提取方式对活性物质的有效成分进行了富集，除去了杂质，大大减少了服用剂量，符合现代中药“三效、三小、五方便”的特点。且利用本发明所提供的制剂工艺所制得的片剂，患者服用方便，生产工艺简单、释药速度快，有利于药效的发挥。 

3.制备工艺简单，无特殊试剂及设备的要求，易于进行大规模生产。 

4.产品质量稳定可控。本发明采用薄层层析法对中药原料川芎、天麻、白芷、元胡及白芍鉴别分析，从原料源头进行质量控制。随后采用HPLC的方法以天麻素为检测指标来控制产品的质量，通过原料控制及产品控制相结合的手段实现产品的稳定性。 

为了便于理解，以下将通过具体的实施例对本发明进行详细地描述。需要特别指出的是，这些描述仅仅是示例性的描述，并不构成对本发明范围的限制。依据本说明书的论述，本发明的许多变化、改变对所属领域技术人员来说都是显而易见的。 

另外，本发明引用了公开文献，这些文献是为了更清楚地描述本发明，它们的全文内容均纳入本文进行参考，就好像它们的全文已经在本文中重复叙述过一样。 

具体实施例

以下通过实施例进一步说明本发明的内容。如未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段和市售的常用仪器，可参见《中国药典》以及SFDA的相关规定和指引等。 

实施例一：天芎头风片的制备 

1、处方： 

川芎  750g  天麻  600g  元胡  600g 

白芷  300g  白芍  300g  全蝎  45g 

2、中药组合物的制备： 

取处方比例药材（除全蝎），在加水量分别是药材重量的4倍、3倍及3倍的情况下煎煮三次，每次煎煮1.5小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.20（60℃测）的流浸膏，加乙醇使含醇量为70%，静置24小时，取上清液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.30～1.35（60℃测）的稠膏，减压干燥，并粉碎，过100目筛，得干浸粉。称取处方比例的全蝎，粉碎成粉，与干浸粉混合均匀，即为中药组合物。 

3、药物制剂的制备： 

称取制备好的中药组合物282g，加入168g淀粉和45g羧甲淀粉钠，混匀，用无水乙醇润湿，再以95%乙醇制粒，过18目筛，30～40℃干燥，16目筛整粒，加入约5g二氧化硅，混匀，压制成1000片。 

4.药品质量的鉴定 

色谱条件及系统适用性试验： 

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05%磷酸水溶液（3：97）为流动相；检测波长220nm；流速1.0ml/min；柱温30℃；色谱柱的理论板数按天麻素峰计算应不低于4000。 

对照品溶液的制备：取天麻素对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含50μg的溶液，即得。 

供试品溶液的制备：取本品10片，研细，取细粉约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙腈-0.05%磷酸水溶液（3：97）50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250w，频率33kHz）20分钟，放冷，再称定重量，用乙腈-0.05%磷酸水溶液（3：97）补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，即得。 

测定：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，测定，即得。 

测定结果：取三个批号重量差异项下制得的天芎头风片各10片，精密称定，研细，取约0.3g，精密称定，按供试品溶液制备方法进行制备，分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各20μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件进行测定，按外标法以峰面积计算。结果见表1。 

表1三批样品中天麻素含量测定结果 

由表1的测定结果可以看出，本发明的提取及制剂方法制得的天芎头风片中天麻素含量平均在4mg左右，经换算成不含辅料的中药组合物中，天麻素含量大于10mg/g，平均在14mg/g左右。但是，也发现，在部分批次中，天麻素含量低 于甚至大大低于10mg/g，其药效下降十分明显，故仅仅保留天麻素含量大于10mg/g的制剂进行以下实验。 

实施例二：中药组合物的药效学实验 

【受试药物】 

试验药品名称：实施例1记载的方式获得的中药组合物——天芎头风片(下文如无相反指示，简称“中药组合物”)，其中每克中药组合物相当于9.03生药。 

【阳性对照药】 

琥珀酸舒马普坦片，天津华津制药有限公司，规格：100mg/片，批号：2A6914T。正天丸，华润三九医药股份有限公司，规格：6g/袋，批号：1202034H。 

布洛芬片，重庆科瑞制药（集团）有限公司，规格：0.1克/片，批号：582001。艾司唑仑片，华中药业股份有限公司，规格：1mg/片，批号：20120402。 

【试验动物】 

SD大鼠：购自成都达硕生物科技有限公司，生产许可证号：SCXK(川)2008-24，动物质量合格证号：No.0002873。 

KM小鼠：购自成都达硕生物科技有限公司，生产许可证号：SCXK(川)2008-24，动物质量合格证号：No.0003150。 

【造模用药】 

戊巴比妥钠，Ruibio公司，规格：25g/瓶，批号：P3350。 

利血平注射液，广东邦民制药厂有限公司生产，规格：1ml:1mg，批号120507。硝酸甘油（GTN），北京益民药业有限公司出品，规格1ml:5mg，批号：20110221。【试验方法及结果】 

一、头痛治疗效果实验 

1.皮下注射硝酸甘油所致大鼠偏头痛模型预防和治疗试验 

⑴治疗实验 

取SD大鼠84只，雌雄各半，体重180-220g，随机分为7组，每组12只。①中药组合物高剂量组5.1g生药/kg；②中药组合物中剂量组3.4生药/kg；③中药组合物低剂量组1.7g生药/kg；④西药阳性组琥珀酸舒马普坦片5.4mg/kg；⑤中药阳性组正天丸1.4g/kg；⑥模型对照组和⑦空白对照组给予等体积纯化水 10ml/kg。采用2.5mg/ml硝酸甘油按照10mg/kg剂量对大鼠皮下注射造模，制备大鼠偏头痛模型，造模成功后立即按以上各分组剂量灌胃给药，给药后以每30min分段计算扰头出现次数，共记录不低于3h。 

⑵预防实验 

将上述治疗试验结束后大鼠，继续保持原有组别，每天按各分组对应的剂量灌胃给药，连续2周；末次给药30min后，大鼠皮下注射硝酸甘油注射液10mg/kg造模。造模成功后以每30min分段计算扰头出现次数，共记录不低于3h。 

实验结果各给药组与模型对照组比较，组间t检验处理，结果见表1-1、表1-2。 

实验结果：治疗结果：5.1～1.7g/kg中药组合物对造模后0～60min内和120～180min挠头有极显著抑制作用(p<0.001)，抑制作用与5.4mg/kg琥珀酸舒马普坦片组相近。 

预防结果：5.1～1.7g/kg中药组合物组对造模后0～180min挠头有极显著抑制作用(p<0.001)，其抑制作用与1.4g/kg正天丸组相近。 

从实验结果可以看出，中药组合物在治疗和预防头痛有着明显的疗效，能够显著地抑制头痛所引起的大鼠挠头行为。 

2.利血平化低5-HT伴局部脑血管痉挛小鼠偏头痛模型治疗试验 

取KM小鼠84只，雌雄各半，体重21-30g，随机分为7组，每组12只。①中药组合物高剂量组7.1g生药/kg；②中药组合物中剂量组4.7生药/kg；③中药组合物低剂量组2.4g生药/kg；④西药阳性组琥珀酸舒马普坦片7.6mg/kg；⑤中药阳性组正天丸1.8g/kg；⑥模型对照组和⑦空白对照组给予等体积纯化水10ml/kg。皮下注射利血平（1mg/kg）制造小鼠偏头痛模型，其中空白对照组以注射0.9%的氯化钠注射液代替注射利血平，其它分组注射利血平造模。于造模后第5天开始，空白对照组和模型对照组灌胃纯化水10ml/kg，其他各分组按对应的剂量灌胃药液，连续灌胃6天。于末次给药1小时后测各项指标。结果见表2-1、表2-2及表2-3。 

结果：与模型对照组比，7.1～2.4g/kg中药组合物组能延长凝血时间（p<0.01或p<0.001），降低偏头痛间歇期小鼠的血浆NO、5-HT和大脑5-HT的浓度（p<0.01）。 

结论：中药组合物对利血平致偏头痛有一定的治疗作用，其作用机制与调节血中NO、5-HT的含量和脑组织中5-HT等单胺类神经递质的含量有关。其中，7.1g/kg中药组合物组的治疗作用更为明显。 

表1-1中药组合物治疗给药对硝酸甘油致偏头痛模型大鼠不同时间段挠头次数影响 

注：各给药组与模型对照组比较**p<0.01***p<0.001 

表1-2中药组合物预防给药对硝酸甘油致偏头痛模型大鼠不同时间段挠头次数影响 

注：各给药组与模型对照组比较***p<0.001 

表2-1中药组合物对利血平化偏头痛模型小鼠凝血时间的影响

注：①模型对照组与空白对照组比较^▲▲▲p<0.001②各给药组与模型对照组比较^***p<0.001或^**p<0.01。 

PT：凝血酶原时间；aPTT：部分活化凝血酶原时间。 

表2-2中药组合物对利血平化偏头痛模型小鼠血浆NO和5-HT浓度影响

注：①模型对照组与空白对照组比较^▲▲▲p<0.001②各给药组与模型对照组比较**p<0.01***p<0.00 

表2-3中药组合物对利血平化偏头痛模型小鼠大脑5-HT含量影响

注：①模型对照组与空白对照组比较^▲▲▲p<0.001②各给药组与模型对照组比较**p<0.01***p<0.001 

二、改变血液流变性实验 

改善血瘀模型大鼠血液流变性试验 

取SD大鼠60只，体重220～260g，雌雄各半，随机分为6组，每组10只。。①中药组合物高剂量组3.36g生药/kg；②中药组合物中剂量组1.12g生药/kg；③中药组合物低剂量组0.56g生药/kg；④中药阳性组正天丸1.94g/kg；⑤正常组及⑥模型对照组给予等体积纯化水10ml/kg。按各分组剂量每天灌胃给药，第6天给药后30min，除正常组外，其余各组大鼠皮下注射0.8mg/kg盐酸肾上腺素(Adr)，冰浴（0～2℃）4min，间隔两小时后，再注射一次同等剂量Adr。最后一次注射Adr后12h，腹腔注射3%戊巴比妥钠30mg/kg麻醉大鼠，从腹主动脉取血，以肝素抗凝，在血液流变仪上测定全血黏度和血浆黏度等指标，结果见表3-1、3-2所示。 

结果：3.36～1.12g/kg中药组合物能明显或极显著改善血瘀模型大鼠全血粘度、全血高切还原粘度、全血低切还原粘度、红细胞刚性指数、红细胞聚集指数、全血高切相对指数、全血低切相对指数等血液流变学指标（p<0.05～p<0.001）。 

结论：中药组合物具有明显或极显著改善血瘀证模型动物血液流变性指标作用，表明中药组合物能使血瘀证模型动物血液粘、浓、凝、聚明显恢复，能够有效的改善血液流变性。 

表3-1中药组合物改善血瘀模型大鼠血液流变性试验

注：①模型组与正常组比较^▲p<0.05^▲▲p<0.01^▲▲▲p<0.001②各给药组与模型组比较*p<0.05**p<0.01***p<0.001 

表3-2中药组合物改善血瘀模型大鼠血液流变性影响

注：①模型组与正常组比较^▲p<0.05^▲▲p<0.01^▲▲▲p<0.001②各给药组与模型组比较*p<0.05**p<0.01***p<0.001 

三、镇痛实验 

1.小鼠热板法镇痛试验 

取KM小鼠60只，雌性。随机分为模型对照组、中药阳性组（正天丸）、西药阳性组（布洛芬片）和中药组合物高、中、低剂量组（9.44、4.72和2.36g生药/kg），共6组，连续灌胃给药5天，观察第1次灌胃给药后和末次灌胃给药后2h内的痛阈值，计算痛阈值提高百分率，判断起效时间和镇痛作用持续时间，进行组间统计学分析，评价供试品镇痛作用，结果见表4-1及表4-2。 

结果：如表4-1及表4-2所示，9.44～2.36g/kg中药组合物单次给药及多次给药（连续给药5天）后，对热板法所致小鼠疼痛均有显著镇痛作用（p<0.001～p<0.05），镇痛作用可持续120min，且镇痛作用呈剂量-效应关系。中药组合物镇痛作用及镇痛持续时间优于正天丸（p<0.05）。 

结论：中药组合物对热板法诱发热灼型疼痛模型动物有镇痛作用。 

2.小鼠扭体法镇痛试验 

取KM小鼠60只，雌雄各半。分性别、按体重随机分为模型对照组、中药阳性组（正天丸）、西药阳性组（布洛芬片）和中药组合物高、中、低剂量组（9.44、4.72和2.36g生药/kg），共6组，连续灌胃给药5天，观察第1次灌胃给药后和末次灌胃给药后小鼠对腹腔注射0.6%冰乙酸诱发的扭体反应的抑制作用，计算抑制率，进行组间统计学分析，评价供试品镇痛作用，结果见表4-3及表4-4。 

结果：如结果见表4-3及表4-4所示，9.44～4.72g/kg中药组合物单次给药及多次给药（连续给药5天）后，对醋酸致小鼠疼痛均有显著镇痛作用（p<0.001～p<0.05），镇痛作用呈剂量-效应关系，且多次给药较单次给药效果更佳，说明没有产生药物耐受性，镇痛作用效果优于正天丸（p<0.05）。 

结论：中药组合物对化学刺激致痛模型动物具有镇痛作用。 

表4-1中药组合物单次给药小鼠热板法镇痛试验结果 

注：各给药组与模型对照组比较*p<0.05**P<0.01***p<0.001 

表4-2中药组合物连续给药5天小鼠热板法镇痛试验结果 

注：各给药组与模型对照组比较*p<0.05**P<0.01***p<0.001 

表4-3中药组合物单次给药小鼠扭体法镇痛试验 

注：各给药组与模型对照组比较*p<0.05**p<0.01***p<0.001 

表4-4中药组合物连续给药5天小鼠扭体法镇痛试验 

注：各给药组与模型对照组比较*p<0.05**p<0.01***p<0.001 

四、镇静实验 

1.小鼠自发活动试验 

取KM小鼠60只，雌雄各半。按性别、体重随机分为对照组、中药阳性组（正天丸）、西药阳性组（艾司唑仑片）和中药组合物高、中、低剂量组（9.44、4.72和2.36g生药/kg），共6组，连续灌胃给药5天，观察第1次灌胃给药后和末次灌胃给药后小鼠的自发活动（站立次数和走动次数）情况，进行组间统计学分析，评价供试品镇静作用，结果见表5-1及表5-2。 

结果：9.44～2.36g/kg中药组合物单次给药及多次给药（连续给药5天）后1h能显著减少小鼠站立次数和走动次数(p<0.01或p<0.001)，镇静作用呈剂量-效应关系，中药组合物多次给药与单次给药镇静效果相当，说明没有产生药物耐受性，其镇静作用效果优于正天丸和艾司唑仑片(p<0.05)。 

结论：中药组合物具有镇静作用。 

表5-1中药组合物单次给药小鼠自发活动试验 

注：各给药组与对照组比较*p<0.05**p<0.01***p<0.001 

表5-2中药组合物多次给药小鼠自发活动试验 

注：各给药组与对照组比较*p<0.05**p<0.01***p<0.001 

2.小鼠戊巴比妥钠阈剂量和阈下剂量催眠试验 

设对照组、中药阳性组（正天丸）、西药阳性组（艾司唑仑片）和中药组合物高、中、低剂量组（9.44、4.72和2.36g生药/kg），每组10只KM种小鼠，雌雄各半。连续灌胃给药5天，观察第1次灌胃给药后和末次灌胃给药后，对戊巴比妥钠阈剂量催眠作用（催眠潜伏期和催眠时间）的影响，以及对戊巴比妥钠阈下剂量诱导小鼠入睡数量的影响，评价其镇静作用，进行组间统计学分析，评价供试品镇静作用，结果见表5-3及表5-4。 

结果：9.44～2.36g/kg中药组合物单次给药及多次给药（连续给药5天）后具有延长阈剂量和阈下剂量戊巴比妥钠催眠作用，其协同催眠作用效果优于正天丸片（p<0.05）。 

结论：中药组合物具有镇静作用。 

表5-3中药组合物单次给药小鼠戊巴比妥钠阈下剂量催眠试验 

注：各给药组与模型对照组比较**p<0.01***p<0.001 

表5-4中药组合物多次给药小鼠戊巴比妥钠阈下剂量催眠试验 

注：各给药组与模型对照组比较*p<0.05**p<0.01 

【实验结论】： 

通过以上实验表明：中药组合物可预防和治疗硝酸甘油引起的偏头痛大鼠， 对利血平化低5-HT伴局部脑血管痉挛小鼠偏头痛模型具有显著治疗作用，并且能够有效的改善血液流变性，对热板法诱发热灼型疼痛模型以及醋酸致小鼠疼痛模型均有显著镇痛作用，此外还具有镇静催眠作用。 

实施例三中药组合物的急毒实验 

中药组合物干膏粉按4.25g生药/ml、40ml/kg/次及3次/24h的最大给药量(510.00g生药/kg/24h)，约相当于临床日用剂量983倍，灌胃给药KM小鼠，观察给药后14天内小鼠出现的毒性反应症状和恢复时间。 

结果：给药后，给药组和对照组小鼠运动功能、反射、眼检指征、心血管指征、唾液分泌、肌张力、及皮肤均未见任何异常情况，两组小鼠粪便呈湿润颗粒状，未见惊厥、抽搐、竖毛、痛觉丧失或死亡等毒性反应。试验观察期间给药组小鼠平均体重增长率和小鼠摄食量与对照组相当，各时间点检查两组体重及摄食量无明显差异。系统尸解检查结果无异常。 

结论：中药组合物给KM品系小鼠灌胃未测出LD₅₀，24小时内给药3次，观察14天，小鼠无死亡，其最大受试药物量509.94g/kg/24h，约为临床人拟用量的983倍。在此剂量下未观察到中药组合物的毒性反应。 

实施例四中药组合物的长毒实验 

中药组合物干膏粉按41.54、20.77、10.38g生药/kg/24h，相当于临床剂量的80、40、20倍，连续灌胃给药3个月，停药恢复2周，观察大鼠给药期间和停药期间出现的毒性反应症状。观察结果如下： 

(1)一般情况观察 

给药期间大鼠呼吸系统、消化系统、中枢和运动神经系统、植物神经系统、泌尿生殖系统、眼、皮肤和皮毛观察均无异常。 

(2)体重和大鼠体重增长 

体重:♂、♀大鼠各剂量组与对照组比较无显著性差异（P>0.05）。♂大鼠体重增长：♂大鼠大剂量组第9、12周体重增长明显低于对照组；中剂量组第8、15周体重增长明显高于对照组，第9周体重增长明显低于对照组；小剂量第5周体重增长明显低于对照组。♀大鼠体重增长：大剂量组第4、7、11周体重增长明显 低于对照组；小剂量组第10周体重变化值明显高于对照组，小剂量组第4、11周体重变化值明显低于对照组。分析：大鼠体重增长、摄食量在个别周低于对照组，又在个别周高于对照组，无明显剂量关系，为动物的正常生理波动，非药物引起，故无生物学意义。 

(3)摄食量 

♂大鼠大剂量组第7周饲料摄食量明显高于对照组，第8、12周饲料摄食量明显低于对照组；中剂量组第1、2、3、10、11周饲料摄食量明显高于对照组，第8、12周饲料摄食量明显低于对照组；小剂量组第1、2、10周饲料摄食量明显高于对照组，第8周饲料摄食量明显低于对照组。♀大鼠大剂量组第7周饲料摄食量明显高于对照组，第5周饲料摄食量明显低于对照组；中剂量组第7周饲料摄食量明显高于对照组。 

分析：大鼠摄食量在个别周低于对照组，又在个别周高于对照组，无明显剂量关系，为动物的正常生理波动，非药物引起，故无生物学意义。 

(4)血常规和网织红细胞检查 

给药3个月和恢复期血液学指标各剂量组和对照组比较无明显差异。 

(5)血凝检测 

Coag-T给药期和停药期检查均无明显缩短或延长变化。 

(6)血液生化检查结果 

①肝功能检查 

大鼠连续给药3个月，中剂量组球蛋白（G）明显高于对照组，其值在正常范围内波动，无其它肝损伤特异性指标异常表现，病理组织检查大剂量组肝脏也未见明显异常病理变化，无剂量关系，故无生物学意义。停药2周后恢复。给药3个月和停药2周其它肝功能检查未见明显异常(p>0.05)。 

②肾功能检查 

给药3个月和停药2周肾功能检查未见明显异常(p>0.05)。 

③血脂血糖检查 

给药3个月和停药2周血脂血糖检查未见明显异常(p>0.05)。 

④心肌酶谱检查 

给药3个月和停药2周CK检查未见明显异常(p>0.05)。 

(7)血清电解质检查 

给药3个月中药组合物大剂量组Na离子升高(p<0.05)，升高率1.16%，停药后可以恢复。其余指标无明显差异。停药2周，小剂量组氯离子（CL）明显低于对照组，其值在正常范围内波动，因无剂量关系，故无生物学意义。 

(8)系统尸解及脏器指数检查 

给药3个月和停药2周系统尸解，各组受试大鼠体表、胸腹壁皮下组织、腹腔及盆腔、胸腔检查、颅内检查、心脏、主动脉、肝脏、脾脏、肺、肾、胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、脑、脊髓、视神经、坐骨神经、垂体、淋巴结、内分泌腺（肾上腺、甲状腺、甲状旁腺、胰腺、胸腺）、颌下腺、子宫、阴道、卵巢、乳腺、睾丸、附睾、前列腺、精囊、膀胱、鼻中隔、咽喉、气管、食道、眼、胸骨（骨髓）和骨骼肌均未见异常病变。给药3个月和停药2周各组受试大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、子宫（雌性）、卵巢（雌性）、睾丸（雄性）、附睾（雄性）、肾上腺、胸腺脏器指数检查，均未见异常(p>0.05)。 

(9)病理组织学检查 

连续灌胃给药3个月组织病理学镜下检查，大剂量组和对照组大鼠主要病变表现为呼吸系统（肺）常见的炎症病理改变，停药恢复2周组织病理学镜下检查，大剂量组和对照组大鼠主要病变表现为呼吸系统（肺）常见的组织炎症改变，对两组大鼠上述病变类型数据进行等级资料分析统计和比较,结果均无明显差异(P>0.05）。动物在试验中途无死亡发生，考虑为灌胃给药时呛咳造成肺部炎性改变，与受试物无关。其它系统，如心血管系统、神经系统、淋巴造血系统、视觉系统、骨骼肌肉系统、生殖系统及内分泌系统均未发现明显的器官组织病理性损害。 

(10)毒性分析及结论 

中药组合物灌胃给药3个月未见有明显的毒性反应靶器官，主要毒性反应为本品长期大剂量服用可能引起Na离子升高，停药后可恢复。中剂量组(20.77g生药/kg/24h)及以下剂量为安全剂量。 

Claims (17)

1.用于治疗头痛的中药组合物，其是由以下重量份数的活性原料制成：川芎7～8份、天麻5.5～6.5份、白芷2.5～3.5份、白芍2.5～3.5份、元胡5.5～6.5份、全蝎0.4～0.5份，而且其天麻素含量不低于10mg/g。

2.权利要求1所述的中药组合物，其是由以下重量份数的活性原料制成：川芎7.5份、天麻6份、白芷3份、白芍3份、元胡6份、全蝎0.45份。

3.权利要求1所述的中药组合物，其天麻素含量不低于14mg/g。

4.权利要求1所述的中药组合物，其由如下制备方法制备：

1)取处方比例的川芎、天麻、白芷、白芍及元胡，加水煎煮，滤过，合并并收集滤液，得水煎液；

2)将步骤1)获得的水煎液减压浓缩，得流浸膏；

3)将步骤2)所得的流浸膏加乙醇沉淀，收集滤液，浓缩、干燥并粉碎成细粉；

4)取处方比例的全蝎粉碎成细粉；

5)将步骤3)及步骤4)所得的细粉混合均匀，和，

6)检测步骤5)的混合产物中的天麻素含量，保留天麻素含量不低于10mg/g的混合产物，即得中药组合物。

5.权利要求4所述的中药组合物，其中步骤6)是：检测步骤5)的混合产物中的天麻素含量，保留天麻素含量不低于14mg/g的混合产物，即得中药组合物。

6.权利要求4所述的中药组合物，其中：

在步骤1)中，加水的总重量为所煎煮药材量的5～15倍；

在步骤1)中，煎煮是分2～4次煎煮；

在步骤1)中，每次煎煮的时间为0.5～3h；

在步骤2)中，流浸膏60℃的相对密度为1.0～1.5；

在步骤3)中，沉淀时加乙醇至乙醇浓度为体积比是60～80％；

在步骤3)中，沉淀的时间是12～36h；

在步骤3)中，浓缩为浓缩至60℃的相对密度为1.30～1.35的稠膏；和/或，

在步骤6)中，合格的产物经HPLC检测天麻素含量不低于10mg/g。

7.权利要求6所述的中药组合物，其中：

在步骤1)中，加水的总重量为所煎煮药材量的10倍；

在步骤1)中，煎煮是分3次煎煮；

在步骤1)中，每次煎煮的时间为1～2h；

在步骤2)中，流浸膏60℃的相对密度为1.10～1.3；

在步骤3)中，沉淀时加乙醇至乙醇浓度为体积比是70％；

在步骤3)中，沉淀的时间是24h；和/或，

在步骤6)中，合格的产物经HPLC检测天麻素含量不低于14mg/g。

8.权利要求1所述的中药组合物的制备方法，其包括：

1)取处方比例的川芎、天麻、白芷、白芍及元胡，加水煎煮，滤过，合并并收集滤液，得水煎液；

2)将步骤1)获得的水煎液减压浓缩，得流浸膏；

3)将步骤2)所得的流浸膏加乙醇沉淀，收集滤液，浓缩、干燥并粉碎成细粉；

4)取处方比例的全蝎粉碎成细粉；

5)将步骤3)及步骤4)所得的细粉混合均匀，和，

6)检测步骤5)的混合产物中的天麻素含量，保留天麻素含量不低于10mg/g的混合产物，即得中药组合物。

9.权利要求8所述的制备方法，其中步骤6)是：检测步骤5)的混合产物中的天麻素含量，保留天麻素含量不低于14mg/g的混合产物，即得中药组合物。

10.权利要求8所述的制备方法，其中：

在步骤1)中，加水的总重量为所煎煮药材量的5～15倍；

在步骤1)中，煎煮是分2～4次煎煮；

在步骤1)中，每次煎煮的时间为0.5～3h；

在步骤2)中，流浸膏60℃的相对密度为1.0～1.5；

在步骤3)中，沉淀时加乙醇至乙醇浓度为体积比是60～80％；

在步骤3)中，沉淀的时间是12～36h；

在步骤3)中，浓缩为浓缩至60℃的相对密度为1.30～1.35的稠膏；和/或，

在步骤6)中，合格的产物经HPLC检测天麻素含量不低于10mg/g。

11.权利要求10所述的制备方法，其中：

在步骤1)中，加水的总重量为所煎煮药材量的10倍；

在步骤1)中，煎煮是分3次煎煮；

在步骤1)中，每次煎煮的时间为1～2h；

在步骤2)中，流浸膏60℃的相对密度为1.10～1.3；

在步骤3)中，沉淀时加乙醇至乙醇浓度为体积比是70％；

在步骤3)中，沉淀的时间是24h；和/或，

在步骤6)中，合格的产物经HPLC检测天麻素含量不低于14mg/g。

12.用于治疗头痛的药物制剂，由权利要求1-7之任一所述的中药组合物和药学上可接受的辅剂制成。

13.权利要求12所述的药物制剂，其是口服药物制剂。

14.权利要求13所述的药物制剂，其是颗粒剂、片剂、糖浆剂、混悬剂、丸剂或胶囊剂。

15.权利要求14所述的药物制剂，其是片剂。

16.权利要求1～7之任一所述的中药组合物在制备具有镇痛作用、镇静作用和/或改善血液流变性作用的药物中的应用。

17.权利要求1～7之任一所述的中药组合物在制备治疗或预防头痛的药物中的应用。