CN103330715B

CN103330715B - 一种抗腹膜纤维化的腹膜透析液

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Publication number: CN103330715B
Application number: CN201310272520.3A
Authority: CN
Inventors: 沈圣民; 李继仁
Original assignee: Huaren Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Huaren Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2013-07-01
Filing date: 2013-07-01
Publication date: 2015-09-02
Anticipated expiration: 2033-07-01
Also published as: CN103330715A

Abstract

本发明提供一种抗腹膜纤维化的腹膜透析液，其特点是：所述腹膜透析液中还包括积雪草苷或/和左旋肉碱。其中的电解质包括氯化钠、氯化钙及氯化镁；渗透剂包括葡萄糖、氨基酸、木糖醇、山梨糖醇、果糖、多聚糖及甘油中的至少一种或多种，缓冲碱包括乳酸盐、碳酸氢盐、柠檬酸盐、异柠檬酸盐、丙酮酸盐、琥珀酸盐、延胡索酸盐、苹果酸盐及草酰乙酸盐中的至少一种或多种。左旋肉碱的含量为0.02%至5%w/v，积雪草苷的含量为0.01%至2%w/v。积雪草苷对腹膜等器官的纤维化进程具有阻断作用，左旋肉碱可以提高腹膜透析的超滤效率，并且具有抗腹膜纤维化作用。

Description

一种抗腹膜纤维化的腹膜透析液

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及适于肾衰患者使用的腹膜透析用溶液，包括连续不卧床腹膜透析（CAPD）和自动腹膜透析（APD），具体说是一种抗腹膜纤维化的腹膜透析液。

背景技术

腹膜透析作为一种治疗终末期肾脏病(end stage renal disease，ESRD)患者的方法，由于其居家治疗，操作简便，减少血源性疾病传播，保护残存肾功能等特殊优点，近年来已得到广泛的应用。其原理是以腹膜为半透膜,以不断更换新鲜透析液来达到清除体内过多的水分及毒素的目的。相比于血液透析的透析膜而言,腹膜的孔径较大,因而可清除大、中、小分子的毒素。但是，超滤衰竭，腹膜损伤等问题不断挑战着腹膜透析技术的进一步发展。

目前国内市售的腹透液仅有葡萄糖作为渗透剂，是应用最早而且目前仍被广泛使用的腹膜透析液渗透剂，能被腹膜很快吸收，进入血液后也容易被代谢。因此，为了保证足够的超滤量，就需要应用高浓度以维持渗透梯度。但研究早已证明，高浓度葡萄糖本身以及其所产生的降解产物对于腹腔内细胞的活性和功能具有明显的损害作用，能够抑制细胞增殖和RNA合成，还可引起DNA损伤，促进腹膜间皮细胞凋亡，使用葡萄糖作为渗透剂的最终结果就是由于腹膜作用的丧失，超滤衰竭，不得不退出腹膜透析。

除葡萄糖外，国外市售的腹透液还有用氨基酸和艾考糊精作为渗透剂的产品。氨基酸腹膜透析液临床上仅仅作为辅助使用（当其他营养补充手段受阻），同时氨基酸溶液的应用能够抑制食欲，引起代谢性酸中毒，改变腹膜表面的电荷性质，并增加血中尿素氮水平，抑制白细胞的功能，加重同型半胱氨酸血症，从而增加发生动脉粥样硬化的危险性。艾考糊精腹膜透析液也是作为常规腹透液的补充，可以对超滤量较小的患者提供持续的超滤作用，国外主要用于APD，而由于艾考糊精本身是非生理性的，限制了其像葡萄糖腹透液一样的持续应用，副作用主要体现在因大分子物质所导致的过敏反应，如皮疹等，另外有报道称艾考糊精腹膜透析液更容易引起腹膜炎。

理想的腹膜透析液具有以下几个特点：pH在7左右，较低的糖吸收，持续的渗透作用保证超滤，生物相容性好，包装无增塑剂。尽管目前市售的腹膜透析液还无法满足理想腹膜透析液的特点，但随着腹膜透析插管技术的改进,感染率的下降，腹透患者的治疗情况已经得到明显改善。在此基础上，腹膜纤维化导致的超滤功能丧失已是CAPD患者退出腹膜透析治疗的主要原因之一。体外研究表明高浓度葡萄糖作为渗透剂可上调腹膜间皮细胞纤维连接蛋白（FN）、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）mRNA的表达和合成，可合成许多细胞外基质包括层连蛋白、纤维连接蛋白及Ⅰ、Ⅲ型胶原，其中TGF-β₁是一种强效的致纤维化因子,FN合成增加是纤维化进程的典型表现，它们可参与腹膜硬化的形成，导致透析效能下降。还有研究发现，高糖腹膜透析液可导致腹膜间皮细胞肥大，肥大的间皮细胞是细胞早期衰老的表现，可能与腹膜的损伤有关，最终使腹膜对感染和纤维化的防御功能受损，导致纤维化和功能进行性丧失。因此，探索有效的抗纤维化防治措施，研究新型的腹膜透析液，对延长腹膜寿命和患者透龄，提高腹膜透析水平意义重大。

由于现有腹膜透析液存在上述许多问题和不足，因此，通过选择新的成分用于腹膜透析液中，研究合理的配方，以便配制出具有更好的生物相容性和抗腹膜纤维化作用的新型腹膜透析液，这是目前本技术领域亟待解决的技术问题。发明内容

本发明为解决现有技术存在的问题，提供一种抗腹膜纤维化的腹膜透析液，通过选择新的成分用于腹膜透析液中，并筛选出合理的配方，提高超滤效率，使其具有更好的生物相容性和抗腹膜纤维化作用。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：一种抗腹膜纤维化的腹膜透析液，包括电解质和渗透剂，其特征在于，所述腹膜透析液包括积雪草苷或/和左旋肉碱。

对上述技术方案的改进：所述电解质包括氯化钠、氯化钙及氯化镁中的至少一种；所述渗透剂包括葡萄糖、氨基酸、木糖醇、山梨糖醇、果糖、多聚糖及甘油中的至少一种或多种。

对上述技术方案的进一步改进：所述腹膜透析液还含有缓冲碱，所述缓冲碱为乳酸盐、碳酸氢盐、柠檬酸盐、异柠檬酸盐、丙酮酸盐、琥珀酸盐、延胡索酸盐、苹果酸盐及草酰乙酸盐中的至少一种或多种。

对上述技术方案的进一步改进：所述腹膜透析液还包括血管扩张剂、利尿剂、激素、维生素或抗氧化剂中的至少一种或多种。

对上述技术方案的进一步改进：所述腹膜透析液中积雪草苷的含量范围为0.01至2%w/v，左旋肉碱的含量范围为0.02至5%w/v。

对上述技术方案的进一步改进：所述腹膜透析液中的主要成分浓度范围如下：

钠离子80至150mEq/L

氯离子80至110mEq/L

钙离子0至4.0mEq/L

镁离子0至4.0mEq/L

缓冲碱10至45mEq/L

葡萄糖0至5%w/v

腹膜透析液的pH值为4.5至8.0。

进一步优选地，所述腹膜透析液中的积雪草苷含量为0.05%至0.2%w/v，左旋肉碱的含量为0.02%至0.45%w/v，腹膜透析液的pH值为6.5至7.5。

本发明与现有技术相比具有如下优点和积极效果：

本发明将积雪草苷或/和左旋肉碱加入到腹膜透析液中，积雪草苷不但对肺、肝、肾等器官的纤维化进程具有阻断作用，而且具有抗腹膜纤维化作用。左旋肉碱不但可以提高腹膜透析的超滤效率，减少腹膜对糖的吸收，改善脂质代谢，具有更好的生物相容性，而且对腹膜的纤维化进程具有一定抑制作用。通过筛选出合理的配方，使腹膜透析液具有更好的生物相容性和抗腹膜纤维化作用。

具体实施方式

本发明一种抗腹膜纤维化的腹膜透析液的具体实施方式，包括电解质和渗透剂，所述腹膜透析液还包括积雪草苷或/和左旋肉碱。所述电解质包括氯化钠、氯化钙及氯化镁；所述渗透剂包括葡萄糖、氨基酸、木糖醇、山梨糖醇、果糖、多聚糖及甘油中的至少一种或多种。所述腹膜透析液还含有缓冲碱，所述缓冲碱为乳酸盐、碳酸氢盐、柠檬酸盐、异柠檬酸盐、丙酮酸盐、琥珀酸盐、延胡索酸盐、苹果酸盐及草酰乙酸盐中的至少一种或多种，其中，乳酸盐和碳酸氢盐是更优选的。所述腹膜透析液还包括血管扩张剂、利尿剂、激素、维生素或抗氧化剂中的至少一种或多种。具体实施例如下：

实施例1

一种抗腹膜纤维化的腹膜透析液中的主要成分浓度如下：

钠离子 132mEq/L

钙离子 2.5mEq/L

镁离子 0.5mEq/L

氯离子 95mEq/L

碳酸氢根离子 40mEq/L

葡萄糖 4.25%w/v

左旋肉碱0.2%w/v

实施例2：

一种抗腹膜纤维化的腹膜透析液中的主要成分浓度如下：

钠离子 132mEq/L

钙离子 2.5mEq/L

镁离子 0.5mEq/L

氯离子 95mEq/L

碳酸氢根离子 40mEq/L

葡萄糖 4.25%w/v

左旋肉碱0.05%w/v

积雪草苷0.05%w/v。

实施例3：

一种抗腹膜纤维化的腹膜透析液中的主要成分浓度如下：

钠离子 132mEq/L

钙离子 2.5mEq/L

镁离子 0.5mEq/L

氯离子 95mEq/L

碳酸氢根离子 40mEq/L

葡萄糖 4.25%w/v

左旋肉碱0.2%w/v

积雪草苷0.2%w/v。

上述各实施例腹膜透析液的pH值为4.5至8.0，优选的pH值为6.5至7.5。

上述各实施例腹膜透析液的渗透剂除选择葡萄糖，也可选择氨基酸、木糖醇、山梨糖醇、果糖、多聚糖及甘油中的至少一种或多种。

上述各实施例腹膜透析液还可添加缓冲碱，缓冲碱为乳酸盐、碳酸氢盐、柠檬酸盐、异柠檬酸盐、丙酮酸盐、琥珀酸盐、延胡索酸盐、苹果酸盐及草酰乙酸盐中的至少一种或多种，其中，乳酸盐和碳酸氢盐是更优选的。

上述各实施例腹膜透析液还可包括血管扩张剂、利尿剂、激素、维生素或抗氧化剂中的至少一种或多种。

上述腹膜透析液一般装于塑料容器，由以下材料制成：聚丙烯、聚乙烯、聚氯乙烯、聚酯、乙烯/醋酸乙烯酯共聚物、苯乙烯-乙烯-丁烯（SEB聚合物）、尼龙或以上组分的混合物。该容器优选含有一个单室用于盛装药液，也可以含有两个或多个室。

本发明选用左旋肉碱和积雪草苷的根据：

积雪草苷（Asiaticoside）是伞形科植物积雪草的全草中提取出的三萜皂苷的主要成分之一。研究发现，积雪草苷具有治疗创伤、抗炎和抗胃溃疡等活性，并且对胶原合成代谢有重要影响。体外和体内研究结果发现，积雪草苷可干扰成纤维细胞的DNA合成，抑制成纤维细胞增殖，从而减少胶原蛋白的合成，对纤维化进程具有一定的阻断作用（《胃肠病学和肝病学杂志》2009年5月第18卷第5期397-399；《中国中西医结合杂志》2003年6月第23卷213-216）。目前只有积雪草苷对肺、肝、肾等器官的纤维化抑制作用的报道，但是，尚未有腹膜纤维化的相关研究。

左旋肉碱（L-Carnitine）又名维生素B_T,广泛分布于体内不同组织细胞,作用是携带长链脂酰CoA通过线粒体内膜,促进三羧酸循环正常进行,协助细胞维持生理活动所需的能量生成。有研究表明，将左旋肉碱加入到腹膜透析液中可通过增强内皮细胞表达和水通道蛋白的功能，增加自由水通过腹膜的量从而增加超滤，同时，可以减少并消除葡萄糖及葡萄糖降解产物对腹膜间皮细胞的损伤，对腹膜有防护作用，有利于透龄的延长[The International Journal ofArtificial Organs》2005，28(2):177-87]。通过本申请人的研究表明，高糖条件下施以一定浓度左旋肉碱可以随着药物作用时间延长，腹膜间皮细胞纤维连接蛋白（FN）合成分泌减少,提示左旋肉碱对腹膜的纤维化进程具有一定抑制作用。

为证明本发明腹膜透析液具有更好的生物相容性和抗腹膜纤维化作用，通过对表1中本发明配方的腹膜透析液及现有配方的腹膜透析液进行超滤效率及抗腹膜纤维化等相关试验，试验结果见表2、表3。

表1各待测腹膜透析液处方

注：试验所用样品为以上处方所制成的水溶液

1、灭菌方法：

药液装入三层输液用共挤膜所致袋中，湿热灭菌，灭菌温度115℃，灭菌时间30min。

2、试验方法：

将雄性SD大鼠50只按随机数字表分为5组，每组10只：对照组腹腔注射20ml生理盐水，G组、GC组、GCA-1组、GCA-2组分别按上述表中将相应处方的药液灌注20ml透析液入腹腔，灌注均为1次/d，观察4周。

3、超滤量的测定：

4周后向大鼠腹腔灌注4.25%腹透液20ml，2h后处死，准确测量超滤量（超滤量=最后出水量-20ml），同时留取腹膜标本。

对照组、G、GC、GCA-1、GCA-2用药组超滤量分别为(4.12±1.26)，(-1.12±1.96)，(2.65±1.38)，(2.47±1.54)，(2.71±0.87)ml；4个用药组与对照组相比较，超滤量均显著下降(P<0.05)；加入左旋肉碱的GC组、GCA-1组、GCA-2组与只有葡萄糖的G组比较，超滤量明显增加(P<0.05)；加入积雪草苷的GCA-1组和GCA-2组与未加入的GC组比较，超滤量无明显差异(P>0.05)。

4、腹膜厚度的测定：

4周后取大鼠壁层腹膜组织，VG法染色：切片脱蜡至水，用Weigert氏苏木精染20min，流水冲洗10min，染Van Gieson氏液1min，用体积分数95%乙醇快速分化，无水乙醇脱水，二甲苯透明，封固。光学显微镜观察，镜下测量腹膜胶原厚度。试验结果如表2：

表2各组大鼠腹膜厚度比较

a:P<0.05，与对照组比较；b：P<0.05，与G组比较；c：P<0.05，与GC组比较

5、腹膜组织FN-mRNA的表达的测定：

逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）方法测定脏层腹膜组织组织FN-mRNA的表达，引物利用引物设计软件Primer5.0完成。应用凝胶成像分析系统对电泳结果进行成像并检测各电泳条带的吸收度(A),结果以A(FN)/A(B-actin)表示FN-mRNA的相对表达水平。

表3

通过表3可知，与对照组相比，G组大鼠腹膜组织中FN mRNA的表达显著增高，说明传统的葡萄糖腹透液显著增加FN的分泌；而经左旋肉碱和积雪草苷治疗过的大鼠,其腹膜组织中FN mRNA的表达与G组相比则明显降低，尤其是加入积雪草苷的腹透液治疗组与对照组相比无显著性差异。

当然，上述说明并非是对发明的限制，本发明也并不限于上述举例，本技术领域的普通技术人员，在本发明的实质范围内作出的变化、改型、添加或替换，也应属于本发明的保护范围。

Claims

1.一种抗腹膜纤维化的腹膜透析液，包括电解质和渗透剂，其特征在于，所述腹膜透析液还包括积雪草苷和左旋肉碱，所述电解质包括氯化钠、氯化钙及氯化镁中的至少一种；所述渗透剂包括葡萄糖、氨基酸、木糖醇、山梨糖醇、果糖、多聚糖及甘油中的至少一种或多种，所述腹膜透析液还含有缓冲碱，所述缓冲碱为乳酸盐、碳酸氢盐、柠檬酸盐、异柠檬酸盐、丙酮酸盐、琥珀酸盐、延胡索酸盐、苹果酸盐及草酰乙酸盐中的至少一种或多种，所述腹膜透析液还包括血管扩张剂、利尿剂、激素、维生素或抗氧化剂中的至少一种或多种，所述腹膜透析液中积雪草苷的含量范围为0.01 至2%w/v，左旋肉碱的含量范围为0.02 至5%w/v，所述腹膜透析液中的其它主要成分浓度范围如下：

钠离子80 至150mEq/L

氯离子80 至110 mEq/L

钙离子0 至4.0 mEq/L

镁离子0 至4.0 mEq/L

缓冲碱10 至45 mEq/L

葡萄糖0 至5% w/v

腹膜透析液的pH 值为4.5 至8.0。

2.按照权利要求1 所述的抗腹膜纤维化的腹膜透析液，其特征在于，所述腹膜透析液中的积雪草苷含量为0.05% 至0.2% w/v，左旋肉碱的含量为0.02% 至0.45% w/v，腹膜透析液的pH 值为6.5 至7.5。