CN103314856A - 白芨的侧芽组培繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
白芨的侧芽组培繁殖方法，属于中药材种植技术领域，包括引种灭菌、芽体萌发培养、丛生芽诱导培养、增殖培养和生根培养五大步骤，其采用侧芽进行组培，所得到的幼苗污染率低，分化率高，遗传性状稳定，有效物质含量高；同时本发明方法还大大缩短了白芨的组培繁殖周期，从剪切侧芽到生根苗的组培周期不到4个月，大大缩短了生产时间，降低了生产成本。
Description
技术领域
本发明属于中药材种植技术领域，特别是一种白芨的侧芽组培繁殖方法。
背景技术
白芨为兰科白芨属多年生草本植物，别名白根、地螺丝、白鸡娃、羊角七、紫兰、刀口药、连及草等。以块茎供药用，能收敛止血，消肿生肌；治肺结核咳血，支气管扩张咯血、胃溃疡吐血、尿血、便血等症。外用治外伤出血、烧烫伤、手足皲裂等症。在生物医药、保健食品、纺织印染、特种涂料和日用化工等方面有巨大的商业利用价值。随着白芨食品的开发利用和印染业、美容业的需求，白芨用量日趋增多。
白芨的种子自然萌发率极低，繁殖困难，野生资源稀少，由于需求量大，野生资源已经频临枯竭，现已列入《濒危动植物种国际贸易公约》予以保护，因此只有采取人工繁育，目前的常规方法大多以分株为主，即将块茎切成小块种植，繁殖系数低，已经无法满足市场需要。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是：针对现有技术的不足，提供一种利用白芨的侧芽进行组织培养，以便快速繁殖白芨幼苗，满足市场需要。
为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是白芨的侧芽组培繁殖方法，包括引种灭菌、芽体萌发培养、丛生芽诱导培养、增殖培养和生根培养五大步骤，其特征在于具体方法如下。
⑴引种灭菌：选取健壮的野生白芨，将侧芽切下，在流水下冲洗，放入1%洗洁精水溶液中浸泡20分钟，然后用刷子轻轻刷洗，并用无菌水充分洗净；在超净工作台上将侧芽放置在75％的酒精中消毒30秒钟后，再用0．2％的HgCl2水溶液浸泡7～9min，然后用无菌水冲洗5～6次，然后切掉侧芽底端形成新的伤口。
⑵芽体萌发培养：将消毒处理后的侧芽作为外植体接种在萌发培养基上，每瓶接种5～7株侧芽，在夜温23℃，日温25℃，相对湿度60%～65%，光照强度3000lx，每天光照开始时间上午7:00，每天光照时长12小时的条件下进行芽体萌发培养，15天后芽体萌发，15～30天后每瓶有4～6株萌发出带叶小苗，成活率达90%。
⑶丛生芽诱导培养：将小苗切下转接到诱导培养基上，每瓶接种5～7株，在夜温24℃，日温26℃，相对湿度60%～65%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行丛生芽诱导培养，在16～22天之后均生成大量丛生芽，诱导率达100%。
⑷增殖培养：当丛生芽茎长到1～2cm时，将其切分成单芽，转入到增殖培养基中，每瓶接种5～7株，在夜温25℃，日温27℃，相对湿度63%～67%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行丛生芽增殖培养，13～17天之内可观察到节间处出现很多凸起，接下来13～17天之内可观察到平均每瓶有增殖丛生芽25～30株，增殖系数达4.5。
⑸生根壮苗培养：当增殖丛生芽长到3～4cm时，将其切分成单芽，转入生根培养基上进行生根诱导培养，每瓶接种5～7株，在夜温26℃，日温28℃，相对湿度65%～70%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行生根培养。
38～40天后，可观察到平均每瓶有根须5～7根，茎长3～4cm且粗壮的白芨苗4～7株；此后，即可将白芨组培苗进行炼苗移栽。
上述组培繁殖方法中，所提到的各阶段培养基的配方是。
萌发培养基：LS+6～BA1.2mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30 g/L +琼脂5g/L；pH5.8。
诱导培养基：B001 BM+BA4+IAA1+卡拉胶5g/L+蔗糖30 g/L；PH6.0。
增殖培养基：B002 BM+ IAA0.3+卡拉胶5g/L+蔗糖30 g/L；PH6.0。
生根壮苗培养基：B003 BM+ IAA1+卡拉胶5g/L+蔗糖30 g/L；PH6.0。
本发明的有益效果是采用侧芽进行组培，所得到的幼苗污染率低，分化率高，遗传性状稳定，有效物质含量高；同时本发明方法还大大缩短了白芨的组培繁殖周期，从剪切侧芽到生根苗的组培周期不到4个月，大大缩短了生产时间，降低了生产成本。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明，以下实施例旨在说明本发明而不是对本发明的进一步限定，不应以此限制本发明的保护范围。
实施例1。
首先配制培养基。
萌发培养基：LS+6～BA1.2mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30 g/L +琼脂5g/L；pH5.8。
诱导培养基：B001 BM+BA4+IAA1+卡拉胶5g/L+蔗糖30 g/L；PH6.0。
增殖培养基：B002 BM+ IAA0.3+卡拉胶5g/L+蔗糖30 g/L；PH6.0。
生根壮苗培养基：B003 BM+ IAA1+卡拉胶5g/L+蔗糖30 g/L；PH6.0。
然后选取健壮的野生白芨，将侧芽切下，在流水下冲洗，放入1%洗洁精水溶液中浸泡20分钟，然后用刷子轻轻刷洗，并用无菌水充分洗净；在超净工作台上将侧芽放置在75％的酒精中消毒30秒钟后，再用0．2％的HgCl2水溶液浸泡7min，然后用无菌水冲洗5～6次，再切掉侧芽底端形成新的伤口；将消毒处理后的侧芽作为外植体接种在萌发培养基上，每瓶接种5株侧芽，在夜温23℃，日温25℃，相对湿度60%，光照强度3000lx，每天光照开始时间上午7:00，每天光照时长12小时的条件下进行芽体萌发培养，15天后芽体萌发，15～30天后每瓶有4～6株萌发出带叶小苗，成活率达90%；将小苗切下转接到诱导培养基上，每瓶接种5株，在夜温24℃，日温26℃，相对湿度60%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行丛生芽诱导培养，在16～22天之后均生成大量丛生芽，诱导率达100%；当丛生芽茎长到1～2cm时，将其切分成单芽，转入到增殖培养基中，每瓶接种5株，在夜温25℃，日温27℃，相对湿度63%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行丛生芽增殖培养，13～17天之内可观察到节间处出现很多凸起，接下来13～17天之内可观察到平均每瓶有增殖丛生芽25～30株，增殖系数达4.5；当增殖丛生芽长到3～4cm时，将其切分成单芽，转入生根培养基上进行生根诱导培养，每瓶接种5株，在夜温26℃，日温28℃，相对湿度65%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行生根培养；38天后，可观察到平均每瓶有根须5～7根，茎长3～4cm且粗壮的白芨苗4～7株；此时，即可将白芨组培苗进行炼苗移栽。
实施例2。
选取健壮的野生白芨，将侧芽切下，在流水下冲洗，放入1%洗洁精水溶液中浸泡20分钟，然后用刷子轻轻刷洗，并用无菌水充分洗净；在超净工作台上将侧芽放置在75％的酒精中消毒30秒钟后，再用0．2％的HgCl2水溶液浸泡8min，然后用无菌水冲洗5～6次，再切掉侧芽底端形成新的伤口；将消毒处理后的侧芽作为外植体接种在萌发培养基上，每瓶接种6株侧芽，在夜温23℃，日温25℃，相对湿度63%，光照强度3000lx，每天光照开始时间上午7:00，每天光照时长12小时的条件下进行芽体萌发培养，15天后芽体萌发，15～30天每瓶有4～6株萌发出带叶小苗，成活率达90%；将小苗切下转接到诱导培养基上，每瓶接种6株，在夜温24℃，日温26℃，相对湿度63%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行丛生芽诱导培养，在16～22天之后均生成大量丛生芽，诱导率达100%；当丛生芽茎长到1～2cm时，将其切分成单芽，转入到增殖培养基中，每瓶接种6株，在夜温25℃，日温27℃，相对湿度65%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行丛生芽增殖培养，13～17天之内可观察到节间处出现很多凸起，接下来13～17天之内可观察到平均每瓶有增殖丛生芽25～30株，增殖系数达4.5；当增殖丛生芽长到3～4cm时，将其切分成单芽，转入生根培养基上进行生根诱导培养，每瓶接种6株，在夜温26℃，日温28℃，相对湿度68%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行生根培养；38天后，可观察到平均每瓶有根须5～7根，茎长3～4cm且粗壮的白芨苗4～7株；此时，即可将白芨组培苗进行炼苗移栽。
实施例3。
选取健壮的野生白芨，将侧芽切下，在流水下冲洗，放入1%洗洁精水溶液中浸泡20分钟，然后用刷子轻轻刷洗，并用无菌水充分洗净；在超净工作台上将侧芽放置在75％的酒精中消毒30秒钟后，再用0．2％的HgCl2水溶液浸泡9min，然后用无菌水冲洗5～6次，再切掉侧芽底端形成新的伤口；将消毒处理后的侧芽作为外植体接种在萌发培养基上，每瓶接种7株侧芽，在夜温23℃，日温25℃，相对湿度65%，光照强度3000lx，每天光照开始时间上午7:00，每天光照时长12小时的条件下进行芽体萌发培养，15天后芽体萌发，15～30天每瓶有4～6株萌发出带叶小苗，成活率达90%；将小苗切下转接到诱导培养基上，每瓶接种7株，在夜温24℃，日温26℃，相对湿度65%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行丛生芽诱导培养，在16～22天之后均生成大量丛生芽，诱导率达100%；当丛生芽茎长到1～2cm时，将其切分成单芽，转入到增殖培养基中，每瓶接种7株，在夜温25℃，日温27℃，相对湿度67%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行丛生芽增殖培养，13～17天之内可观察到节间处出现很多凸起，接下来13～17天之内可观察到平均每瓶有增殖丛生芽25～30株，增殖系数达4.5；当增殖丛生芽长到3～4cm时，将其切分成单芽，转入生根培养基上进行生根诱导培养，每瓶接种7株，在夜温26℃，日温28℃，相对湿度70%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行生根培养；38天后，可观察到平均每瓶有根须5～7根，茎长3～4cm且粗壮的白芨苗4～7株；此时，即可将白芨组培苗进行炼苗移栽。
Claims (1)
1.白芨的侧芽组培繁殖方法，包括引种灭菌、芽体萌发培养、丛生芽诱导培养、增殖培养和生根培养五大步骤，其特征在于具体方法如下：
⑴引种灭菌：选取健壮的野生白芨，将侧芽切下，在流水下冲洗，放入1%洗洁精水溶液中浸泡20分钟，然后用刷子轻轻刷洗，并用无菌水充分洗净；在超净工作台上将侧芽放置在75％的酒精中消毒30秒钟后，再用0．2％的HgCl2水溶液浸泡7～9min，然后用无菌水冲洗5～6次，然后切掉侧芽底端形成新的伤口；
⑵芽体萌发培养：将消毒处理后的侧芽作为外植体接种在萌发培养基上，每瓶接种5～7株侧芽，在夜温23℃，日温25℃，相对湿度60%～65%，光照强度3000lx，每天光照开始时间上午7:00，每天光照时长12小时的条件下进行芽体萌发培养，15天后芽体萌发，15～30天后每瓶有4～6株萌发出带叶小苗，成活率达90%；
⑶丛生芽诱导培养：将小苗切下转接到诱导培养基上，每瓶接种5～7株，在夜温24℃，日温26℃，相对湿度60%～65%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行丛生芽诱导培养，在16～22天之后均生成大量丛生芽，诱导率达100%；
⑷增殖培养：当丛生芽茎长到1～2cm时，将其切分成单芽，转入到增殖培养基中，每瓶接种5～7株，在夜温25℃，日温27℃，相对湿度63%～67%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行丛生芽增殖培养，13～17天之内可观察到节间处出现很多凸起，接下来13～17天之内可观察到平均每瓶有增殖丛生芽25～30株，增殖系数达4.5；
⑸生根壮苗培养：当增殖丛生芽长到3～4cm时，将其切分成单芽，转入生根培养基上进行生根诱导培养，每瓶接种5～7株，在夜温26℃，日温28℃，相对湿度65%～70%，光照强度3000lx，每天光照时长12小时的条件下进行生根培养；
上述组培繁殖方法中，所提到的各阶段培养基的配方是：
萌发培养基：LS+6～BA1.2mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30 g/L +琼脂5g/L；pH5.8；
诱导培养基：B001 BM+BA4+IAA1+卡拉胶5g/L+蔗糖30 g/L；PH6.0；
增殖培养基：B002 BM+ IAA0.3+卡拉胶5g/L+蔗糖30 g/L；PH6.0；
生根壮苗培养基：B003 BM+ IAA1+卡拉胶5g/L+蔗糖30 g/L；PH6.0。
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Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104686363A (zh) * | 2015-03-28 | 2015-06-10 | 邓文祥 | 白芨外植体的无菌化处理方法 |
| CN104782368A (zh) * | 2015-04-16 | 2015-07-22 | 济宁森立生物科技有限公司 | 一种藏红花球茎的繁殖方法 |
| CN106613936A (zh) * | 2015-11-02 | 2017-05-10 | 丹阳华都园艺有限公司 | 一种白芨组培育苗的方法 |
| CN107155880A (zh) * | 2017-05-05 | 2017-09-15 | 江苏东郁园林科技有限公司 | 一种药用白芨组织培养种苗繁育方法 |
| CN108770693A (zh) * | 2018-06-22 | 2018-11-09 | 遵义市播州区惠联生态农业发展有限公司 | 一种白芨的种子快速育苗方法 |
| CN108886987A (zh) * | 2018-06-11 | 2018-11-27 | 中国科学院昆明植物研究所 | 一种蓖麻侧芽快速生根繁殖方法 |
-
2013
- 2013-07-08 CN CN 201310282940 patent/CN103314856A/zh active Pending
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104686363A (zh) * | 2015-03-28 | 2015-06-10 | 邓文祥 | 白芨外植体的无菌化处理方法 |
| CN104686363B (zh) * | 2015-03-28 | 2016-06-29 | 邓文祥 | 白芨外植体的无菌化处理方法 |
| CN104782368A (zh) * | 2015-04-16 | 2015-07-22 | 济宁森立生物科技有限公司 | 一种藏红花球茎的繁殖方法 |
| CN106613936A (zh) * | 2015-11-02 | 2017-05-10 | 丹阳华都园艺有限公司 | 一种白芨组培育苗的方法 |
| CN107155880A (zh) * | 2017-05-05 | 2017-09-15 | 江苏东郁园林科技有限公司 | 一种药用白芨组织培养种苗繁育方法 |
| CN107155880B (zh) * | 2017-05-05 | 2019-11-22 | 江苏东郁园林科技有限公司 | 一种药用白芨组织培养种苗繁育方法 |
| CN108886987A (zh) * | 2018-06-11 | 2018-11-27 | 中国科学院昆明植物研究所 | 一种蓖麻侧芽快速生根繁殖方法 |
| CN108770693A (zh) * | 2018-06-22 | 2018-11-09 | 遵义市播州区惠联生态农业发展有限公司 | 一种白芨的种子快速育苗方法 |
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