CN103293232A - 一种藿香正气滴丸中百秋李醇含量的测定方法 - Google Patents

Abstract

一种藿香正气滴丸中百秋李醇含量的测定方法，该方法包括如下步骤：步骤1，对照品溶液的制备；步骤2，供试品溶液的制备；步骤3，阴性样品溶液的制备；步骤4，注入气相色谱仪，计算百秋李醇含量。

Description

一种藿香正气滴丸中百秋李醇含量的测定方法

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及一种藿香正气滴丸中百秋李醇含量的测定方法。

背景技术

藿香正气滴丸是天津天士力制药股份有限公司生产的独家品种，作为天士力研发的现代中药代表剂型，具有药物稳定性高、不易水解氧化、起效快、无异味、口感好、携带方便等特性。该制剂是包括广藿香油、苍术、陈皮、厚朴在内的10味药材组成的复方制剂，而现有检测方法中仅对其中的广藿香油、白芷、厚朴3味药材进行了定性或定量测定，不能全面反映产品的质量状况。本发明针对君药广藿香油建立了产品中百秋李醇含量测定方法，进一步提高了该产品的质量控制水平。

发明内容：

所要解决的技术问题

本发明目的在于提供一种藿香正气滴丸中百秋李醇含量的测定方法，为该制剂的质量控制提供更完善的检测方法。

技术方案

本发明的藿香正气滴丸处方如下：苍术80～240g、陈皮80～240g、厚朴80～240g、白芷120～360g、茯苓120～360g、大腹皮120～360g、生半夏80～240g、甘草浸膏10～30g、广藿香油0.8～2.4ml、紫苏叶油0.4～1.2ml和适量辅料制成。所述藿香正气滴丸

【处方】苍术160g  陈皮160g    厚朴160g  白芷240g

茯苓240g  大腹皮240g  生半夏160g    甘草浸膏20g

广藿香油1.6mL紫苏叶油0.8mL

【制法】以上十味，取苍术、陈皮、厚朴、白芷分别照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用60％乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，收集渗漉液约8000mL，回收乙醇、药液备用；茯苓加水煮沸后，80℃温浸二次，第一次3小时，第二次2小时，合并温浸液，滤过，滤液备用；生半夏用冷水浸泡，每8小时换一次水，泡至透心后，另加干姜13.5g，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液备用；大腹皮加水煎煮3小时，滤过，滤液与上述漉液及滤液合并，浓缩至稠膏状，加入甘草浸膏、广藿香油和紫苏叶油，混匀。取适量的聚乙二醇-6000，加热使熔融，加入上述稠膏，搅匀，制成滴丸1025g，包薄膜衣，即得。

本发明提供一种藿香正气滴丸中百秋李醇含量的测定方法，该方法包括如下步骤：

步骤1，对照品溶液的制备；

步骤2，供试品溶液的制备；

步骤3，阴性样品溶液的制备；

步骤4，注入气相色谱仪，计算百秋李醇含量。

其中，步骤1，对照品溶液的制备，方法如下：

取百秋李醇对照品适量，精密称定，加正己烷制成每1ml含百秋李醇0.15～0.40mg，优选为每1ml含百秋李醇0.24mg的溶液，即得。

步骤2，供试品溶液的制备，方法如下：

取本品适量压破，取约5.0g，精密称定，加20～40ml水超声20～40min溶解，用10～30ml正己烷萃取1～3次，优选加35ml水超声30min溶解，用20ml正己烷萃取2次，合并上层正己烷溶液减压蒸干，残渣加正己烷溶解，置5ml容量瓶中，定容至刻度，过0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液即得。

步骤3，阴性样品溶液的制备，方法如下：

按藿香正气滴丸处方配比，取除广藿香油的各味药材，按藿香正气滴丸制法制备不含广藿香油的滴丸，再按步骤2供试品溶液制备方法，制成阴性样品溶液。

步骤4，注入气相色谱仪，计算百秋李醇含量，方法如下：

采用气相色谱法，其色谱条件为：色谱柱的固定相以5％苯基95％二甲基聚硅氧烷为填料，优选Agilent HP-5(30m*0.32mm*0.25um)；柱温为程序升温见表1，优选条件见表2；进样口温度为250～300℃，优选280℃；检测器为FID；检测器温度为250～300℃，优选280℃；载气为氮气；分流进样，其分流比为20∶1～3∶1，优选5∶1；进样量为0.5～2μL，优选1μL。

表1程序升温表

上述方法是经过筛选获得的，以下为筛选过程。

1.1仪器与试药

仪器：美国Agilent 7890A，ChemStation工作站。

色谱柱：

①极性柱，固定相以聚乙二醇为填料，Agilent DB-WAXetr(30m*0.32mm*0.25um)；

②非极性柱，固定相以5％苯基95％二甲基聚硅氧烷为填料，Agilent HP-5(30m*0.32mm*0.25um)；

③中等极性柱，固定相以14％氰丙基-苯基，86％二甲基聚硅氧烷为填料，Agilent DB-1701(30m*0.25mm*0.25um)。

试剂：正己烷(色谱纯，天津市康科德科技有限公司)。

对照品：百秋李醇(中国药品生物制品检定所，批号：110772-200404，含量测定用)。

样品：藿香正气滴丸(天津天士力制药股份有限公司，批号：110116、110803)

1.2色谱条件的选择

1.2.1色谱柱的选择

参照相关文献，考察不同极性毛细管柱进行试验，结果色谱柱①对样品中成分无保留，不能分离；色谱柱③虽经多次调节不同程序升温条件，但结果仍不能达到分离要求，见图1；色谱柱②对百秋李醇的分离较好，故使用色谱柱②进行程序升温条件的进一步考察，见图2。

1.2.2程序升温条件的选择

使用色谱柱②分离百秋李醇的气相色谱条件进行进一步的考察，故在满足分离度要求的前提下，将程序升温条件进行考察调整。结果在此程序升温条件(见表2)下，百秋李醇的分离度满足要求，分析时长为29min。

1.2.3色谱条件：色谱柱：固定相以5％苯基95％二甲基聚硅氧烷为填料，AgilentHP-5(30m*0.32mm*0.25um)；柱温：程序升温条件见表1；进样口温度：280℃；检测器：FID；温度：280℃；载气：氮气；分流进样；分流比：5∶1；进样量：1μL。

1.3供试品处理方法的选择

1.3.1供试品处理提取方法的考察

因藿香正气滴丸处方中广藿香油的用量仅为1.6ml，参照2010版《中国药典》“广藿香油”项下规定“相对密度应为0.950～0.980”，按相对密度最大0.950计算广藿香油处方量仅为1.52g，约为制成量1025g滴丸的0.15％；

而2010版《中国药典》“广藿香油”项下还规定“广藿香油含百秋李醇不得少于26％”，则按处方量制成的1025g滴丸中仅含有百秋李醇0.3952g，按工艺过程中转移率100％计算，平均每g滴丸中约含有百秋李醇0.3856mg/g。

综合以上信息可知，藿香正气滴丸中百秋李醇的含量极低，故参照企业现有资料及相关文献，共考察了7种不同的供试品处理方法。

①样品压破，取0.5g，精密称定，置50ml容量瓶中，加乙酸乙酯适量，超声15min溶解，定容至刻度，摇匀过滤，取续滤液即得。

②样品压破，取1.0g，精密称定，加20ml水超声溶解15min，加20ml正己烷萃取，取上层正己烷溶液低温蒸干，残渣加正己烷溶解，定容至5ml容量瓶中，摇匀过滤，取续滤液即得。

③样品压破，取1.0g，精密称定，置50ml容量瓶中，加正己烷适量，超声15min溶解，定容至刻度，摇匀过滤，取续滤液即得。

④样品压破，取1.0g，精密称定，置50ml容量瓶中，加环己烷适量，超声15min溶解，定容至刻度，摇匀过滤，取续滤液即得。

⑤样品压破，取2.0g，精密称定，加20ml水超声溶解15min，加20ml环己烷萃取，取上层环己烷溶液低温蒸干，残渣加环己烷溶解，定容至5ml容量瓶中，摇匀过滤，取续滤液即得。

⑥样品压破，取5.0g，精密称定，加20ml水超声溶解15min，加20ml正己烷萃取，取上层正己烷溶液低温蒸干，残渣加正己烷溶解，定容至5ml容量瓶中，摇匀过滤，取续滤液即得。

⑦样品压破，取5.0g，精密称定，加正己烷50ml超声溶解15min，重复操作2次，滤液合并，减压蒸干，残渣加正己烷溶解，定容至5ml容量瓶中，摇匀过滤，取续滤液即得。

以上处理方法的考察结果显示：取样量为0.5～2.0g的供试品处理方法①～⑤均峰面积较小，不能满足准确定量的要求。而供试品处理方法⑥、⑦比较，供试品处理方法⑥的峰面积略高，故初步确定采用供试品处理方法⑥进行更细致的考察。

1.3.2供试品处理提取方法条件的考察

基于以上的供试品处理方法⑥进行提取条件的细致考察，分别对提取溶剂用量、超声时间、萃取溶剂用量及次数进行了考察，结果如表3.

表3供试品处理提取方法条件的考察结果

1.4溶液的制备

1.4.1对照品溶液的制备：取百秋李醇对照品适量，精密称定，加正己烷制成每1ml含百秋李醇0.24mg的溶液，即得。

1.4.2供试品溶液的制备：取本品适量压破，取约5.0g，精密称定，加35ml水超声

30min溶解，用20ml正己烷萃取2次，合并上层正己烷溶液减压蒸干，残渣加正己烷溶解，置5ml容量瓶中，定容至刻度，过0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液即得。

1.4.3阴性样品溶液的制备：按处方配比，取除广藿香油的各味药材，按藿香正气滴丸制法制备不含广藿香油的滴丸，再按“1.4.2”供试品溶液制备方法，制成阴性样品溶液。

测定结果见图3～5。结果显示，阴性样品无干扰。

1.5标准曲线的制备

取百秋李醇对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯分别制成每1ml含百秋李醇0.0300、0.0601、0.1201、0.2403、0.4805、0.9610mg的系列溶液，分别精密量取1μl，注入气相色谱仪，按“1.2.3”色谱条件分析，测定峰面积，以对照品进样量(μg)为横坐标，峰面积值为纵坐标，求得回归方程：百秋李醇Y＝3488.2X-9.1716，r＝0.9999。结果表明百秋李醇在0.0300～0.9610μg范围内线性良好，结果见表4。

表4百秋李醇标准曲线

1.7重复性试验

取同一批号(批号：110116)样品，共6份，精密称定5.0g，按照“1.4.2”供试品溶液制备操作，按“1.2.3”色谱条件分析，测定每份样品中百秋李醇含量。结果样品中百秋李醇平均含量为0.2375mg/g，RSD为1.47％，重复性良好，结果见表6。

表6重复性试验

1.8稳定性试验

取同一批号(批号：110803)样品，取1份，精密称定5.0g，按照“1.4.2”供试品溶液制备操作，按“1.2.3”色谱条件分析，分别在0、2、4、6、8、12及24小时，测定样品中百秋李醇峰面积，测得峰面积值的RSD为1.17％，结果表明供试品溶液在24小时内测定稳定，结果见表7。

表7稳定性试验

1.9回收率试验

取同一批号(批号：110803)样品，精密称取2.5g，共6份，置100ml离心管中，精密加入每1ml含百秋李醇对照品0.295mg的溶液2.5ml，再按照“1.4.2”供试品溶液制备操作，制得供测定回收率用供试品溶液，按“1.2.3”色谱条件分析，计算回收率，结果百秋李醇平均回收率为101.1％，RSD为1.45％，结果见表8，回收率试验符合要求。

表8藿香正气滴丸中百秋李醇回收率试验

1.10耐用性试验

取同一批号(批号：110803)样品，按照“1.4.2”供试品溶液制备操作，分别用Agilent HP-5 19091J-413(30m×0.32mm×0.25μm)；Agilent HP-5 19091J-433(30m×0.25mm×0.25μm)毛细管色谱柱，按“1.2.3”色谱条件分析，测定样品中百秋李醇含量，结果见表9，见图6和图7。

表9不同色谱柱对含量测定的影响(n＝2)

测定结果显示，不同内径毛细管色谱柱对含量测定的结果无影响。

1.12理论板数的确定

综合考虑藿香正气滴丸2种不同内径气相色谱仪的分离情况及理论塔板数结果，见表9，将百秋李醇理论板数规定为不得低于10000。

本发明的有益效果在于：

本发明建立的气相色谱测定藿香正气滴丸中百秋李醇含量的方法，符合方法学验证的要求，并操作简便，灵敏度高，测定准确，适用性强，能够用于对该产品的质量控制。同时，填补了该产品对君药广藿香油定量控制的空白，使得对该产品能够进行更有效的质量分析，更全面反映产品的质量状况，保证该产品的质量稳定性。

附图说明：

图1色谱柱③DB-1701毛细管色谱柱色谱图

图2色谱柱②HP-5毛细管色谱柱

图3百秋李醇对照品色谱图，HP-5(30m×0.32mm×0.25μm)

图4缺广藿香油阴性供试品色谱图，HP-5(30m×0.32mm×0.25μm)

图5藿香正气滴丸供试品色谱图，HP-5(30m×0.32mm×0.25μm)

图6藿香正气滴丸供试品色谱图，HP-5 19091J-413(30m×0.32mm×0.25μm)

图7藿香正气滴丸供试品色谱图，HP-5 19091J-433(30m×0.25mm×0.25μm)

具体实施方式：

以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。

实施例1取批号为110116的藿香正气滴丸，测定其百秋李醇的含量

步骤1，对照品溶液的制备

取百秋李醇对照品适量，精密称定，加正己烷制成每1ml含百秋李醇0.24mg的溶液，即得。

步骤2，供试品溶液的制备

取本品适量压破，取约5.0g，精密称定，加35ml水超声30min溶解，用20ml正己烷萃取2次，合并上层正己烷溶液减压蒸干，残渣加正己烷溶解，置5ml容量瓶中，定容至刻度，过0.45μm微孔滤膜过滤，取滤液即得。

步骤3，阴性样品溶液的制备

按藿香正气滴丸处方配比，取除广藿香油的各味药材，按藿香正气滴丸制法制备不含广藿香油的滴丸，再按步骤2供试品溶液制备方法，制成阴性样品溶液。

步骤4，含量测定

采用气相色谱法，其色谱条件为：色谱柱的固定相以5％苯基95％二甲基聚硅氧烷为填料，优选Agilent HP-5(30m*0.32mm*0.25um)；柱温为程序升温，条件见表2；进样口温度为280℃；检测器为FID；检测器温度为280℃；载气为氮气；分流进样，其分流比为5∶1；进样量为1μL。

表2程序升温表

测得每克藿香正气滴丸中百秋李醇的含量为0.2368mg。

实施例2取批号为110801的藿香正气滴丸

步骤1，对照品溶液的制备

取百秋李醇对照品适量，精密称定，加正己烷制成每1ml含百秋李醇0.24mg的溶液，即得。

步骤2，供试品溶液的制备

取本品适量压破，取约5.0g，精密称定，加35ml水超声30min溶解，用20ml正己烷萃取2次，合并上层正己烷溶液减压蒸干，残渣加正己烷溶解，置5ml容量瓶中，定容至刻度，过0.45μm微孔滤膜过滤，取滤液即得。

步骤3，阴性样品溶液的制备

按藿香正气滴丸处方配比，取除广藿香油的各味药材，按藿香正气滴丸制法制备不含广藿香油的滴丸，再按步骤2供试品溶液制备方法，制成阴性样品溶液。

步骤4，含量测定

采用气相色谱法，其色谱条件为：色谱柱的固定相以5％苯基95％二甲基聚硅氧烷为填料，优选Agilent HP-5(30m*0.32mm*0.25um)；柱温为程序升温，条件见表2；进样口温度为280℃；检测器为FID；检测器温度为280℃；载气为氮气；分流进样，其分流比为5∶1；进样量为1μL。

表2程序升温表

测得每克藿香正气滴丸中百秋李醇的含量为0.1808mg。

实施例3取批号为110802的藿香正气滴丸

步骤1，对照品溶液的制备

取百秋李醇对照品适量，精密称定，加正己烷制成每1ml含百秋李醇0.24mg的溶液，即得。

步骤2，供试品溶液的制备

取本品适量压破，取约5.0g，精密称定，加35ml水超声30min溶解，用20ml正己烷萃取2次，合并上层正己烷溶液减压蒸干，残渣加正己烷溶解，置5ml容量瓶中，定容至刻度，过0.45μm微孔滤膜过滤，取滤液即得。

步骤3，阴性样品溶液的制备

按藿香正气滴丸处方配比，取除广藿香油的各味药材，按藿香正气滴丸制法制备不含广藿香油的滴丸，再按步骤2供试品溶液制备方法，制成阴性样品溶液。

步骤4，含量测定

采用气相色谱法，其色谱条件为：色谱柱的固定相以5％苯基95％二甲基聚硅氧烷为填料，优选Agilent HP-5(30m*0.32mm*0.25um)；柱温为程序升温，条件见表2；进样口温度为280℃；检测器为FID；检测器温度为280℃；载气为氮气；分流进样，其分流比为5∶1；进样量为1μL。

表2程序升温表

测得每克藿香正气滴丸中百秋李醇的含量为0.1805mg。

实施例4取批号为110803的藿香正气滴丸

步骤1，对照品溶液的制备

取百秋李醇对照品适量，精密称定，加正己烷制成每1ml含百秋李醇0.24mg的溶液，即得。

步骤2，供试品溶液的制备

取本品适量压破，取约5.0g，精密称定，加35ml水超声30min溶解，用20ml正己烷萃取2次，合并上层正己烷溶液减压蒸干，残渣加正己烷溶解，置5ml容量瓶中，定容至刻度，过0.45μm微孔滤膜过滤，取滤液即得。

步骤3，阴性样品溶液的制备

按藿香正气滴丸处方配比，取除广藿香油的各味药材，按藿香正气滴丸制法制备不含广藿香油的滴丸，再按步骤2供试品溶液制备方法，制成阴性样品溶液。

步骤4，含量测定

采用气相色谱法，其色谱条件为：色谱柱的固定相以5％苯基95％二甲基聚硅氧烷为填料，优选Agilent HP-5(30m*0.32mm*0.25um)；柱温为程序升温，条件见表2；进样口温度为280℃；检测器为FID；检测器温度为280℃；载气为氮气；分流进样，其分流比为5∶1；进样量为1μL。

表2程序升温表

测得每克藿香正气滴丸中百秋李醇的含量为0.2859mg

实施例5取批号为110803的藿香正气滴丸

步骤1，对照品溶液的制备，方法如下：

取百秋李醇对照品适量，精密称定，加正己烷制成每1ml含百秋李醇0.15mg的溶液，即得。

步骤2，供试品溶液的制备，方法如下：

取本品适量压破，取约5.0g，精密称定，加20ml水超声20min溶解，用10ml正己烷萃取1次，上层正己烷溶液减压蒸干，残渣加正己烷溶解，置5ml容量瓶中，定容至刻度，过0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液即得。

步骤3，阴性样品溶液的制备，方法如下：

按藿香正气滴丸处方配比，取除广藿香油的各味药材，按藿香正气滴丸制法制备不含广藿香油的滴丸，再按步骤2供试品溶液制备方法，制成阴性样品溶液。

步骤4，注入气相色谱仪，计算百秋李醇含量，方法如下：

采用气相色谱法，其色谱条件为：色谱柱的固定相以5％苯基95％二甲基聚硅氧烷为填料；柱温为程序升温见表10，进样口温度为250℃；检测器为FID；检测器温度为300℃，载气为氮气；分流进样，其分流比为20∶1；进样量为0.5μL。

表10程序升温表

实施例6取批号为110803的藿香正气滴丸

步骤1，对照品溶液的制备，方法如下：

取百秋李醇对照品适量，精密称定，加正己烷制成每1ml含百秋李醇0.40mg的溶液，即得。

步骤2，供试品溶液的制备，方法如下：

取本品适量压破，取约5.0g，精密称定，加40ml水超声40min溶解，用30ml正己烷萃取3次，合并上层正己烷溶液减压蒸干，残渣加正己烷溶解，置5ml容量瓶中，定容至刻度，过0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液即得。

步骤3，阴性样品溶液的制备，方法如下：

按藿香正气滴丸处方配比，取除广藿香油的各味药材，按藿香正气滴丸制法制备不含广藿香油的滴丸，再按步骤2供试品溶液制备方法，制成阴性样品溶液。

步骤4，注入气相色谱仪，计算百秋李醇含量，方法如下：

采用气相色谱法，其色谱条件为：色谱柱的固定相以5％苯基95％二甲基聚硅氧烷为填料，柱温为程序升温见表11，进样口温度为250℃，检测器为FID；检测器温度为300℃，；载气为氮气；分流进样，其分流比为3∶1，进样量为2μL。

表11程序升温表

Claims (7)

1.一种藿香正气滴丸中百秋李醇含量的测定方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

步骤1，对照品溶液的制备；

步骤2，供试品溶液的制备；

步骤3，阴性样品溶液的制备；

步骤4，注入气相色谱仪，计算百秋李醇含量。

2.根据权利要求1的测定方法，其特征在于，其中，步骤1，对照品溶液的制备，方法如下：取百秋李醇对照品适量，精密称定，加正己烷制成每1ml含百秋李醇0.15～0.40mg，即得。

3.根据权利要求1的测定方法，其特征在于，其中，步骤2，供试品溶液的制备，方法如下：取本品适量压破，取约5.0g，精密称定，加20～40ml水超声20～40min溶解，用10～30ml正己烷萃取1～3次，合并上层正己烷溶液减压蒸干，残渣加正己烷溶解，置5ml容量瓶中，定容至刻度，过0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液即得。

4.根据权利要求1的测定方法，其特征在于，其中，步骤3，阴性样品溶液的制备，方法如下：按藿香正气滴丸处方配比，取除广藿香油的各味药材，按藿香正气滴丸制法制备不含广藿香油的滴丸，再按步骤2供试品溶液制备方法，制成阴性样品溶液。

5.根据权利要求1的测定方法，其特征在于，其中，步骤4，注入气相色谱仪，计算百秋李醇含量，方法如下：采用气相色谱法，其色谱条件为：色谱柱的固定相以5％苯基95％二甲基聚硅氧烷为填料，柱温为程序升温见表1，进样口温度为250～300℃，检测器为FID；检测器温度为250～300℃，载气为氮气；分流进样，其分流比为20∶1～3∶1，进样量为0.5～2μL，

表1程序升温表

6.根据权利要求1的测定方法，其特征在于，步骤如下：

步骤1，对照品溶液的制备，方法如下：

取百秋李醇对照品适量，精密称定，加正己烷制成每1ml含百秋李醇0.15～0.40mg，即得；

步骤2，供试品溶液的制备，方法如下：

取本品适量压破，取约5.0g，精密称定，加20～40ml水超声20～40min溶解，用10～30ml正己烷萃取1～3次，合并上层正己烷溶液减压蒸干，残渣加正己烷溶解，置5ml容量瓶中，定容至刻度，过0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液即得；

步骤3，阴性样品溶液的制备，方法如下：

按藿香正气滴丸处方配比，取除广藿香油的各味药材，按藿香正气滴丸制法制备不含广藿香油的滴丸，再按步骤2供试品溶液制备方法，制成阴性样品溶液；

步骤4，注入气相色谱仪，计算百秋李醇含量，方法如下：

采用气相色谱法，其色谱条件为：色谱柱的固定相以5％苯基95％二甲基聚硅氧烷为填料，柱温为程序升温见表1，进样口温度为250～300℃，检测器为FID；检测器温度为250～300℃，载气为氮气；分流进样，其分流比为20∶1～3∶1，进样量为0.5～2μL，

表1程序升温表

7.根据权利要求1的测定方法，其特征在于，步骤如下：

步骤1，对照品溶液的制备，方法如下：

取百秋李醇对照品适量，精密称定，加正己烷制成每1ml含百秋李醇0.24mg的溶液，即得；

步骤2，供试品溶液的制备，方法如下：

取本品适量压破，取约5.0g，精密称定，加35ml水超声30min溶解，用20ml正己烷萃取2次，合并上层正己烷溶液减压蒸干，残渣加正己烷溶解，置5ml容量瓶中，定容至刻度，过0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液即得；

步骤3，阴性样品溶液的制备，方法如下：

按藿香正气滴丸处方配比，取除广藿香油的各味药材，按藿香正气滴丸制法制备不含广藿香油的滴丸，再按步骤2供试品溶液制备方法，制成阴性样品溶液；

步骤4，注入气相色谱仪，计算百秋李醇含量，方法如下：

采用气相色谱法，其色谱条件为：色谱柱为固定相以5％苯基95％二甲基聚硅氧烷为填料的Agilent HP-5(30m*0.32mm*0.25um)；柱温为程序升温见表2；进样口温度为280℃；检测器为FID；检测器温度为280℃；载气为氮气；分流进样，其分流比为5∶1；进样量为1μL；

表2程序升温表

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