CN103274927A

CN103274927A - 一种天然脱落酸的提纯方法

Info

Publication number: CN103274927A
Application number: CN2013102266217A
Authority: CN
Inventors: 孙宏顺; 李玉龙; 徐宏; 许宁; 张继东
Original assignee: Nanjing College of Chemical Technology
Current assignee: Nanjing College of Chemical Technology
Priority date: 2013-06-08
Filing date: 2013-06-08
Publication date: 2013-09-04

Abstract

本发明涉及的是一种天然脱落酸的提纯方法，属于天然物质的分离纯化领域。包括以下步骤：取天然脱落酸粗品用溶剂浸泡，然后浓缩，浓缩所得固体用碱液溶解，溶解后溶液用有机溶剂萃取除杂，再进行酸化，酸化后再用有机溶剂萃取，萃取液经减压浓缩，多次重结晶、过滤、洗涤，干燥，得到99%以上的天然脱落酸晶体，收率达80%以上。本方法具有提取效率高、提取物纯度高，并且易于工业化等优点。

Description

一种天然脱落酸的提纯方法

技术领域

本发明涉及的是一种天然脱落酸的提纯方法，属于天然物质的分离纯化领域。

背景技术

天然脱落酸（(+)～Abscisic acid, S～ABA〕是一种具有倍半萜羧酸结构的植物天然生长调节物质，是植物体的“抗逆免疫因子”，对农作物的生长发育具有很强的调节活性，能促进果实类、谷类、豆类的成熟发育，能大幅度提高其产量和质量，又能大大增强其耐寒、抗旱和抗盐碱能力，因而在农业及生物领域具有广阔的应用前景。

近二十年来，国内外一直在研究利用微生物发酵法来生产天然脱落酸，例如JP～A～6～247927、 JP～A～6～197775、JP～A～6～133786、JP～A～67180、JP～A～2～10988、JP～A～2～60590、JP～A～63～296696 JP～A～58～51895、CN1182798A、CN102399827A等，生物发酵法降低了天然脱落酸的生产成本，使其工业化成为可能。

然而，如何对发酵得到的天然脱落酸粗品进行提纯却依然困扰着产业发展，要提取并得到高纯度的天然脱落酸耗时费力且收率低下，使得高纯度的天然脱落酸产品价格居高不下，一定程度上限制了天然脱落酸的研究和应用。

发明内容

本发明目的是针对目前天然脱落酸的纯化效率低、能耗大、生产成本高等不足，提供一种天然脱落酸的提纯方法，本发明从低浓度的天然脱落酸粗品中提纯得到高纯度的天然脱落酸产品的方法，具有生产工艺简单、产品纯度和收率高、成本低、易于工业化等特点。

本发明一种天然脱落酸的提纯方法是通过以下技术方案实现：

取天然脱落酸粗品用溶剂浸泡，然后浓缩，浓缩所得固体用碱液溶解，溶解后溶液用有机溶剂萃取除杂，再进行酸化，酸化后再用有机溶剂萃取，萃取液经减压浓缩，多次重结晶、过滤、洗涤，干燥，得到99%以上的白色天然脱落酸晶体，收率达80%以上。

所述的天然脱落酸粗品选用天然脱落酸含量为5%～30%的天然脱落酸粗品，即所用的天然脱落酸粗品纯度为5%～30%。

天然脱落酸粗品用溶剂浸泡，所用的浸泡溶剂为蒸馏水或甲醇或乙醇或二者的混合液。

天然脱落酸粗品用溶剂浸泡，浸泡液温度为20～60℃，浸泡时间为1～5天，提取次数为3～5次。

本发明中浓缩所得固体用碱液溶解，所述碱液为氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液或碳酸氢钠溶液，碱液浓度为5%～20%水溶液，碱化后溶液的pH值为7～10。

本发明中的萃取除杂用萃取剂为乙酸乙酯或二氯甲烷或乙醚。

本发明中的酸化所用的酸为硫酸或盐酸，所用酸的浓度为1mol/L～5mol/L，酸化后溶液pH值为1～5。

本发明中的酸化后所用萃取剂为乙酸乙酯或二氯甲烷或乙醚。

本发明中的重结晶所用溶剂为乙酸乙酯或二氯甲烷或乙醚或甲醇或乙醇或水或两者的混合溶剂，重结晶次数为4～5次。

本发明一种天然脱落酸的提纯方法，是一种从低浓度的天然脱落酸粗品中提纯得到高纯度的天然脱落酸产品的方法，本发明的天然脱落酸的提纯方法，具有生产工艺简单、产品纯度和收率高、成本低、易于工业化等特点。

具体实施方式

以下将结合实施例对本发明作进一步说明：

实施例1、

本发明所述天然脱落酸的提纯方法按以下步骤进行：

（1）取含量为5%的天然脱落酸粗品1kg，用60%的甲醇水溶液2.5L浸泡，浸泡温度为20℃，浸泡时间为三天，反复浸泡三次。

（2）将浸泡液于50℃下减压浓缩，浓缩液可回收套用，得到褐色粘稠状产物。

（3）将褐色粘稠状产物用20%碳酸钠水溶液溶解并调节pH值至9～10。

（4）用乙酸乙酯萃取碱化后水溶液，至乙酸乙酯层为浅黄色止。

（5）将萃取后水溶液用3mol/L盐酸溶液调节pH值至4～5。

（6）酸化后溶液用二氯甲烷萃取，至二氯甲烷层为浅黄色止。

（7）减压浓缩萃取后二氯甲烷层溶液，得深黄色粘稠状产物。

（8）将深黄色粘稠物用乙醇反复重结晶5次，过滤，石油醚洗涤，50℃烘干，得白色天然脱落酸晶体40.5g，收率81%，HPLC检测产品纯度为99.2%。

实施例2、

本发明所述天然脱落酸的提纯方法按以下步骤进行：

（1）取含量为10%的天然脱落酸粗品1kg，用2.5L水浸泡，浸泡温度为60℃，浸泡时间为一天，反复浸泡五次。

（2）将浸泡液于50℃下减压浓缩，得到褐色粘稠状产物。

（3）将褐色粘稠状产物用5%的氢氧化钠水溶液溶解并调节pH值至7～8。

（4）用二氯甲烷萃取碱化后水溶液，至二氯甲烷层为浅黄色止。

（5）将萃取后水溶液用1mol/L盐酸溶液调节pH值至1～2。

（6）酸化后溶液用乙酸乙酯萃取，至乙酸乙酯层为浅黄色止。

（7）减压浓缩萃取后乙酸乙酯层溶液，得深黄色粘稠状产物。

（8）将深黄色粘稠物用50%的甲醇水溶液反复重结晶4次，过滤，石油醚洗涤，50℃烘干，得白色天然脱落酸晶体80g，收率80%，HPLC检测产品纯度为99.0%。

实施例3、

本发明所述天然脱落酸的提纯方法按以下步骤进行：

（1）取含量为30%的天然脱落酸粗品1kg，用70%乙醇水溶液2.5L浸泡，浸泡温度为40℃，浸泡时间为五天，反复浸泡三次。

（3）将褐色粘稠状产物用10%的碳酸氢钠水溶液溶解并调节pH值至8～9。

（4）用乙醚萃取碱化后水溶液，至乙醚层为浅黄色止。

（5）将萃取后水溶液用5mol/L硫酸溶液调节pH值至2～3。

（6）酸化后溶液用乙醚萃取，至乙醚层为浅黄色止。

（7）减压浓缩萃取后乙醚层溶液，得深黄色粘稠状产物。

（8）将深黄色粘稠物用50%的乙酸乙酯/二氯甲烷溶液反复重结晶5次，过滤，石油醚洗涤，50℃烘干，得白色天然脱落酸晶体255g，收率85%，HPLC检测产品纯度为99.3%。

Claims

1.一种天然脱落酸的提纯方法，其特征在于包括以下步骤：取天然脱落酸粗品用溶剂浸泡，然后浓缩，浓缩所得固体用碱液溶解，溶解后溶液用有机溶剂萃取除杂，再进行酸化，酸化后再用有机溶剂萃取，萃取液经减压浓缩，多次重结晶、过滤、洗涤，干燥，得到99%以上的天然脱落酸晶体，收率达80%以上。

2.根据权利要求1所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：所述的天然脱落酸粗品选用天然脱落酸含量为5%～30%的天然脱落酸粗品。

3.根据权利要求1所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：所述的天然脱落酸粗品用溶剂浸泡，浸泡溶剂为蒸馏水或甲醇或乙醇或二者的混合液。

4.根据权利要求1或3所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：所述的天然脱落酸粗品用溶剂浸泡，浸泡液温度为20～60℃，浸泡时间为1～5天，提取次数为3～5次。

5.根据权利要求1所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：浓缩所得固体用碱液溶解，所述碱液为氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液或碳酸氢钠溶液；碱液浓度为5%～20%水溶液；碱化后溶液的pH值为7～10。

6.根据权利要求1所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：萃取除杂的萃取剂为乙酸乙酯或二氯甲烷或乙醚。

7.根据权利要求1所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：酸化所用的酸为硫酸或盐酸；所用酸的浓度为1mol/L～5mol/L；酸化后溶液pH值为1～5。

8.根据权利要求1所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：酸化后所用萃取剂为乙酸乙酯或二氯甲烷或乙醚。

9.根据权利要求1所述的天然脱落酸的提纯方法，其特征在于：重结晶所用溶剂为乙酸乙酯或二氯甲烷或乙醚或甲醇或乙醇或水或两者的混合溶剂，重结晶次数为4～5次。