JPH06312975A - アブシジン酸の単離方法 - Google Patents
アブシジン酸の単離方法Info
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- JPH06312975A JPH06312975A JP10448993A JP10448993A JPH06312975A JP H06312975 A JPH06312975 A JP H06312975A JP 10448993 A JP10448993 A JP 10448993A JP 10448993 A JP10448993 A JP 10448993A JP H06312975 A JPH06312975 A JP H06312975A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 アブシジン酸を含む水溶液に、水と混合しな
い有機溶媒と接触させ、前記水溶液から前記アブシジン
酸を有機溶媒に移行せしめる抽出工程、抽出工程で分離
された前記アブシジン酸を含む有機層を、アルカリ水溶
液と接触させ、前記有機層から前記アブシジン酸を前記
アルカリ水溶液に移行せしめる逆抽出工程、逆抽出工程
で前記アブシジン酸を逆抽出された有機層を抽出工程に
リサイクルする工程および逆抽出工程で分離された前記
アブシジン酸を含むアルカリ水溶液から前記アブシジン
酸を単離する工程、からなることを特徴とするアブシジ
ン酸の単離方法。 【効果】 有機溶媒の使用量を少なく、かつ、その有機
溶媒で抽出された有機層を濃縮することなしにアブシジ
ン酸を含む希薄溶液から効率よく、選択的に高収率でア
ブシジン酸を単離できる。また、単離されたアブシジン
酸はその後の精製負荷を下げ工業的に安価な高純度ＡＢ
Ａを得ることが可能である。
い有機溶媒と接触させ、前記水溶液から前記アブシジン
酸を有機溶媒に移行せしめる抽出工程、抽出工程で分離
された前記アブシジン酸を含む有機層を、アルカリ水溶
液と接触させ、前記有機層から前記アブシジン酸を前記
アルカリ水溶液に移行せしめる逆抽出工程、逆抽出工程
で前記アブシジン酸を逆抽出された有機層を抽出工程に
リサイクルする工程および逆抽出工程で分離された前記
アブシジン酸を含むアルカリ水溶液から前記アブシジン
酸を単離する工程、からなることを特徴とするアブシジ
ン酸の単離方法。 【効果】 有機溶媒の使用量を少なく、かつ、その有機
溶媒で抽出された有機層を濃縮することなしにアブシジ
ン酸を含む希薄溶液から効率よく、選択的に高収率でア
ブシジン酸を単離できる。また、単離されたアブシジン
酸はその後の精製負荷を下げ工業的に安価な高純度ＡＢ
Ａを得ることが可能である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はアブシジン酸（以下、Ａ
ＢＡと略記する）の単離方法に関する。
ＢＡと略記する）の単離方法に関する。
【０００２】ＡＢＡは天然型植物ホルモンとして重要な
化合物であり、広い用途が期待されている。
化合物であり、広い用途が期待されている。
【０００３】
【従来の技術】従来醗酵法によるＡＢＡは、セルコスポ
ラ・ロシコラおよびボトリチス・シネレアによる液体培
養および固体培養で生成し、得た培養液および培養物か
ら有機溶媒で抽出し、その抽出液を濃縮する方法（特公
昭６０−６６２９号公報、特公昭６１−３５８３８号公
報）、また、得た培養液をイオン交換樹脂および吸着樹
脂に通液したあと、溶媒で溶出しその溶出液を濃縮する
方法（特公平３−６１３９号公報）などで単離する方法
が知られている。
ラ・ロシコラおよびボトリチス・シネレアによる液体培
養および固体培養で生成し、得た培養液および培養物か
ら有機溶媒で抽出し、その抽出液を濃縮する方法（特公
昭６０−６６２９号公報、特公昭６１−３５８３８号公
報）、また、得た培養液をイオン交換樹脂および吸着樹
脂に通液したあと、溶媒で溶出しその溶出液を濃縮する
方法（特公平３−６１３９号公報）などで単離する方法
が知られている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】しかし、前者法は多量
の溶媒を使用し、かつ、その多量の抽出液を濃縮しなけ
ればならず煩雑である。また。後者法は多量の樹脂およ
び多量の溶出溶媒を使用し、かつ、その多量の溶出液を
濃縮するなど煩雑であり、いずれの方法もＡＢＡの工業
的な生産に適さない。
の溶媒を使用し、かつ、その多量の抽出液を濃縮しなけ
ればならず煩雑である。また。後者法は多量の樹脂およ
び多量の溶出溶媒を使用し、かつ、その多量の溶出液を
濃縮するなど煩雑であり、いずれの方法もＡＢＡの工業
的な生産に適さない。
【０００５】
【課題を解決するための手段】そこで、本発明者らは、
ＡＢＡを含む水溶液からＡＢＡを効率よく選択的に高収
率で単離する方法を鋭意検討した結果、本発明に到達し
た。
ＡＢＡを含む水溶液からＡＢＡを効率よく選択的に高収
率で単離する方法を鋭意検討した結果、本発明に到達し
た。
【０００６】すなわち、本発明は（ｉ）ＡＢＡを含む水
溶液を、水と混合しない有機溶媒と接触させ、前記水溶
液から前記ＡＢＡを有機溶媒に移行せしめる抽出工程、
（ｉｉ）（ｉ）抽出工程で分離された前記ＡＢＡを含む
有機層を、アルカリ水溶液と接触させ、前記有機層から
前記ＡＢＡを前記アルカリ水溶液に移行せしめる逆抽出
工程、（ｉｉｉ）（ｉｉ）逆抽出工程で前記ＡＢＡを逆
抽出された有機層を（ｉ）抽出工程にリサイクルする工
程、（ｉｖ）（ｉｉ）逆抽出工程で分離された前記ＡＢ
Ａを含むアルカリ水溶液から前記ＡＢＡを単離する工
程、からなることを特徴とするＡＢＡの単離方法であ
る。
溶液を、水と混合しない有機溶媒と接触させ、前記水溶
液から前記ＡＢＡを有機溶媒に移行せしめる抽出工程、
（ｉｉ）（ｉ）抽出工程で分離された前記ＡＢＡを含む
有機層を、アルカリ水溶液と接触させ、前記有機層から
前記ＡＢＡを前記アルカリ水溶液に移行せしめる逆抽出
工程、（ｉｉｉ）（ｉｉ）逆抽出工程で前記ＡＢＡを逆
抽出された有機層を（ｉ）抽出工程にリサイクルする工
程、（ｉｖ）（ｉｉ）逆抽出工程で分離された前記ＡＢ
Ａを含むアルカリ水溶液から前記ＡＢＡを単離する工
程、からなることを特徴とするＡＢＡの単離方法であ
る。
【０００７】以下、本発明を詳細に説明する。
【０００８】本発明では、まず、（ｉ）ＡＢＡを含む水
溶液を、水と混合しない有機溶媒と接触させ、前記水溶
液から前記ＡＢＡを有機溶媒に移行せしめる抽出工程に
供する。
溶液を、水と混合しない有機溶媒と接触させ、前記水溶
液から前記ＡＢＡを有機溶媒に移行せしめる抽出工程に
供する。
【０００９】本発明で使用するＡＢＡを含む水溶液は、
特に限定されない。
特に限定されない。
【００１０】たとえば、ＡＢＡを生産することのできる
微生物を用いて培養された液体培養液および固体培養物
を熱水抽出した固体培養抽出水溶液などが挙げられる。
液体培養液を用いる場合は特に菌体を除去しなくても使
用できる。水溶液中のＡＢＡ濃度は０．００１〜５％が
好ましい。また、水溶液中のｐＨは通常１〜５であり、
２〜４が特に好ましい。
微生物を用いて培養された液体培養液および固体培養物
を熱水抽出した固体培養抽出水溶液などが挙げられる。
液体培養液を用いる場合は特に菌体を除去しなくても使
用できる。水溶液中のＡＢＡ濃度は０．００１〜５％が
好ましい。また、水溶液中のｐＨは通常１〜５であり、
２〜４が特に好ましい。
【００１１】水を混合しない有機溶媒は特に限定されな
いが、水と分離しＡＢＡを溶かす有機溶媒の中から選ば
れる。たとえば、酢酸エチル、酢酸ｎ−ブチルなどのエ
ステル類、ｎ−ブタノール、シクロヘキサノールなどの
アルコール類、メチルエチルケトン、メチルイソブチル
ケトンなどのケトン類、ジエチルエーテル、エチルイソ
プロピルエーテルなどのエーテル類、クロロホルム、ジ
クロロエタンなどのハロゲン化炭化水素などで、それぞ
れ単独もしくは２種以上混合して用いられる。その溶媒
量は特に限定されないが、ＡＢＡを含む水溶液の重量に
対して通常０．１〜３倍、本発明を特に効果的に実施す
るためには０．１〜１倍が使用される。ＡＢＡを含む水
溶液と有機層との接触方法は任意であり、バッチ法であ
っても連続法であってもよい。
いが、水と分離しＡＢＡを溶かす有機溶媒の中から選ば
れる。たとえば、酢酸エチル、酢酸ｎ−ブチルなどのエ
ステル類、ｎ−ブタノール、シクロヘキサノールなどの
アルコール類、メチルエチルケトン、メチルイソブチル
ケトンなどのケトン類、ジエチルエーテル、エチルイソ
プロピルエーテルなどのエーテル類、クロロホルム、ジ
クロロエタンなどのハロゲン化炭化水素などで、それぞ
れ単独もしくは２種以上混合して用いられる。その溶媒
量は特に限定されないが、ＡＢＡを含む水溶液の重量に
対して通常０．１〜３倍、本発明を特に効果的に実施す
るためには０．１〜１倍が使用される。ＡＢＡを含む水
溶液と有機層との接触方法は任意であり、バッチ法であ
っても連続法であってもよい。
【００１２】かくしてＡＢＡを含む水溶液からＡＢＡを
有機溶媒に移行せしめる。
有機溶媒に移行せしめる。
【００１３】次に、本発明では、（ｉｉ）（ｉ）抽出工
程で分離されたＡＢＡを含む有機層を、アルカリ水溶液
と接触させ、有機層からＡＢＡをアルカリ水溶液に移行
せしめる逆抽出工程に供する。
程で分離されたＡＢＡを含む有機層を、アルカリ水溶液
と接触させ、有機層からＡＢＡをアルカリ水溶液に移行
せしめる逆抽出工程に供する。
【００１４】アルカリ水溶液としては、特に限定されな
いが、たとえば、アルカリ金属またはアルカリ土類金属
の水酸化物の水溶液が挙げられ、好ましくはアルカリ金
属の水酸化物またはアルカリ金属の炭酸塩で、単独もし
くは２種以上混合して用いられそれを水に溶かしたもの
である。その濃度は特に限定されないが０．１〜３０％
が好ましい。アルカリ層は通常ｐＨ７〜１２、好ましく
は９〜１１の範囲に保たれるようにＡＢＡを含む有機層
と接触させる。接触方法は任意であり、バッチ法であっ
ても連続法であってもよい。
いが、たとえば、アルカリ金属またはアルカリ土類金属
の水酸化物の水溶液が挙げられ、好ましくはアルカリ金
属の水酸化物またはアルカリ金属の炭酸塩で、単独もし
くは２種以上混合して用いられそれを水に溶かしたもの
である。その濃度は特に限定されないが０．１〜３０％
が好ましい。アルカリ層は通常ｐＨ７〜１２、好ましく
は９〜１１の範囲に保たれるようにＡＢＡを含む有機層
と接触させる。接触方法は任意であり、バッチ法であっ
ても連続法であってもよい。
【００１５】かくしてＡＢＡを有機層からアルカリ水溶
液に移行せしめる。
液に移行せしめる。
【００１６】さらに、本発明では、（ｉｉｉ）（ｉｉ）
逆抽出工程で前記ＡＢＡを逆抽出された有機層を（ｉ）
抽出工程にリサイクルする工程に供する。
逆抽出工程で前記ＡＢＡを逆抽出された有機層を（ｉ）
抽出工程にリサイクルする工程に供する。
【００１７】（ｉｉ）逆抽出工程でＡＢＡを逆抽出され
た有機層は前述の（ｉ）抽出工程にリサイクルされ、そ
のまま使用できる。
た有機層は前述の（ｉ）抽出工程にリサイクルされ、そ
のまま使用できる。
【００１８】一方、本発明では、（ｉｖ）（ｉｉ）逆抽
出工程で分離された前記ＡＢＡを含むアルカリ水溶液か
ら前記ＡＢＡを単離する工程に供する。逆抽出工程で分
離されたＡＢＡを含むアルカリ水溶液からＡＢＡを単離
する方法は特に限定されない。たとえば、酸析晶析法、
有機溶媒で抽出した後、晶析させる方法などが挙げられ
る。
出工程で分離された前記ＡＢＡを含むアルカリ水溶液か
ら前記ＡＢＡを単離する工程に供する。逆抽出工程で分
離されたＡＢＡを含むアルカリ水溶液からＡＢＡを単離
する方法は特に限定されない。たとえば、酸析晶析法、
有機溶媒で抽出した後、晶析させる方法などが挙げられ
る。
【００１９】酸析晶析法を用いる場合には、酸として塩
酸、硫酸などの鉱酸やギ酸、酢酸、メタンスルホン酸な
どの有機酸が使用できる。その酸でＡＢＡを含むアルカ
リ水溶液をｐＨ２〜３まで中和する。
酸、硫酸などの鉱酸やギ酸、酢酸、メタンスルホン酸な
どの有機酸が使用できる。その酸でＡＢＡを含むアルカ
リ水溶液をｐＨ２〜３まで中和する。
【００２０】かくして析出したＡＢＡは濾過分離もしく
は遠心分離で単離できる。単離したＡＢＡは既知の晶析
精製方法で、つまり、有機溶媒で均一液としたあと、そ
の均一液を冷却したり、あるいは濃縮したりしてＡＢＡ
を結晶化させ、高純度品にできる。
は遠心分離で単離できる。単離したＡＢＡは既知の晶析
精製方法で、つまり、有機溶媒で均一液としたあと、そ
の均一液を冷却したり、あるいは濃縮したりしてＡＢＡ
を結晶化させ、高純度品にできる。
【００２１】（ｉ）抽出工程の抽出槽および（ｉｉ）逆
抽出工程の逆抽出槽は特に限定されないが、一般の抽出
槽および抽出塔あるいは培養槽が使用される。その抽出
槽および逆抽出槽の撹拌は、槽の型にもよるが１００〜
１，０００rpm の回転数が好ましい。また、その抽出槽
および逆抽出槽の温度は、特に限定されないが、０〜５
０℃で管理されるのが好ましい。
抽出工程の逆抽出槽は特に限定されないが、一般の抽出
槽および抽出塔あるいは培養槽が使用される。その抽出
槽および逆抽出槽の撹拌は、槽の型にもよるが１００〜
１，０００rpm の回転数が好ましい。また、その抽出槽
および逆抽出槽の温度は、特に限定されないが、０〜５
０℃で管理されるのが好ましい。
【００２２】以下、本発明の一実施態様を図１のフロー
に従って説明する。
に従って説明する。
【００２３】抽出工程の（１）の抽出槽でＡＢＡを含む
水溶液に水と混合しない有機溶媒を接触させる。（２）
のポンプで（１）の抽出槽のＡＢＡを含む有機層を逆抽
出工程のアルカリ水溶液が入った（３）の逆抽出槽に供
給し、アルカリ水溶液とＡＢＡを含む有機層を接触させ
る。（４）のポンプで（３）の逆抽出槽のＡＢＡを逆抽
出された有機層を抽出工程の（１）の抽出槽に循環させ
る。（５）のポンプで（３）の逆抽出槽のＡＢＡを含む
アルカリ水溶液を単離工程に供給し、ＡＢＡを単離す
る。
水溶液に水と混合しない有機溶媒を接触させる。（２）
のポンプで（１）の抽出槽のＡＢＡを含む有機層を逆抽
出工程のアルカリ水溶液が入った（３）の逆抽出槽に供
給し、アルカリ水溶液とＡＢＡを含む有機層を接触させ
る。（４）のポンプで（３）の逆抽出槽のＡＢＡを逆抽
出された有機層を抽出工程の（１）の抽出槽に循環させ
る。（５）のポンプで（３）の逆抽出槽のＡＢＡを含む
アルカリ水溶液を単離工程に供給し、ＡＢＡを単離す
る。
【００２４】
【実施例】以下実施例によって本発明を具体的に示す。
【００２５】実施例１ グルコース４％、酵母エキス０．３％、燐酸１カリウム
０．２％、塩化カリウム０．１％、硫酸マグネシウム水
和物０．０２％、ポリオキシエチレンモノステアリン酸
ソルビタン０．０１％からなる液体培地を５００ml容バ
ッフル付きフラスコ５本に５０mlずつ加え、１２０℃１
５分加圧蒸気滅菌した。これにボトリチス・シネレアＦ
ＥＲＭ Ｐ−６１５６の前培養菌液を４％ずつ植菌し、
回転数１８０rpm 、振幅７cmで、２５℃７日間培養し、
ＡＢＡ濃度０．０５％の培養液を得た。
０．２％、塩化カリウム０．１％、硫酸マグネシウム水
和物０．０２％、ポリオキシエチレンモノステアリン酸
ソルビタン０．０１％からなる液体培地を５００ml容バ
ッフル付きフラスコ５本に５０mlずつ加え、１２０℃１
５分加圧蒸気滅菌した。これにボトリチス・シネレアＦ
ＥＲＭ Ｐ−６１５６の前培養菌液を４％ずつ植菌し、
回転数１８０rpm 、振幅７cmで、２５℃７日間培養し、
ＡＢＡ濃度０．０５％の培養液を得た。
【００２６】３リットルジャーファーメンターにこの培
養液１，０００ｇとメチルイソブチルケトン溶媒５００
mlを仕込み、室温下３００rpm で撹拌した。このジャー
ファーメンターの上澄液のＡＢＡを抽出したメチルイソ
ブチルケトン層を１５ml/min速度の定量ポンプで１／１
０規定ＮａＯＨ１０ml入り回転子が回っている１００ml
の容器に供給した。
養液１，０００ｇとメチルイソブチルケトン溶媒５００
mlを仕込み、室温下３００rpm で撹拌した。このジャー
ファーメンターの上澄液のＡＢＡを抽出したメチルイソ
ブチルケトン層を１５ml/min速度の定量ポンプで１／１
０規定ＮａＯＨ１０ml入り回転子が回っている１００ml
の容器に供給した。
【００２７】このＡＢＡを抽出したメチルイソブチルケ
トン層が供給され１／１０規定ＮａＯＨにＡＢＡを逆抽
出された１００ml容器の上澄液のメチルイソブチルケト
ン層を約１５ml／min 速度の定量ポンプでジャーファー
メンターにリサイクルした。この操作を７時間行った。
この間１／１０規定ＮａＯＨの入っている容器のｐＨを
測定しｐＨが約１０になるように１／１０規定ＮａＯＨ
を補給した。
トン層が供給され１／１０規定ＮａＯＨにＡＢＡを逆抽
出された１００ml容器の上澄液のメチルイソブチルケト
ン層を約１５ml／min 速度の定量ポンプでジャーファー
メンターにリサイクルした。この操作を７時間行った。
この間１／１０規定ＮａＯＨの入っている容器のｐＨを
測定しｐＨが約１０になるように１／１０規定ＮａＯＨ
を補給した。
【００２８】得られたＮａＯＨ水溶液は２６．２ｇで、
そのＡＢＡ濃度は１．８％で３６倍に濃縮された。さら
に、このＮａＯＨ水溶液をｐＨ２．５まで硫酸で中和
し、析出物を濾過分離、減圧乾燥し、純度７８．１％の
ＡＢＡを０．５４ｇを得た。
そのＡＢＡ濃度は１．８％で３６倍に濃縮された。さら
に、このＮａＯＨ水溶液をｐＨ２．５まで硫酸で中和
し、析出物を濾過分離、減圧乾燥し、純度７８．１％の
ＡＢＡを０．５４ｇを得た。
【００２９】実施例２ 実施例１のメチルイソブチルケトン溶媒５００mlの代り
に実施例１でＡＢＡを逆抽出されたメチルイソブチルケ
トン層４８０mlを再使用した以外は実施例１と同じ方法
で行った。このとき得られたＮａＯＨ水溶液は２６．８
ｇで、そのＡＢＡ濃度は１．８％で３６倍に濃縮され
た。さらに、このＮａＯＨ水溶液を実施例１と同じよう
に処理し、純度７７．８％のＡＢＡを０．５５ｇ得た。
に実施例１でＡＢＡを逆抽出されたメチルイソブチルケ
トン層４８０mlを再使用した以外は実施例１と同じ方法
で行った。このとき得られたＮａＯＨ水溶液は２６．８
ｇで、そのＡＢＡ濃度は１．８％で３６倍に濃縮され
た。さらに、このＮａＯＨ水溶液を実施例１と同じよう
に処理し、純度７７．８％のＡＢＡを０．５５ｇ得た。
【００３０】実施例３ 実施例１の培養液の代りに実施例１で得た培養液にＡＢ
Ａを４．５ｇ添加した培養液１，０００ｇを、また、メ
チルイソブチルケトン溶媒５００mlの代りに実施例２で
ＡＢＡを逆抽出されたメチルイソブチルケトン層４８０
mlを、また、１／１０規定ＮａＯＨの代りに１規定Ｎａ
ＯＨ水溶液を使用した以外は実施例１と同じ方法で行っ
た。このとき得られたＮａＯＨ水溶液は３０．４ｇで、
そのＡＢＡ濃度は１６．２％で３２倍に濃縮された。さ
らにこのＮａＯＨ水溶液を実施例１と同じように処理
し、純度９５．３％のＡＢＡ５．１０ｇを得た。
Ａを４．５ｇ添加した培養液１，０００ｇを、また、メ
チルイソブチルケトン溶媒５００mlの代りに実施例２で
ＡＢＡを逆抽出されたメチルイソブチルケトン層４８０
mlを、また、１／１０規定ＮａＯＨの代りに１規定Ｎａ
ＯＨ水溶液を使用した以外は実施例１と同じ方法で行っ
た。このとき得られたＮａＯＨ水溶液は３０．４ｇで、
そのＡＢＡ濃度は１６．２％で３２倍に濃縮された。さ
らにこのＮａＯＨ水溶液を実施例１と同じように処理
し、純度９５．３％のＡＢＡ５．１０ｇを得た。
【００３１】実施例４ 実施例１のメチルイソブチルケトン溶媒５００mlの代り
に１−ブタノール溶媒５００mlを、また１／１０規定Ｎ
ａＯＨの代りに１／１０規定Ｎａ2 ＣＯ3 を使用した以
外は実施例１と同じ方法で行った。このとき得られたＮ
ａ2 ＣＯ3 水溶液は２７．１ｇで、そのＡＢＡ濃度は
１．７％で３４倍に濃縮された。さらに、このＮａ2 Ｃ
Ｏ3 水溶液を実施例１と同じように処理し、純度７７．
１％のＡＢＡ０．５２ｇを得た。
に１−ブタノール溶媒５００mlを、また１／１０規定Ｎ
ａＯＨの代りに１／１０規定Ｎａ2 ＣＯ3 を使用した以
外は実施例１と同じ方法で行った。このとき得られたＮ
ａ2 ＣＯ3 水溶液は２７．１ｇで、そのＡＢＡ濃度は
１．７％で３４倍に濃縮された。さらに、このＮａ2 Ｃ
Ｏ3 水溶液を実施例１と同じように処理し、純度７７．
１％のＡＢＡ０．５２ｇを得た。
【００３２】比較例１ 実施例１と同じ培養液１，０００ｇとメチルイソブチル
ケトン溶媒５００mlを３リットルジャーファーメンター
に仕込み、室温下３００rpm で１時間撹拌した後、撹拌
をとめ上澄液のメチルイソブチルケトン層だけを抜出し
た。さらにメチルイソブチルケトン溶媒５００mlを仕込
み、同じ操作を繰返した。この操作を計３回行い、得ら
れたメチルイソブチルケトン層を温水バス約４５℃、２
５ｔｏｒｒの減圧下で濃縮し、純度６０．５％のＡＢＡ
０．７８ｇを得た。
ケトン溶媒５００mlを３リットルジャーファーメンター
に仕込み、室温下３００rpm で１時間撹拌した後、撹拌
をとめ上澄液のメチルイソブチルケトン層だけを抜出し
た。さらにメチルイソブチルケトン溶媒５００mlを仕込
み、同じ操作を繰返した。この操作を計３回行い、得ら
れたメチルイソブチルケトン層を温水バス約４５℃、２
５ｔｏｒｒの減圧下で濃縮し、純度６０．５％のＡＢＡ
０．７８ｇを得た。
【００３３】
【発明の効果】本発明によれば有機培養の使用量を少な
く、かつ、その有機培養で抽出された有機層を濃縮する
ことなしにＡＢＡを含む水溶液から効率よく、選択的に
高収率でＡＢＡを単離できる。また、単離されたＡＢＡ
はその後の精製負荷を下げ工業的に安価な高純度ＡＢＡ
を得ることが可能である。
く、かつ、その有機培養で抽出された有機層を濃縮する
ことなしにＡＢＡを含む水溶液から効率よく、選択的に
高収率でＡＢＡを単離できる。また、単離されたＡＢＡ
はその後の精製負荷を下げ工業的に安価な高純度ＡＢＡ
を得ることが可能である。
【図１】 本発明の一実施態様を示すフロー。
（１）抽出槽 （２）ポンプ （３）逆抽出槽 （４）ポンプ （５）ポンプ
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成５年９月１６日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００３】
【従来の技術】従来、醗酵法によるＡＢＡは、セルコス
ポラ・ロシコラおよびボトリチス・シネレアによる液体
培養および固体培養で生成し、得た培養液および培養物
から有機溶媒で抽出し、その抽出液を濃縮する方法（特
公昭６０−６６２９号公報、特公昭６１−３５８３８号
公報）、また、得た培養液をイオン交換樹脂および吸着
樹脂に通液したあと、溶媒で溶出しその溶出液を濃縮す
る方法（特公平３−６１３９号公報）などで単離する方
法が知られている。
ポラ・ロシコラおよびボトリチス・シネレアによる液体
培養および固体培養で生成し、得た培養液および培養物
から有機溶媒で抽出し、その抽出液を濃縮する方法（特
公昭６０−６６２９号公報、特公昭６１−３５８３８号
公報）、また、得た培養液をイオン交換樹脂および吸着
樹脂に通液したあと、溶媒で溶出しその溶出液を濃縮す
る方法（特公平３−６１３９号公報）などで単離する方
法が知られている。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】しかし、前者法は多量
の溶媒を使用し、かつ、その多量の抽出液を濃縮しなけ
ればならず煩雑である。また、後者法は多量の樹脂およ
び多量の溶出溶媒を使用し、かつ、その多量の溶出液を
濃縮するなど煩雑であり、いずれの方法もＡＢＡの工業
的な生産に適さない。
の溶媒を使用し、かつ、その多量の抽出液を濃縮しなけ
ればならず煩雑である。また、後者法は多量の樹脂およ
び多量の溶出溶媒を使用し、かつ、その多量の溶出液を
濃縮するなど煩雑であり、いずれの方法もＡＢＡの工業
的な生産に適さない。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正内容】
【００２５】実施例１ グルコース４％、酵母エキス０．３％、燐酸１カリウム
０．２％、塩化カリウム０．１％、硫酸マグネシウム水
和物０．０２％、ポリオキシエチレンモノステアリン酸
ソルビタン０．０１％からなる液体培地を５００ml容バ
ッフル付きフラスコ５本にフラスコ１本あたり５０mlず
つ加え、１２０℃１５分加圧蒸気滅菌した。これにボト
リチス・シネレアＦＥＲＭ Ｐ−６１５６の前培養菌液
を４％ずつ植菌し、回転数１８０rpm 、振幅７cmで、２
５℃７日間培養し、ＡＢＡ濃度０．０５％の培養液を得
た。
０．２％、塩化カリウム０．１％、硫酸マグネシウム水
和物０．０２％、ポリオキシエチレンモノステアリン酸
ソルビタン０．０１％からなる液体培地を５００ml容バ
ッフル付きフラスコ５本にフラスコ１本あたり５０mlず
つ加え、１２０℃１５分加圧蒸気滅菌した。これにボト
リチス・シネレアＦＥＲＭ Ｐ−６１５６の前培養菌液
を４％ずつ植菌し、回転数１８０rpm 、振幅７cmで、２
５℃７日間培養し、ＡＢＡ濃度０．０５％の培養液を得
た。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正内容】
【００３３】
【発明の効果】本発明によれば有機溶媒の使用量を少な
く、かつ、その有機溶媒で抽出された有機層を濃縮する
ことなしにＡＢＡを含む水溶液から効率よく、選択的に
高収率でＡＢＡを単離できる。また、単離されたＡＢＡ
はその後の精製負荷を下げ工業的に安価な高純度ＡＢＡ
を得ることが可能である。
く、かつ、その有機溶媒で抽出された有機層を濃縮する
ことなしにＡＢＡを含む水溶液から効率よく、選択的に
高収率でＡＢＡを単離できる。また、単離されたＡＢＡ
はその後の精製負荷を下げ工業的に安価な高純度ＡＢＡ
を得ることが可能である。
Claims (2)
- 【請求項１】 （ｉ）アブシジン酸を含む水溶液に、水
と混合しない有機溶媒と接触させ、前記水溶液から前記
アブシジン酸を有機溶媒に移行せしめる抽出工程、 （ｉｉ）（ｉ）抽出工程で分離された前記アブシジン酸
を含む有機層を、アルカリ水溶液と接触させ、前記有機
層から前記アブシジン酸を前記アルカリ水溶液に移行せ
しめる逆抽出工程、 （ｉｉｉ）（ｉｉ）逆抽出工程で前記アブシジン酸を逆
抽出された有機層を（ｉ）抽出工程にリサイクルする工
程および （ｉｖ）（ｉｉ）逆抽出工程で分離された前記アブシジ
ン酸を含むアルカリ水溶液から前記アブシジン酸を単離
する工程からなることを特徴とするアブシジン酸の単離
方法。 - 【請求項２】 （ｉ）〜（ｉｉｉ）工程の接触およびリ
サイクルを連続して行う請求項１記載のアブシジン酸の
単離方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10448993A JPH06312975A (ja) | 1993-04-30 | 1993-04-30 | アブシジン酸の単離方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10448993A JPH06312975A (ja) | 1993-04-30 | 1993-04-30 | アブシジン酸の単離方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06312975A true JPH06312975A (ja) | 1994-11-08 |
Family
ID=14381962
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10448993A Pending JPH06312975A (ja) | 1993-04-30 | 1993-04-30 | アブシジン酸の単離方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06312975A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1076587C (zh) * | 1998-11-21 | 2001-12-26 | 云南农业大学和昆明恒溢隆经贸有限责任公司 | 天然抑芽剂的制备方法及其在烤烟腋芽抑制上的应用 |
| CN103274927A (zh) * | 2013-06-08 | 2013-09-04 | 南京化工职业技术学院 | 一种天然脱落酸的提纯方法 |
| CN106974323A (zh) * | 2017-04-13 | 2017-07-25 | 泉州美丽星空健康科技有限公司 | 一种清肺电子烟油及其加工工艺 |
| CN116730831A (zh) * | 2023-07-03 | 2023-09-12 | 江西新瑞丰生化股份有限公司 | 一种脱落酸母液的提取方法 |
-
1993
- 1993-04-30 JP JP10448993A patent/JPH06312975A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1076587C (zh) * | 1998-11-21 | 2001-12-26 | 云南农业大学和昆明恒溢隆经贸有限责任公司 | 天然抑芽剂的制备方法及其在烤烟腋芽抑制上的应用 |
| CN103274927A (zh) * | 2013-06-08 | 2013-09-04 | 南京化工职业技术学院 | 一种天然脱落酸的提纯方法 |
| CN106974323A (zh) * | 2017-04-13 | 2017-07-25 | 泉州美丽星空健康科技有限公司 | 一种清肺电子烟油及其加工工艺 |
| CN116730831A (zh) * | 2023-07-03 | 2023-09-12 | 江西新瑞丰生化股份有限公司 | 一种脱落酸母液的提取方法 |
| CN116730831B (zh) * | 2023-07-03 | 2024-04-12 | 江西新瑞丰生化股份有限公司 | 一种脱落酸母液的提取方法 |
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