CN103272083A

CN103272083A - 用于预防和/或治疗哮喘的药物组合物、其制备方法及用途

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Publication number: CN103272083A
Application number: CN2013102248897A
Authority: CN
Inventors: 孙增涛
Original assignee: SECOND AFFILIATED HOSPITAL OF TIANJIN UNIVERSITY OF TCM
Current assignee: SECOND AFFILIATED HOSPITAL OF TIANJIN UNIVERSITY OF TCM
Priority date: 2013-06-07
Filing date: 2013-06-07
Publication date: 2013-09-04
Anticipated expiration: 2033-06-07
Also published as: CN103272083B

Abstract

用于预防和/或治疗哮喘的药物组合物、其制备方法及用途。本发明涉及一种中药组合物、一种药物组合物及其制备方法、和所述中药组合物以及药物组合物的用途。本发明的药物组合物的有效成分的制备原料是或包含：6-10重量份的炙麻黄、8-12重量份的杏仁、18-22重量份的桑白皮、14-18重量份的黄芩、8-12重量份的蝉蜕、8-12重量份的僵蚕、18-22重量份的地龙、8-12重量份的白果、8-12重量份的前胡、8-12重量份的射干、18-22重量份的紫菀、8-12重量份的半夏、和4-8重量份的甘草。

Description

用于预防和/或治疗哮喘的药物组合物、其制备方法及用途

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体地涉及预防和/或治疗哮喘的药物组合物、其制备方法及用途。

背景技术

支气管哮喘（简称：哮喘）是一种常见病、多发病。目前，全球哮喘患者约3亿人，中国哮喘患者约3000万。哮喘是影响人们身心健康的重要疾病，如果治疗不及时、不规范，可能会致命。

哮喘患者的常见症状是发作性的喘息、气急、胸闷或咳嗽等症状，少数患者还可能以胸痛为主要表现，这些症状经常在患者接触烟雾、香水、油漆、灰尘、宠物、花粉等刺激性气体或变应原之后发作，夜间和（或）清晨症状也容易发生或加剧。很多患者在哮喘发作时自己可闻及喘鸣音。症状通常是发作性的，多数患者可自行缓解或经治疗缓解。

很多哮喘患者在确诊之前常常经历很长时间的误诊过程，被诊断为慢性支气管炎、咽炎等，由于错误的诊断导致治疗方案的错误，不仅延误治疗，给患者造成身体上的痛苦，也给患者带来精神上、心理上的痛苦，经济上的付出也白白浪费掉。并且他们会经常使用抗生素，由于抗生素对哮喘病没有治疗作用，反复使用容易造成耐药。

哮喘患者若出现严重急性发作，救治不及时时可能致命。控制不佳的哮喘患者对日常工作及日常生活都会发生影响，可导致误工、误学，导致活动、运动受限，使生命质量下降，并带来经济上的负担及对家人的生活发生负面影响。哮喘反复发作可导致慢性阻塞性肺疾病、肺气肿、肺心病、心功能衰竭、呼吸衰竭等并发症。

治疗哮喘的药物可以分为控制药物和缓解药物。

控制药物：是指需要长期每天使用的药物。这些药物主要通过抗炎作用使哮喘维持临床控制，其中包括吸入糖皮质激素（简称激素）、全身用激素、白三烯调节剂、长效β2-受体激动剂（其须与吸入激素联合应用）、缓释茶碱、抗IgE抗体及其他有助于减少全身激素剂量的药物等。

缓解药物：是指按需使用的药物。这些药物通过迅速解除支气管痉挛从而缓解哮喘症状，其中包括速效吸入β2-受体激动剂、全身用激素、吸入性抗胆碱能药物、短效茶碱及短效口服β2-受体激动剂等。

1、激素

激素是最有效的控制气道炎症的药物。给药途径包括吸入、口服和静脉应用等，吸入为首选途径。

临床上常用的吸入激素包括二丙酸倍氯米松、布地奈德、丙酸氟替卡松等。研究结果证明吸入激素可以有效减轻哮喘症状、改善肺功能、降低气道高反应性、控制气道炎症，减少哮喘发作的频率和减轻发作的严重程度，降低病死率。

但是，吸入激素会给患者身体造成不良影响，其在口咽部局部造成的不良反应包括：声音嘶哑、咽部不适和念珠菌感染。目前有证据表明成人哮喘患者长期高剂量吸入激素后可能出现的全身不良反应包括皮肤瘀斑、肾上腺功能抑制和骨密度降低等。

口服激素适用于中度哮喘发作、慢性持续哮喘吸入大剂量吸入激素联合治疗无效的患者和作为静脉应用激素治疗后的序贯治疗。

然而，长期口服激素可能引起骨质疏松症、高血压、糖尿病、下丘脑-垂体-肾上腺轴的抑制、肥胖症、白内障、青光眼、皮肤菲薄导致皮纹和瘀癍、肌无力。

2、β2-受体激动剂

可通过舒张气道平滑肌、降低微血管的通透性、增加气道上皮纤毛的摆动等，缓解哮喘症状。短效β2-受体激动剂:常用的药物如沙丁胺醇和特布他林等。这类药物应按需间歇使用，不宜长期、单一使用，也不宜过量应用，否则可引起骨骼肌震颤、低血钾、心律紊乱等不良反应。

3、白三烯受体拮抗剂

本品可减轻哮喘症状、改善肺功能、减少哮喘的恶化。轻症哮喘患者可单独使用该类药物，但其作用不如吸入激素，中重度哮喘患者可将此类药物作为联合治疗中的一种药物。

4、茶碱

口服给药:包括氨茶碱和控(缓)释型茶碱。联合应用茶碱、激素和抗胆碱药物具有协同作用。但本品与β2-受体激动剂联合应用时，易出现心率增快和心律失常，应慎用并适当减少剂量。药物血清内浓度过高，易引起药物中毒。

5、抗胆碱药物

本品对有吸烟史的老年哮喘患者较为适宜，但对妊娠早期妇女和患有青光眼或前列腺肥大的患者应慎用。

6、抗IgE治疗

抗IgE单克隆抗体可应用于血清IgE水平增高的哮喘患者。目前它主要用于经过吸入糖皮质激素和长效β2-受体激动剂联合治疗后症状仍未控制的严重哮喘患者。但因该药临床使用的时间尚短，其远期疗效与安全性有待进一步观察。并且价格昂贵也使其临床应用受到限制。

7、变应原特异性免疫疗法(SIT)

通过皮下或舌下含服给予常见吸入变应原提取液(如尘螨、猫毛、豚草等)，可减轻哮喘症状和降低气道高反应性，适用于变应原明确但难以避免的哮喘患者。

综上所述，目前使用的这些西医药物和疗法都或多或少的存在一些缺陷，例如疗效低、产生药物依赖性、副作用大、价格昂贵、易引起药物中毒等。虽然也有一些治疗哮喘的中成药，但是治疗效果不十分理想。

发明内容

本发明以中医的辨证论治为基础，发现了一种可用于预防和/或治疗哮喘的中药组合物，药物组合物和汤药。基于上述发现，完成了本发明。本发明还提供了所述药物组合物的制备方法，以及所述药物组合物在制备预防和/或治疗哮喘的药物中的用途。

本发明的解决方案是基于祖国医学对哮喘及其合并症发病机理的认识和治疗原则，参考现代药理研究成就，从祖国医药宝库中，筛选出滋肾阴、补气血、清浊泄、扶正培本、药膳同源的天然食用植物药。结合哮喘发作时存在的风痰博结于气道，气道挛急，肺管不利，风盛挛急等情况，以宣肺平喘、祛痰行瘀、疏风解痉立法。按照中医理论组方，提取精华，使其明显抑制气道内的炎性细胞，改善气道上皮细胞的损伤脱落，控制炎性细胞在局部的浸润，减轻周围肺组织肥大泡的形成，减少黏液分泌，减轻黏膜充血水肿，以及促进气道纤毛再生。

本发明的第一方面提供一种用于预防和/或治疗哮喘的中药组合物，其包含或由以下组成：炙麻黄、杏仁、桑白皮、黄芩、蝉蜕、僵蚕、地龙、白果、前胡、射干、紫菀、半夏、和甘草。

在一个实施方案中，本发明的中药组合物包含或由以下组成：6-10重量份的炙麻黄、8-12重量份的杏仁、18-22重量份的桑白皮、14-18重量份的黄芩、8-12重量份的蝉蜕、8-12重量份的僵蚕、18-22重量份的地龙、8-12重量份的白果、8-12重量份的前胡、8-12重量份的射干、18-22重量份的紫菀、8-12重量份的半夏、和4-8重量份的甘草。

在另一个实施方案中，本发明的中药组合物包含或由以下组成：7-9重量份的炙麻黄、9-11重量份的杏仁、19-21重量份的桑白皮、15-17重量份的黄芩、9-11重量份的蝉蜕、9-11重量份的僵蚕、19-21重量份的地龙、9-11重量份的白果、9-11重量份的前胡、9-11重量份的射干、19-21重量份的紫菀、9-11重量份的半夏、和5-7重量份的甘草。

在又一个实施方案中，本发明的中药组合物包含或由以下组成：8重量份的炙麻黄、10重量份的杏仁、20重量份的桑白皮、16重量份的黄芩、10重量份的蝉蜕、10重量份的僵蚕、20重量份的地龙、10重量份的白果、10重量份的前胡、10重量份的射干、20重量份的紫菀、10重量份的半夏、和6重量份的甘草。

在施用前，本发明的中药组合物可以利用本领域已知的方法进行水煎，并且服用水煎本发明的中药组合物后获得的汤药。

在一个实施方案中，本发明还涉及由此获得的汤药自身，其通过水煎本发明的中药组合物获得，并且经过任选的过滤步骤。

本发明的第二方面涉及一种药物组合物，其中制成本发明的药物组合物的有效成分的原料是或包含：6-10重量份的炙麻黄、8-12重量份的杏仁、18-22重量份的桑白皮、14-18重量份的黄芩、8-12重量份的蝉蜕、8-12重量份的僵蚕、18-22重量份的地龙、8-12重量份的白果、8-12重量份的前胡、8-12重量份的射干、18-22重量份的紫菀、8-12重量份的半夏、和4-8重量份的甘草。

在一个实施方案中，制成本发明的药物组合物的有效成分的原料是或包含：7-9重量份的炙麻黄、9-11重量份的杏仁、19-21重量份的桑白皮、15-17重量份的黄芩、9-11重量份的蝉蜕、9-11重量份的僵蚕、19-21重量份的地龙、9-11重量份的白果、9-11重量份的前胡、9-11重量份的射干、19-21重量份的紫菀、9-11重量份的半夏、和5-7重量份的甘草。

在另一个实施方案中，制成本发明的药物组合物的有效成分的原料是或包含：8重量份的炙麻黄、10重量份的杏仁、20重量份的桑白皮、16重量份的黄芩、10重量份的蝉蜕、10重量份的僵蚕、20重量份的地龙、10重量份的白果、10重量份的前胡、10重量份的射干、20重量份的紫菀、10重量份的半夏、和6重量份的甘草。

在一个优选的实施方案中，本发明的药物组合物可以通过使得所述原料经历用水煎煮、过滤、浓缩滤液和干燥的步骤而获得。在一个更优选的实施方案中，本发明的药物组合物可以如下获得：使得所述原料经历用水煎煮两次，每次1到3小时，优选2小时，第一次用8到12倍优选10倍量的水，第二次用6到10倍优选8倍量的水，其中第二次所用水的量少于第一次所用水的量；过滤；合并滤液浓缩至相对密度为1.30-1.32的清膏；干燥；粉碎成细粉；和过筛。

本发明的第三方面提供根据本发明第二方面的药物组合物的制备方法，包括将所述原料（炙麻黄、杏仁、桑白皮、黄芩、蝉蜕、僵蚕、地龙、白果、前胡、射干、紫菀、半夏、和甘草等十三味药材）用水煎煮、过滤、浓缩滤液和干燥的步骤。

在一个实施方案中，根据本发明第三方面所述的方法，包括使所述的原料（炙麻黄、杏仁、桑白皮、黄芩、蝉蜕、僵蚕、地龙、白果、前胡、射干、紫菀、半夏、和甘草等十三味药材）经历以下处理步骤：将所述原料用水煎煮两次，每次1到3小时，优选2小时，第一次用8到12倍优选10倍量的水，第二次用6到10倍优选8倍量的水，其中第二次所用水的量少于第一次所用水的量；过滤；合并滤液浓缩至相对密度为1.30-1.32的清膏；干燥；粉碎成细粉；和过筛。

在另一个实施方案中，根据本发明第三方面所述的方法，优选地还包括在过筛后的细粉中加入稀释剂，并混合均匀的步骤。

本发明的第四方面提供根据本发明第一方面的中药组合物以及由其获得的汤药和根据本发明第二方面的药物组合物在制备用于治疗和/或预防哮喘的药物中的用途。

下面对本发明进行进一步的描述。本文所用的术语，如未明确说明或定义，则它们具有本领域技术人员公知的一般含义。

具体实施方式

如本文使用的，术语“治疗”具有其一般含义，并且在本文特别地是指对已经罹患哮喘的动物个体采用本发明的药物组合物进行处理，以期对该病产生治疗、治愈、缓解、减轻等作用。类似地，如本文使用的，术语“预防”具有其一般含义，并且在本文特别地是指对可能罹患哮喘或者对哮喘具有罹患风险的动物个体采用本发明的药物组合物进行处理，以期对该病产生防止、预防、阻止、隔断等作用。

可采用制剂领域中的常规技术，通过药品生产中常用的提取分离纯化手段得到本发明药物组合物的原料的有效成分，与一种或更多种药学上可接受的赋形剂混合，然后形成所需的剂型，来制备本发明的药物组合物。

本发明药物组合物中可用的“药学上可接受的赋形剂”可以是药物制剂领域中任何常规的赋形剂，特定赋形剂的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如，可以作为药学上可接受的赋形剂包括药学领域常规的稀释剂、载体、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体和润滑剂等。必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。

如本文使用的，术语“有效量”是指本发明所述活性成分的量，该量足以对哮喘进行有效的治疗和/或预防。

如本文使用的，术语“药物组合物”具有其一般含义，并且在本文中可以指本发明的原料即原植物药材的组合物、或者所述原料即原植物药材的提取物组合物、或者是前述提取物进一步加工而成的制剂例如药物制剂。此外，本发明的“药物组合物”还可以以保健品、功能性食品、食品、食品添加剂等形式存在或提供。可采用制药领域特别是制剂领域中的常规技术，通过药品生产中常用的提取分离纯化手段得到本发明具有益气活血作用的药物组合物的原料的有效成分，任选地与一种或更多种药学上可接受的赋形剂混合，然后形成所需的剂型，来制备本发明的药物组合物。根据本发明的药物组合物，其为可以适用于口服给药、胃肠外给药或局部给药、外用给药的药物制剂。本发明的药物组合物可以制成片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。具体地说，根据本发明的药物组合物，所述的药物剂型包括但不限于：片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂、注射液、注射用粉剂、透皮贴剂、软膏剂、凝胶剂、栓剂、口服溶液、口服混悬液、注射用乳剂、口服乳剂、缓释片剂、控释片剂等。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。

如本文使用的，术语“个体”或者“动物个体”具有其一般含义，并且在本文中可以指罹患或可能罹患哮喘的个体或动物个体，还可以指为了某种目的例如为了科学研究目的而使用的个体或动物个体。具体地说，所述的个体例如是动物个体，特别是哺乳动物个体，例如人、猪、狗、猫、牛、羊、马、大鼠、小鼠、家兔、豚鼠、猴等。更具体地说，本发明所述的个体是人。

当本发明的药物组合物或者药物组合物作为药物施用于受试个体人或动物时，它们可以以其本身给予，即不加任何的上述药学上可接受的赋形剂，将本发明的药物组合物或者药物组合物以原形直接施用于患者：或者可以是以含有例如1-99%（更优选例如10-90%）的药物组合物（该药物组合物可以是本发明原料药材的提取物的形式）或者药物组合物（该药物组合物可以是本发明原料药材的提取物的形式）与药学上可接受的赋形剂组合后给予人或动物。

在本发明的药物组合物或药物组合物中的活性成分，其实际的剂量水平和施用的时程可以适应性改变，以便对于特定的受试个体、组合物和施用方法而言，活性成分的量可以有效地获得期望的治疗应答，而对受试个体无毒性。

如本文使用的，术语炙麻黄是指炮制过的麻黄。常温下将中药麻黄生品置于加水的炼蜜中闷润至炼蜜被中药麻黄生品充分吸收后，置烘箱中烘烤，后冷却至室温，即得蜜炙麻黄炮制品。

以下实施例用于举例说明本发明，其并不用于限定本发明的范围。

实施例

下面将以具体实施例的方式对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

一、本发明药物组合物的制备实施例

下述实施例中所用实验材料和方法，如无特别说明，均为常规材料和方法。

制备实施例1：根据本发明药物组合物的制备

由此制得的药物组合物称为本发明药物A。

取8kg的炙麻黄、10kg的杏仁、20kg的桑白皮、16kg的黄芩、10kg的蝉蜕、10kg的僵蚕、20kg的地龙、10kg的白果、10kg的前胡、10kg的射干、20kg的紫菀、10kg的半夏、和6kg的甘草，10倍量水煎煮并提取两次，每次2h，合并两次提取液，浓缩后真空干燥，粉碎，得本发明药物A，45.4kg。

制备实施例2：根据本发明药物组合物的制备

由此制得的药物组合物称为本发明药物B。

取6kg的炙麻黄、12kg的杏仁、22kg的桑白皮、18kg的黄芩、12kg的蝉蜕、12kg的僵蚕、22kg的地龙、12kg的白果、12kg的前胡、12kg的射干、22kg的紫菀、12kg的半夏、和8kg的甘草，12倍量水煎煮并提取两次，每次 2h，合并两次提取液，浓缩后真空干燥，粉碎，得本发明药物B，54.8kg。

制备实施例3：根据本发明药物组合物的制备

由此制得的药物组合物称为本发明药物C。

取10kg的炙麻黄、8kg的杏仁、18kg的桑白皮、14kg的黄芩、8kg的蝉蜕、8kg的僵蚕、18kg的地龙、8kg的白果、8kg的前胡、8kg的射干、8kg的紫菀、8kg的半夏、和4kg的甘草，8倍量水煎煮并提取两次，每次2h，合并两次提取液，浓缩后真空干燥，粉碎，得本发明药物C，39.2kg。

制备实施例4：根据本发明药物组合物的制备

由此制得的药物组合物称为本发明药物D。

取8kg的炙麻黄、8kg的杏仁、20kg的桑白皮、16kg的黄芩、8kg的蝉蜕、10kg的僵蚕、18kg的地龙、8kg的白果、8kg的前胡、12kg的射干、22kg的紫菀、10kg的半夏、和6kg的甘草，8倍量水煎煮并提取两次，每次2h，合并两次提取液，浓缩后真空干燥，粉碎，得本发明药物D，38.7kg。

制备实施例5：根据本发明药物组合物的制备

由此制得的药物组合物称为本发明药物E。

取8kg的炙麻黄、10kg的杏仁、20kg的桑白皮、16kg的黄芩、8kg的蝉蜕、10kg的僵蚕、18kg的地龙、8kg的白果、8kg的前胡、12kg的射干、22kg的紫菀、10kg的半夏、和6kg的甘草，8倍量水煎煮并提取两次，每次2h，合并两次提取液，浓缩后真空干燥，粉碎，得本发明药物E，40.2kg。

下面对根据本发明的药物组合物对哮喘的预防和治疗进行实验研究，以证明本发明的药物组合物对哮喘具有确切疗效。

二、实验部分

（一）、根据本发明的药物组合物治疗哮喘的动物实验

1.材料与方法

1.1实验材料

1.1.1动物选择：选择2级Hartley豚鼠60只，雌雄各半，鼠重250±50g，由中国药物生物制品检定所实验动物中心提供。符合北京地方标准 DB11/019.1-92《实验动物微生物与寄生虫学标准·啮齿类和兔类等级标准》。

1.1.2药物制备：

本发明的药物组合物的配制：分别取本发明药物组合物A、B、C、D和E，按照固形物收率用生理盐水配制成折合1g生药/ml溶液。

强的松，天津飞鹰制药厂生产，津卫药准字（95）第002671号，批号：970302。研细，以生理盐水配制成混悬液，浓度为0.12mg/ml。

动物给药剂量参照徐淑云公式：

d_{B} = d_{A} \cdot \frac{R_{B}}{R_{A}} \cdot {(\frac{W_{A}}{W_{B}})}^{1 / 3}

其中，d_A为每公斤体重给药剂量，d_B为豚鼠每公斤体重给药剂量，R_A、R_B分别代表人、豚鼠给药系数，W_A、W_B分别代表人、豚鼠体重。计算后，每天给药折合生药14.8g生药/kg，含强的松0.48mg的生理盐水溶液4ml，灌服。

1.1.3主要试剂及仪器

卵蛋白，由中国医学科学院血研所提供。

PLA2、TXB2、6-K-PGF1α试剂盒，由解放军总医院东亚放免中心提供。

ECP试剂盒，由瑞典Pharmacia公司提供。

IgE试剂盒，由新传生物技术有限公司提供。

TNF-α试剂盒，由中国原子能科学研究院提供。

402超声雾化治疗器，为上海合力医疗器械厂产品。

LTP-A离心涂机，为军事医学科学院仪器厂产品。

MRX-HD-2型全自动酶标仪，为美国Dynatech公司产品。

SN-682型全自动放射免疫r记数仪，为中国科学院上海核原子研究所日环仪器厂产品。

Pharmacia CAP System，为瑞典Pharmacia公司产品。

OLYMPUS CH-2型光学显微镜，为日本OLYMPUS公司产品。

1.2.实验方法

1.2.1哮喘豚鼠模型的建立及分组：

健康Hartley豚鼠124只，雌雄各半，鼠重250±50g。正常饲养一周后，按随机原则分为本发明药物组（制备实施例1～5制得的本发明药物A～E）、强的松组、模型组和正常对照组，各组例数依次为80（本发明药物组共分为5个小组，每组16只）：16：16：12。

除正常对照组不予处理外，余组按吕宝璋方法造成哮喘模型。首先用10%的卵蛋白生理盐水溶液1mL腹腔内注射，正常饲养2周后在密闭雾化箱中用1%的卵蛋白持续低流量雾化致敏，直至豚鼠出现点头呼吸、喘促、肋间隙凹陷等呼吸困难症状，甚至翻滚，跌倒，此时提示造模成功。

1.2.2给药方法：

于造摸成功后开始给药，本发明药物组按豚鼠体重给予本发明药物溶液折合14.8g生药/kg，强的松组给予强的松溶液4mL，强的松1.92mg/kg，其余两组均给予等量生理盐水。共计14d，分早、晚两次给药，其间每日诱发哮喘1次，观察豚鼠一般情况并记录诱喘时间及发作程度。

1.2.3实验过程：

于最后一次诱发哮喘时，详细记录豚鼠出现哮喘的潜伏期，并按邵氏方法将哮喘分为4级：I级，呼吸加剧；II级，呼吸困难、点头呼吸；III级，抽搐；IV级，翻滚跌扑。诱喘完毕后，经颈总动脉取血4ml，低温下离心作放免测试用。暴露颈部，剥离气管后做V字型切口，气管插管，用一次性塑料空针取生理盐水5ml，缓慢注入气管，快速抽吸2～3mL，将抽取的支气管－肺泡灌洗液（BALF）离心，弃掉多半上清液，余少量与沉淀物混匀，取一滴置于载玻片上，风干，96%的酒精固定，HE染色，供观察细胞分类记数用。后秤重并断头活杀，切取肺组织秤重并计算肺体指数。开胸，观察大体肺组织，并统一切取右肺下叶组织，10%福尔马林固定，石蜡包埋，HE染色，供光镜下观察用。

2.观测指标及结果：

2.1一般情况：观察豚鼠诱发哮喘程度（包括喘促、咳嗽甚至跌扑等呼吸道痉挛梗阻症状），结果见下表1。

表1各组豚鼠末次引喘情况

注：★与模型组比较，p<0.01。▲分别与模型组比较，p<0.01。

由表1可见，经本发明药物治疗后，豚鼠哮喘诱发时间明显延长，程度减轻。

2.2豚鼠血浆中磷脂酶A2（PLA2）的变化，结果见下表2。

表2各组豚鼠血浆中PLA2的变化

注:▲与正常组比较p<0.01，★与模型组比较p<0.01。●与模型组比较p<0.01。

由表2可见，模型组PLA2水平明显增高，本发明药物组的PLA2水平经本发明药物治疗后显著降低，与模型组比较，p<0.01。

2．3豚鼠血清中血栓素B2（TXB2）及6-酮-前列腺素（6-K-PGF1α）的变化，结果见下表3。

表3各组豚鼠血清中TXB2及6-K-PGF1α变化

Figure 2013102248897100002DEST_PATH_IMAGE003

注:▲与正常组比较p<0.05，★与模型组比较p<0.05。●分别与模型组比较p<0.05。

由表3可见，模型组TXB2水平明显增高，本发明药物组TXB2水平经本发明药物治疗后降低，与模型组相比，p<0.05，差异有统计学意义。模型组6-K-PGF1α水平增高，本发明药物组6-K-PGF1α经本发明药物治疗后变化不明显。

2．4血清检测

2．4．1嗜酸细胞阳离子蛋白（ECP）：采用放免法测定，将冲洗液（Pharmacia CAP System Washing Solution）注入化验冲洗器（Assay Washer96），安装系统软盘，转移免疫包被物至载有50μl样品的微条孔内，18－32℃孵育30分钟，冲洗；每孔加入50μl酶结合物，18－32℃孵育150分钟，洗脱，加入400μl终止液，稍候2分钟，以荧光计数器测量洗脱液中的荧光物质，计算FU值，绘制标准曲线，求出样品ECP浓度。各组血清ECP测定结果详见下表4。

表4豚鼠血清ECP的分布

注：各组豚鼠血清ECP浓度不等，正常组ECP浓度在2.00mg/l以下。强的松组高于2.00mg/l的豚鼠有4只，本发明药物组（A-E）高于2.00mg/l的豚鼠分别有1,1,2,1,3只。模型组高于2.00mg/l的豚鼠有10只，与正常组比较，有非常显著性差异（p<0.01）。

2．4．2肿瘤坏死因子（TNF-α）：采用放免法测定，取缓冲液、TNF-α标准品或待测样品与TNF抗体充分混匀，4℃温育3小时，然后加入125I-TNF标记物充分混匀，4℃温育17小时，最后加入免疫分离剂充分混匀，室温放置15分钟后，3500转/分钟，离心15分钟，吸弃上清液后测定各试管沉淀物放射性计数率，计算并绘制标准曲线，求出样品TNF-α含量。各组TNF-α变化情况详见下表5。

2．4．3免疫球蛋白IgE：采用酶免法测定，取反应微孔条（抗IgE抗体包被聚乙烯微孔）标号，用加样器加入25μl标准品，（含IgE的牛血清标准品）、质控血清（含IgE的牛血清）及待测标本，每孔分别加入100μl磷酸盐缓冲液（PH7.0-7.2），充分混匀，室温放置15分钟，将各孔液体弃净，用蒸馏水冲洗5次，扣干后，每孔加入100μl酶结合物（含IgE单克隆抗体及辣根过氧化物酶的结合物），混匀后室温反应20分钟将各孔液体弃净，蒸馏水冲洗5次，扣干后，每孔加1滴（50μl）显色液A，再加1滴（50μl）显色液B，充分混匀，室温下避光反应15分钟，每孔加1滴（50μl）终止液（试剂盒由北京科美东雅生物有限公司提供）混匀，用酶标仪在450nm波长读记吸光度，并计算出标本浓度。各组免疫球蛋白IgE变化情况详见下表5。

表5豚鼠血清TNF-α、IgE变化情况

注：**与正常组比较p<0.01，△△与模型组比较p<0.01，▽▽分别与模型组和强的松组比较p<0.01。

表5的结果显示模型组上述两种物质含量明显增高，经本发明药物治疗后显著降低。

2．5BALF细胞计数：在光镜下（400倍），取3个显微镜视野，每个视野中计数100个细胞，分别计算出嗜酸性粒细胞（Eos）、中性粒细胞（Neu）、淋巴细胞（Lym）、巨嗜细胞（MФ）所占百分数，3个视野中Eos、Neu、Lym、及MФ相对数的均数，反映豚鼠气道内Eos、Neu、Lym、及MФ的聚集程度。 BALF液中细胞学比较，结果显示，模型组中嗜酸细胞明显增多，约为正常组的5倍，经药物治疗后有明显下降，以本发明药物组最为明显，结果详见表6。

表6各组BALF的细胞学比较

注：**与正常组比较p<0.01，△△与模型组比较p<0.01，▽▽与模型组和强的松组分别比较，p<0.01

2．6组织形态学观察

肺组织切片：光镜下统一观察各组豚鼠肺组织形态，包括气道粘膜损伤情况，炎性细胞浸润，管腔痉挛及肺大泡形成等。结果表明：模型组肺外观肿胀，光镜下支气管粘膜上皮损伤脱落，炎细胞浸润，管腔痉挛陷闭，周围肺组织有肺大泡形成；在本发明药物组中上述变化明显减轻，强的松组情况大致与本发明药物组相同，表明本发明药物具有明确的抗炎作用，能减少黏液分泌，减轻黏膜充血水肿，促进气道纤毛再生，修复气道上皮细胞损伤。其整体疗效忧于强的松，其机理与中药对炎性细胞（主要是EOS）的抑制，拮抗ECP的释放和TNF的变化，降低IgE水平有关。

3．统计学处理方法：

实验结果采用四格表的确切概率法，单因素方差分析和Q检验。

（二）、根据本发明的药物组合物治疗哮喘的临床实验

1．哮喘的诊断依据和病情疗效判定标准：

按《支气管哮喘的定义、诊断、严重程度分级和疗效判定标准》执行，参见：中华结核和呼吸杂志.1993.16（哮喘增刊）：50。

1．1诊断标准：

（1）反复发作喘息、呼吸困难、胸闷或咳嗽，多与接触变应原、冷空气、物理化学刺激、病毒性上呼吸道感染、运动有关。

（2）发作时在双肺可闻及散在或弥漫性的以呼气相为主的哮鸣音，呼气相延长。

（3）上述症状可经治疗或自行缓解。

（4）除外其它疾病所引起的喘息、气急、胸闷和咳嗽。

（5）症状不典型者（如无明显体征或喘息）应至少具有以下一项试验阳性：a、支气管激发或运动试验阳性；b、支气管舒张试验阳性用力呼气一秒量(FEV1.0)增加15%以上，且FEV1.0增加绝对值>200ml；c、峰值流速(PEF)日内变异率或昼夜波动率≥20%。

符合（1）～（4）条或（4）、（5）条者，可以诊断为患有支气管哮喘。

1．2中医热哮诊断标准

（1）主症：哮鸣有声，呼吸急促，胸闷憋胀。

（2）次症：①气粗息涌；咯痰色黄或白，粘浊稠厚，咯吐不利；②汗出，面赤，口苦，口渴喜饮；③舌红苔黄或腻，脉滑数或弦滑。

符合主症和次症三者之一者即可诊断为患有支气管哮喘。

1．3纳入标准：

（1）符合支气管哮喘诊断标准，病情属轻、中度患者；

（2）中医辨证属热哮；

（3）年龄在16～65岁之间。

1．4排除标准：

（1）有心脑肾等并发症，从而影响支气管哮喘研究观察者；

（2）对中药成份有过敏史的患者；

（3）合并肺部其它疾病如支气管扩张、肺结核等患者。

1．5哮喘病情严重程度分级标准

（1）轻度持续：症状≥每周1次，但<每天1次，可能影响活动和睡眠，夜间哮喘症状>每个月2次，但<每周1次。FEV1.0占预计值%≥80%或PEF≥80%个人最佳值，PEF或FEV1.0变异率20%～30%。

（2）中度持续：每天有症状，影响活动和睡眠，夜间哮喘症状≥每周1次，FEV1.0占预计值%为60%～79%或PEF为60%～79%个人最佳值，PEF或FEV1.0变异率>30%。

1．6疗效判定标准：

（1）临床控制：哮喘症状完全缓解，即使偶有轻度发作不需用药即可缓解。FEV1.0（或PEFR）增加量＞35％或FEV1.0（或PEFR）≥80％预计值。

（2）显效：哮喘发作较治疗前明显减轻，FEV1.0（或PEFR）增加量在25％－35％，或治疗后FEV1.0（或PEFR）达预计值60－79％仍需用激素或支气管扩张剂。

（3）好转：哮喘症状有所减轻，FEV1.0（或PEFR）增加量在15－24％，仍需用激素和（或）支气管扩张剂。

（4）无效：临床症状和FEV1.0（或PEFR）测定值无改善或反而加重。

2．一般资料

选择支气管哮喘发作期患者120例，诊断标准依据《中华结核和呼吸病杂志》1997年“支气管哮喘防治指南”制定，病情属轻、中度者，且中医辨证属热哮。按随机原则分为两组：本发明药物治疗组80例（简称治疗组）和西药治疗对照组40例（简称对照组），两组一般情况详见表6。

表6两组患者一般情况比较

注：经统计学处理，两组在性别、年龄、病程及病情程度上无显著性差异（p>0.05），有可比性。

3．治疗方法：

治疗组分别给予本发明药物A～E，折合生药148g生药/人/天，2次/天，疗程为3周。对照组的治疗参照《支气管哮喘防治指南》轻中度持续患者治疗方案拟定，予吸入的糖皮质激素（普米克气雾剂）及β2受体激动剂（喘康素）。

4．观察指标

4．1症状及体征：观察并记录患者治疗前后喘息，哮鸣音，咳嗽，咯痰情况，按《新药（中药）治疗支气管哮喘临床研究指导原则》进行疗效判断。

（1）症状及分级标准

喘息：

轻度（＋）：喘息偶有发作，程度轻，不影响睡眠或活动。

中度（＋＋）：介于轻度和重度之间。

重度（＋＋＋）：喘息明显不能平卧，影响睡眠及活动。

哮鸣音：

轻度（＋）：偶闻，或在咳嗽，深快呼吸后出现。

中度（＋＋）：散在。

重度（＋＋＋）：满布。

咳嗽：

轻度（＋）：间断咳嗽，不影响正常工作和生活。

中度（＋＋）：介于轻重度之间。

重度（＋＋＋）：昼夜咳嗽频繁或阵咳影响工作和睡眠。

咯痰：

轻度（＋）：昼夜痰量在10－50ml。

中度（＋＋）：昼夜痰量在51－100ml。

重度（＋＋＋）：昼夜痰量在100ml以上。

（2）疗效判定标准

临床控制：上述症状及体征消失和不足轻度。

显效：上述症状及体征明显好转（＋＋→＋）。

好转：上述症状和体征有所好转（＋＋＋→＋＋或＋＋→＋）。

无效：上述症状及体征无好转或加重。

4.2理化检查

（1）肺功能测定：使用日本CHEST公司生产的H1－501型肺功能仪分别于治疗前后由专人测定用力呼气一秒量（FEV1.0）、峰值流速（PEFR）、用力呼气肺活量（FVC）、50%肺活量呼气流速（V50）、25%肺活量呼气流速（V25）等值，测试时保持气压、温度的恒定。然后由上述有关数据计算阻塞指数（OI）和V50/V25。

（2）血清内皮素（ET）、一氧化氮（NO）测定：于治疗组中随机抽取30例患者，分别于治疗前后静脉取血4～5ml。其中2ml置于预先注入EDTA二钠和抑肽酶的试管内，余血置于另一空白试管内，送检验科离心，以放免法测定ET。以生化比色还原法测定NO，试剂盒由天津·洁瑞公司提供，操作按说明书进行。

（3）气道反应性测定：抽取治疗组中FEV1.0≥70％的患者20例，参照《肺功能测定原理与临床应用》一书所介绍的蒸馏水激发实验进行。雾化器为上海合力雾化器厂生产的402型超声雾化器，受试者于测试前先测用力呼气一秒量（FEV1.0）然后夹鼻经面罩潮气吸入雾化蒸馏水，雾化时调整流速为8L/分钟，一分雾化量控制在2ml/分钟；每次吸入时间按1、2、4、8分钟递增。每次吸入后30秒测定FEV1.0，间隔2分钟再吸入下一剂量，直至FEV1.0下降值≥20％或蒸馏水吸入量达30ml为止。于实验后计算其吸入雾化蒸馏水量，以累计毫升数PD20FEV1.0表示。测试前支气管扩张剂12小时，停服皮质激素类药物24小时。

5．统计方法：

实验数据以平均数±标准差（X±S）。统计学方法采用卡方检验、Raddit分析和t检验。

6．观察结果：

6．1两组患者经治疗后近期总疗效比较，治疗组控显率为77.5%，对照组为65%，经统计学处理无显著性意义，P>0.05，结果详见表7。

表7两组患者疗效比较

注：结果显示本发明药物与西药常规治疗疗效无显著性差异，其疗效确切。

6．2两组患者经治疗后肺功能（大、小气道功能）改善明显，经统计学处理有显著差异，p<0.01。结果详见表8和表9。

表8两组患者大气道功能治疗前后变化

表9两组患者小气道功能治疗前后变化

6．3两组患者喘息、哮鸣音、咳嗽、咯痰疗效的比较，喘息、哮鸣音无显著性差异，p>0.05。咳嗽、咯痰疗效本发明药物明显优于西药常规治疗，经统计学处理有显著差异，p<0.05。结果详见表10。

表10两组患者喘息、哮鸣音、咳嗽、咯痰疗效比较

6．4气道反应性测定：于实验后计算其吸入雾化蒸馏水量，以累计毫升数PD20FEV1.0表示。结果详见表11。

表1120例治疗组患者治疗前后PD20FEV1.0变化比较

注：经本发明药物治疗，20例患者气道反应性明显降低，统计学具有显著性差异，p<0.05。

6．5血清ET、NO测定：结果详见表12。

表12治疗组中30例患者ET、NO水平变化

注：治疗组中30例患者治疗前后血清ET、NO均有明显变化，表现为ET、NO水平下降，经统计学处理有显著差异,与治疗前比较p<0.05。

综上所述，本发明药物在临床实验中对于治疗哮喘具有确切疗效，与西药常规治疗疗效无显著差异，并且对于咳嗽、咯痰的疗效本发明药物明显优于西药常规治疗。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用于限定本发明的保护范围。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本发明的保护范围内。

Claims

1.一种用于预防和/或治疗哮喘的中药组合物，其包含或由以下组成：6-10重量份的炙麻黄、8-12重量份的杏仁、18-22重量份的桑白皮、14-18重量份的黄芩、8-12重量份的蝉蜕、8-12重量份的僵蚕、18-22重量份的地龙、8-12重量份的白果、8-12重量份的前胡、8-12重量份的射干、18-22重量份的紫菀、8-12重量份的半夏、和4-8重量份的甘草。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其包含或由以下组成：7-9重量份的炙麻黄、9-11重量份的杏仁、19-21重量份的桑白皮、15-17重量份的黄芩、9-11重量份的蝉蜕、9-11重量份的僵蚕、19-21重量份的地龙、9-11重量份的白果、9-11重量份的前胡、9-11重量份的射干、19-21重量份的紫菀、9-11重量份的半夏、和5-7重量份的甘草。

3.根据权利要求2所述的中药组合物，其包含或由以下组成：8重量份的炙麻黄、10重量份的杏仁、20重量份的桑白皮、16重量份的黄芩、10重量份的蝉蜕、10重量份的僵蚕、20重量份的地龙、10重量份的白果、10重量份的前胡、10重量份的射干、20重量份的紫菀、10重量份的半夏、和6重量份的甘草。

4.一种用于预防和/或治疗哮喘的药物组合物，其中制备其有效成分的原料是或包含：6-10重量份的炙麻黄、8-12重量份的杏仁、18-22重量份的桑白皮、14-18重量份的黄芩、8-12重量份的蝉蜕、8-12重量份的僵蚕、18-22重量份的地龙、8-12重量份的白果、8-12重量份的前胡、8-12重量份的射干、18-22重量份的紫菀、8-12重量份的半夏、和4-8重量份的甘草。

5.根据权利要求4所述的药物组合物，其中所述原料是或包含：7-9重量份的炙麻黄、9-11重量份的杏仁、19-21重量份的桑白皮、15-17重量份的黄芩、9-11重量份的蝉蜕、9-11重量份的僵蚕、19-21重量份的地龙、9-11重量份的白果、9-11重量份的前胡、9-11重量份的射干、19-21重量份的紫菀、9-11重量份的半夏、和5-7重量份的甘草。

6.根据权利要求5所述的药物组合物，其中所述原料是或包含：8重量份的炙麻黄、10重量份的杏仁、20重量份的桑白皮、16重量份的黄芩、10重量份的蝉蜕、10重量份的僵蚕、20重量份的地龙、10重量份的白果、10重量份的前胡、10重量份的射干、20重量份的紫菀、10重量份的半夏、和6重量份的甘草。

7.一种制备根据权利要求4-6中任一项所述的药物组合物的方法，包括使所述的原料经历用水煎煮、过滤、浓缩滤液和干燥的步骤。

8.根据权利要求7所述的方法，其包括使所述的原料经历以下处理步骤：

将所述原料用水煎煮两次，每次1到3小时，优选2小时，第一次用8到12倍优选10倍量的水，第二次用6到10倍优选8倍量的水，其中第二次所用水的量少于第一次所用水的量；

过滤；

合并滤液浓缩至相对密度为1.30-1.32的清膏；

干燥；

粉碎成细粉；和

过筛。

9.根据权利要求8所述的方法，其还包括在过筛后的细粉中加入稀释剂，并混合均匀的步骤。

10.一种用于预防和/或治疗哮喘的汤药，其通过用水煎煮根据权利要求1到3任一项的中药组合物并过滤而得到。

11.权利要求1-3中任一项所述的中药组合物或权利要求4-6中任一项所述的药物组合物或权利要求10所述的汤药在制备用于治疗和/或预防哮喘的药物中的用途。