CN103254139A - 新型18f标记4-氨基喹唑啉类衍生物及其制备方法和肿瘤pet显像应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一类新型¹⁸F标记喹唑啉类化合物，其特征是：一端具有¹⁸F取代烷氧基结构；另一端具有6，7-取代的喹唑啉结构，取代基R₁位于喹唑啉母体4-氨基苯环的3位上，为氢、氟、氯、溴、碘、三氟甲基、乙炔基；取代基R₂位于喹唑啉母体4-氨基苯环的4位上，为氢、氟、氯、溴、甲基、甲氧基、3-氟苯氧基、2-吡啶氧基；n＝1-5。结构式如A。实验表明，该类化合物的标记前体易于合成，用“两步法”进行标记，标记率高。而且该类化合物有良好的生物活性，如在肿瘤组织中吸收较高且清除慢，而在正常组织和血液中摄取低、清除快，因而使得该化合物具有较高的肿瘤/背景比值，特别是肿瘤/血液、肿瘤/肉、和肿瘤/脑的比值，有利于PET肿瘤显像，也显示了其作为脑肿瘤显像剂的巨大潜力。

Description

新型18F标记4-氨基喹唑啉类衍生物及其制备方法和肿瘤PET显像应用

技术领域：

本发明涉及一种新型¹⁸F标记4-氨基喹唑啉类衍生物及其化学制备方法和作为正电子发射断层显像(PET)的肿瘤显像剂的应用。

背景技术：

正电子发射断层(Positron emission tomography)PET是一种功能化影像手段，可以从体外无损伤地定量、动态地从分子水平观察药物或代谢物在人体内的生理生化变化，是目前唯一用解剖形态方式进行功能、代谢和受体显像的技术，具有很高的灵敏度和特异性。

在PET显像常用的放射性核素中，¹⁸F有较长的半衰期(t_1/2＝109.8min)，且对组织有较低的辐射剂量和较短的射程，而且其类氢特性不会引起标记分子的空间结构发生明显改变，因此这些优良的特性，使得¹⁸F成为最常用的正电子核素，也适合有机合成较复杂的药物的放射性标记和PET临床应用。

目前临床中应用的¹⁸F标记的肿瘤显像剂主要有[¹⁸F]-FDG，[¹⁸F]-FET和[¹⁸F]-FET等。其中应用最广泛的放射性药物是[¹⁸F]-FDG，已用于肿瘤、冠心病及神经精神疾病的研究和临床诊断，但是它也存在某些方面的缺陷，如在非肿瘤和炎症组织较高的吸收引起假阳性结果，在正常脑组织的高背景吸收降低了其在脑肿瘤显像上的应用。因此，亟需开发出一些新型的¹⁸F标记的显像剂来弥补现有显像剂的缺陷或不足。

喹唑啉类衍生物作为一类重要的杂环化合物，有许多生物活性，如抗炎，抗菌，抗病毒，特别是抗肿瘤活性。被美国FDA批准上市的代表药物，像吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼已经被应用于临床治疗非小细胞肺癌，胰腺癌，乳腺癌等其他癌症。而且近年来，用临床和临床前喹唑啉类药物进行放射性标记和显像已成为研究的热点。但是这些已报道的放射性标记的显像剂有一些缺点，比如水溶性差，肿瘤摄取值不高，体内稳定性较差，使得其进一步的应用受到了很大的限制。

因此，本发明人通过“两步法”对4-氨基喹唑啉类衍生物进行¹⁸F标记，初步研究表明，该类化合物操作方法简便，标记率高、成本低，并且标记化合物具有良好的生物性能，有望成为潜在的PET肿瘤显像剂。

发明内容

第一、本发明提供了一类可用作新型正电子发射断层(PET)显像剂的¹⁸F标记4-氨基喹唑啉类衍生物。

本发明的[¹⁸F]氟标记的4-氨基喹唑啉类化合物，其结构式如下式(A)所示。

其特征在于：一端具有¹⁸F取代烷氧基结构；另一端具有6，7-取代的喹唑啉结构，取代基R₁位于喹唑啉母体4-氨基苯环的3位上，为氢、氟、氯、溴、碘、三氟甲基、乙炔基；取代基R₂位于喹唑啉母体4-氨基苯环的4位上，为氢、氟、氯、溴、甲基、甲氧基、3-氟苯氧基、2-吡啶氧基。

其制备过程包括标记前体化合物和有机化学合成和放射化学合成两部分。具体步骤如下：

一、标记前体化合物(式B)的合成部分

合成路线如下所示：

式C合成步骤如下：

1)3，4-二甲氧基苯甲酸乙酯的合成

将3，4-二甲氧基苯甲酸(10g，0.055mol)、乙醇(100mL)加入250mL反应瓶中，并在冰浴下缓慢滴入浓硫酸(8mL)，升温，加热回流8-10h，TLC跟踪监测，反应完毕，减压旋去乙醇，加入100mL蒸馏水，用K₂CO₃调节pH至中性，乙酸乙酯萃取，收集有机层，旋干溶剂，得淡黄色油状物，产率92％。

2)4，5-二甲氧基-2-硝基苯甲酸乙酯的合成

于0℃以下向加有65％浓硝酸(10mL)的100mL反应瓶中滴加化合物3，4-二甲氧基苯甲酸乙酯(10g，0.048mol)的冰醋酸溶液35mL，缓慢滴加保持反应液的温度在5℃以下，滴加完毕，0～5℃搅拌2h后，于室温搅拌24h，倾入适量冰水中。有大量淡黄色固体析出，抽滤，冰水洗涤，得淡黄色固体，产率89.7％。

3)4，5-二甲氧基-2-氨基苯甲酸乙酯的合成

将4，5-二甲氧基-2-硝基苯甲酸乙酯(10g，0.039mol)加入甲醇80mL中，加入10％Pd/C(1.5g)，通入H₂，室温搅拌24h，过滤，减压旋去大部分溶剂，冷却结晶，抽滤得白色晶状固体，产率85.5％。

4)6，7-二甲氧基-3H喹唑啉-4-酮的合成

将4，5-二甲氧基-2-氨基苯甲酸乙酯(8g，0.035mol)和甲酰胺30mL加入到100mL反应瓶中，通氮气保护，加热至160℃，搅拌反应约10h，冷却至0℃以下，析出固体，抽滤，甲醇洗涤滤饼，红外干燥，得灰白色固体，产率65％。

5)6-羟基-7-甲氧基-3H喹唑啉-4-酮的合成

将6，7-二甲氧基-3H喹唑啉-4-酮(5g，0.024mol)，甲磺酸(30mL)和L-蛋氨酸(5g，0.033mol)加入50mL反应瓶中，缓慢加热升温至120℃，反应6h，反应液中加入适量冰水，然后用40％NaOH调至pH＝7，有大量白色沉淀生成，抽滤，冰水洗涤，得白色固体，产率90％。

6)6-乙酰氧基-7-甲氧基喹唑啉-4-酮的合成

将6-羟基-7-甲氧基-3H喹唑啉-4-酮(4g，0.021mol)，乙酸酐(30mL)，吡啶(5mL)和DMAP(10mg)加入到50mL的反应瓶中，搅拌加热至100℃，反应4h，加入冰水，抽滤，冰水洗涤，得白色粉末状固体，产率60％。

7)6-乙酰氧基-4-氯-7-甲氧基喹唑啉的合成

在100mL反应瓶中加入6-乙酰氧基-7-甲氧基喹唑啉-4-酮(4g，0.017mol)、三氯氧磷(24mL)、甲苯(34mL)，缓慢升温，加热回流，反应6h。反应结束后，旋去溶剂及三氯氧磷，加入适量碎冰，激烈搅拌，氯仿萃取(3×25mL)，合并有机相，用饱和NaHCO₃洗涤(3×25mL)，所得固体用甲苯重结晶得白色固体，产率85.4％。

8)6-乙酰氧基-4-(3，4-二取代苯胺)-7-甲氧基喹唑啉的合成

将6-乙酰氧基-4-氯-7-甲氧基喹唑啉(1g，0.004mol)、3，4-二取代苯胺(1.4g，0.0048mol)和异丙醇(20mL)加入到50mL的反应瓶中，缓慢加热至回流约5h，冷却，抽滤得白色固体，产率80％-90％。

9)4-(3，4-二取代苯胺)-6-羟基-7-甲氧基喹唑啉的合成

在25mL瓶中加入6-乙酰氧基-4-(3，4-二取代苯胺)-7-甲氧基喹唑啉(100mg)、NaOH(2mL)和甲醇2mL，40℃下搅拌，反应完毕后，冷却，用稀HCl调pH至5～6，析出淡黄色固体，抽滤，烘干，产率75％-80％。

10)4-(3，4-二取代苯胺)-6-羟基-7-甲氧基喹唑啉的钾盐的合成

将149mg4-(3，4-二取代苯胺)-6-羟基-7-甲氧基喹唑啉(100mg)，加于1mL H₂O中搅拌，向浑浊液中加入28mg KOH，固体溶解。室温继续搅拌1h后旋去溶剂，得淡黄色固体，干燥保存待用，产率95％-98％。

二、放射化学合成部分(式D、式E)

1)标记中间体：1-¹⁸F，2-对甲苯磺酰氧基乙烷的合成

用含10mg K₂₂₂(冠醚)的1mL乙腈和含3mg K₂CO₃的0.5mL水的混合溶液，淋洗¹⁸F^-被捕获的QMA柱子，收集¹⁸F^-到反应瓶中，测定活度。向反应瓶中不断吹入高纯氮，并向反应瓶中加入无水乙腈1mL，于100℃油浴下共沸除去反应体系中的水，重复此操作三次后，将1，2-双(甲磺酰氧基)乙烷约5mg溶于0.5mL乙腈，迅速转移至反应瓶中，在加热条件下反应，反应温度约为100-115℃，反应时间约为15分钟。

2)4-(3-二取代苯胺)-6-(2-氟乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉的合成

将标记中间体式1-¹⁸F，2-对甲苯磺酰氧基乙烷的乙腈溶液蒸干后，将前体化合物4-(3，4-二取代苯胺)-6-羟基-7-甲氧基喹唑啉的钾盐12mg溶于无水DMSO后加入到反应瓶中，加热反应，反应温度约为100-115℃，反应时间约为15分钟。停止反应，加入大约10mL水将反应体系稀释，再通过Sep-Pak C18柱，将滤液收集到1号瓶中(主要是没有参与反应的¹⁸F^-)，然后再用10ml水洗涤柱子，将滤液收集到2号瓶中(确保将没有参与反应的¹⁸F^-彻底淋洗干净)，用氮气将Sep-Pak C18柱吹干，用2mL乙腈洗涤C18柱，将滤液收集到3号瓶中，得到¹⁸F标记终产物，经HPLC分离纯化。标记物的放化纯度大于99％。整个反应过程(包括HPLC纯化)需要60min。

第二、本发明上述新型¹⁸F标记4-氨基喹唑啉类衍生物作为正电子发射断层(PET)显像剂的应用。

1)本发明中用于进行¹⁸F标记的前体化合物产率较高，原料廉价易得，易于制备。

2)本发明中放射化学合成标记率高，操作简便，目标化合物易于制得。

3)本发明¹⁸F标记的目标化合物具有良好的生物活性，生物数据显示，此化合物具有较高的肿瘤摄取值，以及较高的靶/非靶比值，适合PET肿瘤显像，而且在脑肿瘤显像方面也有一定的优势。

下表为当取代基R₁＝Br，R₂＝H的化合物的生物分布数据(表1)

表1¹⁸F标记的目标化合物(R₁＝Br，R₂＝H)的S180荷瘤鼠模型的生物分布数据(％ID/g±SD，n＝5)

由上面的数据可以看出16b的各种分布特点：肿瘤的放射性积累量在5min以后迅速增加在30min达到一个峰值(4.04)，120min降到3.7，仍有91％的放射性被保留。而其它个组织和器官虽然在5min就达到了较高的值，但是随着时间的延长，放射性积累量迅速降低，从而呈现了较好的靶与非靶的比值。在60min时，肿瘤/肉、肿瘤/血、肿瘤/脑的比值分别为：7.70，2.98，17.42。

肝肾的初始摄取较高分别为9.67％ID/g和10.85％ID/g，但随着时间的延长其摄取量迅速下降，在120min时达到1.78％ID/g和1.07％ID/g的绝对摄取量，显示了较好的代谢速率，也说明此化合物主要经肾脏代谢。

血液的摄取量在注射5min、30min、60min、120min后，分别为4.43％ID/g、1.58％ID/g、1.11％ID/g和0.56％ID/g，清除率达到88％以上，显示了较快的血清除。

由此看来，此化合物具有极为优良的生物活性，具有成为肿瘤PET显像剂的巨大潜力。为了体现这一优势，我们在同一实验条件下对比了目前临床上PET肿瘤显像应用最广泛的¹⁸F-FDG，¹⁸F-FET，整理数据后，我们发现，与目前技术相比，本发明的¹⁸F标记化合物具有创新性，体现在生物性能一些方面的明显的优势，举例如下：

本发明的¹⁸F标记化合物(R₁＝Br，R₂＝H)相对于¹⁸F-FDG和¹⁸F-FET，有更高的肿瘤摄取值，有实验为证，整理实验数据后，见表2：

由表2可以看出，本发明中的化合物在30min，60min，120min时的肿瘤摄取值比在相同时相下¹⁸F-FDG和¹⁸F-FET的肿瘤摄取值都要高。

表2[¹⁸F]-化合物(R₁＝Br，R₂＝H)与¹⁸F-FDG和¹⁸F-FET的肿瘤摄取值的比较

在靶/非靶值方面，本发明中的化合物相对于¹⁸F-FDG和¹⁸F-FET同样具有一定的优势，有实验为证，整理实验数据后，见表3：

表3[¹⁸F]-化合物(R₁＝Br，R₂＝H)与¹⁸F-FDG和¹⁸F-FET的肿瘤/肉摄取比值的比较

从表3可以看出来，从注射后5min，本发明中的化合物肿瘤/肉比值，一直在持续上升，到注射后60min时达到最高值7.70，而此时¹⁸F-FDG和¹⁸F-FET的肿瘤/肉比值仅为2.23和1.23，这种对比显示出，本发明中的化合物在肿瘤/肉比值方面，有绝对的优势，能得到一个清晰的肿瘤PET显像。

另外，在肿瘤/脑比值方面，本发明的18F标记化合物在肿瘤与正常脑组织的区分上，有巨大的优势，有实验为证，整理实验数据后，见表4：

表4[¹⁸F]-化合物(R₁＝Br，R₂＝H)与¹⁸F-FDG和¹⁸F-FET的肿瘤/脑摄取比值的比较

从表4可以看出，在60min，本发明的¹⁸F标记化合物肿瘤/脑摄取比值，高于¹⁸F-FET的5倍多，比¹⁸F-FDG多出10倍以上。考虑到全身分布速率、正常注射剂量的大小及放射性药物按放射性指数衰变规律损失的特性，最佳显像时间应在注射后30-60min，而在此区间，本发明的¹⁸F标记化合物各项T/B比值对¹⁸F-FET和¹⁸F-FDG具有明显优势，这使得本发明的¹⁸F标记化合物进行肿瘤显像特别是脑肿瘤显像时可能得到比¹⁸F-FET更高质量的图像。

综上所述，本发明所提供的¹⁸F标记4-氨基喹唑啉衍生物具有优良的生物活性，与现有技术相比，既具有更优的生物分布区别度，具有作为肿瘤显像剂特别是脑肿瘤显像剂的潜力，又具有制备简单、标记率高的特点，因此有望成为一种新型PET肿瘤显像剂。

具体实施方式：

以下通过具体实施方式可以使本发明得到更清楚的说明，但本发明并不局限于以下实施例。

实施例

按照以下步骤制备的是式A中R₁＝Br，R₂＝H的化合物，包括标记前体(式B中R₁＝Br，R₁＝H的化合物)的有机合成和放射化学合成两个部分。

1)标记前体(式B中R₁＝Br，R₂＝H的化合物)

1.1  3，4-二甲氧基苯甲酸乙酯的合成

将3，4-二甲氧基苯甲酸(10g，0.055mol)、乙醇(100mL)加入250mL反应瓶中，并在冰浴下缓慢滴入浓硫酸(8mL)，升温，加热回流8-10h，TLC跟踪监测，反应完毕，减压旋去乙醇，加入100mL蒸馏水，用K₂CO₃调节pH至中性，乙酸乙酯萃取，收集有机层，旋干溶剂，得淡黄色油状物，产率92％。¹H-NMR(CDCl₃，500MHz)δ(ppm)：7.65-7.67(dd，1H，Ar-H)，7.58-7.59(d，1H，Ar-H)，6.09-6.91(d，1H，Ar-H)，4.32-4.34(q，2H，CH₂)，3.75(s，6H，2OCH₃)，1.36-1.39(m，3H，OCH₂CH₃).

1.2  4，5-二甲氧基-2-硝基苯甲酸乙酯的合成

于0℃以下向加有65％浓硝酸(10mL)的100mL反应瓶中滴加化合物3，4-二甲氧基苯甲酸乙酯(10g，0.048mol)的冰醋酸溶液35nL，缓慢滴加保持反应液的温度在5℃以下，滴加完毕，0～5℃搅拌2h后，于室温搅拌24h，倾入适量冰水中。有大量淡黄色固体析出，抽滤，冰水洗涤，得淡黄色固体，产率89.7％。¹H NMR(CDCl₃，500MHz)δ(ppm)：7.46(s，1H，H6)；7.08(s，1H，H3)；4.39(q，2H，CH₂)；3.98(s，6H，OCH₃)；1.35(t，3H，CH₃)

1.3  4，5-二甲氧基-2-氨基苯甲酸乙酯的合成

将4，5-二甲氧基-2-硝基苯甲酸乙酯(10g，0.039mol)加入甲醇80mL中，加入10％Pd/C(1.5g)，通入H₂，室温搅拌24h，过滤，减压旋去大部分溶剂，冷却结晶，抽滤得白色晶状固体，产率85.5％。¹H NMR(CDCl₃，500MHz)δ(ppm)：7.28(s，1H，H6)；6.14(s，1H，H3)；5.57(br，2H，NH₂)；4.32(q，2H，CH₂)；3.85(s，6H，OCH₃)；1.38(t，3H，CH₃)

1.4  6，7-二甲氧基-3H喹唑啉-4-酮的合成

将4，5-二甲氧基-2-氨基苯甲酸乙酯(8g，0.035mol)和甲酰胺30mL加入到100mL反应瓶中，通氮气保护，加热至160℃，搅拌反应约10h，冷却至0℃以下，析出固体，抽滤，甲醇洗涤滤饼，红外干燥，得灰白色固体，产率65％。¹H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)：10.03(s，1H，NH)；7.99(s，1H，H2)；7.42(s，1H，H5)；7.11(s，1H，H8)；3.88(s，3H，-OCH₃)；3.85(s，3H，OCH₃).

1.5  6-羟基-7-甲氧基-3H喹唑啉-4-酮的合成

将6，7-二甲氧基-3H喹唑啉-4-酮(5g，0.024mol)，甲磺酸(30mL)和L-蛋氨酸(5g，0.033mol)加入50mL反应瓶中，缓慢加热升温至120℃，反应6h，反应液中加入适量冰水，然后用40％NaOH调至pH＝7，有大量白色沉淀生成，抽滤，冰水洗涤，得白色固体，产率90％。¹H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)：9.97(s，1H，NH)；7.99(s，1H，H2)；7.42(s，1H，H5)；7.11(s，1H，H8)；5.88(s，H，OH)；3.85(s，3H，OCH₃).

1.6  6-乙酰氧基-7-甲氧基喹唑啉-4-酮的合成

将6-羟基-7-甲氧基-3H喹唑啉-4-酮(4g，0.021mol)，乙酸酐(30mL)，吡啶(5mL)和DMAP(10mg)加入到50mL的反应瓶中，搅拌加热至100℃，反应4h，加入冰水，抽滤，冰水洗涤，得白色粉末状固体，产率60％。¹H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)：8.07(s，1H，H2)；7.74(s，1H，H5)；7.26(s，1H，H8)；3.90(s，3H，OCH₃)；2.29(s，3H，CH₃CO).¹³C NHR(DMSO，500MHz)δ(ppm)：170.25，166.81，164.23，146.22，144.99，136.65，120.82，114.65，110.12，57.31，21.22.

1.7  6-乙酰氧基-4-氯-7-甲氧基喹唑啉的合成

在100mL反应瓶中加入6-乙酰氧基-7-甲氧基喹唑啉-4-酮(4g，0.017mol)、三氯氧磷(24mL)、甲苯(34mL)，缓慢升温，加热回流，反应6h。反应结束后，旋去溶剂及三氯氧磷，加入适量碎冰，激烈搅拌，氯仿萃取(3×25mL)，合并有机相，用饱和NaHCO₃洗涤(3×25mL)，所得所得固体用甲苯重结晶得白色固体，产率85.4％。¹H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)：8.76(s，1H，H2)；7.86(s，1H，H5)；7.48(s，1H，H8)；3.90(s，3H，OCH₃)；2.34(s，3H，CH₃CO).¹³C NHR(DMSO，500MHz)δ(ppm)：168.39，164.32，158.42，156.76，148.09，139.66，108.82，119.99，114.53，56.66，20.29.

1.8  6-乙酰氧基-4-(3，4-二取代苯胺)-7-甲氧基喹唑啉的合成

将6-乙酰氧基-4-氯-7-甲氧基喹唑啉(1g，0.004mol)、3，4-二取代苯胺(1.4g，0.0048mol)和异丙醇(20mL)加入到50mL的反应瓶中，缓慢加热至回流约5h，冷却，抽滤得白色固体，产率90％。¹H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)：11.16(w，1H，NH)；8.92(s，1H，H_Ar)；8.62(s，1H，H_Ar)；8.04(s，1H，H_Ar)；7.74-7.72(m，1H，H_Ar)；7.49-7.40(m，3H，H_Ar)；3.99(s，3H，OCH₃)；2.27(s，3H，CH₃CO).

1.9  4-(3，4-二取代苯胺)-6-羟基-7-甲氧基喹唑啉的合成

在25mL瓶中加入6-乙酰氧基-4-(3，4-二取代苯胺)-7-甲氧基喹唑啉(100mg)、NaOH(2mL)和甲醇2mL，40℃下搅拌，反应完毕后，冷却，用稀HCl调pH至5～6，析出淡黄色固体，抽滤，烘干，产率75％。m.p.272℃；¹H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)：¹H NMR(400MHz，DMSO)：δ8.43(s，1H，H_Ar)，8.22-7.90(m，2H，H_Ar)，8.02(d，J＝8.3Hz，1H，H_Ar)，7.37-6.86(m，2H，H_Ar)，6.76(d，J＝24.9Hz，2H，H_Ar)，4.03(q，J＝7.1Hz，1H，OH)，3.74(s，3H，CH₃O).GC-MS(m/z)：393(M⁺)

1.10  4-(3，4-二取代苯胺)-6-羟基-7-甲氧基喹唑啉的钾盐的合成

将149mg4-(3，4-二取代苯胺)-6-羟基-7-甲氧基喹唑啉(100mg)，加于1mL H₂O中搅拌，向浑浊液中加入28mg KOH，固体溶解。室温继续搅拌1h后旋去溶剂，得淡黄色固体，干燥保存待用，产率98％。

2)放射化学合成部分

2.1标记中间体：1-¹⁸F，2-对甲苯磺酰氧基乙烷的合成

用含10mg K₂₂₂(冠醚)的1mL乙腈和含3mg K₂CO₃的0.5mL水的混合溶液，淋洗¹⁸F^-被捕获的QMA柱子，收集¹⁸F^-到反应瓶中，测定活度。向反应瓶中不断吹入高纯氮，并向反应瓶中加入无水乙腈1mL，于100℃油浴下共沸除去反应体系中的水，重复此操作三次后，将1，2-双(甲磺酰氧基)乙烷约5mg溶于0.5mL乙腈，迅速转移至反应瓶中，在加热条件下反应，反应温度约为100-115℃，反应时间约为15分钟。

2)4-(3-二取代苯胺)-6-(2-氟乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉的合成

将标记中间体式1-¹⁸F，2-对甲苯磺酰氧基乙烷的乙腈溶液蒸干后，将前体化合物4-(3，4-二取代苯胺)-6-羟基-7-甲氧基喹唑啉的钾盐12mg溶于无水DMSO后加入到反应瓶中，加热反应，反应温度约为100-115℃，反应时间约为15分钟。停止反应，加入大约10mL水将反应体系稀释，再通过Sep-Pak C18柱，将滤液收集到1号瓶中(主要是没有参与反应的¹⁸F^-)，然后再用10ml水洗涤柱子，将滤液收集到2号瓶中(确保将没有参与反应的¹⁸F^-彻底淋洗干净)，用氮气将Sep-Pak C18柱吹干，用2mL乙腈洗涤C18柱，将滤液收集到3号瓶中，得到¹⁸F标记终产物，经HPLC分离纯化。标记物的放化纯度大于99％。整个反应过程(包括HPLC纯化)需要60min。

脂水分配系数测定实施例：

在离心试管中依次加入2ml正辛醇和1.9mL pH＝7.4的磷酸盐缓冲溶液，以及经HPLC分离纯化的4-(3-溴苯胺)-6-(2-氟18乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉的0.1mL水溶液，充分振荡后离心分层5min，分别取有机相和水相各0.1mL于干净试管中，分别测定其放射性计数N，计算分配系数P＝N_有/N_水，重复本操作3次后取平均值，对P取对数logP，即为该¹⁸F标记产物的脂水分配系数。测得此实施例化合物，4-(3-溴苯胺)-6-(2-氟乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉的脂水分配系数logP＝0.89。

异常毒性检查：

按中华人民共和国药典2005年版所述方法进行。将10只正常昆明小鼠(18-20g)尾静脉注入0.5mL(37MBq)4-(3-溴苯胺)-6-(2-氟18乙氧基)-7-甲氧基喹唑啉注射液(相当于数百倍于成人用量)，观察48小时。小鼠生长正常，无死亡及不良反应现象发生。解剖后观察，未见任何器官损伤。异常毒性检查符合放射性药物质量要求。

Claims (9)

1.一种新型¹⁸F标记4-氨基喹唑啉类衍生物，用于PET(正电子发射断层显像)肿瘤显像研究，其特征在于：一端具有¹⁸F取代烷氧基结构；另一端具有6，7-取代的喹唑啉结构，取代基R₁位于喹唑啉母体4-氨基苯环的3位上，为氢、氟、氯、溴、碘、三氟甲基、乙炔基；取代基R₂位于喹唑啉母体4-氨基苯环的4位上，为氢、氟、氯、溴、甲基、甲氧基、3-氟苯氧基、2-吡啶氧基。结构式如A。

2.权利要求1所述的¹⁸F标记4-氨基喹唑啉类衍生物的前体化合物，其特征在于：一端是喹唑啉6位取代的羟基的钾盐结构；另一端具有6，7-取代的喹唑啉结构，取代基R₁位于喹唑啉母体4-氨基苯环的3位上，为氢、氟、氯、溴、碘、三氟甲基、乙炔基；取代基R₂位于喹唑啉母体4-氨基苯环的4位上，为氢、氟、氯、溴、甲基、甲氧基、3-氟苯氧基、2-吡啶氧基。结构式如B。

3.权利要求1所述的化合物的制备方法，其包括1-¹⁸F，2-对甲苯磺酰氧基乙烷作为标记中间体，进行¹⁸F两步标记。结构式如C。

4.权利要求3所述的化合物的制备方法，其特征在于：用含10mg K₂₂₂(冠醚)的1mL乙腈和含3mgK₂CO₃的0.5mL水的混合溶液，淋洗¹⁸F^-被捕获的QMA柱子，收集¹⁸F^-到反应瓶中，测定活度。向反应瓶中不断吹入高纯氮，并向反应瓶中加入无水乙腈1mL，于100℃油浴下共沸除去反应体系中的水，重复此操作三次后，将1，2-双(甲磺酰氧基)乙烷约5mg溶于0.5mL乙腈，迅速转移至反应瓶中，在加热条件下反应，反应温度约为100-115℃，反应时间约为15分钟。

5.权利要求1所述的化合物的制备方法，其特征在于：将权利要求3所述的标记反应中间体式(C)的乙腈溶液蒸干后，将前体化合物式(B)12mg溶于无水DMSO后加入到反应瓶中，加热反应，反应温度约为100-115℃，反应时间约为15分钟。停止反应，加入大约10mL水将反应体系稀释，再通过Sep-PakC18柱，将滤液收集到1号瓶中(主要是没有参与反应的¹⁸F^-)，然后再用10ml水洗涤柱子，将滤液收集到2号瓶中(确保将没有参与反应的¹⁸F^-彻底淋洗干净)，用氮气将Sep-Pak C18柱吹干，用2mL乙腈洗涤C18柱，将滤液收集到3号瓶中，得到¹⁸F标记终产物，经HPLC分离纯化。标记物的放化纯度大于99％。

6.权力要求4所述的¹⁸F标记方法，其特征在于：取用15mg K₂₂₂和3mg K₂CO₃的乙腈1mL和水0.5mL的混合液作为洗脱液获得放射性¹⁸F离子，并用无水乙腈共沸除水。

7.权力要求4和5所述的“两步法”¹⁸F标记，：使用乙腈或DMSO作为反应溶剂，K₂₂₂为相转移催化剂。

8.权力要求4和5所述的“两步法”¹⁸F标记，其特征在于：标记反应最佳温度100℃-115℃，最佳时间为15-20分钟。

9.权利要求1所述的新型¹⁸F标记喹唑啉类衍生物作为正电子发射断层显像(PET)肿瘤显像剂的应用。