CN103249731A - 丙型肝炎病毒抑制剂 - Google Patents

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CN103249731A CN2011800457257A CN201180045725A CN103249731A CN 103249731 A CN103249731 A CN 103249731A CN 2011800457257 A CN2011800457257 A CN 2011800457257A CN 201180045725 A CN201180045725 A CN 201180045725A CN 103249731 A CN103249731 A CN 103249731A
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波图卡努里·斯里尼瓦苏
沙马亚门图拉·V·S·A·K·古普塔
M.贝勒曼
J.A.本德
O.D.罗佩斯
Q.陈
R.A.拉姆普拉
N.A.米恩维尔
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Abstract

本发明涉及治疗丙型肝炎病毒(HCV)感染的化合物、组合物和方法。本发明还公开了含有这些化合物的医药组合物和使用这些化合物治疗HCV感染的方法。

Description

丙型肝炎病毒抑制剂
相关申请的相互参照
本申请案主张2010年8月12日申请的美国临时申请案第61/373,070号的权利。
本发明(disclosure)大体来说涉及抗病毒化合物，且更具体地说涉及可抑制由丙型肝炎病毒(HCV)编码的NS5A蛋白的功能的化合物，包含这些化合物的组合物，和抑制该NS5A蛋白的功能的方法。
HCV为一种主要的人类病原体，全世界估计有1.7亿人受感染，约为1型人类免疫缺陷病毒感染人数的五倍。这种感染HCV的个体中有相当一部分发展成严重进行性肝病，包括肝硬化和肝细胞癌。
当前对于HCV的护理标准，其使用聚乙二醇化干扰素与病毒唑（ribavirin）的组合，在达成持续病毒反应方面的成功率并非最佳且引起许多副作用。因此，明显且长期需要开发有效疗法来解决此未满足的医学需求。
HCV为一种正链RNA病毒。基于推导的氨基酸序列的比较和5'未转译区的广泛相似性，HCV已归类为黄病毒家族(Flaviviridae family)中的独立属。黄病毒家族的所有成员均具有包膜病毒粒子，这些粒子含有通过单一、不间断的、开放阅读框架的转译来编码所有已知病毒特异性蛋白质的正链RNA基因组。
由于所编码的缺乏校对能力的RNA依赖性RNA聚合酶的出错率高，故在整个HCV基因组中，在核苷酸和所编码的氨基酸序列中发现相当大的异质性。已表征至少6种主要基因型，且已描述超过50种子型并遍布全世界。HCV的基因异质性的临床显著性已显现在单一疗法治疗期间出现突变的倾向，因此需要供使用的其它治疗选择。基因型对发病机制和疗法的可能调节作用仍然难懂。
单链HCV RNA基因组的长度为约9500个核苷酸且具有编码含约3000个氨基酸的单一大型聚合蛋白质的单一开放阅读框架(ORF)。在受感染细胞中，此聚合蛋白质由细胞和病毒蛋白酶在多个位点裂解以产生结构和非结构(NS)蛋白质。在HCV的情况下，成熟非结构蛋白质(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)的产生由两种病毒蛋白酶实现。相信第一种为金属蛋白酶且在NS2-NS3接合处裂解；第二种为含在NS3的N端区域中的丝胺酸蛋白酶(本文中也称为NS3蛋白酶)且介导NS3下游的所有后续裂解，在NS3-NS4A裂解位点两者为顺式，而在其余NS4A-NS4B、NS4B-NS5A、NS5A-NS5B位点为反式。NS4A蛋白似乎通过充当NS3蛋白酶的辅因子和辅助NS3和其它病毒复制酶组分的膜定位两种方式来发挥多种功能。NS3-NS4A复合物的形成为适当蛋白酶活性所必需的，其使得裂解事件的蛋白水解效率增加。NS3蛋白也展现核苷三磷酸酶和RNA解螺旋酶活性。NS5B(本文中也称为HCV聚合酶)为与复制酶复合物中HCV与其它HCV蛋白(包括NS5A)的复制有关的RNA依赖性RNA聚合酶。
需要适用于治疗感染HCV的患者的化合物，其选择性抑制HCV病毒复制。具体地说，需要有效抑制NS5A蛋白的功能的化合物。HCV NS5A蛋白例如描述在以下参考文献中：S.L. Tan,等人，Virology, 284:1-12 (2001)； K.-J. Park,等人，J. Biol. Chem., 30711-30718 (2003)；T.L. Tellinghuisen,等人，Nature, 435, 374 (2005)； R.A. Love,等人，J. Virol., 83, 4395 (2009)； N. Appel,等人，J. Biol. Chem., 281, 9833 (2006)； L., J. Huang, Biol. Chem., 280, 36417 (2005)；C. Rice,等人，WO2006093867。
在第一方面中，本发明提供式(I)化合物
Figure 2011800457257100002DEST_PATH_IMAGE002
或其医药学上可接受的盐，其中
各D独立地选自O和NH；
L为一键或苯基；
Q选自苯基、含有1、2或3个氮原子的6员杂芳环，和
Figure 2011800457257100002DEST_PATH_IMAGE004
X选自O、S、CH2、CH2CH2、(NR1)CH2和OCH2；
Y选自O、S、CH2、CH2CH2、(NR2)CH2和OCH2；
Z1和Z2各独立地选自CH和N；
Z3和Z4各独立地选自C和N；
限制条件为Z1、Z2、Z3和Z4中不超过两者为N；
A为任选含有1或2个其它双键且任选含有1、2或3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4至6员环，其中该环任选被烷基取代；
R1和R2独立地选自氢、烷基、卤基和羟基；其中烷基可任选与环上的另一碳原子形成稠合的3至6员环或桥联的4或5员环；或可任选与其所连接的碳形成螺环状3至6员环；
限制条件为当X为(NR1)CH2时，R1为氢或烷基；且
限制条件为当Y为(NR2)CH2时，R2为氢或烷基；
R3选自氢和-C(O)R5；
R4选自氢和-C(O)R6；
R5和R6独立地选自烷氧基、烷基、芳基烷氧基、芳基烷基、环烷基、环烷基氧基、杂环基、杂环基烷基、(NRcRd)烯基和(NRcRd)烷基；
R7和R8独立地选自氢、烷基、氰基和卤基；
Rc和Rd独立地选自氢、烯氧基羰基、烷氧基烷基羰基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、烷基磺酰基、芳基、芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳氧基羰基、芳基磺酰基、环烷基、环烷基氧基羰基、环烷基磺酰基、甲酰基、卤烷氧基羰基、杂环基、杂环基烷氧基羰基、杂环基烷基、杂环基烷基羰基、杂环基羰基、杂环基氧基羰基、羟烷基羰基、(NReRf)烷基、(NReRf)烷基羰基、(NReRf)羰基、(NReRf)磺酰基、-C(NCN)OR'和-C(NCN)NRxRy，其中R'选自烷基和未取代的苯基，且其中芳基烷基、芳基烷基羰基、杂环基烷基和杂环基烷基羰基的烷基部分进一步任选被1个-NReRf基团取代；且其中芳基；芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳氧基羰基和芳基磺酰基的芳基部分；杂环基；和杂环基烷氧基羰基、杂环基烷基、杂环基烷基羰基、杂环基羰基和杂环基氧基羰基的杂环基部分进一步任选被1、2或3个独立地选自烷氧基、烷基、氰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基和硝基的取代基取代；
Re和Rf独立地选自氢、烷基、未取代的芳基、未取代的芳基烷基、未取代的环烷基、未取代的(环烷基)烷基、未取代的杂环基、未取代的杂环基烷基、(NRxRy)烷基和(NRxRy)羰基；且
Rx和Ry独立地选自氢和烷基。
在第一方面的第一实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其医药学上可接受的盐，其中Q为苯基。
在第一方面的第二实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其医药学上可接受的盐，其中X和Y各为CH2。
在第一方面的第三实施方案中，本发明提供式(I)化合物或其医药学上可接受的盐，其中R7和R8各为氢。
在第二方面中，本发明提供式(II)化合物
Figure 2011800457257100002DEST_PATH_IMAGE006
或其医药学上可接受的盐，其中
各D独立地选自O和NH；
L为一键或苯基；
Z1和Z2各独立地选自CH和N；
Z3和Z4各独立地选自C和N；
限制条件为Z1、Z2、Z3和Z4中不超过两者为N；
A为任选含有1或2个其它双键且任选含有1、2或3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4至6员环；
R1和R2独立地选自氢、烷基、卤基和羟基；其中烷基可任选与环上的另一碳原子形成稠合的3至6员环或桥联的4或5员环；或可任选与其所连接的碳形成螺环状3至6员环；
R3选自氢和-C(O)R5；
R4选自氢和-C(O)R6；
R5和R6独立地选自烷氧基、烷基、芳基烷氧基、芳基烷基、环烷基、环烷基氧基、杂环基、杂环基烷基、(NRcRd)烯基和(NRcRd)烷基；
Rc和Rd独立地选自氢、烯氧基羰基、烷氧基烷基羰基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、烷基磺酰基、芳基、芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳氧基羰基、芳基磺酰基、环烷基、环烷基氧基羰基、环烷基磺酰基、甲酰基、卤烷氧基羰基、杂环基、杂环基烷氧基羰基、杂环基烷基、杂环基烷基羰基、杂环基羰基、杂环基氧基羰基、羟烷基羰基、(NReRf)烷基、(NReRf)烷基羰基、(NReRf)羰基、(NReRf)磺酰基、-C(NCN)OR'和-C(NCN)NRxRy，其中R'选自烷基和未取代的苯基，且其中芳基烷基、芳基烷基羰基、杂环基烷基和杂环基烷基羰基的烷基部分进一步任选被1个-NReRf基团取代；且其中芳基，芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳氧基羰基和芳基磺酰基的芳基部分；杂环基，和杂环基烷氧基羰基、杂环基烷基、杂环基烷基羰基、杂环基羰基和杂环基氧基羰基的杂环基部分进一步任选被1、2或3个独立地选自烷氧基、烷基、氰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基和硝基的取代基取代；
Re和Rf独立地选自氢、烷基、未取代的芳基、未取代的芳基烷基、未取代的环烷基、未取代的(环烷基)烷基、未取代的杂环基、未取代的杂环基烷基、(NRxRy)烷基和(NRxRy)羰基；且
Rx和Ry独立地选自氢和烷基。
在第三方面中，本发明提供式(III)化合物
或其医药学上可接受的盐，其中
各D独立地选自O和NH；
Q选自苯基、含有1、2或3个氮原子的6员杂芳环，和
Figure 2011800457257100002DEST_PATH_IMAGE010
X选自O、S、CH2、CH2CH2、(NR1)CH2和OCH2；
Y选自O、S、CH2、CH2CH2、(NR2)CH2和OCH2；
Z1和Z2各独立地选自CH和N；
Z3和Z4各独立地选自C和N；
限制条件为Z1、Z2、Z3和Z4中不超过两者为N；
A为任选含有1或2个其它双键且任选含有1、2或3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4至6员环；
R1和R2独立地选自氢、烷基、卤基和羟基；其中烷基可任选与环上的另一碳原子形成稠合的3至6员环或桥联的4或5员环；或可任选与其所连接的碳形成螺环状3至6员环；
限制条件为当X为(NR1)CH2时，R1为氢或烷基；且
限制条件为当Y为(NR2)CH2时，R2为氢或烷基；
R3选自氢和-C(O)R5；
R4选自氢和-C(O)R6；
R5和R6独立地选自烷氧基、烷基、芳基烷氧基、芳基烷基、环烷基、环烷基氧基、杂环基、杂环基烷基、(NRcRd)烯基和(NRcRd)烷基；
R7和R8独立地选自氢、烷基、氰基和卤基；
Rc和Rd独立地选自氢、烯氧基羰基、烷氧基烷基羰基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、烷基磺酰基、芳基、芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳氧基羰基、芳基磺酰基、环烷基、环烷基氧基羰基、环烷基磺酰基、甲酰基、卤烷氧基羰基、杂环基、杂环基烷氧基羰基、杂环基烷基、杂环基烷基羰基、杂环基羰基、杂环基氧基羰基、羟烷基羰基、(NReRf)烷基、(NReRf)烷基羰基、(NReRf)羰基、(NReRf)磺酰基、-C(NCN)OR'和-C(NCN)NRxRy，其中R'选自烷基和未取代的苯基，且其中芳基烷基、芳基烷基羰基、杂环基烷基和杂环基烷基羰基的烷基部分进一步任选被1个-NReRf基团取代；且其中芳基，芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳氧基羰基和芳基磺酰基的芳基部分；杂环基，和杂环基烷氧基羰基、杂环基烷基、杂环基烷基羰基、杂环基羰基和杂环基氧基羰基的杂环基部分进一步任选被1、2或3个独立地选自烷氧基、烷基、氰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基和硝基的取代基取代；
Re和Rf独立地选自氢、烷基、未取代的芳基、未取代的芳基烷基、未取代的环烷基、未取代的(环烷基)烷基、未取代的杂环基、未取代的杂环基烷基、(NRxRy)烷基和(NRxRy)羰基；且
Rx和Ry独立地选自氢和烷基。
在第四方面中，本发明提供一种包含式(I)化合物或其医药学上可接受的盐和医药学上可接受的载体的组合物。在第四方面的第一实施方案中，该组合物进一步包含一或两种具有抗HCV活性的其它化合物。在第四方面的第二实施方案中，至少一种其它化合物为干扰素或病毒唑。在第三实施方案中，该干扰素选自干扰素α 2B、聚乙二醇化干扰素α、复合干扰素、干扰素α 2A和类淋巴母细胞干扰素τ。
在第四方面的第四实施方案中，本发明提供一种包含式(I)化合物或其医药学上可接受的盐、医药学上可接受的载体和一或两种具有抗HCV活性的其它化合物的组合物，其中至少一种其它化合物选自介白素2、介白素6、介白素12、增强1型辅助T细胞反应发生的化合物、干扰RNA、反义RNA、咪奎莫特(Imiqimod)、病毒唑、肌苷5'-单磷酸去氢酶抑制剂、金刚胺(amantadine)和金刚乙胺(rimantadine)。
在第四方面的第五实施方案中，本发明提供一种包含式(I)化合物或其医药学上可接受的盐、医药学上可接受的载体和一或两种具有抗HCV活性的其它化合物的组合物，其中至少一种其它化合物有效抑制选自HCV金属蛋白酶、HCV丝胺酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解螺旋酶、HCV NS4B蛋白、HCV进入、HCV组装、HCV释出(egress)、HCV NS5A蛋白和IMPDH的标靶的功能以治疗HCV感染。
在第五方面中，本发明提供一种治疗患者的HCV感染的方法，其包含向该患者给予治疗有效量的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐。在第五方面的第一实施方案中，该方法进一步包含在该式(I)化合物或其医药学上可接受的盐之前、之后或同时给予一或两种具有抗HCV活性的其它化合物。在第五方面的第二实施方案中，至少一种其它化合物为干扰素或病毒唑。在第五方面的第三实施方案中，该干扰素选自干扰素α 2B、聚乙二醇化干扰素α、复合干扰素、干扰素α 2A和类淋巴母细胞干扰素τ。
在第五方面的第四实施方案中，本发明提供一种治疗患者的HCV感染的方法，其包含向该患者给予治疗有效量的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐和在该式(I)化合物或其医药学上可接受的盐之前、之后或同时给予一或两种具有抗HCV活性的其它化合物，其中至少一种其它化合物选自介白素2、介白素6、介白素12、增强1型辅助T细胞反应发生的化合物、干扰RNA、反义RNA、咪奎莫特、病毒唑、肌苷5'-单磷酸去氢酶抑制剂、金刚胺和金刚乙胺。
在第五方面的第五实施方案中，本发明提供一种治疗患者的HCV感染的方法，其包含向该患者给予治疗有效量的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐和在该式(I)化合物或其医药学上可接受的盐之前、之后或同时给予一或两种具有抗HCV活性的其它化合物，其中至少一种其它化合物有效抑制选自HCV金属蛋白酶、HCV丝胺酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解螺旋酶、HCV NS4B蛋白、HCV进入、HCV组装、HCV释出、HCV NS5A蛋白和IMPDH的标靶的功能以治疗HCV感染。
本发明的其它实施方案可包含两个或两个以上本文所公开的实施方案和/或方面的适当组合。
本发明的其它实施方案和方面将根据以下提供的描述而明显。
本发明化合物也以互变异构体形式存在；因此本发明也涵盖所有互变异构形式。
本文中对本发明的描述应依照化学键结的定律和原则加以解释。
应理解，本发明所涵盖的化合物为适当稳定以用作药剂的化合物。
预期分子中特定位置处任何取代基或变量(例如Rc和Rd)的定义独立于其在该分子中其它位置处的定义。
说明书中所引用的所有专利、专利申请和参考文献均以全文引用的方式并入本文中。在出现矛盾的情况下，将以本发明(包括定义)为准。
如本说明书中所使用，以下术语具有所指示的含义：
除非本文另外明确指示，否则如本文中所使用，单数形式“一”和“该”包括复数个指示物。
除非另有规定，否则本发明的所有芳基、环烷基和杂环基均如其每一个分别的定义中所述可被取代。例如，芳基烷基的芳基部分可如术语“芳基”的定义中所述被取代。
如本文中所用的术语“烷氧基”是指通过氧原子连接至母分子部分的烷基。
如本文中所用的术语“烷基”是指衍生自含有1至6个碳原子的直链或分支链饱和烃的基团。在本发明化合物中，当分别地X和/或Y为CH2且R1和/或R2为烷基时，烷基可任选与相邻碳原子形成稠合3至6员环以提供以下所示的结构中的一种：
Figure 2011800457257100002DEST_PATH_IMAGE012
；
其中z为1、2、3或4；或者，烷基可形成4或5员桥联的环以提供以下所示的结构中的一种：
Figure 2011800457257100002DEST_PATH_IMAGE014
或者，烷基可与其所连接的碳原子形成螺环状3至6员环以提供以下所示的结构中的一种：
Figure 2011800457257100002DEST_PATH_IMAGE016
；
其中z为1、2、3或4。
如本文中所用的术语“C2炔基”是指-=-。
如本文中所用的术语“芳基”是指苯基，或一个或两个环为苯基的双环稠环系统。双环稠环系统由苯基与4至6员芳族或非芳族碳环稠合组成。本发明的芳基可通过基团中的任何可取代碳原子连接至母分子部分。芳基的代表性实施例包括(但不限于)二氢茚基、茚基、萘基、苯基和四氢萘基。本发明的芳基任选被1、2、3、4或5个独立地选自烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、第二芳基、芳基烷氧基、芳基烷基、芳基羰基、氰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基、杂环基、杂环基烷基、杂环基羰基、羟基、羟烷基、硝基、-NRxRy、(NRxRy)烷基、氧代和-P(O)OR2的取代基取代，其中各R独立地选自氢和烷基；且其中芳基烷基和杂环基烷基的烷基部分未取代且其中第二芳基、芳基烷基的芳基部分、芳基羰基的芳基部分、杂环基以及杂环基烷基和杂环基羰基的杂环基部分进一步任选被1、2或3个独立地选自烷氧基、烷基、氰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基和硝基的取代基取代。
如本文中所用的术语“芳基烷基”是指被1、2或3个芳基取代的烷基。芳基烷基的烷基部分进一步任选被1或2个独立地选自烷氧基、烷基羰氧基、卤基、卤烷氧基、卤烷基、杂环基、羟基和-NRcRd的其它基团取代，其中杂环基进一步任选被1或2个独立地选自烷氧基、烷基、未取代的芳基、未取代的芳基烷氧基、未取代的芳基烷氧基羰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基、羟基、-NRxRy和氧代的取代基取代。
如本文中所用的术语“环烷基”是指具有3至14个碳原子且不含杂原子的饱和单环或双环烃环系统。环烷基的代表性实施例包括(但不限于)环丙基、环丁基、环戊基、环己基、双环[3.1.1]庚基和金刚烷基。本发明的环烷基任选被1、2、3、4或5个独立地选自烷氧基、烷基、芳基、氰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基、杂环基、羟基、羟烷基、硝基和-NRxRy的取代基取代，其中芳基和杂环基进一步任选被1、2或3个独立地选自烷氧基、烷基、氰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基、羟基、硝基和氧代的取代基取代。
如本文中所用的术语“杂环基”是指含有1、2、3或4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4、5、6或7员环。4员环不含双键，5员环具有0至2个双键且6和7员环具有0至3个双键。术语“杂环基”也包括其中杂环基环与另一单环杂环基或3至7员芳族或非芳族碳环稠合的双环基；其中杂环基环被3至7员螺环取代的双环基；以及桥联的双环基，例如3-氧杂双环[3.2.1]辛基、7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基、2-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基和2-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基。本发明的杂环基可通过基团中的任何碳原子或氮原子连接至母分子部分。杂环基的实施例包括(但不限于)苯并噻吩基、呋喃基、咪唑基、吲哚啉基、吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、吗啉基、噁唑基、哌嗪基、哌啶基、吡唑基、吡啶基、吡咯烷基、吡咯并吡啶基、吡咯基、喹啉基、四氢吡喃基、噻唑基、噻吩基和硫吗啉基。本发明的杂环基任选被1、2、3、4或5个独立地选自烯基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、芳基、芳基烷基、芳基羰基、氰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基、第二杂环基、杂环基烷基、杂环基羰基、羟基、羟烷基、硝基、-NRxRy、(NRxRy)烷基和氧代的取代基取代，其中芳基烷基和杂环基烷基的烷基部分未取代且其中芳基、芳基烷基的芳基部分、芳基羰基的芳基部分、第二杂环基以及杂环基烷基和杂环基羰基的杂环基部分进一步任选被1、2或3个独立地选自烷氧基、烷基、氰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基和硝基的取代基取代。
如本文中所用的术语“杂环基烷基”是指被1、2或3个杂环基取代的烷基。杂环基烷基的烷基部分进一步任选被1或2个独立地选自烷氧基、烷基羰氧基、芳基、卤基、卤烷氧基、卤烷基、羟基和-NRcRd的其它基团取代，其中芳基进一步任选被1或2个独立地选自烷氧基、烷基、未取代的芳基、未取代的芳基烷氧基、未取代的芳基烷氧基羰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基、羟基和-NRxRy的取代基取代。
如本文中所用的术语“-NRcRd”是指通过氮原子连接至母分子部分的两个基团Rc和Rd。Rc和Rd独立地选自氢、烯氧基羰基、烷氧基烷基羰基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、烷基磺酰基、芳基、芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳氧基羰基、芳基磺酰基、环烷基、环烷基氧基羰基、环烷基磺酰基、甲酰基、卤烷氧基羰基、杂环基、杂环基烷氧基羰基、杂环基烷基、杂环基烷基羰基、杂环基羰基、杂环基氧基羰基、羟烷基羰基、(NReRf)烷基、(NReRf)烷基羰基、(NReRf)羰基、(NReRf)磺酰基、-C(NCN)OR'和-C(NCN)NRxRy，其中R'选自烷基和未取代的苯基，且其中芳基烷基、芳基烷基羰基、杂环基烷基和杂环基烷基羰基的烷基部分进一步任选被1个-NReRf基团取代；且其中芳基，芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳氧基羰基和芳基磺酰基的芳基部分；杂环基，和杂环基烷氧基羰基、杂环基烷基、杂环基烷基羰基、杂环基羰基和杂环基氧基羰基的杂环基部分进一步任选被1、2或3个独立地选自烷氧基、烷基、氰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基和硝基的取代基取代。
如本文中所用的术语“(NRcRd)烯基”是指
Figure 2011800457257100002DEST_PATH_IMAGE018
其中Rc和Rd如本文所定义且各Rq独立地为氢或C1-3烷基。
如本文中所用的术语“(NRcRd)烷基”是指被1或2个-NRcRd基团取代的烷基。(NRcRd)烷基的烷基部分进一步任选被1或2个选自烷氧基、烷氧基烷基羰基、烷氧基羰基、烷基硫基、C2炔基、芳基烷氧基羰基、羧基、氰基、环烷基、卤基、杂环基、杂环基羰基、羟基和(NReRf)羰基的其它基团取代；其中杂环基进一步任选被1、2、3、4或5个独立地选自烷氧基、烷基、氰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基和硝基的取代基取代。
如本文中所用的术语“-NReRf”是指通过氮原子连接至母分子部分的两个基团Re和Rf。Re和Rf独立地选自氢、烷基、未取代的芳基、未取代的芳基烷基、未取代的环烷基、未取代的(环烷基)烷基、未取代的杂环基、未取代的杂环基烷基、(NRxRy)烷基和(NRxRy)羰基。
如本文中所用的术语“-NRxRy”是指通过氮原子连接至母分子部分的两个基团Rx和Ry。Rx和Ry独立地选自氢、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、未取代的芳基、未取代的芳基烷氧基羰基、未取代的芳基烷基、未取代的环烷基、未取代的杂环基和(NRx'Ry')羰基，其中Rx'和Ry'独立地选自氢和烷基。
本发明化合物中存在不对称中心。根据手性碳原子周围取代基的构型，这些中心由符号“R”或“S”表示。应理解，本发明涵盖具有抑制NS5A的能力的所有立体化学异构形式或其混合物。化合物的个别立体异构体可自含有对掌中心的市售起始物质以合成方法制备，或通过制备对映异构产物的混合物接着进行分离来制备，例如转化为非对映异构体的混合物，接着进行分离或再结晶，层析技术，或在手性层析柱上直接分离对映异构体。具有特定立体化学的起始化合物可购得或可通过本领域已知的技术制备和解析。
本发明的某些化合物也可以可分离的不同稳定构形形式存在。由于围绕不对称单键的限制性旋转(例如由于位阻或环应力)所产生的扭转不对称性，可允许分离不同构象异构体。本发明包括这些化合物的每一构象异构体和其混合物。
术语“本发明化合物”和等效表述意为涵盖式(I)化合物和其医药学上可接受的对映异构体、非对映异构体和盐。类似地，当情况允许时，提及中间体意为涵盖其盐。
本发明意在包括本发明化合物中存在的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序数但不同质量数的原子。作为一般实施例且不加以限制，氢的同位素包括氘和氚。碳的同位素包括13C和14C。用同位素标记的本发明化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与本文所述类似的方法，使用合适的用同位素标记的试剂替代另外使用的未经标记的试剂来制备。这些化合物可具有多种潜在用途，例如用作测定生物活性的标准物和试剂。在稳定同位素情况下，这些化合物可具有有利地改良生物学、药理学或药物动力学性质的潜力。
本发明化合物可呈医药学上可接受的盐形式存在。如本文中所用的术语“医药学上可接受的盐”表示本发明化合物的盐或两性离子形式，其为水或油溶性或分散性，其在正确医学判断范畴内适用于与患者组织接触而无过量毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症，与合理的益处/风险比相匹配，且有效达成其预期用途。这些盐可在化合物的最后分离和纯化期间制备或分别由适合的氮原子与适合的酸反应制备。代表性酸加成盐包括乙酸盐、己二酸盐、褐藻酸盐、柠檬酸盐、天冬胺酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸酯、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、二氢溴化物、二氢氯化物、二氢碘化物、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、甲酸盐、反丁烯二酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙烷磺酸盐、乳酸盐、顺丁烯二酸盐、均三甲苯磺酸盐、甲烷磺酸盐、伸萘基磺酸盐、烟碱酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、丁二酸盐、酒石酸盐、三氯乙酸盐、三氟乙酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。可用于形成医药学上可接受的加成盐的酸的实施例包括无机酸，例如盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸；和有机酸，例如草酸、顺丁烯二酸、丁二酸和柠檬酸。
碱加成盐可在化合物的最后分离和纯化期间由羧基与适合碱(例如金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐)或与氨或有机一级、二级或叔胺反应来制备。医药学上可接受盐的阳离子包括锂、钠、钾、钙、镁和铝，以及无毒四级胺阳离子，例如铵、四甲铵、四乙铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺、乙胺、三丁胺、吡啶、N,N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基吗啉、二环己基胺、普鲁卡因(procaine)、二苯甲基胺、N,N-二苯甲基苯乙基胺和N,N'-二苯甲基乙二胺。适用于形成碱加成盐的其它代表性有机胺包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶和哌嗪。
当可以给予治疗有效量的式(I)化合物和其医药学上可接受的盐作为化学原料、以用于疗法中时，可以医药组合物形式提供活性成分。因此，本发明进一步提供医药组合物，其包括治疗有效量的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐，和一或多种医药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。如本文中所用的术语“治疗有效量”是指各活性组分足以展示有意义的患者效益(例如病毒负荷降低)时的总量。当应用于单独给予的个别活性成分时，该术语是指该单独的成分。当应用于组合时，该术语是指产生治疗效果的活性成分组合量，无论以组合形式、连续或同时给予。式(I)化合物和其医药学上可接受的盐如上所述。载体、稀释剂或赋形剂必须为可接受的，意即与制剂的其它成分兼容且对其接受者无害。根据本发明的另一方面，也提供一种制备医药制剂的方法，其包括将式(I)化合物或其医药学上可接受的盐与一或多种医药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂混合。如本文中所使用的术语“医药学上可接受”是指那种化合物、物质、组合物和/或剂型，其在正确医学判断范畴内适于与患者组织接触中使用、而无过量毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症且与合理的益处/风险比相匹配，且有效达成其预期用途。
医药制剂可呈每单位剂量含有预定量的活性成分的单位剂型提供。每日每千克体重约0.01毫克至约250毫克(“mg/kg”)之间、较优选每日每千克体重约0.05 mg至约100 mg之间的本发明化合物的剂量水平为用于预防和治疗HCV介导疾病的单一疗法中的典型剂量。本发明的医药组合物通常将给予每日约1至约5次，或者以连续输注形式给予。该给药可用作长期(chronic)或短期（acute）疗法。可与载体物质组合产生单一剂型的活性成分的量将根据所治疗的病状、病状的严重程度、给药时间、给药途径、所用化合物的排泄速率、治疗持续时间和患者的年龄、性别、体重和状况而变化。较优选单位剂量制剂为含有如上文所述的日剂量或亚剂量（sub-dose）或其适当部分的活性成分的那种制剂。可从实质上小于化合物最优选剂量的小剂量开始治疗。随后，通过小幅增量来增加剂量直至达到这些情形下的最佳效果。一般来说，化合物最理想地以一般将得到抗病毒有效结果而不引起任何伤害或损伤副作用的浓度给予。
当本发明的组合物包含本发明化合物与一或多种其它治疗剂或预防剂的组合时，该化合物与该其它药剂通常都以单一疗法方案中通常所给予剂量的约10%至150%且更优选约10%至80%的剂量存在。
医药制剂可配合通过任何适当途径来给予，例如通过经口(包括颊内或舌下)、经直肠、经鼻、局部(包括颊内、舌下或经皮)、经阴道或非经肠(包括皮下、皮内、肌肉内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、病灶内、静脉内或皮内注射或输注)途径。这些制剂可通过药剂学技术中已知的任何方法来制备，例如通过使活性成分与载体或赋形剂缔合来制备。经口给药或通过注射给药为较优选。
适用于经口给药的医药制剂可以个别单位形式提供，例如胶囊或片剂；散剂（powder）或颗粒；在水性或非水性液体中的溶液或悬浮液；可食用泡沫或泡沫状物；或水包油液体乳液或油包水乳液。
例如，对于以片剂或胶囊形式经口给药来说，活性药物组分可与口服、无毒性医药学上可接受的惰性载体(例如乙醇、甘油、水和其类似物)组合。散剂通过将化合物碾碎至适合的精细尺寸且与同样经碾碎的医药载体(例如可食用碳水化合物，例如淀粉或甘露糖醇)混合来制备。也可存在调味剂、防腐剂、分散剂和着色剂。
胶囊通过制备如上文所述的粉末混合物且填充已形成的明胶壳来制备。在填充操作之前，可将例如胶状二氧化硅、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或固体聚乙二醇的助流剂和润滑剂加入到粉末混合物中。也可加入例如琼脂、碳酸钙或碳酸钠的崩解剂或增溶剂以改良摄取胶囊时该药剂的可利用性。
此外，需要或必需时，也可将适合的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂并入混合物中。适合的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖(例如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味剂、天然和合成胶(例如阿拉伯胶、黄蓍胶或海藻酸钠)、羧甲基纤维素、聚乙二醇和其类似物。这种剂型中所用的润滑剂包括油酸钠、氯化钠和其类似物。崩解剂包括(但不限于)淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶 和其类似物。片剂是例如通过制备粉末混合物，造粒或成块(slugging)，加入润滑剂和崩解剂，和压成片剂配制。粉末混合物是通过将适当碾碎的化合物与如上文所述的稀释剂或基质且任选与粘合剂(例如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶或聚乙烯吡烷咯酮)、溶解延迟剂(例如石蜡)、再吸收加速剂(例如四级盐)和/或吸收剂(例如膨润土、高岭土或磷酸二钙)混合制备。粉末混合物可用粘合剂(例如糖浆、淀粉糊、阿卡迪亚粘浆(acadia mucilage)、或纤维素或聚合物质的溶液)润湿和迫使通过筛网造粒。作为造粒的替代法，可使粉末混合物通过压片机，结果是成形不完美的坯块碎裂成颗粒。可通过加入硬脂酸、硬脂酸盐、滑石或矿物油润滑颗粒以防止粘附在形成片剂的模具上。接着将经润滑的混合物压成片剂。本发明化合物也可与自由流动的惰性载体组合和直接压成片剂，不经造粒或成块步骤。可提供由密封虫胶涂层、糖或聚合物质涂层和抛光蜡涂层组成的透明或不透明保护涂层。可将染料加入到这些涂层中以区分不同单位剂型。
口服液体，例如溶液、糖浆和酏剂，可制备成为单位剂型以使一给予量含有预定量的化合物。糖浆可由化合物溶在适当调味的水溶液中制备，而酏剂是通过使用无毒载体制备。也可加入增溶剂和乳化剂(例如乙氧化异十八醇和聚氧乙烯山梨糖醇醚)、防腐剂、调味添加剂(例如薄荷油或天然甜味剂、或糖精或其它人造甜味剂)和其类似物。
适当时，可将用于经口给药的剂量单位制剂微囊密封（microencapsulated）。也可例如通过以聚合物、蜡或其类似物涂布或包埋微粒物质来制备制剂以延长或持续释放。
式(I)化合物和其医药学上可接受的盐也可以脂质体传递系统(例如单层小脂囊（vesicles）、单层大脂囊（vesicles）和多层脂囊（vesicles）)形式给予。脂质体可由各种磷脂(例如胆固醇、十八烷胺或磷脂酰胆碱)形成。
式(I)化合物和其医药学上可接受的盐也可通过使用单克隆抗体作为化合物分子所偶合的个别载体来传递。这些化合物也可与作为可靶向药物载体的可溶性聚合物偶合。这些聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基丙烯酰胺苯酚、聚羟乙基天冬酰胺苯酚或经软脂酰基（palitoyl）残基取代的聚氧化乙烯聚赖氨酸。此外，化合物可偶合在适用于达成药物控制释放的一类生物可降解聚合物上，例如聚乳酸、聚ε己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两性嵌段共聚物。
适用于经皮给药的医药制剂可以个别贴片形式提供，其意欲与接受者的表皮保持长时间紧密接触。例如，活性成分可通过如Pharmaceutical Research, 3(6):318 (1986)中大致所述的离子导入疗法自贴片传递。
适用于局部给药的医药制剂可配制成软膏、乳膏、悬浮液、洗剂、散剂（powder）、溶液、糊剂、凝胶、喷雾、气溶胶或油剂。
适用于经直肠给药的医药制剂可以栓剂或灌肠剂形式提供。
适用于经鼻给药的医药制剂(其中载体为固体)包括粒径例如在20微米至500微米范围内的粗品粉末，其以用鼻吸的方式给予，也即通过自保持贴近鼻子的散剂容器通过鼻腔快速吸入来进行。适于以鼻用喷雾或滴鼻剂形式给药的制剂(其中载体为液体)包括含活性成分的水性或油溶液。
适用于通过吸入给药的医药制剂包括细粒粉剂或雾剂，其可通过各种类型的定剂量加压喷雾器（aerosols）、雾化器或吹入器（insufflators）产生。
适用于经阴道给药的医药制剂可以子宫托、棉塞、乳膏、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾制剂提供。
适用于非经肠给药的医药制剂包括水性和非水性灭菌注射溶液，其可含有抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂和使制剂与所欲接受者的血液等张的（isotonic）溶质；和水性和非水性灭菌悬浮液，其可包括悬浮剂和增稠剂。制剂可以单位剂量或多剂量容器(例如密封安瓿和小瓶)提供，且可储存在冷冻干燥(冻干)条件下，仅需要在临用前加入灭菌液体载体(例如注射用水)。即用型注射溶液和悬浮液可由灭菌粉末、颗粒和片剂制备。
应了解，除上文特定提到的成分外，制剂可包括本领域常规的关于所述制剂类型的其它剂，例如适于经口给药的制剂可包括调味剂。
术语“患者”包括人类与其它哺乳动物。
术语“治疗”是指：(i)防止可能易患疾病、病症和/或病状但尚未诊断出患病的患者发生该疾病、病症或病状；(ii)抑制疾病、病症或病状，也即遏止其发展；和(iii)缓解疾病、病症或病状，也即使疾病、病症和/或病状消退。
本发明化合物也可与环孢素(cyclosporin)(例如环孢素A)一起给予。临床试验中已显示环孢素A对HCV有活性(Hepatology, 38, 1282 (2003)；Biochem. Biophys. Res. Commun., 313, 42 (2004)；J. Gastroenterol., 38, 567 (2003))。
下表1列举可与本发明化合物一起给予的化合物的一些说明性实施例。本发明化合物可与其它抗HCV活性化合物在组合疗法中联合或分开给予，或通过将化合物组合成组合物来给予。
表 1
商标名 生理学类别 抑制剂的类型或目标 来源公司
NIM811 亲环素抑制剂 Novartis
日达仙(Zadaxin) 免疫调节剂 Sciclone
撒瓦斯(Suvus) 亚甲基蓝 Bioenvision
阿迪隆(Actilon)(CPG10101) TLR9激动剂 Coley
百他布尔(Batabulin)(T67) 抗癌剂 β-微管蛋白抑制剂 Tularik Inc., South San Francisco, CA
ISIS 14803 抗病毒剂 反义 ISIS Pharmaceuticals Inc, Carlsbad, CA/Elan Phamaceuticals Inc., New York, NY
撒姆美特(Summetrel) 抗病毒剂 抗病毒剂 Endo Pharmaceuticals Holdings Inc., Chadds Ford, PA
GS-9132(ACH-806) 抗病毒剂 HCV抑制剂 Achillion / Gilead
吡唑并嘧啶化合物和盐来自WO-2005047288(2005年5月26日) 抗病毒剂 HCV抑制剂 Arrow Therapeutics Ltd.
利沃韦林(Levovirin) 抗病毒剂 IMPDH抑制剂 Ribapharm Inc., Costa Mesa, CA
美泊地布(Merimepodib)(VX-497) 抗病毒剂 IMPDH抑制剂 Vertex Pharmaceuticals Inc., Cambridge, MA
XTL-6865(XTL-002) 抗病毒剂 单克隆抗体 XTL Biopharmaceuticals Ltd., Rehovot, 以色列
特拉瑞韦(Telaprevir)(VX-950，LY-570310) 抗病毒剂 NS3丝胺酸蛋白酶抑制剂 Vertex Pharmaceuticals Inc., Cambridge, MA/ Eli Lilly and Co. Inc., Indianapolis, IN
HCV-796 抗病毒剂 NS5B复制酶抑制剂 Wyeth / Viropharma
NM-283 抗病毒剂 NS5B复制酶抑制剂 Idenix / Novartis
GL-59728 抗病毒剂 NS5B复制酶抑制剂 Gene Labs / Novartis
GL-60667 抗病毒剂 NS5B复制酶抑制剂 Gene Labs / Novartis
2'C MeA 抗病毒剂 NS5B复制酶抑制剂 Gilead
PSI 6130 抗病毒剂 NS5B复制酶抑制剂 Roche
R1626 抗病毒剂 NS5B复制酶抑制剂 Roche
2'C甲基腺苷 抗病毒剂 NS5B复制酶抑制剂 默克（Merck）
JTK-003 抗病毒剂 RdRp抑制剂 Japan Tobacco Inc., Tokyo, 日本
利沃韦林 抗病毒剂 病毒唑 ICN Pharmaceuticals, Costa Mesa, CA
病毒唑(Ribavirin) 抗病毒剂 病毒唑 Schering-Plough Corporation, Kenilworth, NJ
伟拉咪定(Viramidine) 抗病毒剂 病毒唑前药 Ribapharm Inc., Costa Mesa, CA
海普他美(Heptazyme) 抗病毒剂 核糖酶 Ribozyme Pharmaceuticals Inc., Boulder, CO
BILN-2061 抗病毒剂 丝胺酸蛋白酶抑制剂 Boehringer Ingelheim Pharma KG, Ingelheim, 德国
SCH 503034 抗病毒剂 丝胺酸蛋白酶抑制剂 Schering Plough
扎达斯姆(Zadazim) 免疫调节剂 免疫调节剂 SciClone Pharmaceuticals Inc., San Mateo, CA
塞普林(Ceplene) 免疫调节剂 免疫调节剂 Maxim Pharmaceuticals Inc., San Diego, CA
山喜多(CellCept) 免疫抑制剂 HCV IgG免疫抑制剂 F. Hoffmann-La Roche LTD, Basel, 瑞士
西瓦塞(Civacir) 免疫抑制剂 HCV IgG免疫抑制剂 Nabi Biopharmaceuticals Inc., Boca Raton, FL
白蛋白干扰素-α 干扰素 白蛋白IFN-α2b Human Genome Sciences Inc., Rockville, MD
干复津A(Infergen A) 干扰素 IFN阿法克-1(alfacon-1) InterMune Pharmaceuticals Inc., Brisbane, CA
Omega IFN 干扰素 IFN-ω Intarcia Therapeutics
IFN-β和EMZ701 干扰素 IFN-β和EMZ701 Transition Therapeutics Inc., Ontario, 加拿大
立比扶(Rebif) 干扰素 IFN-β1a Serono, Geneva, 瑞士
罗飞龙A(Roferon A) 干扰素 IFN-α2a F. Hoffmann-La Roche LTD, Basel, 瑞士
Intron A 干扰素 IFN-α2b Schering-Plough Corporation, Kenilworth, NJ
Intron A和日达仙 干扰素 IFN-α2b/α1-胸腺素 RegeneRx Biopharma. Inc., Bethesda, MD/SciClone Pharmaceuticals Inc, San Mateo, CA
立倍隆(Rebetron) 干扰素 IFN-α2b/病毒唑 Schering-Plough Corporation, Kenilworth, NJ
阿克姆(Actimmune) 干扰素 INF-γ InterMune Inc., Brisbane, CA
干扰素-β 干扰素 干扰素-β-1a Serono
木迪菲隆(Multiferon) 干扰素 长效IFN Viragen/Valentis
惠福仁(Wellferon) 干扰素 类淋巴母细胞IFN-αn1 GlaxoSmithKline plc, Uxbridge, 英国
欧尼菲隆(Omniferon) 干扰素 天然IFN-α Viragen Inc., Plantation, FL
佩格西施(Pegasys) 干扰素 聚乙二醇化IFN-α2a F. Hoffmann-La Roche LTD, Basel, 瑞士
佩格西施和塞普林 干扰素 聚乙二醇化IFN-α2a/免疫调节剂 Maxim Pharmaceuticals Inc., San Diego, CA
佩格西施和病毒唑 干扰素 聚乙二醇化IFN-α2a/病毒唑 F. Hoffmann-La Roche LTD, Basel, 瑞士
PEG-Intron 干扰素 聚乙二醇化IFN-α2b Schering-Plough Corporation, Kenilworth, NJ
PEG-Intron /病毒唑 干扰素 聚乙二醇化IFN-α2b/病毒唑 Schering-Plough Corporation, Kenilworth, NJ
IP-501 保肝剂 抗纤维变性剂 Indevus Pharmaceuticals Inc., Lexington, MA
IDN-6556 保肝剂 卡斯蛋白酶(caspase)抑制剂 Idun Pharmaceuticals Inc., San Diego, CA
ITMN-191(R-7227) 抗病毒剂 丝胺酸蛋白酶抑制剂 InterMune Pharmaceuticals Inc., Brisbane, CA
GL-59728 抗病毒剂 NS5B复制酶抑制剂 Genelabs
ANA-971 抗病毒剂 TLR-7激动剂 Anadys
博克瑞韦(Boceprevir) 抗病毒剂 丝胺酸蛋白酶抑制剂 Schering Plough
TMS-435 抗病毒剂 丝胺酸蛋白酶抑制剂 Tibotec BVBA, Mechelen, 比利时
BI-201335 抗病毒剂 丝胺酸蛋白酶抑制剂 Boehringer Ingelheim Pharma KG, Ingelheim, 德国
MK-7009 抗病毒剂 丝胺酸蛋白酶抑制剂 默克（Merck）
PF-00868554 抗病毒剂 复制酶抑制剂 辉瑞（Pfizer）
ANA598 抗病毒剂 非核苷NS5B聚合酶抑制剂 Anadys Pharmaceuticals, Inc., San Diego, CA, 美国
IDX375 抗病毒剂 非核苷复制酶抑制剂 Idenix Pharmaceuticals, Cambridge, MA, 美国
BILB 1941 抗病毒剂 NS5B聚合酶抑制剂 Boehringer Ingelheim Canada Ltd R&D, Laval, QC, 加拿大
PSI-7851 抗病毒剂 核苷聚合酶抑制剂 Pharmasset, Princeton, NJ, 美国
VCH-759 抗病毒剂 NS5B聚合酶抑制剂 ViroChem Pharma
VCH-916 抗病毒剂 NS5B聚合酶抑制剂 ViroChem Pharma
GS-9190 抗病毒剂 NS5B聚合酶抑制剂 Gilead
Peg-干扰素λ 抗病毒剂 干扰素 ZymoGenetics/Bristol-Myers Squibb
本发明化合物也可用作实验室试剂。化合物可有助于提供用于设计病毒复制检测、验证动物检测系统和结构生物学研究的研究工具以进一步加强对HCV疾病机制的认知。此外，本发明化合物适用于例如通过竞争性抑制来建立或确定其它抗病毒化合物的结合位点。
本发明化合物也可用于治疗或预防物质的病毒污染且因此降低与这些物质接触的实验室或医务人员或患者的病毒感染风险，这些物质例如血液、组织、手术器械和衣服、实验室器械和衣服、和血液采集或输血设备和物质。
本发明意欲涵盖通过合成方法或通过代谢过程(包括人体或动物体内(活体内)发生的那种过程或活体外发生的过程)制备的式(I)化合物。
本发明中所用的缩写(尤其包括随后说明性流程和实施例中的缩写)为本领域技术人员所熟知。一些所用缩写如下：Boc或BOC表示叔丁氧基羰基；HATU表示六氟磷酸O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲；DIEA或DiPEA或DIPEA表示二异丙基乙基胺；NCS表示N-氯丁二酰亚胺；NBS表示N-溴丁二酰亚胺；DMF表示N,N-二甲基甲酰胺；ACN或MeCN表示乙腈；OAc表示乙酸基；EtOAc表示乙酸乙酯；Et表示乙基；Bu表示丁基；Ph表示苯基；Me表示甲基；LDA表示二异丙氨基锂；Bn表示苯甲基；Ts表示甲苯磺酰基；RT或rt表示室温或保留时间(视上下文而定)；h或hr或hrs表示小时；min或mins表示分钟；DCM表示二氯甲烷；MeOH表示甲醇；d表示天；THF表示四氢呋喃；Et2O表示乙醚；Bz表示苯甲酰基；AIBN表示偶氮双异丁腈；LiHMDS表示六甲基二硅烷氨基锂；Hex表示己烷；EDC表示1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺；DMAP表示4-N,N-二甲基氨基吡啶；EtOH表示乙醇；DEAD表示偶氮二甲酸二乙酯；DMSO表示二甲亚砜；(S,S)Me-BPE-Rh表示四氟硼酸(-)-1,2-双((2S,5S)-2,5-二甲基磷杂环戊烷基（phospholano）)乙烷(1,5-环辛二烯)铑(I)；TBS表示叔丁基二甲基硅烷基；m-CPBA表示间氯过氧苯甲酸；TBAF表示氟化四丁基铵；DBU表示1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯；ON或o/n或on表示过夜；AcOH表示乙酸；dppf表示二苯膦基二茂铁；TFA表示三氟乙酸；pTsA或PTSA表示对甲苯磺酸；TMSCl表示氯三甲基硅烷；DDQ表示2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌；Tf表示三氟甲基磺酰基；TMSCN表示氰化三甲基硅烷；n-BuLi表示正丁基锂；且SEM表示2-三甲基硅烷基乙氧基甲氧基。
结合以下合成流程将更好地理解本发明的化合物和方法，这些流程说明可用以制备本发明化合物的方法。起始物质可自商业来源获得或通过本领域普通技术人员已知的公认文献方法制备。本领域普通技术人员将显而易见，可通过取代下文所示的合成中的适当反应物和试剂来合成上文定义的化合物。本领域技术人员也将显而易见，根据变量的性质，可以按不同次序进行选择性保护和去保护步骤以及步骤本身的次序，以成功完成以下合成。除非下文另有说明，否则变量如上文所定义。
流程A说明如何由关键前体A-1和A-3加工成目标产物A-7的实施例，且流程B至流程E强调如何在不同杂环家族情形下制备这些关键前体。
流程 A
进行氨基甲酸盐A-1的标准酸催化脱除保护基，接着与受保护的氨基酸(例如Boc-脯氨酸)偶合，得到酮酰胺A-2，其可通过在乙酸铵存在下加热来环化为咪唑A-5。或者，咪唑A-5可自酮酯A-4制备，而酮酯A-4是自卤酮A-3通过与乙酸铵发生类似热辅助反应来制备。进行标准酸催化脱除Boc保护基，接着与酸在标准肽偶合条件(例如HATU/DIEA)下缩合，得到A-7。现有多种方法制备A-7的咪唑官能化形式。例如，可用例如NCS或NBS的试剂直接卤化A-7；或可在脱除Boc保护基步骤前进行咪唑部分的卤化。应注意，在卤素部分为碘或溴的情况下，可通过应用化学文献中公认的金属辅助偶合条件(例如铃木-宫浦偶合(Suz英国i-Miayura coupling))进一步官能化。
流程A
Figure 2011800457257100002DEST_PATH_IMAGE020
流程 B
现有多种方法自苯并噁唑B-1制备区域异构体（regioisomeric）B-6a和B-6b。可使用施蒂勒(Stille)和铃木-宫浦偶合条件的组合自二溴化物B-1加工成二酮B-5，其中用例如HCl的酸处理来自施蒂勒偶合步骤的产物以暴露酮部分。可在中间体阶段(溴化物B-4或B-5)或二酮阶段B-6进行区域异构体（regioisomeric）分离。可使用例如溴的试剂自各二酮B-6加工成二溴化物B-7。在替代性方法中，苯并噁唑B-1可与硼酸B-2在铃木-宫浦条件下偶合，且可将所得区位异构混合物分离，且可通过在水存在下使用施蒂勒偶合与原位溴化(使用例如NBS的试剂)的组合个别地加工成溴酮B-6。
流程B
Figure 2011800457257100002DEST_PATH_IMAGE022
流程 C
可通过使用流程B中论述的合成途径将二溴化物C-1加工成溴酮C-2a。若在最终溴化步骤期间出现C-2的咪唑片段竞争性地溴化得到C-2b的复杂情况，则可促使该物质历经流程A中描述的咪唑构造步骤，接着在还原条件(例如钯/碳辅助氢化作用)下除去溴。或者，二溴化物C-1可经单锂化且用Boc-甘氨酸的维勒布酰胺(Weinerb amide)淬灭，得到区位异构溴化物C-3。分离的区域异构体（regioisomeric）可与C-4在铃木-宫浦条件下偶合，得到氨基甲酸酯C-5。
流程C
Figure 2011800457257100002DEST_PATH_IMAGE024
流程 D 和流程 E
在流程D中，胺D-1可与2,5-二甲氧基四氢呋喃在热条件下缩合，接着所得吡咯可与2-氯-2-氧代乙酸甲酯或其任一酯变体反应，得到酮酯D-3。在酸条件下除去Boc基团，接着进行原位氧化可得到二酯D-6。用CH2ICl/LDA处理二酯D-6可得到氯酮D-7。可根据流程E中描述的改良途径制备D-7的区域异构体（regioisomeric），其中使用4-(氯羰基)苯甲酸甲酯替代2-氯-2-氧代乙酸甲酯。
流程D
Figure 2011800457257100002DEST_PATH_IMAGE026
流程E
Figure 2011800457257100002DEST_PATH_IMAGE028
本领域普通技术人员将显而易见流程B至E中描述的合成途径将同样适用于清单（Figure）A中描述的二卤素前体。本领域普通技术人员也将显而易见，可使用流程A至E中描述的途径的改良形式制备最终产物的均二聚变体，如流程F中说明。
清单A
市售
文献中报导的制备程序
可使用以下参考文献制备4,7-二碘-1H-吲唑
Figure 2011800457257100002DEST_PATH_IMAGE034
流程F
流程 1 ：被取代的苯基甘氨酸衍生物
可由下文所示的多种方法制备被取代的苯基甘氨酸衍生物。可用适当醛和还原剂(例如氰基硼氢化钠)在酸性介质中还原性烷基化(路径A)苯基甘氨酸叔丁酯。可用强酸(例如HCl或三氟乙酸)实现叔丁酯的水解。或者，可用烷基卤化物(例如碘乙烷)和碱(例如碳酸氢钠或碳酸钾)烷基化苯基甘氨酸(路径B)。路径C说明苯基甘氨酸的还原烷基化(如路径A中)，接着在还原剂和酸存在下用替代的醛(例如甲醛)进行第二次还原性烷基化。路径D说明通过相应扁桃酸类似物合成被取代的苯基甘氨酸。可用对甲苯磺酰氯使仲醇转化为适当的离去基团。用适当胺置换甲苯磺酸基，接着还原性除去苯甲酯可得到被取代的苯基甘氨酸衍生物。在路径E中，通过用对映异构性纯的手性助剂(例如(但不限于)(+)-1-苯基乙醇、(-)-1-苯基乙醇、伊凡氏噁唑烷酮(Evan's oxazolidinone))或对映异构性纯的泛解酸内酯进行酯化来解析外消旋被取代的苯基甘氨酸衍生物。通过层析(硅胶，HPLC，结晶等)，接着除去手性助剂，得到对映异构性纯的苯基甘氨酸衍生物来分离非对映异构体。路径H说明与路径E交错的合成程序，其中在加入胺之前加入上述手性助剂。或者，可用溴鎓离子源(例如溴、N-溴丁二酰亚胺或CBr4)溴化芳基乙酸酯。可用多种经单取代或双取代的胺在叔胺碱(例如三乙胺或胡尼碱(Hunig's base))存在下置换所得苯甲基溴。通过在低温下用氢氧化锂处理或在高温下用6 N HCl处理使甲酯水解，得到被取代的苯基甘氨酸衍生物。另一方法展示在路径G中。可在钯(0)源(例如双(三丁基膦)钯)和碱(例如磷酸钾)存在下用多种芳基卤化物使甘氨酸类似物衍生化。接着可通过用碱或酸处理来使所得酯水解。应理解，本领域存在制备苯基甘氨酸衍生物的其它熟知方法，且可经修改以提供本叙述中所需的化合物。也应理解，最终苯基甘氨酸衍生物可通过制备型HPLC纯化至对映异构纯度大在98%ee。
Figure DEST_PATH_IMAGE038
流程 2 ：酰化的氨基酸衍生物
在本发明的另一实施方案中，可如以下说明酰化的苯基甘氨酸衍生物的制备。可用酸氯化物在碱(例如三乙胺)存在下酰化苯基甘氨酸衍生物(其中羧酸被保护为容易除去的酯)以提供相应酰胺(路径A)。路径B说明以适当氯甲酸酯使起始苯基甘氨酸衍生物酰化，而路径C展示与适当异氰酸酯或氨基甲酰氯的反应。路径A-C中展示的三种中间体各自可通过本领域技术人员已知的方法脱除保护基(也即用强碱(例如HCl或三氟乙酸)处理叔丁酯)。
Figure DEST_PATH_IMAGE040
流程 3
可通过用过量胺处理氯甲基苯基乙酸来制备被氨基取代的苯乙酸。
Figure DEST_PATH_IMAGE042
共同酸前体（ common acid precursors ）的合成
关于除下文说明的酸前体以外的其它酸前体的合成，参见WO 2011/059887中的共同酸前体-1至共同酸前体-176。
共同酸前体 -177a 和共同酸前体 -177b
共同酸前体 -177a 和共同酸前体 -177b ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE044
将1,1,3,3-四甲基胍(0.985 mL，7.85 mmol)加入到搅拌着的2-(苯甲氧基羰基氨基)-2-(二甲氧基磷酰基)乙酸甲酯(2.0 g，6.0 mmol)在EtOAc(40 mL)中的溶液中且在室温下、在N2下搅拌混合物10分钟。接着加入二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮(0.604 g，6.04 mmol)且在室温下搅拌混合物16小时。接着在冷冻器中冷却反应混合物10分钟且用柠檬酸水溶液(1.5 g在20 mL水中)中和。分开两相且有机层用0.25 N HCl水溶液和盐水洗涤，接着干燥(MgSO4)且浓缩为无色油状物。通过快速二氧化硅层析(装载溶剂：DCM，用EtOAc/己烷洗脱，梯度为20%至30% EtOAc)纯化粗品物质，得到两种异构产物：第一洗脱产物为(Z)-2-(苯甲氧基羰基氨基)-2-(2H-吡喃-3-(4H,5H,6H)-亚基)乙酸甲酯(490 mg)(白色固体)，且第二洗脱产物为(E)-2-(苯甲氧基羰基氨基)-2-(2H-吡喃-3(4H,5H,6H)-亚基)乙酸甲酯(433 mg)(白色固体)。LC-MS保留时间为1.398分钟(Z异构体)和1.378分钟(E-异构体)；m/z 304.08(Z异构体)和304.16(E异构体)(MH-)。用配备有PHENOMENEX® Luna 10 μ C18 3.0×50 mm管柱的Shimadzu LC-10AS液相层析仪，使用SPD-10AV UV-Vis检测器在220 nM的检测器波长下记录LC数据。洗脱条件采用流动速率4 mL/min，梯度100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间3分钟，保持时间1分钟且分析时间4分钟，其中溶剂A为5% MeOH/95% H2O/10 mM乙酸铵，且溶剂B为5% H2O/95% MeOH/10 mM乙酸铵。使用 MICROMASS®平台以LC电喷模式测定MS数据。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) (Z-异构体) δ ppm 7.30-7.44 (m, 5 H), 6.18 (br. s., 1 H), 5.10-5.17 (m, 2 H), 4.22 (s, 2 H), 3.78 (br. s., 3 H), 2.93-3.02 (m, 2 H), 1.80 (dt, J=11.7, 5.8 Hz, 2 H), 1.62 (s, 2 H)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) (E-异构体) δ ppm 7.31-7.44 (m, 5 H), 6.12 (br. s., 1 H), 5.13-5.17 (m, 2 H), 4.64 (br. s., 2 H), 3.70-3.82 (m, 5 H), 2.49 (t, J=6.5 Hz, 2 H), 1.80 (br. s., 2 H)。(注意：由1H NMR位移和耦合常数测定绝对区域化学（regiochemistry）)。
共同酸前体 -177a 和共同酸前体 -177b ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE046
将四氟硼酸(-)-1,2-双((2S,5S)-2,5-二甲基磷杂环戊烷基)乙烷(环辛二烯)-铑(I)(28.2 mg，0.051 mmol)加入到搅拌的(Z)-2-(苯甲氧基羰基氨基)-2-(2H-吡喃-3-(4H,5H,6H)-亚基)乙酸甲酯(310 mg，1.015 mmol)在MeOH(10 mL)中的溶液中且相继用N2和H2真空冲洗混合物，接着在室温在H2(60 psi)下搅拌反应物2天。浓缩反应混合物且通过快速二氧化硅层析(装载溶剂：DCM，用含20% EtOAc的己烷洗脱)纯化残余物，得到呈澄清无色油状的(S)-2-(苯甲氧基羰基氨基)-2-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯(204 mg)。LC-MS保留时间1.437分钟；m/z 307.89(MH+)。用配备有PHENOMENEX® Luna 10 μ C18 3.0×50 mm管柱的Shimadzu LC-10AS液相层析仪，使用SPD-10AV UV-Vis检测器在220 nM的检测器波长下记录LC数据。洗脱条件采用流动速率4 mL/min，梯度100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间3分钟，保持时间1分钟且分析时间4分钟，其中溶剂A为5% MeOH/95% H2O/10 mM乙酸铵，且溶剂B为5% H2O/95% MeOH/10 mM乙酸铵。使用 MICROMASS®平台以LC电喷模式测定MS数据。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 7.30-7.46 (m, 5 H), 5.32 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 5.12 (s, 2 H), 4.36 (dd, J=8.9, 5.6 Hz, 1 H), 3.84-3.98 (m, 2 H), 3.77 (s, 3 H), 3.28-3.37 (m, 1 H), 3.23 (dd, J=11.3, 10.5 Hz, 1 H), 2.04-2.16 (m, 1 H), 1.61-1.75 (m, 3 H), 1.31-1.43 (m, 1 H)。
以类似方式还原其它立体异构体((E)-2-(苯甲氧基羰基氨基)-2-(2H-吡喃-3(4H,5H,6H)-亚基)乙酸甲酯)(360 mg，1.18 mmol)，得到呈澄清无色油状的(S)-2-(苯甲氧基羰基氨基)-2-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯(214 mg)。LC-MS保留时间1.437分钟；m/z 308.03(MH+)。用配备有PHENOMENEX® Luna 10 μ C18 3.0×50 mm管柱的Shimadzu LC-10AS液相层析仪，使用SPD-10AV UV-Vis检测器在220 nM的检测器波长下记录LC数据。洗脱条件采用流动速率4 mL/min，梯度100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间3分钟，保持时间1分钟且分析时间4分钟，其中溶剂A为5% MeOH/95% H2O/10 mM乙酸铵，且溶剂B为5% H2O/95% MeOH/10 mM乙酸铵。使用 MICROMASS®平台以LC电喷模式测定MS数据。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 7.30-7.44 (m, 5 H), 5.31 (d, J=9.0 Hz, 1 H), 5.12 (s, 2 H), 4.31 (dd, J=8.7, 6.9 Hz, 1 H), 3.80-3.90 (m, 2 H), 3.77 (s, 3 H), 3.37 (td, J=10.8, 3.5 Hz, 1 H), 3.28 (dd, J=11.3, 9.8 Hz, 1 H), 1.97-2.10 (m, 1 H), 1.81 (d, J=11.5 Hz, 1 H), 1.61-1.72 (m, 2 H), 1.33-1.46 (m, 1 H)。
共同酸前体 -177a 和共同酸前体 -177b ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE048
将10% Pd/C(69.3 mg，0.065 mmol)加入到(S)-2-(苯甲氧基羰基氨基)-2-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯(200 mg，0.651 mmol)和二碳酸二甲酯[4525-33-1](0.104 mL，0.976 mmol)在MeOH(10 mL)中的溶液中。反应混合物相继用N2和H2真空冲洗，接着在室温在H2(55 psi)下搅拌反应物5小时。反应混合物经CELITE®/二氧化硅垫过滤且滤液浓缩为无色油状物。通过快速二氧化硅层析(装载溶剂：DCM，用含30% EtOAc的己烷洗脱)纯化粗品油，得到呈无色油状的产物(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯(132 mg)。LC-MS保留时间0.92分钟；m/z 231.97(MH+)。用配备有PHENOMENEX® Luna 10 μ C18 3.0×50 mm管柱的Shimadzu LC-10AS液相层析仪，使用SPD-10AV UV-Vis检测器在220 nM的检测器波长下记录LC数据。洗脱条件采用流动速率4 mL/min，梯度100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间3分钟，保持时间1分钟且分析时间4分钟，其中溶剂A为5% MeOH/95% H2O/10 mM乙酸铵，且溶剂B为5% H2O/95% MeOH/10 mM乙酸铵。使用 MICROMASS®平台以LC电喷模式测定MS数据。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 5.24 (d, J=8.5 Hz, 1 H), 4.34 (dd, J=8.9, 5.6 Hz, 1 H), 3.84-3.97 (m, 2 H), 3.77 (s, 3 H), 3.70 (s, 3 H), 3.29-3.38 (m, 1 H), 3.23 (dd, J=11.2, 10.4 Hz, 1 H), 2.03-2.14 (m, 1 H), 1.56-1.75 (m, 3 H), 1.32-1.43 (m, 1 H)。
以类似方式转化另一非对映异构体((S)-2-(苯甲氧基羰基氨基)-2-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯)，得到呈澄清无色油状的(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯。LC-MS保留时间0.99分钟；m/z 231.90(MH+)。用配备有PHENOMENEX® Luna 10 μ C18 3.0×50 mm管柱的Shimadzu LC-10AS液相层析仪，使用SPD-10AV UV-Vis检测器在220 nM的检测器波长下记录LC数据。洗脱条件采用流动速率4 mL/min，梯度100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间3分钟，保持时间1分钟且分析时间4分钟，其中溶剂A为5% MeOH/95% H2O/10 mM乙酸铵，且溶剂B为5% H2O/95% MeOH/10 mM乙酸铵。使用 MICROMASS®平台以LC电喷模式测定MS数据。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 5.25 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 4.29 (dd, J=8.4, 7.2 Hz, 1 H), 3.82-3.90 (m, 2 H), 3.77 (s, 3 H), 3.70 (s, 3 H), 3.37 (td, J=10.8, 3.3 Hz, 1 H), 3.28 (t, J=10.5 Hz, 1 H), 1.96-2.08 (m, 1 H), 1.81 (dd, J=12.9, 1.6 Hz, 1 H), 1.56-1.72 (m, 2 H), 1.33-1.46 (m, 1 H)。
共同酸前体 -177a 和共同酸前体 -177b
向在室温下搅拌的(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯(126 mg，0.545 mmol)在THF(4 mL)中的溶液中加入1 M LiOH(1.090 mL，1.090 mmol)的水溶液。在室温下搅拌反应物3小时，用1 M HCl(1.1 mL)中和且用EtOAc(3×10 mL)萃取。干燥有机物，过滤且浓缩，得到呈澄清无色油状的(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((S)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸(共同酸前体-177a)(125 mg)。LC-MS保留时间0.44分钟；m/z 218.00(MH+)。用配备有PHENOMENEX® Luna 10 μ C18 3.0×50 mm管柱的Shimadzu LC-10AS液相层析仪，使用SPD-10AV UV-Vis检测器在220 nM的检测器波长下记录LC数据。洗脱条件采用流动速率4 mL/min，梯度100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间3分钟，保持时间1分钟且分析时间4分钟，其中溶剂A为5% MeOH/95% H2O/10 mM乙酸铵，且溶剂B为5% H2O/95% MeOH/10 mM乙酸铵。使用 MICROMASS®平台以LC电喷模式测定MS数据。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 5.28 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 4.38 (dd, J=8.7, 5.6 Hz, 1 H), 3.96-4.04 (m, 1 H), 3.91 (d, J=11.0 Hz, 1 H), 3.71 (s, 3 H), 3.33-3.41 (m, 1 H), 3.24-3.32 (m, 1 H), 2.10-2.24 (m, 1 H), 1.74-1.83 (m, 1 H), 1.63-1.71 (m, 2 H), 1.35-1.49 (m, 1 H)。
以类似方式转化另一非对映异构体((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸甲酯)，得到呈澄清无色油状的(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((R)-四氢-2H-吡喃-3-基)乙酸(共同酸前体-177b)。LC-MS保留时间0.41分钟；m/z 217.93(MH+)。用配备有PHENOMENEX® Luna 10 μ C18 3.0×50 mm管柱的Shimadzu LC-10AS液相层析仪，使用SPD-10AV UV-Vis检测器在220 nM的检测器波长下记录LC数据。洗脱条件采用流动速率4 mL/min，梯度100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间3分钟，保持时间1分钟且分析时间4分钟，其中溶剂A为5% MeOH/95% H2O/10 mM乙酸铵，且溶剂B为5% H2O/95% MeOH/10 mM乙酸铵。使用 MICROMASS®平台以LC电喷模式测定MS数据。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 6.18 (br. s., 1 H), 5.39 (d, J=8.5 Hz, 1 H), 4.27-4.37 (m, 1 H), 3.82-3.96 (m, 2 H), 3.72 (s, 3 H), 3.42 (td, J=10.8, 3.3 Hz, 1 H), 3.35 (t, J=10.4 Hz, 1 H), 2.01-2.18 (m, 1 H), 1.90 (d, J=11.8 Hz, 1 H), 1.59-1.76 (m, 2 H), 1.40-1.54 (m, 1 H)。
共同酸前体 -178
Figure DEST_PATH_IMAGE050
共同酸前体 -178 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE052
向氢化槽中二乙酸(2S,3S,4S)-2-甲基-3,4-二氢-2H-吡喃-3,4-二基酯(5 g，23.34 mmol)在20 mL MeOH中的溶液中加入Pd/C(150 mg，0.141 mmol)。在Parr震荡器上在40 psi下氢化所得混合物1小时。接着过滤混合物且浓缩滤液，得到呈澄清油状的共同酸前体-178，步骤a(5.0 g)，其在静置时凝固。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 4.85-4.94 (1 H, m), 4.69 (1 H, t, J=9.46 Hz), 3.88-3.94 (1 H, m), 3.44 (1 H, td, J=12.21, 1.83 Hz), 3.36 (1 H, dq, J=9.42, 6.12 Hz), 2.03-2.08 (1 H, m), 2.02 (3 H, s), 2.00 (3 H, s), 1.70-1.80 (1 H, m), 1.16 (3 H, d, J=6.10 Hz)。
共同酸前体 -178 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE054
向共同酸前体-178，步骤a(5.0 g，23 mmol)在50 mL MeOH中的溶液中加入几滴甲醇钠。在室温下搅拌30分钟后，加入甲醇钠(0.1 mL，23.12 mmol)且在室温下搅拌溶液过夜。接着在真空下除去溶剂。残余物用苯稀释且浓缩，得到呈黄色固体状的相应二醇。将固体溶解在50 mL吡啶中且在-35℃向该溶液中逐滴加入苯甲酰氯(2.95 mL，25.4 mmol)。在-35℃搅拌所得混合物1小时，接着在室温下搅拌过夜。混合物用Et2O稀释且用水洗涤。用EtOAc(2×)萃取水层。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，5%-15% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈澄清油状的共同酸前体-178，步骤b(4.5 g)，其在长期静置后缓慢结晶。LC-MS: [M+Na]+ C13H16NaO4的分析性计算值259.09；实验值259.0；1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 8.02-8.07 (2 H, m), 7.55-7.61 (1 H, m), 7.45 (2 H, t, J=7.78 Hz), 5.01 (1 H, ddd, J=11.44, 8.70, 5.49 Hz), 3.98 (1 H, ddd, J=11.90, 4.88, 1.53 Hz), 3.54 (1 H, td, J=12.36, 2.14 Hz), 3.41 (1 H, t, J=9.00 Hz), 3.31-3.38 (1 H, m), 2.13-2.19 (1 H, m), 1.83-1.94 (1 H, m), 1.36 (3 H, d, J=5.80 Hz)。
共同酸前体 -178 ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE056
经15分钟向NaH(1.143 g，28.6 mmol)(60%在矿物油中)在6 mL CS2中的混合物中逐滴加入含共同酸前体-178，步骤b(4.5 g，19 mmol)的40 mL CS2。在室温下搅拌所得混合物30分钟。混合物变为浅橙色且产生一些固体。接着经20分钟逐滴加入MeI(14.29 mL，229 mmol)。接着在室温下搅拌混合物过夜。反应物用饱和NH4Cl溶液小心淬灭。用EtOAc(3×)萃取混合物。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，6% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈澄清油状的共同酸前体-178，步骤c(3.13 g)。LC-MS: [M+Na]－ C15H18NaO4S2的分析性计算值349.05；实验值349.11；1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.94-8.00 (2 H, m), 7.50-7.58 (1 H, m), 7.41 (2 H, t, J=7.78 Hz), 5.96 (1 H, t, J=9.46 Hz), 5.28 (1 H, ddd, J=11.37, 9.38, 5.49 Hz), 4.02 (1 H, ddd, J=11.98, 4.96, 1.68 Hz), 3.54-3.68 (2 H, m), 2.48 (3 H, s), 2.31 (1 H, dd), 1.88-1.99 (1 H, m), 1.28 (3 H, d)。
共同酸前体 -178 ，步骤 d
Figure DEST_PATH_IMAGE058
在80℃向共同酸前体-178，步骤c(3.13 g，9.59 mmol)和AIBN(120 mg，0.731 mmol)在40 mL苯中的混合物中加入氢化三-正丁基锡(10.24 mL，38.4 mmol)。在回流温度下搅拌所得混合物20分钟，接着冷却至室温。混合物用乙醚稀释且加入100 mL KF(10 g)水溶液且剧烈搅拌混合物30分钟。接着分离两层且水相用EtOAc(2×)萃取。有机层用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，用含3% Et3N的己烷钝化且用含3% Et3N的己烷冲洗以除去三丁基锡衍生物，接着用15% EtOAc/Hex洗脱)纯化粗品产物，得到呈澄清油状的共同酸前体-178，步骤d(1.9 g)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.98-8.07 (2 H, m), 7.52-7.58 (1 H, m), 7.43 (2 H, t, J=7.63 Hz), 5.08-5.17 (1 H, m), 4.06 (1 H, ddd, J=11.90, 4.88, 1.53 Hz), 3.50-3.59 (2 H, m), 2.08-2.14 (1 H, m), 1.99-2.06 (1 H, m), 1.69-1.80 (1 H, m), 1.41-1.49 (1 H, m), 1.24 (3 H, d, J=6.10 Hz)。
共同酸前体 -178 ，步骤 e
Figure DEST_PATH_IMAGE060
向共同酸前体-178，步骤d(1.9 g，8.63 mmol)在10 mL MeOH中的混合物中加入甲醇钠(2 mL，4.00 mmol)(2 M在甲醇中)。在室温下搅拌所得混合物5小时。在真空下除去溶剂。混合物用饱和NH4Cl溶液中和且用EtOAc(3×)萃取。有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到呈澄清油状的共同酸前体-178，步骤e(0.8 g)。产物未经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 4.01 (1 H, ddd, J=11.80, 5.02, 1.76 Hz), 3.73-3.83 (1 H, m), 3.36-3.46 (2 H, m), 1.92-2.00 (1 H, m), 1.88 (1 H, m), 1.43-1.56 (1 H, m), 1.23 (3 H, d), 1.15-1.29 (1 H, m)。
共同酸前体 -178 ，步骤 f
Figure DEST_PATH_IMAGE062
将甲苯磺酰氯(2.63 g，13.77 mmol)加入到共同酸前体-178，步骤e(0.8 g，6.89 mmol)和吡啶(2.23 mL，27.5 mmol)在100 mL CH2Cl2中的溶液中。在室温下搅拌所得混合物3天。接着将10 mL水加入到反应混合物中且在室温下搅拌混合物1小时。分离两层且有机相用水和1 N盐酸水溶液洗涤。有机相用MgSO4干燥且浓缩，得到呈浅黄色固体状的共同酸前体-178，步骤f(1.75 g)。产物未经进一步纯化即用于下一步骤。[M+H]+ C13H19O4S的分析性计算值271.10；实验值270.90；1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.79 (2 H, d, J=8.24 Hz), 7.34 (2 H, d, J=7.93 Hz), 4.53-4.62 (1 H, m), 3.94 (1 H, ddd, J=12.13, 4.96, 1.83 Hz), 3.29-3.41 (2 H, m), 2.45 (3 H, s), 1.90-1.97 (1 H, m), 1.79-1.85 (1 H, m), 1.64-1.75 (1 H, m), 1.38-1.48 (1 H, m), 1.17 (3 H, d, J=6.10 Hz)。
共同酸前体 -178 ，步骤 g
Figure DEST_PATH_IMAGE064
将2-(二苯基亚甲基氨基)乙酸乙酯(1.6 g，5.92 mmol)和共同酸前体-178，步骤f(1.6 g，5.92 mmol)置放在微波管中。加入10 mL甲苯。密封微波管且在N2下逐滴加入LiHMDS(7.1 mL，7.10 mmol)(1 N在甲苯中)。在微波辐射下100℃加热所得暗褐色溶液6小时。接着向混合物中加入水且用EtOAc(3×)萃取混合物。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥且浓缩，得到呈橙色油状的共同酸前体-3，步骤g(3.1 g)的非对映异构混合物。粗品混合物未经分离即用于下一步骤。LC-MS: [M+H]+ C23H28NO3的分析性计算值366.21；实验值366.3。
共同酸前体 -178 ，步骤 h
Figure DEST_PATH_IMAGE066
向共同酸前体-178乙基酯，步骤g的非对映异构混合物在20 mL THF中的溶液中加入HCl(30 mL，60.0 mmol)(2 N水溶液)。在室温下搅拌所得混合物1小时。混合物用EtOAc萃取且浓缩水层，得到呈橙色油状的共同酸前体-178，步骤h的盐酸盐(1.9 g)。该盐未经进一步纯化即用于下一步骤。LC-MS: [M+H]+ C10H20NO3的分析性计算值202.14；实验值202.1。
共同酸前体 -178 ，步骤 i
Figure DEST_PATH_IMAGE068
在室温下搅拌1.9 g共同酸前体-178，步骤h(盐酸盐)、DiPEA(4.19 mL，24.0 mmol)和氯甲酸甲酯(1.24 mL，16.0 mmol)在20 mL CH2Cl2中的溶液1小时。混合物用CH2Cl2稀释且用水洗涤。有机层用Na2SO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-20% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈黄色油状的共同酸前体-178，步骤i(1.1 g)。[M+Na]+ C12H21NNaO5的分析性计算值282.13；实验值282.14；1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.16 (1 H, br. s.), 4.43-4.58 (1 H, m), 4.17-4.28 (2 H, m), 3.89-4.03 (1 H, m), 3.72-3.78 (2 H, m), 3.67-3.72 (3 H, m), 2.07-2.19 (1 H, m), 1.35-1.77 (4 H, m), 1.30 (3 H, td, J=7.09, 2.89 Hz), 1.19 (3 H, d, J=6.53 Hz)。
共同酸前体 -178 ，步骤 j
Figure DEST_PATH_IMAGE070
向共同酸前体-178，步骤i(1.1 g，4.2 mmol)在5 mL THF和2 mL水中的混合物中加入LiOH(6.36 mL，12.7 mmol)(2 N水溶液)。在室温下搅拌所得混合物过夜。接着混合物用1 N盐酸水溶液中和且用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到呈澄清油状的共同酸前体-178，步骤j(0.8 g)。LC-MS: [M+H]+ C10H18NO5的分析性计算值232.12；实验值232.1；1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.20 (1 H, d, J=8.28 Hz), 4.54 (1 H, t, J=8.16 Hz), 3.95-4.10 (1 H, m), 3.66-3.85 (5 H, m), 2.15-2.29 (1 H, m), 1.41-1.85 (4 H, m), 1.23 (3 H, dd, J=6.53, 1.76 Hz)。
共同酸前体 -178 ，步骤 k
Figure DEST_PATH_IMAGE072
向共同酸前体-178，步骤j(240 mg，1.04 mmol)、(S)-1-苯基乙醇(0.141 mL，1.142 mmol)和EDC(219 mg，1.14 mmol)在10 mL CH2Cl2中的溶液中加入DMAP(13.95 mg，0.114 mmol)。在室温下搅拌所得溶液过夜且在真空中除去溶剂。将残余物溶解在EtOAc中，用水洗涤，用MgSO4干燥且浓缩。通过层析(硅胶，0-15% EtOAc/己烷)纯化粗品产物，得到呈两种非对映异构体的混合物形式的共同酸前体-178，步骤k。通过手性HPLC(CHIRALPAK® AS管柱，21×250 mm，10 μm)，用90% 0.1%二乙胺/庚烷-10% EtOH以15 mL/min洗脱来分离混合物，得到呈白色固体状的共同酸前体-178，步骤k立体异构体1(第一洗脱)和共同酸前体-178，步骤k立体异构体2(第二洗脱)。异构体的立体化学未作指定。
共同酸前体-178，步骤k立体异构体1(130 mg)：LC-MS: [M+Na]+ C18H25NNaO5的分析性计算值358.16；实验值358.16；1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.28-7.38 (5 H, m), 5.94 (1 H, q, J=6.71 Hz), 5.12 (1 H, d, J=9.16 Hz), 4.55 (1 H, t, J=9.00 Hz), 3.72-3.81 (1 H, m), 3.67 (3 H, s), 3.60-3.70 (2 H, m), 1.98-2.08 (1 H, m), 1.59 (3 H, d, J=6.71 Hz), 1.38-1.47 (2 H, m), 1.30 (2 H, t, J=5.34 Hz), 0.93 (3 H, d, J=6.41 Hz)。
共同酸前体 -178 ，立体异构体 1
向共同酸前体-178，步骤k立体异构体1((S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-((2S,4R)-2-甲基四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸)(150 mg，0.447 mmol)在10 mL EtOH中的溶液中加入Pd/C(20 mg，0.188 mmol)且在Parr震荡器上在40 psi下氢化混合物过夜。接着过滤混合物且浓缩滤液，得到呈粘稠白色固体状的共同酸前体-178，立体异构体1(100 mg)。LC-MS: [M+H]+ C10H18NO5的分析性计算值232.12；实验值232.1；1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.14-5.27 (1 H, m), 4.51 (1 H, t, J=8.39 Hz), 3.90-4.07 (1 H, m), 3.60-3.83 (5 H, m), 2.06-2.27 (1 H, m), 1.45-1.77 (4 H, m), 1.21 (3 H, d, J=6.41 Hz)。
共同酸前体 -179((S)- 对映异构体或 (R)- 对映异构体 )
共同酸前体 -179 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE076
将2,6-二甲基-4H-吡喃-4-酮(15 g，121 mmol)溶解在乙醇(300 mL)中且加入10% Pd/C(1.28 g，1.21 mmol)。在Parr震荡器中在室温在H2(70 psi)下氢化混合物72小时。经硅藻土垫(Celite®)过滤反应混合物且用乙醇洗涤。在真空中浓缩滤液且通过快速层析(10%至30% EtOAc/Hex)纯化残余物。分离两个澄清油状洗脱级分。第一洗脱级分为(2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-醇(共同酸前体-1，步骤a)与(2R,4s,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-醇的混合物(1.2 g)，而后者洗脱级分仅对应于共同酸前体-179，步骤a(10.73 g)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 3.69-3.78 (1 H, m), 3.36-3.47 (2 H, m), 2.10 (1 H, br. s.), 1.88 (2 H, dd, J=12.05, 4.73 Hz), 1.19 (6 H, d, J=6.10 Hz), 1.10 (2 H, q, J=10.70 Hz)。13C NMR (126 MHz, CDCl3) δ ppm 71.44 (2 C), 67.92 (1 C), 42.59 (2 C), 21.71 (2 C)。
共同酸前体 -179 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE078
将DEAD(166 mL，330 mmol)逐滴加入到共同酸前体-179，步骤a(10.73，82 mmol)、4-硝基苯甲酸(48.2 g，288 mmol)和Ph3P(86 g，330 mmol)在苯(750 mL)中的溶液中。检测到热析出且在环境温度下搅拌所得琥珀色溶液18小时。在减压下除去溶剂且用Et2O(200 mL)湿磨残余物以除去氧化三苯膦(10 g)。经Biotage®纯化(0至5% EtOAc/Hex；300 g管柱×4)剩余混合物。分离呈白色固体状的共同酸前体-179，步骤b(19.36 g)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 8.27-8.32 (2 H, m), 8.20-8.24 (2 H, m), 5.45 (1 H, quin, J=2.82 Hz), 3.92 (2 H, dqd, J=11.90, 6.10, 1.53 Hz), 1.91 (2 H, dd, J=14.80, 2.29 Hz), 1.57 (2 H, dt, J=14.65, 3.05 Hz), 1.22 (6 H, d, J=6.10 Hz)。13C NMR (126 MHz, CDCl3) δ ppm 163.81 (1 C), 150.55 (1 C), 135.94 (1 C), 130.64 (2 C), 123.58 (2 C), 70.20 (1 C), 68.45 (2 C), 36.95 (2 C), 21.84 (2 C)。LC-MS: [M]+ C14H17NO5的分析性计算值：279.11；实验值279.12。
共同酸前体 -179 ，步骤 c
将LiOH(8.30 g，347 mmol)在水(300 mL)中的溶液加入到共同酸前体-179，步骤b(19.36 g，69.3 mmol)在THF(1000 mL)中的溶液中且在环境温度下搅拌所得混合物16小时。在减压下除去THF且水层用更多的水(200 mL)稀释且用EtOAc(3×200 mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤且在真空下浓缩。回收具有白色固体的油性残余物。混合物用己烷湿磨且通过过滤除去固体，得到呈澄清油状的共同酸前体-179，步骤c(8.03 g)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 4.21 (1 H, quin, J=2.82 Hz), 3.87-3.95 (2 H, m), 1.72 (1 H, br. s.), 1.63 (2 H, dd, J=14.34, 2.14 Hz), 1.39-1.47 (2 H, m), 1.17 (6 H, d, J=6.41 Hz)。13C NMR (126 MHz, CDCl3) δ ppm 67.53 (2 C), 64.71 (1 C), 39.99 (2 C), 21.82 (2 C)。
共同酸前体 -179 ，步骤 d
在室温下将对甲苯磺酰氯(23.52 g，123 mmol)加入到共同酸前体-179，步骤c(8.03 g，61.7 mmol)和吡啶(19.96 mL，247 mmol)在CH2Cl2(750 mL)中的溶液中且搅拌36小时。由于反应未进行完全，在减压下除去CH2Cl2且再继续搅拌48小时。接着将混合物加入到CH2Cl2(100 mL)和水(100 mL)中且在环境温度下搅拌2小时。分离混合物且有机层用1 N盐酸水溶液(2×50 mL)充分洗涤。接着干燥(MgSO4)有机层，过滤且浓缩。分离呈黄色油状的共同酸前体-179，步骤d(14.15 g)，其在真空下凝固为灰白色固体。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.80 (2 H, d, J=8.24 Hz), 7.35 (2 H, d, J=7.93 Hz), 4.88 (1 H, quin, J=2.82 Hz), 3.79-3.87 (2 H, m), 2.46 (3 H, s), 1.76 (2 H, dd, J=14.50, 2.59 Hz), 1.36 (2 H, ddd, J=14.34, 11.60, 2.75 Hz), 1.12 (6 H, d, J=6.10 Hz)。13C NMR (126 MHz, CDCl3) δ ppm 144.64 (1 C), 134.24 (1 C), 129.82 (2 C), 127.61 (2 C), 77.34 (1 C), 67.68 (2 C), 37.45 (2 C), 21.61 (1 C), 21.57 (2 C)。LC-MS: [2M+H]+ C28H41O8S2的分析性计算值：569.22；实验值569.3。
共同酸前体 -179 ，步骤 e
Figure DEST_PATH_IMAGE084
在压力管中在室温下将LiHMDS(29.7 mL，29.7 mmol，1 M在THF中)加入到共同酸前体-179，步骤d(7.05 g，24.8 mmol)和2-(二苯基亚甲基氨基)乙酸苯甲酯(8.57 g，26.0 mmol)在甲苯(80 mL)中的溶液中，接着在100℃搅拌所得混合物5小时。反应物用水(100 mL)淬灭，用EtOAc萃取，用水洗涤，用MgSO4干燥，过滤且在真空中浓缩。通过Biotage®纯化(0%至15% EtOAc/Hex；240 g管柱)残余物且分离呈黄色油状的共同酸前体-179，步骤e的外消旋混合物(8.76 g)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.62-7.71 (2 H, m), 7.30-7.45 (11 H, m), 7.05 (2 H, dd, J=7.65, 1.63 Hz), 5.13-5.22 (2 H, m), 3.89 (1 H, d, J=6.78 Hz), 3.46 (2 H, dquind, J=11.27, 5.90, 2.01 Hz), 2.34-2.45 (1 H, m), 1.58-1.66 (1 H, m), 1.34-1.43 (1 H, m), 1.19 (3 H, d, J=6.02 Hz), 1.03-1.16 (4 H, m), 0.83-0.97 (1 H, m)。13C NMR (101 MHz, CDCl3) δ ppm 170.84 (1 C), 170.68 (1 C), 139.01 (1 C), 135.96 (1 C), 135.51 (1 C), 130.04 (1 C), 128.49 (2 C), 128.20 (1 C), 128.09 (4 C), 127.97 (2 C), 127.85 (1 C), 127.67 (2 C), 127.47 (2 C), 72.76 (1 C), 72.46 (1 C), 69.77 (1 C), 65.99 (1 C), 39.11 (1 C), 35.90 (1 C), 35.01 (1 C), 21.74 (1 C), 21.65 (1 C)。LC-MS [2M+Na]+ C58H62N2NaO6的分析性计算值：905.45；实验值905.42。
共同酸前体 -179 ，步骤 f
Figure DEST_PATH_IMAGE086
将共同酸前体-179，步骤e(8.76 g，19.84 mmol)溶解在THF(100 mL)中且用2 N盐酸水溶液(49.6 mL，99 mmol)处理。在环境温度下搅拌所得澄清溶液4小时，接着在减压下除去THF。剩余水层用EtOAc(3×30 mL)萃取且在真空下浓缩，得到相应粗品胺。将残余物溶解在CH2Cl2(100 mL)中且加入DIEA(11.8 mL，67.6 mmol)和氯甲酸甲酯(1.962 mL，25.3 mmol)。在环境温度下搅拌所得溶液2小时。反应混合物用CH2Cl2(50 mL)稀释且用水(100 mL)和盐水(100 mL)洗涤。干燥(MgSO4)有机层，过滤且浓缩。通过Biotage®纯化(15%至25% EtOAc/Hex；80 g管柱)残余物。回收呈澄清无色油状的外消旋共同酸前体-179，步骤f(5.27 g)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.32-7.41 (5 H, m), 5.13-5.28 (3 H, m), 4.36 (1 H, dd, J=8.16, 4.64 Hz), 3.69 (3 H, s), 3.30-3.47 (2 H, m), 2.00-2.16 (1 H, m), 1.52 (1 H, d, J=12.55 Hz), 1.33 (1 H, d, J=12.30 Hz), 1.15 (6 H, dd, J=6.02, 5.02 Hz), 0.88-1.07 (2 H, m)。13C NMR (101 MHz, CDCl3) δ ppm 171.39 (1 C), 156.72 (1 C), 135.20 (2 C), 128.60 (2 C), 128.57 (1 C), 128.52 (2 C), 72.77 (1 C), 72.74 (1 C), 67.16 (1 C), 57.81 (1 C), 52.40 (1 C), 38.85 (1 C), 35.56 (1 C), 34.25 (1 C), 21.94 (2 C)。LC-MS: [M+H]+ C18H26NO5的分析性计算值：336.18；实验值336.3。
开发一种手性方法在CHIRALPAK® AS-H管柱(50×500 mm，20 μm)上使用20%乙醇作为改性剂来分离外消旋混合物(波长=220 nm，流动速率=100 mL/min(22分钟)，溶剂A=含0.1%二乙胺的庚烷，溶剂B=EtOH)。两种经分离的异构体对应于(S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酸苯甲酯(共同酸前体-179，步骤f.1)(保留时间=9.8分钟，2.2 g)和(R)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酸苯甲酯(共同酸前体-179，步骤f.2)(保留时间=16.4分钟，2.1 g)且其各呈现与相应混合物相同的分析数据(参见上文)。
共同酸前体 -179[(S)- 对映异构体 ]
在Parr瓶中将(S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酸苯甲酯(共同酸前体-179，步骤f.1)(2.2 g，6.6 mmol)溶解在MeOH(50 mL)中且加入10% Pd/C(0.349 g，0.328 mmol)。接着将悬浮液置放在Parr震荡器中且该混合物用N2(3×)冲洗，置放在40 psi H2下且在室温下震荡15小时。经硅藻土垫(Celite®)滤除催化剂且在减压下除去溶剂，得到呈琥珀色固体状的(S)-共同酸前体-179(1.6 g)。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.74 (1 H, br. s.), 7.35 (1 H, d, J=6.10 Hz), 3.85 (1 H, br. s.), 3.53 (3 H, s), 3.35 (2 H, ddd, J=15.95, 9.99, 6.10 Hz), 1.97 (1 H, br. s.), 1.48 (2 H, t, J=13.28 Hz), 1.06 (6 H, d, J=6.10 Hz), 0.82-1.00 (2 H, m)。13C NMR (101 MHz, DMSO-d6) δ ppm 176.93 (1 C), 156.72 (1 C,), 72.10 (1 C), 71.92 (1 C), 58.54 (1 C), 51.35 (1 C), 36.88 (1 C), 35.82 (1 C), 34.71 (1 C), 21.90 (2 C)。注意：通过对(S)-苯乙醇酯衍生物进行单晶X射线分析来指定绝对立体化学。类似地制备共同酸前体-179[(R)-对映异构体]：1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.50 (1 H, br. s.), 7.31 (1 H, br. s.), 3.84 (1 H, t, J=7.32 Hz), 3.53 (3 H, s), 3.29-3.41 (2 H, m), 1.99 (1 H, s), 1.48 (2 H, t, J=14.34 Hz), 1.06 (6 H, d, J=6.10 Hz), 0.95 (1 H, q, J=12.21 Hz), 0.87 (1 H, q, J=11.80 Hz)。[注意：对映异构体的1H NMR概况的较小变化可能是由样品浓度差异所致。]
共同酸前体 -180( 外消旋混合物 )
Figure DEST_PATH_IMAGE088
共同酸前体 -180 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE090
在室温下将对甲苯磺酰氯(4.39 g，23.0 mmol)加入到共同酸前体-179，步骤a(1.50 g，11.5 mmol)和吡啶(3.73 mL，46.1 mmol)在CH2Cl2(50 mL)中的溶液中且搅拌2天。反应物用CH2Cl2稀释，相继用水和1 N HCl洗涤。干燥(MgSO4)有机层且浓缩为黄色油状物，通过BIOTAGE®纯化(5%至20% EtOAc/Hex；40 g管柱)。分离呈澄清油状的共同酸前体-180，步骤a(2.89 g)，其在真空下凝固。LC-MS: [2M+Na]+ C28H40NaO8S2的分析性计算值：591.21；实验值591.3。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.80 (2 H, d, J=8.24 Hz), 7.35 (2 H, d, J=7.93 Hz), 4.59 (1 H, tt, J=11.37, 4.96 Hz), 3.36-3.46 (2 H, m), 2.46 (3 H, s), 1.91 (2 H, dd, J=12.05, 5.04 Hz), 1.37 (2 H, dt, J=12.67, 11.52 Hz), 1.19 (6 H, d, J=6.10 Hz)。
共同酸前体 -180 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE092
在室温下将1 N LiHMDS(7.09 mL，7.09 mmol)加入到共同酸前体-180，步骤a(1.68 g，5.91 mmol)和2-(二苯基亚甲基氨基)乙酸乙酯(1.579 g，5.91 mmol)在甲苯(30 mL)中的溶液中，接着在85℃搅拌所得混合物16小时。反应物用水(50 mL)淬灭，用EtOAc萃取，用水洗涤，用MgSO4干燥，过滤且在真空中浓缩。通过BIOTAGE®纯化(0%至15% EtOAc/Hex；40 g管柱)残余物。分离呈澄清浅黄色油状的共同酸前体-180，步骤b(外消旋混合物；0.64 g)。LC-MS: [M+H]+ C24H30NO3的分析性计算值：380.22；实验值380.03。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.64-7.70 (2 H, m), 7.45-7.51 (3 H, m), 7.38-7.44 (1 H, m), 7.31-7.37 (2 H, m), 7.13-7.19 (2 H, m), 4.39 (1 H, d, J=10.54 Hz), 4.16-4.26 (2 H, m), 3.29-3.39 (1 H, m), 2.93-3.03 (1 H, m), 2.70 (1 H, m, J=9.41, 4.14 Hz), 1.42-1.49 (2 H, m), 1.31-1.37 (1 H, m), 1.29 (4 H, t, J=7.15 Hz), 1.04 (6 H, dd, J=7.78, 6.27 Hz)。
共同酸前体 -180 ，步骤 c
将共同酸前体-180，步骤b(0.36 g，0.949 mmol)溶解在THF(10 mL)中且用2 N HCl(1.897 mL，3.79 mmol)处理。在环境温度下搅拌所得澄清溶液20小时且在减压下除去THF。剩余水层用己烷(3×20 mL)萃取且在用H2O(20 mL)稀释后，水相用1 N NaOH碱化至pH=10且用EtOAc(3×10 mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤且在真空下浓缩。将所得残余物溶解在CH2Cl2(10.00 mL)中且加入DIEA(0.497 mL，2.85 mmol)和氯甲酸甲酯(0.081 mL，1.044 mmol)。在环境温度下搅拌所得溶液2小时且反应混合物用水(10 mL)淬灭且在减压下除去有机层。水层用EtOAc(3×10 mL)萃取且干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤且浓缩。回收，得到呈琥珀色油状的共同酸前体-180，步骤c(0.21 g)且其未经进一步纯化即使用。LC-MS: [M+H]+ C13H24NO5的分析性计算值：273.17；实验值274.06。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.20 (1 H, d, J=8.03 Hz), 4.59 (1 H, t, J=10.16 Hz), 4.11-4.27 (3 H, m), 3.69-3.82 (2 H, m), 3.64 (3 H, s), 1.95-2.07 (1 H, m), 1.63 (1 H, d, J=13.80 Hz), 1.41 (2 H, dd, J=8.03, 4.02 Hz), 1.31-1.37 (1 H, m), 1.26 (3 H, t, J=7.15 Hz), 1.16 (1 H, d, J=6.27 Hz), 1.12 (6 H, dd, J=6.15, 3.89 Hz)。
共同酸前体 -180( 外消旋混合物 )
将共同酸前体-180，步骤c(0.32 g，1.2 mmol)溶解在THF(10 mL)中且在0℃加入含LiOH(0.056 g，2.342 mmol)的水(3.33 mL)。在室温下搅拌所得溶液2小时。在减压下除去THF且剩余残余物用水(15 mL)稀释且用Et2O(2×10 mL)洗涤。接着用1 N HCl酸化水层至pH值约为2且用EtOAc(3×15 mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤且在真空下浓缩，得到呈白色泡沫状的共同酸前体-180(外消旋混合物)(0.2 g)。LC-MS: [M+H]+ C11H20NO5的分析性计算值：246.13；实验值246.00。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.14 (1 H, d, J=9.03 Hz), 4.65 (1 H, t, J=9.91 Hz), 3.63-3.89 (5 H, m), 1.99-2.13 (1 H, m), 1.56-1.73 (2 H, m), 1.48-1.55 (1 H, m), 1.35-1.48 (1 H, m), 1.27 (1 H, br. s.), 1.17 (6 H, d, J=6.02 Hz)。
共同酸前体 -181
Figure DEST_PATH_IMAGE096
共同酸前体 -181 ，步骤 a
重氮乙酸叔丁酯(1.832 mL，13.22 mmol)在50 mL CH2Cl2中的溶液由注射泵经5小时逐滴加入到2,5-二氢呋喃(9.76 mL，132 mmol)、乙酸铑(II)二聚体(0.058 g，0.132 mmol)在40 mL CH2Cl2中的混合物中。接着在室温下搅拌所得混合物过夜。在真空下除去溶剂。通过层析(硅胶，0%-15% EtOAc/Hex)纯化残余物，得到呈澄清油状的共同酸前体-181步骤a(反式异构体)(720 mg)和共同酸前体-181，步骤a(顺式异构体)(360 mg)。共同酸前体-181步骤a(反式异构体)：1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 3.88 (2 H, d, J=8.55 Hz), 3.70 (2 H, d, J=8.55 Hz), 2.03-2.07 (2 H, m), 1.47 (1 H, t, J=3.20 Hz), 1.41 (9 H, s)；共同酸前体-181步骤a(顺式异构体)：1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 4.06 (2 H, d, J=8.53 Hz), 3.73 (2 H, d, J=8.03 Hz), 1.81-1.86 (2 H, m), 1.65-1.71 (1 H, m), 1.43-1.47 (9 H, m)。
共同酸前体 -181 ，步骤 b
在-10℃下经1小时向(共同酸前体-181，步骤a(反式异构体))(700 mg，3.80 mmol)在15 mL乙醚中的溶液中逐滴加入LiAlH4(7.60 mL，7.60 mmol)(1 M在THF中)。在-10℃搅拌所得混合物1小时接着在室温下搅拌1小时。接着冷却混合物至-5℃。逐滴加入10 mL洛歇尔盐(Rochelle's salt)(酒石酸钾钠)水溶液以淬灭反应物。在室温下搅拌混合物30分钟，接着用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到呈浅黄色油状的共同酸前体-181，步骤b(380 mg)。产物未经纯化即用于下一步骤。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3.85 (2 H, d, J=8.28 Hz), 3.68 (2 H, d, J=8.53 Hz), 3.45-3.55 (2 H, m), 1.50-1.56 (2 H, m), 1.02-1.11 (1 H, m)。
共同酸前体 -181 ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE102
在-78℃向DMSO(4.82 mL，67.9 mmol)在CH2Cl2(70 mL)中的溶液中逐滴加入乙二酰氯(3.14 mL，35.8 mmol)。在-78℃搅拌所得混合物15分钟。加入共同酸前体-181，步骤b(3.10 g，27.2 mmol)在35 mL CH2Cl2中的溶液且在-78℃搅拌混合物1小时。接着逐滴加入Et3N(18.93 mL，136 mmol)。30分钟后，除去冷却浴且反应物用冷20% K2HPO4水溶液(10 mL)和水淬灭。在室温下搅拌混合物15分钟，接着用Et2O稀释。分离各层。用Et2O(2×)萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，100% CH2Cl2)纯化残余物，得到呈浅黄色油状的共同酸前体-181，步骤c(2.71 g)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 9.41 (1 H, d, J=4.27 Hz), 3.96 (2 H, d, J=8.85 Hz), 3.80 (2 H, d, J=8.55 Hz), 2.27-2.33 (2 H, m), 1.93 (1 H, m)。
共同酸前体 -181 ，步骤 d
在0℃向共同酸前体-181，步骤c(2.7 g，24.08 mmol)在50 mL水中的混合物中加入亚硫酸氢钠(2.506 g，24.08 mmol)和KCN(1.631 g，25.04 mmol)，接着加入(R)-2-氨基-2-苯乙醇(3.30 g，24.08 mmol)在18 mL MeOH中的溶液。在室温下搅拌所得混合物2小时，接着加热至回流过夜。冷却混合物至室温。加入100 mL EtOAc。混合15分钟后，分离各层。用EtOAc(2×)萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥且浓缩。通过反相HPLC(管柱：Water Sunfire 30×150 mm，乙腈/水/NH4OAc)纯化粗品非对映异构混合物，得到共同酸前体-181，步骤d的两种非对映异构体。未测定各异构体的绝对立体化学。非对映异构体1(后一洗脱级分)(570 mg)：LC-MS: [M+H]+ C15H19N2O2的分析性计算值259.14；实验值259.2。
共同酸前体 -181 ，步骤 e
在0℃向共同酸前体-181，步骤d(非对映异构体1)(570 mg，2.207 mmol)在20 mL CH2Cl2和20 mL MeOH中的溶液中加入四乙酸铅(1174 mg，2.65 mmol)。在0℃搅拌所得橙色混合物10分钟。接着向混合物中加入水(20 mL)且滤出(CELITE®)混合物。浓缩滤液且用25 mL 6 N盐酸水溶液稀释。使所得混合物回流4小时。滤出混合物且用CH2Cl2洗涤。浓缩水层，得到共同酸前体-181，步骤e(盐酸盐)。粗品产物未经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR (500 MHz, MeOD) δ ppm 3.87-3.91 (2 H, m), 3.73 (2 H, dd, J=8.70, 2.90 Hz), 3.55 (1 H, d, J=10.07 Hz), 2.02-2.07 (1 H, m), 1.94-1.99 (1 H, m), 1.03-1.10 (1 H, m)。
共同酸前体 -181
向上述粗品共同酸前体-181，步骤e在1 N NaOH水溶液(10 mL)中的混合物中加入碳酸氢钠(371 mg，4.42 mmol)。接着逐滴加入氯甲酸甲酯(0.342 mL，4.42 mmol)且在室温下搅拌所得混合物3小时。混合物用1 N盐酸水溶液中和且用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到呈浅黄色油状的共同酸前体-181(100 mg，21%，经过两步)。LC-MS: [M+H]+ C9H14NO5的分析性计算值216.09；实验值216.1。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.29 (1 H, br. s.), 3.53-4.02 (8 H, m), 1.66-1.92 (2 H, m), 1.08 (1 H, br. s.)。
共同酸前体 -182( 外消旋混合物 )
Figure DEST_PATH_IMAGE108
共同酸前体 -182 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE110
在室温下搅拌环戊-3-烯醇(5 g，59.4 mmol)和Et3N(9.94 mL，71.3 mmol)在50 mL CH2Cl2中的溶液15分钟。接着逐滴加入苯甲酰氯(8.28 mL，71.3 mmol)且在室温下搅拌混合物过夜。接着用水洗涤混合物且有机层用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，EtOAc/Hex 0-10%)纯化残余物，得到呈澄清油状的共同酸前体-182，步骤a(9.25 g)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.01-8.07 (2 H, m), 7.55 (1 H, t, J=7.40 Hz), 7.43 (2 H, t, J=7.65 Hz), 5.79 (2 H, s), 5.64 (1 H, tt, J=6.93, 2.60 Hz), 2.87 (2 H, dd, J=16.56, 6.78 Hz), 2.52-2.63 (2 H, m)。
共同酸前体 -182 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE112
向具有磁性搅拌棒的圆底烧瓶中加入氟化钠(5.02 mg，0.120 mmol)和共同酸前体-182，步骤a(2.25 g，11.95 mmol)。将烧瓶加热至100℃且由注射泵经5小时缓慢加入纯2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸三甲基硅烷酯(5.89 mL，29.9 mmol)，且在100℃加热过夜。接着混合物用CH2Cl2稀释，用水、NaHCO3饱和水溶液和盐水洗涤，用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-5% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈澄清油状的共同酸前体-182，步骤b(异构体1)(750 mg)和共同酸前体-182，步骤b(异构体2)(480 mg)。通过NOE研究来指定相关立体化学。共同酸前体-182，步骤b(异构体1)：LC-MS: [M+H]+ C13H13F2O2的分析性计算值239.09；实验值239.2。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.99-8.04 (2 H, m), 7.56 (1 H, t, J=7.32 Hz), 7.43 (2 H, t, J=7.63 Hz), 5.25-5.33 (1 H, m), 2.50 (2 H, dd, J=14.04, 6.71 Hz), 2.14-2.22 (2 H, m), 2.08-2.14 (2 H, m)。共同酸前体-182，步骤b(异构体2)：LC-MS: [M+H]+ C13H13F2O2的分析性计算值239.09；实验值239.2。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.98-8.08 (2 H, m), 7.53-7.59 (1 H, m), 7.41-7.48 (2 H, m), 5.53-5.62 (1 H, m), 2.59-2.70 (2 H, m), 2.01-2.11 (4 H, m)。
共同酸前体 -182 ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE114
向共同酸前体-182，步骤b(异构体2)(480 mg，2.015 mmol)在4 mL MeOH中的溶液中加入KOH(4 mL，2.015 mmol)(10%水溶液)。在室温下搅拌所得混合物过夜。接着用CH2Cl2(3×)萃取混合物。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到呈浅黄色固体状的共同酸前体-182，步骤c(220 mg)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 4.41-4.54 (1 H, m), 2.38-2.50 (2 H, m), 1.89-1.99 (2 H, m), 1.81 (2 H, dd, J=14.50, 5.04 Hz)。
共同酸前体 -182 ，步骤 d
将对甲苯磺酰氯(625 mg，3.28 mmol)加入到共同酸前体-182，步骤c(220 mg，1.640 mmol)和吡啶(0.531 mL，6.56 mmol)在7 mL CH2Cl2中的溶液中。在室温下搅拌混合物过夜，接着用CH2Cl2稀释，用水和1 N盐酸水溶液洗涤。干燥(MgSO4)有机层且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-15% EtOAc/己烷)纯化残余物，得到呈澄清油状的共同酸前体-182，步骤d(325 mg)。LC-MS: [M+Na]+ C13H14F2NaO3S的分析性计算值311.05；实验值311.2。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.76 (2 H, d, J=8.24 Hz), 7.34 (2 H, d, J=8.24 Hz), 4.99-5.08 (1 H, m), 2.45 (3 H, s), 2.31-2.41 (2 H, m), 1.84-1.94 (4 H, m)。
共同酸前体 -182 ，步骤 e( 外消旋混合物 )
Figure DEST_PATH_IMAGE118
向微波管中加入含N-(二苯基亚甲基)甘氨酸乙酯(241 mg，0.902 mmol)和共同酸前体-182，步骤d(260 mg，0.902 mmol)的2 mL甲苯。密封微波管且在N2下逐滴加入LiHMDS(1.082 mL(1 N在THF中)，1.082 mmol)。在微波中100℃加热所得暗褐色溶液5小时。接着混合物用水淬灭且用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用水洗涤，用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-5% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈浅黄色油状的共同酸前体-182，步骤e的外消旋混合物(240 mg)。混合物未经分离即用于下一步骤。LC-MS: [M+H]+ C23H24F2NO2的分析性计算值384.18，实验值384.35。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.63-7.70 (2 H, m), 7.43-7.51 (3 H, m), 7.38-7.43 (1 H, m), 7.31-7.38 (2 H, m), 7.13-7.22 (2 H, m), 4.13-4.22 (2 H, m), 3.95 (1 H, d, J=6.41 Hz), 2.67-2.79 (1 H, m), 2.07-2.16 (1 H, m), 1.97-2.07 (2 H, m), 1.90 (2 H, m), 1.65-1.76 (1 H, m), 1.25 (3 H, t, J=7.17 Hz)。
共同酸前体 -182 ，步骤 f( 外消旋混合物 )
Figure DEST_PATH_IMAGE120
向共同酸前体-182，步骤e(240 mg，0.626 mmol)在4 mL THF中的溶液中加入HCl(1 mL，2.0 mmol)(2 N水溶液)。在室温下搅拌所得混合物2小时。接着混合物用EtOAc洗涤，用NaHCO3饱和水溶液中和，接着用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到呈澄清油状的共同酸前体-182，步骤f(120 mg)。LC-MS: [M+H]+ C10H16F2NO2的分析性计算值220.11；实验值220.26。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 4.14-4.25 (2 H, m), 3.26 (1 H, d, J=6.71 Hz), 2.22-2.35 (1 H, m), 1.90-2.11 (5 H, m), 1.79-1.90 (1 H, m), 1.22-1.34 (3 H, m)。
共同酸前体 -182 ，步骤 g( 外消旋混合物 )
Figure DEST_PATH_IMAGE122
向共同酸前体-182，步骤f(120 mg，0.547 mmol)在2 mL CH2Cl2中的溶液中加入氯甲酸甲酯(0.085 mL，1.095 mmol)。在室温下搅拌所得混合物1小时。混合物用CH2Cl2稀释且用水洗涤。有机层用Na2SO4干燥且浓缩，得到呈白色固体状的共同酸前体-182，步骤g(150 mg)。LC-MS: [M+H]+ C12H18F2NO4的分析性计算值278.12；实验值278.2。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.23 (1 H, d, J=8.24 Hz), 4.29 (1 H, t, J=7.48 Hz), 4.15-4.23 (2 H, m), 3.68 (3 H, s), 2.37 (1 H, br. s.), 2.02-2.10 (1 H, m), 1.85-2.00 (4 H, m), 1.75-1.84 (1 H, m), 1.27 (3 H, t, J=7.02 Hz)。
共同酸前体 -182( 外消旋混合物 )
向共同酸前体-182，步骤g(150 mg，0.541 mmol)在2 mL THF和1 mL水中的混合物中加入LiOH(0.811 mL，1.623 mmol)(2 N水溶液)。在室温下搅拌所得混合物过夜。混合物用1 N盐酸水溶液中和且用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到呈白色固体状的共同酸前体-182(133 mg)。LC-MS: [M+H]+ C10H14F2NO4的分析性计算值250.09；实验值250.13。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.18-5.36 (1 H, m), 4.28-4.44 (1 H, m), 3.70 (3 H, s), 2.37-2.56 (1 H, m), 1.74-2.31 (6 H, m)。
共同酸前体 -183( 外消旋混合物 )
Figure DEST_PATH_IMAGE124
根据关于共同酸前体-182的制备所描述的程序自共同酸前体-182，步骤b(异构体1)合成共同酸前体-183。[M+H]+ C10H14F2NO4的分析性计算值250.09，实验值249.86。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.15 (1 H, d, J=8.24 Hz), 4.32 (1 H, t, J=7.48 Hz), 3.69 (3 H, s), 2.83-2.99 (1 H, m), 1.96-2.26 (4 H, m), 1.70 (1 H, t, J=11.75 Hz), 1.59 (1 H, t, J=12.05 Hz)。
共同酸前体 -184( 外消旋混合物 )
Figure DEST_PATH_IMAGE126
共同酸前体 -184 ，步骤 a
在室温下搅拌2-氨基-2-((1R,3r,5S)-双环[3.1.0]己-3-基)乙酸乙酯(使用与关于共同酸前体-182的制备所描述相同的程序自市售(1R,3r,5S)-双环[3.1.0]己-3-醇制备；350 mg，1.910 mmol)、DiPEA(0.667 mL，3.82 mmol)、氯甲酸甲酯(0.296 mL，3.82 mmol)在5 mL CH2Cl2中的混合物1小时。接着混合物用CH2Cl2稀释且用水洗涤。有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到呈黄色油状的共同酸前体-184，步骤a(461 mg)。LC-MS: [M+H]+ C12H20NO4的分析性计算值242.14；实验值242.2。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.04 (1 H, d, J=7.63 Hz), 4.09-4.20 (2 H, m), 4.05 (1 H, t, J=8.39 Hz), 3.63 (3 H, s), 2.55-2.70 (1 H, m), 1.96-2.09 (2 H, m), 1.37-1.60 (4 H, m), 1.24 (3 H, t, J=7.17 Hz), 0.66-0.76 (1 H, m), -0.03-0.06 (1 H, m)。
共同酸前体 -184( 外消旋混合物 )
向共同酸前体-184，步骤a(461 mg，1.911 mmol)在5 mL THF和2 mL水中的混合物中加入LiOH(2.87 mL，5.73 mmol)(2 N水溶液)。在室温下搅拌所得混合物过夜。接着混合物用1 N盐酸水溶液中和且用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到呈澄清油状的共同酸前体-184(350 mg)。LC-MS: [2M+Na]+ C20H30N2NaO8的分析性计算值449.19；实验值449.3。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.07 (1 H, d, J=8.85 Hz), 4.13 (1 H, t, J=8.24 Hz), 3.68 (3 H, s), 2.64-2.79 (1 H, m), 2.04-2.21 (2 H, m), 1.23-1.49 (4 H, m), 0.71-0.81 (1 H, m), 0.03-0.12 (1 H, m)。
共同酸前体 -185( 对映异构体 -1 和对映异构体 -2)
Figure DEST_PATH_IMAGE130
共同酸前体 -185 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE132
在黑暗中经1小时向呋喃(1.075 mL，14.69 mmol)和锌(1.585 g，24.24 mmol)在1 mL THF中的混合物中逐滴加入含1,1,3,3-四溴丙-2-酮(8.23 g，22.03 mmol)和硼酸三乙酯(5.25 mL，30.8 mmol)的4 mL THF。在黑暗中在室温下搅拌所得混合物17小时。冷却所得暗褐色混合物至-15℃且加入6 mL水。将混合物温至0℃且在此温度下搅拌30分钟。接着过滤混合物且用乙醚(ether)洗涤。滤液用水稀释且用乙醚(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到暗褐色油状物。将暗褐色油状物溶解在6 mL MeOH中且将溶液逐滴加入到锌(4.99 g，76 mmol)、氯化铜(I)(0.756 g，7.64 mmol)和氯化铵(5.4 g，101 mmol)在20 mL MeOH中的混合物中。在加入期间维持反应温度低在15℃。接着在室温下搅拌混合物20小时，过滤且滤液用水稀释且用CH2Cl2(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-14% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈白色固体状的共同酸前体-185，步骤a(1.0 g)，其很快变为黄色。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 6.24 (2 H, s), 5.01 (2 H, d, J=4.88 Hz), 2.73 (2 H, dd, J=16.94, 5.04 Hz), 2.31 (2 H, d, J=16.79 Hz)。
共同酸前体 -185 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE134
在-78℃下经100分钟向共同酸前体-185，步骤a(240 mg，1.933 mmol)在2 mL THF中的溶液中逐滴加入锂硼化物(L-selectride，3.87 mL，3.87 mmol)(1 M在THF中)。在-78℃搅拌所得混合物1小时，接着在室温下搅拌过夜。接着冷却混合物至0℃，加入4 mL 20% NaOH水溶液，接着逐滴加入2 mL H2O2(30%水溶液)。搅拌所得混合物1小时，接着用6 N HCl(约5 mL)中和。用NaCl使水层饱和且用CH2Cl2(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-40% EtOAc/ Hex)纯化粗品产物，得到呈澄清油状的共同酸前体-185，步骤b(180 mg)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 6.49 (2 H, s), 4.76 (2 H, d, J=4.27 Hz), 3.99 (1 H, t, J=5.77 Hz), 2.29 (2 H, ddd, J=15.18, 5.65, 4.02 Hz), 1.70-1.78 (2 H, m)。
共同酸前体 -185 ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE136
将对甲苯磺酰氯(544 mg，2.85 mmol)加入到共同酸前体-185，步骤b(180 mg，1.427 mmol)和吡啶(0.462 mL，5.71 mmol)在5 mL CH2Cl2(5 mL)中的溶液中且在室温下搅拌混合物2天。反应物用CH2Cl2稀释且用1 N盐酸水溶液洗涤。水层用CH2Cl2(2×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-15% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈白色固体状的共同酸前体-185，步骤c(210 mg)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.73 (2 H, d, J=8.24 Hz), 7.32 (2 H, d, J=8.24 Hz), 6.25 (2 H, s), 4.76 (1 H, t, J=5.65 Hz), 4.64 (2 H, d, J=3.66 Hz), 2.44 (3 H, s), 2.18 (2 H, td, J=10.07, 5.49 Hz), 1.71 (2 H, d, J=15.56 Hz)。
共同酸前体 -185 ，步骤 d
Figure DEST_PATH_IMAGE138
向微波管中装入含2-(二苯基亚甲基氨基)乙酸苯甲酯(1.5 g，4.57 mmol)和共同酸前体-185，步骤c(1.28 g，4.57 mmol)的5 mL甲苯。密封微波管且在N2下逐滴加入LiHMDS(5.5 mL，5.50 mmol)(1 N在甲苯中)。在微波中100℃加热所得暗褐色溶液5小时。接着向混合物中加入水和EtOAc。分离各层且用EtOAc(2×)萃取水相。浓缩合并的有机层，得到共同酸前体-185，步骤d的外消旋混合物。粗品混合物未经纯化或分离即用于下一步骤。LC-MS: [M+H]+ C29H28NO3的分析性计算值438.21；实验值438.4。
共同酸前体 -185 ，步骤 e
Figure DEST_PATH_IMAGE140
向共同酸前体-185，步骤d的外消旋混合物在30 mL THF中的溶液中加入HCl(20 mL)(2 N水溶液)。在室温下搅拌所得混合物2小时。在通过TLC判定反应完成后，分离两层。水层用EtOAc洗涤，用NaHCO3饱和水溶液中和，接着用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到共同酸前体-185，步骤e。LC-MS: [M+H]+ C16H20NO3的分析性计算值274.14；实验值274.12。
共同酸前体 -185 ，步骤 f
Figure DEST_PATH_IMAGE142
在室温下搅拌粗品共同酸前体-185，步骤e、DiPEA(1.24 mL，7.1 mmol)和氯甲酸甲酯(0.55 mL，7.1 mmol)在5 mL CH2Cl2中的溶液1小时。接着混合物用CH2Cl2稀释且用水洗涤。有机层用Na2SO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-40% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到700 mg外消旋混合物。接着通过手性HPLC(CHIRALPAK® AD-H管柱，30×250 mm，5 μm)，用88% CO2-12% EtOH以70 mL/min洗脱来分离混合物，得到呈白色固体状的共同酸前体-1，步骤f的对映异构体-1(240 mg)和对映异构体-2(310 mg)。对映异构体-1：LC-MS: [M+H]+ C18H22NO5的分析性计算值332.15；实验值332.3。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.30-7.40 (5 H, m), 6.03-6.16 (2 H, m), 5.09-5.26 (3 H, m), 4.65-4.74 (2 H, m), 4.33 (1 H, dd, J=9.16, 4.88 Hz), 3.67 (3 H, s), 2.27-2.38 (1 H, m), 1.61-1.69 (1 H, m), 1.45-1.56 (1 H, m), 1.34 (1 H, dd, J=13.43, 5.19 Hz), 1.07 (1 H, dd, J=13.12, 5.19 Hz)。对映异构体-2：LC-MS: [M+H]+ C18H22NO5的分析性计算值332.15；实验值332.06。
共同酸前体 -185( 对映异构体 -1 和对映异构体 -2)
在氮气氛围下向含有共同酸前体-185，步骤f(对映异构体-2)(300 mg，0.905 mmol)在10 mL MeOH中的溶液的氢化瓶中加入Pd/C(15 mg，0.141 mmol)。在Parr震荡器上在40 psi下氢化混合物3小时。接着过滤混合物且浓缩滤液，得到呈白色固体状的共同酸前体-185(对映异构体-2) (200 mg)。LC-MS: [M+H]+ C11H18NO5的分析性计算值244.12；实验值244.2。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.33 (1 H, br. s.), 4.46 (2 H, d), 4.28 (1 H, br. s.), 3.68 (3 H, s), 2.35 (1 H, br. s.), 1.91-2.03 (2 H, m), 1.56-1.80 (4 H, m), 1.36-1.55 (2 H, m)。[注意：可以类似方式获得共同酸前体-185(对映异构体-1)。]
共同酸前体 -186
Figure DEST_PATH_IMAGE144
向酯共同酸前体-185，步骤f(对映异构体-2)(150 mg，0.453 mmol)在4 mL MeOH中的溶液中加入NaOH(4 mL(1 N在水中)，4.00 mmol)。在室温下搅拌所得混合物3小时。接着在真空下除去甲醇且残余物用1 N HCl溶液中和并用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到受一些苯甲醇污染的共同酸前体-186(粘性白色固体；115 mg)。LC-MS: [M+H]+ C11H16NO5的分析性计算值242.10；实验值242.1。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 6.10-6.19 (2 H, m), 5.36 (1 H, d, J=8.85 Hz), 4.75-4.84 (2 H, m), 4.28 (1 H, dd, J=8.55, 4.58 Hz), 3.68 (3 H, s), 2.33-2.45 (1 H, m), 1.60-1.72 (2 H, m), 1.30-1.48 (2 H, m)。
共同酸前体 -187
Figure DEST_PATH_IMAGE146
共同酸前体 -187 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE148
向共同酸前体-178，步骤e(2.2 g，18.94 mmol)、PPh3(24.84 g，95 mmol)和4-硝基苯甲酸(14.24 g，85 mmol)在30 mL苯中的溶液中逐滴加入DEAD(42.9 mL，95 mmol)。在室温下搅拌所得浅橙色溶液过夜。接着在真空下除去溶剂且通过快速层析(硅胶，0-15% EtOAc/Hex)纯化残余物，得到呈白色固体状的共同酸前体-187，步骤a(2.3 g)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 8.27-8.34 (2 H, m), 8.20-8.26 (2 H, m), 5.45 (1 H, t, J=2.90 Hz), 3.83-3.96 (3 H, m), 1.90-2.03 (2 H, m), 1.80-1.88 (1 H, m), 1.61-1.70 (1 H, m), 1.21 (3 H, d, J=6.10 Hz)。
共同酸前体 -187 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE150
向共同酸前体-187，步骤a(2.3 g，8.67 mmol)在10 mL MeOH中的溶液中加入甲醇钠(2.372 mL，8.67 mmol)(25%在甲醇中)。在室温下搅拌所得混合物3小时。加入水且混合物用EtOAc(5×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-15% EtOAc/Hex，接着15%-50% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈澄清油状的共同酸前体-187，步骤b(0.85 g)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 4.19-4.23 (1 H, m), 3.82-3.91 (2 H, m), 3.73-3.79 (1 H, m), 1.79-1.88 (1 H, m), 1.62-1.68 (1 H, m), 1.46-1.58 (2 H, m), 1.14 (3 H, d, J=6.10 Hz)。
共同酸前体 -187
根据关于共同酸前体-178所描述的程序自共同酸前体-187，步骤b合成共同酸前体-187的个别非对映异构体。LC-MS: [M+H]+ C10H18NO5的分析性计算值232.12；实验值232.1。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.26 (1 H, d, J=7.78 Hz), 4.32-4.43 (1 H, m), 4.07 (1 H, dd, J=11.54, 3.51 Hz), 3.72 (3 H, s), 3.39-3.50 (2 H, m), 2.08-2.23 (1 H, m), 1.54-1.68 (1 H, m), 1.38-1.52 (1 H, m), 1.11-1.32 (5 H, m)。
共同酸前体 -188(4 种立体异构体 )
共同酸前体 -188 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE154
向2,2-二甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(2 g，15.60 mmol)在50 mL MeOH中的溶液中缓慢加入硼氢化钠(0.649 g，17.16 mmol)。在室温下搅拌所得混合物3小时。接着向混合物中加入1 N盐酸水溶液直至其进入酸性pH值范围，接着用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到呈澄清油状的共同酸前体-188，步骤a(1.9 g)。产物未经纯化即用于下一步骤。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3.91-4.02 (1 H, m), 3.79-3.86 (1 H, m), 3.63 (1 H, td, J=12.05, 2.51 Hz), 1.82-1.93 (2 H, m), 1.40-1.53 (1 H, m), 1.29-1.38 (1 H, m), 1.27 (3 H, s), 1.20 (3 H, s)。
共同酸前体 -188.1 和共同酸前体 -188.2 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE156
将对甲苯磺酰氯(5.56 g，29.2 mmol)加入到共同酸前体-188，步骤a(1.9 g，14.59 mmol)和吡啶(4.72 mL，58.4 mmol)在100 mL CH2Cl2中的溶液中。在室温下搅拌所得混合物3天。向反应物中加入10 mL水且再在室温下搅拌混合物1小时。分离两层且有机相用水和1 N盐酸水溶液洗涤。有机相用MgSO4干燥且浓缩，得到呈浅黄色固体状的两种对映异构体的混合物。通过手性HPLC(CHIRALPAK® AD管柱，21×250 mm，10 μm)，用92% 0.1%二乙胺/庚烷-8% EtOH以15 mL/min洗脱来分离混合物，得到共同酸前体-188.1，步骤b(1.0 g)和共同酸前体-188.2，步骤b(1.0 g)。未指定两种对映异构体的绝对立体化学。共同酸前体-188.1，步骤b：LC-MS: [2M+Na]+ C28H40NaO8S2的分析性计算值591.21；实验值591.3。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.79 (2 H, d, J=8.24 Hz), 7.34 (2 H, d, J=8.24 Hz), 4.72-4.81 (1 H, m), 3.78 (1 H, dt, J=12.44, 4.16 Hz), 3.53-3.61 (1 H, m), 2.45 (3 H, s), 1.75-1.86 (2 H, m), 1.61-1.71 (1 H, m), 1.52-1.60 (1 H, m), 1.22 (3 H, s), 1.14 (3 H, s)。共同酸前体-188.2，步骤b：LC-MS: [2M+Na]+ C28H40NaO8S2的分析性计算值591.21；实验值591.3。
共同酸前体 -188
可根据关于共同酸前体-178的制备所描述的程序自共同酸前体-188.1，步骤b和共同酸前体-188.2，步骤b合成共同酸前体-188的4种立体异构体。共同酸前体-188(立体异构体-1)：LC-MS: [M+Na]+ C11H19NNaO5的分析性计算值268.12；实验值268.23。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.32 (1 H, d, J=8.55 Hz), 4.26-4.35 (1 H, m), 3.57-3.82 (5 H, m), 2.11-2.34 (1 H, m), 1.25-1.58 (4 H, m), 1.21 (6 H, d, J=6.10 Hz)。共同酸前体-188(立体异构体-2)：LC-MS: [M+H]+ C11H20NO5的分析性计算值246.13；实验值246.1。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.25 (1 H, d, J=8.55 Hz), 4.33 (1 H, dd, J=8.39, 5.04 Hz), 3.80 (1 H, dd, J=11.90, 3.97 Hz), 3.62-3.76 (4 H, m), 2.20-2.32 (1 H, m), 1.52-1.63 (1 H, m), 1.27-1.49 (3 H, m), 1.22 (6 H, d, J=14.04 Hz)。
共同酸前体 -189
Figure DEST_PATH_IMAGE158
共同酸前体 -189 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE160
向溴化苯基镁(113 mL，340 mmol)(3 M在乙醚中)在100 mL乙醚中的溶液中逐滴加入含外-2,3-环氧降莰烷(25 g，227 mmol)的50 mL乙醚。最初放热后，加热混合物至回流过夜。接着冷却反应物至室温且用水(约10 mL)小心淬灭。混合物用乙醚稀释且用3 N盐酸水溶液(约160 mL)洗涤。水层用乙醚(2×)萃取且合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-18% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到共同酸前体-189，步骤a(11 g)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 6.03-6.11 (2 H, m), 3.76 (1 H, d, J=11.29 Hz), 2.72-2.81 (2 H, m), 1.98 (1 H, d, J=11.29 Hz), 1.67-1.76 (2 H, m), 0.90-0.97 (2 H, m)。
共同酸前体 -189 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE162
在-78℃向乙二酰氯(59.9 mL，120 mmol)在200 mL CH2Cl2中的溶液中加入含DMSO(17.01 mL，240 mmol)的100 mL CH2Cl2。搅拌混合物10分钟且相继加入含共同酸前体-189，步骤a(11 g，100 mmol)的150 mL CH2Cl2和含Et3N(72.4 mL，519 mmol)的30 mL CH2Cl2。在-78℃搅拌混合物30分钟，接着温至室温。加入水(150 mL)且在室温下搅拌混合物30分钟。接着分离两层且水层用CH2Cl2(2×)萃取。合并有机层，用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-5% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈浅黄色油状的共同酸前体-189，步骤b(5.3 g)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 6.50-6.55 (2 H, m), 2.78-2.84 (2 H, m), 1.92-1.99 (2 H, m), 1.17-1.23 (2 H, m)。
共同酸前体 -189 ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE164
使共同酸前体-189，步骤b(5.3 g，49.0 mmol)、单水合对甲苯磺酸(1.492 g，7.84 mmol)和乙二醇(4.10 mL，73.5 mmol)在100 mL苯中的混合物回流4小时，接着在室温下搅拌过夜。使反应物在Et2O与NaHCO3饱和水溶液之间分配，且分离两层。有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-6% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈澄清油状的共同酸前体-189，步骤c(5.2 g)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 6.20 (2 H, t, J=2.13 Hz), 3.90-3.97 (2 H, m), 3.81-3.89 (2 H, m), 2.54 (2 H, m), 1.89-1.99 (2 H, m), 0.95-1.03 (2 H, m)。
共同酸前体 -189 ，步骤 d
Figure DEST_PATH_IMAGE166
冷却共同酸前体-189，步骤c(5.2 g，34.2 mmol)在60 mL MeOH和50 mL CH2Cl2中的溶液至-78℃且用臭氧气体处理直至出现淡蓝色。接着反应物用N2鼓泡以除去过量臭氧气体(蓝色消失)且将硼氢化钠(1.939 g，51.3 mmol)加入到反应物中。接着使反应物温至0℃。将丙酮加入到混合物中以淬灭过量硼氢化钠。浓缩混合物且通过快速层析(硅胶，100% EtOAc)纯化残余物，得到呈澄清油状的共同酸前体-189，步骤d(5.0 g)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3.99-4.09 (4 H, m), 3.68 (4 H, m), 2.17-2.29 (2 H, m), 1.92-2.10 (2 H, m), 1.77-1.88 (2 H, m), 1.57-1.70 (2 H, m)。
共同酸前体 -189 ，步骤 e
Figure DEST_PATH_IMAGE168
向共同酸前体-189，步骤d(1 g，5.31 mmol)在20 mL CH2Cl2中的溶液中加入氧化银(3.8 g)、对甲苯磺酰氯（p-TsCl）（1.215 g，6.38 mmol)和KI(0.176 g，1.063 mmol)。在室温下搅拌所得溶液3天。接着过滤混合物且浓缩滤液。通过快速层析(硅胶，60% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈澄清油状的共同酸前体-189，步骤e(0.79 g)。LC-MS: [M+Na]+ C16H22NaO6S的分析性计算值365.10；实验值365.22。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.80 (2 H, d, J=8.28 Hz), 7.36 (2 H, d, J=8.03 Hz), 4.11-4.17 (1 H, m), 3.85-4.06 (5 H, m), 3.64-3.71 (1 H, m), 3.55-3.63 (1 H, m), 2.47 (3 H, s), 2.32-2.43 (1 H, m), 2.15-2.27 (1 H, m), 1.70-1.89 (2 H, m), 1.52-1.66 (1 H, m), 1.35-1.47 (1 H, m)。
共同酸前体 -189 ，步骤 f
Figure DEST_PATH_IMAGE170
向共同酸前体-189，步骤e(2.2 g，6.43 mmol)在40 mL MeOH中的溶液中加入碳酸钾(1.776 g，12.85 mmol)。在室温下搅拌所得混合物过夜。接着混合物用水和EtOAc稀释。分离两层。用EtOAc(2×)萃取水层。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-15% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈澄清油状的共同酸前体-189，步骤f(0.89 g，5.23 mmol，81%)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3.89-4.02 (6 H, m), 3.58 (2 H, dd, J=10.79, 2.51 Hz), 1.69-1.89 (6 H, m)。
共同酸前体 -189 ，步骤 g
Figure DEST_PATH_IMAGE172
向共同酸前体-189，步骤f(890 mg，5.23 mmol)在15 mL THF中的溶液中加入HCl(15 mL，45.0 mmol)(3 M水溶液)。在室温下搅拌所得混合物过夜。接着混合物用乙醚稀释且分离两层。水相用乙醚(2×)萃取且合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到共同酸前体-189，步骤g(0.95 g，含有一些残余溶剂)。产物未经纯化即用于下一步骤。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 3.95-4.00 (2 H, m), 3.85 (2 H, d, J=10.68 Hz), 2.21-2.28 (2 H, m), 1.99-2.04 (2 H, m), 1.90-1.96 (2 H, m)。
共同酸前体 -189 ，步骤 h( 对映异构体 -1 和对映异构体 -2)
在-20℃向(+/-)-苯甲氧基羰基-α-膦酰基甘氨酸三甲酯(1733 mg，5.23 mmol)在6 mL THF中的溶液中加入1,1,3,3-四甲基胍(0.723 mL，5.75 mmol)。在-20℃搅拌所得浅黄色混合物1小时且加入含共同酸前体-189，步骤g(660 mg，5.23 mmol)的3 mL THF，接着在室温下搅拌混合物3天。接着反应混合物用EtOAc稀释，用0.1 N盐酸水溶液洗涤。水层用EtOAc(2×)萃取且合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-4% EtOAc/CH2Cl2)纯化粗品产物，得到960 mg外消旋混合物。通过手性HPLC(CHIRALPAK® AD管柱，21×250 mm，10 μm)，用90% 0.1%二乙胺/庚烷-10% EtOH以15 mL/min洗脱来分离混合物，得到呈白色固体状的共同酸前体-189，步骤h(对映异构体-1；300 mg)和共同酸前体-189，步骤h(对映异构体-2；310 mg)。共同酸前体-189，步骤h(对映异构体-1)：LC-MS: [M+H]+ C18H22NO5的分析性计算值332.15；实验值332.2。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.29-7.41 (5 H, m), 6.00 (1 H, br. s.), 5.13 (2 H, s), 3.63-3.87 (8 H, m), 2.84 (1 H, br. s.), 1.84-2.02 (2 H, m), 1.63-1.84 (2 H, m)。共同酸前体-189，步骤h(对映异构体-2)：LC-MS: [M+H]+ C18H22NO5的分析性计算值332.15；实验值332.2。
共同酸前体 -189 ，步骤 i
Figure DEST_PATH_IMAGE176
在500 mL氢化瓶中使N2鼓泡通过共同酸前体-189，步骤h(对映异构体-2；290 mg，0.875 mmol)在10 mL MeOH中的溶液30分钟。向溶液中加入(S,S)-Me-BPE-Rh(9.74 mg，0.018 mmol)，接着在60 psi下氢化混合物6天。浓缩混合物且手性分析性HPLC(CHIRALPAK® OJ管柱)表明存在少量残余起始物质和1种主要产物。通过手性HPLC(CHIRALPAK® OJ管柱，21×250 mm，10 μm)，用70% 0.1%二乙胺/庚烷-30% EtOH以15 mL/min洗脱来分离残余物，得到呈澄清油状的共同酸前体-189，步骤i(150 mg)。LC-MS: [M+H]+ C18H24NO5的分析性计算值334.17；实验值334.39。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.28-7.41 (5 H, m), 5.12-5.18 (1 H, m), 5.09 (2 H, s), 4.05 (1 H, t, J=10.07 Hz), 3.75 (3 H, s), 3.60-3.72 (2 H, m), 3.41-3.50 (2 H, m), 2.10 (1 H, br. s.), 1.72-1.99 (6 H, m)。
共同酸前体 -189 ，步骤 j
Figure DEST_PATH_IMAGE178
在氮气氛围下向在氢化瓶中中的、共同酸前体-189，步骤i(150 mg，0.450 mmol)在10 mL MeOH中的溶液中加入二碳酸二甲酯(0.072 mL，0.675 mmol)和10% Pd/C(23.94 mg，0.022 mmol)。接着在Parr震荡器上在45 psi下氢化混合物过夜。过滤混合物且浓缩滤液，得到呈澄清油状的共同酸前体-189，步骤j(110 mg)。LC-MS: [M+H]+ C12H20NO5的分析性计算值258.13；实验值258.19。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.08 (1 H, d, J=9.16 Hz), 4.03 (1 H, t, J=10.07 Hz), 3.75 (3 H, s), 3.60-3.72 (5 H, m), 3.46 (2 H, t, J=10.38 Hz), 2.11 (1 H, br. s.), 1.72-1.99 (6 H, m)。
共同酸前体 -189
向共同酸前体-189，步骤j(110 mg，0.428 mmol)在2 mL THF和1 mL水中的混合物中加入LiOH(0.641 mL，1.283 mmol)(2 N水溶液)。在室温下搅拌所得混合物过夜。混合物用1 N盐酸水溶液中和且用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到呈白色固体状的共同酸前体-189(100 mg)。LC-MS: [M+Na]+ C11H17NNaO5的分析性计算值266.10；实验值266.21。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.10 (1 H, d, J=9.16 Hz), 4.02 (1 H, t, J=10.07 Hz), 3.62-3.78 (5 H, m), 3.49 (2 H, d, J=10.68 Hz), 2.07-2.22 (2 H, m), 1.72-1.98 (6 H, m)。
共同酸前体 -190( 非对映异构混合物 )
Figure DEST_PATH_IMAGE180
共同酸前体 -190 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE182
在0℃向环戊-3-烯醇(2.93 g，34.8 mmol)和咪唑(5.22 g，77 mmol)在30 mL DMF中的混合物中加入叔丁基二甲基氯硅烷(6.30 g，41.8 mmol)。在室温下搅拌所得无色混合物过夜。接着向混合物中加入己烷和水且分离两层。水层用EtOAc(2×)萃取且合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，2% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈澄清油状的共同酸前体-190，步骤a(6.3 g)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.65 (2 H, s), 4.49-4.56 (1 H, m), 2.56 (2 H, dd, J=15.26, 7.02 Hz), 2.27 (2 H, dd, J=15.26, 3.36 Hz), 0.88 (9 H, s), 0.06 (6 H, s)。
共同酸前体 -190 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE184
在0℃向共同酸前体-190，步骤a(2.3 g，11.59 mmol)在40 mL CH2Cl2中的溶液中分5份加入m-CPBA(5.60 g，16.23 mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜。接着向混合物中加入己烷和水且分离两层。有机层用50 mL 10% NaHSO3水溶液和盐水洗涤，用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，3%-6% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈澄清油状的共同酸前体-190，步骤b(1.42 g)和其反式非对映异构体(0.53 g)。共同酸前体-190，步骤b(顺式)：1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 4.39-4.47 (1 H, m), 3.47 (2 H, s), 2.01-2.10 (2 H, m), 1.93-2.00 (2 H, m), 0.88 (9 H, s), 0.04 (6 H, s)。共同酸前体-190，步骤b(反式)：1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 4.04-4.14 (1 H, m), 3.47 (2 H, s), 2.41 (2 H, dd, J=14.05, 7.28 Hz), 1.61 (2 H, dd, J=14.18, 6.90 Hz), 0.87 (9 H, s), 0.03 (6 H, s)。
共同酸前体 -190 ，步骤 c
在0℃向(S)-1,2'-亚甲基二吡咯烷(0.831 g，5.39 mmol)在15 mL苯中的溶液中逐滴加入正丁基锂(4.90 mL，4.90 mmol)(1 M在己烷中)。溶液变为亮黄色。在0℃搅拌混合物30分钟。接着加入含共同酸前体-190，步骤b(顺式异构体；0.7 g，3.27 mmol)的10 mL苯且在0℃搅拌所得混合物3小时。将EtOAc和NH4Cl饱和水溶液加入到混合物中且分离两层。有机层用水和盐水洗涤，用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，15% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈浅黄色油状的共同酸前体-190，步骤c(400 mg)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.84-5.98 (2 H, m), 4.53-4.69 (2 H, m), 2.63-2.73 (1 H, m), 1.51 (1 H, dt, J=13.73, 4.43 Hz), 0.89 (9 H, s), 0.08 (6 H, s)。
共同酸前体 -190 ，步骤 d
Figure DEST_PATH_IMAGE188
在0℃向共同酸前体-190，步骤c(400 mg，1.866 mmol)、MeI(1.866 mL，3.73 mmol)(2 M在叔丁基甲基醚中)在5 mL THF中的溶液中加入NaH(112 mg，2.80 mmol)(60%在矿物油中)。使所得混合物温至室温且在室温下搅拌过夜。接着反应物用水淬灭且用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，5% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈浅黄色油状的共同酸前体-190，步骤d(370 mg)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.92-5.96 (1 H, m), 5.87-5.91 (1 H, m), 4.64-4.69 (1 H, m), 4.23-4.28 (1 H, m), 3.32 (3 H, s), 2.62-2.69 (1 H, m), 1.54 (1 H, dt, J=13.12, 5.49 Hz), 0.89 (9 H, s), 0.07 (5 H, d, J=1.83 Hz)。
共同酸前体 -190 ，步骤 e
Figure DEST_PATH_IMAGE190
向在氢化瓶中的、共同酸前体-190，步骤d(400 mg，1.751 mmol)在10 mL EtOAc中的溶液中加入氧化铂(IV)(50 mg，0.220 mmol)。在Parr震荡器上在50 psi下氢化所得混合物2小时。接着混合物经CELITE®过滤且浓缩滤液，得到呈澄清油状的共同酸前体-190，步骤e(400 mg)。LC-MS: [M+H]+ C12H27O2Si的分析性计算值231.18；实验值231.3。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 4.10-4.17 (1 H, m), 3.65-3.74 (1 H, m), 3.27 (3 H, s), 1.43-1.80 (6 H, m), 0.90 (9 H, s), 0.09 (6 H, s)。
共同酸前体 -190 ，步骤 f
Figure DEST_PATH_IMAGE192
向共同酸前体-190，步骤e(400 mg，1.736 mmol)在5 mL THF中的溶液中加入TBAF(3.65 mL，3.65 mmol)(1 N在THF中)。几分钟后混合物颜色变为棕色，在室温下搅拌过夜。在真空下除去挥发性组分且通过快速层析(硅胶，0-25% EtOAc/Hex)纯化残余物，得到呈浅黄色油状的共同酸前体-190，步骤f(105 mg)。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 4.25 (1 H, br. s.), 3.84-3.92 (1 H, m), 3.29 (3 H, s), 1.67-2.02 (6 H, m)。
共同酸前体 -190
接着根据关于共同酸前体-182所描述的程序自共同酸前体-190，步骤f合成共同酸前体-190。LC-MS: [M+Na]+ C10H17NNaO5的分析性计算值254.10；实验值254.3。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 5.25 (1 H, d, J=8.55 Hz), 4.27-4.41 (1 H, m), 3.81-3.90 (1 H, m), 3.69 (3 H, s), 3.26 (3 H, s), 2.46-2.58 (1 H, m), 1.76-1.99 (3 H, m), 1.64-1.73 (1 H, m), 1.40-1.58 (1 H, m), 1.22-1.38 (1 H, m)。
共同酸前体 -191( 对映异构体 -1)
共同酸前体 -191 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE196
在-78℃在氮气下向二异丙胺(3 mL，21.05 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中加入正丁基锂(2.5 M在己烷中；8.5 mL，21.25 mmol)。在-78℃搅拌反应物10分钟，接着使其达到0℃保持25分钟。再冷却反应物至-78℃，加入含四氢-2H-吡喃-4-甲酸甲酯(3 g，20.81 mmol)的THF(3 mL)。在-78℃搅拌反应物15分钟，接着使其达到0℃保持30分钟。冷却反应物至-78℃，加入碘甲烷(1.301 mL，20.81 mmol)。加入后，除去冷却浴且反应物缓慢温至约25℃且搅拌22小时。加入乙酸乙酯和盐酸水溶液(0.1 N)，且分离有机层并用盐水洗涤且干燥(MgSO4)，过滤且在真空中浓缩。将残余物装载在汤姆生硅胶滤筒(Thomson's silica gel cartridge)上(用10%乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到浅黄色油状物(2.83 g)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.73-3.66 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.40-3.30 (m, 2H), 1.95-1.93 (dm, 1H), 1.92-1.90 (dm, 1H), 1.43 (ddd, J=13.74, 9.72, 3.89, 2H), 1.18 (s, 3H)。
共同酸前体 -191 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE198
在-78℃在氮气下向共同酸前体-191，步骤a(3 g，18.96 mmol)在甲苯(190 mL)中的溶液中逐滴加入氢化二异丁基铝(1.5 M在甲苯中；26.5 mL，39.8 mmol)。在-78℃下继续搅拌反应物1.5小时且除去浴槽且搅拌18小时。反应物用MeOH(20 mL)淬灭。加入HCl(1 M，150 mL)且混合物用EtOAc(4×40 mL)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤且在真空中浓缩。通过快速层析(硅胶；40%乙酸乙酯/己烷)纯化残余物，得到无色油状物(1.36 g)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3.77 (dt, J=11.73, 4.55, 2H), 3.69-3.60 (m, 2H), 3.42 (s, 2H), 1.71-1.40 (bs, 1H)1.59 (ddd, J=13.74, 9.72, 4.39, 2H), 1.35-1.31 (m, 1H), 1.31-1.27 (m, 1H), 1.06 (s, 3H)。
共同酸前体 -191 ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE200
在-78℃在氮气下向DMSO(5.9 mL，83 mmol)在CH2Cl2(85 mL)中的溶液中加入乙二酰氯(3.8 mL，43.4 mmol)且搅拌40分钟。接着加入共同酸前体-191，步骤b(4.25 g，32.6 mmol)在CH2Cl2(42.5 mL)中的溶液。在-78℃在氮气下继续搅拌反应物2小时。反应物用冷20% K2HPO4(水溶液)(10 mL)和水淬灭。在约25℃搅拌混合物15分钟，用乙醚(50 mL)稀释且分离各层。用乙醚(2×50 mL)萃取水层。合并的有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤且在真空中浓缩。将残余物溶解在CH2Cl2(4 mL)中且通过快速层析(硅胶，用CH2Cl2洗脱)纯化，得到无色油状物(2.1 g)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 9.49 (s. 1H), 3.80 (dt, J=11.98,4.67, 2H), 3.53 (ddd, J=12.05, 9.41, 2.89, 2H), 1.98 (ddd, J=4.71, 3.20, 1.38, 1H), 1.94 (ddd, J= 4.71, 3.20, 1.38, 1H), 1.53 (ddd, J=13.87, 9.60, 4.14, 2H), 1.12 (s, 3H)。
共同酸前体 -191 ，步骤 d
Figure DEST_PATH_IMAGE202
在约25℃在氮气下向共同酸前体191c(2.5 g，19.51 mmol)在CHCl3(20 mL)中的溶液中加入(R)-2-氨基-2-苯基乙醇(2.94 g，21.46 mmol)且搅拌5小时。冷却反应物至0℃，逐滴加入氰化三甲基硅烷(3.8 mL，30.4 mmol)。除去冷却浴且在约25℃在氮气下搅拌反应物15.5小时。反应物用3 N HCl(20 mL)和水(20 mL)处理，且产物用CHCl3(3×50 mL)萃取。干燥(Na2SO4)合并的有机层，过滤且在真空中浓缩。通过快速层析(硅胶；40%乙酸乙酯/己烷)纯化残余物，得到两种非对映异构体：呈无色油状的共同酸前体-191，步骤d1(非对映异构体1)，其在静置后凝固为白色固体(3 g)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.42-7.26 (m, 5H), 5.21 (t, J=5.77, 1H), 3.87 (dd, J=8.53, 4.52, 1H), 3.61-3.53 (m, 1H), 3.53-3.37 (m, 5H), 3.10 (d, J=13.05, 1H), 2.65 (d, J=13.05, 1H), 1.64-1.55 (m, 1H), 1.55-1.46 (m,1H), 1.46-1.39 (m, 1H), 1.31-1.23 (m, 1H), 1.11 (s, 3H)。LC-MS: [M+H]+ C16H23N2O2的分析性计算值：275.18；实验值275.20。呈浅黄色油状的共同酸前体-191，步骤d2(非对映异构体2)(0.5 g)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.44-7.21 (m, 5H), 4.82 (t, J=5.40, 1H), 3.82-3.73 (m, 1H), 3.73-3.61 (m, 3H), 3.61-3.37 (m, 5H), 2.71 (dd, J=9.29, 4.77, 1H), 1.72-1.55 (m, 2H), 1.48-1.37 (m, 1H), 1.35-1.25 (m, 1H), 1.10 (s, 3H)。LC-MS: [M+H]+ C16H23N2O2的分析性计算值：275.18；实验值275.20。
共同酸前体 -191 ，步骤 e
Figure DEST_PATH_IMAGE204
在0℃在氮气下向共同酸前体-191，步骤d2(非对映异构体2)(0.4472 g，1.630 mmol)在CH2Cl2(11 mL)和MeOH(5.50 mL)中的溶液中加入四乙酸铅(1.445 g，3.26 mmol)。搅拌反应物1.5小时，除去冷却浴且继续搅拌20小时。反应物用磷酸盐缓冲液(pH=7；6 mL)处理且搅拌45分钟。反应物通过CELITE®过滤，用CH2Cl2洗涤且分离各层。水层用CH2Cl2(3×25 mL)萃取且合并的有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤且在真空中浓缩。通过快速层析(硅胶；15%乙酸乙酯/己烷)纯化残余物，得到呈无色油状的亚胺中间体(181.2 mg)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.55 (d, J=1.00, 1H), 7.89-7.81 (m, 2H), 7.61-7.46 (m, 3H), 4.80 (d, J=1.00, 1H), 3.74 (tt, J=11.80, 4.02, 2H), 3.62-3.46 (m, 2H), 1.79-1.62 (m, 2H), 1.46-1.30 (m, 2H), 1.15 (s, 3H)。
将亚胺中间体溶解在6 N HCl(10 mL)中且在90℃加热10天。将反应物移离热源，冷却至室温且用乙酸乙酯(3×25 mL)萃取。在真空中浓缩水层，得到灰白色固体。将固体溶解在MeOH中且装载在预先调节的MCX(6 g)滤筒上，用MeOH洗涤接着用2 N NH3/MeOH溶液洗脱且在真空中浓缩，得到灰白色固体(79.8 mg)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 14.33-13.51 (bs, 1H), 8.30 (bs, 3H), 3.82-3.75 (m, 1H), 3.70 (dt, J=11.80, 4.02, 2H), 3.58-3.43 (m, 2H), 1.76-1.60 (m, 2H), 1.47-1.36 (m, 1H), 1.36-1.27 (m, 1H), 1.08 (s, 3H)。LC-MS: [M+H]+ C8H16NO3的分析性计算值：174.11；实验值174.19。
共同酸前体 -191( 对映异构体 -1)
在0℃向共同酸前体-191，步骤e(0.0669 g，0.386 mmol)和碳酸钠(0.020 g，0.193 mmol)在氢氧化钠(1 M水溶液；0.4 mL，0.40 mmol)中的溶液中逐滴加入氯甲酸甲酯(0.035 mL，0.453 mmol)。自冷却浴除去反应物且在约25℃下搅拌3小时。用乙醚(3×20 mL)洗涤反应物。水层用12 N HCl(约pH 1-2)酸化且用乙酸乙酯(2×20 mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤且在真空中浓缩，得到呈无色膜状的共同酸前体-191(66.8 mg)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.10-12.37 (bs, 1H), 7.37 (d, J=9.04, 1H), 4.02 (d, J=9.29, 1H), 3.72-3.57 (m, 2H), 3.56 (s, 3H), 3.54-3.44 (m, 2H), 1.65 (ddd, J=13.61, 9.72, 4.27, 1H), 1.53 (ddd, J=13.68, 9.66, 4.27, 1H), 1.41-1.31 (m, 1H), 1.31-1.22 (m, 1H), 1.00 (s, 3H)。LC-MS: [M+Na]+ C10H17NO5Na的分析性计算值：254.10；实验值254.11。
共同酸前体 -192( 对映异构体 -2)
Figure DEST_PATH_IMAGE206
共同酸前体-192(对映异构体-2)是自共同酸前体-191，步骤d1根据关于其对映异构体共同酸前体-191的制备所描述的程序制备。
共同酸前体 -193
共同酸前体 -193 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE210
向2-(苯甲氧基羰基氨基)-2-(二甲氧基磷酰基)乙酸甲酯(1.45 g，4.2 mmol)在DCM中的溶液中加入DBU(0.70 mL，4.7 mmol)。搅拌反应混合物10分钟，接着加入1,3-二甲氧基丙-2-酮(0.5 g，4.2 mmol)在DCM中的溶液。在室温下搅拌反应混合物18小时。将反应混合物装入80 g硅胶滤筒中，用含0-70% EtOAc的己烷的18分钟梯度洗脱，得到呈粘稠油状的共同酸前体-193，步骤a(0.8 g)。1H NMR (400 MHz, MeOD) ppm 7.23-7.43 (5 H, m), 4.99-5.18 (2 H, m), 4.16 (2 H, s), 4.06 (2 H, s), 3.66-3.78 (3 H, s), 3.26 (3 H, s), 3.23 (3 H, s)。LC-MS: [M+Na]－ C16H21NNaO6的分析性计算值：346.14；实验值：346.12。
共同酸前体 -193 ，步骤 b
在55 psi H2下搅拌酯共同酸前体-193，步骤a(0.5 g)和四氟硼酸(+)-1,2-双((2S,5S)-2,5-二乙基磷杂环戊烷基)苯(环辛二烯)铑(I)(0.1 g)在MeOH中的反应混合物18小时。浓缩反应混合物至干燥。将残余物装入25 g硅胶滤筒中且用含0-80% EtOAc的己烷的18分钟梯度洗脱，得到呈澄清油状的共同酸前体-193，步骤b(0.49 g)。LC-MS: [M+Na]+ C16H23NNaO6的分析性计算值：348.15；实验值：348.19。
共同酸前体 -193 ，步骤 c
在室温在H2下搅拌共同酸前体-193，步骤b(0.16 g)、二碳酸二甲酯(0.13 g)和10% Pd/C(0.026 g)在EtOAc中的反应混合物2小时。过滤反应混合物且浓缩，得到氨基甲酸甲酯共同酸前体-193，步骤c。LC-MS: [M+Na]+ C10H19NNaO6的分析性计算值：272.12；实验值：272.07。
共同酸前体 -193
向酯共同酸前体-193，步骤c在THF(1 mL)和MeOH(0.25 mL)中的溶液中加入1 N NaOH(1 mL)。在室温下搅拌反应混合物2小时。浓缩反应混合物且用EtOAc和1 N HCl稀释。水相用EtOAc萃取且合并的有机相用饱和NaCl洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且浓缩，得到共同酸前体-193(0.082 g)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) 5.99 (1 H, d, J=8.56 Hz), 4.57 (1 H, dd, J=8.56, 3.27 Hz), 3.67 (3 H, s), 3.49 (2 H, d, J=4.28 Hz), 3.45-3.44 (2 H, m), 3.26-3.35 (6 H, m)。LC-MS: [M+Na]+ C9H17NNaO6的分析性计算值：258.11；实验值：258.13。
共同酸前体 -194
向(S)-2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基氨基)-4-甲氧基丁酸(0.355 g，1 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入哌啶(1.0 mL，10 mmol)且在室温下搅拌混合物3小时。除去挥发性物质且使残余物在饱和NaHCO3(水溶液)(5 mL)与EtOAc(5 mL)之间分配。水层进一步用EtOAc和Et2O洗涤。相继向该水溶液中加入Na2CO3(212 mg，2.0 mmol)和氯甲酸甲酯(0.16 mL，2.0 mmol)且在室温下搅拌反应混合物16小时。反应混合物用1 N HCl(水溶液)酸化直至pH<7，接着用EtOAc(2×10 mL)萃取。干燥(Na2SO4)合并的有机层，过滤且浓缩。通过快速二氧化硅层析(EtOAc/己烷，自20%至70%的梯度)纯化残余物，得到呈粘稠无色油状的(S)-4-甲氧基-2-(甲氧基羰基氨基)丁酸(共同酸前体-194)(91.5 mg)。LC-MS保留时间=0.61分钟；m/z 214 [M+Na]+。(管柱：PHENOMENEX® Luna 3.0×50 mm S10。溶剂A=90%水:10%甲醇:0.1% TFA。溶剂B=10%水:90%甲醇:0.1% TFA。流动速率=4 mL/min。开始%B=0。最终%B=100。梯度时间=3分钟。波长=220)。1H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 7.41 (br. s., 1 H), 5.74-6.02 (m, 1 H), 4.32-4.56 (m, 1 H), 3.70 (s, 3 H), 3.54 (t, J=5.0 Hz, 2 H), 3.34 (s, 3 H), 1.99-2.23 (m, 2 H)。
共同酸前体 -195
Figure DEST_PATH_IMAGE218
共同酸前体 -195 ，步骤 a
参考文献：S. Danishefsky和J. F. Kerwin, Jr J. Org. Chem, 1982, 47, 1597。
在氮气下向经搅拌和冷却(-78℃)的(E)-(4-甲氧基丁-1,3-二烯-2-基氧基)三甲基硅烷(5.0 g，29 mmol)和乙醛(3.28 mL，58.0 mmol)在乙醚(100 mL)中的溶液中逐滴加入醚合三氟化硼（Boron trifluoride etherate）(3.81 mL，30.5 mmol)。在-78℃搅拌反应物2.5小时，接着用NaHCO3饱和水溶液(40 mL)淬灭，温至室温且搅拌过夜。分离各层且用乙醚(2×50 mL)萃取水层。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤且浓缩至黄色/橙色油状物。通过Biotage® Horizon(110 g SiO2，25%-40% EtOAc/己烷)纯化粗品油，得到呈黄色油状的外消旋2-甲基-2H-吡喃-4-(3H)-酮(共同酸前体-195，步骤a)(2.2 g)。1H NMR (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 7.35 (d, J=6.0 Hz, 1 H), 5.41 (dd, J=6.0, 1.0 Hz, 1 H), 4.51-4.62 (m, 1 H), 2.41-2.57 (m, 2 H), 1.47 (d, J=6.3 Hz, 3 H)。
共同酸前体 -195 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE222
参考文献：Reddy, D. S.; Vander Velde, D.; Aube, J. J. Org. Chem. 2004, 69, 1716-1719。
在0℃下且在氮气下将1.6 M甲基锂在乙醚(20.9 mL，33.4 mmol)中的溶液加入到搅拌着的碘化铜(I)(4.25 g，22.30 mmol)在乙醚(30 mL)中的浆料中。在0℃搅拌反应物20分钟，接着经10分钟加入含外消旋2-甲基-2H-吡喃-4(3H)-酮(1.25 g，11.2 mmol)的乙醚(12.0 mL)。使反应物温至室温且搅拌2小时。将反应混合物倾入饱和NH4Cl(水溶液)中且搅拌20分钟。溶液用乙醚(4×60 mL)萃取且合并的有机物用盐水(约80 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤且浓缩，得到呈橙色油状的外消旋(2R,6R)-2,6-二甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(共同酸前体-195，步骤b)(1.34 g)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 4.28-4.39 (m, 2 H), 2.57 (dd, J=4.8, 1.5 Hz, 1 H), 2.53 (dd, J=4.9, 1.4 Hz, 1 H), 2.26 (dd, J=6.5, 1.5 Hz, 1 H), 2.23 (dd, J=6.5, 1.5 Hz, 1 H), 1.28 (d, J=6.3 Hz, 6 H)。
共同酸前体 -195 ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE224
在0℃将硼氢化钠(0.354 g，9.36 mmol)逐份加入到搅拌着的外消旋(2R,6R)-2,6-二甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(共同酸前体-195，步骤b)(1.2 g，9.4 mmol)在MeOH(30 mL)中的溶液中。在0℃搅拌溶液10分钟，温至室温且搅拌1小时。将反应物倾入饱和NH4Cl(约50 mL)中，搅拌20分钟，接着部分浓缩(至约1/2体积)。形成沉淀且加入水直至均匀，接着溶液用DCM(3×60 mL)萃取。水层用1 N HCl酸化，接着用DCM(3×60 mL)萃取。合并的有机物用Na2SO4干燥，过滤且浓缩形成浑浊黄色油状物(1.08 g)。将粗品油溶解在DCM(8.0 mL)中，接着加入对甲苯磺酰氯(2.68 g，14.0 mmol)和吡啶(1.51 mL，18.7 mmol)且在室温搅拌反应物2.5天。反应物用饱和NH4Cl(约60 mL)稀释且用DCM(3×30 mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机相，过滤且浓缩至棕色油状物。油状物用Biotage® Horizon(80 g SiO2，10%-25% EtOAc/己烷)纯化，得到呈粘稠澄清无色油状的外消旋4-甲基苯磺酸(2R,6R)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基酯(共同酸前体-195，步骤c)(1.63 g)。LC-MS保留时间3.321分钟；m/z 284.98 [M+H]+。用配备有Phenomenex-Luna 3 μ C18 2.0×50 mm管柱的Shimadzu LC-10AS液相层析仪，使用SPD-10AV UV-Vis检测器在220 nM的检测器波长下记录LC数据。洗脱条件采用流动速率0.8 mL/min，梯度100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间4分钟，保持时间1分钟且分析时间5分钟，其中溶剂A为5% MeOH/95% H2O/10 mM乙酸铵，且溶剂B为5% H2O/95% MeOH/10 mM乙酸铵。使用Micromass平台以LC 电喷模式测定MS数据。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.81 (2 H, d, J=8.3 Hz), 7.36 (2 H, d, J=8.0 Hz), 4.81-4.92 (1 H, m), 4.17-4.26 (1 H, m), 3.78-3.87 (1 H, m), 2.47 (3 H, s), 1.91-1.99 (1 H, m), 1.78-1.86 (1 H, m), 1.65-1.72 (1 H, m), 1.46 (1 H, ddd, J=12.9, 9.4, 9.3 Hz), 1.20 (6 H, dd, J=6.5, 4.8 Hz)。
使用手性制备型SFC纯化(Chiralpak AD-H制备型管柱，30×250 mm，5 μm，含10% 1:1 EtOH/庚烷的CO2，70毫升/分钟，历时10分钟)分多次注射将外消旋混合物分离成个别对映异构体，得到第一洗脱峰4-甲基苯磺酸(2R,6R)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基酯(共同酸前体-195，步骤c.1)(577 mg)和第二洗脱峰4-甲基苯磺酸(2S,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基酯(共同酸前体-195，步骤c.2)(588 mg)。将各对映异构体分离为澄清无色油状物，其在静置后凝固为白色固体。
共同酸前体 -195 ，步骤 d
在48 mL压力管中，在THF(2 mL)和甲苯(10 mL)中搅拌4-甲基苯磺酸(2R,6R)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基酯(共同酸前体-195，步骤c.1)(575 mg，2.02 mmol)和2-(二苯基亚甲基氨基)乙酸苯甲酯(733 mg，2.22 mmol)。将此澄清无色溶液用氮气冲洗，接着加入LiHMDS(1.0 M在THF中)(2.22 mL，2.22 mmol)且密封容器并在100℃加热8小时。冷却反应物至室温，倾入1/2饱和NH4Cl(水溶液)(约50 mL)中且用EtOAc(3×30 mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤且浓缩为粗品橙色油状物。油状物用Biotage® Horizon纯化(40 g SiO2，10%-25% EtOAc/己烷)，得到呈橙色油状的不纯的所需产物(501 mg)。此物质用Biotage® Horizon再纯化(25 g SiO2，6%-12% EtOAc/己烷)，得到呈粘稠橙色油状的非对映异构体的约1:1混合物(共同酸前体-195，步骤d)(306 mg)。
使用手性制备型SFC纯化(Chiralcel OJ-H制备型管柱，30×250 mm，5 μm，含10% 1:1 EtOH/庚烷的CO2@(150巴)，70毫升/分钟，历时10分钟)分多次注射将混合物分离为个别非对映异构体，得到第一洗脱峰(R)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(二苯基亚甲基氨基)乙酸苯甲酯(共同酸前体-195，步骤d.1)(124 mg)和第二洗脱峰(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(二苯基亚甲基氨基)乙酸苯甲酯(共同酸前体-195，步骤d.2)(129 mg)。将各非对映异构体分离为粘稠黄色油状物。
(R)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(二苯基亚甲基氨基)乙酸苯甲酯(共同酸前体-195，步骤d.1)的分析数据：1H NMR (400 MHz, D4-MeOH) δ ppm 7.57-7.61 (m, 2 H), 7.41-7.48 (m, 4 H), 7.33-7.40 (m, 7 H), 7.03-7.08 (m, 2 H), 5.22 (d, J=12.1 Hz, 1 H), 5.16 (d, J=12.1 Hz, 1 H), 4.09-4.19 (m, 1 H), 3.84 (d, J=6.8 Hz, 1 H), 3.75-3.83 (m, 1 H), 2.53-2.64 (m, 1 H), 1.58-1.65 (m, 1 H), 1.33-1.43 (m, 1 H), 1.26-1.32 (m, 1 H), 1.24 (d, J=7.0 Hz, 3 H), 1.10 (d, J=6.0 Hz, 3 H), 0.98-1.08 (m, 1 H)。LC-MS保留时间4.28分钟；m/z 442.16 [M+H]+。用配备有Phenomenex-Luna 3 μ C18 2.0×50 mm管柱的Shimadzu LC-10AS液相层析仪，使用SPD-10AV UV-Vis检测器在220 nM的检测器波长下记录LC数据。洗脱条件采用流动速率0.8 mL/min，梯度100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间4分钟，保持时间1分钟且分析时间5分钟，其中溶剂A为5% MeOH/95% H2O/10 mM乙酸铵，且溶剂B为5% H2O/95% MeOH/10 mM乙酸铵。使用 Micromass平台以LC电喷模式测定MS数据。
(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(二苯基亚甲基氨基)乙酸苯甲酯(共同酸前体-195，步骤d.2)的分析数据：1H NMR (400 MHz, D4-MeOH) δ ppm 7.57-7.61 (m, 2 H), 7.41-7.50 (m, 4 H), 7.33-7.40 (m, 7 H), 7.04-7.08 (m, 2 H), 5.22 (d, J=12.1 Hz, 1 H), 5.16 (d, J=12.1 Hz, 1 H), 4.20 (qd, J=6.4, 6.3 Hz, 1 H), 3.86 (d, J=6.5 Hz, 1 H), 3.74-3.83 (m, 1 H), 2.53-2.64 (m, 1 H), 1.60 (td, J=12.7, 5.6 Hz, 1 H), 1.38-1.51 (m, 2 H), 1.26 (d, J=7.0 Hz, 3 H), 1.04 (d, J=6.0 Hz, 3 H), 0.79-0.89 (m, 1 H)。LC-MS保留时间4.27分钟；m/z 442.17 [M+H]+。用配备有Phenomenex-Luna 3 μ C18 2.0×50 mm管柱的Shimadzu LC-10AS液相层析仪，使用SPD-10AV UV-Vis检测器在220 nM的检测器波长下记录LC数据。洗脱条件采用流动速率0.8 mL/min，梯度100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间4分钟，保持时间1分钟且分析时间5分钟，其中溶剂A为5% MeOH/95% H2O/10 mM乙酸铵，且溶剂B为5% H2O/95% MeOH/10 mM乙酸铵。使用Micromass平台以LC 电喷模式测定MS数据。
共同酸前体 -195 ，步骤 e
Figure DEST_PATH_IMAGE228
将(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(二苯基亚甲基氨基)乙酸苯甲酯(共同酸前体-195，步骤d.2)(129.6 mg，0.294 mmol)溶解在THF(2 mL)中，接着用2 N HCl(1.0 mL，2.1 mmol)水溶液处理。搅拌反应物2小时，接着在氮气流下浓缩过夜。将粗品残余物溶解在DCM(2 mL)和DIPEA(0.21 mL，1.2 mmol)中，接着用氯甲酸甲酯(0.032 mL，0.41 mmol)处理且在室温下搅拌4小时。反应物用水(约2.5 mL)稀释且用DCM(4×2 mL)萃取。在氮气流下浓缩合并的有机相过夜且通过Biotage® Horizon纯化(4 g SiO2，10%-50% EtOAc/己烷)残余物，得到呈无色玻璃状(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸苯甲酯(共同酸前体-195，步骤e)(56 mg)。LC-MS保留时间3.338分钟；m/z 335.99 [M+H]+。用配备有Phenomenex-Luna 3 μ C18 2.0×50 mm管柱的Shimadzu LC-10AS液相层析仪，使用SPD-10AV UV-Vis检测器在220 nM的检测器波长下记录LC数据。洗脱条件采用流动速率0.8 mL/min，梯度100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间4分钟，保持时间1分钟且分析时间5分钟，其中溶剂A为5% MeOH/95% H2O/10 mM乙酸铵，且溶剂B为5% H2O/95% MeOH/10 mM乙酸铵。使用 Micromass平台以LC电喷模式测定MS数据。1H NMR (400 MHz, D4-MeOH) δ ppm 7.29-7.42 (m, 5 H), 5.28 (d, J=12.0 Hz, 1 H), 5.09 (d, J=12.0 Hz, 1 H), 4.10-4.20 (m, 2 H), 3.68-3.78 (m, 1 H), 3.65 (s, 3 H), 2.22-2.36 (m, 1 H), 1.42-1.54 (m, 2 H), 1.29-1.38 (m, 1 H), 1.17 (d, J=6.8 Hz, 3 H), 1.04 (d, J=6.0 Hz, 3 H), 0.89-1.00 (m, 1 H)。
共同酸前体 -195
将(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸苯甲酯(共同酸前体-195，步骤e)(56 mg，0.167 mmol)溶解在MeOH(4 mL)中，接着用10% Pd/C(12 mg，0.012 mmol)处理。反应混合物相继用氮气(4×)和氢气(4×)真空冲洗且在氢气球下搅拌过夜。反应物经Celite®过滤且浓缩，得到呈无色油状的(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸(共同酸前体-195)(41 mg)。1H NMR (400 MHz, D4-MeOH) δ ppm 4.22 (quin, J=6.4 Hz, 1 H), 4.04-4.11 (m, 1 H), 3.78-3.87 (m, 1 H), 3.66 (s, 3 H), 2.26-2.39 (m, 1 H), 1.63 (d, J=13.1 Hz, 1 H), 1.51-1.60 (m, 1 H), 1.42-1.49 (m, 1 H), 1.27 (d, J=7.0 Hz, 3 H), 1.11 (d, J=6.3 Hz, 3 H), 0.97-1.08 (m, 1 H)。
注意：通过对自共同酸前体-195((R)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酸)的差向异构体和(S)-1-(萘-2-基)乙胺制备的酰胺类似物进行单晶X射线分析来测定共同酸前体-195的绝对立体化学。
共同酸前体 -196.1 和共同酸前体 -196.2
Figure DEST_PATH_IMAGE230
共同酸前体 -196 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE232
在80℃加热3,3-二甲氧基丙酸甲酯(10 g，67.5 mmol)、LiOH(8.08 g，337 mmol)在含有40 mL MeOH、40 mL THF和40 mL水的溶剂中的混合物2小时。接着冷却混合物至室温且用1 N盐酸水溶液酸化(pH>3)。接着用CH2Cl2(3×)萃取混合物。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到呈澄清油状的共同酸前体-196，步骤a(6.3 g)。产物未经进一步纯化即用于下一反应。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 4.82 (t, J=5.8 Hz, 1H), 3.36 (s, 6H), 2.69 (d, J=5.8 Hz, 2H)；13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 175.22, 101.09, 53.68, 38.76。
共同酸前体 -196 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE234
向共同酸前体-196，步骤a(4.55 g，33.9 mmol)在40 mL THF中的溶液中逐滴加入N,N'-羰基二咪唑(6.60 g，40.7 mmol)在40 mL THF中的悬浮液。溶液变为黄色且观测到气体放出。在室温下搅拌混合物2小时。同时，也在室温下搅拌另一烧瓶中的、含丙二酸单甲酯单钾盐(7.95 g，50.9 mmol)和氯化镁(3.55 g，37.3 mmol)的80 mL THF 2小时。接着咪唑溶液由注射器转移至Mg(OOCCH2COOMe)2溶液中且在室温下搅拌所得混合物16小时。接着混合物用60 mL NaHSO4(2 M)溶液酸化且用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用NaHCO3饱和水溶液、盐水洗涤，用MgSO4干燥且浓缩，得到呈浅紫色油状的共同酸前体-196，步骤b(4.9 g)。油状物未经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 4.75 (t, J=5.5 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.50 (s, 2H), 3.35 (s, 6H), 2.84 (d, J=5.5 Hz, 2H)。
共同酸前体 -196 ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE236
向共同酸前体-196，步骤b(4.9 g，25.8 mmol)在70 mL MeOH中的溶液中缓慢加入硼氢化钠(1.072 g，28.3 mmol)。在室温下搅拌所得混合物3小时且用1 N HCl(15 mL)淬灭。接着用EtOAc(3×)萃取混合物。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到呈浅黄色油状的共同酸前体-196，步骤c(4.4 g)。产物未经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.60 (t, J=5.5 Hz, 1H), 4.25-4.16 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.36 (d, J=1.5 Hz, 6H), 2.52-2.48 (m, 2H), 1.83-1.77 (m, 2H)；13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 172.21, 102.73, 64.61, 53.22, 52.95, 51.30, 41.00, 38.65。
共同酸前体 -196 ，步骤 d
向共同酸前体-196，步骤c(4.4 g，22.89 mmol)在50 mL DMF中的溶液中加入咪唑(3.12 g，45.8 mmol)和TBS-Cl(5.52 g，36.6 mmol)。在室温下搅拌所得混合物3天。接着反应物用CH2Cl2稀释且用水洗涤。有机相用盐水洗涤，用MgSO4干燥且浓缩。通过快速层析(硅胶，0-15% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈澄清油状的共同酸前体-196，步骤d(5.0 g)。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 4.55-4.50 (m, 1H), 4.30-4.21 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.32 (d, J=1.5 Hz, 6H), 2.51 (d, J=6.3 Hz, 2H), 1.89-1.77 (m, 2H), 0.88 (s, 9H), 0.08 (d, J=11.0 Hz, 6H)；13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 171.41, 101.24, 65.85, 52.35, 52.09, 51.04, 42.40, 39.92, 25.37, 25.27, 17.55, -3.95, -5.15。
共同酸前体 -196 ，步骤 e
Figure DEST_PATH_IMAGE240
向水浴中的、共同酸前体-196，步骤d(5.0 g，16.31 mmol)在50 mL乙醚中的溶液中加入含钛酸四异丙酯(0.971 mL，3.26 mmol)的10 mL乙醚。溶液变为黄色。接着由注射泵经1小时逐滴加入溴化乙基镁(48.9 mL，48.9 mmol)(1 M在THF中)。溶液变为暗褐色且产生一些沉淀。接着在水浴中搅拌混合物2小时。混合物用乙醚稀释且用NH4Cl饱和水溶液缓慢淬灭。滤出所得白色沉淀。滤液用Et2O(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩。接着通过快速层析(硅胶，0-20% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈澄清油状的共同酸前体-196，步骤e(4.02 g)。1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 4.47 (t, J=5.6 Hz, 1H), 4.21-4.14 (m, 1H), 3.71 (s, 1H), 3.31 (d, J=1.8 Hz, 6H), 2.05-1.88 (m, 3H), 1.66-1.58 (m, 1H), 0.90 (s, 9H), 0.83-0.76 (m, 1H), 0.71-0.65 (m, 1H), 0.47 (m, 1H), 0.40-0.34 (m, 1H), 0.12 (d, J=11.0 Hz, 6H)；13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 102.09, 69.97, 54.44, 52.97, 52.84, 43.27, 40.00, 25.92, 17.96, 14.04, 12.06, -4.32, -4.61。
共同酸前体 -196 ，步骤 f
Figure DEST_PATH_IMAGE242
在室温下搅拌共同酸前体-196，步骤e(4.02 g，13.20 mmol)和单水合对甲苯磺酸(3.01 g，15.84 mmol)在120 mL MeOH中的溶液过夜。向混合物中加入100 mL饱和NaHCO3溶液且用CH2Cl2(3×)萃取混合物。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩。通过经硅胶床用70% EtOAc/Hex冲洗粗品产物来将其快速纯化，得到呈澄清油状的共同酸前体-196，步骤f(1.7 g)。1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 4.79 (t, J=3.7 Hz, 1H), 4.59 (dd, J=5.3, 2.9 Hz, 1H), 4.30-4.22 (m, 1H), 4.03 (br. s., 1H), 3.37 (s, 3H), 3.31 (s, 3H), 2.09-2.03 (m, 1H), 2.00 (dtd, J=13.1, 4.0, 1.5 Hz, 1H), 1.86 (dd, J=13.1, 3.7 Hz, 1H), 1.81-1.61 (m, 7H), 0.94-0.87 (m, 1H), 0.83-0.77 (m, 1H), 0.74-0.69 (m, 1H), 0.65-0.56 (m, 2H), 0.48-0.40 (m, 2H), 0.37-0.30 (m, 1H)；13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 100.86, 100.27, 65.75, 64.35, 56.24, 55.92, 53.80, 52.35, 40.86, 39.92, 39.28, 38.05, 12.10, 12.06, 9.91, 9.37。
共同酸前体 -196 ，步骤 g
Figure DEST_PATH_IMAGE244
向共同酸前体-196，步骤f(1.7 g，10.75 mmol)在20 mL CH2Cl2中的溶液中加入双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(2.139 mL，8.06 mmol)。在室温下搅拌混合物2小时。接着冷却混合物至-10℃。加入三乙基硅烷(6.87 mL，43.0 mmol)，接着逐滴加入三氟化硼乙醚复合物(3.40 mL，26.9 mmol)。在加入三氟化硼乙醚复合物后混合物立即变为浅紫色。接着使混合物缓慢温至0℃且在0℃搅拌30分钟。接着反应物用水淬灭且用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩。通过经硅胶床用70%EtOAc/Hex冲洗粗品产物来将其快速纯化，得到呈澄清油状的共同酸前体-196，步骤g(1.5 g)。1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 6.43 (br. s., 1H), 3.96 (tt, J=9.5, 4.7 Hz, 1H), 3.86 (dt, J=11.5, 4.0 Hz, 1H), 3.51 (td, J=11.1, 2.7 Hz, 1H), 1.98-1.84 (m, 2H), 1.66-1.50 (m, 2H), 0.86-0.79 (m, 1H), 0.66-0.59 (m, 1H), 0.53-0.46 (m, 1H), 0.34 (m, 1H)；13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 67.41, 64.37, 57.99, 41.28, 35.22, 11.74, 11.32。
共同酸前体 -196 ，步骤 h
在-78℃向乙二酰氯(1.090 mL，12.45 mmol)在30 mL CH2Cl2中的溶液中逐滴加入含DMSO(1.767 mL，24.90 mmol)的20 mL CH2Cl2。搅拌混合物20分钟且逐滴加入含共同酸前体-196，步骤g(1.33 g，10.38 mmol)的20 mL CH2Cl2。在-78℃搅拌所得混合物20分钟。接着加入Et3N(7.52 mL，54.0 mmol)且混合物经30分钟缓慢温至室温。接着混合物用水淬灭且用CH2Cl2(3×)萃取。合并有机层且用MgSO4干燥且浓缩，得到呈澄清油状的共同酸前体-196，步骤h(1.3 g)。粗品产物未经纯化即用于下一步骤。1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 3.95 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.55-2.50 (m, 2H), 2.46 (s, 2H), 0.84 (m, 2H), 0.50 (m, 2H)。
共同酸前体 -196 ，步骤 i
在-20℃向2-(((苯甲氧基)羰基)氨基)-2-(二甲氧基磷酰基)乙酸甲酯(3.41 g，10.30 mmol)在20 mL THF中的溶液中加入1,1,3,3-四甲基胍(2.85 mL，22.67 mmol)。在-20℃搅拌所得混合物1小时。接着加入含共同酸前体-196，步骤h(1.3 g，10.30 mmol)的10 mL THF。在室温下搅拌所得棕色混合物6天。接着浓缩反应物且通过快速层析(硅胶，0-25% EtOAc/Hex)纯化粗品产物，得到呈白色固体状的共同酸前体-196，步骤i(异构体的混合物)(850 mg)。LC/MS: [M+H]+ C18H22NO5的分析性计算值332.15；实验值332.14；1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.45-7.29 (m, 5H), 6.09-5.81 (m, 1H), 5.18-5.08 (m, 2H), 3.88-3.49 (m, 5H), 3.06-2.82 (m, 2H), 2.52-2.36 (m, 2H), 0.82-0.64 (m, 2H), 0.58-0.32 (m, 2H)。
共同酸前体 -196.1 和共同酸前体 -196.2 ，步骤 j
Figure DEST_PATH_IMAGE250
在500 mL氢化压力管中，将共同酸前体-196，步骤i(异构体的混合物)(730 mg，2.203 mmol)在5 mL MeOH中的溶液用N2鼓泡30分钟。向混合物中加入四氟硼酸(-)-1,2-双((2S,5S)-2,5-二甲基磷杂环戊烷基)乙烷(环辛二烯)铑(I)(24.51 mg，0.044 mmol)，接着将该瓶置放在Parr震荡器上且在60 psi下氢化3天。接着浓缩混合物。接着通过手性HPLC(Chiralpak AD管柱，21×250 mm，10 μm)，用85% 0.1%二乙胺/庚烷-15% EtOH以15 mL/min洗脱来分离粗品产物，得到呈澄清油状的共同酸前体-196.1，步骤j(220 mg)(第一洗脱级分)和共同酸前体-196.2，步骤j(290 mg)(第二洗脱级分)。未测定异构体的绝对立体化学。
共同酸前体-196.1，步骤j：LC/MS: [M+Na]+ C18H23NNaO5的分析性计算值356.15；实验值356.16；1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.41-7.28 (m, 5H), 5.34 (d, J=8.9 Hz, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.37 (dd, J=9.0, 5.0 Hz, 1H), 3.89-3.82 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.48 (td, J=11.1, 3.1 Hz, 1H), 2.29-2.17 (m, 1H), 1.96 (t, J=12.7 Hz, 1H), 1.57-1.43 (m, 2H), 1.07-0.98 (m, 1H), 0.87-0.78 (m, 1H), 0.66-0.56 (m, 1H), 0.56-0.47 (m, 1H), 0.37-0.27 (m, 1H)；
共同酸前体-196.2，步骤j：LC/MS: [M+Na]+ C18H23NNaO5的分析性计算值356.15；实验值356.17；1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.40-7.28 (m, 5H), 5.33 (d, J=8.5 Hz, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.36 (dd, J=8.9, 5.8 Hz, 1H), 3.86 (dd, J=11.0, 3.1 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.53-3.43 (m, 1H), 2.25-2.14 (m, 1H), 1.94 (t, J=12.5 Hz, 1H), 1.67-1.44 (m, 2H), 0.97-0.90 (m, 1H), 0.86-0.79 (m, 1H), 0.66-0.57 (m, 1H), 0.53-0.44 (m, 1H), 0.33-0.24 (m, 1H)。
共同酸前体 -196.1 ，步骤 k
Figure DEST_PATH_IMAGE252
向在氢化瓶中的、共同酸前体-196.1，步骤j(210 mg，0.630 mmol)在10 mL MeOH中的溶液中加入二碳酸二甲酯(0.135 mL，1.260 mmol)和Pd/C(33.5 mg，0.031 mmol)。将该瓶置放在Parr震荡器上且在50 psi下氢化混合物4小时。接着混合物经硅藻土(Celite®)过滤且浓缩滤液，得到呈澄清油状的共同酸前体-196.1，步骤k(165 mg)。LC/MS: [M+H]+ C12H20NO5的分析性计算值258.13；实验值258.16；1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 5.39 (d, J=8.5 Hz, 1H), 4.30 (dd, J=8.9, 5.2 Hz, 1H), 3.84-3.78 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.63 (s, 3H), 3.47-3.39 (m, 1H), 2.23-2.12 (m, 1H), 1.91 (t, J=12.5 Hz, 1H), 1.49-1.39 (m, 2H), 0.97 (dd, J=13.1, 2.4 Hz, 1H), 0.81-0.74 (m, 1H), 0.61-0.52 (m, 1H), 0.46 (dt, J=10.1, 6.0 Hz, 1H), 0.32-0.24 (m, 1H)。
共同酸前体 -196.1
Figure DEST_PATH_IMAGE254
向共同酸前体-196.1，步骤k(165 mg，0.641 mmol)在2 mL THF和1 mL水中的混合物中加入LiOH(1 mL，2.0 mmol)(2 N水溶液)。在室温下搅拌所得混合物过夜。接着用乙醚(1 mL)洗涤混合物。水相用1 N盐酸水溶液酸化且用乙醚(6×)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥且浓缩，得到呈白色固体状的共同酸前体-196.1(150 mg)。LC/MS: [M+H]+ C11H18NO5的分析性计算值244.12；实验值244.09；1H NMR (500MHz, CDCl3 -d) δ 5.27 (d, J=8.9 Hz, 1H), 4.39 (dd, J=8.5, 4.9 Hz, 1H), 3.94-3.86 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.56-3.46 (m, 1H), 2.36-2.24 (m, 1H), 2.01 (t, J=12.7 Hz, 1H), 1.63-1.48 (m, 2H), 1.14-1.05 (m, 1H), 0.92-0.80 (m, 1H), 0.69-0.60 (m, 1H), 0.58-0.49 (m, 1H), 0.40-0.31 (m, 1H)。
Cap 196.2
Figure DEST_PATH_IMAGE256
根据关于共同酸前体-196.1所描述的程序自共同酸前体-196.2，步骤j合成共同酸前体-196.2。LC/MS: [M+H]+ C11H18NO5的分析性计算值244.12；实验值244.09；1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 5.27 (d, J=8.9 Hz, 1H), 4.38 (dd, J=8.2, 4.9 Hz, 1H), 3.91 (dd, J=11.1, 3.2 Hz, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.52 (t, J=11.0 Hz, 1H), 2.34-2.23 (m, 1H), 2.07-1.97 (m, 1H), 1.72-1.61 (m, 1H), 1.54 (qd, J=12.6, 4.7 Hz, 1H), 1.04-0.96 (m, 1H), 0.90-0.82 (m, 1H), 0.68-0.61 (m, 1H), 0.56-0.49 (m, 1H), 0.39-0.30 (m, 1H)。
共同酸前体 -197
Figure DEST_PATH_IMAGE258
共同酸前体 -197 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE260
将1,4-二氧螺[4.5]癸-8-酮(15 g，96 mmol)在EtOAc(150 mL)中的溶液加入到2-(苯甲氧基羰基氨基)-2-(二甲氧基磷酰基)乙酸甲酯(21.21 g，64.0 mmol)在1,1,3,3-四甲基胍(10.45 mL，83 mmol)和EtOAc(150 mL)中的溶液中。在环境温度下搅拌所得溶液72小时，接着用EtOAc(25 mL)稀释。有机层用1 N HCl(75 mL)、H2O(100 mL)和盐水(100 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤且浓缩。通过Biotage纯化(5%至25 EtOAc/己烷；300 g管柱)残余物。接着在真空下浓缩合并的含有产物的级级分且使残余物从己烷/EtOAc中重结晶，得到呈白色晶体状的2-(苯甲氧基羰基氨基)-2-(1,4-二氧螺[4.5]癸-8-亚基)乙酸甲酯(6.2 g)。1H NMR (400 MHz, CDCl3 -d) δ ppm 7.30-7.44 (5 H, m), 6.02 (1 H, br. s.), 5.15 (2 H, s), 3.97 (4 H, s), 3.76 (3 H, br. s.), 2.84-2.92 (2 H, m), 2.47 (2 H, t, J=6.40 Hz), 1.74-1.83 (4 H, m)。LC(条件OL1)：Rt=2.89 min。LC/MS: [M+Na]+ C19H23NNaO6的分析性计算值：745.21；实验值：745.47。
共同酸前体 -197 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE262
根据Burk, M. J.; Gross, M. F.和Martinez J. P. (J. Am. Chem. Soc., 1995, 117, 9375-9376和其中参考文献)的方法自烯共同酸前体-197，步骤a制备酯共同酸前体-197，步骤b：在N2氛围下向500 mL高压瓶中装入含烯共同酸前体-197，步骤a(3.5 g，9.68 mmol)的经脱气的MeOH(200 mL)。接着向溶液中加入四氟硼酸(-)-1,2-双((2S,5S)-2,5-二甲基磷杂环戊烷基)乙烷(环辛二烯)铑(I)(0.108 g，0.194 mmol)且所得混合物用N2(3×)冲洗且填充H2(3×)。在环境温度在70 psi H2下剧烈震荡溶液72小时。在减压下除去溶剂且将剩余残余物溶解在EtOAc中。接着淡褐色溶液经硅胶塞过滤且用EtOAc洗脱。在真空下浓缩溶剂，得到呈澄清油状的共同酸前体-197，步骤b(3.4 g)。1H NMR (500 MHz, CDCl3 -d) δ ppm 7.28-7.43 (5 H, m), 5.32 (1 H, d, J=9.16 Hz), 5.06-5.16 (2 H, m), 4.37 (1 H, dd, J=9.00, 5.04 Hz), 3.92 (4 H, t, J=3.05 Hz), 3.75 (3 H, s), 1.64-1.92 (4 H, m), 1.37-1.60 (5 H, m)。LC(条件OL1)：Rt=1.95 min。LC/MS: [M+H]+ C19H26NO6的分析性计算值：364.18；实验值：364.27。
共同酸前体 -197 ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE264
将共同酸前体-197，步骤b(6.68 g，18.38 mmol)溶解在MeOH(150 mL)中且加入Pd/C(0.039 g，0.368 mmol)且将悬浮液置放在1 atm H2下。在室温下搅拌反应混合物6小时且经硅藻土塞(Celite®)过滤且在减压下除去挥发性物质。回收到呈琥珀色油状的共同酸前体-197，步骤c(3.8 g)且其未经进一步纯化即使用。1H NMR (400MHz, CDCl3 -d) δ 3.92 (br. s., 4H), 3.71 (s, 3H), 3.31 (d, J=4.0 Hz, 1H), 1.87-1.44 (m, 9H)。13C NMR (101MHz, CDCl3 -d) δ 176.1, 108.7, 64.5 (2C), 59.1 , 52.0, 41.1, 34.7, 34.6 , 27.2, 25.4。
共同酸前体 -197 ，步骤 d
Figure DEST_PATH_IMAGE266
将氯甲酸甲酯(2.57 mL，33.1 mmol)加入到共同酸前体197，步骤c(3.8 g，16.57 mmol)和DIEA(23.16 mL，133 mmol)在CH2Cl2(200 mL)中的溶液中。在室温下搅拌所得溶液3小时且在减压下除去挥发性物质。通过Biotage纯化(30% EtOAc/Hex；160 g管柱)残余物。回收，得到呈琥珀色油状的共同酸前体-197，步骤d(3 g)。1H NMR (500MHz, CDCl3 -d) δ 5.24 (d, J=8.5 Hz, 1H), 4.34 (dd, J=8.9, 4.9 Hz, 1H), 3.92 (s, 4H), 3.74 (s, 3H), 3.67 (s, 3H), 1.89-1.73 (m, 3H), 1.67 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.62-1.33 (m, 5H)。13C NMR (126MHz, CDCl3 -d) 172.4, 156.7, 108.1, 64.2, 64.2, 57.7, 52.3, 52.2, 39.6, 34.2 (2C), 26.5, 25.0。
共同酸前体 -197 ，步骤 e
Figure DEST_PATH_IMAGE268
将共同酸前体-197，步骤d(1.15 g，4.00 mmol)溶解在THF(50 mL)中，接着相继加入水(30 mL)、冰AcOH(8.02 mL，140 mmol)和二氯乙酸(1.985 mL，24.02 mmol)。在室温下搅拌混合物过夜且通过在剧烈搅拌下缓慢加入固体碳酸钠直至不再发现气体释放来淬灭反应物。将粗品产物萃取到10%乙酸乙酯-二氯甲烷中，且合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤且浓缩。通过Biotage纯化(0至30% EtOAc/Hex；40 g管柱)残余物且回收，得到呈澄清油状的共同酸前体-197，步骤e(0.72 g)。1H NMR (500MHz, CDCl3 -d) δ 5.36 (d, J=8.2 Hz, 1H), 4.46 (dd, J=8.4, 5.0 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.68 (s, 3H), 2.46-2.39 (m, 2H), 2.38-2.29 (m, 2H), 2.09-2.03 (m, 1H), 1.96-1.88 (m, 1H), 1.64-1.51 (m, 2H)。13C NMR (126MHz, CDCl3 -d) δ 210.1, 171.9, 156.7, 57.2, 52.5 (2C), 40.2, 40.2, 39.4, 28.7, 27.6。
共同酸前体 -197
冷却共同酸前体-197，步骤e(0.68 g，2.80 mmol)在THF(7.5 mL)和MeOH(7.50 mL)中的溶液至0℃。逐滴加入2 N NaOH水溶液(1.9 mL，3.80 mmol)且在室温下搅拌所得溶液2小时。加入己烷：Et2O的1:1混合物(20 mL)且弃去有机层。接着用10% KHSO4水溶液酸化水层至约pH ~1，且用EtOAc(2×)萃取混合物。干燥(MgSO4)合并的有机层，过滤且浓缩。回收，得到呈白色泡沫状的共同酸前体-197(0.55 g)且其未经进一步纯化即使用。1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 12.70 (br. s., 1H), 7.49 (d, J=8.5 Hz, 1H), 4.01 (dd, J=8.2, 6.7 Hz, 1H), 3.54 (s, 3H), 2.45-2.30 (m, 2H), 2.23-2.13 (m, 3H), 1.94-1.79 (m, 3H), 1.57 (qd, J=12.7, 4.1 Hz, 1H), 1.47 (qd, J=12.7, 4.4 Hz, 1H)。13C NMR (126MHz, DMSO-d6) δ 210.2, 173.0, 156.8, 57.6, 51.5, 39.7 ( 2C), 36.9, 28.6, 27.5。
共同酸前体 -198
在0℃向(S)-2-氨基-2-(3-(三氟甲基)双环[1.1.1]戊-1-基)乙酸(自商业来源获得；0.5151 g，2.463 mmol)和碳酸钠(0.131 g，1.231 mmol)在1 M氢氧化钠水溶液(2.4 mL，2.400 mmol)中的混合物中逐滴加入氯甲酸甲酯(0.2 mL，2.59 mmol)。接着在室温下搅拌反应物4小时。接着在冰/水浴中将其冷却，且加入乙醚(25 mL)，且搅拌并分离各层。用乙醚(2×25 mL)洗涤水层。水层用冰-水浴冷却且用12 N HCl酸化至pH值在1-2范围内。用CH2Cl2(3×50 mL)萃取，用MgSO4干燥且在真空中浓缩，得到呈灰白色固体状的共同酸前体-198(480.7 mg)且其未经进一步纯化即使用。1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.86 (br s, 1H), 7.61 (br d, J=8.0 Hz, 1H), 4.16 (d, J=8.0 Hz, 1H), 3.57 (s, 3H), 2.00 (d, J=8.3 Hz, 3H), 1.93 (d, J=9.3, 3H)。
实施例
现将结合某些实施例描述本发明，这些实施例不欲限制本发明的范畴。相反，本发明涵盖可包括在权利要求范围内的所有替代物、修改和等价物。因此，以下实施例(包括特定实施方案)将说明本发明的一种实践，应理解，实施例是出于说明某些实施方案的目的且为了提供相信为最适用且最容易理解的对于本发明程序和概念方面的描述而提出。
纯度评估、分子量和保留时间根据以下条件进行。
条件 1(用Agilent 1200系列LC系统进行的均质性指数评估)
管柱 =Xbridge phenyl((4.6×150) mm，3.5 µm)
溶剂A =缓冲液：CH3CN(95:5)
溶剂B =缓冲液：CH3CN(5:95)
缓冲液 =0.05% TFA的H2O溶液(pH 2.5，用稀氨调节)
起始%B =10
最终%B =100
梯度时间 =12 min
等度洗脱时间（Isocratic time）=3 min
终止时间 =23 min
流动速率 =1 mL/min
波长 =220 nm和254 nm。
条件 2(用Agilent 1200系列LC系统进行的均质性指数评估)
管柱 =Sunfire C18((4.6×150) mm，3.5 µm)
溶剂A =缓冲液：CH3CN(95:5)
溶剂B =缓冲液：CH3CN(5:95)
缓冲液 =0.05% TFA的H2O溶液(pH 2.5，用稀氨调节)
起始%B =10
最终%B =100
梯度时间 =12 min
等度洗脱时间=3 min
终止时间 =23 min
流动速率 =1 mL/min
波长 =220 nm和254 nm。
条件 3(用Agilent 1200系列LC系统进行的均质性指数评估)
管柱 =Xbridge phenyl((4.6×150) mm，3.5 µm)
溶剂A =缓冲液：CH3CN(95:5)
溶剂B =缓冲液：CH3CN(5:95)
缓冲液 =0.05% TFA的H2O溶液(pH 2.5，用稀氨调节)
起始%B =0
最终%B =50
梯度时间-1 =15 min
最终%B =100
梯度时间-2 =3 min
等度洗脱时间=5 min
终止时间 =28 min
流动速率 =1 mL/min
波长 =220 nm和254 nm。
条件 4(用Agilent 1200系列LC系统进行的均质性指数评估)
管柱 =Sunfire C18((4.6×150) mm，3.5 µm)
溶剂A =缓冲液：CH3CN(95:5)
溶剂B =缓冲液：CH3CN(5:95)
缓冲液 =0.05% TFA的H2O溶液(pH 2.5，用稀氨调节)
起始%B =0
最终%B =50
梯度时间-1 =15 min
最终%B =100
梯度时间-2 =3 min
等度洗脱时间=5 min
终止时间 =28 min
流动速率 =1 mL/min
波长 =220 nm和254 nm。
条件 5(用Agilent 1200系列LC系统进行的均质性指数评估)
管柱 =Sunfire C18((4.6×150) mm，3.5 µm)
溶剂A =缓冲液：CH3CN(95:5)
溶剂B =缓冲液：CH3CN(5:95)
缓冲液 =0.05% TFA的H2O溶液(pH 2.5，用稀氨调节)
起始%B =10
最终%B =100
梯度时间 =25 min
等度洗脱时间=5 min
终止时间 =36 min
流动速率 =1 mL/min
波长 =220 nm和254 nm。
条件 6( 用 Agilent 1200 系列 LC 系统进行的均质性指数评估 )
管柱 =Xbridge phenyl((4.6×150) mm，3.5 µm)
溶剂A =缓冲液：CH3CN(95:5)
溶剂B =缓冲液：CH3CN(5:95)
缓冲液 =0.05% TFA的H2O溶液(pH 2.5，用稀氨调节)
起始%B =10
最终%B =100
梯度时间 =25 min
等度洗脱时间=5 min
终止时间 =36 min
流动速率 =1 mL/min
波长 =220 nm和254 nm。
条件 7(用Agilent 1200系列LC系统进行的均质性指数评估)
管柱 =Eclipse XDB C18((4.6×150) mm，5 µm)
溶剂A =20 mM NH4OAc的H2O溶液
溶剂B =CH3CN
起始%B =10
最终%B =100
梯度时间 =12 min
等度洗脱时间=3 min
终止时间 =20 min
流动速率 =1 mL/min
波长 =220 nm和254 nm。
条件 8(使用与6140单一四极质谱仪耦合的Agilent LC-1200系列进行的LC-MS分析，ESI +ve模式，MS范围：100-2000)
管柱 =Chromolith SpeedROD C18((4.6×30) mm，5 µm)
溶剂A =MeOH(10%)+0.1% TFA的H2O溶液(90%)
溶剂B =MeOH(90%)+0.1% TFA的H2O溶液(10%)
起始%B =0
最终%B =100
梯度时间 =2 min
终止时间 =1 min
流动速率 =5 mL/min
波长 =220 nm。
条件 9(使用与6140单一四极质谱仪耦合的Agilent LC-1200系列进行的LC-MS分析，ESI +ve模式，MS范围：100-2000)
管柱 =Zorbax SB C18((4.6×50) mm，5 µm)
溶剂A =MeOH(10%)+0.1% TFA的H2O溶液(90%)
溶剂B =MeOH(90%)+0.1% TFA的H2O溶液(10%)
起始%B =0
最终%B =100
梯度时间 =2 min
终止时间 =3 min
流动速率 =5 mL/min
波长 =220 nm。
条件 10(使用与6140单一四极质谱仪耦合的Agilent LC-1200系列进行的LC-MS分析，ESI +ve模式和-ve模式，MS范围：100-2000)
管柱 =Purospher@star RP-18((4.0×55) mm，3 µm)
溶剂A =ACN(10%)+20 mM NH4OAc的H2O溶液(90%)
溶剂B =ACN(90%)+20 mM NH4OAc的H2O溶液(10%)
起始%B =0
最终%B =100
梯度时间 =2.0 min
等度洗脱时间=0.5 min
终止时间 =3 min
流动速率 =2.5 mL/min
波长 =220 nm。
条件 11(使用与6140单一四极质谱仪耦合的Agilent LC-1200系列进行的LC-MS分析，ESI +ve模式和-ve模式，MS范围：100-2000)
管柱 =Purospher@star RP-18((4.0×55) mm，3 µm)
溶剂A =ACN(10%)+20 mM NH4OAc的H2O溶液(90%)
溶剂B =ACN(90%)+20 mM NH4OAc的H2O溶液(10%)
起始%B =0
最终%B =100
梯度时间 =1.8 min
等度洗脱时间 =1.5 min
终止时间 =4 min
流动速率 =2.5 mL/min
波长 =220 nm。
条件 12(使用与6140单一四极质谱仪耦合的Agilent LC-1200系列进行的LC-MS分析，ESI +ve模式和-ve模式，MS范围：100-2000)
管柱 =Xbridge phenyl(4.6×30 mm，3.5 µm)
溶剂A =CH3CN(2%)+10 mM NH4COOH的H2O溶液(98%)
溶剂B =CH3CN(98%)+10 mM NH4COOH的H2O溶液(2%)
起始%B =0
最终%B =100
梯度时间 =1.5 min
等度洗脱时间 =1.7 min
终止时间 =4 min
流动速率 =1.8 mL/min
波长 =220 nm。
条件 13(使用与6330离子阱质谱仪耦合的Agilent LC-1200系列进行的LC-MS分析，ESI +ve模式和-ve模式，MS范围：100-2000)
管柱 =Ascentis Express C18(2.1×50 mm，2.7 µm)
溶剂A =CH3CN(2%)+10 mM NH4COOH的H2O溶液(98%)
溶剂B =CH3CN(98%)+10 mM NH4COOH的H2O溶液(2%)
起始%B =0
最终%B =100
梯度时间 =1.4 min
等度洗脱时间 =1.6 min
终止时间 =4 min
流动速率 =1.0 mL/min
波长 =220 nm。
条件 14(使用与6330离子阱质谱仪耦合的Agilent LC-1200系列进行的LC-MS分析，ESI +ve模式和-ve模式，MS范围：100-2000)
管柱 =Ascentis Express C8(2.1×50 mm，2.7 µm)
溶剂A =CH3CN(2%)+10 mM NH4COOH的H2O溶液(98%)
溶剂B =CH3CN(98%)+10 mM NH4COOH的H2O溶液(2%)
起始%B =0
最终%B =100
梯度时间 =1.5 min
等度洗脱时间=1.5 min
终止时间 =4 min
流动速率 =1.0 mL/min
波长 =220 nm。
条件 15(使用与6330离子阱质谱仪耦合的Agilent LC-1200系列进行的LC-MS分析，ESI +ve模式和-ve模式，MS范围：100-2000)
管柱 =Ascentis Express C18(2.1×50 mm，2.7 µm)
溶剂A =CH3CN(2%)+10 mM NH4COOH的H2O溶液(98%)
溶剂B =CH3CN(98%)+10 mM NH4COOH的H2O溶液(2%)
起始%B =0
最终%B =100
梯度时间 =1.5 min
等度洗脱时间=1.5 min
终止时间 =4 min
流动速率 =1.0 mL/min
波长 =220 nm。
条件 16(使用Agilent GCMS模块-7890(GC)5975C(MSD)进行的GC-MS分析)
管柱=DB-1，30 m×0.25 mm ID×0.25 µ膜厚度
管柱流动速率=1.2 mL/min，恒定氦气流
载气 =氦气
注射器温度 =250℃
注射体积 =1 µL
分流比 =1:20
质量检测器：
源温度 =230℃
四极温度 =150℃
管柱温度梯度=初始温度50℃且保持1分钟。以25℃/min递增至300℃且保持5分钟。
条件 17(使用与6140四极质谱仪耦合的Agilent LC-1200系列进行的LC-MS分析，(ESI+APCI)多模+ve模式和-ve模式，MS范围：100-1300)
管柱 =YMC PACK TMS(3×50 mm，3 µm)
溶剂A =CH3CN(2%)+10 mM NH4COOH的H2O溶液(98%)
溶剂B =CH3CN(98%)+10 mM NH4COOH的H2O溶液(2%)
起始%B =0
最终%B =100
梯度时间 =1.5 min
等度洗脱时间=1.7 min
终止时间 =4 min
流动速率 =1.0 mL/min
波长 =220 nm。
条件 18(使用与6140单一四极质谱仪耦合的Agilent LC-1200系列进行的LC-MS分析，ESI +ve模式和-ve模式，MS范围：100-2000)
管柱 =Purospher@star RP-18((4.0×55) mm，3 µm)
溶剂A =ACN(10%)+20 mM NH4OAc的H2O溶液(90%)
溶剂B =ACN(90%)+20 mM NH4OAc的H2O溶液(10%)
起始%B =0
最终%B =100
梯度时间 =2.0 min
等度洗脱时间 =0.5 min
终止时间 =4 min
流动速率 =2.5 mL/min
波长 =220 nm。
实施例 1
Figure DEST_PATH_IMAGE274
实施例 1 ， 步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE276
用N2冲洗1,4-二溴萘(1.0 g，3.49 mmol)在甲苯(10 mL)中的溶液10分钟。接着相继加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡(1.38 g，3.84 mmol)和Pd(Ph3P)2Cl2(251 mg，0.349 mmol)。反应混合物用N2冲洗10分钟且在100℃下回流过夜。反应混合物用饱和KF溶液(10 mL)淬灭且在室温下搅拌2小时。经硅藻土塞(Celite®)过滤反应混合物且分离有机层并在真空中浓缩。在室温向所得残余物中加入3 N HCl(20 mL)且搅拌2小时。接着反应混合物用EtOAc萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(ISCO，EtOAc:石油醚，20:80)纯化粗品，得到溴化物1a(600 mg)。LC/MS(条件 8)：Rt=1.99 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 8.75-8.73 (m, 1H), 8.36-8.34 (m , 1H), 7.85 (d, J=7.8, 1H), 7.76 (d, J=7.8, 1H), 7.69-7.65 (m , 2H), 2.76 (s, 3H)。LC/MS: [M+H]+ C12H10BrO的分析性计算值：248.98；实验值249.0。
实施例 1 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE278
在0℃向搅拌着的溴化物1a(600 mg，2.40 mmol)在二噁烷(10 mL)中的溶液中加入Br2(384 mg，2.40 mmol)且在室温下搅拌过夜，随后用冰淬灭。反应混合物用EtOAc萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，得到粗品2,2-二溴-1-(4-溴萘-1-基)乙酮(780 mg)。在室温向含粗品二溴乙酰基衍生物(400 mg，0.98 mmol)的ACN(25 mL)中相继加入亚磷酸二乙酯(0.12 mL，0.98 mmol)和DIEA(0.17 mL，0.98 mmol)且搅拌2小时。蒸发挥发性物质且向反应混合物中加入水。接着反应混合物用EtOAc萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，得到粗品2-溴-1-(4-溴萘-1-基)乙酮(1b)(302 mg)，其按原样用于下一步骤中。LC/MS(条件 8)：Rt=2.09 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 8.44-8.41 (m, 1H), 8.31-8.28 (m , 1H), 8.11 (d, J=7.8, 1H), 8.07 (d, J=7.8, 1H), 7.82-7.76 (m , 2H), 5.06 (s, 2H)。LC/MS: [M+H]+ C12H9Br2O的分析性计算值：326.89；实验值328.8。
实施例 1 ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE280
向搅拌着的二溴化物1b(130 mg，0.39 mmol)在ACN(20 mL)中的溶液中相继加入N-Boc-L-脯氨酸(85 mg，0.39 mmol)和DIEA(51 mg，0.39 mmol)。在室温下搅拌反应混合物2小时。蒸发挥发性物质且反应混合物用水淬灭。接着反应混合物用EtOAc萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，得到酮酯1c(150 mg)，其未经纯化即用于下一步骤。LC/MS(条件 8)：Rt=2.17 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 8.46 (app dd, 1H), 8.28 (d, J=8.0, 1H), 8.06-8.01 (m, 2H), 7.81-7.74 (m, 2H), 5.57-5.42 (m, 2H), 4.36-4.32 (m, 1H), 3.42-3.23 (被遮蔽, 2H), 2.29-2.10 (m, 2H), 1.90-1.77 (m, 2H), 1.35 (s, 9H)。LC/MS: [M+H-Boc]+ C17H17BrNO3的分析性计算值：362.03；实验值364.0。
实施例 1 ，步骤 d
Figure DEST_PATH_IMAGE282
向酮酯1c(150 mg，0.32 mmol)在二甲苯(10 mL)中的溶液中加入NH4OAc(600 mg，7.79 mmol)。在压力管中130℃加热反应混合物过夜。蒸发挥发性物质且反应混合物用饱和NaHCO3溶液中和。接着反应混合物用DCM萃取，用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(ISCO，MeOH:CHCl3，5:95)纯化粗品，得到溴化物1d(60 mg)。LC/MS(条件 8)：Rt=1.73 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 12.16/12.07 (br s, 1H), 8.89 (d, J=8.8, 1H), 8.18 (d, J=8.4, 1H), 7.88 (d, J=7.6, 1H), 7.71-7.67 (m, 1H), 7.62-7.58 (m, 2H), 7.47 (br s, 1H), 4.94 (app br d, 0.4H), 4.85 (br s, 0.6H), 3.62-3.50 (m, 1H), 3.43-3.32 (m, 1H), 2.33-2.21 (m, 1H), 2.09-1.86 (m, 3H), 1.43 (s, 4H), 1.20 (s, 5H)。LC/MS: [M+H]+ C22H25BrN3O2的分析性计算值：442.11；实验值442.0。
实施例 1 ，步骤 e
向(S)-2-(5-(4-溴萘-1-基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(280 mg，0.63 mmol)和(S)-2-(5-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(参见专利申请WO 2008/021927；278 mg，0.56 mmol)在二噁烷：水(10 mL:2 mL)中的混合物中加入K2CO3(175 mg，1.26 mmol)。用N2冲洗反应混合物10分钟。接着加入Pd(dppf)Cl2(26 mg, 0.031 mmol)且再用N2冲洗10分钟。在90℃加热反应混合物过夜。蒸发挥发性物质且残余物悬浮在DCM中，经短硅藻土垫(Celite®)过滤。接着分离有机层，用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(ISCO，MeOH:CHCl3，5:95)纯化粗品，得到苯基-萘1e(260 mg)。LC/MS(条件 8)：Rt=1.65 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 12.11/11.97/11.87 (br s, 2H), 8.87 (br s, 1H), 7.92-7.83 (m, 3H), 7.73-7.45 (m, 8H), 4.97-4.81 (m, 2H), 3.62-3.52 (m, 2H), 3.42-3.34 (m, 2H), 2.33-1.82 (m, 8H), 1.44-1.20 (m, 18H)。LC/MS: [M+H]+ C40H47N6O4的分析性计算值：675.36；实验值675.2。
实施例 1 ，步骤 f
Figure DEST_PATH_IMAGE286
向氨基甲酸酯1e(130 mg，0.19 mmol)在MeOH(30 mL)中的溶液中加入HCl/乙醚(20 mL)且在室温下搅拌1小时。在真空中除去挥发性组分且用乙醚洗涤残余物。所得盐暴露在高真空中，得到呈固体状的吡咯烷盐酸盐1f (85 mg)，其按原样用于下一步骤。LC/MS(条件 8)：Rt=1.18 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 10.41/10.32 (br s, 2H), 8.42-8.37 (m, 1H), 8.17 (br s, 1H), 8.10 (app d, 2H), 7.99 (br s, 1H), 7.95 (app d, 1H), 7.82 (app d, 1H), 7.73-7.58 (m, 5H), 5.06 (br s, 2H), 3.43-3.36 (m, 4H), 2.50-1.98 (m, 8H)。LC/MS: [M+H]+ C30H31N6的分析性计算值：475.25；实验值475.2。
实施例 1
在室温向吡咯烷1f/4HCl(80 mg，0.16 mmol)在DMF(15 mL)中的溶液中加入DIEA(0.23 mL，1.34 mmol)。接着相继加入(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(62 mg，0.35 mmol)和HATU(131 mg，0.34 mmol)。在室温下搅拌2小时后，在真空中除去挥发性组分且残余物用DCM萃取，用水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。粗品经反相HPLC纯化(ACN/水/TFA)，得到呈固体状的实施例1的TFA盐(55 mg)。LC(条件 1 和 2)：>98%均质性指数。LC/MS(条件 8)：Rt=1.48 min。1H NMR (MeOD, δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 8.04-7.92 (m, 5H), 7.81-7.75 (m, 2H), 7.70-7.60 (m, 5H), 5.34-5.28 (m, 2H), 4.28-4.26 (m, 2H), 4.18-4.10 (m, 2H), 3.92-3.87 (m, 2H), 3.68 (s, 6H), 2.65-2.58 (m, 2H), 2.35-2.07 (m, 8H), 1.05-0.93 (m, 12H)。LC/MS: [M+H]+ C44H53N8O6的分析性计算值：789.4；实验值789.4。
实施例 2
Figure DEST_PATH_IMAGE288
根据关于实施例1的合成所描述的程序自吡咯烷1f/4HCl和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸制备实施例2的TFA盐。LC(条件 1 和 2)：>95%均质性指数。LC/MS(条件 8)：Rt=1.36 min。LC/MS: [M+H]+ 48H57N8O8的分析性计算值：873.42；实验值873.4。
实施例 3
Figure DEST_PATH_IMAGE290
实施例 3 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE292
在室温向4-氨基茚满(5 g，37.56 mmol)在乙酸(350 mL)中的溶液中逐滴加入含ICl(6.09 g，37.56 mmol)的乙酸(14 mL)。搅拌所得溶液过夜。反应完成后，在减压下蒸发溶剂。将残余物溶解在EtOAc(200 mL)中且溶液用饱和NaHCO3溶液洗涤且水层用EtOAc(200 mL)萃取。合并的萃取物用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(ISCO，EtOAc:石油醚，11:89)纯化粗品，得到呈白色固体状的碘化物3a(6.4 g)。LC/MS(条件 9)：Rt=1.40 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 7.31 (d, J=8.4, 1H), 6.29 (d, J=8.4, 1H), 3.55 ( br s, 2H), 2.91-2.84 (m, 4H), 2.13-2.06 (m, 2H)。LC/MS: [M+H]+ C9H11IN的分析性计算值：259.99；实验值260.0。
实施例 3 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE294
向搅拌着的碘化物3a(6.2 g，23.9 mmol)、4-溴苯基硼酸(5.28 g，26.3 mmol)在无水MeOH(100 mL)中的溶液中加入K2CO3(7.43 g，53.7 mmol)且用N2冲洗反应混合物10分钟。接着加入Pd(Ph3P)4(828 mg，0.71 mmol)且反应混合物再用N2冲洗10分钟且在60℃加热过夜。反应完成后，混合物经硅藻土垫(Celite®)过滤且在减压下浓缩。将残余物溶解在EtOAc(250 mL)中，用水洗涤且水层用EtOAc(250 mL)萃取。合并的萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(ISCO，EtOAc:石油醚，12:88)纯化粗品，得到呈灰白色固体状的溴化物3b(4 g)。LC/MS(条件 9)：Rt=1.75 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 7.50-7.47 (m, 2H), 7.28-7.25 (m, 2H), 7.03 (d, J=8.0, 1H), 6.60 (d, J=8.0, 1H), 3.65 ( br s, 2H), 2.95 (t, J=7.4, 2H), 2.78 (t, J=7.2, 2H), 2.13-2.06 (m, 2H)。LC/MS: [M+H]+ C15H15BrN的分析性计算值：288.03；实验值288.0。
实施例 3 ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE296
冷却溴化物3b(4 g，13.9 mmol)在48%氢溴酸水溶液(20 mL)中的溶液至-15℃。接着，缓慢加入冰冷的NaNO2(1.92 g，27.8 mmol)在水(15 mL)中的溶液且维持温度介于-10℃至-15℃之间30分钟。在-15℃向上述反应混合物中加入CuBr(200 mg，1.39 mmol)，维持低于15℃历时3小时且经12小时缓慢温至室温。通过加入10% NaOH调节反应混合物至约pH 10。反应混合物经硅藻土(Celite®)过滤且用EtOAc洗涤。分离各层且用EtOAc萃取水层2次。合并的萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(SiO2，230-400目，石油醚)纯化粗品，得到呈白色固体状的二溴化物3c(2.1 g)。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 7.55-7.53 (m, 2H), 7.38 (d, J=8.0, 1H), 7.27-7.25 (m, 2H), 7.0 (d, J=8.0, 1H), 3.02 (t, J=7.2, 2H), 3.01 (t, J=7.6, 2H), 2.10-2.03 (m, 2H)。
实施例 3 ，步骤 d
Figure DEST_PATH_IMAGE298
向搅拌着的二溴化物3c(1.4 g，4.0 mmol)在无水二噁烷(20 mL)中的溶液中加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡(5.7 g，16 mmol)且反应混合物用N2冲洗30分钟。接着加入Pd(Ph3P)2Cl2(280 mg，0.4 mmol)，用N2冲洗10分钟且在90℃搅拌混合物16小时。混合物经硅藻土垫(Celite®)过滤且在减压下浓缩滤液。将所得残余物溶解在EtOAc中且冷却至冰浴温度。接着缓慢加入2 N HCl(20 mL)且经2小时温至室温。分离有机层且水相用EtOAc(150 mL)反萃取。合并的萃取物用10% NaHCO3、水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(ISCO，EtOAc:石油醚，10:90)纯化粗品，得到呈淡黄色固体状的二酮3d(700 mg)。LC/MS(条件 9)：Rt=2.17 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 8.06-8.04 (m, 2H), 7.78 (d, J=8.0, 1H), 7.56-7.54 (m, 2H), 7.30 (d, J=8.0, 1H), 3.34 (t, J=7.6, 2H), 2.95 (t, J=7.4, 2H), 2.66 (s, 3H), 2.64 (s, 3H), 2.12-2.04 (m, 2H)。LC/MS: [M+H]+ C19H19O2的分析性计算值：279.13；实验值279.2。
实施例 3 ，步骤 e
在0℃向二酮3d(1.03 g，3.7 mmol)在无水二噁烷(20 mL)中的溶液中加入含Br2(1.18 g，7.4 mmol)的二噁烷(5 mL)且混合物经3小时温至室温。反应完成后，在减压下蒸发溶剂。将残余物溶解在DCM(100 mL)中且溶液用饱和NaHCO3溶液洗涤且水相用DCM(100 mL)萃取。合并的萃取物经Na2SO4干燥，得到二溴化物3e(1.5 g)，其按原样用于下一步骤。LC/MS(条件 9)：Rt=2.12 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 8.09-8.03 (m, 2H), 7.77 (d, J=8.0, 1H), 7.58-7.53 (m, 2H), 7.31 (d, J=8.0, 1H), 4.48 (s, 4H), 3.35-3.32 (m, 2H), 2.96-2.94 (m, 2H), 2.11-2.07 (m, 2H)。LC/MS: [M+H]+ C19H17Br2O2的分析性计算值：434.95；实验值435.0。
实施例 3 ，步骤 f
Figure DEST_PATH_IMAGE302
冷却含(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸(1.57 g，6.92 mmol)的乙腈(50 mL)至冰浴温度且加入DIEA(1.11 g，8.6 mmol)。向上述反应混合物中缓慢加入溶解在乙腈(50 mL)中的二溴化物3e(1.5 g，3.46 mmol)且经3小时温至室温。反应完成后，在减压下蒸发溶剂。将残余物溶解在EtOAc(200 mL)中且溶液用饱和NaHCO3溶液、饱和NH4Cl洗涤且水相用EtOAc(100 mL)萃取。合并的萃取物用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(ISCO，EtOAc:石油醚，25:75)纯化粗品，得到呈白色固体状的二酮酯3f(1.2 g)。LC/MS(条件 10)：Rt=2.47 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 7.99 (d, J=8.0, 2H), 7.69 (d, J=8.0, 1H), 7.56 (d, J=8.0, 2H), 7.29 (d, J=8.0, 1H), 5.56-5.12 (m, 4H), 4.23 (br s, 2H), 3.55 (br s, 1H), 3.47 (br s, 1H), 3.31 (app t, 2H), 2.94 (app t, 2H), 2.66-2.59 (m, 2H), 2.51-2.45 (m, 2H), 2.12-2.06 (m, 2H), 1.73-1.64 (m, 2H), 1.47 (br s, 18H), 0.90-0.85 (m, 2H), 0.53-0.47 (m, 2H)。LC/MS: [M+H2O]+ C41H50N2O11的分析性计算值：746.34；实验值746.4。
实施例 3 ，步骤 g-1 和 g-2
Figure DEST_PATH_IMAGE304
向二酮酯3f(700 mg，0.961 mmol)在无水二甲苯(50 mL)中的溶液中加入无水NH4OAc(1.480 g，19.23 mmol)。反应混合物用N2冲洗10分钟且在130℃加热过夜。在减压下蒸发溶剂且将残余物溶解在EtOAc(200 mL)中，用饱和NaHCO3溶液洗涤且水相用EtOAc(100 mL)萃取。合并的萃取物用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。使用相同上述条件对另一500 mg批次进行处理。收集两个批次的粗品且经反相HPLC纯化(ACN/水/NH4OAc)，得到呈白色固体状的咪唑3g-1(495 mg)。LC/MS(条件 11)：Rt=2.08 min。1H NMR (MeOD, δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 7.77 (d, J=8.0, 2H), 7.60 (app br d, 1H), 7.49 (d, J=8.4, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.27 (d, J=8.0, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.70 (br s, 2H), 3.61 (br s, 2H), 3.12 (t, J=7.2, 2H), 3.07 (app t, 2H), 2.58-2.52 (m, 2H), 2.39-2.34 (m, 2H), 2.15-2.10 (m, 2H), 1.78-1.71 (m, 2H), 1.31-1.28 (br s, 18H), 0.90-0.87 (m, 2H), 0.63 (br s, 2H)。LC/MS: [M+H]+ C41H49N6O4的分析性计算值：689.37；实验值689.3。自同一反应物HAI 分离出呈白色固体状的区域异构体（regioisomeric）3g-2(稍后洗脱)(62 mg)。LC/MS(条件 11)：Rt=2.10 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 11.89 (s, 1H), 11.81 (s, 1H), 7.85-7.72 (m, 2H), 7.62-7.58 (m, 2H), 7.52-7.45 (m, 4H), 4.65-4.62 (m, 2H), 3.48-3.39 (m, 2H), 2.96-2.93 (m, 4H), 2.40-2.22 (m, 4H), 2.03-1.98 (m, 2H), 1.67-1.60 (m, 2H), 1.35-1.15 (br s, 18H), 0.80-0.71 (m, 2H), 0.58-0.51 (m, 2H)。LC/MS: [M+H]+ C41H49N6O4的分析性计算值：689.37；实验值689.4。
实施例 3 ，步骤 h
Figure DEST_PATH_IMAGE306
在0℃向氨基甲酸酯3g-1(11 mg，0.015 mmol)在MeOH(1.0 mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4N；3 mL)且在室温下搅拌混合物3小时。在真空中除去挥发性组分，残余物与无水DCM(3×5 mL)共同蒸发且在高真空下干燥，得到呈淡黄色固体状的吡咯烷3h(4HCl)(10 mg)。LC/MS(条件 10)：Rt=1.49 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 10.24 (br s, 2H), 7.88 (d, J=8.0, 2H), 7.83 (s, 1H), 7.77 (app d, 1H), 7.56-7.54 (m, 3H), 7.32 (d, J=8.0, 1H), 4.70-4.62 (m, 2H), 3.40-3.35 (被遮蔽, 2H), 3.12 (t, J=7.2, 2H), 3.03 (app t, 2H), 2.08-2.01 (m, 2H), 1.93 (br s, 2H), 1.30-1.25 (m, 2H), 1.14 (br s, 2H), 0.90-0.79 (m, 4H)。LC/MS: [M+H]+ C31H33N6的分析性计算值：489.27；实验值489.3。
实施例 3
将HATU(12.4 mg，0.032 mmol)加入到吡咯烷3h(4HCl)(9.5 mg，0.015 mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(5.87 mg，0.033 mmol)和DIEA(0.022 mL，0.12 mmol)的DMF溶液中且在室温下搅拌2小时。在真空中除去挥发性组分，将残余物溶解在EtOAc(100 mL)中，用饱和NaHCO3溶液、饱和NH4Cl洗涤且水相用EtOAc(50 mL)萃取。合并的萃取物用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。粗品经反相HPLC纯化(ACN/水/NH4OAc)，得到呈游离碱形式的实施例3(2 mg，淡黄色固体)。LC(条件 1 和 2)：>98%均质性指数。LC/MS(条件 11)：Rt=1.78 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 12.09/11.90/11.72/11.69 (br s, 2H), 7.82-7.66 (m, 3H), 7.53-7.43 (m, 3H), 7.30-7.21 (m, 2H), 7.16-7.06 (m, 2H), 5.15-5.10 (m, 2H), 4.45 (t, J=7.2, 2H), 3.56 (br s, 8H), 3.12-3.06 (m, 2H), 3.04-2.99 (m, 2H), 2.50-2.46 (m, 2H), 2.26-2.20 (m, 2H), 2.12-2.01 (m, 4H), 1.89-1.86 (m, 2H), 1.06-0.87 (m, 14H), 0.73 (br s, 2H)。LC/MS: [M-H]- C45H53N8O6的分析性计算值：801.42；实验值801.4。
实施例 4
Figure DEST_PATH_IMAGE308
根据关于实施例3所描述的程序自吡咯烷3h(盐酸盐)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸制备实施例4(游离碱，含有残余乙酸铵)。LC(条件 1 和 4)：>98%均质性指数。LC/MS(条件 10)：Rt=1.51 min。LC/MS: [M+H]+ C49H59N8O8的分析性计算值：887.44；实验值887.4。
实施例 5
Figure DEST_PATH_IMAGE310
实施例5(游离碱，含有残余乙酸铵)由氨基甲酸酯3g-2根据关于其区位异构体实施例3的制备所描述的程序制备。LC(条件 1 和 2)：>97%均质性指数。LC/MS(条件 10)：Rt=1.84 min。1H NMR (MeOD, δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 7.76 (d, J=8.0, 2H), 7.54-7.51 (m, 4H), 7.35 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 5.18-5.16 (m, 2H), 4.62-4.57 (m, 2H), 3.72-3.63 (m, 8H), 3.05-2.98 (m, 4H), 2.58-2.49 (m, 2H), 2.48-2.39 (m, 2H), 2.20-2.10 (m, 6H), 1.17-1.10 (m, 2H), 1.04-0.93 (m, 12H), 0.82-0.77 (m, 2H)。LC/MS: [M+H]+ C45H55N8O6的分析性计算值：803.42；实验值803.4。
实施例 6
实施例 6 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE314
根据关于二酮酯3f的制备所描述的程序自二溴化物3e和(2S,5S)-5-甲基吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯制备二酮酯6a。
实施例 6 ，步骤 b-1 和 b-2
Figure DEST_PATH_IMAGE316
向二酮酯6a(700 mg，0.956 mmol)在无水二甲苯(15 mL)中的溶液中加入无水NH4OAc(1.47 g，19.12 mmol)。反应混合物用N2冲洗10分钟且在130℃加热过夜。在减压下蒸发溶剂且将残余物溶解在EtOAc(200 mL)中，用饱和NaHCO3溶液洗涤且水相用EtOAc(100 mL)萃取。合并的萃取物用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。粗品经反相HPLC纯化(ACN/水/NH4OAc)，得到呈白色固体状的咪唑6b-1(115 mg)。自同一反应物还分离出呈白色固体状的噁唑咪唑6b-2(稍后洗脱)(103 mg)。
实施例 6
根据关于实施例3和实施例4的制备所描述的程序以双-咪唑6b-1为起始物质制备实施例6(TFA盐)。LC(条件 5 和 6)：>96%均质性指数。LC/MS(条件 10)：Rt=1.70 min。1H NMR (MeOD, δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 7.98-7.96 (m, 0.5H), 7.89 (s, 0.8H), 7.85 (d, J=8.4, 1.7H), 7.73-7.66 (m, 3.7H), 7.54 (d, J=8.0, 0.9H), 7.44-7.41 (m, 1.4H), 5.75-5.71 (m, 0.3H), 5.22-5.15(m, 1.7H), 4.24-4.22 (m, 2H), 4.01-3.90 (m, 4H), 3.72/3.69/3.67 (s, 6H), 3.45-3.23 (被遮蔽, 6H), 3.18-3.07 (m, 4H), 2.58-1.72 (m, 12H), 1.60-1.25 (m, 14H)。LC/MS: [M+H]+ C49H63N8O8的分析性计算值：891.47；实验值891.4。
实施例 7
Figure DEST_PATH_IMAGE318
根据关于实施例3和实施例4的制备所描述的程序以噁唑6b-2为起始物质制备实施例7(TFA盐)。LC(条件 1 和 2)：>97%均质性指数。LC/MS(条件 10)：Rt=1.90 min。1H NMR (MeOD, δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 8.06 (s, 0.8H), 7.97/7.94/7.92 (s, 0.6H), 7.88 (s, 0.8H), 7.82-7.77 (m, 2.8H), 7.65 (d, J=8.4, 2H), 7.30 (d, J=8.0, 1H), 5.82/5.4/5.20-5.13 (m, 2H), 4.82-4.21 (m, 2H), 4.0-3.87 (m, 4H), 3.72/3.68 (s, 6H), 3.42-3.25 (被遮蔽, 5H), 3.18-3.02 (m, 5H), 2.58-2.11 (m, 8H), 2.02-1.71 (m, 6H), 1.68-1.19 (m, 12H)。LC/MS: [M-H]- C49H60N7O9的分析性计算值：890.45；实验值890.4。
实施例 7.1
Figure DEST_PATH_IMAGE320
根据关于实施例6的制备所描述的程序以双-咪唑6b-1和适当酸为起始物质制备实施例7.1(TFA盐)。LC(条件 1 和 2)：>94%均质性指数。LC/MS(条件 10)：Rt=1.87 min。LC/MS: [M-H]- C53H69N8O8的分析性计算值：945.53；实验值945.4。
实施例 8
Figure DEST_PATH_IMAGE322
实施例 8 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE324
用N2冲洗4,7-二溴苯并[c][1,2,5]噻二唑(1.0 g，3.4 mmol)、4-溴苯基硼酸(0.68 g，3.4 mmol)和K2CO3(0.939 g，6.8 mmol)在MeOH(50 mL)中的溶液10分钟。接着加入Pd(Ph3P)4(0.117 g，0.10 mmol)，反应混合物再用N2冲洗10分钟且在60℃下回流过夜。在减压下蒸发挥发性组分且向所得残余物中加入H2O。粗品用EtOAc(100 mL)萃取且有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(ISCO，EtOAc:石油醚，2:98)纯化粗品，得到呈黄色固体状的二溴化物8a(630 mg)。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 7.94 (d, J=7.4, 1H), 7.81-7.78 (m, 2H), 7.69-7.66 (m, 2H), 7.58 (d, J=7.4, 1H)。
实施例 8 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE326
用N2冲洗二溴化物8a(1.0 g，2.7 mmol)在二噁烷(20 mL)中的溶液10分钟。接着相继加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡(3.75 mL，10.8 mmol)和Pd(Ph3P)2Cl2(0.135 g，0.192 mmol)。再用N2冲洗反应混合物10分钟且在微波条件下80℃加热1小时。反应混合物经硅藻土塞(Celite®)过滤且在减压下蒸发挥发性组分。将所得残余物溶解在EtOAc(30 mL)中且在室温下加入HCl(1.5 N，50 mL)。搅拌2小时后，反应混合物用NaHCO3中和，用EtOAc(100 mL)萃取且有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(ISCO，EtOAc:石油醚，20:80)纯化粗品，得到呈黄色固体状的二酮8b(630 mg)。LC/MS(条件 9)：Rt=1.90 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 8.40 (d, J=7.4, 1H), 8.15 (d, J=8.4, 2H), 8.07 (d, J=8.4, 2H), 7.88 (d, J=7.4, 1H), 3.08 (s, 3H), 2.69 (s, 3H)。LC/MS: [M+H]+ C16H13N2O2S的分析性计算值：297.06；实验值297.0。
实施例 8 ，步骤 c
在室温向搅拌着的二酮8b(0.480 g，1.62 mmol)在CHCl3(10 mL)中的溶液中加入含Br2(0.77 g，4.83 mmol)的CHCl3(10 mL)且加热至60℃保持3小时。反应混合物用NaHCO3中和，用CH2Cl2(100 mL)萃取，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，得到粗品二溴化物8c(760 mg)，其按原样用于下一步骤。LC/MS(条件 9)：Rt=2.09 min。LC/MS: [M+H]+ C16H11Br2N2O2S的分析性计算值：452.88；实验值452.8。
实施例 8 ，步骤 d
Figure DEST_PATH_IMAGE330
在室温向搅拌着的(1R,3S,5R)-2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸(1.51 g，6.69 mmol)和Et3N(0.93 mL，6.69 mmol)在CH3CN(20 mL)中的溶液中加入含二溴化物8c(0.760 g，1.67 mmol)的CH3CN(15 mL)。搅拌反应混合物90分钟，接着在减压下蒸发挥发性物质。向反应混合物中加入水，用DCM(100 mL)萃取且有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(ISCO，EtOAc:石油醚，40:80)纯化粗品，得到呈黄色固体状的二酮酯8d(430 mg)。LC/MS(条件 12)：Rt=1.99 min。1H NMR (MeOD,δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 8.54 (d, J=7.6, 1H), 8.29-8.24 (m, 2H), 8.21-8.16 (m, 2H), 8.11 (d, J=7.6, 1H), 6.07/6.02 (br s, 1H), 5.93/5.89 (br s, 1H), 5.68/5.65 (br s, 1H), 5.58-5.47 (m, 1H), 4.35-4.30 (m, 2H), 3.51-3.48 (m, 2H), 2.71-2.62 (m, 2H), 2.59-2.48 (m, 2H), 1.79-1.71 (m, 2H), 1.50 (br s, 18H), 0.93-0.87 (m, 2H), 0.58-0.57 (m, 2H)。LC/MS: [M-H]- C38H41N4O10S的分析性计算值：745.26；实验值745.8。
实施例 8 ，步骤 e
Figure DEST_PATH_IMAGE332
向在密封管中的二酮酯8d(0.4 g，0.536 mmol)在二甲苯(8 mL)中的溶液中加入NH4OAc(0.826 g，10.72 mmol)且在130℃加热过夜。在减压下蒸发挥发性组分且反应混合物用饱和NaHCO3溶液处理。接着反应混合物用CH2Cl2(100 mL)萃取且有机层用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(ISCO，MeOH:DCM：0.3:99.7)纯化粗品，得到呈橙红色固体状的咪唑8e(100 mg)。LC/MS(条件 12)：Rt=1.71 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 12.16 (br s, 1H), 11.94 (br s, 1H), 8.31 (d, J=7.6, 1H), 8.16/8.15 (s, 1H), 8.02 (d, J=8.4, 2H), 7.94 (d, J=7.6, 1H), 7.91 (d, J=8.4, 2H), 7.59 (br s, 1H), 4.75-4.62 (m, 2H), 3.50-3.40 (m, 2H), 2.48-2.25 (m, 4H), 1.70-1.62 (m, 2H), 1.46-1.14 (br s, 18H), 0.81-0.73 (m, 2H), 0.62-0.53 (m, 2H)。LC/MS: [M-H]- C38H41N8O4S的分析性计算值：705.3；实验值704.8。
实施例 8 ，步骤 f
Figure DEST_PATH_IMAGE334
向氨基甲酸酯8e(0.105，0.148 mmol)在MeOH(6 mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4 N，6.3 mL)且在室温下搅拌2小时。在真空中除去挥发性组分且残余物与无水CH2Cl2(3×5 mL)共同蒸发。所得盐暴露在高真空中，得到呈黄色固体状的吡咯烷8f(105 mg)，其按原样用于下一步骤。LC/MS(条件 9)：Rt=1.33 min。1H NMR (MeOD, δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 8.71 (s, 1H), 8.48 (d, J=7.6, 1H), 8.31 (d, J=8.4, 2H), 8.21 (s, 1H), 8.13 (d, J=7.6, 1H), 8.07 (d, J=8.4, 2H), 5.18-5.02 (m, 2H), 3.40-3.30 (被遮蔽, 2H), 2.95-2.81 (m, 4H), 2.23-2.18 (m, 2H), 1.38-1.33 (m, 2H), 1.15-1.11 (m, 2H)。LC/MS: [M+H]+ C28H27N8S的分析性计算值：507.2；实验值507.2。
实施例 8
在0℃向吡咯烷8f盐酸盐(0.055 g，0.077 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液中相继加入(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(0.0286 g，0.163 mmol)、HATU(0.0607 g，0.159 mmol)和DIEA(0.10 mL，0.622 mmol)。在室温下搅拌2小时后，在真空中除去挥发性组分且将残余物溶解在DCM(50 mL)中，用饱和NH4Cl溶液、NaHCO3溶液、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。粗品经反相HPLC纯化(ACN/水/TFA)，得到呈黄色固体状的实施例8的TFA盐(47 mg)。LC(条件 1 和 2)：>97%均质性指数。LC/MS(条件 9)：Rt=1.56 min。1H NMR (MeOD, δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 8.44 (s, 1H), 8.25 (d, J=8.6, 2H), 8.23 (d, J=7.2, 1H), 8.05 (d, J=7.2, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.91 (d, J=8.6, 2H), 5.24 (dd, J=9.2, 6.8, 1H), 5.15 (dd, J=9.2, 6.8, 1H), 4.58 (t, J=7.6, 2H), 3.83 (t, J=4.8, 2H), 3.67 (s, 6H), 2.73-2.67 (m, 2H), 2.57-2.48 (m, 2H), 2.23-2.08 (m, 4H), 1.15-1.10 (m, 2H), 1.08-1.02 (m, 6H), 0.97-0.88 (m, 8H)。LC/MS: [M+H]+ C42H49N10O6S的分析性计算值：821.35；实验值821.2。
实施例 9
Figure DEST_PATH_IMAGE336
根据关于实施例8所描述的程序自吡咯烷8f(.4HCl)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸制备实施例9(TFA盐；黄色固体)。LC(条件 1 和 2)：>95%均质性指数。LC/MS(条件 9)：Rt=1.41 min。LC/MS: [M+H]+ C46H53N10O8S的分析性计算值：905.37；实验值905.4。
实施例 10-11
根据关于制备实施例8和9所描述的程序以二溴化物8c和(2S,5S)-5-甲基吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯为起始物质制备实施例10和11(TFA盐).
Figure DEST_PATH_IMAGE338
实施例编号 R LC和LC/MS数据
10
Figure DEST_PATH_IMAGE340
 LC(条件 1 和 2)：>98%均质性指数。LC/MS(条件 10)：Rt=2.02 min。LC/MS: [M+H]+ C42H53N10O6S的分析性计算值：825.38；实验值825.3。
11
Figure DEST_PATH_IMAGE342
 LC(条件 1 和 2)：>97%均质性指数。LC/MS(条件 10)：Rt=1.67 min。LC/MS: [M+H]+ C46H57N10O8S的分析性计算值：909.4；实验值909.4。
实施例 12
Figure DEST_PATH_IMAGE344
实施例 12 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE346
向8e(175 mg，0.247 mmol)在冰AcOH(5 mL)中的溶液中加入锌粉(161 mg，2.47 mmol)且在50℃加热2小时。反应混合物经硅藻土垫(Celite®)过滤且用MeOH(2×10 mL)洗涤。在减压下蒸发滤液。将所得残余物溶解在EtOAc(50 mL)中且用饱和NaHCO3溶液、水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，得到粗品二胺12a(120 mg)，其按原样用于下一步骤。LC/MS(条件 12)：Rt=1.61 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 11.92 (br s, 1H), 11.85 (br s, 1H), 7.80 (d, J=8.4, 2H), 7.48 (d, J=1.6, 1H), 7.43/7.37 (d, J=8.0, 2H), 7.33 (d, J=1.6, 1H), 6.91 (d, J=8.0, 1H), 6.40 (d, J=8.0, 1H), 5.96 (br s, 2H), 4.68-4.61 (m, 2H), 4.14-4.11 (m, 2H), 3.47-3.40 (m, 2H), 2.40-2.23 (m, 4H), 1.69-1.60 (m, 2H), 1.30-1.20 (br s, 18H), 0.80-0.72 (m, 2H), 0.60-0.52 (m, 2H)。LC/MS: [M+H]+ C38H47N8O4的分析性计算值：679.36；实验值679.2。
实施例 12 ，步骤 b
向二胺12a(60 mg，0.088 mmol)在原甲酸三乙酯(1 mL)中的溶液中加入催化量的PTSA(5 mg)且在微波条件下100℃加热15分钟。反应混合物用DCM(50 mL)稀释且用饱和NaHCO3溶液、水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。残余物用己烷(5 mL)湿磨且过滤所得固体，用己烷(3×5 mL)洗涤，得到粗品，其经反相HPLC纯化(ACN/水/TFA)，得到呈白色固体状的实施例12b的TFA盐(30 mg)。LC/MS(条件 13)：Rt=1.77 min。1H NMR (MeOD, δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 8.48 (s, 1H), 8.20 (br s, 1H), 8.01-7.91 (m, 5H), 7.80 (d, J=7.6, 1H), 7.58 (d, J=8.0, 1H), 5.01-4.97 (m, 1H), 4.92-4.85 (被遮蔽, 1H), 3.70-3.62 (m, 2H), 2.78-2.69 (m, 2H), 2.52-2.41 (m, 2H), 1.90-1.82 (m, 2H), 1.55-1.25 (br s, 18H), 0.95-0.92 (m, 2H), 0.77-0.72 (m, 2H)。LC/MS: [M-H]- C39H43N8O4的分析性计算值：687.35；实验值687.5。
实施例 12 ，步骤 c
向氨基甲酸酯12b(30 mg，0.043 mmol)在MeOH(1 mL)中的溶液中加入HCl/二噁烷(4 N，1 mL)且在室温下搅拌2小时。在真空中除去挥发性组分且残余物与无水CH2Cl2(3×5 mL)共同蒸发。所得盐暴露在高真空中，得到呈黄色固体状的吡咯烷12c(22 mg)，其按原样用于下一步骤。LC/MS(条件 9)：Rt=1.12 min。1H NMR (MeOD, δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 9.53 (s, 1H), 8.20-7.99 (m, 5H), 7.90 (br s, 2H), 7.75 (br s, 1H), 5.05-4.83 (被遮蔽, 2H), 3.73-3.55 (m, 2H), 2.94-2.48 (m, 4H), 2.20-2.06 (m, 2H), 1.18-1.01 (m, 2H), 0.91-0.82 (m, 2H)。LC/MS: [M+H]+ C29H29N8的分析性计算值：489.24；实验值489.2。
实施例 12
在0℃向吡咯烷12c盐酸盐(22 mg，0.04 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液中相继加入(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-3-甲基丁酸(16 mg，0.09 mmol)、HATU(33.9 mg，0.089 mmol)和DIEA(0.03 mL，0.174 mmol)。在室温下搅拌2小时后，在真空中除去挥发性组分且将残余物溶解在DCM(50 mL)中，用饱和NH4Cl溶液、NaHCO3溶液、盐水洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。粗品经反相HPLC纯化(ACN/水/TFA)，得到呈灰白色固体状的实施例12的TFA盐(4.2 mg)。LC(条件 1 和 7)：>91%均质性指数。LC/MS(条件 10)：Rt=1.54 min。LC/MS: [M+H]+ C43H51N10O6的分析性计算值：803.39；实验值803.4。
实施例 13
Figure DEST_PATH_IMAGE352
根据关于实施例12所描述的程序自吡咯烷12c(.4HCl)和(S)-2-(甲氧基羰基氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸制备实施例13(TFA盐；灰白色固体)。LC(条件 3 和 7)：>89%均质性指数。LC/MS(条件 10)：Rt=1.33 min。LC/MS: [M+H]+ C47H55N10O8的分析性计算值：887.41；实验值887.4。
实施例 14
根据关于制备实施例12和13所描述的程序以二溴化物8c和(2S,5S)-5-甲基吡咯烷-1,2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯为起始物质制备实施例14(TFA盐)。LC(条件 1 和 14)：>90%均质性指数。LC/MS(条件 9)：Rt=1.40 min。LC/MS: [M+H]+ C47H59N10O8的分析性计算值：891.44；实验值891.4。
实施例 15
Figure DEST_PATH_IMAGE356
实施例 15 ，步骤 a
将锂(0.533 g，77 mmol)装入50 mL三颈圆底烧瓶中，在0℃加入THF(20 mL)且有力搅拌。将TMSCl(7.36 mL，57.6 mmol)加入到反应混合物中，接着逐滴加入1,2-二氢环丁并苯(cyclobutabenzene，2 g，19.20 mmol)。在室温下搅拌反应混合物6天。用注射器自反应混合物中抽出未反应的锂，接着在0℃用MeOH(10 mL)淬灭反应混合物。加入水(25 mL)且所得溶液用石油醚(3×40 mL)萃取。合并的有机层用盐水(25 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在25℃浓缩，得到呈黄色油状的粗品二烯的混合物(4.6 g)。GC/MS(条件 16)：Rt=6.95 min, GC/MS: [M]+ C14H26Si2的分析性计算值：250.16；实验值250.2。
将粗品二烯的混合物(7.0 g，27.9 mmol)溶解在THF(50 mL)中且加热至40℃。将DDQ(3.17 g，13.97 mmol)在THF(20 mL)中的溶液逐滴加入到反应混合物中且在相同温度下再加热1小时。向反应混合物中加入水(100 mL)且用EtOAc(4×50 mL)萃取。有机层相继用水(100 mL)、饱和Na2CO3(150 mL)、盐水(50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在25℃在减压下浓缩，得到粗品3,6-双(三甲基硅烷基)-1,2-二氢环丁并苯(cyclobutabenzene，7.9 g)。GC/MS(条件 16)：Rt=7.60 min。GC/MS: [M]+ C14H24Si2的分析性计算值：248.14；实验值248.0。
在0℃将Br2(4.66 mL，91 mmol)在MeOH(20 mL)中的溶液逐滴加入到粗品3,6-(双三甲基硅烷基)-1,2-二氢环丁苯(7.5 g，30.2 mmol)在甲醇(75 mL)中的溶液且在25℃搅拌过夜。向反应混合物中加入水(100 mL)且用石油醚(3×100 mL)萃取。合并的有机层用盐水(50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在25℃在减压下浓缩。通过Combiflash Isco纯化(Silicycle，120 g，二氧化硅，100%石油醚)粗品，得到二溴化物15a(3.9 g)。GC/MS(条件 16)：Rt=7.07 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 7.17 (s, 2H), 3.09 (s, 4H)。GC/MS: [M]+ C8H6Br2的分析性计算值：261.94；实验值261.9。
实施例 15 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE360
用N2冲洗二溴化物15a(5 g，19.09 mmol)在1,4-二噁烷(50 mL)中的溶液10分钟。接着相继加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡(5.85 mL，17.18 mmol)和Pd(Ph3P)2Cl2(0.670 g，0.954 mmol)。再用N2冲洗反应混合物10分钟且在微波条件下100℃加热1小时。反应混合物经硅藻土塞(Celite®)过滤且在室温用DCM(30 mL)和HCl(1.5 N，50 mL)稀释滤液。搅拌2小时后，反应混合物用DCM(100 mL)萃取且有机层用盐水(50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在25℃在真空中浓缩。通过Combiflash Isco纯化(Redisep，40 g，二氧化硅，3%-5% EtOAc/石油醚)粗品，得到呈白色固体状的15b(1.2 g)。GC/MS(条件 16)：Rt=7.75 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 7.62 (d, J=8.4, 1H), 7.40 (d, J=8.4, 1H), 3.41 (app t, 2H), 3.21 (app t, 2H), 2.49 (s, 3H)。GC/MS: [M]+ C10H9BrO的分析性计算值：225.08；实验值225.9。
实施例 15 ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE362
用N2冲洗15b(900 mg，4.00 mmol)、4-乙酰基苯基硼酸(983 mg，6.00 mmol)、K2CO3(1.658 g，12.00 mmol)在1,4-二噁烷(9 mL)和水(0.9 mL)中的溶液10分钟。接着加入Pd(Ph3P)4(462 mg，0.400 mmol)，再用N2冲洗反应混合物10分钟且在微波条件下100℃加热1.5小时。反应混合物经硅藻土塞过滤且用EtOAc(3×10 mL)洗涤。在减压下蒸发滤液且向所得残余物中加入H2O(50 mL)。粗品用EtOAc(50 mL)萃取且有机层用盐水(50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过Combiflash Isco(Redisep，26 g，C18，0.05% TFA的水溶液：ACN，51:49)纯化粗品，得到呈白色固体状的15c(430 mg)。LC/MS(条件 14)：Rt=1.89 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 8.06-8.04 (m, 2H), 7.87 (d, J=8.4, 1H), 7.78-7.76 (m, 2H), 7.61 (d, J=8.4, 1H), 3.53-3.50 (m, 4H), 2.64 (s, 3H), 2.54 (s, 3H)。LC/MS: [M+H]+ C18H17O2的分析性计算值：265.12；实验值264.9。
实施例 15 ，步骤 d
Figure DEST_PATH_IMAGE364
在10℃向搅拌着的15c(430 mg，1.627 mmol)在1,4-二噁烷(2.5 mL)中的溶液中加入含Br2(0.168 mL，3.25 mmol)的1,4-二噁烷(1 mL)且在室温下搅拌2小时。向反应混合物中加入水(20 mL)且通过过滤收集所得固体。在高真空下干燥固体，得到粗品二溴化物15d(630 mg)，其按原样用于下一步骤。LC/MS(条件 14)：Rt=2.04 min。LC/MS: [M+H]+ C18H15Br2O2的分析性计算值：423.11；实验值423.1。
实施例 15 ，步骤 e
Figure DEST_PATH_IMAGE366
冷却粗品二溴化物15d(350 mg，0.829 mmol)在ACN(5 mL)中的溶液至0℃。接着加入(2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-甲酸(418 mg，1.824 mmol)，接着逐滴加入DIPEA(0.579 mL，3.32 mmol)。使反应混合物温至室温且搅拌2小时。反应混合物用EtOAc(30 mL)稀释且用饱和NH4Cl(20 mL)、10% NaHCO3(20 mL)、水(20 mL)和盐水(10 mL)洗涤。有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过Combiflash Isco(Silicycle，40 g，二氧化硅，EtOAc:石油醚，35:65)纯化粗品，得到呈黄色固体状的二酮酯15e(300 mg)。LC/MS(条件 14)：Rt=2.36 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 8.01-7.99 (m, 2H), 7.89 (d, J=8.4, 1H), 7.79-7.77 (m, 2H), 7.62 (d, J=8.4, 1H), 5.60- 5.05 (m, 4H), 4.55-4.47 (m, 1H), 4.45-4.38 (m, 1H), 4.09-4.01 (m, 1H), 3.98-3.92 (m, 1H), 3.52 (br s, 4H), 2.38-2.29 (m, 4H), 2.17-2.04 (m, 2H), 1.80-1.69 (m, 2H), 1.48/1.45 (s, 18 H), 1.33 (br s, 6H)。LC/MS: [M-H]- C40H49N2O10的分析性计算值：717.35；实验值717.6。
实施例 15 ，步骤 f
Figure DEST_PATH_IMAGE368
向二酮酯15e(675 mg，0.939 mmol)在二甲苯(15 mL)中的溶液中加入NH4OAc(1.448 g，18.78 mmol)且在密封管中130℃加热过夜。在减压下蒸发挥发性组分且所得残余物用EtOAc(50 mL)稀释且用10% NaHCO3(50 mL)处理。分离有机层，用水(50 mL)、盐水(25 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过Combiflash Isco(Redisep，26 g，C18，0.01 M NH4OAc-水:ACN，63:37)纯化粗品，得到呈黄色固体状的氨基甲酸酯15f(152 mg)。LC/MS(条件 15)：Rt=2.29 min。1H NMR (MeOD, δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 7.78 (d, J=8.4, 2H), 7.73 (d, J=8.4, 2H), 7.67 (d, J=8.4, 1H), 7.60 (d, J=8.4, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 4.99-4.85 (被遮蔽, 2H), 4.11-4.03 (m, 2H), 3.52 (app t, 2H), 3.38 (app t, 2H), 2.31-2.16 (m, 6H), 1.78-1.69 (m, 2H), 1.44-1.28 (br m, 24H)。LC/MS: [M+H]+ C40H51N6O4的分析性计算值：679.39；实验值679.4。
实施例 15 ，步骤 g
Figure DEST_PATH_IMAGE370
在0℃向氨基甲酸酯15f(60 mg，0.088 mmol)在MeOH(1 mL)中的溶液中加入HCl/MeOH(4 N，1 mL)且在室温下搅拌2小时。在真空中除去挥发性组分且残余物与无水DCM(3×5 mL)共同蒸发。所得盐暴露在高真空中，得到呈黄色固体状的吡咯烷15g(4HCl)(52 mg)，其按原样用于下一步骤。LC/MS(条件 10)：Rt=1.23 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 10.34 (br s, 2H), 8.02 (s, 1H), 7.97 (d, J=8.4, 2H), 7.85-7.82 (m, 3H), 7.74 (d, J=8.4, 1H), 7.68 (s, 1H), 4.99-4.91 (br m, 2H), 3.82-3-3.77 (br m, 2H), 3.53-3.49 (m, 2H), 3.41-3.37 (m, 2H), 2.51-2.44 (m, 4H), 2.29-2.24 (m, 2H), 1.91-1.86 (m, 2H), 1.44 (d, J=6.8, 6H)。LC/MS: [M+H]+ C30H35N6的分析性计算值：479.28；实验值479.3。
实施例 15
在0℃向吡咯烷15g(4HCl)(42.1 mg，0.088 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液中加入(S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酸(45.3 mg，0.185 mmol)。接着相继加入HATU(68.6 mg，0.180 mmol)和DIPEA(0.061 mL，0.352 mmol)。在室温下搅拌1.5小时后，在真空中除去挥发性组分且将残余物溶解在DCM(50 mL)中，用饱和NH4Cl(25 mL)、10% NaHCO3(25 mL)、盐水(25 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。粗品经反相HPLC纯化(ACN/水/NH4OAc)，得到呈白色固体状的实施例15(40 mg，游离碱)。LC(条件 1 和 2)：>96%均质性指数。LC/MS(条件 10)：Rt=1.89 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 12.07/12.03/11.95/11.85 (br s, 2H), 7.79-7.24 (m, 10H), 5.29/5.00 (m, 2H), 4.66/4.23 (m, 2H), 4.10/3.98 (m, 2H), 3.55 (br s, 6H), 3.45-3.11 (m, 8H), 2.35-2.10 (m, 4H), 2.06-1.86 (m, 4H), 1.82-1.58 (m, 4H), 1.51-1.18 (m, 8H), 1.11-1.01 (m, 8H), 0.96-0.68 (m, 8H)。LC/MS: [M+H]+ C52H69N8O8的分析性计算值：933.52；实验值933.5。
实施例 15.1
使用与关于实施例15所描述的类似偶合条件自吡咯烷15g(4HCl)和适当酸制备实施例15.1。LC-MS保留时间4.076分钟；m/z 933.7 (MH+)。用配备有Phenomenex-Luna 3 μ C18 2.0×50 mm管柱的Shimadzu LC-10AS液相层析仪，使用SPD-10AV UV-Vis检测器在220 nM的检测器波长下记录LC数据。洗脱条件采用流动速率0.8 mL/min，梯度100%溶剂A/0%溶剂B至0%溶剂A/100%溶剂B，梯度时间4分钟，保持时间1分钟且分析时间5分钟，其中溶剂A为5% MeOH/95% H2O/10 mM乙酸铵，且溶剂B为5% H2O/95% MeOH/10 mM乙酸铵。使用Micromass平台以LC 电喷模式测定MS数据。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.02-7.64 (m, 8H), 5.74 (d, J=5.5 Hz, 0.4H), 5.25-5.11 (m, 1.6H), 4.79-4.71 (m, 2H), 4.36-4.09 (m, 4H), 3.87-3.63 (m, 8H), 3.57 (d, J=3.3 Hz, 2H), 3.46 (br. s., 2H), 2.71-2.13 (m, 8H), 2.06-1.88 (m, 1.6H), 1.78-1.39 (m, 9.4H), 1.35-0.89 (m, 17H)。
实施例 16
Figure DEST_PATH_IMAGE374
实施例 16 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE376
在0℃将氨气充入搅拌着的4-甲酰基苯甲酸甲酯(5.0 g，30.5 mmol)和Zn(OTf)2(2.215 g，6.09 mmol)在THF(150 mL)中的溶液中历时5-10分钟。10分钟后，在0℃加入TMSCN(4.90 mL，36.6 mmol)且在室温下搅拌1小时。反应混合物用水(50 mL)淬灭且用EtOAc(100 mL)萃取。分离有机层，用水(2×50 mL)、盐水(25 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。向含所得粗品氰基胺的AcOH(50 mL)中加入2,5-二甲氧基四氢呋喃(4.03 g，30.5 mmol)且加热至回流保持2小时。接着在减压下浓缩反应混合物且所得粗品用DCM(100 mL)稀释。有机层用10% NaHCO3(50 mL)、盐水(50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过Combiflash Isco(Redisep，80 g，碱性Al2O3，20%-30% EtOAc/石油醚纯化)粗品物质，得到呈淡黄色半固体状的16a(3.8 g)。LC/MS(条件 10)：Rt=1.83 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 8.10-8.08 (m, 2H), 7.40-7.38 (m, 2H), 6.76 (app t, 2H), 6.28 (app t, 2H), 6.18 (s, 1H), 3.94 (s, 3H)。LC/MS: [M+H]+ C14H13N2O2的分析性计算值：241.09；实验值241.2。
实施例 16 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE378
加热16a(3.5 g，14.57 mmol)和乙二酰氯甲基酯(4.06 mL，43.7 mmol)在苯(75 mL)中的溶液至95℃保持4小时。冷却反应混合物至室温且在减压下浓缩。粗品用EtOAc(75 mL)稀释，用10% NaHCO3(50 mL)、盐水(50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，得到粗品16b(3.8 g)，其未经纯化即用于下一步骤。LC/MS(条件 10)：Rt=1.77 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 8.09-8.07 (m, 2H), 7.78 (s, 1H), 7.52 (dd, J=4.4, 1.6, 1H), 7.45-7.43 (m, 2H), 7.31 (dd, J=2.8, 1.6, 1H), 6.42 (dd, J=4.4, 2.8, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.93 (s, 3H)。LC/MS: [M-H]- C17H13N2O5的分析性计算值：325.09；实验值325.2。
实施例 16 ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE380
向粗品16b(3.8 g，11.65 mmol)在MeOH(75 mL)中的溶液中加入Pd/C(0.496 g，0.466 mmol)和AcOH(0.667 mL，11.65 mmol)。在氢氛围下在室温下搅拌反应混合物2小时。反应混合物经硅藻土(Celite®)过滤且用MeOH(2×50 mL)洗涤。在减压下浓缩滤液，得到粗品16c(36%)与未经芳香化的衍生物(45%)的混合物。
将上述混合物(3.6 g，11.45 mmol)溶解在THF(75 mL)中且加热至70℃。接着在70℃向反应混合物中加入DDQ(5.20 g，22.91 mmol)在THF(10 mL)中的溶液且搅拌2小时。接着反应混合物用EtOAc(100 mL)稀释，用水(50 mL)、10% NaHCO3(3×100 mL)、盐水(50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。将粗品溶解在MeOH(5 mL)中且用乙醚:石油醚(20 mL:75 mL)沉淀。所得沉淀用乙醚:石油醚(10 mL:90 mL)洗涤，得到呈黄色固体状的所需产物16c(1.2 g)。LC/MS(条件 10)：Rt=1.77 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 8.26-8.24 (m, 2H), 7.78-7.76 (m, 2H), 7.66 (s, 1H), 7.63-7.61 (m, 2H), 7.06 (dd, J=4.4, 2.8, 1H), 4.09 (s, 3H), 3.99 (s, 3H)。LC/MS: [M+H]+ C17H15N2O4的分析性计算值：311.10；实验值311.0。
实施例 16 ，步骤 d
Figure DEST_PATH_IMAGE382
在-78℃向搅拌着的16c(0.7 g，2.256 mmol)在THF(70 mL)中的溶液中加入氯碘甲烷(1.310 mL，18.05 mmol)。5分钟后，经30分钟逐滴加入LDA(12.53 mL，22.56 mmol)。搅拌反应物10分钟，接着在低于-65℃的温度下加入AcOH(3.5 mL)在THF(10 mL)中的溶液。再搅拌反应物10分钟且在EtOAc(50 mL)与盐水(50 mL)之间分配。分离有机层且用10% NaHCO3(50 mL)、盐水(50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，得到呈暗黄色液体状的粗品16d(0.78 g)。该粗品未经纯化即用于下一步骤。LC/MS(条件 11)：Rt=2.09 min, [M-H]- C17H11Cl2N2O2的分析性计算值：345.03；实验值345.0。
实施例 16 ，步骤 e
在0℃向粗品16d(350 mg，1.008 mmol)和(2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-甲酸(462 mg，2.016 mmol)在ACN(50 mL)中的溶液中相继加入KI(36.8 mg，0.222 mmol)和DIPEA(0.704 mL，4.03 mmol)。接着在室温下搅拌反应混合物2小时。反应混合物用EtOAc(50 mL)稀释且用饱和NH4Cl(50 mL)、10% NaHCO3(50 mL)、盐水(50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。将粗品溶解在MeOH(5 mL)中且用乙醚:石油醚(50 mL:45 mL)沉淀。将所得沉淀溶解在MeOH(5 mL)中且用乙醚:石油醚(50 mL:45 mL)沉淀。再次重复此过程。在高真空下干燥沉淀，得到呈黄色固体状的16e(700 mg)。LC/MS(条件 10)：Rt=2.55 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 8.14-8.12 (m, 2H), 7.85-7.82 (m, 2H), 7.70-7.65 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.59-7.56 (m, 1H), 7.08-7.04 (m, 1H), 5.89-5.26 (m, 4H), 4.58-4.40 (m, 2H), 4.10-3.72 (m, 2H), 2.41-2.24 (m, 4H), 2.15-2.03 (m, 2H), 1.78-1.60 (m, 2H), 1.50 (br s, 18H), 1.40-1.31 (m, 6H)。LC/MS: [M+H]+ C39H49N4O10的分析性计算值：733.34；实验值733.4。
实施例 16 ，步骤 f
Figure DEST_PATH_IMAGE386
向16e(700 mg，0.955 mmol)在二甲苯(10 mL)中的溶液中加入NH4OAc(1.473 g，19.10 mmol)。反应混合物用氮气冲洗10分钟，接着在密封管中加热至130℃保持18小时。在减压下蒸发挥发性组分，所得残余物用DCM(50 mL)稀释且用饱和NaHCO3(50 mL)处理。接着分离有机层，用盐水(25 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过Combiflash Isco(Redisep，26 g，C18，50%-60% ACN:10 mM NH4HCO3)纯化残余物，得到呈黄色液体状的16f(80 mg)。LC/MS(条件 10)：Rt=2.28 min。1H NMR (MeOD, δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 7.98-7.72 (m, 5H), 7.50-6.98 (m, 5H), 5.01-4.85 (被遮蔽, 2H), 4.10-4.0 (m, 2H), 2.40-2.11 (m, 6H), 1.84-1.60 (m, 2H), 1.51-1.30 (m, 24H)。LC/MS: [M+H]+ C39H49N8O4的分析性计算值：693.38；实验值：693.4。
实施例 16 ，步骤 g
Figure DEST_PATH_IMAGE388
在0℃向16f(55 mg，0.079 mmol)在MeOH(1 mL)中的溶液中加入HCl/MeOH(4 N，1.5 mL)且在室温下搅拌2小时。在真空中除去挥发性组分且残余物与无水DCM(3×5 mL)共同蒸发。所得盐暴露在高真空中，得到呈黄色固体状的吡咯烷16g(4HCl)(55 mg)，其按原样用于下一步骤。LC/MS(条件 10)：Rt=1.15 min。1H NMR (MeOD, δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 8.70 (s, 1H), 8.39 (dd, J=4.8, 0.8, 1H), 8.22 (dd, J=2.4, 0.8, 1H), 8.18 (d, J=8.4, 2H), 8.12 (s, 1H), 7.97 (d, J=8.4, 2H), 7.62 (s, 1H), 7.45 (dd, J=4.8, 2.8, 1H), 5.19 (app t, 1H), 5.08 (app t, 1H), 4.03-3.95 (m, 2H), 2.76-2.58 (m, 4H), 2.53-2.43 (m, 2H), 2.12-2.01 (m, 2H), 1.60 (d, J=6.4, 3H), 1.59 (d, J=6.8, 3H)。LC/MS: [M+H]+ C29H33N8的分析性计算值：493.27；实验值：493.3。
实施例 16
在0℃向16g(4HCl)(55 mg，0.086 mmol)和(S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-(甲氧基羰基氨基)乙酸(44.4 mg，0.181 mmol)在DMF(2.5 mL)中的溶液中相继加入HATU(67.1 mg，0.177 mmol)和DIPEA(0.060 mL，0.345 mmol)。在室温下搅拌2小时后，在真空中除去挥发性组分且将残余物溶解在DCM(50 mL)中，用饱和NH4Cl(25 mL)、10% NaHCO3(25 mL)、盐水(25 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。粗品经反相HPLC纯化(ACN/水/TFA)，得到呈黄色固体状的实施例16的TFA盐(60 mg，0.062 mmol，产率72.1%)。LC(条件 1 和 2)：>98%均质性指数。LC/MS(条件 10)：Rt=1.79 min。1H NMR (MeOD, δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 8.62/8.45 (s, 1H), 8.31-8.27 (m, 1H), 8.16-8.05 (m, 3H), 7.94-7.88 (m, 3H), 7.55-7.53 (m, 1H), 7.40-7.36 (m, 1H), 5.62/5.50/5.19 (m, 2H), 4.86-4.75 (被遮蔽, 2H), 4.29-4.16 (m, 2H), 3.76/3.75/3.59 (s, 6H), 3.56-3.22 (m, 4H), 2.82-2.19 (m, 6H), 2.17-1.76 (m, 4H), 1.61-1.37 (m, 6H), 1.32-1.09 (m, 14H), 1.03-0.82 (m, 6H)。LC/MS: [M+H]+ C51H67N10O8的分析性计算值：947.51；实验值：947.4。
实施例 17
Figure DEST_PATH_IMAGE390
实施例 17 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE392
在-78℃向搅拌着的1-溴-4-氯-2-硝基苯(10 g，42.3 mmol)在THF(125 mL)中的溶液中加入溴化乙烯基镁(1 M在THF中，127 mL，127 mmol)且在相同温度下搅拌反应混合物30分钟。接着用饱和NH4Cl(60 mL)淬灭反应混合物。在减压下蒸发挥发性组分且向所得残余物中加入H2O(100 mL)。粗品用DCM(2×50 mL)萃取且有机层用盐水(50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(硅胶230-400，1.3% EtOAc/石油醚)纯化残余物，得到呈棕色油状的17a(4.5 g)。LC/MS(条件 15)：Rt=2.01 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 11.72 (br s, 1H), 7.52 (t, J=2.8, 1H), 7.32 (d, J=8.0, 1H), 7.05 (d, J=8.0, 1H), 6.61-6.59 (m, 1H)。LC/MS: [M-H]- C8H4BrClN的分析性计算值：227.93；实验值228.0。
实施例 17 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE394
在0℃向17a(4.5 g，19.52 mmol)在DMF(65 mL)中的溶液中加入NaH(60%在矿物油中)(0.937 g，23.43 mmol)且在该温度下搅拌30分钟。将MeI(1.221 mL，19.52 mmol)逐滴加入到反应混合物中且在室温下搅拌12小时。向反应混合物中加入水(30 mL)且用EtOAc(2×50 mL)萃取。有机层用盐水(25 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过Combiflash Isco(Silicycle，40 g，二氧化硅，100%石油醚)纯化粗品，得到呈黄色油状的17b(4.1 g)。GC/MS(条件 16)：Rt=8.40 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 7.51 (d, J=3.2, 1H), 7.32 (d, J=8.4, 1H), 7.02 (d, J=8.4, 1H), 6.52 (d, J=3.2, 1H), 4.14 (s, 3H)。GC/MS: [M]+ C9H7BrClN的分析性计算值：244.52；实验值245.0。
实施例 17 ，步骤 c
Figure DEST_PATH_IMAGE396
在10℃将NaCNBH3(8.43 g，134 mmol)加入到17b(4.1 g，16.77 mmol)在AcOH(30 mL)中的溶液中且在室温下搅拌反应混合物12小时。冷却反应混合物至0℃，向反应混合物中加入水(50 mL)且用10% NaOH缓慢碱化。反应混合物用EtOAc(4×25 mL)萃取，有机层用盐水(25 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过Combiflash Isco(Silicycle，40 g，二氧化硅，100%石油醚)纯化粗品，得到呈无色油状的17c(3.5 g)。LC/MS(条件 9)：Rt=2.17 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 7.17 (d, J=8.4, 1H), 6.58 (d, J=8.4, 1H), 3.44 (app t, 2H), 3.06 (s, 3H), 2.94 (t, J=8.8, 2H)。LC/MS: [M+H] + C9H10BrClN的分析性计算值：245.96；实验值246.0。
实施例 17 ，步骤 d
Figure DEST_PATH_IMAGE398
将氯溴化物17c(1 g，4.06 mmol)和硼酸三异丙酯(1.130 mL，4.87 mmol)溶解在甲苯(10 mL)和THF(2.5 mL)中且冷却至-70℃。将n-BuLi(2.0 M在己烷中，2.434 mL，4.87 mmol)逐滴加入到反应混合物中且在相同温度下搅拌1小时。接着使反应混合物达到室温且加入1.5 N HCl(5 mL)。分离水层与有机层。使用10% NaOH溶液中和水层至pH 7，接着用EtOAc(3×15 mL)萃取。EtOAc层用盐水(15 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩，得到呈棕色固体状的17d(500 mg)。LC/MS(条件 9)：Rt=0.97 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 8.10 (s, 2H), 7.00 (d, J=8.0, 1H), 6.57 (d, J=8.0, 1H), 3.36-3.34 (被遮蔽, 2H), 2.89 (app t, 2H), 2.78 (s, 3H)。LC/MS: [M+H]+ C9H12BClNO2的分析性计算值：212.6；实验值212.0。
实施例 17 ，步骤 e
Figure DEST_PATH_IMAGE400
在0℃向2-氨基-1-(4-溴苯基)乙酮盐酸盐(5 g，19.96 mmol)在DMF(50 mL)中的搅拌着的溶液中加入(2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-甲酸(4.80 g，20.96 mmol)。接着向反应混合物中相继加入HATU(7.74 g，20.36 mmol)和DIPEA(10.46 mL，59.9 mmol)。使反应混合物温至室温且搅拌1.5小时。向反应混合物中加入水(100 mL)且用EtOAc(2×100 mL)萃取。有机层用盐水(50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过快速层析(硅胶60-120，1.8% MeOH/DCM)纯化粗品，得到呈灰白色固体状的17e(7.9 g)。LC/MS(条件 15)：Rt=1.99 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 7.84 (d, J=8.8, 2H), 7.65 (d, J=8.8, 2H), 4.84-4.62 (m, 2H), 4.39 (br s, 1H), 3.94 (br s, 1H), 2.23 (br s, 1H), 2.10-2.02 (m, 2H), 1.64-1.54 (m, 1H), 1.48/1.47 (s, 9H), 1.39 (d, J=6.0, 3H)。LC/MS: [M-H]- C19H24BrN2O4的分析性计算值：424.32；实验值425.0。
实施例 17 ，步骤 f
Figure DEST_PATH_IMAGE402
向17e(4 g，9.40 mmol)在二甲苯(30 mL)中的溶液中加入NH4OAc(3.62 g，47.0 mmol)且在密封管中在130℃加热12小时。在减压下蒸发挥发性组分且反应混合物用10% NaHCO3(25 mL)处理。接着反应混合物用EtOAc(2×50 mL)萃取且有机层用水(50 mL)、盐水(25 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过Combiflash Isco(Silicycle，120 g，硅胶，1%-2% MeOH/CHCl3)纯化粗品，得到呈黄色固体状的17f(2.8 g)。LC/MS(条件 15)：Rt=2.07 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 10.87/10.42 (br s, 1H), 7.65 (d, J=8.0, 2H), 7.46 (d, J=8.0, 2H), 7.22 (s, 1H), 4.96-4.93 (m, 1H), 3.97-3.93 (m, 1H), 3.08-2.88 (m, 1H), 2.22-2.10 (m, 2H), 1.90-1.78 (m, 1H), 1.50/1.48 (s, 9H), 1.16 (br s, 3H)。LC/MS: [M+H]+ C19H25BrN3O2的分析性计算值：406.11；实验值406.2。
实施例 17 ，步骤 g
Figure DEST_PATH_IMAGE404
用N2冲洗17f(1 g，2.461 mmol)、双(频哪醇基)二硼(1.312 g，5.17 mmol)和KOAc(0.604 g，6.15 mmol)在1,4-二噁烷(20 mL)中的溶液10分钟。接着加入Pd(Ph3P)4(0.142 g，0.123 mmol)，反应混合物再用N2冲洗10分钟且在80℃加热12小时。反应混合物经硅藻土塞过滤且用EtOAc(2×10 mL)洗涤。在减压下蒸发滤液且向所得残余物中加入H2O(50 mL)。粗品用EtOAc(50 mL)萃取且有机层用盐水(50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(硅胶230-400，2.1% MeOH/DCM)纯化粗品，得到呈黄色固体状的17g(583 mg，产率41.7%)。LC/MS(条件 15)：Rt=2.15 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 10.90/10.40 (br s, 1H), 7.83-7.40 (m, 4H), 7.27 (s, 1H), 4.97 (br s, 1H), 3.97 (br s, 1H), 3.01-2.88 (m, 1H), 2.19-2.03 (m, 2H), 1.88-1.75 (m, 1H), 1.51/1.35 (s, 9H), 1.26/1.24 (s, 12H), 1.15 (br s, 3H)。LC/MS: [M+H]+ C25H37BN3O4的分析性计算值：454.28；实验值454.4。
实施例 17 ，步骤 h
Figure DEST_PATH_IMAGE406
在0℃向(2S,5S)-1-(叔丁氧基羰基)-5-甲基吡咯烷-2-甲酸(3.5 g，15.27 mmol)在THF(10 mL)中的溶液中加入BH3.DMS(1.595 mL，16.79 mmol)，接着在80℃回流12小时。冷却反应混合物至0℃且缓慢加入MeOH(10 mL)。搅拌10分钟后，在减压下除去挥发性组分。将所得残余物溶解在EtOAc(50 mL)中，用10% NaHCO3(25 mL)、水(25 mL)、盐水(10 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(硅胶230-400，30%-40% EtOAc/石油醚)纯化粗品，得到呈无色液体状的17h(3.1 g)。LC/MS(条件 15)：Rt=1.71 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 4.95 (br s, 1H), 3.98-3.88 (m, 2H), 3.71-3.63 (m, 1H), 3.57-3.50 (m, 1H), 2.03-1.89 (m, 2H), 1.72-1.50 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.16 (d, J=6.0, 3H)。LC/MS: [M+H-Boc]+ C6H14NO的分析性计算值：116.10；实验值116.2。
实施例 17 ，步骤 i
Figure DEST_PATH_IMAGE408
在0℃将戴斯-马丁氧化剂(Dess-Martin Periodinane)(7.39 g，17.42 mmol)加入到17h(2.5 g，11.61 mmol)在DCM(50 mL)中的溶液中且在室温下搅拌2小时。将反应混合物溶解在EtOAc(150 mL)中，用10% NaHCO3(75 mL)、10% Na2S2O3 (75 mL)、盐水(25 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩，得到呈棕色液体状的粗品(2S,5S)-2-甲酰基-5-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.62 g)，其按原样用于下一步骤。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 9.48/9.39 (s, 1H), 4.20-3.90 (m, 2H), 2.01-1.83 (m, 3H), 1.65-1.52 (m, 1H), 1.47/1.46 (s, 9H), 1.24 (d, J=5.2, 3H)。
在室温下向粗品(2S,5S)-2-甲酰基-5-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.62 g，12.28 mmol)在MeOH(40 mL)中的溶液中加入NH4OH(9.13 mL，234 mmol)，接着逐滴加入水合乙二醛(0.57 mL，12.28 mmol)且在室温下搅拌12小时。在减压下除去挥发性组分且通过Combiflash Isco(Redisep，硅胶，40 g，2%-3% MeOH/CHCl3)纯化所得粗品，得到呈淡黄色液体状的17i(770 mg)。LC/MS(条件 15)：Rt=1.60 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 10.40 (br s, 1H), 6.96 (s, 2H), 4.94-4.91 (m, 1H), 3.95-3.91 (m, 1H), 2.90 (br s, 1H), 2.20-2.06 (m, 2H), 1.81 (br s, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.12 (br s, 3H)。LC/MS: [M+H]+ C13H22N3O2的分析性计算值：252.16；实验值252.2。
实施例 17 ，步骤 j
Figure DEST_PATH_IMAGE410
在0℃向17i(770 mg，3.06 mmol)在DMF(10 mL)中的搅拌着的溶液中加入NaH(60%在矿物油中，129 mg，3.22 mmol)且搅拌20分钟。接着逐滴加入SEM-Cl(0.598 mL，3.37 mmol)且搅拌，经2小时自0℃至室温。用水(5 mL)淬灭反应混合物。反应混合物用EtOAc(50 mL)萃取，用水(25 mL)、盐水(10 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(硅胶230-400，25%-30% EtOAc/石油醚)纯化粗品，得到呈淡黄色液体状的17l(520 mg)。LC/MS(条件 15)：Rt=2.17 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 7.01 (br s, 1H), 6.87 (d, J=1.2, 1H), 5.76 (br s, 1H), 5.16 (d, J=11.2, 1H), 4.90 (br s, 1H), 3.95 (br s, 1H), 3.47 (app t, 2H), 2.26-2.04 (m, 4H), 1.48-1.20 (br s, 12H), 0.96-0.80 (m, 2H), -0.02 (s, 9H)。LC/MS: [M+H]+ C19H36N3O3Si的分析性计算值：382.24；实验值382.4。
实施例 17 ，步骤 k
在室温下将NBS(0.466 g，2.62 mmol)在ACN(10 mL)中的溶液逐滴加入到17j(1 g，2.62 mmol)在DCM(20 mL)中的搅拌着的溶液中。搅拌1小时后，向反应混合物中加入水(10 mL)且用DCM(2×30 mL)萃取。有机层用10% NaHCO3(30 mL)和盐水(30 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过快速层析(硅胶60-120，12% EtOAc/石油醚)纯化粗品，得到呈黄色油状的17k(600 mg)。LC/MS(条件 15)：Rt=2.41 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 6.99 (s, 1H), 5.86/5.40 (br s, 1H), 5.28 (d, J=11.2, 1H), 5.03-4.82 (m, 1H), 4.04-3.90 (m, 1H), 3.54 (app t, 2H), 2.23-2.04 (m, 4H), 1.47-1.20 (br s, 12H), 0.99-0.81 (m, 2H), -0.07 (s, 9H)。LC/MS: [M+H]+ C19H35BrN3O3Si的分析性计算值：460.16；实验值460.2。
实施例 17 ，步骤 l
Figure DEST_PATH_IMAGE414
用N2冲洗17k(294 mg，0.638 mmol)、17d(135 mg，0.638 mmol)、K2CO3(265 mg，1.915 mmol)在1,4-二噁烷(3 mL)和水(0.6 mL)中的溶液10分钟。接着加入Pd(Ph3P)4(36.9 mg，0.032 mmol)，反应混合物再用N2冲洗10分钟且在微波下80℃加热2小时。反应混合物经硅藻土塞(Celite®)过滤且用EtOAc(2×10 mL)洗涤。在减压下蒸发滤液且向所得残余物中加入H2O(30 mL)。粗品用EtOAc(50 mL)萃取且有机层用盐水(20 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过Combiflash Isco(Silicycle，40 g，二氧化硅，12%-15% EtOAc/石油醚)纯化粗品，得到呈黄色油状的17l(124 mg)。LC/MS(条件 15)：Rt=2.88 min。1H NMR (CDCl3, δ=7.26 ppm, 400 MHz): δ 6.94 (s, 1H), 6.85 (d, J=8.0, 1H), 6.64 (d, J=8.0, 1H), 5.89 (br s, 1H), 4.99 (app t, 1H), 4.88 (d, J=11.2, 1H), 4.05-3.96 (m, 1H), 3.57-3.44 (m, 1H), 3.33-3.19 (m, 2H), 3.15-2.92 (m, 3H), 2.28 (br s, 3H), 2.21-1.96 (m, 4H), 1.41/1.37 (s, 9H), 1.29-1.26 (m, 3H), 0.91-0.68 (m, 2H), -0.08 (s, 9H)。LC/MS: [M+H]+ C28H44ClN4O3Si的分析性计算值：547.28；实验值547.4。
实施例 17 ，步骤 m
Figure DEST_PATH_IMAGE416
将实施例17l(50 mg，0.091 mmol)和17g(83 mg，0.183 mmol)溶解在DMF(2 mL)中。用N2冲洗反应混合物10分钟。加入2-二环己基膦-2',6'-二甲氧基-1,1'-联苯(7.50 mg，0.018 mmol)、Pd(OAc)2(2.051 mg，9.14 µmol)、K2CO3(37.9 mg，0.274 mmol)且再用N2冲洗反应混合物10分钟。密封容器且加热至125℃保持12小时。反应混合物经硅藻土塞过滤且用EtOAc(2×5 mL)洗涤。滤液用EtOAc(10 mL)稀释，用水(10 mL)和盐水(10 mL)洗涤。有机层经Na2SO4干燥且在减压下浓缩。通过反相HPLC(ACN/水/NH4OAc)纯化粗品，得到呈灰白色固体状的17m(48 mg)。LC/MS(条件 14)：Rt=2.58 min。LC/MS: [M+H]+ C47H68N7O5Si的分析性计算值：838.50；实验值838.4。
实施例 17 ，步骤 n
Figure DEST_PATH_IMAGE418
在0℃向17m(37 mg，0.044 mmol)在MeOH(2 mL)中的溶液中加入HCl/MeOH(4 N，8 mL)且在室温下搅拌12小时。在真空中除去挥发性组分且残余物与无水DCM(3×5 mL)共同蒸发。所得盐暴露在高真空中，得到呈黄色固体状的17n(4HCl)(23 mg)，其按原样用于下一步骤。LC/MS(条件 9)：Rt=1.07 min。1H NMR (MeOD,δ=3.34 ppm, 400 MHz): δ 8.08 (br s, 1H), 8.04-7.98 (m, 2H), 7.94 (br s, 1H), 7.91 (d, J=8.0, 1H), 7.78-7.72 (m, 2H), 7.68 (d, J=8.0, 1H), 5.21 (br s, 2H), 4.11 (br s, 2H), 4.02-3.90 (m, 2H), 3.60-3.51 (m, 2H), 3.37 (被遮蔽, 3H), 2.78-2.58 (m, 3H), 2.52-2.40 (m, 3H), 2.12-2.00 (m, 2H), 1.63 (d, J=5.6, 3H), 1.59 (d, J=6.0, 3H)。LC/MS: [M+H]+ C31H38N7的分析性计算值：508.31；实验值508.2。
实施例 17
在0℃向17n(60 mg，0.118 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液中相继加入(S)-2-((2R,6R)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)-2-((甲氧基羰基)氨基)乙酸(60.9 mg，0.248 mmol)、HATU(92 mg，0.242 mmol)和DIPEA(0.083 mL，0.473 mmol)。在室温下搅拌1.5小时后，在真空中除去挥发性组分且将残余物溶解在DCM(20 mL)中，用饱和NH4Cl(10 mL)、10% NaHCO3溶液(10 mL)、盐水(10 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。粗品经反相HPLC纯化(ACN/水/TFA)，得到呈灰白色固体状的实施例17的TFA盐(65 mg)。LC(条件 1 和 7)：>92%均质性指数。LC/MS(条件 18)：Rt=1.63 min。LC/MS: [M+H]+ C53H72N9O8的分析性计算值：962.54；实验值：962.4。
实施例 18
Figure DEST_PATH_IMAGE420
实施例 18 ，步骤 a
Figure DEST_PATH_IMAGE422
在-40℃向1,4-二溴-2-硝基苯(10 g，35.8 mmol)在THF(100 mL)中的搅拌着的溶液中加入溴化乙烯基镁(1 M在THF中，107.5 mL，107.5 mmol)且在相同温度下搅拌反应混合物30分钟。接着用饱和NH4Cl(60 mL)淬灭反应混合物。在减压下蒸发挥发性组分且向所得残余物中加入H2O(100 mL)。粗品用DCM(2×100 mL)萃取且有机层用盐水(50 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过快速层析(硅胶230-400，3%-5% EtOAc/石油醚)纯化残余物，得到18a(4 g)。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 11.75 (s, 1H), 7.54 (t, J=2.8, 1H), 7.27 (d, J=8.4, 1H), 7.18 (d, J=8.4, 1H), 6.54-6.52 (m, 1H)。
实施例 18 ，步骤 b
Figure DEST_PATH_IMAGE424
用N2冲洗18a(250 mg，0.916 mmol)、(1S,3R,5S)-3-(4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2-甲酸叔丁酯(关于制备方法参见US2009-0202478 A1；1.03 g，2.29 mmol)和K2CO3(758 mg，5.49 mmol)在1,4-二噁烷(5 mL)和水(2 mL)中的溶液10分钟。接着加入Pd(dppf)Cl2:DCM加合物(74.7 mg，0.091 mmol)，反应混合物再用N2冲洗10分钟且在压力管中80℃加热12小时。反应混合物经硅藻土塞过滤且用EtOAc(2×5 mL)洗涤。在减压下蒸发滤液且向所得残余物中加入H2O(10 mL)。粗品用EtOAc(25 mL)萃取且有机层用盐水(5 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。通过反相HPLC(ACN/水/NH4OAc)纯化粗品，得到18b(150 mg)；区位异构单偶合产物为主要组分。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 11.16 (s, 1H), 7.91 (d, J=8.4, 2H), 7.87 (d, J=8.4, 2H), 7.69 (d, J=8.4, 2H), 7.67 (d, J=8.4, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.41 (t, J=2.8, 1H), 7.25 (d, J=7.6, 1H), 7.22 (d, J=7.6, 1H), 6.71-6.69 (m, 1H), 4.70-4.60 (m, 2H), 3.48-3.41 (m, 2H), 2.42-2.22 (m, 4H), 1.70-1.62 (m, 2H), 1.42-1.18 (m, 18H), 0.80-0.74 (m, 2H), 0.60-0.53 (m, 2H)。
实施例 18 ，步骤 c
在0℃向18b(150 mg，0.196 mmol)在DCM(25 mL)中的溶液中加入TFA(1 mL)且在室温下搅拌12小时。在真空中除去挥发性组分且让残余物与无水DCM(3×5 mL)共同蒸发。所得盐暴露在高真空中，得到吡咯烷18c(140 mg)，其按原样用于下一步骤。LC/MS(条件 9)：Rt=1.41 min。1H NMR (DMSO-d6, δ=2.50 ppm, 400 MHz): δ 11.19 (s, 1H), 10.08 (br s, 2H), 7.97-7.92 (m, 4H), 7.81 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.75-7.71 (m, 4H), 7.42 (t, J=2.8, 1H), 7.28-7.21 (被遮蔽, 2H), 6.70 (app t, 1H), 4.66-4.62 (m, 2H), 3.62-3.59 (m, 2H), 3.40-3.36 (m, 2H), 1.93-1.91 (m, 2H), 1.78-1.75 (m, 2H), 1.20-1.11 (m, 2H), 0.87-0.81 (m, 2H)。LC/MS: [M+H]+ C36H34N7的分析性计算值：564.28；实验值：564.2。
实施例 18
在0℃向18c(70 mg，0.124 mmol)和(S)-2-((甲氧基羰基)氨基)-3-甲基丁酸(45.7 mg，0.261 mmol)在DMF(10 mL)中的溶液中依序加入HATU(96.9 mg，0.254 mmol)和DIPEA(0.17 mL，0.994 mmol)。在室温下搅拌4小时后，在真空中除去挥发性组分且将残余物溶解在DCM(50 mL)中，用饱和NH4Cl(25 mL)、10% NaHCO3(25 mL)、盐水(25 mL)洗涤，经Na2SO4干燥且在真空中浓缩。粗品经反相HPLC纯化(ACN/水/TFA)，得到实施例18的TFA盐(10 mg)。LC(条件 2)：>91%均质性指数。LC/MS(条件 17)：Rt=1.82 min。LC/MS: [M-H]- C50H54N9O6的分析性计算值：877.03；实验值：877.4。
生物活性
本发明中利用HCV复制子检测法，且如共同拥有的PCT/US2006/022197中和在O'Boyle等人Antimicrob Agents Chemother. 2005年4月;49(4):1346-53中所描述来制备、进行和验证。如所描述，还使用合并有荧光素酶报导体的检测方法(Apath.com)。
使用HCV新型复制子细胞和在NS5A区中含有抗性取代的复制子细胞，以测试当前所描述的化合物族群。测出这些化合物对含有突变的细胞的抑制活性相对于针对野生型细胞的相应抑制效力具有不同程度的降低。因此，本发明化合物可有效抑制HCV NS5A蛋白的功能且被理解为其在如同先前在申请案PCT/US2006/022197和共同拥有的WO/04014852中所述的组合形式中是有效的。应了解本发明化合物可抑制HCV的多种基因型。表2显示本发明代表性化合物针对HCV 1b基因型的EC50(有效50%抑制浓度)值。范围如下：A=0.5 pM至10 pM；B=11 pM至90 pM；C=91 pM至160 pM；D=161 pM至5 nM。在一个实施方案中，本发明化合物对1a、1b、2a、2b、3a、4a和5a基因型具有抑制性。
表 2
实施例 EC50 ( μ M) 范围
1 A
2 B
3 A
4 B
5 C
6 A
7 9.42E-05 C
7.1 A
8 A
9 A
10 A
11 A
12 4.09E-05 B
13 4.18E-03 D
14 D
15 A
15.1 A
16 A
18 2.74E-06 A
本领域技术人员将显而易见，本发明不限于前述说明性实施例，且其可在不偏离其基本属性的情况下以其它特定形式实施。因此，需要这些实施例在所有方面中均视为说明性而非限制性的，参考随附的权利要求书，而非上述实施例，且因此在权利要求书的等同物的含义和范围内的所有变化均欲涵盖在其中。
本发明化合物可通过除NS5A抑制以外或不同于NS5A抑制的机制来抑制HCV。在一个实施方案中，本发明化合物抑制HCV复制子且在另一个实施方案中，本发明化合物抑制NS5A。本发明化合物可抑制多种HCV基因型。

Claims (17)

1. 式(I)化合物
Figure DEST_PATH_IMAGE002
或其医药学上可接受的盐，其中
各D独立地选自O和NH；
L为一键或苯基；
Q选自苯基、含有1、2或3个氮原子的6员杂芳环，和
X选自O、S、CH2、CH2CH2、(NR1)CH2和OCH2；
Y选自O、S、CH2、CH2CH2、(NR2)CH2和OCH2；
Z1和Z2各独立地选自CH和N；
Z3和Z4各独立地选自C和N；
限制条件为Z1、Z2、Z3和Z4中不超过两者为N；
A为任选含有1或2个其它双键且任选含有1、2或3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4至6员环，其中该环任选被烷基取代；
R1和R2独立地选自氢、烷基、卤基和羟基；其中该烷基可任选与该环上的另一碳原子形成稠合的3至6员环或桥联的4或5员环；或可任选与其所连接的碳形成螺环状3至6员环；
限制条件为当X为(NR1)CH2时，R1为氢或烷基；且
限制条件为当Y为(NR2)CH2时，R2为氢或烷基；
R3选自氢和-C(O)R5；
R4选自氢和-C(O)R6；
R5和R6独立地选自烷氧基、烷基、芳基烷氧基、芳基烷基、环烷基、环烷基氧基、杂环基、杂环基烷基、(NRcRd)烯基和(NRcRd)烷基；
R7和R8独立地选自氢、烷基、氰基和卤基；
Rc和Rd独立地选自氢、烯氧基羰基、烷氧基烷基羰基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、烷基磺酰基、芳基、芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳氧基羰基、芳基磺酰基、环烷基、环烷基氧基羰基、环烷基磺酰基、甲酰基、卤烷氧基羰基、杂环基、杂环基烷氧基羰基、杂环基烷基、杂环基烷基羰基、杂环基羰基、杂环基氧基羰基、羟烷基羰基、(NReRf)烷基、(NReRf)烷基羰基、(NReRf)羰基、(NReRf)磺酰基、-C(NCN)OR'和-C(NCN)NRxRy，其中R'选自烷基和未取代的苯基，且其中该芳基烷基、该芳基烷基羰基、该杂环基烷基和该杂环基烷基羰基的烷基部分进一步任选被1个-NReRf基团取代；且其中该芳基和该芳基烷氧基羰基、该芳基烷基、该芳基烷基羰基、该芳基羰基、该芳氧基羰基和该芳基磺酰基的芳基部分；该杂环基和该杂环基烷氧基羰基、该杂环基烷基、该杂环基烷基羰基、该杂环基羰基和该杂环基氧基羰基的杂环基部分进一步任选被1、2或3个独立地选自烷氧基、烷基、氰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基和硝基的取代基取代；
Re和Rf独立地选自氢、烷基、未取代的芳基、未取代的芳基烷基、未取代的环烷基、未取代的(环烷基)烷基、未取代的杂环基、未取代的杂环基烷基、(NRxRy)烷基和(NRxRy)羰基；且
Rx和Ry独立地选自氢和烷基。
2. 权利要求1的化合物，或其医药学上可接受的盐，其中Q为苯基。
3. 权利要求1的化合物，或其医药学上可接受的盐，其中X和Y各为CH2。
4. 权利要求1的化合物，或其医药学上可接受的盐，其中R7和R8各为氢。
5. 式(II)化合物
Figure DEST_PATH_IMAGE006
或其医药学上可接受的盐，其中
各D独立地选自O和NH；
L为一键或苯基；
Z1和Z2各独立地选自CH和N；
Z3和Z4各独立地选自C和N；
限制条件为Z1、Z2、Z3和Z4中不超过两者为N；
A为任选含有1或2个其它双键且任选含有1、2或3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4至6员环；
R1和R2独立地选自氢、烷基、卤基和羟基；其中该烷基可任选与该环上的另一碳原子形成稠合的3至6员环或桥联的4或5员环；或可任选与其所连接的碳形成螺环状3至6员环；
R3选自氢和-C(O)R5；
R4选自氢和-C(O)R6；
R5和R6独立地选自烷氧基、烷基、芳基烷氧基、芳基烷基、环烷基、环烷基氧基、杂环基、杂环基烷基、(NRcRd)烯基和(NRcRd)烷基；
Rc和Rd独立地选自氢、烯氧基羰基、烷氧基烷基羰基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、烷基磺酰基、芳基、芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳氧基羰基、芳基磺酰基、环烷基、环烷基氧基羰基、环烷基磺酰基、甲酰基、卤烷氧基羰基、杂环基、杂环基烷氧基羰基、杂环基烷基、杂环基烷基羰基、杂环基羰基、杂环基氧基羰基、羟烷基羰基、(NReRf)烷基、(NReRf)烷基羰基、(NReRf)羰基、(NReRf)磺酰基、-C(NCN)OR'和-C(NCN)NRxRy，其中R'选自烷基和未取代的苯基，且其中该芳基烷基、该芳基烷基羰基、该杂环基烷基和该杂环基烷基羰基的烷基部分进一步任选被1个-NReRf基团取代；且其中该芳基和该芳基烷氧基羰基、该芳基烷基、该芳基烷基羰基、该芳基羰基、该芳氧基羰基和该芳基磺酰基的芳基部分；该杂环基和该杂环基烷氧基羰基、该杂环基烷基、该杂环基烷基羰基、该杂环基羰基和该杂环基氧基羰基的杂环基部分进一步任选被1、2或3个独立地选自烷氧基、烷基、氰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基和硝基的取代基取代；
Re和Rf独立地选自氢、烷基、未取代的芳基、未取代的芳基烷基、未取代的环烷基、未取代的(环烷基)烷基、未取代的杂环基、未取代的杂环基烷基、(NRxRy)烷基和(NRxRy)羰基；且
Rx和Ry独立地选自氢和烷基。
6. 式(III)化合物
Figure DEST_PATH_IMAGE008
或其医药学上可接受的盐，其中
各D独立地选自O和NH；
Q选自苯基、含有1、2或3个氮原子的6员杂芳环，和
Figure DEST_PATH_IMAGE010
X选自O、S、CH2、CH2CH2、(NR1)CH2和OCH2；
Y选自O、S、CH2、CH2CH2、(NR2)CH2和OCH2；
Z1和Z2各独立地选自CH和N；
Z3和Z4各独立地选自C和N；
限制条件为Z1、Z2、Z3和Z4中不超过两者为N；
A为任选含有1或2个其它双键且任选含有1、2或3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4至6员环；
R1和R2独立地选自氢、烷基、卤基和羟基；其中该烷基可任选与该环上的另一碳原子形成稠合的3至6员环或桥联的4或5员环；或可任选与其所连接的碳形成螺环状3至6员环；
限制条件为当X为(NR1)CH2时，R1为氢或烷基；且
限制条件为当Y为(NR2)CH2时，R2为氢或烷基；
R3选自氢和-C(O)R5；
R4选自氢和-C(O)R6；
R5和R6独立地选自烷氧基、烷基、芳基烷氧基、芳基烷基、环烷基、环烷基氧基、杂环基、杂环基烷基、(NRcRd)烯基和(NRcRd)烷基；
R7和R8独立地选自氢、烷基、氰基和卤基；
Rc和Rd独立地选自氢、烯氧基羰基、烷氧基烷基羰基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、烷基磺酰基、芳基、芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳氧基羰基、芳基磺酰基、环烷基、环烷基氧基羰基、环烷基磺酰基、甲酰基、卤烷氧基羰基、杂环基、杂环基烷氧基羰基、杂环基烷基、杂环基烷基羰基、杂环基羰基、杂环基氧基羰基、羟烷基羰基、(NReRf)烷基、(NReRf)烷基羰基、(NReRf)羰基、(NReRf)磺酰基、-C(NCN)OR'和-C(NCN)NRxRy，其中R'选自烷基和未取代的苯基，且其中该芳基烷基、该芳基烷基羰基、该杂环基烷基和该杂环基烷基羰基的烷基部分进一步任选被1个-NReRf基团取代；且其中该芳基和该芳基烷氧基羰基、该芳基烷基、该芳基烷基羰基、该芳基羰基、该芳氧基羰基和该芳基磺酰基的芳基部分；该杂环基和该杂环基烷氧基羰基、该杂环基烷基、该杂环基烷基羰基、该杂环基羰基和该杂环基氧基羰基的杂环基部分进一步任选被1、2或3个独立地选自烷氧基、烷基、氰基、卤基、卤烷氧基、卤烷基和硝基的取代基取代；
Re和Rf独立地选自氢、烷基、未取代的芳基、未取代的芳基烷基、未取代的环烷基、未取代的(环烷基)烷基、未取代的杂环基、未取代的杂环基烷基、(NRxRy)烷基和(NRxRy)羰基；且
Rx和Ry独立地选自氢和烷基。
7. 化合物，其选自
Figure DEST_PATH_IMAGE012
Figure DEST_PATH_IMAGE014
Figure DEST_PATH_IMAGE018
Figure DEST_PATH_IMAGE020
Figure DEST_PATH_IMAGE022
Figure DEST_PATH_IMAGE026
Figure DEST_PATH_IMAGE028
Figure DEST_PATH_IMAGE030
Figure DEST_PATH_IMAGE032
和
Figure DEST_PATH_IMAGE034
或其医药学上可接受的盐。
8. 组合物，其包含权利要求1的化合物或其医药学上可接受的盐，和医药学上可接受的载体。
9. 权利要求8的组合物，其进一步包含一或两种具有抗HCV活性的其它化合物。
10. 权利要求9的组合物，其中这些其它化合物中至少一种为干扰素或病毒唑。
11. 权利要求10的组合物，其中该干扰素选自干扰素α 2B、聚乙二醇化干扰素α、聚乙二醇化干扰素λ、复合干扰素、干扰素α 2A和类淋巴母细胞干扰素τ。
12. 权利要求9的组合物，其中这些其它化合物中至少一种有效抑制选自HCV金属蛋白酶、HCV丝胺酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解螺旋酶、HCV NS4B蛋白、HCV进入、HCV组装、HCV释出、HCV NS5A蛋白和IMPDH的目标的功能，以治疗HCV感染。
13. 治疗患者HCV感染的方法，包括给予该患者治疗有效量的权利要求1的化合物或其医药学上可接受的盐。
14. 权利要求13的方法，其中进一步包括在给予权利要求1的化合物或其医药学上可接受的盐之前、之后或同时给予1或2种具有抗HCV活性的其它化合物。
15. 权利要求14的方法，其中这些其它化合物中至少一种为干扰素或病毒唑。
16. 权利要求13的方法，其中干扰素选自干扰素α 2B、聚乙二醇化干扰素α、聚乙二醇化干扰素λ、复合干扰素、干扰素α 2A和类淋巴母细胞干扰素τ。
17. 权利要求13的方法，其中这些其它化合物中至少一种有效抑制选自HCV金属蛋白酶、HCV丝胺酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解螺旋酶、HCV NS4B蛋白、HCV进入、HCV组装、HCV释出、HCV NS5A蛋白和IMPDH的目标的功能，以治疗HCV感染。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105085493A (zh) * 2014-04-15 2015-11-25 广东东阳光药业有限公司 作为丙型肝炎抑制剂的螺环化合物及其在药物中的应用
CN105272972A (zh) * 2014-05-30 2016-01-27 上海唐润医药科技有限公司 具有抗病毒活性的苯并杂环己二烯衍生物
WO2017076201A1 (zh) * 2015-11-06 2017-05-11 江苏豪森药业集团有限公司 Hcv抑制剂、其制备方法与应用

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8303944B2 (en) 2006-08-11 2012-11-06 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2011009084A2 (en) 2009-07-16 2011-01-20 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Benzimidazole analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
US20110269956A1 (en) 2009-11-11 2011-11-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110274648A1 (en) 2009-11-11 2011-11-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110281910A1 (en) 2009-11-12 2011-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US8362020B2 (en) 2009-12-30 2013-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2794145A1 (en) 2010-03-24 2011-09-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Analogues for the treatment or prevention of flavivirus infections
EP2963034A1 (en) 2010-08-26 2016-01-06 RFS Pharma, LLC. Potent and selective inhibitors of hepatitis c virus
US20150031884A1 (en) * 2010-12-15 2015-01-29 Abbvie Inc. Anti-viral compounds
US8552047B2 (en) * 2011-02-07 2013-10-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
KR20200003933A (ko) 2011-03-04 2020-01-10 뉴젠 세러퓨틱스 인코포레이티드 알킨 치환된 퀴나졸린 화합물 및 그것의 사용 방법
US9546160B2 (en) 2011-05-12 2017-01-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2012155339A1 (zh) 2011-05-17 2012-11-22 江苏康缘药业股份有限公司 4-苯胺-6-丁烯酰胺-7-烷醚喹唑啉衍生物及其制备方法和用途
BR112014000563A2 (pt) 2011-07-09 2019-12-10 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd composto, composição farmacêutica, e, uso do composto
WO2013030750A1 (en) 2011-09-01 2013-03-07 Lupin Limited Antiviral compounds
BR112014010401A8 (pt) 2011-11-03 2017-12-19 Theravance Inc Inibidores do vírus da hepatite c rod-like que contêm o fragmento {2-[4-(bifenil-4-il)-1h-imidazo-2-il] pirrolidina-1-carbonilmetil}amina
US9326973B2 (en) 2012-01-13 2016-05-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US9073943B2 (en) 2012-02-10 2015-07-07 Lupin Limited Antiviral compounds with a dibenzooxaheterocycle moiety
CA2869640C (en) 2012-04-25 2018-03-20 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Piperazine-piperidine compounds as hepatitis c virus inhibitors
MX2014013489A (es) * 2012-05-09 2015-02-12 Bayer Cropscience Ag 5-halogenopirazolindanil carboxamidas.
CN103420991B (zh) * 2012-05-17 2017-07-07 乳源东阳光药业有限公司 作为丙型肝炎抑制剂的吡咯烷衍生物及其在药物中的应用
TWI610916B (zh) 2012-08-03 2018-01-11 廣東東陽光藥業有限公司 作爲丙型肝炎抑制劑的橋環化合物及其在藥物中的應用
TW201412709A (zh) * 2012-09-28 2014-04-01 Sunshine Lake Pharma Co Ltd 作為丙型肝炎抑制劑的螺環化合物及其在藥物中的應用
CN103848821B (zh) * 2012-11-29 2016-10-12 广东东阳光药业有限公司 作为丙型肝炎抑制剂的螺环化合物、药物组合物及它们的用途
US9802949B2 (en) 2012-11-29 2017-10-31 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Fused ring compounds as hepatitis C virus inhibitors, pharmaceutical compositions and uses thereof
TW201439084A (zh) * 2012-11-29 2014-10-16 Sunshine Lake Pharma Co Ltd 作爲丙型肝炎抑制劑的螺環化合物、藥物組合物及它們在藥物中的應用
US9717712B2 (en) 2013-07-02 2017-08-01 Bristol-Myers Squibb Company Combinations comprising tricyclohexadecahexaene derivatives for use in the treatment of hepatitis C virus
US20150023913A1 (en) 2013-07-02 2015-01-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
JP2016527232A (ja) 2013-07-17 2016-09-08 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｈｃｖの治療に使用するためのビフェニル誘導体を含む組み合わせ
JP6306874B2 (ja) * 2013-12-20 2018-04-04 住友化学株式会社 臭素化合物の製造方法
WO2015110048A1 (en) * 2014-01-23 2015-07-30 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Bridged ring compounds as hepatitis c virus inhibitors, pharmaceutical compositions and uses thereof
WO2015184644A1 (zh) * 2014-06-06 2015-12-10 爱博新药研发(上海)有限公司 抑制丙肝病毒的化合物、药物组合物及其应用
EP3154985B1 (en) * 2014-06-12 2018-06-06 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
TWI675029B (zh) * 2014-12-16 2019-10-21 大陸商廣東東陽光藥業有限公司 作為丙型肝炎抑制劑的橋環化合物及其製備方法
US10617675B2 (en) 2015-08-06 2020-04-14 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
JP6918819B2 (ja) 2016-03-08 2021-08-11 ノバルティス アーゲー オルトミクソウイルス感染の処置に有用な三環式化合物
JOP20170169A1 (ar) 2016-08-29 2019-01-30 Novartis Ag مركبات بيريدازين ثلاثية الحلقة مندمجة تفيد في علاج العدوى بفيروس أورثوميكسو
PE20210403A1 (es) 2018-02-28 2021-03-02 Novartis Ag Derivados de 10-(di(fenil)metil)-4-hidroxi-8,9,9a,10-tetrahidro-7h-pirrolo [1',2':4,5]pirazino[1,2-b]piridazina-3,5-diona y compuestos relacionados como inhibidores de la replicacion del ortomixovirus para el tratamiento de la influenza
US11634389B2 (en) 2018-11-28 2023-04-25 The Regents Of The University Of Michigan Succinate dehydrogenase inhibitors and methods of making and using the same
WO2023247489A1 (en) 2022-06-21 2023-12-28 Astrazeneca Ab N-(2-(4-cyanothiazolidin-3-yl)-2-oxoethyl)- quinoline-4-carboxamides

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010065674A1 (en) * 2008-12-03 2010-06-10 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
CN102596936A (zh) * 2009-05-13 2012-07-18 吉里德科学公司 抗病毒化合物
CN102791687A (zh) * 2009-12-18 2012-11-21 英特穆恩公司 C型肝炎病毒复制的新型抑制剂

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2003261434A1 (en) 2002-08-12 2004-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Iminothiazolidinones as inhibitors of hcv replication
DE102004036971B4 (de) 2004-07-30 2009-07-30 Advanced Micro Devices, Inc., Sunnyvale Technik zur Bewertung lokaler elektrischer Eigenschaften in Halbleiterbauelementen
US7894996B2 (en) 2005-02-28 2011-02-22 The Rockefeller University Structure of the hepatitis C NS5A protein
US7659270B2 (en) * 2006-08-11 2010-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8329159B2 (en) * 2006-08-11 2012-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7728027B2 (en) * 2007-08-08 2010-06-01 Bristol-Myers Squibb Company Process for synthesizing compounds useful for treating hepatitis C
DK2250163T3 (da) * 2008-02-12 2012-07-16 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis C-virusinhibitorer
US8147818B2 (en) 2008-02-13 2012-04-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20110274648A1 (en) 2009-11-11 2011-11-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010065674A1 (en) * 2008-12-03 2010-06-10 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
CN102596936A (zh) * 2009-05-13 2012-07-18 吉里德科学公司 抗病毒化合物
CN102791687A (zh) * 2009-12-18 2012-11-21 英特穆恩公司 C型肝炎病毒复制的新型抑制剂

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105085493A (zh) * 2014-04-15 2015-11-25 广东东阳光药业有限公司 作为丙型肝炎抑制剂的螺环化合物及其在药物中的应用
CN105272972A (zh) * 2014-05-30 2016-01-27 上海唐润医药科技有限公司 具有抗病毒活性的苯并杂环己二烯衍生物
WO2017076201A1 (zh) * 2015-11-06 2017-05-11 江苏豪森药业集团有限公司 Hcv抑制剂、其制备方法与应用

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EA201390190A1 (ru) 2013-06-28
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