CN103229677B - 一种生产沉香的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物技术领域，公开了一种生产沉香的方法。该方法先在沉香树或白木香树的树干上钻孔，用输液法将由植物激素、无机盐和苯乙醇组成沉香诱导剂滴入树体中，然后封住孔洞，间隔1-2个月滴加一次，共处理3-24个月，然后割取树干中棕褐色油状物以及黄棕色变色木质部，晒干后即为沉香；所述植物激素为茉莉酸甲酯、乙烯利、6-BA中的一种或两种以上；所述无机盐为氯化钠、氯化镁中的一种或两种。本发明调整现有沉香促香剂的组分，刺激树干防御系统，产生合成沉香化学成分的相关酶类并作用于苯乙醇，使树干产沉香中相关化学成分，最终积累形成沉香。本发明不止提高了沉香油和沉香油中倍半萜含量，在醇溶性浸出物方面的含量也得到提高。
Description
技术领域
本发明涉及制生物技术领域，具体涉及一种生产沉香的方法。
背景技术
沉香(agarwood)是为瑞香科(Thymelaeaceae)植物沉香（Aquilaria agallochaRoxb.）或白木香[Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg.]含有黑色树脂的木质部。前者主产印度和马来西亚等地，我国称其为进口沉香，后者主产我国海南、广东和广西等省区，称为国产沉香或土沉香。沉香不仅是我国、日本、印度以及其他东南亚国家的传统名贵药材，更是一种名贵的天然香料。沉香在中东、中国和日本至少有3000年的历史，在印度和法国，甚至在圣经的旧约全书中也有沉香的记载。目前沉香仍然是世界上最昂贵的香料之一，仅新加坡每年出口沉香的价值就超过12亿美元。
健康的沉香或白木香在正常生长情况下无法生成沉香，只有在受到外界伤害之后，其伤口附近会逐步产生含有树脂的木块，通常要积累数年才能形成，所以自然条件下沉香的产出率非常低。为此，人们经通过科学研究和实践经验，总结出“砍伤法”、“半断枝法”、“凿洞法”、“人工接菌法”和“化学法”等人工结香的方法。但是这些传统的人工结香方法操作复杂，沉香得率很低，成本高，造成很大程度上的浪费。
申请号201010104119.5的中国专利公开了一种输液法在白木香树上生产沉香的方法，具体采用输液法将沉香促香剂缓慢滴入白木香树干中，处理6-12个月后可以得到沉香。虽然该方法生产的沉香满足国家对其醇溶性浸出物的含量要求，但是其沉香促香剂成分并未考虑如何提高沉香油含量以及沉香油中倍半萜含量。众所周知，沉香除作药用外，还作为香料备受推崇，所以沉香的沉香油含量以及沉香油中倍半萜的含量对于沉香品质尤其重要。由于沉香油含量以及沉香油中倍半萜的含量在沉香中含量不高，因此在本领域能够提升这两者的含量既能提升沉香的品质。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种生产沉香的方法，使得该方法生产的沉香能够提升沉香油以及沉香油中倍半萜含量，提升沉香品质。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种生产沉香的方法，在沉香树或白木香树的树干上钻孔，用输液法将由植物激素、无机盐和苯乙醇组成沉香诱导剂滴入树体中，然后封住孔洞，间隔1-2个月滴加一次，共处理3-24个月，然后割取树干中棕褐色油状物以及黄棕色变色木质部，晒干后即为沉香；
其中，所述植物激素为茉莉酸甲酯、乙烯利、6-BA中的一种或两种以上；所述无机盐为氯化钠、氯化镁中的一种或两种。所述植物激素更加优选为茉莉酸甲酯、乙烯利中的任意一种与6-BA混合，6-BA和乙烯利或茉莉酸甲酯的质量比优选为1:1-5:3。
作为优选，所述植物激素的质量百分浓度为0.01-0.1%，更优选为0.05-0.1%，所述无机盐的质量百分浓度优选为0.05-0.5%，更优选为0.1-0.2%，所述苯乙醇的质量百分浓度优选为0.05-0.5%，更优选为0.2-0.5%。
作为优选，所述沉香树或白木香树为树龄5-10年、胸径大于等于8cm的树木，所述钻孔深度大于等于4cm、小于等于树木胸径的一半，所述处理时间为6-12个月，所述钻孔优选位于距地面2-10cm高的树干上。本发明对钻孔数量不加限制，可以为一个，也可以为多个。
本发明调整现有沉香促香剂的组分，用6-BA代替生长素（IAA），刺激沉香或白木香树干的防御系统，使其产生合成沉香化学成分的相关酶类，然后这些酶类作用于本发明新加组分-促香剂苯乙醇，使得树干迅速产沉香中相关化学成分，经过积累，最终形成棕褐色或黄棕色的变色木质部，经采集晒干后得到沉香。经过和未添加苯乙醇制备的沉香以及不同配方组成制备的沉香对比，结果显示，本发明不止提高了沉香油和沉香油中倍半萜含量，在醇溶性浸出物方面的含量也得到提高。本发明所生产的沉香完全满足市场需求和要求，可用于大规模、标准化、商品化的生产，既可提高香农收入，又可保护野生沉香和白木香资源，具有重要的经济效益、社会效益和生态效益。
具体实施方式
本发明公开了一种生产沉香的方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明所述方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
在具体实施方式中，本发明对生产的沉香随机挑选三份样品的醇浸出物进行了含量测定，同一批样品平行试验5次，得实验产出的沉香样品浸出物含量均高于10%，达到药典要求水平。沉香油含量和沉香油中倍半萜含量检测结果显示得到提高。检测方法如下：
醇溶性浸出物含量检测：
割取的沉香参照2010年《中华人民共和国药典》所载醇溶性浸出物测定法项下的热浸法制取沉香油，并对所得沉香样品的醇溶性浸出物含量进行了测定。精密称取沉香药材粉末2.0g，置250ml的锥形瓶中，精密加入无水乙醇50ml，塞紧，称定重量，静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1小时。放冷，取下圆底烧瓶，塞紧，称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，即得沉香油。精密量取滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，移至干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，以干燥品计算药材中醇溶性浸出物的含量(%)。
沉香油含量和沉香油中倍半萜含量检测：
精确称取样品10.0g，粉碎后分别加入100ml乙醚于室温下浸提三次，回收乙醚后即得挥发油。
将样品的挥发油进行GC-MS分析。仪器为美国惠普公司的HP6890/5973GC/MS联用仪。色谱柱为HP-INno-wax Polyethylene Glycol(30.0m×320m×0.25m)弹性石英毛细管柱。程序升温：柱温60℃，保留2min，以4℃/min升温至230℃，保持20min，气化室温度250℃。载气为高纯He(99.999％)；柱前压5.08psi，载气流量2.0ml/min；进样量1μl(丙酮溶液)；分流比10：1。
离子源为EI源；离子源温度230℃；四级杆温度150℃；电子能量70eV；发射电流34.6A；倍增器电压1412V；接口温度280℃；质量扫描范围为10-550amu。分析结果通过HPMSD化学工作，结合Nist2005标准质谱图库和WILE275质谱图库进行鉴定，采用峰面积归一化法计算相对含量。
以下就本发明所提供的一种生产沉香的方法做进一步说明。
实施例1：输液法生产沉香以及试验对比
1、本发明方法
选取5年树龄，胸径大于10cm的白木香树，在距离地面5cm处，垂直树干使用普通电钻，钻头直径为0.6cm，钻2个深5cm的孔。配制含0.1%的茉莉酸甲酯、0.5%的NaCl和0.3%的苯乙醇溶液500ml，将其缓慢输入钻孔，输完后用橡胶塞封住孔洞，防止沉香药剂流出和雨水冲刷。3天后白木香树部分叶子掉落。每1个月滴加一次，3个月后割取创伤周围形成的棕褐色油状物及黄褐色的变色木质部，经晒干后得到沉香。
2、对比方法
结香液体中不加苯乙醇溶液，其余结香条件同上。3天后白木香树部分叶子掉落。每1个月滴加一次，3个月后，割取创伤周围形成的棕褐色油状物及黄褐色的变色木质部，经晒干后得到沉香。
3、试验检测
对上述两种方法制备的沉香进行醇溶性浸出物含量、沉香油含量和沉香油中倍半萜含量检测，见表1。
表1沉香质量检测
| 醇溶性浸出物含量% | 沉香油含量% | 沉香油中倍半萜含量% | |
| 本发明方法 | 12.8 | 2.0 | 17.0 |
| 对比方法 | 10.5 | 1.8 | 15.5 |
上表数据显示，本发明不止提高了沉香油和沉香油中倍半萜含量，在醇溶性浸出物方面的含量也得到提高。
实施例2：输液法生产沉香以及试验对比
1、本发明方法
选取8年树龄，胸径大于等于8cm的沉香树，在距离地面2cm处，垂直树干使用普通电钻，钻头直径为0.6cm，钻2个深4cm的孔。配制含0.01%的6-BA、0.1%的MgCl2和0.2%的苯乙醇溶液500ml，将其缓慢输入钻孔，输完后用橡胶塞封住孔洞，防止沉香药剂流出和雨水冲刷。4天后白木香树部分叶子掉落。每2个月滴加一次，12个月后割取创伤周围形成的棕褐色油状物及黄褐色的变色木质部，经晒干后得到沉香。
2、对比方法
结香液体中不加苯乙醇溶液，其余结香条件同上。4天后白木香树部分叶子掉落。每2个月滴加一次，12个月后，割取创伤周围形成的棕褐色油状物及黄褐色的变色木质部，经晒干后得到沉香。
3、试验检测
对上述两种方法制备的沉香进行醇溶性浸出物含量、沉香油含量和沉香油中倍半萜含量检测，见表2。
表2沉香质量检测
| 醇溶性浸出物含量% | 沉香油含量% | 沉香油中倍半萜含量% | |
| 本发明方法 | 15.8 | 3.7 | 31.5 |
| 对比方法 | 13.2 | 2.9 | 28.4 |
上表数据显示，本发明不止提高了沉香油和沉香油中倍半萜含量，在醇溶性浸出物方面的含量也得到提高。
实施例3：输液法生产沉香以及试验对比
1、本发明方法
选取10年树龄，胸径大于等于15cm的沉香树，在距离地面10cm处，垂直树干使用普通电钻，钻头直径为0.6cm，钻2个深7.5cm的孔。配制含0.01%的6-BA、0.05%乙烯利、0.05%的MgCl2和0.5%的苯乙醇溶液500ml，将其缓慢输入钻孔，输完后用橡胶塞封住孔洞，防止沉香药剂流出和雨水冲刷。4天后白木香树部分叶子掉落。每2个月滴加一次，24个月后割取创伤周围形成的棕褐色油状物及黄褐色的变色木质部，经晒干后得到沉香。
2、对比方法
结香液体中不加苯乙醇溶液，其余结香条件同上。4天后白木香树部分叶子掉落。每2个月滴加一次，24个月后，割取创伤周围形成的棕褐色油状物及黄褐色的变色木质部，经晒干后得到沉香。
3、试验检测
对上述两种方法制备的沉香进行醇溶性浸出物含量、沉香油含量和沉香油中倍半萜含量检测，见表3。
表3沉香质量检测
| 醇溶性浸出物含量% | 沉香油含量% | 沉香油中倍半萜含量% | |
| 本发明方法 | 17.3 | 5.0 | 32.8 |
| 对比方法 | 15.2 | 4.0 | 29.1 |
上表数据显示，本发明不止提高了沉香油和沉香油中倍半萜含量，在醇溶性浸出物方面的含量也得到提高。
实施例4：输液法生产沉香以及试验对比
1、本发明方法
选取10年树龄，胸径大于10cm的白木香树，在距离地面10cm处，垂直树干使用普通电钻，钻头直径为0.6cm，钻2个深5cm的孔。配制含0.05%的6-BA、0.05%乙烯利、0.2%的NaCl和0.3%的苯乙醇溶液500ml，将其缓慢输入钻孔，输完后用橡胶塞封住孔洞，防止沉香药剂流出和雨水冲刷。4天后白木香树部分叶子掉落。每2个月滴加一次，12个月后割取创伤周围形成的棕褐色油状物及黄褐色的变色木质部，经晒干后得到沉香。
2、对比方法
参照申请号201010104119.5专利实施例2方法制备。即1%乙烯利10mL，1%生长素5mL，1%氯化钠985mL。
3、试验检测
对上述两种方法制备的沉香进行醇溶性浸出物含量、沉香油含量和沉香油中倍半萜含量检测，见表4。
表4沉香质量检测
| 醇溶性浸出物含量% | 沉香油含量% | 沉香油中倍半萜含量% | |
| 本发明方法 | 15.6 | 3.5 | 30.5 |
| 对比方法 | 12.9 | 2.6 | 27.7 |
上表数据显示，本发明不止提高了沉香油和沉香油中倍半萜含量，在醇溶性浸出物方面的含量也得到提高。
实施例5：输液法生产沉香以及试验对比
1、本发明方法
选取10年树龄，胸径大于10cm的白木香树，在距离地面10cm处，垂直树干使用普通电钻，钻头直径为0.6cm，钻2个深5cm的孔。配制含0.05%的6-BA、0.03%茉莉酸甲酯、0.15%的MgCl2和0.5%的苯乙醇溶液500ml，将其缓慢输入钻孔，输完后用橡胶塞封住孔洞，防止沉香药剂流出和雨水冲刷。4天后白木香树部分叶子掉落。每2个月滴加一次，24个月后割取创伤周围形成的棕褐色油状物及黄褐色的变色木质部，经晒干后得到沉香。
2、对比方法
结香液体中不加苯乙醇溶液，其余结香条件同上。4天后白木香树部分叶子掉落。每2个月滴加一次，24个月后，割取创伤周围形成的棕褐色油状物及黄褐色的变色木质部，经晒干后得到沉香。
3、试验检测
对上述两种方法制备的沉香进行醇溶性浸出物含量、沉香油含量和沉香油中倍半萜含量检测，见表5。
表5沉香质量检测
| 醇溶性浸出物含量% | 沉香油含量% | 沉香油中倍半萜含量% | |
| 本发明方法 | 17.2 | 4.8 | 31.9 |
| 对比方法 | 15.0 | 3.9 | 28.0 |
上表数据显示，本发明不止提高了沉香油和沉香油中倍半萜含量，在醇溶性浸出物方面的含量也得到提高。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (7)
1.一种生产沉香的方法，其特征在于，在沉香树或白木香树的树干上钻孔，用输液法将植物激素、无机盐和苯乙醇配成的沉香诱导剂混合溶液滴入树体中，所述沉香诱导剂混合溶液中植物激素质量百分浓度为0.01-0.1%，无机盐质量百分浓度为0.05-0.5%，苯乙醇质量百分浓度为0.05-0.5%，然后封住孔洞，间隔1-2个月滴加一次，共处理3-24个月，然后割取树干中棕褐色油状物以及黄棕色变色木质部，晒干后即为沉香；
其中，所述植物激素为茉莉酸甲酯、乙烯利、6-BA中的一种或两种以上；所述无机盐为氯化钠、氯化镁中的一种或两种。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述沉香树或白木香树为树龄5-10年、胸径大于等于8cm的树木。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述钻孔深度大于等于4cm、小于等于树木胸径的一半。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述钻孔位于离地2-10cm高的树干上。
5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述处理时间为6-12个月。
6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述植物激素为茉莉酸甲酯、乙烯利中的任意一种与6-BA混合。
7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述沉香诱导剂的用量为500mL/次。
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