CN114158415B - 一种促进沉香树结香的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种促进沉香树结香的方法，遵循沉香树生长自然生长规律，通过采用微创钻孔技术，与树体成斜角的钻孔方式，减少对树体的破坏，在采香时无需破坏整个树体，不会影响沉香树的正常生长，然后通过在结香剂中添加反式肉桂酸和萘乙酸抑制木质素的生成，再结合使用根瘤菌、胶质芽孢杆菌、淡紫拟青霉菌和刺盘孢菌的复合菌体系，分解结香剂中的其余成分，刺激树体分泌油脂，还可与分泌的树脂反应结香，添加氨基酸和微量元素等营养成分，促进菌种生长，加快结香速度，使沉香树在结香3个月内生产的沉香就可符合药典的标准，在结香6个月后生产的2‑(2‑苯乙基)色酮类化合物含量高，质量接近野生沉香。

Description

一种促进沉香树结香的方法
技术领域
本发明涉及生物工程技术领域，特别涉及一种促进沉香树结香的方法。
背景技术
沉香树是瑞香科，沉香属乔木，主要有白木香树、鹰木香树、蜜香树、奇楠等树种，其中白木香是我国沉香的主要植物来源。沉香具有很高的药用价值，且在文化、香水制造和宗教领域亦有广泛用途，供不应求。目前野生沉香树被过度砍伐，沉香树资源越来越少，现已被列为国家珍稀濒危二级保护植物。为了保护野生沉香资源，开辟可持续利用沉香的途径，各种人工栽培沉香树以及人工结香的技术应运而生。
沉香是沉香树受到外伤雷电击伤、台风折断、鼠吃虫咬、人工砍折等后，出于自身的生机恢复功能，树体会分泌出特殊的树脂结香来进行自我修复，真菌感染树体伤处后与这部分树脂反应，从而产生沉香。利用这一机制，我国南方白木香树种植地区，普遍采用传统的砍伤、火烧、打钉、凿洞技术对白木香树进行致伤，或采用现代生物技术在伤处人工接种某种微生物等方法，激发树的防御机制，以促进其产生树脂沉香。但这些结香技术的产率及产量低，品质不稳定，操作麻烦，容易影响树的健康生长，甚至结香之后需砍伐取香再重新栽种。近年来开发出来的点滴法通体结香技术，即在树干体内反复灌注各种化学制剂和或微生物制剂来致伤，诱导树木启动防御反应，在植株内部结香，可在6个月内结香，产量是传统结香法的数十倍以上，且质量较佳，但对植株的伤害比较大，不利于香树的长期健康生长，也不易结出高品质的沉香。
目前采取的各种简便快速的人工结香手段，可以缩短结香周期，增加沉香的产量，但是要想获得真正与野生沉香相媲美的高品质沉香，还有很长的路要走。野生沉香的结香周期很长，数量很少。野生沉香是与树体生长的气候、纬度、地势、土壤以及周围环境中的微生物生态等自然环境密切相关。尤其是植物本身与天然环境的长期相互作用，结出香味典雅、气韵悠长的优质沉香。至今，人类对于白木香结香的奥秘还远远没有探究清楚，而且与香树结香关系密切的复杂的菌类微生态系统尚未研究清楚。因此，如何模拟野生条件，真正诱导出天然品质沉香，需要不断的深入研究。
发明内容
鉴以此，本发明提出一种促进沉香树结香的方法，遵循沉香树生长自然生长规律，不对树体进行大规模伤害，采用特殊钻针进行科学钻孔，通过人工导入结香剂，辅助其转化内生营养，凝结沉香，具有快速、简易、对树体健康无害、结香品质高的优点。
本发明的技术方案是这样实现的：
一种促进沉香树结香的方法，包括如下步骤：
S1.沉香树的选择：选择树龄3年以上、胸径在10cm以上的沉香树；
S2.钻孔：在沉香树胸径部位以上，选定孔位，用钻头钻盲孔，盲孔方向与树体成斜角斜向上方或下方，深度为4～6cm；
S3.结香：将结香剂导入盲孔内，然后在孔口处涂抹护理液，每隔1～3个月，导入一次结香剂。
优选的，所述沉香树为白木香树。
优选的，所述沉香树还可以为鹰木香树、蜜香树、奇楠等瑞香科树种。
优选的，所述孔位为呈阶梯状排列，每一孔位与后一个孔位的水平距离为2～3cm，垂直距离为3～4cm，相邻排间的垂直距离为4～7cm。
优选的，所述盲孔方向，从下往上数，奇数排的盲孔方向为斜向上方，偶数排的盲孔方向为斜向下方，偶数排的盲孔与下方奇数排的盲孔连通。
优选的，所述斜角的角度为30～45°。
优选的，所述孔的孔径为10～15mm，斜向上方的深度为4～5cm，斜向下方的深度为与下方奇数排的盲孔连通。
优选的，当盲孔方向为斜向上方时，所述结香剂的导入方法为用结香剂涂抹孔壁；所述结香剂的使用量为10～15mL/孔，使用频率为每隔1个月使用一次。
优选的，当盲孔方向为斜向下方时，结香剂的导入方法为沿孔壁缓慢倒入孔内；所述结香剂的使用量为15～20mL/孔，使用频率为每隔2个月使用一次。
优选的，当盲孔方向为奇数排斜向上方、偶数排斜向下方时，结香剂的导入方法为封住奇数排盲孔，从偶数排将结香剂导入孔内；所述结香剂的使用量为18～30mL/孔，使用频率为每隔3个月使用一次。
优选的，所述结香剂，按重量份计，包括以下成分：0.1～0.3份反式肉桂酸、0.04～0.05份萘乙酸、0.55～0.75份花青素、3～5份芦荟苷、1～2份复合菌粉、0.5～2份氨基酸、0.01～0.06份微量元素和15～30份水。
优选的，所述复合菌粉为根瘤菌、胶质芽孢杆菌、淡紫拟青霉菌和刺盘孢菌的菌粉按(0.4～0.5)：1：(1.2～1.4)：(0.7～0.9)的数量比混合制得；所述菌粉中菌的数量为1×106～8cfu/g。
优选的，所述微量元素为质量比(0.1～0.5)：(4～8)：(0.1～0.5)：1的硫酸铜、碳酸锰、钼酸钠和硫酸锌。
优选的，所述护理液，按重量份计，包括以下成分：0.6～0.8份茉莉酸甲酯、5～6份碳酸钙、0.2～0.3份硫酸铜、0.02～0.03份羟甲基纤维素和25～35份水。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明提供了一种促进沉香树结香的方法，遵循沉香树生长自然生长规律，通过采用微创钻孔技术，与树体成斜角的钻孔方式，减少对树体的破坏，在采香时无需破坏整个树体，不会影响沉香树的正常生长，然后通过在结香剂中添加反式肉桂酸和萘乙酸抑制木质素的生成，刺激树体分泌树脂，再结合使用复合菌体系，与分泌的树脂反应结香，添加氨基酸和微量元素等营养成分，促进菌种生长，加快结香速度，使沉香树在结香3个月内生产的沉香就可符合药典的标准，在结香6个月后生产的2-(2-苯乙基)色酮类化合物含量高。
本发明的结香方法，可以提高沉香树的结香速度，在结香3～6个月后，便可获得品质高的沉香，可提高沉香中沉香四醇、含油量和2-(2-苯乙基)色酮类化合物含量，质量接近野生沉香。
本发明通过采用根瘤菌、胶质芽孢杆菌、淡紫拟青霉菌和刺盘孢菌的复合菌体系能够分解结香剂中的其余成分，刺激树体分泌油脂，还可与油脂反应生成质量佳的沉香。
本发明将相邻排的盲孔连接，加快结香速度，减少结香剂的使用量，提高沉香的含油量。
经实验证明，本发明的促进沉香树结香技术，能够诱发沉香树自然结香，持续养护半年、1年、3年或更长时间后，本领域技术人员依据常规方法，例如，观察香树整体状态、结香部位的大体形态、木质特性、颜色、含油脂程度、采样后加热闻到香气等可以初步判断结香情况，并根据需要决定采集时间,以获得不同品质的天然沉香，是一种简单易行，且成效显著的结香方法。
附图说明
图1为本发明沉香树结香3个月后生产沉香；
图2为本发明实施例1的沉香树结香3个月后生产的沉香的气相色谱-质谱分析图；
图3为本发明钻盲孔后的沉香树正视图；
图4为本发明钻盲孔后的沉香树横截面示意图；
图5为本发明实施例1每排在同一水平上钻1个盲孔后的沉香树径向横截面示意图；
图6为本发明实施例2每排在同一水平上钻1个盲孔后的沉香树径向横截面示意图；
图7为本发明实施例3每排在同一水平上钻1个盲孔后的沉香树径向横截面示意图；
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
实施例1
S1.沉香树的选择：选择树龄3年以上、胸径在10cm以上的白木香；
S2.钻孔：在沉香树胸径部位以上，孔位呈阶梯状排列，每一孔位与后一个孔位的水平距离为3cm，垂直距离为4cm，相邻排间的垂直距离为5cm，选定孔位后用钻头钻盲孔，孔径为10mm，盲孔方向与树体成45°角，从下往上数，奇数排的盲孔方向为斜向上方，深度为4cm，偶数排的盲孔方向为斜向下方，偶数排的盲孔与下方奇数排的盲孔连通；
S3.结香：封住奇数排盲孔，从偶数排将结香剂导入孔内，结香剂的使用量为18mL/孔，然后在孔口处涂抹护理液，每隔3个月使用一次结香剂；
所述结香剂，包括以下成分：0.2g反式肉桂酸、0.04g萘乙酸、0.70g花青素、4g芦荟苷、0.2g根瘤菌菌粉、0.5g胶质芽孢杆菌菌粉、0.65g淡紫拟青霉菌菌粉、0.4g刺盘孢菌菌粉、0.5～2g氨基酸、0.0023g硫酸铜、0.0385g碳酸锰、0.0015g钼酸钠和0.0077g硫酸锌和20g水；
所述菌粉中菌的数量为1×107cfu/g；
所述护理液，包括以下成分：0.7g茉莉酸甲酯、5g碳酸钙、0.3g硫酸铜、0.02g羟甲基纤维素和30g水。
实施例2
S1.沉香树的选择：选择树龄3年以上、胸径在10cm以上的白木香；
S2.钻孔：在沉香树胸径部位以上，孔位呈阶梯状排列，每一孔位与后一个孔位的水平距离为2cm，垂直距离为3cm，相邻排间的垂直距离为4cm，选定孔位后用钻头钻盲孔，孔径为15mm，盲孔方向与树体成30°角，斜向上方，深度为5cm；
S3.结香：用结香剂涂抹孔壁；所述结香剂的使用量为10mL/孔，然后在孔口处涂抹护理液，每隔1个月使用一次结香剂；
所述结香剂，包括以下成分：0.3g反式肉桂酸、0.05g萘乙酸、0.75g花青素、5g芦荟苷、0.29g根瘤菌菌粉、0.59g胶质芽孢杆菌菌粉、0.71淡紫拟青霉菌菌粉、0.41g刺盘孢菌菌粉、2g氨基酸、0.0053g硫酸铜、0.0427g碳酸锰、0.001g钼酸钠和0.011g硫酸锌和30g水；
所述菌粉中菌的数量为1×106cfu/g；
所述护理液，包括以下成分：0.8g茉莉酸甲酯、6g碳酸钙、0.3g硫酸铜、0.03g羟甲基纤维素和35g水。
实施例3
S1.沉香树的选择：选择树龄3年以上、胸径在10cm以上的白木香；
S2.钻孔：在沉香树胸径部位以上，孔位呈阶梯状排列，每一孔位与后一个孔位的水平距离为3cm，垂直距离为4cm，相邻排间的垂直距离为6cm，选定孔位后用钻头钻盲孔，孔径为15mm，盲孔方向与树体成45°角，斜向下方，深度为5cm；
S3.结香：沿孔壁缓慢倒入孔内，结香剂的使用量为15mL/孔，然后在孔口处涂抹护理液，每隔2个月使用一次结香剂；
所述结香剂，包括以下成分：0.2g反式肉桂酸、0.04g萘乙酸、0.6g花青素、3g芦荟苷、0.11g根瘤菌菌粉、0.29g胶质芽孢杆菌菌粉、0.34g淡紫拟青霉菌菌粉、0.26g刺盘孢菌菌粉、1g氨基酸、0.0001g硫酸铜、0.0083g碳酸锰、0.0005钼酸钠和0.0011g硫酸锌和15g水；
所述菌粉中菌的数量为1×108cfu/g；
所述护理液，包括以下成分：0.6g茉莉酸甲酯、5g碳酸钙、0.2g硫酸铜、0.02g羟甲基纤维素和25g水。
实施例4
S1.沉香树的选择：选择树龄3年以上、胸径在10cm以上的白木香；
S2.钻孔：在沉香树胸径部位以上，孔位呈阶梯状排列，每一孔位与后一个孔位的水平距离为3cm，垂直距离为4cm，相邻排间的垂直距离为5cm，选定孔位后用钻头钻盲孔，孔径为10mm，盲孔方向与树体成45°角，从下往上数，奇数排的盲孔方向为斜向上方，深度为4cm，偶数排的盲孔方向为斜向下方，偶数排的盲孔与下方奇数排的盲孔连通；
S3.结香：封住奇数排盲孔，从偶数排将结香剂导入孔内，结香剂的使用量为18mL/孔，然后在孔口处涂抹护理液，每隔3个月使用一次结香剂；
所述结香剂，包括以下成分：0.2g反式肉桂酸、0.04g萘乙酸、0.70g花青素、4g芦荟苷、0.5g枯草芽孢杆菌菌粉、0.65g青霉菌菌粉、0.4g刺盘孢菌菌粉、0.5～2g氨基酸、0.0023g硫酸铜、0.0385g碳酸锰、0.0015g钼酸钠和0.0077g硫酸锌和20g水；
所述菌粉中菌的数量为1×107cfu/g；
所述护理液，包括以下成分：0.7g茉莉酸甲酯、5g碳酸钙、0.3g硫酸铜、0.02g羟甲基纤维素和30g水。
实施例5
S1.沉香树的选择：选择树龄3年以上、胸径在10cm以上的白木香；
S2.钻孔：在沉香树胸径部位以上，孔位呈阶梯状排列，每一孔位与后一个孔位的水平距离为3cm，垂直距离为4cm，相邻排间的垂直距离为7cm，选定孔位后用钻头钻盲孔，孔径为10mm，盲孔方向与树体成45°角，从下往上数，奇数排的盲孔方向为斜向上方，深度为4cm，偶数排的盲孔方向为斜向下方，深度为4cm；
S3.结香：封住奇数排盲孔，从偶数排将结香剂导入孔内，结香剂的使用量为18mL/孔，然后在孔口处涂抹护理液，每隔3个月使用一次结香剂；
所述结香剂，包括以下成分：0.2g反式肉桂酸、0.04g萘乙酸、0.70g花青素、4g芦荟苷、0.2g根瘤菌菌粉、0.5g胶质芽孢杆菌菌粉、0.65g淡紫拟青霉菌菌粉、0.4g刺盘孢菌菌粉、0.5～2g氨基酸、0.0023g硫酸铜、0.0385g碳酸锰、0.0015g钼酸钠和0.0077g硫酸锌和20g水；
所述菌粉中菌的数量为1×107cfu/g；
所述护理液，包括以下成分：0.7g茉莉酸甲酯、5g碳酸钙、0.3g硫酸铜、0.02g羟甲基纤维素和30g水。
实施例6
S1.沉香树的选择：选择树龄3年以上、胸径在10cm以上的白木香；
S2.钻孔：在沉香树胸径部位以上，孔位呈阶梯状排列，每一孔位与后一个孔位的水平距离为3cm，垂直距离为4cm，相邻排间的垂直距离为5cm，选定孔位后用钻头钻盲孔，孔径为10mm，盲孔方向与树体成45°角，从下往上数，奇数排的盲孔方向为斜向上方，深度为4cm，偶数排的盲孔方向为斜向下方，偶数排的盲孔与下方奇数排的盲孔连通；
S3.结香：封住奇数排盲孔，从偶数排将结香剂导入孔内，结香剂的使用量为18mL/孔，然后在孔口处涂抹护理液，每隔3个月使用一次结香剂；
所述结香剂，包括以下成分：0.2g反式肉桂酸、0.70g花青素、4g芦荟苷、0.2g根瘤菌菌粉、0.5g胶质芽孢杆菌菌粉、0.65g淡紫拟青霉菌菌粉、0.4g刺盘孢菌菌粉、0.5～2g氨基酸、0.0023g硫酸铜、0.0385g碳酸锰、0.0015g钼酸钠和0.0077g硫酸锌和20g水；
所述菌粉中菌的数量为1×107cfu/g；
所述护理液，包括以下成分：0.7g茉莉酸甲酯、5g碳酸钙、0.3g硫酸铜、0.02g羟甲基纤维素和30g水。
实施例7
S1.沉香树的选择：选择树龄3年以上、胸径在10cm以上的白木香；
S2.钻孔：在沉香树胸径部位以上，孔位呈阶梯状排列，每一孔位与后一个孔位的水平距离为3cm，垂直距离为4cm，相邻排间的垂直距离为5cm，选定孔位后用钻头钻盲孔，孔径为10mm，盲孔方向与树体成45°角，从下往上数，奇数排的盲孔方向为斜向上方，深度为4cm，偶数排的盲孔方向为斜向下方，偶数排的盲孔与下方奇数排的盲孔连通；
S3.结香：封住奇数排盲孔，从偶数排将结香剂导入孔内，结香剂的使用量为18mL/孔，然后在孔口处涂抹护理液，每隔3个月使用一次结香剂；
所述结香剂，包括以下成分：0.2g反式肉桂酸、0.04g萘乙酸、0.70g花青素、0.2g根瘤菌菌粉、0.5g胶质芽孢杆菌菌粉、0.65g淡紫拟青霉菌菌粉、0.4g刺盘孢菌菌粉、0.5～2g氨基酸、0.0023g硫酸铜、0.0385g碳酸锰、0.0015g钼酸钠和0.0077g硫酸锌和20g水；
所述菌粉中菌的数量为1×107cfu/g；
所述护理液，包括以下成分：0.7g茉莉酸甲酯、5g碳酸钙、0.3g硫酸铜、0.02g羟甲基纤维素和30g水。
试验例沉香品质测定
在注射结香剂后3、6个月采集孔中的沉香，测定其浸出物含量和沉香油含量，结果见表1，并测定沉香中2-(2-苯乙基)色酮类化合物总含量和沉香四醇含量，取位于海南屯昌的沉香基地所产的野生沉香作阳性对照，测定结果见表2；
浸出物含量的测定：参照《中国药典一部》(2020版)沉香项下【浸出物】；
沉香油含量的测定：参照《中国药典一部》(2020版)沉香项下【鉴别】第三项；
表1结香效果测定结果
Figure BDA0003382516810000091
由测定结果可知，本发明实施例1～3的结香方法，在结香3个月后沉香的浸出物含量已超过10％、沉香油含量高，其中实施例1的结香质量最佳，在3个月时浸出物含量便可超过17％。与对比例1对比，实施例4采用的菌种不同，结香3个月和6个月得到的沉香浸出物和沉香油含量均低。实施例5未将相邻排的盲孔连通，结香速度慢，浸出物和沉香油含量较低。实施例6～7未使用萘乙酸或芦荟苷，结香质量较差。
2-(2-苯乙基)色酮类化合物总含量测定方法：参照刘洋洋等人撰写的“紫外分光光度法测定沉香药材中2-(2-苯乙基)色酮类化合物总含量”的期刊文献进行；
具体包括以下步骤：
(1)精密称取6,7-二甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮，加甲醇溶解并稀释成质量浓度(mg/L)为1.5625、3.125、6.250、9.375、12.500、15.625的标准溶液；
(2)取沉香油用甲醇溶解并定容至10mL，即得供试品溶液；
(3)在230nm处测定吸光值，绘制标准曲线，根据标准曲线计算2-(2-苯乙基)色酮类化合物总含量。
沉香四醇含量的测定：参照《中国药典一部》(2020版)沉香项下【含量测定】；
表2沉香成分含量测定结果
Figure BDA0003382516810000101
由表2结果可以看出，本发明的结香方法在结香3个月后，沉香中的沉香四醇含量便高于0.10％，2-(2-苯乙基)色酮类化合物总含量与野生沉香比较接近。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种促进沉香树结香的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.沉香树的选择：选择树龄3年以上、胸径在10cm以上的沉香树；
S2.钻孔：在沉香树胸径部位以上，选定孔位，用钻头钻盲孔，盲孔方向与树体成斜角斜向上方和斜向下方；
S3.结香：将结香剂导入盲孔内，然后在孔口处涂抹护理液，每隔1~3个月，导入一次结香剂；
所述结香剂，按重量份计，包括以下成分：0.1~0.3份反式肉桂酸、0.04~0.05份萘乙酸、0.55~0.75份花青素、3~5份芦荟苷、1~2份复合菌粉、0.5~2份氨基酸、0.01~0.06份微量元素和15~30份水；所述复合菌粉为根瘤菌、胶质芽孢杆菌、淡紫拟青霉菌和刺盘孢菌的菌粉按（0.4~0.5）：1：（1.2~1.4）：（0.7~0.9）的数量比混合制得；所述复合菌粉中菌的数量为1×106~8cfu/g；
所述盲孔方向，从下往上数，奇数排的盲孔方向为斜向上方，偶数排的盲孔方向为斜向下方，偶数排的盲孔与下方奇数排的盲孔连通；斜角的角度为30~45°；
所述盲孔的孔径为10~15mm，斜向上方的深度为4~5cm，斜向下方的深度为与下方奇数排的盲孔连通；
当盲孔方向为奇数排斜向上方、偶数排斜向下方时，所述结香剂的导入方法为封住奇数排盲孔，从偶数排将结香剂导入盲孔内；所述结香剂的使用量为18~30mL/孔，使用频率为每隔3个月使用一次。
2.根据权利要求1所述的促进沉香树结香的方法，其特征在于，所述盲孔的孔位为呈阶梯状排列，每一孔位与后一个孔位的水平距离为2~3cm，垂直距离为3~4cm，相邻排间的垂直距离为4~7cm。
3.根据权利要求1所述的促进沉香树结香的方法，其特征在于，所述护理液，包括以下重量份的成分：0.6~0.8份茉莉酸甲酯、5~6份碳酸钙、0.2~0.3份硫酸铜、0.02~0.03份羟甲基纤维素和25~35份水。
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