CN105886401A

CN105886401A - 沉香复合型诱导剂及在白木香树内的结香方法

Info

Publication number: CN105886401A
Application number: CN201410467878.6A
Authority: CN
Inventors: 徐风
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2014-09-15
Filing date: 2014-09-15
Publication date: 2016-08-24

Abstract

本发明公开了一种沉香复合型诱导剂及在白木香树内的结香方法，其特征在于采用特殊的原地採菌办法培养得到复合菌种，然后再通过培养和扩繁制取复合菌沉香诱导剂；又可进一步利用微生物驯化的方法将生物结香与物理结香和化学结香有机的结合起来，协同作用，达到更好的效果。步骤包括1.制备特殊的微生物固体培养基和採菌器皿。2.将特殊的採菌器皿水平固定在结香的白木香树干上(0.8‑1.5)m高处。採菌24h封盖拿回，并恒温箱培养。3.恒温培养至菌丝长满培养基。4.接种到特制的液体培养基培养或培养并驯化。5.扩大培养并制取沉香复合型诱导剂。6.用输液法按照一定的操作要求将复合型诱导剂缓施于胸径不小于80mm的白木香树内，3‑6个月后香树体内就会有环装沉香香线形成，并随时间增长而增长且质量提高。该方法简便、实用、适应性强，适用于广大沉香树种植户人工结香。

Description

沉香复合型诱导剂及在白木香树内的结香方法

一种沉香复合型诱导剂及在白木香树内的结香方法，本发明属于沉香生产技术领域，其特征在于采用特殊的原地採菌办法培养得到复合菌种，然后再通过培养和扩繁制取复合菌沉香诱导剂；又可进一步利用微生物驯化的方法将生物结香与物理结香和化学结香有机的结合起来，协同作用，达到更好的效果。

技术背景

沉香是瑞香科植物Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg含树脂的木材，是我国、印度及其他东南亚国家的传统名贵中药，具有行气止痛、纳气平喘、温中止呕的功效。同时它受热会释放出具有浓郁而独特的香气，常被国内外用来制造高级香料等，随着沉香药用及保健品用量大幅增加和普及，沉香产品越来越凸显其巨大的市场潜能和经济价值。

在自然界的白木香树中，只有极少数的个体会自然产生沉香树脂，通常的观点是受到外伤(刀砍、虫咬、雷击、火烧)之后白木香树自身的愈伤保护机制分泌出特殊的树脂来保护自己，这种分泌出特殊的树脂即为沉香，但这需要十几年、几十年乃至上百年的时间积累，这种天然沉香的偶然性及长周期性已远不能满足市场的需求，人们便开始使用各种人工促香的方法使白木香树结香，并不断对沉香形成机制进行研究探索，现有人工结香的方法有打钉法、凿洞法、物理及化学刺激法、接菌法，用特制的採菌器皿悬固在白木香树干上原地採菌，并将菌种与物化激素有机结合的复合型诱导剂未见报导。

发明内容

一种沉香复合型诱导剂及在白木香树内的结香方法，其特征在于采用特殊的原地採菌办法得到复合菌种制取复合菌沉香诱导剂；又可进一步利用微生物驯化的方法将生物结香与物理结香和化学结香有机的结合起来，协同作用，达到更好的效果。具体包括1、制备特殊的微生物固体培养基和採菌器皿，特殊的微生物固体培养基的制备方法是：取白木香树干粉过40目筛100g、马铃薯去皮切块200g、1500g水于不锈钢锅内煮沸30min，用30目筛(这样可有一部分白木香树干粉通过)过滤取滤下物1000ml，加入20g葡萄糖、20g琼脂溶化后趁热搅拌倒入微生物培养皿中1/2高，培养皿要求有盖(10mm大小为好)且方便固定在树干上，然后将微生物培养皿同盖灭菌后即为特制的採菌器皿。2、将特殊的採菌器皿水平固定在要结香的白木香树干上(0.8-1.8)m高处，可用铁丝、胶带辅助按常规的办法固定即可，然后採菌24h封盖拿回恒温箱。3、恒温培养箱26-28度培养3-4d至菌丝张满后接种。4、将3中的菌丝接种到特制的液体培养基三角瓶内摇床震荡培养(温度26-28度、120-150r/min)，4-5d后扩大培养既得沉香纯生物复合诱导剂A；如果4-5d后再加入植物激素或有机盐进行驯化培养2-3d后扩大培养就得到沉香复合型诱导剂B。液体培养基的制备：A、白木香树干粉过40目筛20％、葡萄糖10％、七水硫酸镁0.3％、磷酸二氢钾0.3ppm、碳酸铵0.5ppm，125度灭菌25min即可；B、在A的基础上加入0.2ppm植物激素(吲哚乙酸、三十烷醇、等)、8ppm的无机盐(硫酸亚铁、氯化钾、氯化钠、等)，可分别加一类或两类一起加。5、扩大培养并制取沉香复合型诱导剂：将4、中的A、B两种培养菌剂分别接种到A、B两种液体扩大培养基中进行扩大培养，扩大培养的条件是：接种比5％-15％，温度26-30度，充气有氧黑暗培养3-5d，过滤就得到A、B两种沉香复合型诱导剂。6、用输液法按照一定的操作要求将复合型诱导剂缓施于(胸径一般不小于80mm的)白木香树内，具体操作要求是：选胸径不小于80mm的白木香树，在距地面0.5-1.0m的高度阳面钻直径4-5mm的两个孔，孔距3-5cm成八字向下倾斜30-45度角，孔深6-8cm穿过白木香树的初生木质部而不伤到原生木质部，在干燥无雨的天气内缓慢滴加沉香复合型诱导剂600-1000ml。3-6个月后香树体内就会有环装沉香香线形成并随时间增长而增长且质量提高。

实施实例一：1、制备特殊的微生物固体培养基和採菌器皿，特殊的微生物固体培养基的制方法是：取白木香树干粉过40目筛100g、马铃薯去皮切块200g、1500g水于不锈钢锅内煮沸30min，用30目筛(这样可有一部分白木香树干粉通过)过滤取滤下物1000ml，加入20g葡萄糖、20g琼脂溶化后趁热搅拌倒入微生物培养皿中1/2高，培养皿要求有盖(10mm大小为好)且方便固定在树干上，然后将微生物培养皿同盖灭菌后即为特制的採菌器皿。2、将特殊的採菌器皿水平固定在要结香的白木香树干上(0.8-1.8)m高处，可用铁丝、胶带辅助按常规的办法固定即可，然后採菌24h封盖拿回恒温箱。3、恒温培养箱26-28度培养3-4d至菌丝张满后接种。4、将3中的菌丝接种到特制的液体培养基三角瓶内摇床震荡培养(温度26-28度、120-150r/min)，4-5d后扩大培养既得沉香纯生物复合诱导剂A。A型液体培养基的制备：白木香树干粉过40目筛20％、葡萄糖10％、七水硫酸镁0.3％、磷酸二氢钾0.3ppm、碳酸铵0.5ppm，125度灭菌25min即可。5、扩大培养并制取沉香复合型诱导剂：将4、中的培养菌剂接种到A型液体扩大培养基中进行扩大培养，扩大培养的条件是：接种比5％-15％，温度26-30度，充气有氧黑暗培养3-5d，过滤就得到A型沉香复合型诱导剂。6、用输液法按照一定的操作要求将复合型诱导剂缓施于(胸径一般不小于80mm的)白木香树内，具体操作要求是：选胸径不小于80mm的白木香树，在距地面0.5-1.0m的高度阳面钻直径4-5mm的两个孔，孔距3-5cm成八字向下倾斜30-45度角，孔深6-8cm穿过白木香树的初生木质部而不伤到原生木质部，在干燥无雨的天气内缓慢滴加沉香复合型诱导剂600-1000ml。3-6个月后香树体内就会有环装沉香香线形成并随时间增长而增长且质量提高。

实施实例二：1、制备特殊的微生物固体培养基和採菌器皿，特殊的微生物固体培养基的制方法是：取白木香树干粉过40目筛100g、马铃薯去皮切块200g、1500g水于不锈钢锅内煮沸30min，用30目筛(这样可有一部分白木香树干粉通过)过滤取滤下物1000ml，加入20g葡萄糖、20g琼脂溶化后趁热搅拌倒入微生物培养皿中1/2高，培养皿要求有盖(10mm大小为好)且方便固定在树干上，然后将微生物培养皿同盖灭菌后即为特制的採菌器皿。2、将特殊的採菌器皿水平固定在要结香的白木香树干上(0.8-1.8)m高处，可用铁丝、胶带辅助按常规的办法固定即可，然后採菌24h封盖拿回恒温箱。3、恒温培养箱26-28度培养3-4d至菌丝张满后接种。4、将3中的菌丝接种到特制的液体培养基三角瓶内摇床震荡培养(温度26-28度、120-150r/min)，液体培养基的制备：白木香树干粉过40目筛20％、葡萄糖10％、七水硫酸镁0.3％、磷酸二氢钾0.3ppm、碳酸铵0.5ppm，125度灭菌25min即可，震荡培养4-5d后再加入0.2ppm植物激素(吲哚乙酸、三十烷醇、等)或8ppm的无机盐(硫酸亚铁、氯化钾、氯化钠、等)进行驯化培养2-3d后，再扩大培养就得到沉香复合型诱导剂B，植物激素或有机盐可分别加一类，或两类一起先后加入。5、扩大培养并制取沉香复合型诱导剂：将4中的B型培养菌剂分别接种到B型液体扩大培养基中进行扩大培养，扩大培养的条件是：接种比5％-15％，温度26-30度，充气有氧黑暗培养3-5d，过滤就得到B型沉香复合型诱导剂。B型液体扩大培养基的制备：白木香树干粉过40目筛20％、葡萄糖10％、七水硫酸镁0.3％、磷酸二氢钾0.3ppm、碳酸铵0.5ppm，0.2ppm植物激素(吲哚乙酸、三十烷醇、等)或8ppm的无机盐(硫酸亚铁、氯化钾、氯化钠、等)，植物激素或有机盐可分别加一类，或两类一起先后加入，125度灭菌25min即可，6、用输液法按照一定的操作要求将复合型诱导剂缓施于(胸径一般不小于80mm的)白木香树内，具体操作要求是：选胸径不小于80mm的白木香树，在距地面0.5-1.0m的高度阳面钻直径4-5mm的两个孔，孔距3-5cm成八字向下倾斜30-45度角，孔深6-8cm穿过白木香树的初生木质部而不伤到原生木质部，在干燥无雨的天气内缓慢滴加沉香复合型诱导剂600-1000ml。3-6个月后香树体内就会有环装沉香香线形成并随时间增长而增长且质量提高。

Claims

1.制备特殊的微生物固体培养基和採菌器血，特殊的微生物固体培养基的制备方法是：取白木香树干粉过40目筛100g、马铃薯去皮切块200g、1500g水于不锈钢锅内煮沸30min，用30目筛(这样可有一部分白木香树干粉通过)过滤取滤下物1000ml，加入20g葡萄糖、20g琼脂溶化后趁热搅拌倒入微生物培养器皿中，然后灭菌封盖。

2.将特殊的採菌器皿水平固定在要结香的白木香树树干上(0.8-1.8)m高处，可用铁丝、胶带辅助按常规的的办法固定既可，然后採菌24h封盖拿回恒温箱。

3.恒温培养箱26-28度培养3-4d至菌丝长满后接种。

4.将3中的菌丝接种到特制的液体培养基三角瓶内摇床振荡培养(温度26-28度，120-150r/min)4-5d后扩大培养既得沉香纯生物复合诱导剂A；如果4-5d后再加入植物激素或有机盐进行驯化培养，2-3d后扩大培养就得到沉香复合型诱导剂B。

5.液体培养基的制备：

A、白木香树干粉过40目筛20％、葡萄糖10％、七水硫酸镁0.3％、磷酸二氢钾0.3ppm、碳酸铵0.5ppm，125度灭菌25min既可；

B、在A的基础上加入0.2ppm植物激素(吲哚乙酸、三十烷醇、等)、8ppm的无机盐(硫酸亚铁、氯化钾、氯化钠、等)，可分别加一类或两类一起加。

6.扩大培养并制取沉香复合型诱导剂：将4、中的A、B两种培养菌剂分别接种到A、B两种液体扩大培养基中进行扩大培养，扩大培养的条件是：接种比：5％-15％，温度26-30度，充气有氧黑暗培养3-5d，过滤就得到A、B两种沉香复合型诱导剂。

7.用输液法按照一定的操作要求将复合型诱导剂缓施于(胸径一般不小于80mm的)白木香树内，具体操作要求是：选胸径不小于80mm的白木香树，在距地面0.5-1.0m的高度阳面钻直径4-5mm的两个孔，孔距3-5cm成八字向下倾斜30-45度角，孔深6-8cm穿过白木香树的初生木质部而不伤到原生木质部，在干燥无雨的天气内缓慢滴加沉香复合型诱导剂600-1000ml。