CN104621186B

CN104621186B - 一种组合物、由其制备诱导液的方法、该诱导液在刺激降香结香上的应用

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Publication number: CN104621186B
Application number: CN201510074009.1A
Authority: CN
Inventors: 林励; 蔡丹燕; 吴泽青; 帅欧
Original assignee: Individual
Current assignee: Lin Xiang
Priority date: 2015-02-10
Filing date: 2015-02-10
Publication date: 2017-11-21
Anticipated expiration: 2035-02-10
Also published as: CN104621186A

Abstract

一种组合物，按重量百分比，包括降香树皮渗出物提取液0.2～10％；植物生长素0.1～10％；促渗剂0.01～0.1％；余量为水；pH2～3。由上述组合物制备诱导液的方法，步骤A，降香树皮渗出物组分的配置。采集5年生以上降香树干表皮的红褐色渗出物，粉碎后加体积分数为1～2％乙醇水溶液，浸提24h，滤过，配制成质量浓度为1～10％的降香树皮渗出物提取液；步骤B，按重量比，依次加入步骤A得到的降香树皮渗出物提取液0.2～10％、植物生长素用量0.1～10％、促渗剂0.01～0.1％、其余量为水。利用上述诱导液刺激降香结香的方法，含以下步骤：在降香离地1～180cm高的树干上钻孔，通过输液法导入，封住孔洞。处理6～12个月后，采收树干中形成红棕色变色木质部，即为降香结香的心材。

Description

一种组合物、由其制备诱导液的方法、该诱导液在刺激降香结香上的应用

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种组合物、由其制备诱导液的方法、该诱导液在刺激降香整体结香上的应用。

背景技术

豆科黄檀属植物降香Dalbergia odorifera T.Chen(中国植物志)，中国药典亦称降香檀，别名降香黄檀、海南黄花梨、花梨母等，主要分布于我国海南省，广东各地也有批量引种。降香是我国国家标准5属8类34种最珍贵红木的品种之一，其茎干和根部干燥心材为名贵中药材降香，降香性辛、温，具有化瘀止血，理气止痛之功效，主用于胸肋疼痛、跌损瘀痛、呕吐腹痛、出血等病症，在藏医学和传统医学中使用已有上千年的历史，现为《中华人民共和国药典》收载的唯一降香基源。

经过早年的掠夺性地采伐，上世纪末国内野生降香资源已面临濒危，降香精选料市场售价6800-17600元/kg，仅能用于高档家具及珍贵工艺品市场，只有边脚料可能作为药材使用，但尚存在与佛珠等小件工艺品的竞争。降香呈供不应求趋势；故医药企业采购降香资源的困难越来越大。

近十年来，广东省不少地区已开始对降香进行产业化引种。到2011年底，广东省种植降香林已近2000hm²，近年种植面积乃呈显著增加趋势，已对我国降香资源的迁地保护产生了积极的影响。然而，迄今为止，尚未见降香刺激结香等关键生产技术突破的报道。

降香药用部位为心材(即结香)，降香生长周期较长，一般需十年左右才能初步结香，30年以上才能成材。因此，进行人工刺激结香研究，将降香结香点提前4-6年，成材时间提前至8年以内，可显著缩短降香的成材年限，从而显著缓解我国降香药用资源紧缺的局面。

现有的一些发明专利针对降香刺激结香，主要应用膜包裹法(中国专利200910192294.1)、打孔法(中国专利201410104192.0)、菌液法(中国专利201410104193.5)。此类方法结香产量较低，结香部位都仅为处理点局部，不能使整段树干整体结香，因此对于解决目前降香资源紧缺状况仍没有取得突破性的进展。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种诱导液组合物及利用该组合物刺激降香树结香的方法，该方法可将降香结香点提前4～6年并达到整体结香效果，使降香成材时间提前至8年以内，极大地提高了降香结香的产量和质量，显著缩短了降香的成材年限，突破性地解决了降香刺激结香核心技术难点。

为实现上述目的，本发明采用如下的技术方案：

一种组合物，各组分由下列按重量百分比的原料组成：

降香树皮渗出物提取液0.2～10％，

植物生长素0.1～10％，

促渗剂0.01～0.1％，

余量为水，

pH2～3；

其中，

所说植物生长素选自赤霉素、脱落酸、乙烯利、萘乙酸钠中的一种或多种；所说降香树皮渗出物选用5年生以上降香树干表皮的红褐色渗出物；所说促渗剂选用薄荷油。

优选的，促渗剂选用从薄荷油中制取的薄荷醇。

优选的，所说植物生长素选用赤霉素。

优选的，所说的水为去离子水。

由上述组合物制备诱导液的方法，包括如下步骤：

步骤A，降香树皮渗出物组分的配置，采集5年生以上降香树干表皮的红褐色渗出物，粉碎后加体积分数为1～2％乙醇水溶液，浸提24h，滤过，配制成质量浓度为1～10％的降香树皮渗出物提取液；

步骤B，按重量比，依次加入由步骤A得到的降香树皮渗出物提取液0.2～10％、植物生长素用量0.1～10％、促渗剂0.01～0.1％、其余量为水，调节pH至2～3。

优选的，针对步骤A，滤过采用滤纸滤过。

利用上述诱导液刺激降香结香的应用，包括以下步骤：

步骤A：在降香树离地1～180cm高树干上钻孔，孔径为2～8mm，深2～6cm，通过高压注射法或滴注输液法将诱导液输入树体中，待诱导液流尽后封住孔洞；

步骤B：处理6～12个月后，获得树干中形成红棕色变色木质部(心材)，即为降香。

针对上述诱导液刺激降香结香的应用，优选的，选取4～5年未形成心材的降香树，在离地面1～180cm高度范围内用直径为3mm的钻头在树干上左右各钻2个倾斜45°的孔，孔深至木质部，两孔上下距离10cm，用装有30～120ml诱导液的输液装置进行输液诱导，或用装有30～120ml诱导液的高压注射器分别在两钻孔处进行诱导液注射，滴注输液法用30～60min将诱导液滴尽，取下输液装置，封住孔洞即可；高压注射法在1～10min内注射完，取出注射器，封住孔洞即可，6～12个月内砍倒降香树，获取紫红色心材部分，得到降香。

本发明采用诱导液通过输液法或滴注输液法对降香进行整体滴注刺激，输导作用使树干心材部分受到诱导液刺激而结香。

其中使用降香树皮渗出物提取液和促渗剂，且促渗剂能促进降香树皮渗出物、植物生长素等诱导物质进入降香植株体内是本发明的亮点。薄荷油含20多种萜烯类化合物，薄荷醇是其中之一，薄荷油和薄荷醇均为天然促渗剂，有显著促进其他成分渗透的作用，故可显著促进本发明所用降香树皮渗出物提取液、植物生长素等诱导物质进入降香植株体内。本发明应用薄荷醇或薄荷油进行实验，发现诱导液渗透吸收速度及扩散面积显著增加，促进了植株组织的吸收。因此，该方法可将降香缩短至6～12个月并达到整体结香效果，极大地提高了降香结香的产量和质量，显著缩短了降香的成材年限，突破性地解决了降香刺激结香核心技术难点。

该刺激降香结香(诱导产生降香)技术的原理是：在促渗剂作用下降香树皮渗出物提取液、植物生长素充分渗入降香树体内，通过树本身的疏导组织，使诱导液从树的基部延伸至树梢，并诱导启动降香树体内的结香机制；在促渗剂的作用下，诱导液吸收速度及扩散面积增大，经过积累，最终在降香树干内形成降香心材，从而达到诱导降香树通体结香的目的。经诱导作用6～12个月后，降香树干中心形成红棕色变色木质部，即为降香心材。

用刀、锯等工具获取刺激一年后的5～8年生降香树干紫红色心材，一般可获得降香心材6～15kg。而未经本方法刺激的同龄者一般无心材形成，即一般连0.1kg的降香心材也得不到。

取部分紫红色心材，晒干、粉碎粉末后用适量高纯蒸馏水浸泡，参照2010年版《中华人民共和国药典》挥发油测定法(附录XD甲法)测定其挥发油的含量，用挥发油提取器按水蒸气蒸馏法蒸馏6小时，读数，得挥发油含量；一般经本法刺激所获的降香心材挥发油含量可达到2.00％左右，显著高于2010年版《中华人民共和国药典》降香项下挥发油含量限量(≥1.00％)。经无水硫酸钠脱水后的挥发油为淡黄色透明油状物，具有特殊的清香味，该挥发油通过气相色谱-质谱(GC-MS)对化学成分进行鉴定，用归一化法确定相对百分含量，挥发油组分与对照药材相同，其主成分均为橙花叔醇(Nerolidol)。

相比于现有技术，本发明的有益效果在于：

1.使用降香树皮渗出物提取液和促渗剂，且促渗剂能促进降香树皮渗出物、植物生长素等诱导物质进入降香植株体内，观察发现使用促渗剂后诱导液渗透吸收速度及扩散面积增加2～4倍，结香产量增加显著。

2.本发明所述诱导液在刺激降香结香上的应用方法，可将降香结香点提前4～6年并达到整体结香效果，使降香成材时间提前至8年以内，极大地提高了降香结香的产量和质量，显著缩短了降香的成材年限，突破性地解决了降香刺激结香核心技术难点。

附图说明

图1为本发明实施例1中6个月结香心材GC-MS分析图；

图2为本发明实施例1中12个月结香心材GC-MS分析图；

图3为本发明实施例2中6个月结香心材GC-MS分析图；

图4为本发明实施例2中12个月结香心材GC-MS分析图；

图5为本发明实施例3中6个月结香心材GC-MS分析图；

图6为本发明实施例3中12个月结香心材GC-MS分析图；

图7为诱导6个月降香的结香样品图；

图8为诱导12个月降香的结香样品图。

具体实施方式

下面，结合附图1-8以及具体实施方式，对本发明做进一步描述。

实施例一

组合物配方：降香树皮渗出物提取液用量为0.2％，植物生长素用量为0.1％，促渗剂为0.01％，水为99.69％。植物生长素选用赤霉素、脱落酸、乙烯利中的一种；促渗剂为薄荷醇。薄荷醇采用市售产品即可。

由上述组合物制备诱导液，步骤A：选取已结香降香，钻取其结香心材，粉碎后加体积分数为1～2％乙醇水溶液，浸提24h，滤过，配制成质量浓度为1～10％的降香树皮渗出物提取液；步骤B：按重量比，依次加入步骤A得到的降香树皮渗出物提取液0.2％、植物生长素用量0.1％、促渗剂0.01％、水99.69％；调节pH为2。

上述诱导液在刺激降香结香上的应用：

选取4～5年未形成心材的降香树30株，在离地面1～180cm高度范围内用直径为3mm的钻头在树干上左右各钻2个倾斜45°的孔，孔深至木质部，两孔上下距离10cm，用装有30～120ml诱导液的输液装置进行输液诱导，或用装有30～120ml诱导液的高压注射器别在两钻孔处进行诱导液注射，滴注输液法用30～60min将诱导液滴尽，取下输液装置，封住孔洞即可；高压注射法在1～10min内注射完，取出注射器，封住孔洞即可。6、12个月后砍倒降香树，割取紫红色部分心材，阴干，并称重。得平均产量分别为3128g、6751g，实验数据如下表1中A1-A30所示。

实施例二

组合物配方：降香树皮渗出物提取液用量为4％，植物生长素用量为3.5％，促渗剂为0.05％，水为92.45％。植物生长素选用赤霉素、脱落酸、萘乙酸钠中的一种；促渗剂为薄荷醇。

由上述组合物制备诱导液，步骤A：选取已结香降香，钻取其结香心材，粉碎后加体积分数为1～2％乙醇水溶液，浸提24h，滤过，配制成质量浓度为1～10％的降香树皮渗出物提取液；步骤B：按重量比，依次加入步骤A得到的降香树皮渗出物提取液4％、植物生长素用量3.5％、促渗剂0.05％、水92.45％；调节pH为2.5。

上述诱导液在刺激降香结香上的应用：

选取4～5年未形成心材的降香树30株，在离地面1～180cm高度范围内用直径为3mm的钻头在树干上左右各钻2个倾斜45°的孔，孔深至木质部，两孔上下距离10cm，用装有30～120ml诱导液的输液装置进行输液诱导，或用装有30～120ml诱导液的高压注射器别在两钻孔处进行诱导液注射，滴注输液法用30min～60min将诱导液滴尽，取下输液装置，封住孔洞即可；高压注射法在1～10min内注射完，取出注射器，封住孔洞即可。6、12个月后砍倒降香树，割取紫红色部分心材，阴干，并称重。得平均产量分别为3689g、8657g，实验数据如表1中B1-B30所示。

实施例三

组合物配方：降香树皮渗出物提取液用量为10％，植物生长素用量为10％，促渗剂为0.1％，水为79.9％。植物生长素选用脱落酸、萘乙酸钠中的一种；促渗剂为薄荷油。薄荷油采用市售产品即可。

由上述组合物制备诱导液，步骤A：选取已结香降香，钻取其结香心材，粉碎后加体积分数为1～2％乙醇水溶液，浸提24h，滤过，配制成质量浓度为1～10％的降香树皮渗出物提取液；步骤B：按重量比，依次加入步骤A得到的降香树皮渗出物提取液10％、植物生长素用量10％、促渗剂0.1％、水79.9％；调节pH为3。

上述诱导液在刺激降香结香上的应用：

选取4～5年未形成心材的降香树30株，在离地面1cm～180cm高度范围内用直径为3mm的钻头在树干上左右各钻2个倾斜45°的孔，孔深至木质部，两孔上下距离10cm，用装有30～120ml诱导液的输液装置进行输液诱导，或用装有30～120ml诱导液的高压注射器别在两钻孔处进行诱导液注射，滴注输液法用30～60min将诱导液滴尽，取下输液装置，封住孔洞即可；高压注射法在1～10min内注射完，取出注射器，封住孔洞即可。6、12个月后砍倒降香树，割取紫红色部分心材，阴干，并称重。得平均产量分别为4215g、9421g。实验数据如表1中C1-C30所示。

表1(如下)：降香实验产量分析表

检验

降香结香产物中挥发油含量的测定

分别精确称取实施例一、二、三中的产物50g，参照2010年《中华人民共和国药典》挥发油测定法(附录XD甲法)测定其挥发油的含量，粉碎后用适量高纯蒸馏水浸泡1h,用挥发油提取器按常规水蒸气回流法100℃蒸煮6h直至挥发油不再增加,经无水硫酸钠干燥后得挥发油。挥发油为无色透明油状物,具有特殊的清香味。结果见表2。

表2(如下)：挥发油含量指标

根据2010年《中华人民共和国药典》规定的本品含挥发油不得少于1.0％(mL/g)的标准，本发明的实施例全部达标。

挥发油中橙花叔醇的含量

分别取实施例一、二、三中的挥发油少许，利用气相色谱-质谱(GC-MS)对化学成分进行鉴定，用归一化法确定相对百分含量。气相色谱-质谱分析条件：色谱柱:石英毛细管柱HP-5MS(30mm×0.25mm×0.25mm),色谱柱程序升温条件:升温程序：柱温60℃，保持2min，以15℃/min升至120℃保持2min，然后以2℃/min升至160℃保持2min，再以10℃/min升至200℃保持2min，然后以2℃/min升至240℃保持2min，再以1℃/min升至250℃保持2min，最后以15℃/min升至280℃保持3min。载气He，流速1ml/min；分流比1:30；进样口温度:250℃；离子源温度:230℃；电离电压:70eV；扫描质量范围:50～400AMU；扫描方式：EI源。按上述GC-MS条件对挥发油进行成分分析，以面积归一化法测量橙花叔醇的相对百分含量，结果见表3及说明书附图1-6。

表3(如下)：挥发油中成分分析

由图1-6的数据可以看出，6个月后采集的样品可分离约20种成分，12个月后采集的样品可分离约25种成分，以面积归一化法测得挥发油的主要成分之橙花叔醇的相对百分含量达到较高值，说明采用本发明制得的紫红色心材物质确实为降香，符合国家药典规定的降香的药材标准。

图7为诱导6个月降香的结香样品图；图8为诱导12个月降香的结香样品图。从中我们可以明显的发现结香现象，降香树干中心形成红棕色变色木质部，即为降香心材。

相比于现有技术，本发明的有益效果在于：

1.使用降香树皮渗出物提取液和促渗剂，且促渗剂能促进降香树皮渗出物提取液、植物生长素等诱导物质进入降香植株体内，发现使用促渗剂后诱导液渗透吸收速度及扩散面积增加2～4倍，结香产量增加显著。

2.本发明所述诱导液在刺激降香结香上的应用方法，可将降香结香点提前4～6年并达到整体结香效果，使降香成材时间提前至8年以内，极大地提高了降香结香的产量和质量，显著缩短了降香的成材年限，突破性地解决了刺激降香结香的核心技术难点。

实施例1-3仅为本发明的较佳实施方式，本发明并不局限于上述实施方式，在实施过程中可能存在局部微小的结构改动，如果对本发明的各种改动或变型不脱离本发明的精神和范围，且属于本发明的权利要求和等同技术范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型。

Claims

1.一种组合物，其特征在于，各组分由下列按重量百分比的原料组成：

降香树皮渗出物提取液0.2～10％，

植物生长素 0.1～10％，

促渗剂 0.01～0.1％，

余量为水，

pH2～3；

其中，

所说植物生长素选自赤霉素、脱落酸、乙烯利、萘乙酸钠中的一种或多种，

所说促渗剂选用薄荷油。

2.根据权利要求1所述的一种组合物，其特征在于，

所说降香树皮渗出物选用5年生以上降香树干表皮的红褐色渗出物；所说促渗剂选用从薄荷油中制取的薄荷醇。

3.根据权利要求1所述的一种组合物，其特征在于，

降香树皮渗出物提取液用量为4％，植物生长素用量为3.5％，促渗剂为0.05％，水为92.45％；pH2～3；植物生长素选用赤霉素、脱落酸、萘乙酸钠中的一种；促渗剂为薄荷醇。

4.根据权利要求1所述的一种组合物，其特征在于，

降香树皮渗出物提取液用量为10％，植物生长素用量为10％，促渗剂为0.1％，水为79.9％；pH2～3；植物生长素选用脱落酸、萘乙酸钠中的一种；促渗剂为薄荷油。

5.根据权利要求1-4任一项所述的一种组合物，其特征在于，所说的水为去离子水。

6.根据权利要求1-4任一项所述组合物制备诱导液的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤B，按重量比，依次加入步骤A得到的降香树皮渗出物提取液0.2～10％、植物生长素用量0.1～10％、促渗剂0.01～0.1％、其余量为水；调pH至2～3。

7.根据权利要求6制成的诱导液在刺激降香结香上的应用，其特征在于，包括以下步骤：

步骤A：在降香离地1～180cm高的树干上钻孔，孔径为2～8mm，深2～6cm，通过高压注射法或滴注输液法将诱导液输入树体中，待诱导液流尽后封住孔洞；

步骤B：处理6～12个月后，获得树干中形成红棕色变色木质部，即为降香心材。

8.根据权利要求7所述诱导液在刺激降香结香上的应用，其特征在于，

选取4～5年未形成心材的降香树，在离地面1～180cm高度范围内用直径为3mm的钻头在树干上左右各钻2个倾斜45°的孔，孔深至木质部，两孔上下距离10cm，用装有30～120ml诱导液的输液装置进行输液诱导，或用装有30～120ml诱导液的高压注射器分别在两钻孔处进行诱导液注射，滴注输液法用30～60min将诱导液滴尽，取下输液装置，封住孔洞即可；高压注射法在1～10min内注射完，取出注射器，封住孔洞即可，6～12个月内砍倒降香树，获取紫红色心材部分，得到降香。