CN103182298B - L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶的合成及其对丙氨酸对映体的分离应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于分析化学领域，涉及手性柱材料的合成，特别涉及L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶的合成及其对丙氨酸对映体的分离应用。本发明的具体技术方案是先制得活化硅胶，然后合成β-环糊精键合硅胶，再合成对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶，最后将所得产物用L-色氨酸衍生化制备而成。所合成的L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶为浅黄色固体粉末，不溶于水，也不溶于N,N’-二甲基甲酰胺等有机溶剂，难溶于酸性和碱性溶液。将所合成的L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶用作色谱填充材料，恒温常压下对含丙氨酸对映体的水溶液进行吸附分离，具有良好的手性分离效果。用该材料来分离丙氨酸对映体，操作简单，成本较低，吸附效果好，具有一定的实用价值。
Description
技术领域
本发明属于分析化学领域，涉及一种手性柱材料的合成，特别涉及一种L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶的合成及其对丙氨酸对映体的分离应用。
背景技术
物质与其镜像不能重叠的性质称为手性。手性是自然界的普遍特征，和生命活动相关的许多大分子如蛋白质、多糖、核酸等都具有手性，手性物质在医药、农药、食品、环境等诸多领域也显示出越来越重要的研究与应用价值。为了研究不同对映体结构与活性的关系，监控手性化合物的立体选择性合成过程，评价手性化合物的光学纯度等等，研究手性化合物的拆分方法变得尤为重要。
环糊精衍生物固定相，该类固定相在气相色谱手性分离研究中发展最快、应用最广。其独特的空腔结构和分子本身具有多个手性中心，使它具有良好的手性分离能力。采用不同的衍生化方法对环糊精分子中具有不同反应活性的羟基进行修饰，得到性质各异、选择性不同的手性固定相，可用于分离烷烃、烯烃、卤代烃、醇、醛、酮、胺、氰类、环氧化合物、羧酸、卤代酸、羟基酸、内酯和氨基酸等大量的手性化合物。在石油化工、医药、农药、食品、环境化学等领域的手性分离中发挥着重要的作用。
目前研究的主要成果为：
（1）Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2010, 51: 84-89, 合成了全甲基-6 - 单氨基-6-脱氧-β-环糊精的手性固定相，使用高效液相色谱分离香豆素衍生物的外消旋体并对手??性固定相进行了评价。
（2）应用化工, 2011, 40: 1011-1015，用β-环糊精(β-CD)键合硅胶合成了一种新型的β-环糊精/S iO2手性固定相,用红外对其进行了结构鉴定，将该手性固定相用于薄层色谱分离萘普生外消旋体,考察多种溶剂对萘普生外消旋体的展开效果。
（3）分析测试技术与仪器, 2011, 17（3）：155-159，研究了3,5-二甲基苯基异氰酸酯对羟丙基-β-环糊精固定相的手性识别影响，通过异氰酸丙基三乙氧基硅烷作偶联剂,将羟丙基-β-环糊精键合到3-氨丙基硅烷化硅胶上,再用3,5-二甲基苯基异氰酸酯对β-环糊精和硅胶其余羟基进行衍生化,制得一种新型的3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯全衍生化羟丙基-β-环糊精键合硅胶手性固定相；在反相色谱条件下, 对9种手性药物进行了拆分。
（4）Journal of Chromatography A, 2011, 1218: 5597-5601, 制备了单（6-N-烯丙基-6-脱氧）联苯氨甲酰衍生化的α，β，γ-环糊精键合到硅胶上这三种手性固定相，并用高效液相色谱法对黄酮化合物，β-肾上腺素能阻断剂，胺和非质子化的化合物及其对映体进行分离。
（5）Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2012, 70: 71-76, β-环糊精，羟丙基-β-环糊精和全甲基化-β-环糊精与二氧化硅键合得到3种新的环糊精键合硅胶固定相，并且所将合成的手性固定相用于1 4种结构不同的分析的对映异构体的分离。
β-环糊精键合硅胶及其衍生物在手性分离方面存在明显优势，而利用L-色氨酸修饰的β-环糊精键合硅胶并将其应用于丙氨酸及其他手性对映体的分离，尚未见公开报道。
发明内容
本发明的目的是对β-环糊精进行L-色氨酸修饰衍生，并将制备的L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶应用于丙氨酸（Ala）对映体的分离。
本发明是L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L-Trp-CD/SiO2）的合成并将其应用于丙氨酸对映体的分离。本发明的具体技术方案是先制得活化硅胶，然后合成β-环糊精键合硅胶（β-CD/SiO2），再合成对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶，最后将所得产物用L-色氨酸衍生化制备而成。
本发明所述的活化硅胶，是采用如下步骤制得：按盐酸溶液与硅胶的体积质量比为20mL/g，将浓HCl–H2O (1 : 3, v/v)与粒径为5~7μm的硅胶配制成混合物室温浸渍24h，然后在120 ℃下回流10h，抽滤并用双蒸馏水洗至中性，再用丙酮洗涤，于150 ℃下真空干燥10h，置于干燥器备用。
本发明所述的β-环糊精键合硅胶（β-CD/SiO2），制备步骤包括如下：
A、 按质量体积比为20g/mL的比例，将β-环糊精溶解在无水N,N’-二甲基甲酰胺（DMF）中配制成溶液，加入占β-环糊精质量6%的NaH为催化剂，室温下搅拌1h，过滤；
B、 在氮气氛围中向滤液滴加KH-560（γ-(2,3-环氧丙氧) 丙基三甲氧基硅烷），于85-90℃反应5h，所述KH-560的体积为滤液的1.96%；
C、 向反应体系中加入与β-环糊精等质量的活化硅胶，升温至110-115℃反应24h，待冷却至室温后，抽滤；
D、 将滤得的固体物依次用无水N,N’-二甲基甲酰胺、甲醇、双蒸馏水洗涤，最后再次用甲醇洗涤，滤干后于120℃真空干燥3h，置于干燥器中备用。
本发明所述的对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶（TsCD/ SiO2），其制备包括如下步骤：
A、 按无水吡啶与对甲苯磺酰氯体积质量比为25mL/g配制成溶液，加入与对甲苯磺酰氯等质量的β-环糊精键合硅胶（β-CD/SiO2），室温下搅拌24h；
B、 将反应体系置于冰浴中继续反应18h，抽滤；
C、 将滤得的产物依次用无水吡啶、乙醚、甲醇、乙醚洗涤数次,于100 ℃下真空干燥24 h, 干燥备用。
本发明所述的L-色氨酸衍生化制备步骤包括：
A、 按L-色氨酸与对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶（TsCD/ SiO2）的混合质量与无水吡啶的固液比为25~33g/mL（优选25g/mL）的比例，称取干燥过的L-色氨酸和对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶（TsCD/ SiO2）于无水吡啶中，所述的L-色氨酸与对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶（TsCD/ SiO2）的质量比为0.5：1~1:1， 优选1:1；
B、 在氮气氛围中将溶液于70~80℃搅拌反应40~48h，温度优选80℃，反应时间优选48h，冷却至室温抽滤；
C、 将滤得的产物依次用无水吡啶、甲醇、乙醚、无水乙醇、甲醇、蒸馏水、丙酮洗涤, 抽滤后, 于120 ℃下真空干燥4 h。
将本发明所制备的L-色氨酸修饰的β-环糊精键合硅胶（L-Trp -CD/SiO2）作为色谱填料的应用，以丙氨酸的外消旋溶液作为流动相，在恒温常压下即可完成丙氨酸对映体的色谱分离。
本发明所制备的L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2），为浅黄色固体粉末，不溶于水，也不溶于N,N’-二甲基甲酰胺等有机溶剂，难溶于酸性和碱性溶液。
取等质量的L-丙氨酸（L-Ala）和D-丙氨酸（D-Ala），混合后溶解在水中，得到丙氨酸的外消旋溶液。在底部封端的玻璃管填入L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶(L-Trp -CD/SiO2)，加入一定体积的丙氨酸外消旋溶液，封口，将其放入恒温水槽中，直到吸附达平衡。吸附的温度可以在25~50℃之间，优选35℃。吸附结束后，离心分离，用UV-2450分光光度计，在190nm波长处测定清液的吸光度；用旋光仪测定清液的旋光度。
本发明中所用的β-环糊精，D-丙氨酸，L-丙氨酸，氢化钠（80％），L-色氨酸，购自国药集团化学试剂有限公司；球形硅胶（5-7μm）购自青岛海洋化工厂，其他化学品和试剂均为分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司。
有益效果
本发明公开了一种合成手性吸附剂L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L-Trp-CD/SiO2）的合成方法，为浅黄色固体粉末，不溶于水，也不溶于N,N’-二甲基甲酰胺等有机溶剂，难溶于酸性和碱性溶液。本发明将所合成的L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶用作色谱填充材料，恒温常压下对含有丙氨酸对映体的水溶液进行吸附分离，具有良好的手性分离效果。用该材料来分离丙氨酸对映体，操作简单，成本较低，吸附效果好，具有一定的实用价值。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行详细说明，以便本领域的技术人员更好地理解本发明，但本发明并不局限于以下实施例。
本发明的实施例中，活化硅胶的制备步骤如下:称取粒径为5~7μm的硅胶10g浸渍在200 mL浓HCl–H2O (1 : 3, v/v;)溶液中24 h，然后在120 ℃下回流10h,用双蒸馏水将硅胶洗至中性，再用丙酮洗涤；所得活化硅胶于150 ℃下真空干燥10h，置于干燥器中备用。
本发明的实施例中, β-环糊精键合硅胶（β-CD/SiO2）的制备步骤包括如下：称取经真空干燥过的β-环糊精5g加入100mL无水N,N’-二甲基甲酰胺（DMF）中，加入0.3gNaH为催化剂，在室温下搅拌反应1h，滤去未经反应的固体物质；在滤液中滴加KH-560（γ-(2,3-环氧丙氧) 丙基三甲氧基硅烷）2mL，在氮气氛围中于85-90℃反应5h，然后加入5g活化硅胶将反应温度提高到110-115℃继续反应24h，待反应液冷却至室温后，抽滤；产物依次用无水N,N’-二甲基甲酰胺（DMF）、甲醇、双蒸馏水洗涤，最后再次用甲醇洗涤，滤干后于120℃下真空干燥3h，置于干燥器中备用。
本发明的实施例中，对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶（TsCD/ SiO2）的制备步骤包括如下：称取2. 0 g 对甲苯磺酰氯溶于50 mL 无水吡啶中, 加入2. 0 gβ-环糊精键合硅胶（β-CD/SiO2）室温下搅拌反应24 h 后, 置于冰浴( 0～2 ℃) 中继续反应18 h, 抽滤；产物依次用吡啶、乙醚、甲醇、乙醚洗涤数次, 100 ℃下真空干燥24 h, 干燥备用。
实施例1
（1）L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2）的合成：称取干燥过的L-色氨酸0.5g和对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶（TsCD/ SiO2） 1g置于50mL无水吡啶中， 氮气氛围中于70℃搅拌反应40h；抽滤除去反应液, 产物依次用无水吡啶、甲醇、乙醚、无水乙醇、甲醇、蒸馏水、丙酮洗涤, 抽滤后,于120 ℃下真空干燥4 h，即得。
（2）丙氨酸对映体的分离：取等质量的L-丙氨酸（L-Ala）和D-丙氨酸（D-Ala），混合后溶解在水中，得到丙氨酸的外消旋溶液；在底部封端的玻璃管填入L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2），加入一定体积的丙氨酸外消旋溶液，封口，放入25℃恒温水槽中，直到吸附达平衡；吸附结束后，离心分离，用UV-2450分光光度计，在190nm波长处测定清液的吸光度，用旋光仪测定清液的旋光度。L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶对L-丙氨酸（L-Ala）的选择性系数在0.97~1.45之间。
实施例2
（1）L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2）的合成：称取干燥过的L-色氨酸1g和对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶（TsCD/ SiO2）1g置于50mL无水吡啶中， 氮气氛围中于70℃搅拌反应40h；抽滤除去反应液, 产物依次用无水吡啶、甲醇、乙醚、无水乙醇、甲醇、蒸馏水、丙酮洗涤, 抽滤后,于120 ℃下真空干燥4 h，即得。
（2）丙氨酸对映体的分离：取等质量的L-丙氨酸（L-Ala）和D-丙氨酸（D-Ala），混合后溶解在水中，得到丙氨酸的外消旋溶液；在底部封端的玻璃管填入L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2），加入一定体积的丙氨酸外消旋溶液，封口，放入30℃恒温水槽中，直到吸附达平衡；吸附结束后，离心分离，用UV-2450分光光度计，在190nm波长处测定清液的吸光度，用旋光仪测定清液的旋光度。L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶对L-丙氨酸（L-Ala）的选择性系数在1.17~1.52之间。
实施例3
（1）L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2）的合成：称取干燥过的L-色氨酸2.5g和对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶（TsCD/ SiO2）1g置于50mL无水吡啶中， 氮气氛围中于80℃搅拌反应40h；抽滤除去反应液, 产物依次用无水吡啶、甲醇、乙醚、无水乙醇、甲醇、蒸馏水、丙酮洗涤, 抽滤后,于120 ℃下真空干燥4 h，即得。
（2）丙氨酸对映体的分离：取等质量的L-丙氨酸（L-Ala）和D-丙氨酸（D-Ala），混合后溶解在水中，得到丙氨酸的外消旋溶液；在底部封端的玻璃管填入L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2），加入一定体积的丙氨酸外消旋溶液，封口，放入45℃恒温水槽中，直到吸附达平衡；吸附结束后，离心分离，用UV-2450分光光度计，在190nm波长处测定清液的吸光度，用旋光仪测定清液的旋光度。L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶对L-丙氨酸（L-Ala）的选择性系数在1.21~1.59之间。
实施例4
（1）L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2）的合成：称取干燥过的L-色氨酸1g和对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶（TsCD/ SiO2）1g置于50mL无水吡啶中， 氮气氛围中于70℃搅拌反应48h；抽滤除去反应液, 产物依次用无水吡啶、甲醇、乙醚、无水乙醇、甲醇、蒸馏水、丙酮洗涤, 抽滤后,于120 ℃下真空干燥4 h，即得。
（2）丙氨酸对映体的分离：取等质量的L-丙氨酸（L-Ala）和D-丙氨酸（D-Ala），混合后溶解在水中，得到丙氨酸的外消旋溶液；在底部封端的玻璃管填入L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2），加入一定体积的丙氨酸外消旋溶液，封口，放入30℃恒温水槽中，直到吸附达平衡；吸附结束后，离心分离，用UV-2450分光光度计，在190nm波长处测定清液的吸光度，用旋光仪测定清液的旋光度。L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶对L-丙氨酸（L-Ala）的选择性系数在1.39~1.80之间。
实施例5
（1）L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2）的合成：称取干燥过的L-色氨酸0.5g和对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶（TsCD/ SiO2）1g置于50mL无水吡啶中， 氮气氛围中于70℃搅拌反应48h；抽滤除去反应液, 产物依次用无水吡啶、甲醇、乙醚、无水乙醇、甲醇、蒸馏水、丙酮洗涤, 抽滤后,于120 ℃下真空干燥4 h，即得。
（2）丙氨酸对映体的分离：取等质量的L-丙氨酸（L-Ala）和D-丙氨酸（D-Ala），混合后溶解在水中，得到丙氨酸的外消旋溶液；在底部封端的玻璃管填入L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2），加入一定体积的丙氨酸外消旋溶液，封口，放入50℃恒温水槽中，直到吸附达平衡；吸附结束后，离心分离，用UV-2450分光光度计，在190nm波长处测定清液的吸光度，用旋光仪测定清液的旋光度。L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶对L-丙氨酸（L-Ala）的选择性系数在1.40~1.82之间。
实施例6
（1）L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2）的合成：称取干燥过的L-色氨酸1g和对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶（TsCD/ SiO2）1g置于50mL无水吡啶中， 氮气氛围中于80℃搅拌反应40h；抽滤除去反应液, 产物依次用无水吡啶、甲醇、乙醚、无水乙醇、甲醇、蒸馏水、丙酮洗涤, 抽滤后,于120 ℃下真空干燥4 h，即得。
（2）丙氨酸对映体的分离：取等质量的L-丙氨酸（L-Ala）和D-丙氨酸（D-Ala），混合后溶解在水中，得到丙氨酸的外消旋溶液；在底部封端的玻璃管填入L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2），加入一定体积的丙氨酸外消旋溶液，封口，放入45℃恒温水槽中，直到吸附达平衡；吸附结束后，离心分离，用UV-2450分光光度计，在190nm波长处测定清液的吸光度，用旋光仪测定清液的旋光度。L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶对L-丙氨酸（L-Ala）的选择性系数在1.47~1.95之间。
实施例7
（1）L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2）的合成：称取干燥过的L-色氨酸0.5g和对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶（TsCD/ SiO2）1g置于50mL无水吡啶中， 氮气氛围中于80℃搅拌反应48h；抽滤除去反应液, 产物依次用无水吡啶、甲醇、乙醚、无水乙醇、甲醇、蒸馏水、丙酮洗涤, 抽滤后,于120 ℃下真空干燥4 h，即得。
（2）丙氨酸对映体的分离：取等质量的L-丙氨酸（L-Ala）和D-丙氨酸（D-Ala），混合后溶解在水中，得到丙氨酸的外消旋溶液；在底部封端的玻璃管填入L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2），加入一定体积的丙氨酸外消旋溶液，封口，放入35℃恒温水槽中，直到吸附达平衡；吸附结束后，离心分离，用UV-2450分光光度计，在190nm波长处测定清液的吸光度，用旋光仪测定清液的旋光度。L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶对L-丙氨酸（L-Ala）的选择性系数在1.61~2.08之间。
实施例8
（1）L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2）的合成：称取干燥过的L-色氨酸1g和对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶（TsCD/ SiO2）1g置于50mL无水吡啶中， 氮气氛围中于80℃搅拌反应48h；抽滤除去反应液, 产物依次用无水吡啶、甲醇、乙醚、无水乙醇、甲醇、蒸馏水、丙酮洗涤, 抽滤后,于120 ℃下真空干燥4 h，即得。
（2）丙氨酸对映体的分离：取等质量的L-丙氨酸（L-Ala）和D-丙氨酸（D-Ala），混合后溶解在水中，得到丙氨酸的外消旋溶液；在底部封端的玻璃管填入L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶（L- Trp -CD/SiO2），加入一定体积的丙氨酸外消旋溶液，封口，放入35℃恒温水槽中，直到吸附达平衡；吸附结束后，离心分离，用UV-2450分光光度计，在190nm波长处测定清液的吸光度，用旋光仪测定清液的旋光度。L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶对L-丙氨酸（L-Ala）的选择性系数在1.87~2.71之间。
结果表明，以L-色氨酸衍生化β-环糊精键合硅胶（L-Trp-CD/SiO2）为手性分离吸附柱材料，以外消旋的丙氨酸为分离对象，具有对L-丙氨酸较强的识别能力，操作简单、成本低、选择性高和分离效率好，具有一定的实用价值。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (6)
1.L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶的制备方法，其特征在于，制备步骤包括:先制得活化硅胶，然后合成β-环糊精键合硅胶，再合成对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶，最后将所得产物用L-色氨酸衍生化。
2.根据权利要求1所述的L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶的制备方法，其特征在于，所述的活化硅胶以如下步骤制得：按盐酸溶液与硅胶的体积质量比为20mL/g，将盐酸溶液与粒径为5~7μm的硅胶配制成混合物室温浸渍24h，所述盐酸溶液为浓HCl与H2O的体积比为1:3混合而成，然后在120 ℃下回流10h，抽滤并用双蒸馏水洗至中性，再用丙酮洗涤，于150 ℃下真空干燥10h，置于干燥器备用。
3.根据权利要求1所述的L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶的制备方法，其特征在于，所述的β-环糊精键合硅胶，包括如下步骤：
A、 按质量体积比为20g/mL的比例，将β-环糊精溶解在无水N,N’-二甲基甲酰胺中配制成溶液，加入占β-环糊精质量6%的NaH为催化剂，室温下搅拌1h，过滤；
B、 在氮气氛围中向滤液滴加KH-560，于85-90℃反应5h，所述KH-560的体积为滤液的1.96%；
C、 向反应体系中加入与β-环糊精等质量的活化硅胶，升温至110-115℃反应24h，待冷却至室温后，抽滤；
D、 将滤得的固体物依次用无水N,N’-二甲基甲酰胺、甲醇、双蒸馏水洗涤，最后再次用甲醇洗涤，滤干后于120℃真空干燥3h，置于干燥器中备用。
4.根据权利要求1所述的L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶的制备方法，其特征在于，所述的对甲苯磺酰化β-环糊精键合硅胶的合成步骤包括如下：
A、 按无水吡啶与对甲苯磺酰氯体积质量比为25mL/g配制成溶液，加入与对甲苯磺酰氯等质量的β-环糊精键合硅胶，室温下搅拌24h；
B、 将反应体系置于冰浴中继续反应18h，抽滤；
C、 将滤得的产物依次用无水吡啶、乙醚、甲醇、乙醚洗涤数次,于100℃下真空干燥24 h, 干燥备用。
5.根据权利要求1~4任一所述方法制备的L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶。
6.将权利要求5所述的L-色氨酸衍生β-环糊精键合硅胶作为色谱填料的应用，其特征在于，以丙氨酸的外消旋溶液作为流动相，在恒温常压下完成丙氨酸对映体的色谱分离。
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| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20150422 Termination date: 20160328 |
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