CN103156831A - 一种荆芥活性成分组合物及其在医药上的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种药理作用明确的荆芥活性提取组合物，其特征是该组合物含有薄荷酮和胡薄荷酮，且两个活性成分重量总含量大于90％，该组合物中薄荷酮和胡薄荷酮的重量比值为1∶0.5～5。本发明还涉及荆芥活性提取组合物在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用。

Description

一种荆芥活性成分组合物及其在医药上的应用

技术领域

本发明涉及一种荆芥活性成分组合物及其在医药上的应用。该组合物含有胡薄荷酮和薄荷酮，且两个活性成分重量总含量大于90％。该组合物可用于制成口服制剂，用于治疗过敏性鼻炎。

背景技术

过敏性鼻炎，又称变应性鼻炎，是特异性个体接触致敏原后由IgE介导的介质释放为开端的、有多种免疫活性细胞和细胞因子等参与的鼻黏膜慢性炎症反应性疾病，临床主要表现为打喷嚏、流清涕、鼻塞和鼻痒。变应性鼻炎是目前全球普遍存在的疾患，流行病学研究报道在世界范围内其患病率约为10％～25％，我国每年约有2000万人患病，发病率约为37.74％。近30年来，变应性鼻炎患病率明显增加趋势，其增加的趋势尤其以西方经济发达国家更为显著。目前，治疗变应性鼻炎的西药主要有抗组胺药、糖皮质类固醇激素、减充血剂、抗胆碱药和肥大细胞稳定剂5类。但是这些药物毒副作用明显，抗药性强。

荆芥为唇形植物荆芥Schizonepeta tenuifolia(L.)Briq.的干燥地上部分。荆芥为一年生草本，高60～100cm；具有强烈香气，茎直立，四棱形，上部分多枝，基部棕紫色，全株被灰白色短柔毛；花期7～9月，果期9～11月；生长于山坡路旁或山谷、林缘，海拔在540～2700m之间；多栽培，亦有野生。荆芥在我国分布广泛，现今为八大祁药之一，主产于河北安国、易县、唐县、承德等地。安徽、江西、湖北、四川、河南、陕西、山东、山西、河北各地都有野生。江苏江都、扬州、泰兴，浙江萧山、杭州，江西吉安、吉水，湖北，湖南等地亦有种植。具有解表散风、透疹、消疮之功效，用于感冒，头痛，麻疹，风疹，疮疡初起。

实验性过敏性鼻炎大鼠口服荆芥生药，结果表明使鼻粘膜毛细血管通透性显著降低，显著抑制鼻粘膜分泌，减少流鼻涕量，同时使血清中组胺水平显著下降。实验性过敏性鼻炎豚鼠口服荆芥挥发油，可以降低过敏性鼻炎模型豚鼠血清中IgE浓度及组胺浓度，同时，擦鼻次数和打喷嚏次数及流涕程度均显著减少。

荆芥的主要成分为其挥发油中含有的单萜类成分，包括胡薄荷酮、薄荷酮、薄荷呋喃、β-香叶烯、D-柠檬烯、β-石竹烯等。此外，还含有橙皮苷、橙皮素、木犀草素等黄酮类成分以及熊果酸、齐墩果酸等三萜酸类成分。

胡薄荷酮((+)-Pulegone)，分子式：C₁₀H1₆O，分子量：152.23，CAS登录号：89-82-7。薄荷酮((-)-Menthone)，分子式：C₁₀H₁₈O，分子量：154.25，CAS登录号：14073-97-3。其分子式如下：

发明内容

本发明所要解决的关键问题在于运用现代医药理论，经豚鼠过敏性鼻炎模型试验，提供一种成分明确、质量可控、疗效确切的荆芥活性成分组合物。

本发明所要解决的关键问题在于该组合物可用于制成口服制剂。

本发明所要解决的关键问题在于该组合物可用于制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用。

本发明所要解决的关键问题可以通过以下措施来达到：

本发明是含薄荷酮和胡薄荷酮活性提取物，二者重量总含量大于90％，其重量比值为为1∶0.5～5，最佳重量比值为1∶1。

本发明含有上述荆芥活性提取组合物和一种或多种药用赋形剂制成的药用组合物。本发明中薄荷酮和胡薄荷酮的提取来源可以是裂叶荆芥属植物，本属植物在中国有3种(《中国植物志》)，优选为唇形科植物荆芥Schizonepeta tenuifolia(L.)Briq.，更优选为唇形科植物荆芥Schizonepeta tenuifolia(L.)Briq.的干燥地上部分。

本发明合理利用荆芥资源，明确有效成分及含量，可用于制成胶囊剂，可用于制成治疗过敏性鼻炎的药物。

本发明的药效学研究如下：

1.试验药物与动物

荆芥饮片(安徽井泉集团中药饮片有限公司，产地：河北，批号：110701)，经南京中医药大学吴启南教授鉴定为唇形科植物荆芥Schizonepeta tenuifolia(L.)Briq.的干燥地上部分所制成的饮片。氯雷他定()

SPF级豚鼠，雄性，体重280-320g，108只。由南京中医药大学实验动物中心提供。

2.方法

2.1过敏性鼻炎豚鼠模型的建立

适应环境1周后进行致敏造模。致敏组均首先选用卵清白蛋白与氢氧化铝以1∶5的比例混合，用生理盐水配制混悬溶液，使其中卵清白蛋白浓度为1mg/ml，双侧鼻孔每侧、每次20μl，每天2次，连续10天，正常对照组先以5mg/ml氢氧化铝溶液代替滴鼻，间隔5天后模型组以5％卵清白蛋白溶液滴鼻激发，每侧鼻孔20μl，隔3天激发1次，连续激发11次，正常对照组则以生理盐水代替激发。

2.2分组及给药

将豚鼠随机分为9组，每组12只，分别为空白对照组、模型对照组、阳性对照组(氯雷他定0.1mg/kg)、A组(薄荷酮，2mg/kg)、B组(胡薄荷酮，2mg/kg)、C组(按照实施例7制备，2mg/kg)、D组(按照实施例8制备，2mg/kg)、E组(按照实施例9制备，2mg/kg)、F组(荆芥挥发油，8mg/kg)，后8组为致敏组。各组均于造模成功后第1天开始每天灌胃给药，空白对照组和模型对照组：0.5％CMC-Na水溶液灌胃2ml/次；阳性对照组：氯雷他定混悬液0.1mg/kg灌胃；A、B、C、D、E、F组均以相应药物剂量的0.5％CMC-Na水溶液灌胃，连续给药7天，并于给药第7天给药1小时后再次激发一次。

2.3行为学特征

分别记录各组自给致敏药开始，在第11次激发后、给药第7天激发后20分钟内豚鼠擦鼻次数、打喷嚏次数及流涕程度进行评分并迭加比较。评分依据见表1。

表1过敏反应行为学评分依据

2.4血清中组胺含量测定

将豚鼠用3％戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔注射麻醉，仰卧位固定，剪开腹部皮肤，钝性分离，暴露腹主动脉，用一次性注射器(预先用1∶25肝素湿润)抽取腹主动脉动脉血3mL，立即注入抗凝管中，静置2小时后3000r/min离心15min，分取血清，-20℃保存并检验。用ELISA法检测血清中组胺浓度。

2.5统计及数据处理

所有测定数据以均值±标准差

表示，应用SPSS统计软件进行统计学处理。组内采用t检验，组间比较采用方差分析。

3结果

观察第11次激发后与给药第7天激发后行为学特征，并测定血清中组胺含量，所得数据进行统计学处理。试验结果见表2。

表2试验结果(n＝12，

)

注：＊＊P＜0.01，各组均与模型对照组比较

表2说明：A组给药后，动物的喷嚏次数、抓鼻次数均明显减少，显著改善鼻痒、喷嚏、流清涕症状，但是血清中组胺含量降低不明显；B组给药后，相应症状改善不明显，血清中组胺含量降低不明显；C、D、E组给药后，显著减少喷嚏次数、抓鼻次数，相应症状得到极显著改善，血清中组胺含量极显著降低；F组给药后，喷嚏次数、抓鼻次数明显显著减少，相应症状得到极显著改善，血清中组胺含量极显著降低。

4结论

从以上试验可以看出，C、D、E组药物(组合物)比单独使用的A、B组，以及生药的提取物F组效果好。

本发明的纯度测定研究方法如下：

1.仪器与试剂

Agilent6890N-5975B型气相色谱-质谱联用仪，Agilent ChemStation化学工作站软件；BP211D型电子天平(d＝0.01mg，赛多利斯科学仪器有限公司)。甲醇为色谱纯。

2.色谱及质谱条件

HP-5MS毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)；载气：He，1.0mL·min^-1；进样口温度：220℃；程序升温：50℃，以10℃·min^-1升温至90℃，保持15min，再以5℃·min^-1升至200℃，保持5min测定；进样量：1μL；分流比20∶1；溶剂延迟：3min。

电子轰击离子源(EI)；电子能量：70eV；四级杆温度：150℃离子源温度：230℃；接口温度：280℃；扫描范围：40～400；扫描速率0.20s·scan^-1。

3.供试品溶液的制备

取待测成分适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含5mg的溶液。

4.纯度测定方法

采用面积归一化法测定待测成分的纯度：在上述测定条件下，精密吸取供试品溶液1μl，注入气相色谱仪，记录色谱图。测量待测成分色谱峰面积和色谱图上除溶剂峰以外的总色谱峰面积，计算待测成分色谱峰面积占总峰面积的百分率。

具体实施方式

实施例1

挥发油的制备：取唇形科植物荆芥Schizonepeta tenuifolia(L.)Briq.的干燥地上部分25公斤，置挥发油提取罐中，加水浸没药材，水蒸汽蒸馏10小时，油水分离得含水荆芥挥发油200g。-12℃冰冻24小时，去冰除水，得荆芥挥发油190g。

实施例2

挥发油的制备：取唇形科植物荆芥Schizonepeta tenuifolia(L.)Briq.的干燥花穗10公斤，置CO2超临界萃取装置中，萃取压力20MPa，温度45℃，CO₂流量2ml/g生药·min，萃取时间150分钟，得荆芥挥发油220g。

实施例3

薄荷酮的制备：称取实施例1挥发油10g，上硅胶柱(100g)以石油醚(60～90℃)洗脱后，再以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(99.6∶0.4)洗脱，200ml为一个流份，以GC检测，收集第42～127号流份，减压回收洗脱剂，得油状物2.4g。按照前述纯度测定方法，鉴定为薄荷酮，纯度为97.23％。

实施例4

薄荷酮的制备：称取实施例2挥发油10g，上三氧化二铝柱(100g)以石油醚(60～90℃)洗脱后，再以石油醚(60～90℃)-氯仿(99.8∶0.2)洗脱，200ml为一个流份，以GC检测，收集第59～152号流份，减压回收洗脱剂，得油状物2.1g。按照前述纯度测定方法，鉴定为薄荷酮，纯度为95.99％。

实施例5

胡薄荷酮的制备：称取实施例1挥发油10g，上硅胶柱(100g)以石油醚(60～90℃)洗脱后，再以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(99.2∶0.8)洗脱，200ml为一个流份，以GC检测，收集第106～238号流份，减压回收洗脱剂，得油状物7.6g。按照前述纯度测定方法，鉴定为胡薄荷酮，纯度为98.85％。

实施例6

胡薄荷酮的制备：称取实施例2挥发油10g，上三氧化二铝柱(100g)以石油醚(60～90℃)洗脱后，再以石油醚(60～90℃)-氯仿(99.4∶0.6)洗脱，200ml为一个流份，以GC检测，收集第151～302号流份，减压回收洗脱剂，得油状物7.5g。按照前述纯度测定方法，鉴定为胡薄荷酮，纯度为97.60％。

实施例7

薄荷酮+胡薄荷酮组合物制备：将实施例3和实施例4获得的产品按照1∶1混合，得到荆芥提取组合物。

实施例8

薄荷酮+胡薄荷酮组合物制备：将实施例5和实施例6获得的产品按照1∶0.5混合，得到荆芥提取组合物。

实施例9

薄荷酮+胡薄荷酮组合物制备：将实施例5和实施例6获得的产品按照1∶5混合，得到荆芥提取组合物。

实施例10

荆芥活性成分组合物的制剂：将实施例6获得的组合物12g，加甘油聚乙二醇混合物340g，混合均匀，制成软胶囊剂。

实施例11

荆芥活性成分组合物的制剂：将实施例7获得的组合物12g，加β-环糊精340g，混合，包合，喷雾干燥，制粒后填充胶囊。

Claims (3)

1.一种荆芥活性提取组合物，其特征是该组合物含有薄荷酮和胡薄荷酮，且两个活性成分重量总含量大于90％，该组合物中薄荷酮和胡薄荷酮的重量比值为1∶0.5～5。

2.根据权利要求1所述的荆芥活性提取组合物，其特征是该组合物中薄荷酮和胡薄荷酮的重量比值为1∶1。

3.根据权利要求1所述的荆芥活性提取组合物在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用。