CN103149288A - 一种利用特征图谱控制牛黄蛇胆川贝胶囊里蛇胆汁质量的方法 - Google Patents
一种利用特征图谱控制牛黄蛇胆川贝胶囊里蛇胆汁质量的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种利用特征图谱控制牛黄蛇胆川贝胶囊里蛇胆汁的方法，首先先建立标准蛇胆汁中成分标准特征图谱，然后，以相同的方法建立待测牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分样品特征图谱；最后将待测牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分样品特征图谱与标准的蛇胆汁成分特征图谱比对，判断牛黄蛇胆川贝胶囊的质量及真伪。本发明方法能真实的控制蛇胆汁实际投料情况，为完整、准确评价牛黄蛇胆川贝胶囊的质量提供了新的方法和手段。
Description
技术领域
本发明涉及一种中成药的质量控制方法，特别是涉及一种利用特征图谱控制牛黄蛇胆川贝胶囊里蛇胆汁的方法。
背景技术
牛黄蛇胆川贝胶囊是由人工牛黄、蛇胆汁、川贝母等三味中药材，经一定工艺加工而成。具有清热、化痰、止咳功效，主要用于外感咳嗽中的热痰咳嗽，燥痰咳嗽。为了提高生物利用度，本品是制粒后粉碎成细粉，然后灌装胶囊。
众所周知，中成药的药效不是来自任何单一的活性成分，而是多种有效部位群共同作用的结果，目前，牛黄蛇胆川贝胶囊质量标准中对人工牛黄、川贝母采用多成分鉴别方式进行质量控制，而蛇胆汁是采用牛磺胆酸钠进行含量测定。看似蛇胆汁的控制更严，但由于牛磺胆酸钠能额外获得，所以单独采用牛磺胆酸钠含量来判断蛇胆汁的质量不准确，反而存在很大风险。因此，需要一种快速、相对准确的质量控制方法，对牛黄蛇胆川贝胶囊中的蛇胆汁进行控制。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术中的不足，提供一种牛黄蛇胆川胶囊中蛇胆汁的质量控制方法。本发明方法快速、准确率高。
本发明的技术方案概述如下：
第一步，先建立蛇胆汁中成分标准特征图谱，方法如下：
（1）供试品溶液的制备：取牛黄蛇胆川贝胶囊内容物适量，混匀，取1g，精密称定，置25ml量瓶中，加70%甲醇约20ml，超声处理30分钟，放冷，加70%甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液，为供试品溶液；
（2）参照物溶液的制备：取牛磺胆酸钠对照品适量，精密称定，加70%甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为参照物溶液；
（3）色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸二氢钾溶液（7:3）为流动相；检验波长为205nm；
（4）测定：分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，用液相色谱法测定，制定牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分特征图谱；
所述牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分特征图谱中，有三个特征峰，以参照物牛磺胆酸钠的色谱峰的相对保留时间和相对峰面积为1，计算其它色谱峰的相对保留时间和相对峰面积，上述三个特征峰分别是1号峰：平均相对保留时间RRT为0.68，相对峰面积为50%-70%，2号峰的平均相对保留时间RRT为0.81，相对峰面积为80%-100%，3号峰平均相对保留时间RRT为1.0，相对峰面积为100%；所述1号峰、2号峰的相对保留时间的差值均小于10%；
第二步，以上述相同的方法建立待测牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分样品特征图谱；
第三步，将待测牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分样品特征图谱与标准的蛇胆汁成分特征图谱比对，判断牛黄蛇胆川贝胶囊的质量。
本发明是结合大量生产批次统计情况和试验研究工作，建立了合格的牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分标准特征图谱，能较好地保证牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁投料的准确性与正确性。到目前为止，上述的控制方法尚无公开报道。
本发明具有下述特点：
1、整体性、宏观性和模糊性，本发明克服了单一成分含量测定难以反映蛇胆汁真实投料情况，本发明为完整、准确评价牛黄蛇胆川贝胶囊的质量提供了新的方法和手段；
2、用视觉直观辨识图谱的异同；用半定量指标量化样品的真伪，优劣。
附图说明
图1 为牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分标准特征图谱。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明。
实施例1：牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁特征图谱的建立
1、仪器与试药
1.1 仪器
EX1600高效液相色谱仪及原装工作站
1.2 试药
牛磺胆酸钠对照品由中国药品生物制品检定所提供；磷酸二氢钾为分析纯；甲醇为色谱纯；牛黄蛇胆川贝胶囊由合肥今越制药有限公司提供，批号为110801，110901，111101，120101，120201，120301，120302，120401，120501，120601。
2、方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性
C18色谱柱（4.6×250mm，5μm），甲醇-0.4%磷酸二氢钾溶液（7:3）为流动相；检测波长为205nm。理论板数按牛磺胆酸钠峰计算应不低于5000。
3、特征图谱特征峰的测定
3.1 牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分特征图谱特征峰的建立
（1）供试品溶液的制备：取牛黄蛇胆川贝胶囊内容物适量，混匀，取1g精密称定，置25ml量瓶中，加70%甲醇约20ml，超声处理30分钟，放冷，加70%甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液，为供试品溶液。
（2）参照物溶液的制备：取牛磺胆酸钠对照品约50mg，精密称定，置25ml量瓶中，加入70%甲醇适量使溶解完全，然后稀释至刻度，摇匀，作为参照物溶液。
分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，照液相色谱法测定，记录30分钟的图谱，即得。以参照物的色谱峰保留时间和峰面积为1，计算相对保留时间和峰面积比值，即得牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁标准特征图谱。
3.2 特征峰确定
通过10批牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分特征图谱的测定，比较其图谱，确定特征峰为3个，以参照物牛磺胆酸钠的色谱峰的相对保留时间和相对峰面积为1，计算10批样品共有峰相对保留时间以及相对峰面积。结果见下表1、表2。
表1：10批样品保留时间统计结果
表2：10批样品峰面积比值统计结果
3.3 特征峰的描述
（1）特征峰共有3个，其中参照物峰面积最大。
（2）1、2号峰的相对保留时间的平均值分别为：0.68、0.81。
（3）1、2号峰的峰面积比值的平均值分别为：61.5%，89.8%。
3.4 特征图谱精密度试验
按照特征图谱精密度规定方法操作，以批号为110801的牛黄蛇胆川贝胶囊为供试品，依法制备，连续进样6次，分别对共有特征峰时间以及峰面积比值进行统计，共有峰相对保留时间的RSD为0.59%，峰面积比值的RSD为0.88%。
3.5 特征图谱稳定性试验
按照特征图谱稳定性测定方法操作，以批号110801的牛黄蛇胆川贝胶囊为供试品，依法制备，于不同时间（0、2、4、8、16、24h）检测，分别对特征峰时间以及峰面积比值进行统计，特征峰相对保留时间的RSD为0.71%。
以上试验结果表明，应用此方法对牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分标准特征图谱进行测定方法可靠，能比较全面的反映本品中的化学信息，确保产品投料的准确性与正确性。
Claims (1)
1.一种利用特征图谱控制牛黄蛇胆川贝胶囊里蛇胆汁质量的方法，其特征在于，包括如下步骤：
第一步，先建立蛇胆汁中成分标准特征图谱，方法如下：
（1）供试品溶液的制备：取牛黄蛇胆川贝胶囊内容物适量，混匀，取1g，精密称定，置25ml量瓶中，加70%甲醇约20ml，超声处理30分钟，放冷，加70%甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，为供试品溶液；
（2）参照物溶液的制备：取牛磺胆酸钠对照品适量，精密称定，加70%甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为参照物溶液；
（3）色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸二氢钾溶液为流动相，检验波长为205nm，其中，甲醇与0.4%磷酸二氢钾溶液的质量比为7:3；
（4）测定：分别精确吸取参照物溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，用液相色谱法测定，制定牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分特征图谱；
所述牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分特征图谱中，有三个特征峰，以参照物牛磺胆酸钠的色谱峰的相对保留时间和相对峰面积为1，计算其它色谱峰的相对保留时间和相对峰面积，上述三个特征峰分别是1号峰：平均相对保留时间RRT为0.68，相对峰面积为50%-70%，2号峰的平均相对保留时间RRT为0.81，相对峰面积为80%-100%，3号峰平均相对保留时间RRT为1.0，相对峰面积为100%；所述1号峰、2号峰的相对保留时间的差值均小于10%，
第二步，以上述相同的方法建立待测牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分样品特征图谱；
第三步，将待测牛黄蛇胆川贝胶囊中蛇胆汁成分样品特征图谱与标准的蛇胆汁成分特征图谱比对，判断牛黄蛇胆川贝胶囊的质量及真伪。
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Denomination of invention: Quality control method for snake bile in bezoar snake gall bulbus fritilariae capsules by means of feature maps Effective date of registration: 20170602 Granted publication date: 20150930 Pledgee: Merchants Bank of Hefei Economic Development Zone Branch Pledgor: Hefei Jinyue Pharmaceutical Co., Ltd. Registration number: 2017340000080 |
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Date of cancellation: 20180413 Granted publication date: 20150930 Pledgee: Merchants Bank of Hefei Economic Development Zone Branch Pledgor: Hefei Jinyue Pharmaceutical Co., Ltd. Registration number: 2017340000080 |
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Denomination of invention: Quality control method for snake bile in bezoar snake gall bulbus fritilariae capsules by means of feature maps Effective date of registration: 20180504 Granted publication date: 20150930 Pledgee: Merchants Bank of Hefei Economic Development Zone Branch Pledgor: Hefei Jinyue Pharmaceutical Co., Ltd. Registration number: 2018340000141 |
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Date of cancellation: 20190701 Granted publication date: 20150930 Pledgee: Merchants Bank of Hefei Economic Development Zone Branch Pledgor: Hefei Jinyue Pharmaceutical Co., Ltd. Registration number: 2018340000141 |