CN103145703A - 基于不同植物制备颅痛定的工艺技术 - Google Patents

Abstract

基于不同植物制备颅痛定的工艺技术，该工艺技术以黄藤和山乌龟为原料提取了黄藤素，主要工艺过程如下：黄藤粗粉以盐酸浸渍提取，提取液盐析，碱化，沉淀，沉淀物回流提取，脱色，得到黄藤素；山乌龟粗粉以氨水润湿，以甲醇回流提取，提取液浓缩，浓缩液酸液溶解，滤液以浓氨水碱化，氯仿萃取，萃取液通过柱色谱得黄藤素。所得黄藤素通过硼氢化钠，氢气，锌粉等3种氢化试剂还原，得到颅痛定。该工艺技术还以延胡索和夏天无为原料直接提取了颅痛定，主要工艺过程如下：延胡索粗粉碱性甲醇回流提取，提取液浓缩后以盐酸溶解，滤液碱化后萃取，萃取液经反萃取后，以盐酸液萃取，酸水液通过柱色谱，得到片状结晶颅痛定；夏天无粗粉以盐酸浸泡，提取液通过柱色谱后，树脂以碱性甲醇液回流提取，得到颅痛定。

Description

基于不同植物制备颅痛定的工艺技术

技术领域

本发明涉及基于不同植物制备颅痛定的工艺技术。

背景技术

颅痛定为左旋延胡索乙素，延胡索乙素又名四氢巴马汀、四氢非洲防己碱、四氢掌叶防己碱等，巴马汀又名黄藤素、大黄藤素、非洲防己碱、棕榈碱，其盐酸盐为盐酸巴马汀、盐酸掌叶防己碱、氯化巴马汀、盐酸棕榈碱。

黄藤素，英文名Fibrauretin，中文别名：巴马汀、大黄藤素、非洲防己碱、棕榈碱。主要存在于黄藤，山乌龟植物中。清热解毒，用于妇科炎症，菌痢，肠炎，呼吸道及泌尿道感染，外科感染，眼结膜炎。黄藤素为我国自行研制的纯天然植物药，现已被载入《中国药典》。黄藤素注射液具有广谱抑菌抗病毒作用、明显增加白细胞吞噬细菌的多重药理作用、良好的抗炎和增强机体免疫力作用。盐酸巴马汀，英文名称：Palmatine chloride，C₂₁H₂₂ClNO₄，分子量：387.86。黄藤中含巴马汀4％，还有药根碱。黄藤素对对中枢神经糸统有麻痹作用，静脉注射有降压作用，黄藤素对福氏及宋内痢疾杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型链球菌、甲型流感病毒，均有抑制作用。黄藤来源于防己科(Menispermaceae)黄藤属(Fibraurea)Fibraurea tinctoria Lour.植物干燥藤茎。主要产自广东东南部、香港、海南及广西西南部，西双版纳有栽培。根含掌叶防己碱(Palmatine)、药根碱(Jatrorrhizine)、非洲防己碱(Columbamine)、黄藤素甲(Fibranine)、黄藤素乙(Fibraminine)、黄藤内酯(Fi-bralaetone)、甾醇。根和茎含掌叶防己碱(palmatine)、药根碱(jatror-rhizine)、小檗碱；另含黄藤素甲(fibranine)、黄藤素乙(fibraminine)、黄藤内酯(fibralactone)及甾醇(sterol)。树皮及木部亦含有小檗碱，叶中含生物碱甚微。山乌龟别名地不容(广西、云南)，金不换(云南、贵州)，地胆，白地胆(云南)，防己科(Menispermaceae)金藤属植物StephaniacepharanthaHayata，为著名传统中草药，全世界约有50种，中国有30种，云南有18种。本属植物富含生物碱，有多种可药用，块根含多量瑟法丹质和轮黄藤宁，能清热解毒、镇静、理气止痛。医学科学部门还从山乌龟中撮出颅痛定、异可利定、光千金藤定碱、千金藤素等，在临床上具有重要的用途。山乌龟在不同地区常作为不同药材的别名，也就是说，山乌龟存在着同名异物的现象，不同地区所指的山乌龟植物来源不同。

延胡索乙素(Tetrahydropalmatine)，别名四氢巴马汀，分子式C₂₁H₂₅O₄N，分子量355.42，稀甲醇中结晶，熔点147℃，盐酸盐甲醇中结晶，熔点215～216℃，主要存在于延胡索，夏天无等植物中。具有以下药理作用：1)对中枢神经系统的影响，镇痛作用：延胡索乙素有镇痛作用，且强于甲素和丙素。镇痛有效剂量对呼吸无明显抑制作用，也无便秘等不良反应，用于催眠、镇静与安定作用，较大剂量的延胡索乙素有明显的催眠作用，快速的镇静、催眠作用。能明显抑制神经元的自发放电频率，因而认为其可能是属于新类型的中枢抑制剂。2)对心血管系统的影响，延胡索乙素使心率减慢，使P波变低平，倒置，甚至消失，并延长P-R间期，Q-T间期，不影响QRS综合波和R波。延胡索乙素抗心律失常作用和对心电图影响的机制可能与拮抗Ca²⁺有关。3)对消化系统的影响，延胡索乙素能抑制兔离体肠管活动，并能阻断乙酰胆碱、氯化钡及脑垂体后叶素对肠肌的兴奋作用，也可使胃瘘犬的胃液分泌明显抑制。4)对内分泌系统的影响，延胡索乙素使幼年小鼠胸腺萎缩，促进肾上腺皮质分泌的作用，还可影响甲状腺功能，使甲状腺重量增加，对性腺功能也有一定影响。5)其他作用，延胡索乙素明显对抗子宫收缩，有明显松弛作用，在子宫平滑肌上具有钙拮抗作用。延胡索，别名延胡、玄胡索、元胡索、元胡。属罂粟科植物延胡索Cirydalis yanhusuo，W.T.Wang或齿瓣延胡索C.remota Fisch.ex Maxim的块茎。中国传统药材，主产于浙江东阳、永康。近年江苏的南通和上海、湖北等地已引种成功，吉林、辽宁、河北有野生，浙江产者奉为道地药材。延胡索性味苦、微辛、温，功能活血散瘀，理气止痛，主治胃痛、胸腹痛、疝痛、痛经、月经不调、产后瘀血腹痛、跌打损伤，有镇痛、镇静、催眠作用。其块茎中共提取出生物碱多种，其中经鉴定的有延胡索甲素(亦名延胡索碱，紫堇碱，d-Corydaline)、延胡索乙素(消旋四氢巴马汀，dl-四氢掌叶防己碱，dl-Tetrahydropalmatine)、延胡索丙素(原阿片碱，Protopine)、延胡索丁素(L-四氢黄连碱，L-Tetrahydrocoptisine)、延胡索戊素(d1-四氢黄连碱)、延胡索己素(L-四氢非洲防己碱，Tetrahydrocolumbamine)、延胡索辛素(Corydalis H)、延胡索壬素(Corydalis I)、延胡索癸素(Corydalis J)、延胡索子素(Corydalis K)、延胡索丑素(Corydalis L)、延胡索寅素(α-别隐品碱，α-Allocryptopine；或名β-高白屈菜碱，β-Homo-chehdonine)、黄连碱(Coptisine)、去氢延胡索甲素(去氢延胡索，去氢紫堇碱，Dehydrocoryda-line)、延胡索胺碱(d-Corybulbine，亦名紫堇达明碱，d-Corydalmine；或紫堇鳞茎碱)、去氢延胡索胺碱(Dehydrocorydalmine，亦名去氢紫堇达明碱)等。此外，尚含有大量淀粉和少量黏液质，挥发油及树脂等。夏天无为罂科紫堇属延胡索亚属植物伏生紫堇Corydalis decumbens(Thumb.)Pers.的干燥块茎。块茎含夏无碱(decumbenine)，紫堇米定碱(corlumidine)，比枯枯灵碱(bicuculline)，掌叶防己碱(palmatine)，α-四氢掌叶防己碱(tetrahydropalmatine)，α-别隐品碱(α-allocryptopine)，小檗碱(berberine)，药根碱(jatror-rhizine)，空褐鳞碱(bulbocapnine)，原阿片碱(protopine)，山缘草定碱(adlumi-dine)，夏无新碱(decumbensine)，表-α-夏无新碱(epi-α-decum-bensine)，羟白毛莫碱(hydroxyhydrastine)，紫堇碱(corydaline)及夏无碱丙素(decumbenine C)等生物碱。上世纪70年代起，国内学者对其进行了详细研究其化学成分主要有延胡索乙素，原阿片碱，毕扣扣灵，药根碱等。可治疗脑瘤或脑栓塞所致偏瘫；治疗各型高血压；治疗风湿性关节炎；治疗腰肌劳损。

颅痛定又名左旋四氢巴马汀，分子式C₂₁H₂₅NO₄分子量355.43。为白色或微黄色的结晶，无臭，无味，遇光受热易变黄，在氯仿中溶解，在乙醇或乙醚中略溶，在水中不溶，在稀硫酸中易溶。其作用与延胡索乙素相似，但作用更强。该品具有镇痛、镇静、催眠及安定作用，其镇痛作用弱于哌替啶，强于一般解热镇痛药。在治疗剂量下无呼吸抑制作用，亦不引起胃肠道平滑肌痉挛。对慢性持续性疼痛及内脏钝痛效果较好，对急性疼痛(如手术后疼痛，创伤性疼痛等)、晚期癌症痛效果较差。在产生镇痛作用的同时，可引起镇静及催眠。其作用机制尚待阐明，可能与通过抑制脑干网状结构上行激活系统、阻滞脑内多巴胺受体的功能有关。

本发明以黄藤和山乌龟为原料提取了黄藤素，再以黄藤素为原料，经3种方法氢化得到颅痛定。以延胡索和夏天无为原料直接提取了颅痛定。

发明内容

第一从黄藤，山乌龟中提取黄藤素

1.从黄藤中提取黄藤素：黄藤粗粉以酸水浸渍，酸液加入氯化钠盐析，以碱液调pH值碱性，过滤得沉淀，干燥后以乙酸乙酯回流，回流液加酸化，沉淀，过滤，干燥，得黄藤素。

2.从山乌龟中提取黄藤素：山乌龟粗粉以碱液润湿，以甲醇醇回流提取，合并甲醇液，浓缩，浓缩液用酸液溶解，残渣酸水洗涤，合并滤液，酸液以浓氨水碱化，以氯仿萃取，氯仿液通过氧化铝色谱柱，以石油醚洗脱后，再以乙醚洗脱，合并乙醚洗脱液，浓缩，浓缩液结晶，结晶物加入石油醚搅拌后滴加少量乙醚，洗去色素，过滤，干燥，得黄藤素。

第二黄藤素的氢化制备颅痛定

1.盐酸黄藤素置于三颈瓶中，加入甲醇加热溶解，加入硼氢化钠，室温下反应，蒸去甲醇后，加水搅拌，析出白色结晶，抽滤，水洗，干燥，得颅痛定成品。

2.盐酸黄藤素置于三颈瓶中，加入甲醇加热溶解，加入活性镍粉，甲醇钠于高压反应釜中，密封，通氢气换气后，再通氢气反应，搅拌，升温反应，降温，排气，滤除釜内活性镍，得滤液，滤液浓缩回收甲醇后，加入纯化水，加入活性炭脱色，过滤，放置结晶，过滤，得颅痛定成品。

3.盐酸黄藤素置于三颈瓶中，加入水，浓硫酸，加热全溶后，加入锌粉，不断搅拌加热反应，使反应完全，冷却，加浓氨水碱化，析出固体，用氯仿提取，氯仿液用无水碳酸钠干燥后浓缩，最后加入适量甲醇，结晶，得到所得颅痛定成品。

第三从延胡索，夏天无中提取颅痛定

1.从延胡索中提取：延胡索粗粉以氨水润湿，以甲醇回流提取，提取液浓缩，以盐酸溶解，过滤，弃去滤渣，滤液以氨水碱化，乙酸乙酯萃取，萃取液以氨水溶液反萃取，弃去水液，乙酸乙酯液以盐酸液萃取，酸水液通过已处理好的大孔吸附树脂，用水洗至流出液无色后，用梯度甲醇洗脱，浓缩洗脱液，蒸干，于残留物中加氯仿-甲醇混合液结晶，过滤，片状结晶为颅痛定。

2.从夏天无中提取：夏天无粗粉，加入酸水浸泡，直至生物碱提取完全，通过阳离子交换树脂后，以水，乙醇依次洗脱，将树脂晾干，再以碱性甲醇液回流，提取液浓缩，结晶，过滤，干燥，得到颅痛定成品。

具体实施方式

第一从黄藤，山乌龟中提取黄藤素

1.从黄藤中提取黄藤素：黄藤粗粉500g以5％盐酸浸渍提取，提取酸液中加入过量的氯化钠，加入氨水调pH10～11，过滤得沉淀，沉淀物干燥后以5倍量(v/w)的乙酸乙酯回流3次，过滤，乙酸乙酯液加入活性炭回流20min，过滤，滤液浓缩，加入石油醚结晶，过滤，干燥，得到黄藤素10.3g。

2.从山乌龟中提取黄藤素：山乌龟粗粉400g以pH11～12氨水润湿4h，以98％甲醇回流提取3次，分别为15倍量(w/w)2h，10倍量(w/w)1.5h，8倍量(w/w)1.0h，合并甲醇提取液，减压浓缩，浓缩液用pH2～3盐酸溶解，残渣用酸水溶解3次，过滤，合并滤液，滤液以浓氨水碱化至pH9～10，用等体积氯仿萃取3次，氯仿液通过中性氧化铝柱色谱，以石油醚洗脱后，再以乙醚洗脱，合并乙醚洗脱液，浓缩，浓缩液结晶，结晶物加入石油醚搅拌后滴加少量乙醚，洗去色素，过滤，干燥，得黄藤素12.6g。

第二盐酸黄藤素的氢化制备颅痛定

1.称取盐酸黄藤素50.0g置于三颈瓶中，加入1200mL甲醇加热溶解，加入硼氢化钠12～15g，20～25℃下反应8～12h，加入活性炭2～3g，回流30min，过滤，减压浓缩，去除70％甲醇后，加纯化水充分搅拌，析出白色结晶，抽滤，水洗，干燥，得到颅痛定39.2g。

2.称取盐酸黄藤素30.0g置于三颈瓶中，活性镍粉20g，甲醇钠5～7g，甲醇400mL，投入反应釜中，密封，通氢气三次换气，然后通氢气至5.5MPa，搅拌，升温，控制釜内温度于90～95℃反应2～4h，降温至40℃，泄气，滤出釜内活性镍，得滤液，浓缩回收70％的甲醇后，加入纯化水加热溶解，加入活性炭2g，80℃保温20min，过滤，滤液放置结晶，过滤，干燥，得颅痛定21.7g。

3.称取盐酸黄藤素60.0g置三颈瓶中，加入700mL纯化水，25mL浓硫酸，加热全溶后，2h内分次加入50g锌粉，不断搅拌加热4h，使还原完全，冷却，加浓氨水碱化至pH10～11，析出固体完全后用等体积氯仿萃取3次，氯仿液用无水碳酸钠干燥后浓缩，最后加入适量甲醇，所得粗品用氯仿-甲醇混合液重结晶，过滤，干燥，得到精品44.5g。

第三从延胡索，夏天无中提取颅痛定

1.从延胡索中提取：延胡索粗粉300g以10％氨水润湿4～6h，以98％甲醇回流提取3次，分别为15倍量(w/w)2h，10倍量(w/w)1.5h，8倍量(w/w)1.0h，提取液浓缩，以5％盐酸溶解4次，过滤，弃去滤渣，滤液以浓氨水碱化至pH10～11以乙酸乙酯萃取，萃取液以pH10的氨水溶液萃取，弃去水液，乙酸乙酯液以pH1～2的盐酸液萃取，酸水液通过已处理好的D101大孔吸附树脂，先用水洗至流出液无色后，再用30％甲醇洗脱杂质成分，最后以98％甲醇洗脱有效成分，浓缩洗脱液，蒸干浓缩液，于残留物中加氯仿-甲醇混合液结晶，过滤，干燥，得到片状结晶颅痛定5.8g。

2.从夏天无中提取：夏天无粗粉700g，加入5％盐酸浸泡24h，直至提取液无生物碱反应，生物碱提取完全后通过已处理好的732阳离子交换树脂后，以水、甲醇依次洗脱，弃去洗脱液，树脂晾干后以pH10的氨水-甲醇液回流提取，提取液减压浓缩，结晶，过滤，干燥，得到颅痛定11.2g。

Claims (7)

1.基于不同植物制备颅痛定的工艺技术，其特征在于，以黄藤、山乌龟、延胡索和夏天无等植物为原料，该方法依次经以下步骤：

(1)从黄藤提取黄藤素：黄藤粗粉以盐酸浸渍提取，提取酸液中加入过量的氯化钠，加入氨水调至碱性，过滤得沉淀，沉淀物干燥后以乙酸乙酯回流，乙酸乙酯液加入活性炭回流，过滤，滤液浓缩，结晶，过滤，干燥，得到黄藤素。

(2)从山乌龟中提取黄藤素：山乌龟粗粉以氨水润湿，以98％甲醇回流提取3次，合并甲醇提取液，减压浓缩，浓缩液用盐酸溶解，残渣用酸水溶解3次，过滤，合并滤液，滤液以浓氨水碱化，用等体积氯仿萃取3次，氯仿液通过中性氧化铝柱色谱，用不同洗脱剂洗脱，合并洗脱液，浓缩，浓缩液结晶，结晶物洗涤，过滤，干燥，得黄藤素。

(3)黄藤素的氢化制备颅痛定：盐酸黄藤素溶解后，加入氢化试剂反应，反应完全后加入活性炭脱色，过滤，滤液减压浓缩，结晶，干燥，得到颅痛定。

(4)以延胡索中制取颅痛定：延胡索粗粉以氨水润湿，以98％甲醇回流提取，提取液浓缩，以盐酸溶解，过滤，弃去滤渣，滤液以浓氨水碱化后以乙酸乙酯萃取，萃取液以的氨水溶液反萃取，弃去水液，乙酸乙酯液以pH1～2的盐酸液萃取，酸水液通过已处理好的大孔吸附树脂，先用水洗至流出液无色后，再用梯度甲醇洗脱，浓缩洗脱液，蒸干浓缩液，结晶，过滤，干燥，得到片状结晶颅痛定。

(5)以夏天无中制取颅痛定：夏天无粗粉，加入盐酸浸泡，直至提取液无生物碱反应，生物碱提取完全后通过已处理好的阳离子交换树脂后，以水、甲醇依次洗脱，弃去洗脱液，树脂晾干后以pH10的氨水-甲醇液回流提取，提取液减压浓缩，结晶，过滤，干燥，得到颅痛定11.2g。

2.如权利要求1所述的基于不同植物制备颅痛定的工艺技术，其特征在于，步骤(1)中用5％盐酸浸渍提取，直至提取液无生物碱反应。提取液加入大量固体氯化钠盐析；氨水调pH10～11；乙酸乙酯回流3次，加入石油醚结晶。

3.如权利要求1所述的基于不同植物制备颅痛定的工艺技术，其特征在于，步骤(2)中所用氨水pH值为11～12，润湿4h；甲醇回流提取4次，分别为15倍量(w/w)2h，10倍量(w/w)1.5h，8倍量(w/w)1.0h；浓缩液用pH2～3盐酸溶解；滤液以浓氨水碱化至pH9～10；以石油醚洗脱后，再以乙醚洗脱；过滤后的结晶物中加入石油醚搅拌后滴加少量乙醚，洗去色素。

4.如权利要求1所述的基于不同植物制备颅痛定的工艺技术，其特征在于，步骤(3)中所用的氢化试剂可为硼氢化钠，氢气，锌粉等。硼氢化钠氢化只需常温反应，条件温和。氢气氢化需要镍做催化剂，加压高温反应，条件苛刻。锌粉需要在强酸下反应。

5.如权利要求1所述的基于不同植物制备颅痛定的工艺技术，其特征在于，步骤(4)中延胡索粗粉以10％氨水润湿4～6h；回流提取3次，分别为15倍量(w/w)2h，10倍量(w/w)1.5h，8倍量(w/w)1.0h；浓缩液以5％盐酸溶解4次；滤液以浓氨水碱化至pH10～11；萃取液以pH10的氨水溶液反萃取；D101大孔吸附树脂；30％甲醇洗脱杂质成分，最后以98％甲醇洗脱有效成分；于残留物中加氯仿-甲醇混合液结晶。

6.如权利要求1所述的基于不同植物制备颅痛定的工艺技术，其特征在于，步骤(5)中加入5％盐酸浸泡24h；提取液用732阳离子交换树脂；所用树脂提取剂为pH10的氨水-甲醇液。

7.如权利要求1，2，3，4，5，6所述的基于不同植物制备颅痛定的工艺技术，其特征在于，颅痛定可通过不同植物制备，其中以延胡索，夏天无为原料可直接制备，而以黄藤和山乌龟为原料，需先提取黄藤素，然后再氢化黄藤素得到颅痛定。