CN103125382A

CN103125382A - 橡胶树优良品种体胚植株微繁方法

Info

Publication number: CN103125382A
Application number: CN2011103933647A
Authority: CN
Inventors: 梁国平; 黄凤翔; 管艳; 田海; 李玲; 孙小龙
Original assignee: Yunnan Institute of Tropical Crops
Current assignee: Yunnan Institute of Tropical Crops
Priority date: 2011-12-02
Filing date: 2011-12-02
Publication date: 2013-06-05

Abstract

本发明公开了一种云南省自育橡胶树优良品种（云研73-477）体胚植株微繁方法，它是直接利用云南省自育优良品种橡胶树云研73-477花药或胚珠诱导的体胚植株通过微繁技术培育幼态芽条的方法，其工艺过程包括芽的诱导过程，芽的增殖继代过程与芽条的伸长壮苗培养过程。本发明工艺流程简单，生产成本低，均在人工化环境中完成，不受季节和天气的影响，培育的幼态芽条芽眼多，可用芽点多，繁殖速度较常规生产繁殖芽条快，为云南省提供大量自育优良品种云研73-477的优质接穗，有利于该品种的推广，因此具有很大的应用价值。

Description

橡胶树优良品种体胚植株微繁方法

技术领域

本发明属于农业生物技术组培快繁领域，具体涉及橡胶树优良品种云研73-477的微繁方法。

背景技术

天然橡胶为四大工业原料之一，也是极为重要的战略物资。天然橡胶是一种可再生而无污染资源，然而因橡胶树地域分布的局限性及其不可代替性而成为了一种约束型资源。因此，天然橡胶总产量远不能满足世界经济快速发展的需求。自2003年以来，我国已成为世界上第一大天然橡胶消费国和进口国，至2010年止，自给率不足25%。云南是我国天然橡胶最早的引种地，也是目前我国植胶大省之一，至2007年，云南天然橡胶历年累计为国家生产干胶339.7万吨产品(其中云南农垦238.7万吨)，为我国橡胶产业的发展和国防建设做出了巨大的贡献。近年来，随着我国经济的发展，特别是汽车工业和交通运输的迅速发展，对橡胶的消费量日越增加。作为我国植胶大省之一的云南省依然肩负着提升天然橡胶产业发展的重任，然而云南农垦橡胶树大部分是20世纪60～70年代种植的，胶园已进入老龄低产期，这些胶园需要及时更新，每年更新面积达到10万亩，这就对良种橡胶苗产生了巨大需求。

云南是非传统植胶区，地处热带北缘，受气候、环境的制约，很难通过扩大种植面积来提高产量。云南植胶50多年的实践证明，要想提高本省产胶量，只有加强科技创新，培育优良品种和高产抗寒的新品种以及新型种植材料，高效利用有限的宜植胶土地资源，提高单位面积产量。为了巩固和提升云南天然橡胶产业，云南省热带作物科学研究所根据当地独特的气候条件，已通过杂交育种手段选育出多个橡胶树优良品种，并经各级系比试验和生产性试种（不少品种已开割投产多年）鉴定，有些优良品种的生长、产量、抗性及副性状表现都已超过现生产上广为种植的某些引进品种。目前已有个别自育优良品种在云南大规模推广或中规模推广种植。

橡胶树籽苗芽接育苗是一项新的育苗技术，是由中国热带农业科学院橡胶研究所研究发明的一项芽接技术。与传统芽接桩育苗方法相比，可缩短育苗时间12~14个月，降低了育苗成本和劳动强度，同时提高了单位面积苗圃生产率。为了满足农户对良种橡胶苗的需求，云南省热带作物科学研究所于2002年开始与华南热科院橡胶所合作，引入了微型芽条籽苗芽接技术，进行籽苗芽接研究。利用增殖圃的大田芽条进行籽苗芽接，由于增殖圃的芽条太粗，难与种子苗砧木匹配，芽接成活率低；而利用组培快繁的试管苗粗细正好与种子苗砧木匹配，解决了接穗与砧木大小的问题，芽接成活率高。但是华南热科院橡胶所组培快繁的品种（热研7-33-97）属于高产抗风型品种，不适应云南省植胶区。此外，橡胶树的组织培养是木本植物中难度较大的树种之一，且品种之间组培难易也存在较大差异。因此，培育适合本省优良橡胶品种的组培快繁微型芽条已迫在眉睫。

发明内容

本发明的目的是提供一种橡胶树优良品种体胚植株幼态芽条培育方法，它是以云南省自育橡胶树优良品种云研73-477处于试管苗阶段的花药或胚珠诱导的体胚植株为外植体，用微繁技术培育幼态芽条，该方法能为籽苗芽接提供大量本省自育且已在省内大规模或中规模推广种植的橡胶树优良品种的优质穗条。

为了实现本发明的目的，本发明所述的橡胶树优良品种体胚植株微繁方法，包括如下步骤：

（1）芽的诱导过程：以云南省热带作物科学研究所自育橡胶树优良品种（云研73-477）处于试管苗阶段的花药或胚珠诱导的体胚植株为外植体，在无菌条件下，将体胚植株去叶，切成长度在2cm左右的茎尖、茎段及基部，分别接种在诱导培养基上于26～28℃温度下光培养35～40d；所述的诱导培养基是以改良MS为基本培养基，附加6-BA 0.5～2.0mg·L^-1，NAA0.2～0.4 mg·L^-1，蔗糖50～60g·L^-1，琼脂5～6g·L^-1，pH值5.8；

（2）芽的增殖和继代过程：将带有长度小于2cm新芽的茎尖、茎段和基部转接在增殖培养基上于26～28℃温度下光培养30～35d；所述的增殖培养基是以WPM（或MS）为基本培养基，附加6-BA 0.5～2.0mg·L^-1，NAA（IBA）0.2～0.4 mg·L^-1，蔗糖50～60g·L^-1，琼脂5～6g·L^-1， pH值5.8；

（3）芽条伸长壮苗培养过程：将长度在2cm左右的芽条接种在伸长壮苗培养基上于26～28℃温度下先光培养10～15d，再将其转入暗培养20～25d，待部分芽条长度达6.0～7.0cm时，转入光照下培养一周；所述的伸长壮苗培养基是以WPM（或MS）为基本培养基，附加6-BA0.5 ～1.0 mg·L^-1，NAA0.2～0.4 mg·L^-1，蔗糖50～60g·L^-1，琼脂5～6g·L^-1，pH值5.8。

本发明的有益效果

本发明以云南省中规模推广种植的自育橡胶树优良品种（云研73-477）的体胚植株为外植体，对该品种的推广具有重要作用。

本发明以幼龄花药或胚珠诱导的体胚植株为外植体，培育出的芽条为幼态，经籽苗芽接得到的芽接苗亦为幼态无性系，为云南省胶园的更新提供大量优质植胶材料。

本发明培育的幼态芽条和籽苗砧木大小相匹配，芽接时，不必剥去木质部，必要时对芽片两端稍加修整即可，提高了芽接速度和成活率，降低生产成本和劳动强度。

本发明培育幼态芽条的整个工艺均在人工化环境中完成的，不受季节和天气的影响，受空间的约束也小，常年可培育幼态芽条，在不宜进行籽苗芽接时，可通过诱导生根培育自根幼态无性系。

本发明工艺流程简单，生产成本低，培育的幼态芽条芽眼多，可用芽点多，繁殖速度较常规生产繁殖芽条快，为云南省提供大量自育橡胶树优良品种的优质接穗，有利于云南省自育橡胶树优良品种的推广，因此具有很大的应用价值。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明。

本发明所设计的橡胶树优良品种（云研73-477）体胚植株微繁方法包括芽的诱导过程、芽增殖和继代过程及芽条的伸长壮苗培养过程，具体步骤是：

（1）芽的诱导过程：以云南省热带作物科学研究所自育橡胶树优良品种（云研73-477）处于试管苗阶段的花药或胚珠诱导的体胚植株为外植体，在无菌条件下，将体胚植株去叶，切成长度在2cm左右的茎尖、茎段及基部，分别接种在诱导培养基上于26～28℃温度下光培养35～40d；所述的诱导培养基是以改良MS为基本培养基，附加6-BA 0.5～2.0mg·L^-1，NAA0.2～0.4 mg·L^-1，蔗糖60g·L^-1，琼脂5g·L^-1，pH值5.8；

（2）芽的增殖和继代过程：将带有长度小于2cm新芽的茎尖、茎段和基部转接在增殖培养基上于26～28℃温度下光培养30～35d；所述的增殖培养基是以WPM（或MS）为基本培养基，附加6-BA 0.5～2.0mg·L^-1，NAA（IBA）0.2～0.4 mg·L^-1，蔗糖60g·L^-1，琼脂6g·L^-1， pH值5.8；

（3）芽条伸长壮苗培养过程：将长度在2cm左右的芽条接种在伸长壮苗培养基上于26～28℃温度下先光培养10～15d，再将其转入暗培养20～25d，待部分芽条长度达6.0～7.0cm时，转入光照下培养一周；所述的伸长壮苗培养基是以WPM（或MS）为基本培养基，附加6-BA0.5 ～1.0 mg·L^-1，NAA0.2～0.4 mg·L^-1，蔗糖60g·L^-1，琼脂6g·L^-1，pH值5.8。

实施例

橡胶树优良品种体胚植株微繁方法，具体步骤是：

1芽的诱导过程：

（1）以云南省自育中规模推广种植的高产橡胶树品种云研73-477处于试管苗阶段的花药体胚植株为外植体；

（2）在无菌下，将体胚植株去叶，切成长度为2cm左右的带有1至2个腋芽的茎段或1cm左右的茎尖，余下的为基部，直立插入诱导培养基上，插入深度茎段约0.5cm左右，茎尖为0.3cm左右，基部为0.4cm左右，形态学上端向上。培养基的有效成分为改良MS（将MS基本培养基的大量元素下降至80%，其余不变）和附加成分，附加成分为6-BA 0.5～1.0mg·L^-1，NAA0.2～0.25 mg·L^-1，蔗糖60g·L^-1，pH值在高温高压灭菌前调至5.8，6g·L^-1琼脂固化；

（3）培养条件：温度为28℃，光照强度为500lx，光照时间为10h/d，培养40d。

2 芽的增殖继代过程：

（1）将带有长度小于2cm新芽的茎尖、茎段和基部转接在增殖培养基上于26～28℃温度下光培养30～35d；培养基的有效成分为WPM基本培养基和附加成分，附加成分为6-BA 0.5～1.0mg·L^-1，NAA0.2～0.4 mg·L^-1，GA₃1.0～4.0 mg·L^-1，蔗糖60g·L^-1，6g/L·L^-1琼脂固化；

（2）培养条件：温度为28℃，光照强度为500lx，光照时间为10h/d，培养35d。

3 芽条的壮苗过程：

（1）将长度在2cm左右的芽条接种在伸长壮苗培养基上，培养基的有效成分为WPM 基本培养基和附加成分，附加成分为6-BA 0.5～1.0mg·L^-1，NAA0.2～0.4 mg·L^-1，GA₃1.0～4.0 mg·L^-1，蔗糖60g·L^-1，6g·L^-1琼脂固化；

（2）培养条件：培养温度28℃，先在500lx光照下培养10～15d，芽条的顶芽开始抽出，将其转入暗培养20～25d后，部分芽条显著伸长，抽生长度达6.0～7.0cm，此时，将这些芽条转入光强为500lx下培养一周，芽条的茎干及叶片变绿。

Claims

1.橡胶树优良品种（云研73-477）体胚植株微繁方法，包括芽的诱导过程、芽的增殖和继代过程以及芽条的伸长壮苗培养过程，其特征在于：

（1）芽的诱导过程：以云南省热带作物科学研究所自育橡胶树优良品种处于试管苗阶段的花药或胚珠诱导的体胚植株为外植体，在无菌条件下，将体胚植株去叶，切成长度在2cm左右的茎尖、茎段及基部，分别接种在诱导培养基上于26～28℃温度下光培养35～40d；所述的诱导培养基是以改良MS为基本培养基，附加6-BA 0.5～2.0mg·L^-1，NAA0.2～0.4 mg·L^-1，蔗糖50～60g·L^-1，琼脂5～6g·L^-1，pH值5.8；

（3）芽条伸长壮苗培养过程：将长度在2cm左右的芽条接种在伸长壮苗培养基上于26～28℃温度下先光培养10～15d，再将其转入暗培养20～25d，待部分芽条的长度达6.0～7.0cm时，在转入光照下培养一周；所述的伸长壮苗培养基是以WPM（或MS）为基本培养基，附加6-BA0.5 ～1.0 mg·L^-1，NAA0.2～0.4 mg·L^-1，蔗糖50～60g·L^-1，琼脂5～6g·L^-1，pH值5.8。

2.根据权利要求1所述的橡胶树优良品种体胚植株微繁方法，其特征在于：所述的改良MS培养基是指将MS基本培养基的大量元素下降至80%，其余同MS。