CN103110656A - 一种注射用水溶性维生素冻干制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种注射用水溶性维生素冻干制剂，所述冻干制剂由包含如下组分的原料制备成1000瓶：硝酸硫胺2.8-3.4g；烟酰胺36-44g；盐酸吡哆辛4.4-5.4g；泛酸钠化合物14.8-18.1g；核黄素磷酸钠4.4-5.4g；维生素C钠102-124g；生物素54-66mg；叶酸0.36-0.44g；维生素B124.5-6.0mg；对羟基苯甲酸甲酯0.4-0.6g；甘氨酸280-320g；乙二胺四乙酸二钠0.4-0.6g；注射用水2000-3000ml。本发明所得泛酸钠钠化合物显著提高了现有泛酸钠的稳定性，从而确保含有泛酸钠的注射用水溶性微生物冻干制剂具有理想的稳定性和疗效，进一步保证了患者的用药安全。

Description

一种注射用水溶性维生素冻干制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种注射用水溶性维生素冻干制剂及其制备方法。 

背景技术

维生素是维持人类机体正常代谢功能所必须的微量营养物质，主要作用于机体的能量转移和代谢调节，它作为体内数十种辅酶的组成成分，对于催化碳水化合物、脂类及蛋白质代谢的酶类至关重要，对于药物代谢、自由基的捕获、防止细胞损伤及细胞膜的过氧化反应也是必需的。由于人体内不能合成或合成量很少，必须定量定时从食物中获取。而仿制注射用水溶性维生素在临床上主要用于水溶性维生素缺乏的预防和治疗。注射用冻干粉针稳定性好，保存期长，较注射液更便于贮存和运输。 

注射用水溶性维生素由于成分较多，长时间放置，部分成分容易氧化，产生不溶性可见异物和杂质，影响药品质量，降低疗效。冻干剂在大输液等水溶液中也不稳定，影响产品质量和疗效。 

由于常规注射用水溶性维生素不太稳定，因而需遮光，密封，在低温下保存，以保证产品质量，而且随保藏时间延长，常规注射用水溶性维生素内杂质会增加，从而明显影响了产品质量，降低了药品的安全性和可靠性。 

现有技术公开了多种注射用水溶性维生素制剂，如专利号为200710019642.6，CN101007018A的发明申请、中国申请200810162698.1和中国申请200510057306.1等。上述现有技术中为了改善水溶性维生素的温度性通常都是通过优化制备方法，添加赋形剂等方式，而从未见有对水溶性维生素原料本身进行的相关研究，如何通过改善原料来提高制剂的稳定性一直是行内难以攻克的技术问题。中国专利ZL201010223328.1公开了一种全新制剂，该制剂中烟酰胺为烟酰胺水合物、泛酸钠为泛酸钠水合物。该申请通过特殊的制备方法得到全新的烟酰胺和泛酸钠化合物，以进一步改善整体制剂的稳定性。但实际应用过程中发现，上述水合物的制备工艺并不稳定，再现性不强，难以推广化应用。此外，在冻干过程中，上述水合物中的水分子容易发生丢失，丢失水 分子后的晶体质量不够稳定，会出现彻底失去结晶水后得到与其原料一致的烟酰胺和泛酸钠从而无法保证制剂的稳定性。因此，依然有待于提出新的技术方案来解决注射用水溶性维生素的稳定性和疗效问题。 

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种注射用水溶性维生素组合物冻干制剂。为实现发明目的，本发明采用如下技术方案： 

一种注射用水溶性维生素冻干制剂，所述冻干制剂由包含如下组分的原料制备成1000瓶：硝酸硫胺2.8-3.4g；烟酰胺36-44g；盐酸吡哆辛4.4-5.4g；泛酸钠化合物14.8-18.1g；核黄素磷酸钠4.4-5.4g；维生素C钠102-124g；生物素54-66mg；叶酸0.36-0.44g；维生素B124.5-6.0mg；对羟基苯甲酸甲酯0.4-0.6g；甘氨酸280-320g；乙二胺四乙酸二钠0.4-0.6g；注射用水2000-3000ml；其中，所述泛酸钠用粉末X射线衍射测定法测定，以2θ±0.2°衍射角表示的X射线粉末衍射图谱在6.02°、9.08°、9.92°、12.16°、12.63°、13.01°、14.93°、18.95°、20.20°、20.96°、22.81°、23.40°、24.16°、26.41°、29.39°、32.11°、33.93°、37.28°和40.72°处显示出特征衍射峰。 

进一步地，本发明优选所述冻干制剂由包含如下组分的原料制备成1000瓶：硝酸硫胺3.1g；烟酰胺化合物40g；盐酸吡哆辛（维生素B₆）4.9g；泛酸钠化合物16.5g；核黄素磷酸钠4.9g；维生素C钠113g；生物素60mg；叶酸0.4g；维生素B₁₂5.0mg；对羟基苯甲酸甲酯0.5g；甘氨酸300g；乙二胺四乙酸二钠0.5g；注射用水2500ml。 

本发明得到了一种全新的泛酸钠化合物，该化合物与现有技术公开的泛酸钠具有不同的结构，采用粉末X射线衍射测定法测定，具有不同的X射线粉末衍射图。可见本发明得到的是一种全新的泛酸钠化合物。该泛酸钠化合物本身及其制剂在稳定性试验等均表现出显著优于现有泛酸钠化合物的优势。由于泛酸钠化合物能够显著改善制剂的稳定性，这就能够保障患者的用药安全。经热重分析确定本发明所得泛酸钠化合物不带结晶水分子，为无水化合物。 

本发明所述泛酸钠化合物熔点为155-161℃。 

此外，为了获得一种成熟的，可重复实现并工业化推广应用的重结晶方法，发明人对此做了大量针对性试验，进一步优化了各操作步骤，使所述的制备方法能够稳定地实现，获得均一的高质量泛酸钠化合物。 

本发明所述泛酸钠化合物采用如下方法制备而成： 

（1）取市售的泛酸钠粗品，加入相当于泛酸钠粗品重量30~45倍的水，45-55℃下搅拌溶解后，真空减压浓缩至原体积的1/4~1/6； 

（2）向溶液中加入活性碳脱色，过滤； 

（3）向滤液中搅拌匀速流加体积为所述溶液1/5~1/3的乙醇：乙醚混合溶液；流加的同时以1.5~2.5℃/min的速度将滤液降温至10~15℃； 

（4）停止搅拌，在20~40min内使溶液降温至0~5℃，并置于超声场下静置养晶6~12小时，过滤，滤饼用乙醚洗涤，干燥，得所述的泛酸钠化合物。 

本发明采用重结晶法制备所述泛酸钠晶体，其中，利用泛酸钠在不同溶剂中溶解度的差异，先将市售的泛酸钠粗品溶于水中，形成低浓度的泛酸钠溶液，溶解过程中适度升温，使泛酸钠充分溶解并形成稳定体系。再通过真空减压浓缩挥发部分溶剂以便于晶体的析出。本发明采用乙醇与乙醚作为复合溶剂，通过确定复合溶剂中二者适宜的比例、以及合理的降温速度使整个体系的重结晶过程得到最理想化实现。此外，本发明进一步引入超声场进行重结晶，不但加快了重结晶的速度，同时还能进一步保证晶体的质量，提高其纯度和收率。 

进一步地，本发明所述的方法，所述步骤1中，真空减压浓缩在60℃以下进行，真空度为0.06~0.08兆帕。 

本发明所述的方法，步骤2中，活性碳的用量为泛酸钠粗品重量的0.05~0.1倍，优选0.08倍，能够起到最理想的吸附除杂效果。 

本发明所述的方法，步骤3中，乙醇：乙醚混合溶液中乙醇和乙醚的体积为1:5~1:12，优选1:8。优选的，步骤3中所述的搅拌速度为6~12rmp的低速搅拌，该速度一方面有利于引导和促进晶体的析出，另一方面尽量避免对已析出的晶体的质量产生影响。 

本发明所述的方法，步骤4中超声频率为0.1-0.3KW。 

本发明的第二目的在于提高一种上述冻干制剂的制备方法，并采用如下技术方案： 

上述冻干制剂采用如下方法制备： 

（1）将50-70%处方量的38-42℃的注射用水加入浓配罐，充入氮气； 

（2）分别加入处方量的甘氨酸、对羟基苯甲酸甲酯、乙二胺四乙酸二钠溶解并充入氮气； 

（3）依次用适量注射用水将核黄素磷酸钠、烟酰胺、硝酸硫胺、盐酸吡哆 辛、泛酸钠、叶酸、维生素C钠、生物素、维生素B₁₂溶解后加入浓配罐搅拌均匀，所述的适量以满足溶解的程度为准； 

（4）用pH调节剂将pH值调至5.6-6.1，补充注射用水至全量； 

（5）向浓配罐中加入重量相当于总体积0.08-0.12%的湿润活性炭；控制药液温度不超过30℃，搅拌吸附20-40min，经0.45μm微孔滤膜过滤至稀配罐； 

（6）稀配罐充入氮气，对中间体进行检测； 

（7）中间体检测合格后，经双级0.22μm微孔滤膜精滤至灌封间待灌封； 

（8）罐装，半加塞，冷冻干燥； 

（9）轧盖、灯检，包装即得。 

其中，步骤8所述的冷冻干燥为： 

1、将板温设置在-45℃以下； 

2、加热板层，在45-75分钟内缓慢升温至-20℃，再在45-75分钟内降至-45； 

3、在2-3小时内将温度升至0℃；在4-6小时内继续升温至25℃； 

4、在1-2小时内继续升温至40℃，保温4-7小时，即得。 

采用上述技术方案，本发明具有如下有益效果： 

上述步骤中，升温或者降温速度可视具体情况掌握，最好是采用匀速升温或降温的方式。上述冻干过程是发明人在大量实验研究的基础上确定的，所述冻干过程时间短至16小时，能耗低，易于操作，但得到的冻干粉针无论从复溶性方面还是稳定性方面较现有技术均得到了显著提高。 

采用上述技术方案，本发明所得泛酸钠钠化合物显著提高了现有泛酸钠的稳定性，从而确保含有泛酸钠的注射用水溶性微生物冻干制剂具有理想的稳定性和疗效，进一步保证了患者的用药安全。此外，本发明所述的泛酸钠化合物易于制备，且性质稳定，便于推广实施。 

附图说明

图1本发明所述泛酸钠化合物的X射线粉末衍射图。 

具体实施方式

实施例1  泛酸钠化合物的制备 

（1）取市售的泛酸钠粗品，加入相当于泛酸钠粗品重量40倍的水，50℃ 下搅拌溶解后，真空减压浓缩至原体积的1/5；其中，真空减压浓缩在60℃以下进行，真空度为0.07兆帕； 

（2）向溶液中加入泛酸钠粗品重量的0.08倍的活性碳脱色，过滤； 

（3）向滤液中搅拌匀速流加体积为所述溶液1/4的乙醇：乙醚混合溶液；所述乙醇：乙醚混合溶液中乙醇和乙醚的体积为1:8，流加的同时以2℃/min的速度将滤液降温至12℃；其中，搅拌速度为8rmp； 

（4）停止搅拌，在30min内使溶液匀速降温至2℃，并置于超声场下静置养晶8小时，超声频率为0.2KW，过滤，滤饼用乙醚洗涤，干燥，得所述的泛酸钠化合物。 

所得泛酸钠化合物的X射线粉末衍射图见图1。 

实施例2  泛酸钠化合物的制备 

（1）取市售的泛酸钠粗品，加入相当于泛酸钠粗品重量30倍的水，45℃下搅拌溶解后，真空减压浓缩至原体积的1/4；其中，真空减压浓缩在60℃以下进行，真空度为0.06兆帕； 

（2）向溶液中加入泛酸钠粗品重量的0.05倍的活性碳脱色，过滤； 

（3）向滤液中搅拌匀速流加体积为所述溶液1/5的乙醇：乙醚混合溶液；所述乙醇：乙醚混合溶液中乙醇和乙醚的体积为1:5，流加的同时以1.5℃/min的速度将滤液降温至10℃；其中，搅拌速度为6rmp； 

（4）停止搅拌，在20min内使溶液降温至0℃，并置于超声场下静置养晶6小时，超声频率为0.1KW，过滤，滤饼用乙醚洗涤，干燥，得所述的泛酸钠化合物。所得泛酸钠化合物的X射线粉末衍射图见图1。 

实施例3  泛酸钠化合物的制备 

（1）取市售的泛酸钠粗品，加入相当于泛酸钠粗品重量45倍的水，55℃下搅拌溶解后，真空减压浓缩至原体积的1/6；其中，真空减压浓缩在60℃以下进行，真空度为0.08兆帕； 

（2）向溶液中加入泛酸钠粗品重量的0.1倍的活性碳脱色，过滤； 

（3）向滤液中搅拌匀速流加体积为所述溶液1/3的乙醇：乙醚混合溶液；所述乙醇：乙醚混合溶液中乙醇和乙醚的体积为1:12流加的同时以2.5℃/min的速度将滤液降温至15℃；其中，搅拌速度为12rmp； 

（4）停止搅拌，在40min内使溶液降温至5℃，并置于超声场下静置养晶12小时，超声频率为0.3KW，过滤，滤饼用乙醚洗涤，干燥，得所述的泛酸钠 化合物。所得泛酸钠化合物的X射线粉末衍射图见图1。 

实施例4  泛酸钠化合物的制备 

（1）取市售的泛酸钠粗品，加入相当于泛酸钠粗品重量38倍的水，48℃下搅拌溶解后，真空减压浓缩至原体积的1/6；其中，真空减压浓缩在60℃以下进行，真空度为0.07兆帕； 

（2）向溶液中加入泛酸钠粗品重量的0.06倍的活性碳脱色，过滤； 

（3）向滤液中搅拌匀速流加体积为所述溶液1/5的乙醇：乙醚混合溶液；所述乙醇：乙醚混合溶液中乙醇和乙醚的体积为1:5。流加的同时以2.5℃/min的速度将滤液降温至10℃；其中，搅拌速度为9rmp； 

（4）停止搅拌，在25min内使溶液降温至4℃，并置于超声场下静置养晶9小时，超声频率为0.25KW，过滤，滤饼用乙醚洗涤，干燥，得所述的泛酸钠化合物。所得泛酸钠化合物的X射线粉末衍射图见图1。 

实施例5  泛酸钠化合物的制备 

（1）取市售的泛酸钠粗品，加入相当于泛酸钠粗品重量32倍的水，52℃下搅拌溶解后，真空减压浓缩至原体积的1/5；其中，真空减压浓缩在60℃以下进行，真空度为0.06兆帕； 

（2）向溶液中加入泛酸钠粗品重量的0.09倍的活性碳脱色，过滤； 

（3）向滤液中搅拌匀速流加体积为所述溶液1/5的乙醇：乙醚混合溶液；所述乙醇：乙醚混合溶液中乙醇和乙醚的体积为1:8，流加的同时以2.5℃/min的速度将滤液降温至11℃；其中，搅拌速度为11rmp； 

（4）停止搅拌，在32min内使溶液降温至3℃，并置于超声场下静置养晶10小时，超声频率为0.15KW，过滤，滤饼用乙醚洗涤，干燥，得所述的泛酸钠化合物。所得泛酸钠化合物的X射线粉末衍射图见图1。 

实施例6  泛酸钠化合物的制备 

（1）取市售的泛酸钠粗品，加入相当于泛酸钠粗品重量35倍的水，55℃下搅拌溶解后，真空减压浓缩至原体积的1/4；其中，真空减压浓缩在60℃以下进行，真空度为0.06兆帕； 

（2）向溶液中加入泛酸钠粗品重量的0.07倍的活性碳脱色，过滤； 

（3）向滤液中搅拌匀速流加体积为所述溶液1/4的乙醇：乙醚混合溶液；所述乙醇：乙醚混合溶液中乙醇和乙醚的体积为1:10；流加的同时以2℃/min的速度将滤液降温至13℃；其中，搅拌速度为7rmp； 

（4）停止搅拌，在28min内使溶液降温至4℃，并置于超声场下静置养晶10小时，超声频率为0.3KW，过滤，滤饼用乙醚洗涤，干燥，得所述的泛酸钠化合物。所得泛酸钠化合物的X射线粉末衍射图见图1。 

实施例7  泛酸钠化合物的制备 

（1）取市售的泛酸钠粗品，加入相当于泛酸钠粗品重量42倍的水，50℃下搅拌溶解后，真空减压浓缩至原体积的1/6；其中，真空减压浓缩在60℃以下进行，真空度为0.07兆帕； 

（2）向溶液中加入泛酸钠粗品重量的0.08倍的活性碳脱色，过滤； 

（3）向滤液中搅拌匀速流加体积为所述溶液1/4的乙醇：乙醚混合溶液；所述乙醇：乙醚混合溶液中乙醇和乙醚的体积为1:12，流加的同时以2℃/min的速度将滤液降温至12℃；其中，搅拌速度为8rmp； 

（4）停止搅拌，在28min内使溶液降温至4℃，并置于超声场下静置养晶10小时，超声频率为0.3KW，过滤，滤饼用乙醚洗涤，干燥，得所述的泛酸钠化合物。所得泛酸钠化合物的X射线粉末衍射图见图1。 

实施例8  冻干制剂的制备 

准确称量下列原料： 

硝酸硫胺3.1g；烟酰胺40g；盐酸吡哆辛4.9g；泛酸钠化合物（实施例1制备）16.5g；核黄素磷酸钠4.9g；维生素C钠113g；生物素60mg；叶酸0.4g；维生素B₁₂5.0mg；对羟基苯甲酸甲酯0.5g；甘氨酸300g；乙二胺四乙酸二钠0.5g；注射用水2500ml 

制备方法如下： 

（1）将60%处方量的40℃的注射用水加入浓配罐，充入氮气； 

（2）分别加入处方量的甘氨酸、对羟基苯甲酸甲酯、乙二胺四乙酸二钠溶解并充入氮气； 

（3）依次用适量注射用水将核黄素磷酸钠、烟酰胺、硝酸硫胺、盐酸吡哆辛、泛酸钠、叶酸、维生素C钠、生物素、维生素B₁₂溶解后加入浓配罐搅拌均匀，所述的适量以满足溶解的程度为准； 

（4）用pH调节剂将pH值调至5.8，补充注射用水至全量； 

（5）向浓配罐中加入重量相当于总体积0.1%的湿润活性炭；控制药液温度不超过30℃，搅拌吸附30min，经0.45μm微孔滤膜过滤至稀配罐； 

（6）稀配罐充入氮气，对中间体进行检测； 

（7）中间体检测合格后，经双级0.22μm微孔滤膜精滤至灌封间待灌封； 

（8）罐装，半加塞，冷冻干燥； 

（9）轧盖、灯检，包装即得。 

其中，步骤8所述的冷冻干燥为： 

1.将板温设置在-45℃以下； 

2.加热板层，在1小时内缓慢升温至-20℃，再1小时内匀速降至-45； 

3.在2.5小时内将温度匀速升至0℃；在5小时内继续匀速升温至25℃； 

4.在1.5小时内继续升温至40℃，保温5小时，即得。 

实施例9  冻干制剂的制备 

准确称量下列原料： 

硝酸硫胺2.8g；烟酰胺36g；盐酸吡哆辛4.4g；泛酸钠（实施例1所制备）14.8g；核黄素磷酸钠4.4g；维生素C钠102g；生物素54mg；叶酸0.36g；维生素B₁₂4.5mg；对羟基苯甲酸甲酯0.4g；甘氨酸280g；乙二胺四乙酸二钠0.4g；注射用水2000ml 

制备方法： 

（1）将50%处方量的38℃的注射用水加入浓配罐，充入氮气； 

（2）分别加入处方量的甘氨酸、对羟基苯甲酸甲酯、乙二胺四乙酸二钠溶解并充入氮气； 

（3）依次用适量注射用水将核黄素磷酸钠、烟酰胺、硝酸硫胺、盐酸吡哆辛、泛酸钠、叶酸、维生素C钠、生物素、维生素B₁₂溶解后加入浓配罐搅拌均匀，所述的适量以满足溶解的程度为准； 

（4）用pH调节剂将pH值调至5.6，补充注射用水至全量； 

（5）向浓配罐中加入重量相当于总体积0.08%的湿润活性炭；控制药液温度不超过30℃，搅拌吸附20min，经0.45μm微孔滤膜过滤至稀配罐； 

（6）稀配罐充入氮气，对中间体进行检测； 

（7）中间体检测合格后，经双级0.22μm微孔滤膜精滤至灌封间待灌封； 

（8）罐装，半加塞，冷冻干燥； 

（9）轧盖、灯检，包装即得。 

其中，步骤8所述的冷冻干燥为： 

1.将板温设置在-45℃以下； 

2.加热板层，在45分钟内缓慢升温至-20℃，再在75分钟内降至-45； 

3.在2小时内将温度升至0℃；在6小时内继续升温至25℃； 

4.在1小时内继续升温至40℃，保温7小时，即得。 

实施例10  冻干制剂的制备 

准确称量下列原料： 

硝酸硫胺3.4g；烟酰胺44g；盐酸吡哆辛5.4g；泛酸钠（实施例3所制备）18.1g；核黄素磷酸钠5.4g；维生素C钠124g；生物素66mg；叶酸0.44g；维生素B₁₂6.0mg；对羟基苯甲酸甲酯0.6g；甘氨酸320g；乙二胺四乙酸二钠0.6g；注射用水3000ml； 

制备方法如下： 

（1）将70%处方量的42℃的注射用水加入浓配罐，充入氮气； 

（2）分别加入处方量的甘氨酸、对羟基苯甲酸甲酯、乙二胺四乙酸二钠溶解并充入氮气； 

（3）依次用适量注射用水将核黄素磷酸钠、烟酰胺、硝酸硫胺、盐酸吡哆辛、泛酸钠、叶酸、维生素C钠、生物素、维生素B₁₂溶解后加入浓配罐搅拌均匀，所述的适量以满足溶解的程度为准； 

（4）用pH调节剂将pH值调至6.1，补充注射用水至全量； 

（5）向浓配罐中加入重量相当于总体积0.12%的湿润活性炭；控制药液温度不超过30℃，搅拌吸附40min，经0.45μm微孔滤膜过滤至稀配罐； 

（6）稀配罐充入氮气，对中间体进行检测； 

（7）中间体检测合格后，经双级0.22μm微孔滤膜精滤至灌封间待灌封； 

（8）罐装，半加塞，冷冻干燥； 

（9）轧盖、灯检，包装即得。 

其中，步骤8所述的冷冻干燥为： 

1.将板温设置在-45℃以下； 

2.加热板层，在75分钟内缓慢升温至-20℃，再在45分钟内降至-45； 

3.在3小时内将温度升至0℃；在4小时内继续升温至25℃； 

4.在2小时内继续升温至40℃，保温4小时，即得。 

实施例11  冻干制剂的制备 

准确称量下列原料： 

硝酸硫胺3.0g；烟酰胺物41g；盐酸吡哆辛4.9g；泛酸钠（实施例3所制备）17.1g；核黄素磷酸钠4.9g；维生素C钠118g；生物素59mg；叶酸0.42g； 维生素B₁₂5.2mg；对羟基苯甲酸甲酯0.5g；甘氨酸300g；乙二胺四乙酸二钠0.5g；注射用水2800ml； 

制备方法同实施例8。 

实施例12  冻干制剂的制备 

准确称量下列原料： 

硝酸硫胺2.9g；烟酰胺37g；盐酸吡哆辛4.6g；泛酸钠（实施例4所制备）15.8g；核黄素磷酸钠4.8g；维生素C钠114g；生物素58mg；叶酸0.38g；维生素B₁₂5.2mg；对羟基苯甲酸甲酯0.4g；甘氨酸310g；乙二胺四乙酸二钠0.45g；注射用水2600ml； 

制备方法同实施例8。 

本发明还进一步提供如下试验例，以对本发明效果做进一步说明： 

试验例1泛酸钠化合物稳定性研究 

本发明还进一步提供如下试验例，以进一步对本发明的技术方案进行说明。 

试验例1泛酸钠化合物稳定性试验 

本试验例检测了本发明所提供的泛酸钠化合物的稳定性（试验结果均以各试验组泛酸钠重量计算）。 

试验对象： 

实验组1：本发明实施例1； 

实验组2：本发明实施例3； 

实验组3：本发明实施例5； 

对照组1为市售泛酸钠粗品（即实施例1所用原料），HPLC纯99.62％； 

本试验可以采用现有技术公开的任意方法来检测泛酸钠化合物，本发明对此不作特别限定，具体的选择为本领域技术人员所掌握。本发明即按照中国药典2005版第二部附录公开的药物稳定性试验指导原则进行，结果如下： 

表1、加速试验结果 

	1个月	2个月	3个月	6个月	12个月
						1	99.95％	99.80％	99.69％	99.59％	99.26％
2	99.94％	99.78％	99.65％	99.54％	99.18％
						3	99.92％	99.81％	99.63％	99.50％	99.10％

[0153] 

4

99.80％

98.48％

97.06％

94.00％

86.68％

表2、长期试验结果 

	3个月	6个月	9个月	12个月	18个月
						1	99.94％	99.86％	99.79％	99.68％	99.38％
2	99.90％	99.80％	99.70％	99.58％	99.28％
						3	99.92％	99.83％	99.72％	99.55％	99.29％
4	99.69％	99.01％	97.52％	95.02％	86.73％

上述试验结果表明，本发明所述的泛酸钠化合物在加速试验和长期试验中均表现出良好的稳定性，而现有市售的泛酸钠原料虽然在加速试验的1-2月，以及长期试验中3个月内含量也高达99%以上，但其受环境影响较大，加速试验12个月后低至86.68%，长期试验18个月后含量为86.73%，稳定性明显不及本发明化合物，其中，以实施例1的效果最佳。 

试验例2注射用水溶性维生素稳定性试验（实施例8） 

1．样品来源 

其中，对照组与实施例8的区别仅在于，泛酸钠采用市售的泛酸钠原料，即实施例1中用于制备本发明所述泛酸钠化合物的起始原料。 

2．考察项目及操作方法 

2.1性状：目视法。 

2.2酸碱度：取试验药品1瓶，加水10ml溶解，依法测定（中国药典2005年版二部附录ⅥH），pH值应为5.6～6.1。 

2.3可见异物：取试验药品，依法检查（中国药典2005年版二部附录ⅨH及可见异物检查法补充规定）。 

2.4含量测定：试验药品含量测定，照高效液相色谱法（中国药典2005年版二部附录ⅤD）进行测定。参照部颁国家药品标准（二部）第五册第44～46页注射用水溶性维生素的质量标准检查项中含量测定项下的色谱条件，其含量测定方法如下： 

烟酰胺、盐酸吡哆辛、硝酸硫胺、泛酸钠、维生素Ｃ钠和核黄素磷酸钠的测定。 

色谱条件与系统适用性试验用氨基键合多孔硅胶为填料，以（0.02mol/L）磷酸二氢钾溶液-乙腈（27∶73），用10%盐酸溶液调节pH为5.3的溶液为流动相，流速为1.5ml/min，检测波长：烟酰胺、盐酸吡哆辛、硝酸硫胺、泛酸钠、维生素C钠为214nm；核黄素磷酸钠用萤光检测λ_EX＝445nm、λ_EM＝520nm。各组分的分离度应符合要求。 

对照品溶液的制备  （1）取烟酰胺对照品约150mg、硝酸硫胺对照品约12mg、盐酸吡哆辛对照品约18mg、泛酸钠对照品约62mg，分别精密称量置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度摇匀，精密量取2ml置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液（Ⅰ），此溶液置暗处充氮气于零下20℃可保存1个月。 

（2）取维生素C钠对照品约425mg、核黄素磷酸钠对照品约19mg，精密称定，置50ml量瓶中加水溶解并稀释至刻度摇匀，精密量取2ml置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀即为对照品溶液（Ⅱ），此溶液必须临用新鲜配制，并于零下20℃保存，用前放置至室温。 

等容混合对照品溶液（Ⅰ）和对照品溶液（Ⅱ）即为对照品溶液。 

供试品溶液的制备  取装量差异项下的内容物约2瓶重量，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml置200ml量瓶中，用流动相稀释至刻度。 

测定法  取对照品溶液和供试品溶液各10μl，交替注入液相色谱仪，测定，用外标法计算各组分含量，即得。 

叶酸、生物素和对羟基苯甲酸甲酯的测定。 

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，磷酸二氢钾缓冲液（精密称取磷酸二氢钾（KH₂PO₄）2.27g和磷酸0.96g，加水溶解并稀释至5000ml）-乙腈（93∶7）用磷酸调节pH值至3.0为流动相，流速为1.5ml/min，柱温30℃，检测波长为200nm，各组分分离度应符合要求。 

对照品溶液的制备  取叶酸对照品约32mg、生物素对照品约12mg及对羟基苯甲酸甲酯对照品约20mg，精密称定，分别置100ml量瓶中，叶酸用（2mmol/L）氢氧化钠溶液溶解并稀释至刻度，生物素和对羟基苯甲酸甲酯用乙醇-水（1:3）混合液溶解并稀释至刻度。 

精密量取叶酸对照品溶液5ml、生物素对照品溶液2ml及对羟基苯甲酸甲酯对照品溶液10ml置100ml量瓶中，加水至刻度，即为对照品溶液。 

供试品溶液的制备  取装量差异项下的内容物约1瓶重量，精密称定，置25ml量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀即得。 

测定法  取对照品溶液和供试品溶液各20μl，交替注入液相色谱仪，测定，用外标法计算各组分含量，即得。 

维生素B₁₂的测定。 

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填料。 

梯度洗脱  流动相A  精密称取磷酸氢二钾0.87g，磷酸二氢钾0.41g，用水溶解后加乙腈125ml，用水稀释至1000ml，pH值为7.5。 

流动相B  水－乙腈－磷酸（499∶499∶2）。 

检测波长360nm，柱温40℃，维生素B12与未知峰之间的分离度应大于1.0。 

对照品溶液的制备  取维生素B₁₂对照品约25mg，精密称定，置250ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1ml置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。 

供试品溶液的制备  取试验药品5瓶，用适量水溶解后转移25ml量瓶中，用水稀释至刻度摇匀即得。 

测定法  取对照品溶液和供试品溶液各30μl，交替注入液相色谱仪，测定，用外标法计算，即得。 

3．加速试验 

3.1试验方法 

将三批试验药品，在相对湿度75%±5%、40℃±2℃的条件下放置6个月。并分别于0、1、2、3、6月末取样一次，按上述考察项目及方法检测，结果见表3。 

3.2试验结果 

试验药品在市售包装条件下，经6个月加速试验，考察项目未发生明显变化，且都在合格范围内。 

4．长期试验 

4.1试验方法 

将三批试验药品，置冷库（＜15℃的条件下）放置，并分别于第3、6、9、12、18、24、30、36、42月末取样，按上述考察项目及方法检测，结果见表4。 

4.2试验结果 

试验药品在市售包装条件下，长期考察42个月，考察项都在合格范围内。 

表3注射用水溶性维生素加速试验结果(75%±5%、40℃±2℃) 

表4注射用水溶性维生素长期试验结果(＜15℃) 

5．试验结论 

从加速试验的结果来看，本发明所述制剂在高温高湿的环境中，所有考察项目的变化，都在合格范围内。在长期留样中，所有考察项目的变化，都在合格范围内。但长期试验中，36个月后各组分的含量虽然也在合格范围内，但含量的变化相对较为显著，因此，本发明所述制剂的保质期以36个月为宜。而对照组的稳定性整体明显不如本发明的冻干制剂，尤其是泛酸钠化合物，可见本发明对原料本身的改进及对冻干工艺的优化调整都能有助于提高制剂的稳定性从而确保患者的用药安全。 

本发明其他实施例产品也都做了类似的实验，具有和上述表格数据相似的趋势。由于篇幅所限，发明人不再一一列举。 

Claims (10)

1.一种注射用水溶性维生素冻干制剂，其特征在于：所述冻干制剂由包含如下组分的原料制备成1000瓶：硝酸硫胺2.8-3.4g；烟酰胺36-44g；盐酸吡哆辛4.4-5.4g；泛酸钠化合物14.8-18.1g；核黄素磷酸钠4.4-5.4g；维生素C钠102-124g；生物素54-66mg；叶酸0.36-0.44g；维生素B124.5-6.0mg；对羟基苯甲酸甲酯0.4-0.6g；甘氨酸280-320g；乙二胺四乙酸二钠0.4-0.6g；注射用水2000-3000ml；其中，所述泛酸钠用粉末X射线衍射测定法测定，以2θ±0.2°衍射角表示的X射线粉末衍射图谱在6.02°、9.08°、9.92°、12.16°、12.63°、13.01°、14.93°、18.95°、20.20°、20.96°、22.81°、23.40°、24.16°、26.41°、29.39°、32.11°、33.93°、37.28°和40.72°处显示出特征衍射峰。

2.根据权利要求1所述的冻干制剂，其特征在于，所述冻干制剂由包含如下组分的原料制备成1000瓶：硝酸硫胺3.1g；烟酰胺化合物40g；盐酸吡哆辛4.9g；泛酸钠化合物16.5g；核黄素磷酸钠4.9g；维生素C钠113g；生物素60mg；叶酸0.4g；维生素B125.0mg；对羟基苯甲酸甲酯0.5g；甘氨酸300g；乙二胺四乙酸二钠0.5g；注射用水2500ml。

3.根据权利要求1或2所述的冻干制剂，其特征在于，所述泛酸钠化合物采用如下方法制备而成：

（1）取市售的泛酸钠粗品，加入相当于泛酸钠粗品重量30~45倍的水，45-55℃下搅拌溶解后，真空减压浓缩至原体积的1/4~1/6；

（2）向溶液中加入活性碳脱色，过滤；

（3）向滤液中搅拌匀速流加体积为所述溶液1/5~1/3的乙醇：乙醚混合溶液；流加的同时以1.5~2.5℃/min的速度将滤液降温至10~15℃；

（4）停止搅拌，在20~40min内使溶液降温至0~5℃，并置于超声场下静置养晶6~12小时，过滤，滤饼用乙醚洗涤，干燥，得所述的泛酸钠化合物。

4.根据权利要求3所述的冻干制剂，其特征在于，所述步骤1中，真空减压浓缩在60℃以下进行，真空度为0.06~0.08兆帕。

5.根据权利要求3所述的冻干制剂，其特征在于，所述步骤2中，活性碳的用量为泛酸钠粗品重量的0.05~0.1倍。

6.根据权利要求3所述的冻干制剂，其特征在于，所述步骤3中，所述乙醇：乙醚混合溶液中乙醇和乙醚的体积为1:5~1:12，搅拌速度为6~12rmp。

7.根据权利要求3所述的冻干制剂，其特征在于，所述步骤4中超声频率为0.1-0.3KW。

8.权利要求1-7任一项所述冻干制剂的制备方法，包括如下步骤：

（1）将50-70%处方量的38-42℃的注射用水加入浓配罐，充入氮气；

（2）分别加入处方量的甘氨酸、对羟基苯甲酸甲酯、乙二胺四乙酸二钠溶解并充入氮气；

（3）依次用适量注射用水将核黄素磷酸钠、烟酰胺、硝酸硫胺、盐酸吡哆辛、泛酸钠、叶酸、维生素C钠、生物素、维生素B₁₂溶解后加入浓配罐搅拌均匀，所述的适量以满足溶解的程度为准；

（4）用pH调节剂将pH值调至5.6-6.1，补充注射用水至全量；

（5）向浓配罐中加入重量相当于总体积0.08-0.12%的湿润活性炭；控制药液温度不超过30℃，搅拌吸附20-40min，经0.45μm微孔滤膜过滤至稀配罐；

（6）稀配罐充入氮气，对中间体进行检测；

（7）中间体检测合格后，经双级0.22μm微孔滤膜精滤至灌封间待灌封；

（8）罐装，半加塞，冷冻干燥；

（9）轧盖、灯检，包装即得。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述的冷冻干燥为：

（1）将板温设置在-45℃以下；

（2）加热板层，在45-75分钟内缓慢升温至-20℃，再在45-75分钟内降至-45；

（3）在2-3小时内将温度升至0℃；在4-6小时内继续升温至25℃；

（4）在1-2小时内继续升温至40℃，保温4-7小时，即得。

10.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括如下步骤：

（1）将60%处方量的40℃的注射用水加入浓配罐，充入氮气；

（2）分别加入处方量的甘氨酸、对羟基苯甲酸甲酯、乙二胺四乙酸二钠溶解并充入氮气；

（3）依次用适量注射用水将核黄素磷酸钠、烟酰胺、硝酸硫胺、盐酸吡哆辛、泛酸钠、叶酸、维生素C钠、生物素、维生素B₁₂溶解后加入浓配罐搅拌均匀，所述的适量以满足溶解的程度为准；

（4）用pH调节剂将pH值调至5.8，补充注射用水至全量；

（5）向浓配罐中加入重量相当于总体积0.1%的湿润活性炭；控制药液温度不超过30℃，搅拌吸附30min，经0.45μm微孔滤膜过滤至稀配罐；

（6）稀配罐充入氮气，对中间体进行检测；

（7）中间体检测合格后，经双级0.22μm微孔滤膜精滤至灌封间待灌封；

（8）罐装，半加塞，冷冻干燥；

（9）轧盖、灯检，包装即得。

其中，步骤8所述的冷冻干燥为：

1.将板温设置在-45℃以下；

2.加热板层，在1小时内缓慢升温至-20℃，再1小时内匀速降至-45；

3.在2.5小时内将温度匀速升至0℃；在5小时内继续匀速升温至25℃；

4.在1.5小时内继续升温至40℃，保温5小时，即得。