CN103099291A - 一种以杨梅叶为原料的天然防腐剂的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种以杨梅叶为原料的天然防腐剂的制备方法及其应用,制备步骤为:将杨梅叶清洗后、干燥、粉碎后加入乙醇,通过乙醇浸提,提取液合并、微孔膜过滤或离心后通过大孔树脂,以乙醇溶液洗脱后收集乙醇洗脱液,将洗脱液浓缩、干燥后得到杨梅叶提取物,经粉碎后获得天然防腐剂。本发明原料属于天然植物,资源保有量极大,生产成本低,本发明的制备方法不仅工艺简单、生产成本低,而且制得的天然防腐剂杀菌防腐功效好,使用安全性高,对食品中典型致病性微生物大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有显著抑制功效,可用于包括水产品在内的多种动物性食物的防腐保鲜。
Description
技术领域
本发明涉及食品添加剂技术领域,具体是一种以杨梅叶为原料的天然防腐剂的制备方法。
背景技术
目前,食品工业中主要采用添加防腐剂的方式解决食品常温保藏问题。由于化学防腐剂使用简便、成本低廉等优点使其得以广泛应用。但随着科技水平的不断提高,化学防腐剂潜在的致癌、致畸以及容易引起食物中毒等弊端逐渐显现,如肉类防腐中使用的亚硝酸盐可在体内形成强致癌物亚硝胺,苯甲酸盐可引起食物中毒并有微量致畸效果;此外,化学防腐剂对生态环境也会产生不利影响。天然防腐剂由于自身来自于天然产物,许多植物源防腐剂还有一定的营养价值和其他功能特性,如作为着色剂、风味调节剂,有些还具有一定生理活性效果,如抗氧化等。从丰富植物资源中寻找具有安全性高、防腐效果好的天然防腐剂成为今后食品防腐剂的主要发展方向之一。
食品防腐是一个古老的命题。人类自出现始,就自觉不自觉的发明了盐渍、烟熏等食品保藏手段。到目前为止,食品防腐仍然是食品科学工作者的主要研究内容之一。目前已经探明:食品腐败影响因素较多,如微生物、光线、氧气、水分等,其中引起食品腐败变质最主要的因素是微生物。绝大部分食品的腐败变质均由微生物引起。自此,防腐剂因运而生。食品工业中维持和延长食品保质期的主要手段也主要是采用防腐剂。防腐剂按其来源可分为化学防腐剂(又称人工合成防腐剂)和天然防腐剂两大类。化学防腐剂以其成本低、防腐效果好、水溶性好等优点使其自问世起到现在一直是食品防腐的主要应用对象。而随着科技的不断进步,化学防腐剂的缺点逐渐显现。如最常用的苯甲酸钠,已有众多研究资料表明长期使用苯甲酸钠对人体可诱发癌症,苯甲酸钠也存在致畸性等。世界各国对化学防腐剂的使用越来越严格,发达国家如日本已全面禁止苯甲酸钠在食品中的应用,我国尽管还允许在食品中使用苯甲酸钠,但也做出了苯甲酸钠用量和使用范围的严格限制。总体而言,随着人们对食品安全意识的不断增强和近来“染色馒头”、“麦乐鸡”等有关食品添加剂的食品安全事件,人们对包括食品添加剂关注度越来越高,对食品防腐剂更是谈虎色变。因此,开发食品安全性高、防腐效果好的天然防腐剂成为今后食品防腐剂的主要发展方向。
杨梅(Myrica rubra(Lour.)Zucc.),原产于中国亚热带地区,世界上有60余种,中国有6种。杨梅枝叶和根皮中富含杨梅素、单宁、黄酮和三萜类化合物,具有消炎、抗氧化等功效,杨梅皮和枝叶经常用做收敛剂、解毒剂和肠胃止泻剂等。我国杨梅栽培面积多,丰富的杨梅枝叶和根皮资源为开发天然防腐剂提供了资源保证。
发明内容
本发明所要解决的第一个技术问题是提供一种以杨梅叶为原料的天然防腐剂的制备方法,具有制备工艺简便,生产成本较低的特点。
本发明所要解决的第一个技术问题是提供一种以杨梅叶为原料的天然防腐剂的应用。
本发明解决第一个上述技术问题所采用的技术方案为:一种以杨梅叶为原料的天然防腐剂的制备方法,其特征在于步骤为:
1)将新鲜杨梅叶清洗干净后在40~60℃条件下热风干燥至水分含量为5~15(wt)%,粉碎后过40~60目筛,得到杨梅叶粉;
2)在杨梅叶粉中加入质量5~15倍、质量百分比浓度60~90%的乙醇,35~45℃恒温震荡提取1.5~3h,过滤后取滤液,浓缩至0.5~1g原药/mL;
3)将杨梅叶浓缩液采用微孔膜过滤或离心后上柱洗脱分离,洗脱柱为D101型大孔吸附树脂,树脂柱直径与高度比为1∶8~1∶12,洗脱液为45~55(wt)%、70~80(wt)%和88~98(wt)%乙醇,洗脱速度为1~3BV/h,每个浓度乙醇洗脱液洗脱时间为2~4h;
4)将乙醇洗脱液收集后减压浓缩,得到固体减压浓缩,得到固体杨梅叶提取物,粉碎后即得到天然防腐剂。
作为优选,步骤1)热风干燥温度为50℃,水分含量为10(wt)%。
作为优选,步骤2)的浸提用乙醇质量为杨梅叶粉的10倍,浸提用乙醇浓度为85(wt)%,浸提时间为2h。
再改进,所述步骤3)离心参数为5000r/min,时间15分钟。
优选,所述步骤3)的树脂柱直径与高度比优选为1∶10,洗脱液优选为50(wt)%、75(Wt)%和95(Wt)%乙醇,洗脱速度为2BV/h,每个浓度乙醇洗脱液洗脱时间为3h。
最后,所述步骤2)中滤渣按照相同条件重新提取1~2次,合并各次的滤液。
本发明解决第二个上述技术问题所采用的技术方案为:一种以杨梅叶为原料的天然防腐剂应用于水产品的防腐。
与现有技术相比,本发明的优点在于:采用的原料属天然植物的叶,资源保有量极大,不存在资源短缺问题;杨梅叶中含有多种天然化合物,如杨梅素、单宁、黄酮和三萜类化合物等。这些化合物除具有抑菌杀菌功效外,还具有多种生理活性,属多功能性天然防腐剂。本发明的制备方法不仅工艺简单、生产成本低,而且制得的天然防腐剂杀菌防腐功效好,使用安全性高,对食品中典型致病性微生物大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有显著抑制功效,可用于包括水产品在内的多种动物性食物的防腐保鲜。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例1:
称取1份杨梅叶,清洗干净后在50℃条件下热风干燥至水分含量为10%,粉碎后过50目筛;杨梅叶粉中加入5倍质量、百分比浓度90%的乙醇,40℃恒温震荡提取1.5h过滤后取滤液,滤渣按照上述步骤重新提取1次,合并两次的滤液,浓缩至0.5g原药/mL,微孔膜过滤或离心(10000r/min,15min)后上柱洗脱分离,洗脱柱为D101型大孔吸附树脂,树脂柱直径与高度比为1∶10,洗脱液为50%、75%和95%乙醇,洗脱速度均为2BV/h,每个浓度乙醇洗脱液洗脱时间为3h,即洗脱体积为6BV。将乙醇洗脱液收集后减压浓缩,得到固体减压浓缩,得到固体杨梅叶提取物,粉碎后即得到天然防腐剂。该天然防腐剂总黄酮含量(以芦丁计)含量:2.08%,硝酸率-亚硝酸钠法;多酚类物质:3.87%,Folin-Denis法。
实施例2:
称取1份杨梅叶,清洗干净后50℃条件下热风干燥至水分含量为10%,粉碎后过50目筛;杨梅叶粉中加入10倍质量、百分比浓度75%的乙醇,40℃恒温震荡提取2h过滤后取滤液,滤渣按照上述步骤重新提取1次,合并两次的滤液,浓缩至0.8g原药/mL,微孔膜过滤或离心(10000r/min,15min)后上柱洗脱分离,洗脱柱为D101型大孔吸附树脂,树脂柱直径与高度比为1∶10,洗脱液为50%、75%和95%乙醇,洗脱速度均为2BV/h,每个浓度乙醇洗脱液洗脱时间为3h,即洗脱体积为6BV。将乙醇洗脱液收集后减压浓缩,得到固体减压浓缩,得到固体杨梅叶提取物,粉碎后即得到天然防腐剂。该天然防腐剂总黄酮含量(以芦丁计)含量:2.23%,硝酸率-亚硝酸钠法;多酚类物质:3.96%,Folin-Denis法。
实施例3:
称取1份杨梅叶,清洗干净后在50℃条件下热风干燥至水分含量为10%,粉碎后过50目筛;杨梅叶粉中加入15倍质量、百分比浓度60%的乙醇,40℃恒温震荡提取3h过滤后取滤液,滤渣按照上述步骤重新提取1次,合并两次的滤液,浓缩至1g原药/mL,微孔膜过滤或离心(10000r/min,15min)后上柱洗脱分离,洗脱柱为D101型大孔吸附树脂,树脂柱直径与高度比为1∶10,洗脱液为50%、75%和95%乙醇,洗脱速度均为2BV/h,每个浓度乙醇洗脱液洗脱时间为3h,即洗脱体积为6BV。将乙醇洗脱液收集后减压浓缩,得到固体减压浓缩,得到固体杨梅叶提取物,粉碎后即得到天然防腐剂。该天然防腐剂总黄酮含量(以芦丁计)含量:2.46%,硝酸率-亚硝酸钠法;多酚类物质:4.02%,Folin-Denis法。
实验例:以实施例1(A)、实施例2(B)、实施例3(C)制备所得的天然防腐剂为实验对象,以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为实验菌株。分别以无菌蒸馏水将A、B、C配置成为浓度为0.02g/mL溶液,各吸取3mL防腐剂溶液注入已灭菌的培养皿中,取供试菌株100μL(菌浓度为105CFU/mL),倒入普通营养琼脂培养基12mL,以不加防腐剂的平皿作为对照,37℃恒温培养24h,计算抑菌率。
抑菌率(%)=(对照实验菌落数-相应浓度菌落数)/对照实验菌落数×100
表1天然防腐剂对不同微生物抑菌圈大小(单位:mm)
Claims (7)
1.一种以杨梅叶为原料的天然防腐剂的制备方法,其特征在于步骤为:
1)将新鲜杨梅叶清洗干净后在40~60℃条件下热风干燥至水分含量为5~15(wt)%,粉碎后过40~60目筛,得到杨梅叶粉;
2)在杨梅叶粉中加入质量5~15倍、质量百分比浓度60~90%的乙醇,35~45℃恒温震荡提取1.5~3h,过滤后取滤液,浓缩至0.5~1g原药/mL;
3)将杨梅叶浓缩液采用微孔膜过滤或离心后上柱洗脱分离,洗脱柱为D101型大孔吸附树脂,树脂柱直径与高度比为1∶8~1∶12,洗脱液为45~55(wt)%、70~80(wt)%和88~98(wt)%乙醇,洗脱速度为1~3BV/h,每个浓度乙醇洗脱液洗脱时间为2~4h;
4)将乙醇洗脱液收集后减压浓缩,得到固体减压浓缩,得到固体杨梅叶提取物,粉碎后即得到天然防腐剂。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述步骤1)热风干燥温度为50℃,水分含量为10(wt)%。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述步骤2)的浸提用乙醇质量为杨梅叶粉的10倍,浸提用乙醇浓度为85%,浸提时间为2h。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述步骤3)离心参数为4000~6000r/min,时间11~20分钟。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述步骤3)树脂柱直径与高度比为1∶10,洗脱液为50(wt)%、75(wt)%和95(wt)%乙醇,洗脱速度为2BV/h,每个浓度乙醇洗脱液洗脱时间为3h。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述步骤2)中滤渣按照相同条件重新提取1~2次,合并各次的滤液。
7.一种根据权利要求1所述的以杨梅叶为原料的天然防腐剂应用于水产品的防腐。
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