CN103087128B - 一种从牡丹籽粕中提取芍药苷的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及植物提取的领域，具体涉及一种提取芍药苷的新的植物来源和方法。一种从牡丹籽粕中提取芍药苷的方法，其特征在于，包括下述的步骤：粉碎、酶解、乙醇超声提取，乙醇微波提取，大孔树脂吸附，氧化铝柱吸附，钛棒过滤，膜超滤、纳滤，浓缩，干燥得芍药苷提取物。本发明的有益效果在于，以废弃的牡丹籽粕为原料，采用酶解法先对牡丹籽粕进行酶解，然后再加入有机溶剂乙醇对芍药苷进行提取，再采用大孔吸附树脂、氧化铝柱，钛棒、膜过滤对提取液进行提取，使芍药苷的提取率达到61.6%。
Description
技术领域
本发明涉及植物提取的领域，具体涉及一种提取芍药苷的新的植物来源和方法。
背景技术
芍药苷为吸湿性无定形白色粉末，在酸性条件下芍药苷稳定，受热易分解。芍药苷具有显著的镇痛、镇静、抗惊厥作用。对心脑血管系统具有扩张冠状动脉，增加冠脉流量，对抗急性心肌缺血，降低血压作用。芍药苷还具有通过抗血小板聚集而实现抗血栓形成的作用。国内外研究证明芍药苷具有降低高血脂、高胆固醇、高血糖作用；逆转低血压作用；具有舒张平滑肌细胞的解痉作用；抗炎、抗溃疡和抗过敏作用；对于应激溃疡有预防作用；对某些致病性细菌和真菌有抑制作用。此外还具有抗肿瘤作用、对肝脏的保护作用、防治老年性痴呆及利尿的作用。
芍药苷的提取方法很多，例如一种是取赤芍药材粉碎，乙醇一水溶液热回流提取，再上大孔吸附树脂柱，乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩后上聚酰胺柱，水洗脱，浓缩洗脱液，干燥后得白色粉末。一种是从白芍中提取芍药苷，将白勺粉碎，用醇或酮提取，大孔树脂吸附，甲醇洗脱，氧化铝柱除杂，萃取后，减压干燥即可得到产品。
但是以牡丹籽为原料，从牡丹籽粕中提取芍药苷的报道，却鲜见。成熟牡丹的籽产量为300kg-～500kg/年，2011年卫生部批准牡丹籽油作为新资源食品后，牡丹籽油及其深加工产业化，使牡丹籽变废为宝，从单纯的留够种子育苗，其他的都丢弃不管到各种经营商高价抢购，提高了当地农民的经济收入。
发明内容
本发明提供了一种从牡丹籽粕中提取芍药苷的方法，通过该方法提取的芍药苷，不仅纯度高，而且易于工业化生产。为牡丹产业的深加工提供更广的应用。
为实现上述目的，本发明提供一种从牡丹籽粕中提取芍药苷的方法，它包括以下步骤：
一种从牡丹籽粕中提取芍药苷的方法，该方法包含下述步骤：
（1）粉碎：将原料牡丹籽粕粉碎至200目，得牡丹籽粕粉，原料牡丹籽粕为牡丹种仁榨油之后的固体饼粕；
（2）酶解：将步骤（1）中的牡丹籽粕粉以料液比1:10～20的比例加入水，在35～55℃的条件下，调pH4～6，加入纤维素酶和果胶酶，所加的纤维素酶占物料重的0.1～0.2%，其酶活≥8万U/g， 果胶酶0.1～0.2%，其酶活≥10万U/g， 酶解1～3 h，在95℃下灭酶，得酶解液；
（3）乙醇提取：取步骤（2）中的酶解浆液，加入乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液中的乙醇体积分数为25～80%，进行超声波提取，提取温度为10～60℃，提取时间为10～60 min；超声频率为20～30 kHz，抽滤，在残渣中加入乙醇溶液，继续提取，其提取条件同前一次超声波提取；待两次超声波提取之后，再微波提取10～30min，微波提取的条件是:温度 20～50℃,微波功率2MHz～5MHz，得提取液，合并两次的提取液；并减压浓缩至无醇，得浓缩液；
（4）将步骤（3）中的浓缩液上大孔树脂吸附柱，先用水冲洗，再用体积分数为40%～95%的乙醇解析液洗脱，收集洗脱液，再过氧化铝柱，钛棒过滤，膜超滤、纳滤，减压浓缩至无醇，干燥得芍药苷提取物，上述的干燥方式为真空冷冻干燥、喷雾干燥或真空烘干中的任一种；膜超滤、纳滤的条件如下：进液压力为0.1～0.5Mpa；料液流速为20～30ml/s；料液温度为20～35℃；当料液原液被超滤至少量时，再加纯化水稀释，重复超滤多次；料液的pH值控制在6～7；反冲洗周期为每批，反冲洗时间为1小时，超滤膜的截留分子量采用10000～100000Da，纳滤膜的截留分子量采用200～5000Da。
优选的，超声提取条件是，提取温度为30℃，提取时间为30min，频率为25kHz。
优选的，微波提取的条件是:温度 25℃,微波频率2.5MHz；步骤（4）中的大孔树脂为HPD200A，HPD100， D-101，D-101A，AB-8。
上述的解析液乙醇的体积分数为50%～70%，更优选的，解析液乙醇的体积分数为50%。
膜结构采用中空纤维超滤膜、卷式或管式超滤膜，采用错流过滤或采用死端过滤；超滤膜材料为纤维素及其衍生物、聚碳酸酯、聚氯乙烯、聚偏氟乙烯、聚砜、聚丙烯腈、聚酰胺、聚砜酰胺、磺化聚砜、交链的聚乙烯醇、改性丙烯酸聚合物中的任一种。
乙醇提取步骤中：取步骤（2）中的酶解浆液，加入乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液中的乙醇体积分数为60%，进行超声波提取，提取温度为40℃，提取时间为20 min；超声频率为20 kHz，抽滤，在残渣中加入乙醇溶液，继续提取，其提取条件同前一次超声波提取；待两次超声波提取之后，再微波提取20min，微波提取的条件是:温度 35℃，微波功率5MHz，得提取液，合并两次的提取液；并减压浓缩至无醇，得浓缩液。
纳滤膜的截留分子量采用3000Da。
本发明的有益效果在于，以废弃的牡丹粕为原料，采用酶解法先对牡丹籽粕进行酶解，然后再加入有机溶剂乙醇对芍药苷进行提取，再采用大孔吸附树脂、氧化铝柱，钛棒、膜过滤对提取液进行提取，使芍药苷的提取率达到61.6%。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解本发明，但并不因此限制本发明。
实施例1
一种从牡丹籽粕中提取芍药苷的方法，该方法包含下述步骤：
（1）粉碎：将原料牡丹籽粕粉碎至200目，得牡丹籽粕粉，原料牡丹籽粕为牡丹种仁榨油之后的固体饼粕；
（2）酶解：将步骤（1）中的牡丹籽粕粉以料液比1:15的比例加入水，在45℃的条件下，调pH5，加入纤维素酶和果胶酶，所加的纤维素酶占物料重的0.15%，其酶活≥8万U/g， 果胶酶0.15%，其酶活≥10万U/g， 酶解2h，在95℃下灭酶，得酶解液；
（3）乙醇提取：取步骤（2）中的酶解浆液，加入乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液中的乙醇体积分数为60%，进行超声波提取，提取温度为30℃，提取时间为30 min；超声频率为20 kHz，抽滤，在残渣中加入乙醇溶液，继续提取，其提取条件同前一次超声波提取；待两次超声波提取之后，再微波提取20min，微波提取的条件是:温度 40℃，微波功率5MHz，得提取液，合并两次的提取液；并减压浓缩至无醇，得浓缩液；
（4）将步骤（3）中的浓缩液上大孔树脂吸附柱，先用水冲洗，再用体积分数为50%的乙醇解析液洗脱，收集洗脱液，再过氧化铝柱，钛棒过滤，膜超滤、纳滤，减压浓缩至无醇，干燥得芍药苷提取物，上述的干燥方式为真空冷冻干燥、喷雾干燥或真空烘干中的任一种；膜超滤、纳滤的条件如下：进液压力为0.2Mpa；料液流速为20ml/s；料液温度为30℃；当料液原液被超滤至少量时，再加纯化水稀释，重复超滤多次；料液的pH值控制在6；反冲洗周期为每批，反冲洗时间为1小时，超滤膜的截留分子量采用10000Da，纳滤膜的截留分子量采用1000Da。
以上的大孔树脂为AB-8，膜结构采用中空纤维超滤膜，采用死端过滤；超滤膜材料为纤维素聚砜酰胺。
检测得到的芍药苷的纯度是50.26%，提取率为61.6%。
实施例2
一种从牡丹籽粕中提取芍药苷的方法，其特征在于，该方法包含下述步骤：
（1）粉碎：将原料牡丹籽粕粉碎至200目，得牡丹籽粕粉，原料牡丹籽粕为牡丹种仁榨油之后的固体饼粕；
（2）酶解：将步骤（1）中的牡丹籽粕粉以料液比1:10的比例加入水，在35℃的条件下，调pH4，加入纤维素酶和果胶酶，所加的纤维素酶占物料重的0.1%，其酶活≥8万U/g， 果胶酶0.1%，其酶活≥10万U/g， 酶解1 h，在95℃下灭酶，得酶解液；
（3）乙醇提取：取步骤（2）中的酶解浆液，加入乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液中的乙醇体积分数为25%，进行超声波提取，提取温度为20℃，提取时间为10 min；超声频率为20 kHz，抽滤，在残渣中加入乙醇溶液，继续提取，其提取条件同前一次超声波提取；待两次超声波提取之后，再微波提取20min，微波提取的条件是:温度 30℃，微波功率5MHz，得提取液，合并两次的提取液；并减压浓缩至无醇，得浓缩液；
（4）将步骤（3）中的浓缩液上大孔树脂吸附柱，先用水冲洗，再用体积分数为60%的乙醇解析液洗脱，收集洗脱液，再过氧化铝柱，钛棒过滤，膜超滤、纳滤，减压浓缩至无醇，干燥得芍药苷提取物，上述的干燥方式为真空冷冻干燥、喷雾干燥或真空烘干中的任一种；膜超滤、纳滤的条件如下：进液压力为0.1Mpa；料液流速为20ml/s；料液温度为20℃；当料液原液被超滤至少量时，再加纯化水稀释，重复超滤多次；料液的pH值控制在6；反冲洗周期为每批，反冲洗时间为1小时，超滤膜的截留分子量采用10000Da，纳滤膜的截留分子量采用200Da。
以上的大孔树脂为HPD200A。
膜结构采用管式超滤膜，采用错流过滤；超滤膜材料为聚碳酸酯。
检测得到的芍药苷的纯度是49.34%，提取率为58.2%。
实施例3
一种从牡丹籽粕中提取芍药苷的方法，其特征在于，该方法包含下述步骤：
（1）粉碎：将原料牡丹籽粕粉碎至200目，得牡丹籽粕粉，原料牡丹籽粕为牡丹种仁榨油之后的固体饼粕；
（2）酶解：将步骤（1）中的牡丹籽粕粉以料液比1: 20的比例加入水，在45℃的条件下，调pH6，加入纤维素酶和果胶酶，所加的纤维素酶占物料重的0.2%，其酶活≥8万U/g， 果胶酶0.2%，其酶活≥10万U/g， 酶解3 h，在95℃下灭酶，得酶解液；
（3）乙醇提取：取步骤（2）中的酶解浆液，加入乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液中的乙醇体积分数为60%，进行超声波提取，提取温度为40℃，提取时间为20 min；超声频率为30 kHz，抽滤，在残渣中加入乙醇溶液，继续提取，其提取条件同前一次超声波提取；待两次超声波提取之后，再微波提取20min，微波提取的条件是:温度 40℃，微波功率5MHz，得提取液，合并两次的提取液；并减压浓缩至无醇，得浓缩液；
（4）将步骤（3）中的浓缩液上大孔树脂吸附柱，先用水冲洗，再用体积分数为75%的乙醇解析液洗脱，收集洗脱液，再过氧化铝柱，钛棒过滤，膜超滤、纳滤，减压浓缩至无醇，干燥得芍药苷提取物，上述的干燥方式为真空冷冻干燥、喷雾干燥或真空烘干中的任一种；膜超滤、纳滤的条件如下：进液压力为0.4Mpa；料液流速为30ml/s；料液温度为35℃；当料液原液被超滤至少量时，再加纯化水稀释，重复超滤多次；料液的pH值控制在7；反冲洗周期为每批，反冲洗时间为1小时，超滤膜的截留分子量采用600000Da，纳滤膜的截留分子量采用3000Da。
步骤（4）中的大孔树脂为HPD100。
膜结构采用卷式超滤膜，采用错流过滤；超滤膜材料为聚丙烯腈。
检测得到的芍药苷的纯度是50.26%，提取率为61.6%。
Claims (10)
1.一种从牡丹籽粕中提取芍药苷的方法，其特征在于，该方法包含下述步骤：
（1）粉碎：将原料牡丹籽粕粉碎至200目，得牡丹籽粕粉，所述的原料牡丹籽粕为牡丹种仁榨油之后的固体饼粕；
（2）酶解：将步骤（1）中的牡丹籽粕粉以料液比1:10～20的比例加入水，在35～55℃的条件下，调pH4～6，加入纤维素酶和果胶酶，所加的纤维素酶占物料重的0.1～0.2%，其酶活≥8万U/g， 果胶酶0.1～0.2%，其酶活≥10万U/g， 酶解1～3 h，在95℃下灭酶，得酶解液；
（3）乙醇提取：取步骤（2）中的酶解浆液，加入乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液中的乙醇体积分数为25～80%，进行超声波提取，提取温度为10～60℃，提取时间为10～60 min；超声频率为20～30 kHz，抽滤，在残渣中加入乙醇溶液，继续提取，其提取条件同前一次超声波提取；待两次超声波提取之后，再微波提取10～30min，微波提取的条件是:温度 20～50℃,微波功率2MHz～5MHz，得提取液，合并两次的提取液；并减压浓缩至无醇，得浓缩液；
（4）将步骤（3）中的浓缩液上大孔树脂吸附柱，先用水冲洗，再用体积分数为40%～95%的乙醇解析液洗脱，收集洗脱液，再过氧化铝柱，钛棒过滤，膜超滤、纳滤，减压浓缩至无醇，干燥得芍药苷提取物，所述的干燥方式为真空冷冻干燥、喷雾干燥或真空烘干中的任一种；所述的膜超滤、纳滤的条件如下：进液压力为0.1～0.5Mpa；料液流速为20～30ml/s；料液温度为20～35℃；当料液原液被超滤至少量时，再加纯化水稀释，重复超滤多次；料液的pH值控制在6～7；反冲洗周期为每批，反冲洗时间为1小时，所述的超滤膜的截留分子量采用10000～100000Da，纳滤膜的截留分子量采用200～5000Da。
2.如权利要求1所述从牡丹粕中提取芍药苷的方法，其特征在于，所述的超声提取条件是，提取温度为30℃，提取时间为30min，频率为25kHz。
3.如权利要求1所述从牡丹粕中提取芍药苷的方法，其特征在于，所述的微波提取的条件是:温度 25℃,微波频率2.5MHz。
4.如权利要求1所述从牡丹粕中提取芍药苷的方法，其特征在于，所述的步骤（4）中的大孔树脂为HPD200A，HPD100， D-101，D-101A，AB-8。
5.如权利要求1所述从牡丹粕中提取芍药苷的方法，其特征在于，所述的乙醇解析液的体积分数为50%～70%。
6.如权利要求1或5所述从牡丹粕中提取芍药苷的方法，其特征在于，所述的解析液乙醇的体积分数为50%。
7.如权利要求1所述从牡丹粕中提取芍药苷的方法，其特征在于，所述的膜结构采用中空纤维超滤膜、卷式或管式超滤膜，采用错流过滤或采用死端过滤。
8.如权利要求1所述从牡丹粕中提取芍药苷的方法，其特征在于，所述的超滤膜材料为纤维素及其衍生物、聚碳酸酯、聚氯乙烯、聚偏氟乙烯、聚砜、聚丙烯腈、聚酰胺、聚砜酰胺、磺化聚砜、交链的聚乙烯醇、改性丙烯酸聚合物中的任一种。
9.如权利要求1所述从牡丹粕中提取芍药苷的方法，其特征在于，所述的乙醇提取步骤中：取步骤（2）中的酶解浆液，加入乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液中的乙醇体积分数为60%，进行超声波提取，提取温度为40℃，提取时间为20 min，超声频率为20 kHz，抽滤，在残渣中加入乙醇溶液，继续提取，其提取条件同前一次超声波提取；待两次超声波提取之后，再微波提取20min，微波提取的条件是:温度 35℃，微波功率5MHz，得提取液，合并两次的提取液；并减压浓缩至无醇，得浓缩液。
10.如权利要求1所述从牡丹粕中提取芍药苷的方法，其特征在于，所述的纳滤膜的截留分子量采用3000Da。
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| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |