CN103074417A - 一种丙型肝炎治疗用药指导的多重基因检测方法 - Google Patents
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Abstract
Description
RT反应试剂 | 量/孔 |
Dnase/Rnase Free水 | 8μL |
RT缓冲液,5X | 4μL |
RT引物 | 2μL |
RT酶 | 1μL |
样品RNA(5-20ng/ul) | 5μL |
Total | 20μL |
步骤 | 温度 | 时间 |
1 | 48℃ | 1分钟 |
2 | 42℃ | 60分钟 |
3 | 95℃ | 5分钟 |
4 | 4℃ | 持续:直至收取RT产物 |
PCR反应试剂 | 量/孔 |
PCR缓冲液,10X | 2μL |
25mM MgCl2 | 4μL |
PCR引物 | 2μL |
CM01 | 2μL |
DNA聚合酶 | 0.3μL |
RT产物 | 9.7μL |
Total | 20μL |
步骤 | 温度 | 时间 |
1 | 94℃ | 1分钟 |
2 | 94℃ | 30秒钟 |
3 | 60℃ | 30秒钟 |
4 | 70℃ | 1分钟 |
5 | N/A | 重复2-4步骤34次(共35次) |
6 | 70℃ | 1分钟 |
7 | 4℃ | 持续:直至收取PCR产物 |
GeXP样品 | 量/孔 |
SLS上样液 | 38.5μL |
DNA大小标准400 | 0.5μL |
PCR产物 | 1μL |
Total | 40μL |
矿物油 | 1滴 |
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