CN103074277A

CN103074277A - 一种反硝化细菌及其应用

Info

Publication number: CN103074277A
Application number: CN2012105858698A
Authority: CN
Inventors: 谢柳; 杨岳平; 杨浩峰; 周俊利; 胡安辉; 张挺
Original assignee: HUZHOU ENVIRONMENTAL SCIENCE AND TECHNOLOGY INNOVATION CENTER; ZHEJIANG ZHIMEI ENVIRONMENT TECHNOLOGY Co Ltd; Zhejiang University ZJU
Current assignee: HUZHOU ENVIRONMENTAL SCIENCE AND TECHNOLOGY INNOVATION CENTER; ZHEJIANG ZHIMEI ENVIRONMENT TECHNOLOGY Co Ltd; Zhejiang University ZJU
Priority date: 2012-12-28
Filing date: 2012-12-28
Publication date: 2013-05-01
Anticipated expiration: 2032-12-28
Also published as: CN103074277B

Abstract

本发明公开了一种反硝化细菌及其应用，该反硝化细菌命名为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)CM-NRD3，已于2012年11月12日保藏在位于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M2012455。本发明还提供了嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M2012455在污水或水体中生物脱氮的应用。本发明菌株对硝酸盐氮和亚硝酸盐氮均具有很强脱氮能力，还能去除污水或水体中的CODcr，适合多种氮素污染型的水质，也可以用于短程硝化反硝化工艺，能应用于低C/N水体的生物脱氮处理，有利于其推广应用。

Description

一种反硝化细菌及其应用

技术领域

本发明涉及环境微生物领域，尤其涉及一种反硝化细菌及其应用。

背景技术

近年来，含氮工业污水的排放以及农业过量施用化肥，导致硝酸盐、亚硝酸盐等含氮化合物污染地下水和地表水，直接或间接危害饮用水水质及人类身体健康。含氮污水进入水体引发的水质恶化及富营养化问题亦日趋严重，氮素污染亟待解决。

生物脱氮处理含氮污水的方法以其成本低、能耗小、处理效果好、不产生二次污染等优点成为主流脱氮技术。近二十年来，国内外发展了一批高效经济的生物脱氮新工艺，包括：同步硝化反硝化工艺、亚硝酸型硝化反硝化工艺、短程硝化-厌氧氨氧化工艺以及限氧自养硝化-反硝化(OLAND)工艺等。

生物脱氮过程包括硝化作用与反硝化作用。硝化作用只能改变氮素在水体中的形态，而不能从污水中脱除，排入环境仍然会引起水体富营养化，还可能生成致癌的亚硝基化合物。亚硝酸或硝酸需进一步在反硝化微生物的作用下还原为氮气，才能实现氮素的根本脱除。因此，反硝化微生物是重要的脱氮功能微生物。

反硝化微生物主要是通过诱导产生硝酸还原酶和亚硝酸还原酶对硝酸盐和亚硝酸盐进行还原。它在分类学上没有专门的类群，是具有反硝化作用的一类微生物的总称。反硝化微生物具有丰富的生物多样性，既涉及古生菌域的众多种类，如嗜热细菌(Pyrobaculum areophilum)、铁细菌(Ferroglobus placidus)等，也涉及细菌域的众多种类。反硝化作用的电子供体可以是有机物也可以是无机物(如硫化氢、氢等)。反硝化细菌的培养需在缺氧或兼氧条件下进行，适宜生长温度为20～35℃，适宜pH为6～8。异养反硝化菌在反硝化作用中占主要地位，迄今为止，国际上已分离到多种反硝化微生物，主要有：产碱杆菌属(Alcaligenes)、水螺菌属(Aquaspirillum)、固氮弧菌属(Azoarcus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、陶厄氏菌属(Thauera)等。于爱茸等(于爱茸，李尤等，《微生物学杂志》，2005，25(3)：77-81)报道了一株兼氧的反硝化细菌，命名为芽孢杆菌W2，在溶解氧(DO)达到2mg/L时，该菌株的除氮率达到97％；张小玲等(张小玲，梁运祥，《淡水渔业》，2006，36(5)：28-32)报道了一株反硝化细菌，属于芽孢杆菌属，该菌株对硝态氮和亚硝态氮的降解率可分别达到94.79％和99.94％。近年来，国内科研学者如李卫芬等(李卫芬，傅罗琴等，《环境科学》2011，32(8)：2403-2408)、杨小龙等(杨小龙，李文明等，《微生物学报》，2011，51(8)：1062-1070)、郑佳佳等(郑佳佳，沈涛等，《水生生物学报》，2012，36(1)：161-167)都陆续分离出不同种属、不同特性的反硝化细菌。

公开号为CN102220264A的中国专利文献公开了一株兼性厌氧反硝化细菌，该菌株命名为Pseudomonas stutzeri LZ-14，属于假单胞菌属的施氏假单胞菌，该菌株能够有效脱除水体中的氨氮、硝酸氮、亚硝酸氮及其混合物，降低总氮浓度，总氮去除率75.9％，还可同时去除有机污水中的CODcr，去除率为53.1％，但是对硝酸盐氮和亚硝酸盐氮的耐受性不高，仅为40mg/L，具体的脱氮速率也未经报道，很难确定其实际脱氮能力。

又如公开号为CN102220265A的中国专利文献公开了一株反硝化细菌，该细菌命名为Paenibacillus sp.XP1，该细菌强化香蒲湿地脱氮，在水力停留时间96小时的情况下，氮的去除率由14％升高到94％，仍存在脱氮效率不高的问题，该菌株的最佳C/N为7，在低C/N的污水脱氮的实际应用上受到一定制约，

公开号为CN102676431A的中国专利文献公开了一种反硝化细菌LR，该菌株联合水体植物联合去氮，并未描述该细菌直接应用水体中脱氮能力，在利用DM培养液测定该细菌的脱氮能力时，该菌株在60h后氮素去除率才达到90％以上。

综合上述文献及相关专利报道，虽然文献和相关专利报道的反硝化细菌都表现出一定的脱氮效率，但这些报道大都基于实验室的研究，在给定的实验室条件下得出了的结论，虽然具有一定的参考价值，但实际在污水脱氮应用中脱氮效果如何，有待进一步验证，而且大多数报道的反硝化细菌硝酸盐和亚硝酸盐的耐受力不高或脱氮效率不高等问题，在实际应用上受到一定制约。

因此筛选具有高效脱氮能力的反硝化细菌，直接采用人工培养生产，然后经化学方法固定后投加到污染水体中，对于控制水体富营养化，处理污水和净化水域有着极大的利用价值。

发明内容

本发明提供了一种反硝化细菌，脱氮能力高，可有效去除污水或水体中的硝酸盐氮、亚硝酸盐氮及化学需氧量。

一种反硝化细菌，分类命名为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonasmaltophilia)，完整命名为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonasmaltophilia)CM-NRD3，该菌株已于2012年11月12日保藏在位于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M 2012455。

本发明菌株在固体培养基上，菌落呈浅黄色，圆形，表面光滑湿润，显微镜观察该菌株为杆状，大小为(0.6～0.8)μm×(1.2～1.4)μm，革兰氏反应呈阳性。

所述固体培养基的成分为：

CH₃COONa，2.5g/L；NaNO₃，1.2g/L；K₂HPO₄，0.5g/L；MgSO₄·7H₂O，0.1g/L；微量元素溶液，2mL/L；琼脂，1.5～2％；pH调节至7.2～7.6；

其中，微量元素溶液组分为：

EDTA，2.06g/L；FeSO₄·7H₂O，1.54g/L；MnCl₂·4H₂O，0.2g/L；ZnSO₄·7H₂O，0.1g/L；CuSO₄·5H₂O，0.02g/L；Na₂MnO₄，0.1g/L；CoCl₂·6H₂O，0.002g/L。

本发明还提供了所述嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455在污水生物脱氮中的应用。

具体包括：在污水处理系统的缺氧池或/和厌氧池内中加入填料和接入嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455，挂膜完成后向缺氧池或/和厌氧池内连续通入污水进行处理。

为促使菌株快速的生长在填料上，在加入填料的同时还向缺氧池或/和厌氧池内加入营养物质。所述营养物质包含菌株生长的碳源、氮源和无机盐。所述碳源可以葡萄糖，所述氮源可以为硝酸钠，所述无机盐可以为FeSO₄·7H₂O、MnCl₂·4H₂O、ZnSO₄·7H₂O等。

所述污水处理系统为厌氧-好氧工艺系统、厌氧-缺氧-好氧工艺系统、序批式活性污泥系统、流化床生物膜反应器系统等。

填料为细菌的生长提供载体，所述的填料可以为聚氨酯海绵、拉西环、活性炭等。

所述填料在厌氧池或缺氧池中的填充率为20～30％。填充率过大，不利于菌株形成优势种群的，填充率过小，则细菌生长的生物量过少，影响脱氮效率。

在向污水处理系统接入本发明菌株前，通常先对本发明的菌株进行扩大培养。所述扩大培养的温度为30～35℃，时间为1.5～4天。

所述挂膜的时间为3～4天。时间过短，菌株尚未在填料上繁殖足够的生物量形成生物膜，时间过长，则菌株老化，反硝化能力下降。

污水处理时，缺氧池或/和厌氧池内的温度为20～40℃，pH为7～7.5，其中缺氧池内的溶解氧浓度为0.2～0.5mg/L，厌氧池内的溶解氧的浓度小于0.2mg/L。

在该条件下，有利于本发明细菌生长增殖，保持高效的脱氮能力，对污水中的硝酸盐氮或亚硝酸盐氮进行还原。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明菌株对硝酸盐氮和亚硝酸盐氮均具有很强脱氮能力，尤其对硝酸盐氮，该菌株的反硝化能力非常高，最高反硝化速率可达19.86mg·L^-1·h^-1，是一般反硝化菌的1.45～18.22倍。

(2)本发明菌株能很好的利用亚硝酸盐，适合多种氮素污染型的水质，也可以用于短程硝化反硝化工艺，能应用于低C/N水体的生物脱氮处理，有利于其推广应用。

(3)本发明菌株不仅能去除硝酸盐氮、亚硝酸盐氮或其混合物，还能去除污水或水体中的化学需氧量，实际生活污水总氮去除率达到80％以上，化学需氧量去除率达到90％以上，较现有技术有很大提升。

(4)本发明细菌为兼氧细菌，在厌氧和缺氧的条件都表现出很好的脱氮效果，并且对硝酸盐氮的耐受性很高。

附图说明

图1为嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455的透射电镜照片；

图2为嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455基于16S rDNA序列同源性构建的系统发育树；

图3为嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455脱氮时硝酸盐氮浓度与反硝化速率的关系；

图4为嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455脱氮时亚硝酸盐氮浓度与反硝化速率的关系；

图5为温度对嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455生长速率的影响；

图6为pH对嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455生长速率的影响；

图7为嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455在最优条件下的生长曲线及反硝化效果；

图8为嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455对生活污水中总氮(TN)的去除曲线；

图9为嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455对生活污水中化学需氧量(CODcr)的去除曲线。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步阐释。

实验测定方法

总氮(TN)的测定：碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法；

化学需氧量(CODer)的测定：快速消解分光光度法；

pH值的测定：玻璃电极法；

硝酸盐氮(NO₃ ^--N)：紫外分光光度法；

亚硝酸盐氮(NO₂ ^--N)：N-(1-萘基)-乙二胺分光光度法；

细菌生长量：比浊法，以OD₆₀₀表示。

实施例1 嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455的分离鉴定

(1)液体培养基

CH₃COONa，2.5g/L；NaNO₃，1.2g/L；K₂HPO₄，0.5g/L；MgSO₄·7H₂O，0.1g/L；微量元素溶液，2mL/L；pH调节至7.2～7.6，121℃灭菌20分钟；

其中，微量元素溶液组分为：

固体培养基为上述液体培养基成分中添加1.5～2％的琼脂。

(2)菌株分离和筛选

本发明菌株从嘉兴污水处理厂连续运行的移动床生物膜(MBBR)反应器中填料生物膜上分离获得。

①取填料生物膜上的污泥样品系列稀释10⁰、10¹、10²、10³、10⁴、10⁵倍后，用液体培养基30℃，150r/min富集反硝化细菌；

②选择稀释度最高的阳性培养液涂布于固体培养基上，30℃倒置培养，菌落长出后用划线法分离纯化；

③经多次划线纯化后，挑取单菌落接种至液体培养基中，30℃，150r/min恒温培养3～5天，定期观察产气情况并测定硝酸盐氮含量，从中筛选出反硝化活性高的菌株，将其命名为CM-NRD3，对该菌株进行形态观察和鉴定。

a、CM-NRD3菌株的菌落、菌体形态观察

菌体形态学研究：对菌体进行革兰氏染色，在光学显微镜(Leica，德国)16×100油镜下进行观察。

菌体内部结构研究：对菌体进行超薄切片，用透射电子显微镜(JEM-1200EX，日本)观察菌体内部结构。

本发明菌株的菌落呈浅黄色，圆形，表面光滑湿润。显微镜下观察发现，该菌株的菌体呈杆状，大小为(0.6～0.8)μm×(1.2～1.4)μm，革兰氏染色反应呈阳性，图1为本发明菌株的透射电镜照片。

b、CM-NRD3菌株的分子生物学鉴定

用细菌基因组DNA提取试剂盒(BS423，上海生工生物工程有限公司)提取CM-NRD3菌株的DNA，采用细菌通用引物扩增16S rDNA，将获得的PCR产物纯化后委托宝生物工程有限公司(Takara)测序。

细菌通用引物为：

上游引物(27f)：5’-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3’；

下游引物(1492r)：5’-GGYTACCTTGTTACGACTT-3’。

PCR扩增体系如表1。

表1 PCR扩增体系

成分	含量(uL)
		DNA模板	3
10×buffer	5
		dNTP混合物(各2.5mmol/L)	4
27f(10pmol/L)	1
		1492r(10pmol/L)	1
Taq DNA聚合酶	0.3
		超纯水	35.7
总计	50

PCR反应条件为：

94℃预变性5min，94℃变性1min，50℃退火1min，72℃延伸3min，进行30个循环，72℃延伸7min。

经过测序获得1506bp的16S rDNA片段，在GenBank中的注册登记号为JN106428，碱基序列如SEQ ID NO.1所示。通过NCBI网站的Blast程序，将测序获得16S rDNA序列与GenBank数据库中的核酸序列进行比对，发现，本发明的CM-NRD3菌株与寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)一些菌株的序列相似性高达97％～99％。用MEGA 4.0软件以Neighbor-Joining法，对这些细菌构建系统发育树，并进行同源性分析。

如图2所示，CM-NRD3菌株与寡养单胞菌属中嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)的进化距离最近；同源性分析发现，本发明的CM-NRD3菌株与嗜麦芽寡养单胞菌(S.maltophilia)的序列同源性达到97％。结合该菌株的菌落、菌体形态特征，可确定CM-NRD3菌株为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)，命名为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)CM-NRD3，并将该菌株送至位于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)进行保藏，保藏编号为CCTCC NO：M 2012455，保藏日期为2012年11月12日。

实施例2嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455的培养

(1)液体培养基

其中，微量元素溶液组分为：

固体培养基为上述培养基成分中加入1.5％(w/v)的琼脂粉。

(2)将保存于-86℃，50％甘油的本发明菌株接种至上述固体培养基上，于33.5℃的厌氧培养箱，倒置活化培养36～48小时备用。

(3)将活化后的菌株接种于盛有50mL液体培养基的110mL血清瓶中，于33.5℃，转速为150r/min的摇床上振荡培养36～48小时进行富集。

(4)将富集好的本发明细菌按体积比为5％的接种量转接至5L的厌氧发酵罐内，于33.5℃，150r/min，pH 7.36条件下扩大培养36～48小时。

(5)扩大培养完成后收集菌体或直接将菌液用于污水或水体脱氮试验。

实施例3 嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455的脱氮能力试验

分别以NaNO₃和NaNO₂为氮源，考察菌株生长及脱氮能力。

反硝化培养液：CH₃COONa，2.5g/L；NaNO₃/NaNO₂(根据试验要求而定)；K₂HPO₄，0.5g/L；MgSO₄·7H₂O，0.1g/L；微量元素溶液，2mL/L；121℃灭菌20分钟；

其中，微量元素溶液组分为：

在110mL血清瓶中加入50mL反硝化培养液，2mL实施例2扩大培养后的菌液，其中NO₃ ^--N和NO₂ ^--N浓度分别依次设定为70mg/L、140mg/L、210mg/L、280mg/L和350mg/L，初始pH值控制在7.5，在30℃，转速为150r/min的恒温摇床培养，通过测定NO₃ ^--N和NO₂ ^--N浓度变化来判断菌株的反硝化能力，以不加菌液的血清瓶作为对照，每个实验做3个重复。

本发明菌株在以硝酸钠为唯一电子受体的培养基上生长，如图3所示，在实验范围内，菌株的反硝化速率随基质(硝酸盐氮)浓度的增加而增大，比胡宝兰等(胡宝兰，郑平，等，《中国科学：C辑》，2006，36(6)：493-499)分离到的反硝化菌具有更高的硝酸盐氮耐受浓度。采用Slidewrite Plus 6.0软件以Monod方程拟合得出最大反硝化速率为19.86mg·(L·h)^-1，K_S＝314.28mg·L^-1(γ²＝0.924)。目前，文献已报道分离出的反硝化细菌其反硝化速率大多数在1.09～13.67mg·(L·h)^-1，而本研究分离出的菌株其反硝化速率是这些菌的1.45～18.22倍。由此可见，本发明菌株对水处理工程中氮素的去除有十分重要的意义，大部分的硝酸盐氮可在短时间内通过反硝化去除。

本发明菌株在以亚硝酸钠为惟一电子受体的培养基上生长，如图4所示，当亚硝酸盐氮浓度低于200mg/L时，亚硝酸盐氮降解速率随基质(亚硝酸盐氮)浓度的升高而加快；至浓度为200mg/L左右时，亚硝酸盐氮降解速率达到最大值；当亚硝氮浓度超过200mg/L后，降解速率随基质浓度的升高反而降低。反硝化速率与NO₂ ^--N浓度呈抑制性曲线，用基质抑制动力学方程对结果进行非线性拟合可得，当NO₂ ^--N浓度为190.2mg/L时反硝化速率最大，为4.05mg·(L·h)^-1，抑制常数K_i＝1021mg/L，半饱和常数K_s＝35.42mg/L(γ²＝0.999)。

据报道，由于亚硝酸盐的毒性作用，某些菌株不能利用其生长，本发明的菌株可很好的利用亚硝酸盐，说明它适合多种氮素污染类型的水质，也可用于短程反硝化工艺中，有利于其推广应用。

实施例4 嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455的生长条件优化

(1)本发明菌株最适生长pH

在110mL血清瓶中加入50mL反硝化培养液(成分参照实施例3)，2mL菌液，其中NO₃ ^--N浓度设定为140mg/L，初始pH值依次分别控制在6.0，7.0，7.5，8.0，9.0，10.0，30℃恒温摇床培养，通过测定OD₆₀₀来判断菌株的生长情况，以不加菌株的血清瓶作为对照，每个实验做3个重复。

图5示出了温度对本发明菌株生长速率的影响，采用Slidewrite plus6.0软件以Erfc Peak方程对图5数据进行非线性拟合，可得本发明菌株的最适生长温度是33.5℃(γ²＝0.981)。

(2)本发明菌株最适生长温度

在110mL血清瓶中加入50mL反硝化培养液(成分参照实施例3)，2mL菌液，其中NO₃ ^--N浓度设定为140mg/L，初始pH值依次控制在7.5，温度依次设定为20℃，30℃，35℃，40℃，45℃。摇床培养，通过测定OD₆₀₀来判断菌株的生长情况，以不加菌株的血清瓶作为对照，每个实验做3个重复。

图6示出了pH对本发明菌株生长速率的影响，采用Slidewrite Plus 6.0软件以Erfc Peak方程对图6数据进行非线性拟合，可得本发明菌株在反硝化培养基上的最适生长pH值为7.36(γ²＝0.999)。

(3)本发明菌最优条件下的生长曲线及反硝化效果

在110mL血清瓶中加入50mL反硝化培养液(成分参照实施例3)，2mL菌液，其中NO₃ ^--N浓度设定为140mg/L，起始pH为7.36，33.5℃恒温摇床(150r/min)培养，测定OD₆₀₀和NO₃ ^--N浓度变化.

如图7所示，结果表明，0～10h为延滞期，此阶段菌株要适应生长环境，硝酸盐氮浓度变化不大；10h后菌株进入指数生长期，硝酸盐氮浓度下降明显。用指数生长模型N_t＝N₀×e^μt(其中μ是细菌在指数生长期的生长速率常数；N_t是t时的细菌浓度，N₀是t₀时的细菌浓度)及T_d＝In2/μ计算得到该菌株的最短倍增时间为9.9h(R²＝0.968)；36～48h，菌株处于生长稳定期，此时硝酸盐氮还原率大于95％。

实施例5 嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M 2012455在生活污水处理中的应用

(1)采用A/O工艺进行生活污水生物处理小试实验；污水为生活污水化粪池出水；

(2)参照实施例2，将扩大培养后的本发明菌株培养液按体积比5％投加至A/O工艺中的A池；同时，在A池内投加聚氨酯海绵填料，聚氨酯海绵填料在厌氧池中的填充率为20％；

(3)在A池内加入适当的营养物质(葡萄糖1.5g/L、硝酸钠1g/L和微量元素溶液5mL/L，其中，微量元素溶液成分参照实施例1)，促使本发明菌株生长在填料上，挂膜3～4天，观察填料上菌株生长情况；

(4)填料挂膜完成后，连续进生活污水，每天检测进水和出水的总氮(TN)含量和化学需氧量(CODcr)。

本发明菌株生活污水氨氮去除小试运行条件和工艺参数。

进水的pH调节为7.5～8.0，进水流量控制在1.5L/h，检测进水水质状况，调节C/N比为5∶1左右；厌氧池A池：检测池中水体溶氧要求稳定在0.2mg/L以下，pH稳定在7.0～7.5之间，温度控制不严格，可随环境温度变化而变化，一般为20～40℃；好氧池O池：检测池中水体溶氧要求稳定在0.5～1.5mg/L，pH稳定在7.5～8.0之间，温度控制不严格，可随环境温度变化而变化，一般为20～40℃检测该池出水总氮及CODcr。O池混合液回流到A池，回流比设计为200％，沉淀池污泥回流到A池，回流比设计为100％(由于工艺流程中污泥产生量较少，污泥回流采用阶段性回流的方式)。整个工艺的水力停留时间为：18小时，其中A池水力停留时间为8小时。

由图8可知，生活污水进水TN浓度为50～80mg/L，运用本发明的菌株处理后，出水TN浓度小于15mg/L，TN去除率达到80％以上。

由图9可知，生活污水进水CODcr浓度为180～300mg/L，运用本发明的菌株处理后，出水CODcr含量小于30mg/L，去除率达到90％以上。

Claims

1.一种反硝化细菌，其特征在于，命名为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)CM-NRD3，保藏编号为CCTCC NO：M2012455。

2.如权利要求1所述的反硝化细菌在污水生物脱氮中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，在污水处理系统的缺氧池或/和厌氧池内中加入填料和接入嗜麦芽寡养单胞菌CCTCC M2012455，挂膜完成后向缺氧池或/和厌氧池内连续通入污水进行处理。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，在加入填料的同时还向缺氧池或/和厌氧池内加入营养物质。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述污水处理系统为厌氧-好氧工艺系统、厌氧-缺氧-好氧工艺系统、序批式活性污泥系统或流化床生物膜反应器系统。

6.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述填料为聚氨酯海绵。

7.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述填料在厌氧池或缺氧池中的填充率为20~30%。

8.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述挂膜的时间为3~4天。

9.如权利要求3所述的应用，其特征在于，污水处理时，缺氧池或/和厌氧池内的温度为20~40℃，pH为7~7.5。