CN103070388B - 一种鲜松茸活性提取物及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种鲜松茸活性提取物及其制备方法与应用，所述鲜松茸活性提取物包括质量百分比挥发油组分0.03～0.47%，多糖13～28%，蛋白质25～38%，氨基酸18~32%；所述制备方法包括前处理、低温浸提、中温浸提、浸提液混合、浓缩干燥工序；本发明的应用为所述鲜松茸活性提取物在制备增强人体免疫力及抗肿瘤保健品中的应用及作为食品调鲜剂或食品、酿酒、烟草、化妆品添加剂的应用。本发明具有松茸挥发油组分不易挥发、蛋白质和氨基酸不失活，挥发油及活性组分提取率高，提取物鲜味强、香气浓郁的特点。
Description
技术领域
本发明属于食用菌深加工技术领域，具体涉及一种工艺简单、提取率高，有益成分活性强、鲜味足、香气浓郁的鲜松茸活性提取物及其制备方法与应用。
背景技术
松茸(Tricholoma Matsutake [S. Ito et Imai] Sing)学名松口蘑，又称青冈菌、松蕈、剥皮菌，为口蘑科真菌松口蘑的子实体，在我国主要产于东北地区和贵州、云南、四川交界一带海拔3000m的针叶阔林区。松茸菌肉白嫩肥厚，质地细密，口感滑润，新鲜松茸每100g含有水分80～90g、粗蛋白4.5～7.5g、糖类4～7.5g、粗纤维0.5～1.2g、粗脂肪0.4～0.8g以及多种维生素、氨基酸和微量元素等，具有独特的浓郁香气。宋代《菌谱》载：“松蕈，生松阴，……人有病漫浊不禁者，偶啜松下菌，病良已。”松茸性味甘平，具有强身，益肠胃，止痛，理气化痰，驱虫等功效，传统上用于治疗精血亏损，身体虚弱，阳痿遗精，小便频繁，咳嗽多痰，食欲不振，口干，乏力等病。
松茸挥发油组分主要是一些脂肪族化合物，是其香气的主要来源，并对其鲜味具有促进作用，其中1-辛烯-3-醇（1-Octen-3-ol，别名松蕈醇、松茸醇）被广泛认为是大多数野生食用菌香气的最大来源和主要成分，而肉桂酸甲酯（methyl cinnamate，别名β-苯丙烯酸甲酯、桂皮酸甲酯）被韩国、日本及我国吉林产松茸子实体的主要挥发性成分，是松茸独特香气的来源。食用菌中的氨基酸是其鲜味的主要来源，蛋白质对鲜爽味也有重要作用。有研究认为，松茸挥发油组分具有降低胆固醇、抗氧化、免疫调节、抗肿瘤等作用。目前，食用菌包括野生松茸和人工栽培的姬松茸挥发性成分的提取，一般采用蒸馏法、有机溶剂萃取法和有机溶剂萃取-蒸馏法提取，由于蒸馏过程会造成热敏性物质变性和氧化，使得提取物挥发性成分得率降低，有益的活性成分活性降低，且有机溶剂萃取中部分有毒有机溶剂的残存限制了萃取物的使用范围。也有部分采用超临界CO2流体萃取酚类物质的研究（张怡等，超临界流体CO2萃取姬松茸酚类物质的研究[J]，中国农学通报，2008，24（10）:110-114），但大多处于萃取酚类等单一成分。
多糖(polysaccharide)是由糖苷键结合，多个单糖分子缩合、失水而成的聚合糖高分子碳水化合物。真菌多糖是从药食用真菌子实体、菌丝体或其发酵液中分离得到的一类活性多糖，现代医学研究表明其具有抗肿瘤、抗病毒、降血脂、治疗糖尿病、抗辐射、延缓衰老等功效，特别是具有1×105～2×105分子量的高分子多糖组分其生物活性较强。松茸由于富含活性多糖，其抗肿瘤作用在14种具有抗肿瘤作用的大型真菌中位居首位，而且具有用量少、抗肿瘤作用强的特点（陈智毅等，巴西蘑菇的食疗价值[J]，中国食用菌，2001，20（4）:4-5）。松茸水溶性多糖具有明显的抑制肿瘤和增强免疫能力，其中分子量约为6.7×105的β-1,3-D-葡聚糖对免疫调节活性至关重要。目前，松茸多糖一般采用热水浸提、醇沉、干燥提取事先破碎松茸的水溶性多糖，虽然不会引起多糖的降解，但由于细胞壁的阻隔，仅能提取胞外多糖，而其中油脂性挥发油组分会降低松茸的亲水性，进一步降低多糖的提取率；也有采用加酶破坏细胞壁提取的方法，虽然提取率有所提高，但成本提取较高。更有采用弱酸性、弱碱性、稀盐溶液浸提松茸多糖，弱酸和弱碱浸提会造成多糖糖苷键的破坏。
大量研究表明：松茸具有提高免疫力抗辐射及抗肿瘤活性，其主要活性成分为多糖，多糖中主要是β—葡聚糖，有特定的提高免疫力的活性，而松茸的特殊双链生物活性物质称为松茸RNA，具有超强抗基因突变能力和抗瘤作用。松茸中含有的多糖与蛋白质的结合体糖蛋白MTSGSI也有较高的抗肿瘤活性。另外，与氨基酸结合态的有机矿物元素如有机硒、有机砷等，也是参与抗瘤作用的活性成分。所以松茸的活性成分很复杂多样，是多种活性成分综合协同作用表现出药理和保健作用。
单纯提取松茸挥发油组分或多糖，松茸其它富含的有益成分如蛋白质、氨基酸未得到有效利用，而且单一提取挥发油组分或多糖得率较低、成本高昂，难以使松茸提取物得到普及应用。由于松茸活性成分除多糖、蛋白质、氨基酸外，其他活性成分很容易在提取中的挥发油成分作为一种参考标志物。如果挥发性特征香气成分能较好的保留，那么其他活性成分也相对能较好的保留。传统的提取方法侧重于多糖的提取，因此一般用晒干、烘干、煮干、冻干后的松茸提取，但传统干燥或低温干燥会造成部分热敏性成分变性和氧化，使提取物中的有益成分活性降低，影响其医疗、保健功效，而且得到的提取物基本散失了松茸的特征香气。提取有效成分的宗旨应是尽量将所以有效成分富集提取出来，而不是单纯提取某一种成分，而且为使松茸中的活性成分不致变性而失去活性，应用全程低温水提的方法，以最大限度地保留其药理及保健活性。
如果能够提供一种工艺简单、提取率高，提取物有益成分活性强、鲜味足、香气浓郁的鲜松茸活性提取物及其制备方法，将能够提供松茸的资料利用率、降低松茸提取产品的价格，从而解决现有技术存在的不足。
发明内容
本发明的目的在于提供一种工艺简单、提取率高，提取物有益成分活性强、鲜味足、香气浓郁的鲜松茸活性提取物及其制备方法与应用。
本发明的鲜松茸活性提取物是这样实现的，包括质量百分比挥发油组分0.03～0.47%，多糖13～28%，蛋白质25～38%，氨基酸18~32%。
本发明的制备方法是这样实现的：包括备料、破壁粉碎、低温浸提、中温浸提、浸提液混合、低温浓缩、低温干燥工序，具体包括：
A、前处理：将新鲜松茸剔除泥土、杂草、霉变并清洗干净，进行湿态破壁处理得到松茸浆；
B、低温浸提：将松茸浆送入浸提罐中，加入提取水于25～45℃温度下循环浸提，固液分离得到低温浸提液和低温浸提渣；
C、中温浸提：将低温浸提渣送入浸提罐中，加入提取水于85～95℃温度下循环浸提，固液分离得到中温浸提液和浸提渣；
D、浸提液混合：将中温浸提液冷却至低于45℃后与低温浸提液混匀得到混合液；
E、浓缩干燥：将混合液送入浓缩装置中进行浓缩得到浓缩液，送入低温干燥装置中干燥得到鲜松茸活性提取物。
本发明的应用是这样实现的：所述鲜松茸活性提取物在制备增强人体免疫力及抗肿瘤保健品中的应用。
本发明的另一应用是这样实现的：所述鲜松茸活性提取物作为食品天然调鲜剂或食品、酿酒、烟草、化妆品添加剂的应用。
本发明的鲜松茸活性提取物制备方法是将新鲜松茸先除杂备料；然后进行湿态破壁粉碎，保证了破壁粉碎过程中不会因升温而造成热敏性物质变形和其它成分氧化，也为后续最大限度提取松茸胞内有益成分创造良好条件，而且比酶解破壁工艺具有工艺简单、成本低的特点；破壁后经过低温和中温先后逐级水浸提工艺，既保证了挥发油、热敏性成分在低温阶段的提取又不遭到破坏，而且挥发油组分提取率高，大部分脂溶性挥发油组分经低温提取后，可明显降低后期提取松茸多糖时松茸的疏水性，有利于水溶性多糖的提取；固液分离后的低温浸提渣再针对其中多糖中温水溶性好的特点，通过中温水提取多糖，从而增加多糖的提取率和松茸提取物的得率；然后把中温提取液冷却至低温提取时的温度，与低温提取液混匀，保证提取液成分的均匀；最后将提取液经低温浓缩和低温干燥工序，保证了提取液中挥发性成分、热敏性物质不易挥发和变质，而且也保证提取物中活性物质的生物活性。通过全程室温及低温提取挥发性成分和热敏性物质，以及后期的低温浓缩和干燥，使得本发明的松茸提取物挥发油、氨基酸及蛋白质提取率高，生物活性强，较高的挥发油组分提取率，使得提取物的松茸特异性香气浓郁；提取物较高的氨基酸及蛋白质含量，使提取物鲜味极强；低温工艺和不添加有害成分，能够最大限度的减少提取时活性物质失活。本发明的松茸提取物及其制备方法，具有提取物提取物有益成分活性强、鲜味足、香气浓郁，制备方法工艺简单、提取率高的特点。
附图说明
图1为本发明的一种典型工艺流程示意图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变更或改进，均属于本发明的保护范围。
本发明所述鲜松茸活性提取物包括质量百分比挥发油组分0.03～0.47%，多糖13～28%，蛋白质25～38%，氨基酸18~32%。
所述挥发油组分包括质量百分比1-辛烯-3-醇20～75%，肉桂酸甲酯0.8～5.5%。
所述多糖的单糖组分包括D-葡萄糖、半乳糖、核糖。
所述多糖包括 
-葡聚糖。
所述
-葡聚糖包括
-1,3-D葡聚糖、-1,6-D葡聚糖。
如图1所示，本发明所述鲜松茸活性提取物的制备方法，包括备料、破壁粉碎、低温浸提、中温浸提、浸提液混合、低温浓缩、低温干燥工序，具体包括：
A、前处理：将新鲜松茸剔除泥土、杂草、霉变并清洗干净，进行湿态破壁处理得到松茸浆；
B、低温浸提：将松茸浆送入浸提罐中，加入提取水于25～45℃温度下循环浸提，固液分离得到低温浸提液和低温浸提渣；
C、中温浸提：将低温浸提渣送入浸提罐中，加入提取水于85～95℃温度下循环浸提，固液分离得到中温浸提液和浸提渣；
D、浸提液混合：将中温浸提液冷却至低于45℃后与低温浸提液混匀得到混合液；
E、浓缩干燥：将混合液送入浓缩装置中进行浓缩得到浓缩液，送入低温干燥装置中干燥得到鲜松茸活性提取物。
所述鲜松茸包括松茸子实体、松茸菌丝体之一或两者的混合。
所述鲜松茸包括野生鲜松茸和人工种植鲜姬松茸。
所述前处理还包括将新鲜松茸保鲜冷冻贮藏的低温贮藏工序，低温贮藏后松茸在破壁粉碎前快速解冻。
所述湿态破壁处理前还包括将新鲜松茸粗粉碎处理得到松茸粗浆的粗粉碎工序。
所述湿态破壁处理是将新鲜松茸用胶体磨、均质机、球磨机或高速打浆机破壁碾磨制备得到松茸浆。
所述低温浸提工序中加入的提取水为松茸破壁粉重量的2～5倍，浸提0.5～3h，提取1～3次。
所述中温浸提工序中加入的提取水为低温浸提渣重量的3～10倍，浸提1～4h，提取1～2次。
所述低温浸提工序和/或中温浸提工序中的固液分离为离心分离或膜分离。
所述低温浸提工序中膜分离的膜为微滤膜。
所述中温浸提工序中膜分离的膜为5000～10000分子量的超滤膜。
所述低温浓缩工序中的低温浓缩为膜分离浓缩、膜蒸馏浓缩、冷冻浓缩中的任一种或任两种的组合。
所述低温浓缩工序中膜分离浓缩的膜为纳滤膜或反渗透膜。
所述低温干燥工序中的低温干燥为冷冻干燥、低温真空干燥或微波真空干燥。
所述制备方法的低温干燥工序后还包括将鲜松茸活性提取物粉碎至80～200目的粉碎工序。
本发明的应用系所述鲜松茸活性提取物加入药学领域接受的辅料制备成片剂、粉剂、颗粒、口服液或胶囊在增强人体免疫力及抗肿瘤保健品中的应用。
本发明的另一应用系所述鲜松茸活性提取物作为食品天然调鲜剂或食品、酿酒、烟草、化妆品添加剂的应用。
实施例1
取云南保山人工种植新鲜姬松茸，剔除泥土、杂草和霉变姬松茸，经清洗后粉碎为姬松茸粗浆，然后再投入球磨机碾磨至破壁率超过75%得到姬松茸浆；将姬松茸浆送入浸提罐中，加入姬松茸重量3倍的提取水于30℃温度下循环浸提2h，提取2次，微滤膜分离得到低温浸提液和低温浸提渣；将低温浸提渣送入浸提罐中，加入低温浸提渣重量7倍的提取水于90℃温度下循环浸提2h，提取2次，离心分离得到中温浸提液和浸提渣；将中温浸提液冷却至30℃与低温浸提液混匀得到混合液；将混合液送入膜蒸馏浓缩装置中进行浓缩，得到浓缩液；将浓缩液送入低温真空干燥装置中干燥，得到鲜松茸活性提取物，最后将其粉碎至100目，得到鲜松茸提取粉。
实施例2
取云南丽江种植新鲜姬松茸，剔除泥土、杂草和霉变姬松茸，经清洗粉碎为姬松茸粗浆，然后再投入高速打浆机碾磨至破壁率超过70%得到姬松茸浆；将姬松茸浆送入浸提罐中，加入姬松茸浆重量5倍的提取水于40℃温度下循环浸提1h，提取2次，离心分离得到低温浸提液和低温浸提渣；将低温浸提渣送入浸提罐中，加入低温浸提渣重量5倍的提取水于85℃温度下循环浸提3h，提取2次，离心分离得到中温浸提液和浸提渣；将中温浸提液冷却至40℃与低温浸提液混匀得到混合液；将混合液送入纳滤膜浓缩装置中进行浓缩，得到浓缩液；将浓缩液送入冷冻干燥装置中干燥，得到鲜松茸活性提取物，最后将其粉碎至80目，得到鲜松茸提取粉。
实施例3
取云南丽江产野生新鲜松茸，剔除泥土、杂草和霉变松茸，清洗后粉碎为松茸粗浆，然后再投入胶体磨碾磨至破壁率超过80%得到松茸浆；将松茸浆送入浸提罐中，加入松茸浆重量2倍的提取水于45℃温度下循环浸提3h，离心分离得到低温浸提液和低温浸提渣；将低温浸提渣送入浸提罐中，加入低温浸提渣重量3倍的提取水于92℃温度下循环浸提4h，经7500分子量的超滤膜分离得到中温浸提液和浸提渣；将中温浸提液冷却至45℃与低温浸提液混匀得到混合液；将混合液送入冷冻浓缩装置中进行浓缩，得到浓缩液；将浓缩液送入微波真空干燥装置中干燥，得到鲜松茸活性提取物，最后将其粉碎至200目，得到鲜松茸提取粉。
实施例4
取云南丽江野生新鲜松茸，剔除泥土、杂草和霉变松茸，经清洗后保鲜冷冻贮藏，保鲜冷冻贮藏的松茸在破壁粉碎前快速解冻，然后粉碎为松茸粗浆，然后再投入均质机碾磨至破壁率超过80%得到松茸浆；将松茸浆送入浸提罐中，加入松茸浆重量4倍的提取水于35℃温度下循环浸提1h，提取3次，微滤膜分离得到低温浸提液和低温浸提渣；将低温浸提渣送入浸提罐中，加入低温浸提渣重量6倍的提取水于87℃温度下循环浸提1h，提取2次，经10000分子量的超滤膜分离得到中温浸提液和浸提渣；将中温浸提液冷却至35℃与低温浸提液混匀得到混合液；将混合液送入反渗透膜浓缩装置中进行浓缩，得到浓缩液；将浓缩液送入冷冻干燥装置中干燥，得到鲜松茸活性提取物，最后将其粉碎至110目，得到鲜松茸提取粉。
实施例5
取丽江人工种植的新鲜姬松茸菌丝体，剔除泥土、杂草和霉变菌丝体，经清洗后粉碎为姬松茸粗浆，然后再投入高速打浆机碾磨至破壁率超过80%得到姬松茸浆；将姬松茸浆送入浸提罐中，加入姬松茸浆重量5倍的提取水于25℃温度下循环浸提3h，提取2次，微滤膜分离得到低温浸提液和低温浸提渣；将低温浸提渣送入浸提罐中，加入低温浸提渣重量10倍的提取水于90℃温度下循环浸提2h，提取2次，经离心分离得到中温浸提液和浸提渣；将中温浸提液冷却至25℃与低温浸提液混匀得到混合液；将混合液送入冷冻浓缩装置中进行浓缩，得到浓缩液；将浓缩液送入低温真空干燥装置中干燥，得到鲜松茸活性提取物，最后将其粉碎至150目，得到鲜松茸提取粉。
实施例6
取云南保山产野生新鲜松茸，剔除泥土、杂草和霉变松茸，经清洗后保鲜冷冻贮藏，保鲜冷冻贮藏的姬松茸在破壁粉碎前快速解冻，然后粉碎为松茸粗浆，然后再投入胶体磨碾磨至破壁率超过80%得到松茸浆；将松茸浆送入浸提罐中，加入松茸浆重量4倍的提取水于45℃温度下循环浸提0.5h，提取3次，离心分离得到低温浸提液和低温浸提渣；将低温浸提渣送入浸提罐中，加入低温浸提渣重量8倍的提取水于95℃温度下循环浸提1h，提取2次，经5000分子量的超滤膜分离得到中温浸提液和浸提渣；将中温浸提液冷却至40℃与低温浸提液混匀得到混合液；将混合液送入纳滤膜浓缩装置中进行浓缩，得到浓缩液；将浓缩液送入微波真空干燥装置中干燥，得到鲜松茸活性提取物，最后将其粉碎至160目，得到鲜松茸提取粉。
实施例7
取实施例1制备的鲜松茸提取粉加入药用糊精、蔗糖，造粒后制备成颗粒剂。
实施例8
取实施例3制备的鲜松茸提取粉加入药用硬脂酸镁制备成片剂。
实施例9
取实施例4制备的鲜松茸提取粉加入药用微粉硅胶制备成胶囊剂。
实施例10
取实施例5制备的鲜松茸提取粉加入药用环糊精、蔗糖和蒸馏水制备得到口服液。
实施例11
取实施例1、4制备的松茸提取物与传统提取物采用气相色谱-质谱联用法（GC-MS）测定挥发油含量及1-辛烯-3-醇、肉桂酸甲酯的相对含量，如下表:
本发明的鲜松茸活性提取物同比传统松茸提取物具有挥发油含量高，香气成分1-辛烯-3-醇及肉桂酸甲酯占比高的特点。
Claims (6)
1.一种鲜松茸活性提取物，其特征在于包括质量百分比挥发油组分0.03~0.47%，多糖13~28%，蛋白质25~38%，氨基酸18~32%；其制备方法包括前处理、低温浸提、中温浸提、浸提液混合、浓缩干燥工序，具体包括：
A、前处理：将新鲜松茸剔除泥土、杂草、霉变并清洗干净，进行湿态破壁处理得到松茸浆；所述湿态破壁处理是将新鲜松茸用胶体磨、均质机、球磨机或高速打浆机破壁碾磨制备得到松茸浆；
B、低温浸提：将松茸浆送入浸提罐中，加入提取水于25~45℃温度下循环浸提，固液分离得到低温浸提液和低温浸提渣；加入的提取水为松茸浆重量的2~5倍，浸提0.5~3h，提取1~3次；
C、中温浸提：将低温浸提渣送入浸提罐中，加入提取水于85~95℃温度下循环浸提，固液分离得到中温浸提液和浸提渣；加入的提取水为低温浸提渣重量的3~10倍，浸提1~4h，提取1~2次；
D、浸提液混合：将中温浸提液冷却至25~45℃后与低温浸提液混匀得到混合液；
E、浓缩干燥：将混合液送入浓缩装置中进行浓缩得到浓缩液，送入低温干燥装置中干燥得到鲜松茸活性提取物。
2.根据权利要求1所述的鲜松茸活性提取物，其特征在于所述挥发油组分包括质量百分比1-辛烯-3-醇20~75%，肉桂酸甲酯0.8~5.5%。
3.根据权利要求1所述的鲜松茸活性提取物，其特征在于所述前处理还包括将新鲜松茸保鲜冷冻贮藏的低温贮藏工序，低温贮藏后松茸在破壁粉碎前快速解冻。
4.根据权利要求1所述的鲜松茸活性提取物，其特征在于所述低温浸提工序和/或中温浸提工序中的固液分离为离心分离或膜分离；所述低温浓缩工序中的低温浓缩为膜分离浓缩、膜蒸馏浓缩、冷冻浓缩中的任一种或任两种的组合。
5.权利要求1或2所述鲜松茸活性提取物在制备增强人体免疫力及抗肿瘤保健品中的应用。
6.权利要求1或2所述鲜松茸活性提取物作为食品、烟草、化妆品添加剂中的应用。
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| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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Owner name: DAI QUN Effective date: 20150225 |
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Effective date of registration: 20150225 Address after: 650106 Yunnan city of Kunming province high tech Zone Branch Road Xin Ming Xiang Mao new factory of the first floor of building B Patentee after: Yunnan Winner Top Biotechnology Co., Ltd. Patentee after: Dai Qun Address before: 650106 Yunnan city of Kunming province high tech Zone Branch Road Xin Ming Xiang Mao new factory of the first floor of building B Patentee before: Yunnan Winner Top Biotechnology Co., Ltd. |
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| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20150917 Address after: 650224 Yunnan city of Kunming province in Jin Road No. 723 Building No. 1 Kunming Electrical Factory Patentee after: Dai Qun Address before: 650106 Yunnan city of Kunming province high tech Zone Branch Road Xin Ming Xiang Mao new factory of the first floor of building B Patentee before: Yunnan Winner Top Biotechnology Co., Ltd. Patentee before: Dai Qun |