CN103070333A

CN103070333A - 蚕虫草（活性物质）多糖的萃取及其胶囊配制方法

Info

Publication number: CN103070333A
Application number: CN201210548998XA
Authority: CN
Inventors: 杨杰; 李祥麟; 张海燕; 石玉洁
Original assignee: Xuzhou Hongyu Agricultural Science And Technology Co Ltd
Current assignee: Yang Jie
Priority date: 2012-12-18
Filing date: 2012-12-18
Publication date: 2013-05-01
Anticipated expiration: 2032-12-18
Also published as: CN103070333B

Abstract

蚕虫草（活性物质）多糖的萃取及其胶囊配制方法，其工艺为：a.蚕虫草多糖的萃取：100目蚕虫草粉经65℃再烘干后，加数倍于蚕虫草粉重量蒸馏水，大火煮沸，小火维持2小时后，然后经过滤、浓缩、计量沉淀后除去沉淀物，酒精萃取烘干粉碎即成品；b.蚕虫草多糖等活性物质抗衰胶囊的配制方法：蚕虫草多糖和螺旋藻及枸杞、茯苓、桑葚、葛根、枣、蔬果等与蛹虫草酶解提取物，经离心、减压浓缩至8%以上，浓缩液内加60%蚕虫草多糖和1%糊精→喷雾干燥，高压泵工作压力1.76x10⁷帕，进风温度120℃，出风温度75～78℃→冷却→粉碎→装胶囊（0.25～0.3.g∕粒）。

Description

蚕虫草(活性物质)多糖的萃取及其胶囊配制方法

技术领域

本发明涉及一种蚕虫草（活性物质）的萃取及其与食用藻菌、药食两用食物经分离、萃取、合成、发酵制成抗衰老、糖尿病辅助食（疗）品的配制方法。

背景技术

自上个世纪50年代，加拿大科学家从蛹虫草中提取出虫草素等多种物质，我们发现蚕虫草中同样含有多种氨基酸，维生素，微量元素，SOD，虫草素，虫草酸，虫草多糖等生物活性物质，这些生物活性物质各具功能：

1. 虫草素

虫草素是种新型的广谱抗菌素，不仅对病毒，细菌，真菌都有明显的抑制作用，而且能降低冠状动脉血流，改善心肌的血液供应，降低心脏耗氧量，抗心律失常，降低血胆固醇和低密度脂蛋白，提高高密度脂蛋白，缓解血脂过高和动脉硬化，还具有调节胰岛素分泌、降低血糖的作用，从而间接地发挥预防血脂异常和动脉硬化等功效。

虫草素更能阻断肿瘤细胞繁殖所必需依赖的物质——鸟苷酸的形成，破坏肿瘤细胞的代谢和营养，从而抑制肿瘤细胞的转移和增生，如将其与抗肿瘤药物（如环磷酰胺）联合使用，其抗肿瘤作用明显增强。虫草素还能增强大脑中——元胺氧化酶活性。研究表明：老年人食蛹虫草后，简易智能状态评分（MMSD）明显改善。试验用D-半乳糖皮下注射小鼠，会引起小鼠快速衰老，而给予蛹虫草提取物则可以明显对抗这种衰老。

2. 虫草酸：

虫草酸，D-甘露醇能渗入肿瘤细胞DNA的复制。具有抗自由基，抗氧化，扩张血管，降

低血小板聚集，防止心脑血栓形成；并有利尿、排除毒素、促进新陈代谢等功能。临床上用于治疗脑血栓、血管痉挛、肾功能衰竭。

3. 虫草多糖

虫草多糖能促进B细胞和T淋巴细胞增殖，对单核巨噬细胞系统和NK细胞等有明显的激活作用，能促进细胞转化，激活机体的免疫活性细胞，尤以针对淋巴细胞核淋巴因子，增强免疫功能和提高机体免疫系统杀伤肿瘤细胞的能力突出。对老年慢性支气管炎，肺源性心脏病有明显疗效，并能提高肝脏解毒能力，起到护肝作用。

蚕虫草还具有：

综合抗氧化作用，氧自由基是人类新陈代谢过程中产生的一类基团，他们非常活跃，能破坏人体细胞膜甚至更多蛋白酶。随着年龄的增大，人体内对抗氧自由基的物质也越来越少，而蚕虫草含有的SOD可以从外部和内部增强人体抗氧自由基的能力。

对中枢神经系统的调节作用：蚕虫草的提取物能稳定中枢神经系统，具有一定的镇静作用，改善老年人的睡眠。

蚕虫草提取物能提高人体细胞线粒体中的能量，因而具有提高体能，抗疲劳，增强抗寒能力，具有明显的抗衰老功能。

据不完全统计，我国古代《本草拾遗》等70部中药文献和现代《中国药典》，《中国用孢子植物志》《全国中草药汇编》，《中华本草》以及日本《新汉药北虫草之疗效》等200多部医药书籍的记载和数百篇专业研究成果（论文）的论述都表明了蛹虫草的功能作用。尽管蛹虫草的研究应用比冬虫夏草晚了约300年，但其具有的医疗保健作用已很显著，甚至有些论述认为它可以代替天然野生的冬虫夏。

目前很多国家的医药学家，一些前沿医学研究都采用蛹虫草为原料进行研究，临床试验，都取得了不同程度的成果，如台湾学者发现蛹虫草具有拮抗肾移植的排异作用。对肺癌、肝癌有一定的抑制功能，可延长患者的生存期3~5年。我国用其治疗胃癌等多种癌症49例，其中有效（症状改善）13例，显著（症状明显改善或肿瘤缩小）23例，无效13例，总有效率为73.5%（杨企镇、郭用庄1995）。

蛹虫草对离体人肾小球系膜增殖的影响。——能明显抑制LDL引起的系膜细胞增殖（王筱霞、吴兆龙）；蛹虫草对癌诱变剂——MMS所致BALB/C小鼠脾细胞DNA有损伤的拮抗作用（郁利本、闫秀欣等）；蛹虫草对大鼠肝线粒体功能的影响，可以防止丙二醛诱导的呼吸控制率下降（陈顺志、王文忠等）；蛹虫草治疗老年痴呆疗效观察（沈均、陶荣芬）。1997年美国国家癌症研究中心（NCI）已将虫草素列入18种抗肿瘤新药进行研究，目前已进入临床试验。由于蛹虫草内含的多种生物活性物质，因此可作为药品、食疗物品及保健营养品的原料，并将其应用于抗衰老和功能食品中。

蚕虫草——我们将蛹虫草菌（孢子）接种在以蚕幼虫为寄主的体内，培育而成的新品。其内含营养和活性物质的数量都超过蛹虫草；它们不同之处，仅仅是寄主，蛹虫草的寄主是蚕蛹，蚕虫草的寄主是蚕幼虫。因此，我们认为蚕虫草也同样具有蛹虫草的功能。

虽然目前市场上各种医疗保健食品琳琅满目，但是充分利用蚕虫草分解、萃取物制作成药食两用食品的，并能根据人体的生理机能达到最佳效果的药食两用食品国内外未见报道。

发明内容

蚕虫草（活性物质）多糖的萃取及其胶囊配制方法，就是为满足广大消费者的需求，而公开了一种抗衰老及糖尿病辅助食（疗）品的制作方法。

一、本发明具有以下特点：

1、将蛹虫草菌（孢子）接种在活家蚕幼虫体内，模拟自然生态环境下培育；

2、全部采用藻菌食品和国家卫生部批准的药食两用食物为原，应用生物工程技术分解，萃取，合成，发酵制成抗衰老胶囊和糖尿病辅助食（疗）品；

3、本品为健康食品，不含任何其他化学添加剂或药物，其安全性很高，无任何毒副作用；

4、本品经免疫，致畸，致突变和Ames试验都表明安全，无任何不良反应；

5、本品经临床试验证明其保健功能较明显。

二、本发明所做的试验及分析

为进一步证明蚕虫草的食品绝对安全、可靠、无任何毒副作用，我们在完成了其急性、亚急性、慢性毒性等一系列的检验无任何毒性的基础上，再深入地作其致畸、致突变等项毒理和临床试验：

① 免疫试验

适用LCR雄性小鼠（免疫22~28g），致伤方法为5%Ⅱ⁺烧伤。

给药方式：4mg/只，每天皮下注射一次，共6次，结果如下：

蚕虫草免疫力试验结果

1.

2.

淋巴细胞转化 CPM±SO
	烧伤对照 6 11968±3319
7 3275±794

3.

腹腔巨噬细胞吞噬运动吞噬百分数指数
	烧伤对照 6 64.0±6.11 2.51±0.17
蚕虫草 7 55.0±11.2 3.42±0.21

从上表可以看出，蚕虫草具有增强机体免疫力的作用

① 小鼠精子致畸试验

以雄性小鼠，用环磷酰胺30mg/kg体重。均以2ml/100g体重容量灌胃，连续灌胃5

天，再饲养30天，自由摄食普通饲料和水，于第35天杀死小鼠，分离两侧副（附）睾，于2ml生理盐水中撕碎，过滤后制片，每只小鼠镜检1000只精子，计算畸变率，结果如下表

小鼠精子畸变试验结果

组别	剂量（g/kg）体重	动物数	受检精子数	畸变数	畸变率（%）
						1	0.0	5	5000	0.95
2	0.2	5	5000		0.98
						3	1.0	5	5000	0.96
4	5.0	5	5000		0.95
						5	对照（阳性）	5	5000	3.68

从上表可见，阳性（对照组）的精子畸变率明显高于试验组（阴性）（P＜0.01），1-4组，各组的精子畸变率两比较P均＞0.05，且分布一致，以无定型为主。

所以蚕虫草对小鼠精子无致畸变的作用

② 骨髓细胞微核试验

以小鼠5组，每组10只；以1-4组为实验组；5组为对照组，分别用蚕虫草2ml/100g体重和环磷酰胺（30mg/kg体重）；均以2ml/100g体重容量灌胃；连续5天，第6天杀死小鼠，取胸骨进行骨髓制片，每只小鼠镜检1000个嗜多染红细胞计算微核出现率，结果如下表

小鼠骨髓微核试验结果

组别	剂量（g/kg）	动物数（只）	微核出现率%
				1	0.0	10	1.20
2	0.2	10	1.10
				3	1.0	10	0．9
4	5.0	10	1.2
				5	阳性对照	10	19.8

从上表可见，1组（试验）微核出现率为1.2，属小鼠骨髓细胞微核出现率正常范围。5组（对照）为19.8，明显高于1组（P<0.01），因此，蚕虫草对于小鼠骨髓细胞微核出现率无影响。

③ Ames试验

将蚕虫草粉碎，配置成0.1mg/ml，1.0mg/ml，10.0mg/ml，50mg/ml 4种浓度试液，高压灭菌后，选用鼠伤寒沙门氏菌TA₉₇，TA₉₈，TA₁₀₀，TA₁₀₂四个试验用标准菌株（菌株和S₉均由上海疾控中心毒理室提供）。采用标准平皿渗入法，每一平皿加受试液0.1ml，二天后计数，每平皿菌落回变数，结果如下

Ames试验结果

从上表可见，各试验浓度下，皿回变菌落数均未超过自发回变数的2倍，而对照（阳性）组均显示了强烈的诱变作用。蚕虫草在5000mg和低于5000mg的剂量下，未显示致突变的作用。

本发明还大幅度地提高了蚕虫草的消化吸收利用率，一般情况下，其消化率（T.O）为30~50%左右，蛋白质净利用率（NPC）为25~33%左右，而本发明通过酶解和调整原料的配比及辅料的品种、数量使其消化率提高到70~75%左右，蛋白质的净利用率提高到45~55%左右，增幅高达50~100%。

上述实验结果表明，大量或长期食用蚕虫草对人体无任何毒副作用，从而也证实了蚕虫草完全能安全地用于生产保健食品。

大量研究证实，蚕虫草内含蛋白质高达80%左右，18种氨基酸，其中有8种是人体必需的，且其组成平衡合理，还含有不饱和脂肪酸（子亚油酸）核酸，10种维生素，SOD和Zn，Fe，Ca，P及硒、锶等微量元素，将其作为食品，既能改善人体营养状况，又能增强人体免疫，并具有抗衰老，抑制癌细胞等之功效，由于其内含多种物质的功能各异，将它们组合在一起，可是这些营养物质能够在发挥各自功能的基础上又增加了协同作用的功能，从而使其功能更显著突出。

培育成的蚕虫草收获后经酶解，分离得酶解提取物，以酶解提取物为原料与辅料经酶解、萃取、合成制成或提取各种保健食品或其他活性物质（SOD等）。

所用的酶为下列酶的一种或多种，一般以两种以上为佳。

纤维素酶，木瓜酶，菠萝酶，中性蛋白酶，蛋白酶，米曲霉，红曲霉，糖化酶，淀粉酶，蜗牛酶等。并使用酶激活剂，如K，Na，Fe，P，Mn，Mg等。PH值控制在2-11之间，温度为10~45℃；时间为5.6~18.5小时。使用或不使用交换树脂，酶解提取物经进一步加工，制成不同的保健食品。

本发明中，“辅料”指构成保健食品组合物的辅助性原料，即除蚕虫草酶解提取物和水之外的其它原料，包括①螺（节）旋藻；②谷类：淀粉、糊精；③食用菌和藻类；④药食二用食物；⑤甜味剂——糖、甜菊甙、蛋白糖、木醇糖等。

三、本发明的制作方法

蚕虫草（活性物质）多糖的萃取及其胶囊配制方法

a. 蚕虫草多糖的萃取

100目蚕虫草粉经65℃再烘干后，加10倍于蚕虫草粉重量蒸馏水，置不锈钢或玻璃容器内，大火煮沸，小火维持2小时后，过滤→滤汁继续加热浓缩至原加水的1∕4~1∕5时，倒入洁净容器内计量→冷却→沉淀。冷却后的浓缩液倾入另一容器时注意勿将沉淀物带入，此时浓缩液的准确数量为浓缩后的数量减去废弃的沉淀物数量。

用普通酒精，加入量（ml）=（75×浓缩液ml）∕（该酒精浓度-75）

注意加酒精时应缓慢，并搅拌均匀。当混合液中酒精浓度约为75%时，多糖成絮状物下沉→离心（3000g∕5分钟）→（真空干燥）或65℃烘箱鼓风烘干，呈棕褐色块状→粉碎→包装（即成品）。

b.蚕虫草多糖等活性物质抗衰胶囊的配制方法

将蚕虫草多糖、螺旋藻、枸杞、茯苓、桑葚、葛根、枣、蔬果各组分与蛹虫草酶解提取物混合，其中枸杞、茯苓、桑葚、葛根、枣、蔬果，可随季节任选其中2种，经离心（3000g∕15分钟）离心后，减压浓缩至8%以上，浓缩液内加60%蚕虫草多糖和1%糊精→喷雾干燥（进料温度50～60℃）高压泵工作压力1.76x10⁷帕，进风温度120℃，出风温度75～78℃→冷却→粉碎→装胶囊（0.25～0.3.g∕粒）。

蚕虫草抗衰胶囊临床试验

国际医学界常用①SOD含量对比；

① T淋巴细胞亚群T₃，T₄百分比值；

② 羟脯氨酸HO-PRO；

③ PH值；

④ 面色、皱纹、皮肤松弛状等项来判断人机体衰老的程度。

我们选择了SOD和T₃、T₄项作为判定蚕虫草胶囊的抗衰能力。

T₃、T₄的百分比值改变，也说明其代谢加强。

不同年龄的人，虽服食同样数量的胶囊，但他们的增质量却不一样，表现为年龄越大，增值越小，反之，年龄越小其增值越大，这可能与他们自身的代谢作用有关，年龄大的其代谢较慢。所有服食者都自我感到体力增强很多，尤以男性更加突出；性功能都有增强、提高，性伴侣都能感到他有所增强，一般在服食8~10天后就有这种感觉…。因此，提示蚕虫草胶囊具有一定的抗衰功能。

具体实施方式

本发明的制备具体如下：

实例，蚕虫草胶囊

①型：（以重量份计）蚕虫草多糖和螺（节）旋藻酶解提取物45～90%，枸杞5～10%，枣3～5%，桑葚5～10%，茯苓5～8%，葛根5～8%，香菇或猴头菇3～5%.

将枸杞、桑葚、枣、茯苓、葛根、香菇或猴头菇6种食物混匀，其中香菇或猴头菇选其一，加5～8倍水→夹层锅中加热，煮沸4～6小时，提取出煮液后，再加3～5倍水，继续加热煮沸4小时，取出煮液，合并2次滤液→过滤→离心（3000g∕15分钟）→真空干燥器内（真空度8.38x10⁴帕以上）浓缩→浓缩至8～10%，加入蚕虫草和螺（节）旋藻酶解提取物→50～60℃烘干→粉碎至100目细度→制粒→装胶囊，包装，灭菌。每粒含蚕虫草螺旋藻酶解提取物0.25～0.3g。

蚕虫草胶囊对糖尿病的辅助食疗作用

②型：（以重量份计）蚕虫草多糖和螺（节）旋藻紫菜酶解提取物45～90%，白扁豆5～15%，葛根3～8%，桑叶10～20%，香菇3～5%，苦瓜（依季节）或茯苓5～10%。

上列各物混合匀后，加5倍清洁水，加热煮沸4小时后取第一次液体；再加3倍水煮沸4小时后取出第二次液体→合并二次液体过滤→离心（3500g∕15分钟）放入真空干燥器或减压浓缩至8%浓缩液，再加入50%的蚕虫草多糖螺旋藻提取物和1%糊糊，喷雾干燥（进料温度50～60℃，高压泵工作压力1.76x10⁷帕，进风温度120℃，出风温度75～78℃→冷却→粉碎成100目→制粒装胶囊，粒重0.25～0.30g。

本发明的临床试验和结果：

A组：经10位志愿者（6位男性，女性4人，他们的年龄在45~65岁之间）每位试验，每日与他们经医生诊治给予的降糖药同时服用此胶囊，每日3次，每次4粒，连续观测20天，每隔4天，分别采取指端测血糖，结果如下表：

蚕虫草胶囊降血糖的试验结果（平均值）

验测数	男性6人	女性4人	下降率（平均值）
				起始数	8.5	8.2
4天后	8.5	8.3
				8天后	8.4	8.1
12天后	7.6	7.6
				16天后	7.2	7.0
20天后	6.7	6.5

B组：经10位自愿者（男性女性各5位，他们年龄40~50岁之间）每位试验者从开始到第十天为一阶段，同时服胶囊和降糖药，从第十一天开始减少原服降糖药1∕3，第21天起，降糖药减少至2∕3，结果如下：

验测时间	男性	女性	减少降糖药量
				起始时间	8.8	8.9	——
第十天	8.3	8.4	——
				20天	7.0	7.2	原用降糖药减少1∕3
30天	6.5	6.6	原用降糖药减少2∕3
				40天	6.4	6.5	原用降糖药减少2∕3

从上列二表可见，蚕虫草胶囊②型，对糖尿病患者的血糖下降，具有不同程度的作用；一般情况下，患者服食后血糖都有逐渐下降趋势，就是在减少用药的情况下，他们的血糖都有不同程度的下降，因此，提示该胶囊对糖尿病患者有辅助的食疗作用。

Claims

1.蚕虫草（活性物质）多糖的萃取及其胶囊配制方法，其工艺为：

a.蚕虫草多糖的萃取

100目蚕虫草粉经65℃再烘干后，加10倍于蚕虫草粉重量蒸馏水，置不锈钢或玻璃容器内，大火煮沸，小火维持2小时后，过滤→滤汁继续加热浓缩至原加水的1∕4~1∕5时，倒入洁净容器内计量→冷却→沉淀，冷却后的浓缩液倾入另一容器时注意勿将沉淀物带入，此时浓缩液的准确数量为浓缩后的数量减去废弃的沉淀物数量；

加酒精时应缓慢，并搅拌均匀，当混合液中酒精浓度约为75%时，多糖成絮状物下沉→离心（3000g∕5分钟）→（真空干燥）或65℃烘箱鼓风烘干，呈棕褐色块状→粉碎→包装（即成品）；

b.蚕虫草多糖等活性物质抗衰胶囊的配制方法

2.根据权利要求1所述的蚕虫草（活性物质）多糖的萃取及其胶囊配制方法，其特征在于：所述的蛹虫草酶解所用的酶为下列酶的一种或多种，优选方式以两种以上：

纤维素酶，木瓜酶，菠萝酶，中性蛋白酶，蛋白酶，米曲霉，红曲霉，糖化酶，淀粉酶，蜗牛酶，并使用酶激活剂，如K，Na，Fe，P，Mn，Mg等，PH值控制在2-11之间，温度为10~45℃；时间为5.6~18.5小时，使用或不使用交换树脂。

3.根据权利要求1所述的蚕虫草（活性物质）多糖的萃取及其胶囊配制方法，其特征在于：所述的胶囊有多种类型，其中胶囊 ①型制作：（以重量份计）蚕虫草多糖和螺（节）旋藻酶解提取物45～90%，枸杞5～10%，枣3～5%，桑葚5～10%，茯苓5～8%，葛根5～8%，香菇或猴头菇3～5%；将枸杞、桑葚、枣、茯苓、葛根、香菇或猴头菇6种食物混匀，其中香菇、猴头菇选其一，加5～8倍水→夹层锅中加热，煮沸4～6小时，提取出煮液后，再加3～5倍水，继续加热煮沸4小时，取出煮液，合并2次滤液→过滤→离心（3000g∕15分钟）→真空干燥器内（真空度8.38x10⁴帕以上）浓缩→浓缩至8～10%，加入蚕虫草和螺（节）旋藻酶解提取物→50～60℃烘干→粉碎至100目细度→制粒→装胶囊，包装，灭菌，每粒含蚕虫草螺旋藻酶解提取物0.25～0.3g；

胶囊②型：（以重量份计）蚕虫草多糖和螺（节）旋藻紫菜酶解提取物45～90%，白扁豆5～15%，葛根3～8%，桑叶10～20%，香菇3～5%，苦瓜（依季节）或茯苓5～10%；上列各物混合匀后，加5倍清洁水，加热煮沸4小时后取第一次液体；再加3倍水煮沸4小时后取出第二次液体→合并二次液体过滤→离心（3500g∕15分钟）放入真空干燥器或减压浓缩至8%浓缩液，再加入50%的蚕虫草多糖螺（节）旋藻提取物和1%糊精，喷雾干燥（进料温度50～60℃，高压泵工作压力1.76x10⁷帕，进风温度120℃，出风温度75～78℃→冷却→粉碎成100目→制粒装胶囊，粒重0.25～0.30g。