CN103040834B

CN103040834B - 一种注射用培美曲塞二钠及其制备方法

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Publication number: CN103040834B
Application number: CN201210569901.3A
Authority: CN
Inventors: 李立忠; 王勇; 解晓荣; 李润宝; 苏志强; 姚荷云; 闫洁; 胡成伟
Original assignee: Shanxi Powerdone Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Shanxi Powerdone Pharmaceutics Co., Ltd.
Priority date: 2012-12-25
Filing date: 2012-12-25
Publication date: 2014-07-02
Anticipated expiration: 2032-12-25
Also published as: CN103040834A

Abstract

本发明公开了一种注射用培美曲塞二钠，所述注射用培美曲塞二钠按重量份计，由包括如下组分的原料制备而成：培美曲塞二钠化合物50-60份、甘露醇20-40份及精氨酸2-4份；此外，本发明还提供了一种培美曲塞二钠化合物，该培美曲塞二钠化合物稳定性得到显著提高，有机溶剂残余量低，质量可控，长时间放置不易发生变化，大大提高了患者用药安全。

Description

一种注射用培美曲塞二钠及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种注射用培美曲塞二钠及其制备方法。

背景技术

培美曲塞二钠是一种新型叶酸抗代谢制剂，可抑制多种叶酸依赖性酶的活性而发挥其抗癌作用。2004年2月4日，FDA批准培美曲塞二钠和顺铂联用治疗恶性胸膜间皮瘤。2004年8月19日，FDA又批准培美曲塞二钠作为局部晚期或者转移性非小细胞肺癌（NSCLC）的二线用药。由于该产品作用的靶点比较多，并且毒副作用相对较轻，所以国际上进行了很多瘤种的临床试验，显示了该产品抗肿瘤的广阔前景。

现有技术公开了多种培美曲塞二钠及其相关制剂，如从制剂处方和制备方法角度提出的改进方案：

中国申请201110420626公开了一种注射用培美曲塞二钠的制备工艺。其处方为：培美曲塞二钠200g、甘露醇200g、盐酸或氢氧化钠适量及注射用水10000ml，该技术方案无法显著改善制剂的稳定性。

中国申请201110218616公开了一种培美曲塞二钠的药物组合物。处方：培美曲塞二钠110份、海藻糖60-105份、冻干赋形剂0-40份；所述赋形剂选自甘露醇、山梨醇和乳糖中的一种或多种，优选甘露醇。其解决的技术问题是培美曲塞二钠不稳定易降解，常规需要加入抗氧剂，但溶液稳定性难以达到制剂要求，液体保存溶液出现活性成分降解和有关物质增加的问题，导致疗效下降和不良反应风险。礼来公司上市了冻干制剂，甘露醇为唯一辅料，疗效显著。但注射用冻干粉针应用过程中常发生输注疼痛的情况，甚至出现患者局部炎性反应，据报道，临床应用培美曲塞二钠有时需要与激素类药物或局麻药结合使用以降低患者不适感。出现药物局部刺激作用大多是由于主药本身具有强刺激性，但也有部分情况是由于主辅药之间的配伍问题，而后者可以通过改变辅料种类和配比来解决。但该制剂使用的辅料用量过大，对主药产生较大影响，容易引起副作用。

中国专利ZL200810234188公开了一种培美曲塞二钠冻干粉针剂及其制备方法。处方：培美曲塞二钠50份、甘露醇10-50份、亚硫酸钠0.1-1份，pH7-8。其解决的技术问题是：培美曲塞二钠稳定性较差，在高温、氧化和光照条件下易发生降解，产生可能引发毒副作用的杂质，冻干制剂稳定性差，临床使用时配伍溶液不能放置长时间。但其冻干复杂，生产成本高，不宜推广。

中国专利ZL201110036849.0公开了一种培美曲塞二钠冻干粉针剂及其制备方法。培美曲塞二钠冻干粉针剂处方：培美曲塞二钠：甘露醇为1:0.6-2.0。其解决的技术问题：培美曲塞二钠的稳定性较差。在高温、氧化条件下易发生降解产生可能引发毒副作用的杂质，不适合支撑注射液。但现有培美曲塞二钠冻干粉针在运输和储存过程中也常因为温度控制不严格而导致有关物质的含量明显增加。且现有技术冻干工艺粗糙，成品水分含量高，且冻干过程中升温缓慢，能耗大，效益低。该申请给出的方案对上述问题的改进效果并不明显。

此外，现有技术也公开了从培美曲塞二钠本身提出纯化方法或者制备出新的培美曲塞二钠化合物，以改进其相关制剂的稳定性，如：

中国申请200910198326公开了一种制备培美曲塞二钠2.5水结晶的方法。具体将培美曲塞二钠溶于水，将其滴加到能与水互溶的有机溶剂中进行析晶，过滤，收集。其中，有机溶剂为C1-C5的直链或支链的醇、C3-C5的酮、甲基叔丁基醚、乙二醇二甲醚、四氢呋喃或1,4-二氧六环中的一种以上，进一步优选甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、正丁醇、异丁醇、丙酮、丁酮或戊酮。其解决的问题为：现有2.5水结晶的吸湿性较强，现有制备难以控制2.5水，7水何物和3水合物容易出现，7水合物虽无吸湿性，但在较高温度，较低适度或真空条件下易失水成小于7水的水合物。

中国申请201110071294.3公开了一种高纯度培美曲塞二钠的纯化方法。具体方法：将培美曲塞二钠溶于水，调pH7.5-8.5，加入氯化钠溶液，搅拌，至氯化钠溶液浓度为8-20%，静置析晶；过滤，滤饼用8-20%氯化钠溶液洗涤，滤饼加入水中使之溶解，再加入能与水混溶的有机溶剂，搅拌至有机溶剂量达70-90%，静置析晶，过滤，干燥，即得。其中有机溶剂选自乙醇、乙腈和二甲基甲酰胺中一种或多种。

中国申请200810037024.9公开了一种培美曲塞二钠无定形多晶型物及其制备方法。具体制备方法为：将原料培美曲塞加入到有机溶剂中；将氢氧化钠或者氢氧化钠的醇溶液加入到上述混合物中，10-80℃反应0.5-6小时，降温析晶，冷却，过滤，收集滤饼，减压干燥得产物。解决的问题：目前公开的培美曲塞二钠晶型有WO0114379公开的2.5水合物晶型和WO0162760公开的7水合物晶型以及CN1778802A公开的三水合物晶型。但2.5水合物不稳定，3水合物虽然稳定性较前者好，但干燥时难以控制结晶水数量，可能出现2.5水合物。7水合物质量稳定，但在较高温度、较低湿度或真空条件下储存非常容易失去部分结晶水，且该水合物的干燥过程还增加了用湿氮气流处理的过程及相应的设备，增加了生产成本。

中国专利ZL200710092879.7公开了一种培美曲塞盐的纯化方法。其制备方法：通过盐析操作实现，所述盐析操作包括使培美曲塞盐从保护培美曲塞盐、另一种或多种水溶性盐的水溶液中析晶出来。解决的技术问题：目前培美曲塞二钠和培美曲塞的纯化方法均涉及到用混合溶剂加热析晶的过程，由于培美曲塞二钠和培美曲塞都具有较易氧化的特性，因此在受热过程中势必会加速它们的氧化降低产品的质量和收率。此外。有机溶剂的回收难度和成本也很大。该申请仅利用盐析，不使用加热和有机溶剂即可以对培美曲塞二钠实现纯化。

中国专利ZL201010606198.x公开了一种高纯度培美曲塞二钠的工业化生产方法。具体制备方法：将培美曲塞二钠粗品加入反应器中，在10-30度下加水搅拌至溶解，粗品与水的重量比为1:5-25；向其中加入四氢呋喃或乙腈作为溶剂，析出部分固体，再加入硅藻土或硅胶，搅拌5-30min，其中四氢呋喃或者乙腈的体积是步骤1水体积的1-10倍，吸附剂与粗品重量比为0.01-0.2：1；将所得反应液过滤，滤液中加入步骤2相同的溶剂，在10-30度下析晶0.5-10小时，分离出固体，在20-40度下干燥0.5-10小时，即得高纯度培美曲塞二钠，其中溶剂为步骤1水体积的5-15倍。其解决的技术问题：现有公开的产品析晶方法，如水溶解，加入乙醇、异丙醇等直接析晶的方法，由于培美曲塞二钠合成过程中所得的杂质在艰辛条件下和产品一样溶解在水中，然后加入反溶剂如乙醇、异丙醇等溶剂。杂质一并析出，基本达不到去除杂质的效果。盐析法一是由于培美曲塞二钠在水中的溶解性交大，加入饱和的钠盐等一般析出的产品很少，损耗太大，且该产品中往往包裹过量的盐，使产品含量低，引入无机杂质。以上公知技术均无法有效去除杂质，所得产品为类白色或浅绿色，单个杂质一般在0.2%以上，想将其进一步控制在0.1%以下是无法达到的，难以满足注射剂原料的质量要求，应用在注射剂中势必会给患者带来较高的不良反应。

中国专利ZL200410097283.2公开了培美曲塞二钠的一种新晶型及其制备方法。具体保护一种新晶型，优选为培美曲塞二钠三水合物，其制备方法包括使培美曲塞二钠盐从包含培美曲塞二钠盐、水和能与水混溶的溶剂中结晶出来，然后减压干燥结晶，控制真空度为400-760mmHg，其中与水混溶的溶剂为乙醇，所得培美曲塞二钠的X射线粉末衍射图见图2。

但上述技术方法都无法真正满足冻干制剂本身及临床应用过程中对培美曲塞二钠原料提出的高要求，因此，依然有待于找到一种理想的培美曲塞二钠化合物，以进一步得到稳定性、疗效等显著优于现有技术的注射用培美曲塞二钠。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种注射用培美曲塞二钠，为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种注射用培美曲塞二钠，所述注射用培美曲塞二钠按重量份计，由包括如下组分的原料制备而成：培美曲塞二钠化合物5-60份、甘露醇20-40份、精氨酸2-4份。

优选由包括如下组分的原料制备而成：培美曲塞二钠化合物55.1份、甘露醇30份、精氨酸3份。

本发明所述注射用培美曲塞二钠采用了新处方，以甘露醇和精氨酸结合作为辅料与培美曲塞二钠化合物制成注射用培美曲塞二钠。该处方通过对辅料的选择及主辅料配比的优化，能够避免现有以甘露醇单一辅料制的注射用冻干粉针在应用过程中发生输注疼痛的情况，保证了患者的用药安全。

上述注射用培美曲塞二钠化合物可以采用现有技术公开的任意培美曲塞二钠化合物，如市售的培美曲塞二钠，WO0114379公开的2.5水合物晶型和WO0162760公开的7水合物晶型以及CN1778802A公开的三水合物晶型，可以预见的是，由于本发明所提供的处方合理，所得注射用培美曲塞二钠自然具有显著的稳定性和有效性。但与此同时，发明人意外在实验过程中发现，以下述培美曲塞二钠化合物作为原料具有更显著的效果，能够极大的突出本发明处方的合理性，更进一步确保制剂的稳定性和疗效，在应用过程中体现了极大的优势。

所述培美曲塞二钠化合物结构如式（I）所示，所述培美曲塞二钠化合物用粉末X射线衍射测定法测定，以2θ±0.2衍射角表示的X射线粉末衍射图谱在10.05°、10.90°、11.40°、12.51°、14.22°、15.94°、18.33°、19.72°、21.44°、22.92°、23.84°、28.08°、29.98°、31.95°和33.32°处显示出特征衍射峰；

式（I）。

本发明所述的培美曲塞二钠化合物采用如下方法制备而成：

（1）称取100份培美曲塞二钠粗品，将其中的94-98份溶于体积相当于培美曲塞二钠粗品重量10-15倍的水中，搅拌均匀，得溶液A；

（2）在40℃-45℃下，以20-30rmp的搅拌速度将剩余2-6份培美曲塞二钠粗品充分溶解于丙酮与异丙醇的混合液中形成溶液B，混合液中丙酮与异丙醇的用量体积为1:3-7；

（3）在2-4小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为20℃-25℃，滴加过程中以5-10rmp的低速搅拌；

（4）滴加完毕后，将溶液温度降至0~5℃，静置养晶8~12小时，过滤，滤饼用丙酮洗涤，40℃以下低温干燥2小时以上，得培美曲塞二钠化合物。

现有技术公开了多种培美曲塞二钠的纯化方法，试图提高培美曲塞二钠的纯度以进一步改善制剂的稳定性及疗效。现有技术也公开了以培美曲塞粗品制备的新晶型。但发明人在实际应用过程中发现，如ZL200410097283.2公开的培美曲塞二钠三水合物新晶体虽然较粗品或现有的2.5水合物晶体和7水合物晶体的吸湿性和失水性有所改善，但当将其进一步制备成组合物制剂后，培美曲塞二钠的稳定性与现有产品无异，究其原因，可能是冻干过程中使上述三水合物新晶型丧失了其作为原料时的优越性能，充分溶于水且经过复杂的冻干过程，很可能失去了3个结晶水，导致其稳定性下降。

发明人在试验过程中意外发现，在采用反溶剂重结晶法对培美曲塞二钠化合物进行处理时，将少量培美曲塞二钠粗品充分溶解于反溶剂中，再以滴加的方式对培美曲塞二钠水溶剂进行析晶操作，出人意料的能够诱导出一种化合物，将该化合物的X射线粉末衍射图与现有公开的培美曲塞二钠粉末衍射图比较可知，本发明得到的是一种全新的培美曲塞二钠化合物。该新型培美曲塞二钠化合物本身及其制剂在稳定性试验等均表现出显著优于现有培美曲塞二钠化合物的优势。由于培美曲塞二钠化合物能够显著改善制剂的稳定性，这就能够保障患者的用药安全。

此外，为了获得一种成熟的，可重复实现并工业化推广应用的重结晶方法，发明人对此做了大量针对性试验，进一步优化了各操作步骤，使所述的制备方法能够稳定地实现，获得均一的高质量培美曲塞二钠化合物。

值得注意的是，本发明所述的培美曲塞二钠粗品即市售的培美曲塞二钠，具体的选择为本领域技术人员所理解。

本发明优选所述的制备方法包括如下步骤：

（1）称取100g培美曲塞二钠粗品，将其中的96份溶于体积相当于培美曲塞二钠粗品重量12倍的水中，搅拌均匀，得溶液A。

（2）在42℃下，以25rmp的搅拌速度将剩余4份培美曲塞二钠粗品充分溶解于丙酮与异丙醇的混合液中形成溶液B，混合液中丙酮与异丙醇的用量体积为1:6；混合液的体积为溶液A的0.8-2倍。

（3）在3小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为22℃，滴加过程中以8rmp的低速搅拌。

（4）滴加完毕后，将溶液温度降至2℃，静置养晶10小时，过滤，滤饼用丙酮洗涤，30-40℃干燥2.5小时，得培美曲塞二钠化合物。

除特别说明外，本发明所述重量与体积比的单位为g/ml。

采用上述技术方案，本发明可以批量得到高质量的培美曲塞二钠化合物，上述制备方法操作简单，对设备和人工的要求低，再现性强，且纯度和收率高，适宜推广生产。所得培美曲塞二钠化合物显著性显著优于现有技术，应用于注射用培美曲塞二钠后，也能够显著提高制剂的稳定性及疗效，并缓解注射疼痛。

本发明的第二目的在于提供上述注射用培美曲塞二钠的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

（1）称取处方量的甘露醇和精氨酸，加入全量50-80%注射用水，搅拌使溶解后，加入处方量的培美曲塞二钠化合物，搅拌使主药充分溶解；

（2）以pH调节剂将pH值调至7.5～8.0，加入0.5-1.5‰针用活性炭，在50-65℃搅拌25-35分钟后除炭过滤，以0.22μm滤膜过滤除菌；

（3）检测合格后，半压塞，冻干，压塞，即得。

其中，所述步骤1中的溶解在40-50℃下完成。

其中，所述步骤2中pH调节剂为0.1mol/L HCl或0.1mol/LNaOH。

其中，所述步骤3中冻干过程具体如下：

（1）预冻：把分装的药品放入冻干箱内隔板上预冻至-35~-45℃；保温2-4h；

（2）升华干燥：制品温度升温至-8～-12℃，保温3-5小时；后继续升温至-0.2~0℃，保温3-5小时；

（3）再干燥：将制品温度自-0.2~0℃梯度依次升至10℃、20℃、30℃，各温度分别保持6-8h、11-13h和5-7h，再升温至35-40℃，保温干燥1-7h。

上述制备方法进一步保证了所得注射用培美曲塞二钠的稳定性，所得制剂的复溶性也显著优于现有技术，是一种理想的替代品。其中所述的培美曲塞二钠化合物，既可以采用现有技术公开的培美曲塞二钠，但作为优选的，最好采用本发明所得到的培美曲塞二钠化合物，以进一步保证制剂的质量。

作为本发明的一种最佳实施方式，本发明所述的注射用培美曲塞二钠采用如下处方及制备方法：

处方：

培美曲塞二钠	551g
		甘露醇	300g
精氨酸	30g
		注射用水加至	8000ml
制成	1000瓶

制备方法：

配制：称取处方量的甘露醇和精氨酸，加入适量注射用水，搅拌使溶解后，加入处方量的培美曲塞二钠，搅拌使主药溶解完全，以0.1mol/L HCl或0.1mol/LNaOH调pH值至7.5～8.0，加入1.0‰针用活性炭60℃搅拌30分钟后除炭过滤，以0.22μm滤膜过滤除菌；用20ml西林瓶，以8ml/瓶的装量分装，半压塞，冻干，压塞，即得。

冻干曲线：预冻时制品温度为≤-35℃，预冻时间为3h；所执行冻干曲线如下：

温度（℃）	时间（分钟）
		-40	1
-10	240
		-0.1	240
10	420
		20	480
30	360
		37	360。

采用上述技术方案，本发明所得注射用培美曲塞二钠具有理想的稳定性和疗效，并能彻底避免现有制剂可能出现的输注疼痛，从而保证了患者的用药安全。

附图说明

图1为本发明所述培美曲塞二钠化合物的X射线粉末衍射图；

图2为ZL200410097283.2中培美曲塞二钠三水合物的X射线粉末衍射图。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1培美曲塞二钠化合物的制备

（1）称取100g培美曲塞二钠粗品，将其中的96g溶于体积相当于培美曲塞二钠粗品重量12倍（g/ml）的水中，搅拌均匀，得溶液A。

（2）在42℃下，以25rmp的搅拌速度将剩余4g培美曲塞二钠粗品充分溶解于丙酮与异丙醇的混合液中形成溶液B，混合液中丙酮与异丙醇的用量体积为1:6；混合液的体积为溶液A的1.5倍。

（4）滴加完毕后，将溶液温度降至2℃，静置养晶10小时，过滤，滤饼用丙酮洗涤，38℃干燥2.5小时，得培美曲塞二钠化合物，总收率为94.76%。。

所得培美曲塞二钠化合物的X射线粉末衍射图见图1（在10.05°、10.90°、11.40°、12.51°、14.22°、15.94°、18.33°、19.72°、21.44°、22.92°、23.84°、28.08°、29.98°、31.95°和33.32°处显示出特征衍射峰）。

实施例2培美曲塞二钠化合物的制备

（1）称取100g培美曲塞二钠粗品，将其中的98g溶于体积相当于培美曲塞二钠粗品重量15倍的水中，搅拌均匀，得溶液A；

（2）在40℃下，以20rmp的搅拌速度将剩余2g培美曲塞二钠粗品充分溶解于丙酮与异丙醇的混合液中形成溶液B，混合液中丙酮与异丙醇的用量体积为1:3，混合液的体积为溶液A的0.8倍；

（3）在2小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为20℃，滴加过程中以5rmp的低速搅拌；

（4）滴加完毕后，将溶液温度降至5℃，静置养晶8小时，过滤，滤饼用丙酮洗涤，低温干燥2小时以上，得培美曲塞二钠化合物，总收率为93.29%。。

所得培美曲塞二钠化合物的X射线粉末衍射图见图1。

实施例3培美曲塞二钠化合物的制备

（1）称取100g培美曲塞二钠粗品，将其中的94g溶于体积相当于培美曲塞二钠粗品重量10-15倍的水中，搅拌均匀，得溶液A；

（2）在45℃下，以30rmp的搅拌速度将剩余6g培美曲塞二钠粗品充分溶解于丙酮与异丙醇的混合液中形成溶液B，混合液中丙酮与异丙醇的用量体积为1:7，混合液的体积为溶液A的2倍；

（3）在2-4小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为25℃，滴加过程中以10rmp的低速搅拌；

（4）滴加完毕后，将溶液温度降至0℃，静置养晶12小时，过滤，滤饼用丙酮洗涤，低温干燥2小时以上，得培美曲塞二钠化合物，总收率为93.79%。

所得培美曲塞二钠化合物的X射线粉末衍射图见图1。

实施例4培美曲塞二钠化合物的制备

（1）称取100g培美曲塞二钠粗品，将其中的97g溶于体积相当于培美曲塞二钠粗品重量12倍的水中，搅拌均匀，得溶液A；

（2）在42℃下，以24rmp的搅拌速度将剩余3g培美曲塞二钠粗品充分溶解于丙酮与异丙醇的混合液中形成溶液B，混合液中丙酮与异丙醇的用量体积为1:4，混合液的体积为溶液A的1.2倍；

（3）在3小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为22℃，滴加过程中以6rmp的低速搅拌；

（4）滴加完毕后，将溶液温度降至4℃，静置养晶10小时，过滤，滤饼用丙酮洗涤，低温干燥2小时以上，得培美曲塞二钠化合物，总收率为92.68%。

所得培美曲塞二钠化合物的X射线粉末衍射图见图1。

实施例5培美曲塞二钠化合物的制备

（1）称取100g培美曲塞二钠粗品，将其中的95g溶于体积相当于培美曲塞二钠粗品重量10-15倍的水中，搅拌均匀，得溶液A；

（2）在40℃下，以28rmp的搅拌速度将剩余5g培美曲塞二钠粗品充分溶解于丙酮与异丙醇的混合液中形成溶液B，混合液中丙酮与异丙醇的用量体积为1:6，混合液的体积为溶液A的1.8倍；

（3）在4小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为20℃，滴加过程中以6rmp的低速搅拌；

（4）滴加完毕后，将溶液温度降至3℃，静置养晶11小时，过滤，滤饼用丙酮洗涤，低温干燥2小时以上，得培美曲塞二钠化合物，总收率为92.43%。

所得培美曲塞二钠化合物的X射线粉末衍射图见图1。

实施例6注射用培美曲塞二钠

处方：

制备方法：

配制：称取处方量的甘露醇和精氨酸，加入70%注射用水，搅拌使溶解后，加入处方量的培美曲塞二钠，搅拌使主药溶解完全，以0.1mol/L HCl或0.1mol/LNaOH调pH值至7.5～8.0，加入1.0‰针用活性炭60℃搅拌30分钟后除炭过滤，以0.22μm滤膜过滤除菌；用20ml西林瓶，以8ml/瓶的装量分装，半压塞，冻干，压塞，即得。

冻干曲线：预冻时制品温度为–40℃，预冻时间为3h；所执行冻干曲线如下：

其中，所述培美曲塞二钠为实施例1所制备的培美曲塞二钠化合物。

实施例7注射用培美曲塞二钠

与实施例6相比区别点仅在于本实施例中采用的培美曲塞二钠为现有技术公开的培美曲塞二钠粗品。

实施例8注射用培美曲塞二钠

与实施例6相比区别点仅在于本实施例中采用的培美曲塞二钠为ZL200410097283.2公开的培美曲塞二钠晶体。

实施例9注射用培美曲塞二钠

与实施例6相比区别点仅在于本实施例中采用的培美曲塞二钠为WO0162760公开的7水合物晶体。

实施例10注射用培美曲塞二钠

处方：

培美曲塞二钠	500g
		甘露醇	200g
精氨酸	20g
		注射用水加至	8000ml
制成	1000瓶

制备方法：

配制：称取处方量的甘露醇和精氨酸，加入50%注射用水，搅拌使溶解后，加入处方量的培美曲塞二钠，搅拌使主药溶解完全，以0.1mol/L HCl或0.1mol/LNaOH调pH值至7.5～8.0，加入0.5‰针用活性炭50℃搅拌25分钟后除炭过滤，以0.22μm滤膜过滤除菌；用20ml西林瓶，以8ml/瓶的装量分装，半压塞，冻干，压塞，即得。

冻干曲线：预冻时制品温度为-35℃，预冻时间为3h；所执行冻干曲线如下：

温度（℃）	时间（分钟）
		-35	1
-8	180
		-0.2	180
10	360

20	420
		30	300
35	360。

实施例11注射用培美曲塞二钠

处方：

制备方法：

配制：称取处方量的甘露醇和精氨酸，加入80%注射用水，搅拌使溶解后，加入处方量的培美曲塞二钠，搅拌使主药溶解完全，以0.1mol/L HCl或0.1mol/LNaOH调pH值至7.5～8.0，加入1.0‰针用活性炭65℃搅拌35分钟后除炭过滤，以0.22μm滤膜过滤除菌；用20ml西林瓶，以8ml/瓶的装量分装，半压塞，冻干，压塞，即得。

冻干曲线：预冻时制品温度为–45℃，预冻时间为3h；所执行冻干曲线如下：

温度（℃）	时间（分钟）
		-45	1
-12	300
		0	300
10	480
		20	540
30	420
		40	420。

试验例1稳定性试验

本发明还进一步提供如下试验例，以进一步对本发明的技术方案进行说明。

本试验例检测了本发明所提供的培美曲塞二钠化合物的稳定性（试验结果均以各试验组培美曲塞二钠重量计算）。

试验对象：

对照组1为中国专利ZL200410097283中公开的培美曲塞二钠3水合物（实施例1）；

对照组2为WO0114379公开的培美曲塞二钠2.5水合物；

对照组3为WO0162760公开的培美曲塞二钠7水合物；

对照组4为市售培美曲塞二钠粗品（即实施例1所用原料），HPLC纯99.62％；

试验方法：

性状：供试品为白色或类白色无定形粉末。

比旋度：取供试品适量，精密称定，用水溶解并定量制成每1ml中含10mg的溶液，依法测定（中国药典2005年版二部附录ⅥF）。比旋度应为＋10.0°至＋14.0°。

酸碱度：取供试品0.25g，加水25ml使溶解，依法测定（中国药典2005年版二部附录ⅥH），pH值应为6.5～8.5。

溶液的澄清度与颜色：取供试品0.25g，加水25ml使溶解，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液（附录ⅨB）比较，均不得更浓；如显色，与黄色2号标准比色液（中国药典2005年版二部附录ⅨA第一法）比较，不得更深。

有关物质：取供试品适量，用水制成每1ml含1.0mg的溶液作为供试品溶液。精密量取供试品溶液用水制成每1ml含0.01mg的溶液作为对照溶液。照含量测定项下的色谱条件进行试验，精密取对照溶液10μl，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使对照溶液主峰高为记录仪满量程的10～25%；再精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图至培美曲塞二钠峰保留时间的3倍，供试品溶液如出现杂质峰，最大单个杂质峰面积不得过对照溶液主成分峰面积的0.5倍；量取杂质峰面积之和，不得过对照品溶液主成分峰面积(1%)。

含量测定：照高效液相色谱法（中国药典2005年版二部附录VD）测定。

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.1%磷酸-乙腈(85∶15)为流动相，检测器波长为225nm。理论板数按培美曲塞二钠峰计算，应不低于2500。

测定法：取供试品50mg，精密称定，置100ml量瓶中用水溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml置10ml量瓶中并用水稀释至刻度，摇匀，精密取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。另精密称取对照品适量用流动相制成每1ml含0.1mg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。

本试验结果见表1和表2：

表1加速试验结果(75%±5%、40℃±2℃)

表2长期试验结果(60%±10%、25℃±2℃)

上述试验结果说明，本发明提供的培美曲塞二钠化合物稳定性好，加速、长期试验纯度含量变化小。其中以实施例1的稳定性最佳。而现有技术公开的其他水合物晶体相较结果显示稳定性较差，尤其是对照组4。可见本发明所得新培美曲塞二钠化合物显著改善了已有培美曲塞二钠化合物的稳定性，为进一步得到稳定性及药效均优于现有技术的培美曲塞二钠制剂提供了基础。

本发明其他实施例产品也进行了相同的实验，并得到相同趋势的实验结果，但篇幅所限，本发明不再一一列举。试验例2注射用培美曲塞二钠稳定性试验

本试验例检测了本发明所提供的注射用培美曲塞二钠的稳定性（试验结果均以各试验组培美曲塞二钠重量计算）。

本试验按照中国药典2005版第二部附录XIX C药物稳定性试验指导原则进行，结果如下：

加速试验结果(75%±5%、40℃±2℃)

表3长期试验结果(60%±10%、25℃±2℃)

上述试验结果表明，本发明所述注射用培美曲塞二钠的稳定性好，加速、长期试验纯度含量变化小。其中以实施例6的效果最好，即本发明所述的培美曲塞二钠化合物对制剂质量能够起到显著的改进作用。此外，将本发明所得注射用培美曲塞二钠与现有技术公开的其他培美曲塞二钠冻干制剂相比，稳定性和疗效均取得了显著改善。尤其在临床应用中，本发明所得制剂未出现任何输注疼痛现象，确保了患者的用药安全。虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims

1.一种注射用培美曲塞二钠，其特征在于，所述注射用培美曲

塞二钠按重量份计，由包括如下组分的原料制备而成：培美曲塞二钠化合物5-60份、甘露醇20-40份、精氨酸2-4份；所述培美曲塞二钠化合物用粉末X射线衍射测定法测定，以2θ±0.2衍射角表示的X射线粉末衍射图谱在10.05°、10.90°、11.40°、12.51°、14.22°、15.94°、18.33°、19.72°、21.44°、22.92°、23.84°、28.08°、29.98°、31.95°和33.32°处显示出特征衍射峰；

式（I）。

2. 根据权利要求1所述的注射用培美曲塞二钠，其特征在于：由包括如下组分的原料制备而成：培美曲塞二钠化合物55.1份、甘露醇30份、精氨酸3份。

3.根据权利要求1所述的注射用培美曲塞二钠，其特征在于，所述的培美曲塞二钠化合物采用如下方法制备而成：

（1）称取100份培美曲塞二钠粗品，以g/ml计，将其中的94-98份溶于相当于培美曲塞二钠粗品重量10-15倍的水中，搅拌均匀，得溶液A；

（2）在40℃-45℃下，以20-30rmp的搅拌速度将剩余2-6份培美曲塞二钠粗品充分溶解于丙酮与异丙醇的混合液中形成溶液B，混合液中丙酮与异丙醇的用量体积比为1:3-7；

4.根据权利要求3所述的注射用培美曲塞二钠，其特征在于，所述的培美曲塞二钠化合物采用如下方法制备而成：

（1）称取100g培美曲塞二钠粗品，以g/ml计，将其中的96份溶于相当于培美曲塞二钠粗品重量12倍的水中，搅拌均匀，得溶液A；

（2）在42℃下，以25rmp的搅拌速度将剩余4份培美曲塞二钠粗品充分溶解于丙酮与异丙醇的混合液中形成溶液B，混合液中丙酮与异丙醇的用量体积比为1:6；混合液的体积为溶液A的0.8-2倍；

（3）在3小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为22℃，滴加过程中以8rmp的低速搅拌；

5.权利要求1所述注射用培美曲塞二钠的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括如下步骤：

（3）检测合格后，半压塞，冻干，压塞，即得。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1中的溶解在40-50℃下完成。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2中pH调节剂为0.1mol/L HCl或0.1mol/L NaOH。

8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3中冻干过程具体如下：

（1）预冻：把分装的药品放入冻干箱内隔板上预冻至-35 ~-45℃；保温2-4h；

（2）升华干燥：制品温度升温至-8 ~-12℃，保温3-5小时；后继续升温至-0.2 ~0℃，保温3-5小时；

（3）再干燥：将制品温度自-0.2 ~0℃梯度依次升至10℃、20℃、30℃，各温度分别保持6-8h、11-13h和5-7h，再升温至35-40℃，保温干燥1-7h。

9.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的制备方法具体为

处方：

制备方法：

配制：称取处方量的甘露醇和精氨酸，加入适量注射用水，搅拌使溶解后，加入处方量的培美曲塞二钠，搅拌使主药溶解完全，以0.1mol/L HCl或0.1mol/L NaOH调pH值至7.5～8.0，加入1.0‰针用活性炭60℃搅拌30分钟后除炭过滤，以0.22μm滤膜过滤除菌；用20ml西林瓶，以8ml/瓶的装量分装，半压塞，冻干，压塞，即得；

冻干曲线：预冻时制品温度为≤–35℃，预冻时间为 3h ；所执行冻干曲线如下：

温度-℃ 时间-分钟 -40 1 -10 240 -0.1 240 10 420 20 480 30 360 37 360

。