CN103030589A

CN103030589A - N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮及制备和应用

Info

Publication number: CN103030589A
Application number: CN2012102198658A
Authority: CN
Inventors: 薛思佳; 肖笛; 李兴玉; 孙传文
Original assignee: Shanghai Normal University
Current assignee: Shanghai Normal University; University of Shanghai for Science and Technology
Priority date: 2012-06-28
Filing date: 2012-06-28
Publication date: 2013-04-10
Anticipated expiration: 2032-06-28
Also published as: CN103030589B

Abstract

本发明涉及有机合成及医药领域，公开了一种N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮，制备方法为，由4-氟苄胺和丙烯酸甲酯出发，依次经Michael加成、Dieckmann缩合、酸解并脱羧得到N-（4-氟苄基）-4-哌啶酮，后者与4-三氟甲基苯甲醛经羟醛缩合反应得到的目标化合物N-（4-氟苄基）-3,5-双（4-三氟甲基苄叉基）-4-哌啶酮。该目标物能高效选择性地抑制12种白血病细胞系、卵巢癌、乳腺癌、肝癌和食道癌等细胞系增殖，其抑制上述癌细胞系增殖的活性均明显高于常规的化疗药物5-氟脲嘧啶,且对正常造血干细胞毒性较低。

Description

N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮及制备和应用

技术领域

本发明属于化学药物领域，具体涉及N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮，可作为治疗白血病、卵巢癌、乳腺癌、肝癌和食道癌药物的先导化合物。

背景技术

癌症是当今世界上死亡率最高的疾病之一，它对人类的健康造成了极严重的危害。据中国发布的流行病学统计，我国各地区白血病发病率在各种肿瘤中占第六位，目前至少有400万白血病患者，每年新增约4万名。近年来，由于室内装修造成的污染，导致血液病患者人数急剧增加。白血病是一类造血细胞恶性疾患，好发于青少年，其发病率排在青少年肿瘤的第一位，所以对人类的危害更为明显和突出。

原发性肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，虽然全球的肝癌发病率在各种肿瘤中位列第8位，其死亡率却排在第4位，且全球50％以上的肝癌发生在中国。

卵巢癌和乳腺癌是女性最常见的肿瘤疾病，据资料统计，卵巢癌和乳腺癌发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌，严重影响妇女身心健康甚至危及生命。

目前，对于上述多种癌症仍然采用化疗的方法来治疗，化疗仅能通过大量杀伤高度增殖的白血病细胞而使患者得到短期缓解，但无法根治这种恶性疾患。且由于目前所用的化疗药物多缺乏特异性，所以毒副作用很大。更棘手的是，大多数复发患者的白血病细胞常常对现有的化疗药物产生了耐药性。

现在临床上常用的化疗药物的共同的缺点是选择性不强，对正常细胞和肿瘤细胞具有几乎相同的杀伤作用。所以毒性较大,对骨髓、消化道细胞和生殖细胞也有很强的杀伤作用。

发明内容

本发明目的是提供N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮（代号为ALB65），该化合物是一种可作为治疗白血病、卵巢癌、乳腺癌、肝癌和食道癌药物的先导化合物。

本发明的第二个目的是，提供该抗癌药物先导化合物ALB65的制备方法。

本发明的第三个目的是，将该化合物用于制备治疗白血病、卵巢癌、乳腺癌、肝癌和食道癌等多种癌症的药物，化合物ALB65具有高效抑制白血病、卵巢癌、乳腺癌、肝癌和食道癌等多种癌细胞系增殖的生物活性，IC₅₀值均明显低于常规化疗药物5-氟尿嘧啶（5Fu）。化合物ALB65体内急性毒性低，对正常造血干细胞的毒性较低。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

本发明提供的具有高效杀死白血病、卵巢癌、乳腺癌、肝癌和食道癌等多种癌细胞的活性，对正常造血干细胞毒性较低的，抗癌药物的先导化合物N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮（代号为ALB65）的结构式如式（I）所示：

本发明提供式（I）化合物的制备方法如下：

（1）将4-氟苄胺（a）与丙烯酸甲酯经过Michael加成反应制成N，N-二-（甲氧羰基乙基）-4-氟苄胺（b）；

（2）将步骤（1）的产物（b）在醇钠作用下发生Dieckmann缩合得到化合物（c），然后在酸作用下水解并脱羧得到N-（4-氟苄基）-4-哌啶酮(d)；

（3）将化合物(d)与4-三氟甲基苯甲醛进行羟醛缩合反应，得到目标化合物N-（4-氟苄基）-3,5-双（4-三氟甲基苄叉基）-4-哌啶酮(Ⅰ)。

具体步骤包括：

（1）-5～5℃下，丙烯酸甲酯溶解于有机溶剂I，向其中滴加含有4-氟苄胺的有机溶剂I，控制体系温度不超过50℃；滴加完毕后继续搅拌20～60min，继续回流反应6～10hr；去除有机溶剂I及未反应的丙烯酸甲酯得到N，N二-（甲氧羰基乙基）-4-氟苄胺；所述有机溶剂I为C1～C4低级脂肪醇；优选为甲醇；丙烯酸甲酯与4-氟苄胺摩尔比优选为2：1～4：1；

（2）以醇钠为催化剂，N，N-二-（甲氧羰基乙基）-4-氟苄胺在有机溶剂II中回流反应4～8hr发生Dieckmann缩合得到N-（4-氟苄基）-2-甲氧羰基4-哌啶酮；再用20wt%～30wt%无机酸溶液萃取，水相回流反应6～12hr；再调节pH至8～9，用有机溶剂III萃取，合并有机相干燥后去除有机溶剂IV，得到N-（4-氟苄基）-4-哌啶酮；所述有机溶剂II为甲苯、乙腈或四氢呋喃，优选为甲苯；所述有机溶剂III为乙酸乙酯或丙酮，优选为乙酸乙酯；醇钠优选为甲醇钠或乙醇钠；无机酸优选为盐酸；

（3）N-（4-氟苄基）-4-哌啶酮与4-三氟甲基苯甲醛在有机溶剂IV中混合，5～40℃搅拌反应0.5～2hr，取固体；N-（4-氟苄基）-4-哌啶酮与4-三氟甲基苯甲醛摩尔比优选为1：2；所述有机溶剂IV为C1～C4低级脂肪醇，优选为乙醇。

本发明的化合物N-（4-氟苄基）-3,5-双（4-三氟甲基苄叉基）-4-哌啶酮（ALB65）可以应用于制备治疗白血病，卵巢癌、乳腺癌、肝癌和食道癌等多种癌症的药物。

本发明提供的抗癌药物先导化合物N-（4-氟苄基）-3,5-双（4-三氟甲基苄叉基）-4-哌啶酮（ALB65），具有高效抑制多种癌细胞系增殖的生物活性，具体包括如下癌细胞系：白血病K562等12种白血病细胞系，卵巢癌HO-8910细胞系，乳腺癌MCF-7细胞系，肝癌SMMC-7721细胞系和食道癌ECA-109细胞系。该化合物可以应用于制备抑制白血病细胞系、卵巢癌细胞系、乳腺癌细胞系、肝癌细胞系和食道癌细胞系等癌症细胞系增殖的药物。

抗癌药物先导化合物N-（4-氟苄基）-3,5-双（4-三氟甲基苄叉基）-4-哌啶酮（ALB65）具有较低的体内急性毒性，对正常造血干细胞的毒性较低。其抑制白血病K562等12种白血病细胞系，卵巢HO-8910细胞系，乳腺癌MCF-7细胞系，肝癌SMMC-7721细胞系和食道癌ECA-109细胞系增殖的活性均明显高于常规的抗癌化疗药物5-氟脲嘧啶（IC₅₀值均明显低于5-氟尿嘧啶），有可能成为特效的、毒负作用较小的新型抗白血病药物，具有潜在的实用性。

经对抗癌药物先导化合物N-（4-氟苄基）-3,5-双（4-三氟甲基苄叉基）-4-哌啶酮（ALB65）抗白血病K562细胞活性的作用机制研究，初步确证了其抗白血病K562细胞活性的作用机制。

附图说明

图1为N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮诱导K562细胞凋亡的流式分析图。

图2为经N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮处理K562细胞48小时后的吖啶橙（AO）染色图。

图3为经N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮处理K562细胞后DNA电泳图。

具体实施方式

实施例1N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮的制备方法

在0℃冰水浴中，将0.4mol的丙烯酸甲酯和7mL甲醇加入100mL三口瓶中，搅拌30min后，向其中缓慢滴加0.1mol 4-氟苄胺和10mL的甲醇混合溶液，控制滴加速度，，使体系温度不超过50℃（约1滴/秒）。滴加完毕后，室温下搅拌30min，继续升高温度至65℃，回流，薄层色谱(TLC)跟踪反应进程。反应约8h后，停止反应，减压蒸馏回收甲醇和未反应的丙烯酸甲酯，得到浅黄色油状液体中间体(b)。

室温下，将15mL无水甲苯和0.1mol金属钠（切成块状）加入250mL干燥的三口瓶中，搅拌加热回流约40min，至钠块呈现珠状，缓慢滴加0.1mol中间体(b)和20mL无水甲苯混合液，在反应刚开始时用滴管滴加3滴无水甲醇促使反应的进行。在滴加过程中反应体系逐渐变成浅黄色粘稠状，需加大搅拌速度，滴加完毕后，如有需要将40mL无水甲苯分批加入到反应容器中，控制体系温度为110℃，回流6h。

回流完毕后，冷却至室温，加入1mL无水甲醇并搅拌1h,以除去未反应完的金属钠，随后将混合物用质量分数为25%的盐酸溶液40mL×3萃取，收集萃取液（水相），将萃取液油浴回流8h，反应结束后，冷却反应体系至室温后，搅拌下用NaOH溶液调节反应系的pH值至碱性(pH=8.5左右)，用乙酸乙酯40mL×3萃取。合并乙酸乙酯层，用10g无水硫酸钠对其进行干燥,减压蒸馏回收乙酸乙酯，蒸馏底物即为淡黄色油状液体N-取代哌啶-4-酮(d)。

在50mL的圆底烧瓶中加入中间体(d)（0.005mol）和4-三氟甲基苯甲醛（0.01mmol）,15mL无水乙醇以及10%(质量分数)氢氧化钠1mL。室温（15～25℃）搅拌1h,有固体析出，抽滤，再用无水乙醇洗涤产物，或用乙酸乙酯和石油醚重结晶即得到目标化合物(I)。产率：92.6%，黄色固体，熔点：168-170℃。

Yield:76.3%;yellow solid,mp 169-171°C;¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ3.67(s,2H),3.87(s,4H),7.01(d,J=7.8Hz,2H),7.13(d,J=7.9 Hz,2H),7.38(d,J=8.1Hz4H),7.32(d,J=8.3Hz 4H),7.85(s,2H);IR(KBr):3131,2939,1662,1616,1509,1263,1215,1179,1002,765cm^-1;MS(ESI)m/z 520([M+H]⁺).Anal.calcd.for C₂₈H₂₀F₇NO C%64.74,H%3.88,F%25.60,N%2.70,O%3.08;Found:C%64.72H%3.97,F%25.51,N%2.78,O%3.02.

上述制备过程的反应式为：

实施例2 化合物ALB65抑制白血病K562等12种白血病癌细胞系增殖的IC₅₀的测试

1.测试药剂及设备

实验药品与试剂：自制化合物ALB65，用DMSO溶解，加蒸馏水配至所需浓度(DMSO浓度≤1‰)，灭菌4℃保存。MTT(四甲基偶氮唑蓝)试剂购自Sigma公司。人白血病细胞K562，Jarket，U937，THP-1，NB₄BF，MM-6，HK-2，HL-60，ML-2，KG-1a，Molm-13,SP2/0细胞系购于上海中科院细胞库。10%SDS试剂（Sino-American Biotechnology产品），用含20%小牛血清(FBS)的RPMI-1640(美国GiBCo公司)培养液，其它试剂都是市售分析纯。在37℃、5%CO₂、饱和湿度的培养箱中进行传代培养，待细胞处于对数生长期时用于实验。

仪器设备：超净工作台，洁净<3.5粒/L(>0.5μm尘粒)，上海上净净化设备有限公司；CO₂细胞培养箱，Thermo公司Forma Scientific,Inc；倒置显微镜，日本奥林巴斯(OLYMPUS)公司，型号CKX41；酶联免疫检测仪，Bio-RAD Model 680；96孔平板，美国Costar公司；SK2200H型超声波清洗器，上海科导超声仪器有限公司。

2.试验方法

实验在96孔板中进行，收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，分于96孔板中，1×10⁴/孔，每孔总体积100μL，每组8个复孔，设置药物颜色对照孔(不含细胞)和含细胞与不同浓度药物的培养孔，分别培养44h后，在各孔中加入MTT(5mg/mL,10μL)，继续培养4h，再加入10%SDS 100μL终止反应，37℃过夜，用酶联免疫检测各孔在570nm的吸光度A值。用EXCEL做趋势线计算出IC50值。

3.结果调查

用MTT法测定了化合物ALB65抑制白血病K562等12种白血病细胞系增殖的IC₅₀值，IC₅₀值见表1。

表1化合物ALB65抑制12种白血病细胞系增殖的IC₅₀值

细胞系	IC₅₀（μM）	细胞系	IC₅₀（μM）
				K562	0.16	HL-60	1.09
Jarket	1.44	HK-2	1.55
				U937	1.29	ML-2	1.17
THP-1	1.92	KG-1a	2.02
				NB₄BF	2.36	Molm-13	1.79
MM-6	0.83	SP2/0	7.13
				K562(5-Fu)	126

4.结论：表1所示为化合物ALB65在体外细胞水平抑制人12种白血病细胞系增殖的IC₅₀。由表1数据可知，化合物ALB65抑制上述12种白血病细胞系增殖的IC₅₀值均明显低于常规化疗药物5-氟尿嘧啶（5Fu）。

实施例3 化合物ALB65抑制卵巢癌、乳腺癌、肝癌和食道癌细胞系增殖IC₅₀的测试

1.测试药剂及设备

实验药品与试剂：自制化合物ALB65，用DMSO溶解，加蒸馏水配至所需浓度(DMSO浓度≤1‰)，灭菌4℃保存。MTT(四甲基偶氮唑蓝)试剂购自Sigma公司。人白血病细胞卵巢癌HO-8910细胞系，乳腺癌MCF-7细胞系，肝癌SMMC-7721细胞系和食道癌ECA-109细胞系购于上海中科院细胞库。10%SDS试剂（Sino-American Biotechnology产品），用含20%小牛血清(FBS)的RPMI-1640(美国GiBCo公司)培养液，其它试剂都是市售分析纯。在37℃、5%CO₂、饱和湿度的培养箱中进行传代培养，待细胞处于对数生长期时用于实验。

仪器设备：超净工作台，洁净<3.5粒/L(>0.5μm尘粒)，上海上净净化设备有限公司；CO₂细胞培养箱，Thermo公司Forma Scientific,Inc；倒置显微镜，日本奥林巴斯(OLYMPUS)公司，型号CKX41；酶联免疫检测仪，Bio-RAD Model 680； 96孔平板，美国Costar公司；SK2200H型超声波清洗器，上海科导超声仪器有限公司。

2.试验方法

3.结果调查

用MTT法测定了化合物ALB65抑制人卵巢癌、乳腺癌、肝癌和食道癌等细胞系增殖的IC₅₀值，IC₅₀值见表2。

表2化合物ALB65抑制人卵巢癌、乳腺癌、肝癌和食道癌细胞系增殖的IC₅₀值

细胞系	IC₅₀（μM/L）	5-FU IC₅₀（μM/L）
			卵巢癌HO-8910	18.69	242.93
乳腺癌MCF-7	15.92	100.0
			肝癌SMMC-7721	17.74	＞384.61
食道癌ECA-109	21.43	342

4.结论：表2所示为化合物ALB65在体外细胞水平抑制抑制人卵巢癌、乳腺癌、肝癌和食道癌等细胞系增殖的IC₅₀值。由表2数据可知，化合物ALB65抑制上述四种癌细胞系增殖的IC₅₀值均明显低于常规化疗药物5-氟尿嘧啶（5Fu）。

实施例4 化合物ALB65体内急性毒性ID₅₀的测试

1.测试药剂及设备

实验药品与试剂：自制化合物(Ⅰ)，用CMC配至所需浓度(CMC浓度=0.5%)，灭菌4℃保存。用吐温-80配至所需浓度（吐温80浓度=1.0%）。CMC是市售分析纯，吐温-80是药用级纯度。实验小鼠（4周龄SPF级BALB/c小鼠）购自上海斯莱克实验动物有限公司。

仪器设备：超净工作台，洁净<3.5粒/L(>0.5μm尘粒)，上海上净净化设备有限公司；独立送风隔离笼具，苏州市冯氏实验动物设备有限公司，型号：IVC-Ⅱ；SK2200H型超声波清洗器，上海科导超声仪器有限公司。

2.试验方法

设置5个按等比级数增加的药物组20mg/kg，100mg/kg,200mg/kg,1000mg/kg,2000mg/kg将药物置于0.5%CMC溶液中研磨均匀，制备成混悬液，以0.2ml/10g剂量灌胃；设置3个按等比级数增加的药物组10mg/kg，100mg/kg,1000mg/kg将药物置于1.0%吐温-80溶液中制备成溶液，以0.1ml/10g剂量尾静脉注射；灌胃组和静脉注射组均采用区组随机法分组，每组10只。给药后SPF级条件下饲养48h，记录小鼠死亡时间。

3.结果调查

当灌胃剂量为2000mg/kg时，未有小鼠死亡。灌胃ID₅₀＞2000mg/kg。

当静脉注射剂量为1000mg/kg时，未有小鼠死亡。静脉注射ID₅₀＞1000mg/kg。

4.结论：

体内急性毒性实验结果表明：化合物ALB65单次小鼠灌胃ID₅₀＞2000mg/kg，静脉注射ID₅₀＞1000mg/kg，属低毒类。

实施例5 化合物ALB65抗白血病K562细胞活性的作用机制确证

1.流式测定法测定化合物ALB65促使K562细胞凋亡

（1）测试药剂及设备

实验药品与试剂：自制化合物ALB65，用DMSO配至所需浓度(DMSO浓度≤1‰)，灭菌4℃保存。慢性粒细胞白血病细胞系K562细胞购于上海中科院细胞库。用含20%小牛血清(FBS)的RPMI-1640(美国GiBCo公司)培养液，Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒(瑞士Roche公司)，其它试剂都是市售分析纯。在37℃、5%CO₂、饱和湿度的培养箱中进行传代培养，待细胞处于对数生长期时用于实验。

仪器设备：超净工作台，洁净<3.5粒/L(>0.5μm尘粒)，上海上净净化设备有限公司；CO₂细胞培养箱，Thermo公司Forma Scientific,Inc；96孔平板，美国Costar公司；SK2200H型超声波清洗器，上海科导超声仪器有限公司。美国BD 公司FACS AriaⅢ型流式细胞分选仪。

（2）试验方法

实验在6孔板中进行，收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，分于6孔板中，1×10⁵/孔，每孔总体积1000μL，每组2个复孔，设置阴性对照孔(不含药物)和含细胞与不同浓度药物的培养孔，分别培养48h后，3000rpm离心5min，收集沉淀，PBS洗两次，用400μL 1XBinging Buffer悬浮细胞，再加入5μL Annexin V-FITC，室温下避光孵育15min。加入10μL PI后室温下避光孵育5min，上机检测。

（3）结果调查

流式细胞仪测定化合物ALB65诱导K562细胞凋亡的流式分析图见图1。

（4）结论：经流式细胞仪定量测定化合物ALB65处理K562细胞48小时后的细胞凋亡率发现，化合物ALB65的处理显著促使K562细胞凋亡，化合物ALB65浓度为0.16μM时，凋亡细胞百分比为85.45%（见图1）。

2.凝胶电泳分析化合物ALB65处理后的K562细胞DNA断裂情况

（1）测试药剂及设备

实验药品与试剂：自制化合物ALB65，用DMSO配至所需浓度(DMSO浓度≤1‰)，灭菌4℃保存。MTT(四甲基偶氮唑蓝)试剂购自Sigma公司，DNA提取试剂盒购自中国康为世纪生物科技有限公司。慢性粒细胞白血病细胞系K562细胞购于上海中科院细胞库。10%SDS试剂（Sino-American Biotechnology产品），用含20%小牛血清(FBS)的RPMI-1640(美国GiBCo公司)培养液，其它试剂都是市售分析纯。在37℃、5%CO₂、饱和湿度的培养箱中进行传代培养，待细胞处于对数生长期时用于实验。

仪器设备：超净工作台，洁净<3.5粒/L(>0.5μm尘粒)，上海上净净化设备有限公司；CO₂细胞培养箱，Thermo公司Forma Scientific,Inc；倒置显微镜，日本奥林巴斯(OLYMPUS)公司，型号CKX41；96孔平板，美国Costar公司；SK2200H型超声波清洗器，上海科导超声仪器有限公司。数码凝胶图像处理系统，中国Tanon公司，型号1600；电泳仪，中国Tanon公司，型号EPS 300。

（2）试验方法

收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，置于细胞培养瓶中，1×10⁶/瓶，每孔总体积10mL，设置阴性对照孔(不含药物)和含细胞与药物的实验组，分别培养6h,12h,18h,24h,36h,48h后，3000rpm离心5min，收集沉淀，PBS洗两次，用DNA提取试剂盒提取细胞DNA。

将DNA样品5μL与上样缓冲液1μL混匀后分别加入1.0%琼脂糖凝胶的样品孔中。接通电源，电压为5V/cm。当溴酚蓝染料移动到距凝胶前沿2cm处停止电泳。

（3）结果调查

将琼脂糖凝胶从电泳槽中取出置于数码凝胶图像处理系统下观察。结果见图2、图3。

（4）结论：经荧光显微镜下观察吖啶橙（AO）染色浓度为0.16μM的化合物ALB65处理48小时后的K562细胞，可以观察到大量凋亡小体的存在（见图2），凋亡细胞的百分比为85%。通过DNA凝胶电泳分析经化合物ALB65处理后的K562细胞中DNA的变化情况，可明显观察到经过化合物ALB65，处理后的K562细胞DNA被切断成阶梯状条带（见图3）。该实验结果表明，化合物ALB65是通过促使细胞凋亡而抑制白血病细胞增殖的。

3.RT-PCR实验分析化合物ALB65处理后的K562细胞诱导P53基因表达情况

结论：通过RT-PCR实验后发现，经化合物ALB65处理6小时后，P53基因开始表达。该实验结果表明，化合物ALB65可能是通过诱导P53基因表达促使细胞凋亡的。

Claims

1.N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮，其特征在于，结构如式（I）所示：。

2.权利要求1所述N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将4-氟苄胺与丙烯酸甲酯经过Michael加成反应制成N，N-二-（甲氧羰基乙基）-4-氟苄胺；

（2）N，N-二-（甲氧羰基乙基）-4-氟苄胺在醇钠作用下发生Dieckmann缩合得到N-（4-氟苄基）-2-甲氧羰基4-哌啶酮，然后在酸作用下水解并脱羧得到N-（4-氟苄基）-4-哌啶酮；

(3）N-（4-氟苄基）-4-哌啶酮与4-三氟甲基苯甲醛进行羟醛缩合反应，得到目标化合物N-（4-氟苄基）-3,5-双（4-三氟甲基苄叉基）-4-哌啶酮。

3.权利要求2所述N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）-5～5℃下，丙烯酸甲酯溶解于有机溶剂I，向其中滴加含有4-氟苄胺的有机溶剂I，控制体系温度不超过50℃；滴加完毕后继续搅拌20～60min，继续回流反应6～10hr；去除有机溶剂I及未反应的丙烯酸甲酯得到N，N-二-（甲氧羰基乙基）-4-氟苄胺；所述有机溶剂I为C1～C4低级脂肪醇；

（2）以醇钠为催化剂，N，N-二-（甲氧羰基乙基）-4-氟苄胺在有机溶剂II中回流反应4～8hr发生Dieckmann缩合得到N-（4-氟苄基）-2-甲氧羰基4-哌啶酮；再用20wt%～30wt%盐酸萃取，水相回流反应6～12hr；再调节pH至8～9，用有机溶剂III萃取，合并有机相干燥后去除有机溶剂IV，得到N-（4-氟苄基） -4-哌啶酮；所述有机溶剂II为甲苯、乙腈或四氢呋喃，所述有机溶剂III为乙酸乙酯或丙酮；

（3）N-（4-氟苄基）-4-哌啶酮与4-三氟甲基苯甲醛在有机溶剂IV中混合，5～40℃搅拌反应0.5～2hr，取固体；所述有机溶剂IV为C1～C4低级脂肪醇。

4.权利要求2所述N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮的制备方法，其特征在于，步骤（1）中的有机溶剂I为甲醇或乙醇。

5.权利要求2所述N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮的制备方法，其特征在于，步骤（2）中的有机溶剂II为甲苯，醇钠为甲醇钠。

6.权利要求2所述N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮的制备方法，其特征在于，步骤（3）中的有机溶剂III为乙醇，有机溶剂IV为乙酸乙酯。

7.权利要求2所述N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮的制备方法，其特征在于，步骤（3）得到的固体洗涤后用乙酸乙酯或石油醚重结晶。

8.权利要求1所述N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮在制备治疗白血病、卵巢癌、乳腺癌、肝癌和食道癌药物方面的应用。

9.权利要求1所述N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮用于制备抑制白血病细胞系、卵巢癌细胞系、乳腺癌细胞系、肝癌细胞系和食道癌细胞系增殖的药物。

10.权利要求1所述N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮用于制备抑制白血病K562、Jarket、U937、THP-1、NB4BF、MM-6、HL-60、HK-2、ML-2、KG-1a、Molm-13、SP2/0细胞系增殖的药物。

11.权利要求1所述N-(4-氟苄基)-3,5-双(4-三氟甲基苄叉基)-4-哌啶酮用于制备抑制卵巢癌HO-8910细胞系，乳腺癌MCF-7细胞系，肝癌SMMC-7721细胞系和食道癌ECA-109细胞系增殖的药物。