CN103012550B - 一种制备n(2)-l-丙氨酰-l-谷氨酰胺的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物化学技术领域，公开了一种制备N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的方法。所述制备方法将D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺不经干燥直接溶于水中D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺较氨气先溶于水，故可用惰性气体置换反应体系中的空气后，采用通氨气的方式来进行反应，便可在相对的低温或室温下严格控制体系的温度与压力，待温度压力稳定后再加热进行恒温、恒压反应，反应重现性好，易于控制，可避免瞬间温度过高或超压现象导致副反应发生，提高D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺的转化率，增强了工艺的可控性，同时大大提高氨解反应的安全性、避免氨的浪费、减少对环境污染，从而极大限度的降低了生产成本，更有利于大规模工业生产。

Description

一种制备N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的方法

技术领域

本发明涉及药物化学技术领域，具体的说是涉及一种制备N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的方法。

背景技术

N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺属于氨基酸的衍生物，在维持肠道机能、促进免疫功能、维持体内碱平衡及提高机体对应激的适应等方面都发挥着极其重要的作用，是人体含量最丰富的氨基酸谷氨酰胺(GLN)的理想替代品。目前N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰已成为国内外比较热门的氨基酸二肽产品，因此其原料药的需求相当巨大，接近1000吨/年。N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺结构式为：

专利US5380934，EP0595345，CN200510023745.0，CN200510094884.2，CN200710151108.0与文献Process research and development of L-Alanyl-L-glutamine，a component of parenteral nutrition(Takahiro sano,Toru sugaya,Kunimi inoue et al.Organic Process Research&Development 2000,4,147-152)等公开了N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰的制备方法，具体为将D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺干燥后，溶于一定浓度的氨水中，密闭加热至设定温度与压力进行氨解反应；反应后，用甲醇或乙醇等溶剂结晶得到N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。

然而现有技术的氨解过程是把D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺直接溶解于氨水中，即进行密闭的反应。由于氨解反应放热非常激烈，容易催生更多的副反应，造成反应转化率偏低；更严重得是，还极易导致反应的温度与压力在瞬间超过设定值，造成危险，尤其是在没有使用任何惰性气体进行排氧处理的条件下，反应的危险性就大大增加，甚至会引发爆炸。

此外，由于反应所需的氨水一般为市售水平。一方面，由于经过分装、运输等过程，使用时其浓度或含量往往偏差较大，使得反应压力或温度不好控制，反应重现性很差，产品批与批之间的偏差也大。另一方面，氨水在分装之后，体积较大，给运输，存储带来了极大的不便而成本也随之增加，而且直接使用氨水，气味较大，不利于环保。

为此亟待一种新的制备方法，以提供更优的工艺条件，提高反应转化率，增强反应的可控性，最大限度的降低生产成本和环保影响，使其更有利于大规模工业生产。

发明内容

有鉴于此，本发明目的是提供一种转化率高的制备N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的方法。

为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

一种制备N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的方法，将D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺溶于水中，用惰性气体置换其中的空气，然后通氨气进行氨解反应，之后减压除去氨气并脱色，残留液加入强极性有机溶剂结晶制得。

现阶段制备N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的方法中氨解过程是把D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺直接溶解于氨水中，再使用惰性气体来置换空气，即进行密闭的反应，氨的浓度会必然发生变化。本发明所述制备N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的方法以D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺为原料进行氨解反应制备N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。其中，所述D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺不经干燥直接溶于纯水，D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺较氨气先溶于水，故可用惰性气体置换反应体系中的空气后，采用通氨气的方式来进行反应，便可在相对的低温或室温下严格控制体系的温度与压力，待温度压力稳定后再加热进行恒温、恒压反应，反应重现性好，易于控制，可避免瞬间温度过高或超压现象导致副反应发生，提高D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺的转化率，同时大大提高氨解反应的安全性、避免氨的浪费、减少对环境污染。此外采用氨气替代氨水可以避免大体积的氨水的分装，运输，存储等相关繁琐过程，也可降低相应的分装，运输，存储等过程的成本。

优选的，本发明所述D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺与水的质量比为1：1～3，更优选为1：1.2。

本发明制备N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的方法所述氨解反应的压力通常优选为0.5～1.5MPa，更优选为0.8～1.2MPa。

本发明所述氨解反应的温度通常优选为30～80℃，更优选为40～60℃。

本发明在氨解反应后利用强极性有机溶剂进行结晶制得所述N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。按照本发明，所述强极性有机溶剂优选为乙醇、异丙醇或丙酮，更优选为乙醇。在一些实施例中，本发明所述强极性有机溶剂与水的体积比为2:1～9:1，在某些实施例中为3:1～5:1。

本发明所述D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺通过专利US5380934，EP0595345，CN200510023745.0，CN200510094884.2，CN200710151108.0与文献Processresearch and development of L-Alanyl-L-glutamine,a component of parenteralnutrition(Takahiro sano,Toru sugaya,Kunimi inoue et al.Organic ProcessResearch&Development 2000,4,147-152)等公开的D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺的制备方法，将L-谷氨酰胺加入到水与甲苯的混合液中，低温下加入氢氧化钠溶液溶解，然后缓慢滴加D-2-取代丙酰氯的甲苯溶液，同时滴加氢氧化钠溶液，使反应液的pH值控制在8.0～11.0之间，继续反应1～6小时，静置分层，取水层，然后滴加浓盐酸调pH值至0.5～2.5，结晶或萃取，制得。

然而由于D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺溶于氢氧化钠溶液后成钠盐，只溶于水，不溶于甲苯等非质子溶剂，而D-2-取代丙酰氯只溶于甲苯等非质子溶剂却不溶于水，因此按照上述方法制备D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺，当在碱性条件下滴加D-2-取代丙酰氯进行反应时，反应只能在非均相条件下进行，导致反应转化不完全，转化率低下。而且非均相缩合反应其微观反应本身的速率很快，反应物在两相间的扩散为宏观反应的限速步骤，而在反应过程中，L-谷氨酰胺和OH-存在明显的竞争趋势，使得产品的转化率不稳定，反应过程控制难度增大。

因此，作为优选，本发明所述D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺通过，将L-谷氨酰胺加入到水与非质子性有机溶剂的混合液中，加入氢氧化钠溶液，待L-谷氨酰胺完全溶解后，加入相转移催化剂与无机盐，缓慢滴加式I所示化合物与非质子性有机溶剂的混合溶液，同时滴加氢氧化钠溶液，使反应液的pH值控制在8.0～11.0，于-10～10℃反应1～4小时；反应完毕后，静置分层，取水层，滴加浓盐酸调pH值至1.0～2.5，结晶制得；

其中，X＝Cl，Br，I，OMs或OTs。反应方程式如下：

本发明所述D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺的制备方法以L-谷氨酰胺和式I所示化合物为原料发生缩合反应制备D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺。其中，所述式I所示化合物为D-2-氯丙酰氯，D-2-溴丙酰氯，D-2-碘丙酰氯，D-2-甲磺酰氧丙酰氯，D-2-对甲苯磺酰氧丙酰氯。

在制备D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺过程中，由于L-谷氨酰胺成钠盐之后，相对于反应体系中大大过量的小分子水，其在甲苯等非质子溶剂中的溶解度远小于后者，使得有机相中由水带入的OH-的浓度要远大于L-谷氨酰胺的钠盐浓度，从而导致式I所示化合物更容易与OH-接触而发生水解。式I所示化合物的碱水解是阻碍缩合反应中式I所示化合物转化为D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺的最大影响因素，因此要提高反应的转化率，关键在于维持反应条件的同时增强L-谷氨酰胺较OH-的竞争能力。而且，L-谷氨酰胺和OH-的竞争强弱根据不同投料比，具体反应条件的变化而随机波动，使得产品的转化率不稳定，过程控制难度增大。

相转移催化剂为能促使提高反应速度并在两相间转移负离子的鎓盐。按照本发明，所述相转移催化剂可以将溶于水相而几乎不溶于有机相的L-谷氨酰胺钠盐以L-谷氨酰胺负离子的形式带入到有机相中，从而大幅度提高有机相中L-谷氨酰胺与OH-的相对比值，增加L-谷氨酰胺与有机相中式I所示化合物进行缩合反应的机会。相转移催化剂不但可以加深反应程度，还可以加快反应速率，直接提高反应的转化率，使反应能进行充分、完全，可以有效的控制式I所示化合物的损耗。无机盐水溶性较大，可以降低L-谷氨酰胺钠盐在水相中的溶解度，同时也可以降低水在有机溶剂当中的溶解度，减少有机相的含水量，使有机相中OH-浓度也可相应降低。

相转移催化剂和无机盐同时加入可以对缩合反应起到协同作用，在进行反应时，使L-谷氨酰胺钠盐更容易被相转移催化剂带入有机相；相转移催化剂提高有机相中L-谷氨酰胺与OH-的相对比值，无机盐使有机相中OH-浓度降低，L-谷氨酰胺与OH-的相对比值升高与OH-浓度降低，最终提高有机相中L-谷氨酰胺与OH-的相对比值，促使反应进行得更充分、完全，也极大的减少了式I所示化合物水解等副反应的发生，利于有效控制式I所示化合物的用量。不仅如此加入的无机盐在后续处理过程中，同样可以降低水在有机溶剂当中的溶解度，降低有机相的含水量，使萃取分层效果更好，不容易产生乳化现象，减少分层时间，提高工艺效率。而在反应结束后，无机盐还可以起到的盐析作用，有利于提高产品的收率。试验表明，单独加入相转移催化剂或单独改变无机盐的加入方式均可改善本反应的转化率，但效果并不显著；而两者同时实施则能显著的提高反应的转化率。因此本发明所述制备方法加入相转移催化剂与无机盐，催化缩合反应，提高反应的转化率。

优选的，本发明所述D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺的制备方法所述相转移催化剂为季铵盐、冠醚或磷化合物。在一些实施例中，所述季铵盐为三丁基甲基氯化铵、四丁基溴化铵、四丁基氯化铵、四丁基硫酸氢铵、苄基三乙基氯化铵或四丙基溴化铵，在某些实施例中为四丁基氯化铵。在一些实施例中，本发明所述L-谷氨酰胺与所述相转移催化剂的质量比为1:0.01～0.1，在某些实施例中为1:0.05。

按照本发明，所述无机盐优选为阳离子为Li⁺、K⁺、Na⁺，阴离子为Cl^-、I^-的以任意组合形式结合而成的盐，如氯化钠、碘化钾、氯化钾、碘化锂或氯化锂，在一些实施例中，所述无机盐为氯化钠、氯化钾或氯化锂。在一些实施例中，本发明所述L-谷氨酰胺与所述无机盐的质量比为1:0.4～0.7，在某些实施例中为1：0.63。

本发明所述D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺的制备方法所述L-谷氨酰胺与所述式I所示化合物的摩尔比为1:1～1.5，优选为1:1.15。

本发明所述D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺的制备方法以水与非质子性有机溶剂的混合液为溶剂溶解L-谷氨酰胺，以非质子性有机溶剂为溶剂溶解式I所示化合物。其中，所述非质子性有机溶剂为小分子脂肪族烃、芳香烃、卤代烃或酯。在一些实施例中，所述小分子脂肪族烃为石油醚(30～60℃)、石油醚(60～90℃)、正戊烷、正己烷、正庚烷、环己烷、甲基环己烷或环庚烷。在一些实施例中，所述芳香烃为甲苯、二甲苯或氯苯。在一些实施例中，所述卤代烃为二氯甲烷、三氯甲烷或1,2-二氯乙烷。在一些实施例中，所述酯为乙酸乙酯或乙酸丁酯。

按照本发明，以水与非质子性有机溶剂的混合液作为L-谷氨酰胺的溶剂，所述L-谷氨酰胺与水的质量比为1:0.4～3，优选为1:2。按mL/g计算，所述水与非质子性有机溶剂的混合液中，非质子性有机溶剂的用量为L-谷氨酰胺的0.5～4倍，优选为2倍。

按照本发明，以非质子性有机溶剂为溶剂溶解式I所示化合物，按mL/g计算，所述式I所示化合物与非质子性有机溶剂的混合溶液中，非质子性有机溶剂的用量为式I所示化合物的0.2～2倍。

优选的，本发明所述D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺的制备方法所述氢氧化钠溶液的浓度为3～6mol/L，更优选为5mol。其中，所述溶解L-谷氨酰胺的氢氧化钠溶液与L-谷氨酰胺的质量比为1：1.6～1.9；所述缩合反应滴加的氢氧化钠溶液与L-谷氨酰胺的质量比为1：2.1～2.6。

本发明所述制备N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的方法将D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺不经干燥直接溶于水中D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺较氨气先溶于水，故可用惰性气体置换反应体系中的空气后，采用通氨气的方式来进行反应，便可在相对的低温或室温下严格控制体系的温度与压力，待温度压力稳定后再加热进行恒温、恒压反应，反应重现性好，易于控制，可避免瞬间温度过高或超压现象导致副反应发生，提高D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺的转化率，增强了工艺的可控性，同时大大提高氨解反应的安全性、避免氨的浪费、减少对环境污染，从而极大限度的降低了生产成本，更有利于大规模工业生产。

附图说明

图1示本发明实施例2所涉及的含量检测所用的高效液相色谱法的条件系统适应性色谱图，其中，D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺、L-谷氨酰胺和D-2-卤丙酸的色谱峰保留时间分别为6.758、10.686和6.155。

具体实施方式

本发明实施例公开了一种制备N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的方法。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明进行详细说明。其中，本发明所涉及的含量检测所用的高效液相检测方法为：用氨基键合硅胶为填充剂(NH2色谱柱，4.6mm×250mm，5μm)，以0.02mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈(1:2)为流动相，检测波长为210nm，流速1.0ml/min，柱温25℃。系统适应性色谱图见图1。

实施例1：

将D-2-氯丙酰-L-谷氨酰胺(94g)直接溶于水(112.8g)中，用惰性气体置换其中的空气后，通氨气，控制压力为1.0MPa和温度为57℃进行氨解反应，反应5h，然后控制温度为30℃减压蒸出氨气，直至PH值为7.2，加入2％活性炭脱色过滤后，向残留液加入丙酮(282mL)结晶。抽滤，用丙酮(40mL×2)洗涤滤饼两次，抽干，真空干燥。得白色固体62.4g。收率70％(以L-谷氨酰胺计算)。1H-NMR(400MHz,D₂O)，7.27(s,1H,CONH)，4.32(m,1H,CH)，2.86(m,1H,CH)，2.13(t,2H,CH₂)，1.68-2.07(m,2H,CH₂)，1.28(d,3H,CH₃).

实施例2：

将L-谷氨酰胺(100g)、水(250g)、石油醚(60～90℃，300mL)加到反应瓶中，降温至0±3℃，滴加4.5mol/L氢氧化钠溶液(190g)，溶解澄清，加入四丁基氯化铵(2g)、碘化钠(70g)搅拌均匀。缓慢滴加用石油醚(60～90℃，219mL)稀释的D-2-甲磺酰氧丙酰氯(146g)，调pH＝10后，开始对滴5mol/L氢氧化钠溶液(244g)，控温0±3℃，pH值9-10，反应3h。静置分层，取水层，滴加浓盐酸(82.8g)调pH值至1.6，结晶。抽滤，抽干，真空干燥。得白色或类白色固体D-2-甲磺酰氧丙酰-L-谷氨酰胺197.5g。

将D-2-甲磺酰氧丙酰-L-谷氨酰胺197.5g溶于水(395g)中，用惰性气体置换其中的空气后，通氨气，控制压力为0.8MPa和温度为60℃进行氨解反应，反应7h，然后控制温度为30℃减压蒸出氨气，直至PH值为6.8，加入2％活性炭脱色过滤后，向残留液加入无水乙醇(1975mL)结晶。抽滤，用无水乙醇(90mL×2)洗涤滤饼两次，抽干，真空干燥。得白色固体98.0g。收率66％(以L-谷氨酰胺计算)。

实施例3：

将L-谷氨酰胺(80g)、水(144g)、乙酸乙酯(120mL)加到反应瓶中，降温至0±3℃，滴加5mol/L氢氧化钠溶液(144g)，溶解澄清，加入四丁基硫酸氢铵(6.4g)、氯化钾(56g)搅拌均匀。缓慢滴加用乙酸乙酯(108mL)稀释的D-2-溴丙酰氯(108g)，调pH＝10后，开始对滴4mol/L氢氧化钠溶液(208g)，控温0±3℃，pH值9-10，反应4h。静置分层，取水层，滴加浓盐酸(66.2g)调pH值至1.8，结晶。抽滤，抽干，真空干燥。得白色或类白色固体D-2-溴丙酰-L-谷氨酰胺147.5g。

将D-2-溴丙酰-L-谷氨酰胺147.5g溶于水(221g)中，用惰性气体置换其中的空气后，通氨气，控制压力为0.9MPa和温度为50℃进行氨解反应，反应9h，然后控制温度为30℃减压蒸出氨气，直至PH值为7.1，加入2％活性炭脱色过滤后，向残留液加入无水乙醇(884mL)结晶。抽滤，用无水乙醇(72mL×2)洗涤滤饼两次，抽干，真空干燥。得白色固体84.4g。收率71％(以L-谷氨酰胺计算)。

实施例4：

将L-谷氨酰胺(80g)、水(160g)、二氯甲烷(200mL)加到反应瓶中，降温至0±4℃，滴加6mol/L氢氧化钠溶液(128g)，溶解澄清，加入苄基三乙基氯化铵(8g)、氯化锂(52g)搅拌均匀。缓慢滴加用二氯甲烷(115mL)稀释的D-2-氯丙酰氯(76.5g)，调pH＝10后，开始对滴5mol/L氢氧化钠溶液(184g)，控温0±4℃，pH值9-10，反应1.5h。静置分层，取水层，滴加浓盐酸(66.2g)调pH值至2.0，结晶。抽滤，抽干，真空干燥。得白色或类白色固体D-2-氯丙酰-L-谷氨酰胺127g。

将D-2-氯丙酰-L-谷氨酰胺127g溶于水(191g)中，用惰性气体置换其中的空气后，通氨气，控制压力为1.2MPa和温度为58℃进行氨解反应，反应5h，然后控制温度为30℃减压蒸出氨气，直至PH值为7.0，加入2％活性炭脱色过滤后，向残留液加入异丙醇(573mL)结晶。抽滤，用异丙醇(60mL×2)洗涤滤饼两次，抽干，真空干燥。得白色固体82.0g。收率69％(以L-谷氨酰胺计算)。

实施例5：

将L-谷氨酰胺(120g)、水(264g)、正己烷(240mL)加到反应瓶中,降温至0±2℃，滴加5mol/L氢氧化钠溶液(208.8g)，溶解澄清，加入三丁基甲基氯化铵(2.4g)、氯化钠(78g)搅拌均匀。缓慢滴加用正己烷(150mL)稀释的D-2-氯丙酰氯(125.1g)，调PH＝10后，开始对滴5mol/L氢氧化钠溶液(292.8g)，控温0±4℃，PH值9-10，反应2h。静置分层，取水层，滴加浓盐酸(99.4g)调PH值至1.8，结晶，得D-2-氯丙酰-L-谷氨酰胺268g(未干燥，含水量约为30％,m/m)。

D-2-氯丙酰-L-谷氨酰胺268g溶于水(202g)中，用惰性气体置换其中的空气后，通氨气，控制压力为1.0MPa和温度为60℃进行氨解反应，反应5h，然后控制温度为30℃减压蒸出氨气，直至PH值为7.4，加入2％活性炭脱色过滤后，向残留液加入无水乙醇(987mL)结晶。抽滤，用无水乙醇(100mL×2)洗涤滤饼两次，抽干，真空干燥。得白色固体126.6g。收率71％(以L-谷氨酰胺计算)。

实施例6：

将L-谷氨酰胺(80g)、水(160g)、甲苯(160mL)加到反应瓶中,降温至0±2℃，滴加5mol/L氢氧化钠溶液(139.2g)，溶解澄清，加入四丁基氯化铵(4g)、氯化钠(52g)搅拌均匀。缓慢滴加用甲苯(92mL)稀释的D-2-氯丙酰氯(76.5g)，调PH＝10后，开始对滴5mol/L氢氧化钠溶液(195.2g)，控温0±3℃，PH值9-10，反应3h。静置分层，取水层，滴加浓盐酸(66.2g)调PH值至2.0，结晶，得D-2-氯丙酰-L-谷氨酰胺178g(未干燥，含水量约为30％，m/m)。

D-2-氯丙酰-L-谷氨酰胺178g溶于水(125g)中，用惰性气体置换其中的空气后，通氨气，控制压力为1.0MPa和温度为55℃进行氨解反应，反应6h，然后控制温度为30℃减压蒸出氨气，直至PH值为7.0，加入2％活性炭脱色过滤后，向残留液加入无水乙醇(535mL)结晶。抽滤，用无水乙醇(60mL×2)洗涤滤饼两次，抽干，真空干燥。得白色固体80.8g。收率68％(以L-谷氨酰胺计算)。

实施例7：

为进一步验证反应过程中相转移催化剂与无机盐的加入方式对反应转化率的影响，本发明实施了如下实验方案：

将50gL-谷氨酰胺加入到100g水与正己烷100mL的混合液中，低温下加入5mol/L氢氧化钠溶液87g，待L-谷氨酰胺完全溶解后，缓慢滴加D-2-丙酰氯53.5g与正己烷组成的溶液53.5mL，同时滴加5mol/L氢氧化钠溶液122g，始终控制反应液的pH值为8.0～10.0，滴加完后继续搅拌10分钟，然后分层，往水层加入32.5g氯化钠，用盐酸调pH值至2.0，经析晶，过滤，干燥得D-2-氯丙酰-L-谷氨酰胺。

以上述反应条件为基准，在反应配比，反应温度，反应时间等条件不变的情况下，分别于L-谷氨酰胺完全溶解后，反应前，单独加入相转移催化剂、单独改变无机盐加入方式(即由反应后加入改为了反应前加入)和同时加入相转移催化剂与改变无机盐加入方式进行反应，并以D-2-氯丙酰-L-谷氨酰胺的生成量、反应底物L-谷氨酰胺的残余量与D-2-氯丙酰氯发生水解产生的D-2-卤丙酸的量为评价指标，衡量上述因素对反应转化率的影响程度，相关代表性的实验数据如表1所示:(按照面积归一法来计算各色谱峰的大小，并以此作为对应化合物的含量)

表1 各考察因素下的反应结果

由表1可见，使用基准条件制备D-2-氯丙酰-L-谷氨酰胺，反应的转化率较低，生成量只有84.2％-85.6％，而原料L-谷氨酰胺的残余量仍有5.5％-6.4％，D-2-氯丙酰氯发生水解产生的D-2-氯丙酸也有8.2％-9.3％。当加入适量的相转移催化剂，或是改变无机盐加入方式之后，D-2-氯丙酰-L-谷氨酰胺的生成量分别有4％与2％左右的提高，同时原料L-谷氨酰胺的残余量和D-2-卤丙酸的生成量也有相应的减少。故加入适量的相转移催化剂或改变无机盐加入方式之后对缩合反应的转化率有所改善。然而，更显著的是，当同时加入相转移催化剂和改变无机盐加入方式后，产品D-2-氯丙酰-L-谷氨酰胺的生成量有10-12％左右的提高，而原料L-谷氨酰胺的残余量减少至1％以下，D-2-卤丙酸生成量减少至3％以下。结果表明相转移催化剂和无机盐的同时加入对提高转化率的作用更显著于两者的分别使用。

以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims (9)

1.一种制备N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的方法，其特征在于，将L-谷氨酰胺加入到水与非质子性有机溶剂的混合液中，加入氢氧化钠溶液，待L-谷氨酰胺完全溶解后，加入相转移催化剂与无机盐，缓慢滴加式I所示化合物与非质子性有机溶剂的混合溶液，同时滴加氢氧化钠溶液，使反应液的pH值控制在8.0～11.0，于-10～10℃反应1～4小时；反应完毕后，静置分层，取水层，滴加浓盐酸调pH值至1.0～2.5，结晶制得D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺；

将D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺溶于水中，用惰性气体置换其中的空气，然后通氨气进行氨解反应，之后减压除去氨气并脱色，残留液加入强极性有机溶剂结晶即得；

其中，X＝Cl，Br，I，OMs或OTs。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述D-2-取代丙酰-L-谷氨酰胺与水的质量比为1:1～3。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述氨解反应的压力为0.5～1.5MPa。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述氨解反应的温度为30～80℃。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述强极性有机溶剂为乙醇、异丙醇或丙酮。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述强极性有机溶剂与水的体积比为2:1～9:1。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述相转移催化剂为季铵盐、冠醚或磷化合物。

8.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述无机盐为阳离子为Li⁺、K⁺、Na⁺，阴离子为Cl^-、I^-的以任意组合形式结合而成的盐。

9.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述非质子性有机溶剂为小分子脂肪族烃、芳香烃、卤代烃或酯。