CN102964444A - 一种高品质淡水鱼鱼皮胶原蛋白的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明一种高品质淡水鱼鱼皮胶原蛋白的制备方法，原料经预处理去脱脂、除杂蛋白后，经冷冻干燥后粉碎等预处理，采用醋酸溶液为提取液及进行浸提，浸提后的溶液进行低温离心得胶原蛋白粗提液，然后通过盐析、醋酸溶液复溶，再透析，冷冻干燥，即得高品质胶原蛋白。本发明方法更为简单、高效、经济、合理、安全性高，该方法大大提高了胶原蛋白的得率、纯度，也保持了胶原蛋白的生物特性。
Description
技术领域
本发明是涉及一种胶原蛋白的制备方法，尤其涉及一种高品质淡水鱼鱼皮胶原蛋白的制备方法。
背景技术
传统的胶原蛋白主要来源于猪、牛等陆生哺乳动物的皮、骨和肌腱中，但是由于疯牛病、口蹄疫等流行病的发生，对此种胶原蛋白的安全产生了质疑；与此同时,宗教问题与素食者对饮食的特殊需求，使得寻求一种新的高品质胶原蛋白来源成为急需解决的问题。因此，从水生动物中提取安全的、可以满足更多人需求的高品质胶原蛋白成为当今社会的研究热点。
随着经济的发展和繁荣，我国的淡水养殖业得到了迅猛发展， 已成为世界淡水养殖大国，淡水水产品产量居世界第一。我国淡水水产业长期发展不均衡，产业结构不合理，重养殖轻加工问题严重。淡水鱼的利用率仅为30～50%，50～70%成为废弃物，浪费资源、污染环境。而废弃物如鱼皮中含有大量大胶原蛋白，胶原蛋白具有美容、丰胸、延缓衰老等生物活性，因此利用淡水鱼鱼皮可制成的保健品、化妆品及医药材料，具有广阔的发展前景。
目前，提取鱼皮中胶原蛋白的方法主要有热水浸提、酸法、酶法等。但是以上方法多存在提取率低、生物活性低，或者提取工艺复杂、成本高、安全性低等问题。一种高效的提取鱼皮胶原蛋白的方法是我们迫切需要的。
发明内容
本发明的目的是提供一种提取率高、纯度高、生物活性高的高品质淡水鱼鱼皮胶原蛋白的制备方法。
为达到上述目的，本发明的技术方案包括：预处理、脱脂、除杂蛋白、冷冻干燥、提取、纯化等步骤，实现本发明的步骤是：
（1）鱼皮预处理：将鱼皮洗净，备用；
（2）脱脂：在鱼皮中加入10倍体积的0.2～1%的氢氧化钠，4～10 ℃搅拌3h，清水洗涤至中性；
（3）除杂蛋白：在脱脂鱼皮加入10倍体积的0.5～1mol/L的氯化钠，4℃搅拌3h，清水洗涤两次，蒸馏水洗涤一次至纯净沥干水分，-20℃备用；
（4）冷冻干燥：将经除杂鱼皮原料进行冷冻干燥后粉碎，4 ℃保存备用；
（5）胶原蛋白的提取：将步骤(3)所得鱼皮加入1：100～1：300的0.5～1 mol/L的醋酸溶液中，4～10℃搅拌浸提48～96 h，离心得上清液；
（6）胶原蛋白的纯化：将上清液加氯化钠至质量分数7%的进行盐析静置2 h，并将析出的胶原蛋白于0.5 mol/L的醋酸溶液中复溶，再用0.1 mol/L的醋酸溶液透析24 h，蒸馏水透析48 h，将透析液冷冻干燥，得高品质淡水鱼鱼皮胶原蛋白。
原料可选取白鲢鱼、花鲢鱼、草鱼、鳙鱼淡水鱼的鱼皮。
本发明利用冷冻干燥法，将鱼皮进行预处理，使原本韧性极强的鱼皮形成内部疏松多孔的结构，以利于后续酸溶时，鱼皮样品与酸溶液具有更大、更全面的接触，以缩短提取时间及提高提取率。
本发明的优点在于：
1、本发明采用氢氧化钠、氯化钠除杂，成本低、污染小、安全性高；2、在提取胶原蛋白前，进行冷冻干燥处理，有效的提高的提取率及效率，节省了时间；3、本发明方法制得的胶原蛋白溶解性好、出度高、色泽好，为高品质胶原蛋白。
具体实施方式
实施例1：一种高品质淡水鱼鱼皮胶原蛋白的制备方法，其步骤如下：
（1）原料处理：将白鲢鱼鱼皮洗净，备用；
（2）脱脂：在鱼皮中加入10倍体积的0.2%的氢氧化钠，4 ℃搅拌2.5 h，清水洗涤至中性；
（3）除杂蛋白：在脱脂鱼皮加入10倍体积的0.7 mol/L的氯化钠，4 ℃搅拌3 h，清水洗涤两次，蒸馏水洗涤一次至纯净，沥干水分，-20 ℃备用；
（4）冷冻干燥：将经除杂鱼皮原料进行冷冻干燥后粉碎，4 ℃保存备用；
（5）胶原蛋白的提取：将步骤(3)所得鱼皮加入1：200的0.5 mol/L的醋酸溶液中，4 ℃搅拌浸提72 h，离心得上清液。
（6）胶原蛋白的纯化：将上清液加7%的氯化钠进行盐析静置2 h，4 ℃离心10 min，将析出的胶原蛋白溶于最少量的0.5 mol/L的醋酸溶液中，然后用大量的0.1 mol/L的醋酸溶液透析24 h，再换成蒸馏水透析48 h，整个过程保持在4 ℃。最后将透析液冷冻干燥，得高品质淡水鱼鱼皮胶原蛋白。
实施例2：一种高品质淡水鱼鱼皮胶原蛋白的制备方法，其步骤如下：
（1）原料处理：将鳙鱼鱼皮洗净，剪碎备用；
（2）脱脂：在鱼皮中加入20倍体积的0.5%的氢氧化钠，4 ℃搅拌2.5 h，清水洗涤至中性；
（3）除杂蛋白：在脱脂鱼皮加入10倍体积的0.5 mol/L的氯化钠，4 ℃搅拌5 h，清水洗涤两次，再用蒸馏水洗涤，沥干水分，-20 ℃备用；
（4）冷冻干燥：将经除杂鱼皮原料进行冷冻干燥后粉碎，4 ℃保存备用；
（5）胶原蛋白的提取：将步骤(3)所得鱼皮加入1：300的0.5 mol/L的醋酸溶液中，4 ℃搅拌浸提48 h，离心得上清液。
（6）胶原蛋白的纯化：将上清液加7%的氯化钠进行盐析4 ℃静置，4 ℃离心15 min，将析出的胶原蛋白溶于最少量的0.5 mol/L的醋酸溶液中，然后用大量的0.1 mol/L的醋酸溶液透析24 h，再换成蒸馏水透析24 h，整个过程保持在4 ℃。最后将透析液冷冻干燥，得高品质淡水鱼鱼皮胶原蛋白。
实施例3：一种高品质淡水鱼鱼皮胶原蛋白的制备方法，其步骤如下：
（1）原料处理：将草鱼鱼皮洗净，剪碎备用；
（2）脱脂：在鱼皮中加入20倍体积的0.5%的氢氧化钠，4℃搅拌2.5 h，清水洗涤至中性；
（3）除杂蛋白：在脱脂鱼皮加入10倍体积的0.7 mol/L的氯化钠，4 ℃搅拌5 h，清水洗涤两次，再用蒸馏水洗涤，沥干水分，-20 ℃备用；
（4）冷冻干燥：将经除杂鱼皮原料进行冷冻干燥后粉碎，4 ℃保存备用；
（5）胶原蛋白的提取：将步骤(3)所得鱼皮加入1：100的0.5 mol/L的醋酸溶液中，4 ℃搅拌浸提96 h，离心得上清液；
（6）胶原蛋白的纯化：将上清液加7%的氯化钠进行盐析4 ℃静置，4 ℃离心15 min，将析出的胶原蛋白溶于最少量的0.5 mol/L的醋酸溶液中，然后用大量的0.1 mol/L的醋酸溶液透析24 h，再换成蒸馏水透析24 h，整个过程保持在4 ℃。最后将透析液冷冻干燥，得高品质淡水鱼鱼皮胶原蛋白。
Claims (2)
1.一种高品质淡水鱼鱼皮胶原蛋白的制备方法，其特征是步骤如下：
（1）鱼皮预处理：将鱼皮洗净，备用；
（2）脱脂：在鱼皮中加入10～20倍体积的0.2～1%的氢氧化钠，4～10 ℃搅拌3 h，清水洗涤至中性；
（3）除杂蛋白：在脱脂鱼皮加入10倍体积的0.5～1mol/L的氯化钠，4 ℃搅拌3 h，清水洗涤两次，蒸馏水洗涤一次至纯净沥干水分；
（4）冷冻干燥：将经除杂鱼皮原料进行冷冻干燥后粉碎，4 ℃保存备用；
（5）胶原蛋白的提取：将步骤(3)所得鱼皮加入1：100～1：300的0.5～1 mol/L的醋酸溶液中，4～10 ℃搅拌浸提48 ～ 96 h，离心得上清液；
（6）胶原蛋白的纯化：将上清液加入氯化钠至质量分数为7%，进行盐析，静置2 h，并将析出的胶原蛋白于0.5 mol/L的醋酸溶液中复溶，再用0.1 mol/L的醋酸溶液透析24 h，蒸馏水透析48 h，将透析液冷冻干燥，得高品质淡水鱼鱼皮胶原蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种高品质淡水鱼鱼皮胶原蛋白的制备方法，其特征是原料可选取白鲢鱼、花鲢鱼、草鱼、鳙鱼淡水鱼的鱼皮。
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