CN102949460A - 互叶白千层油的应用及其制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了互叶白千层油作为马拉色菌抑制剂的应用,尤其是在制备治疗马拉色菌引起皮肤疾病的药物中的应用。本发明还公开了一种含有互叶白千层油的外用制剂和日化用品。
Description
技术领域
本发明涉及互叶白千层油的应用及其制剂。
背景技术
马拉色菌(Pityrosporum)是人类及温血动物皮肤上的常驻菌群,属于嗜脂性担子菌纲酵母属。早在上世纪九十年代之前,人们已经在温血动物皮肤上发现了三种马拉色菌,它们分别为:糠秕马拉色菌、厚皮马拉色菌和合轴马拉色菌。而后在人们的研究中,发现马拉色菌共有7种,即除上述3种外还有球形马拉色菌、钝形马拉色菌、限制性马拉色菌和斯洛菲马拉色菌。马拉色菌主要生长在人类的表皮角质层中,是一种嗜脂性的菌群,主要以皮肤表面的三酰基甘油和游离的脂肪酸为营养,而影响三酰基甘油和游离脂肪酸分泌的主要因素是皮脂腺功能的强弱。马拉色菌在皮肤上生长密度因年龄增长和脂质分泌较少而降低。马拉色菌以酵母相和菌丝相生长,在正常人皮肤上以酵母相生长,7种马拉色菌中糠秕马拉色菌可单独以氨酸基为中介生长,其他六种则无此特性。马拉色菌属于条件性致病菌,可以引起多种疾病,尤其是皮肤病。因此,近几年对它的致病因素有了越来越广泛的研究。大量研究表明,马拉色菌引起的皮肤疾病是有多种因素综合作用的结果,疾病的发生与该菌的密度,菌种及代谢产物均有密切关系。大量研究表明,马拉色菌可以引起头皮屑、脂溢性皮炎、特应性皮炎和银屑病等。
头皮屑通常是肉眼难以观察的鳞屑,其存在形式通常是角质化单细胞形式,但当一定量的角质化单细胞黏附在一起时,临床上就可以观察到片状的白色鳞屑。Behrman是第一个研究头皮屑的学者,他总结了大量的资料,按临床表现将头皮屑分为两型:单纯糠疹型和脂溢性糠疹型。单纯糠疹型为出现在正常头皮上的灰白疏松干燥的头屑;脂溢性糠疹型则表现为鳞屑多,且油腻易黏附,可形成蜡样痂皮,基底为红色,并伴有少量的黏性渗出。正常头皮的角质层包含了完全角化并相互紧贴的25-30层角质化细胞,而头皮屑的头皮角质层里通常少于10层角质化细胞,而且这些角质化细胞经常角化功能不全,排列不齐,细胞间有裂缝。头皮屑的产生过程很可能始于一个不连续的,真皮乳头区的毛细血管扩张。中性粒细胞和单核细胞迁移进入乳头区、表皮,造成表皮细胞间水肿,部分细胞坏死形成小水疱,随后颗粒层消失,出现角化不全。不久以后,水肿减轻,炎症细胞渐消失。表皮自行修复,角质层表面形成鳞屑。
与头皮屑病因相关的最重要的微生物是马拉色菌,已有大量的临床和实验室研究的相关学说。正常的头皮上分布着多种微生物,密度大约是l03-105/mm2,其中包括葡萄球菌、丙酸杆菌和马拉色菌。马拉色菌在体内外营养条件不同的情况下,表现为酵母相或菌丝相,其生长有严格的脂质需求。马拉色菌在分子水平上的不同亚型可以引起临床和病理上不同的炎症反应和多种疾病,而且菌丝相和某些酵母相都可以致病。早在20世纪60年代就有人通过试验指出,治疗头皮屑使用真菌抑制剂的疗效明显优于细菌抑制剂。近来有许多报道,口服或外用酮康唑、和吡硫锌等抗真菌药物可以有效的治疗头屑过多。
脂溢性皮炎是一种发生在皮脂溢出基础上的慢性皮肤炎症。临床上以头面部及上背部黄红色斑片伴油腻性鳞屑及结痂为特征,并伴有明显的炎症反应。皮肤表面皮脂增多及化学成分的改变,使存在于皮肤的正常菌群大量异常增殖,侵犯皮肤从而引起发病。自1874年Malassez首次提出马拉色菌与脂溢性皮炎的发病有关,马拉色菌与脂溢性皮炎关系一直存在争议。Heng等人证实,皮损的消退与马拉色菌含量下降成正相关。抗真菌药用于治疗脂溢性皮炎后,马拉色菌数量明显减少,皮损得到改善,这给马拉色菌与脂溢性皮炎的关系提供了有力证据。Pechere等人研究发现,马拉色菌的致病性并不取决于其在皮肤上的密度,而是由马拉色菌亚型决定的。Tajima等人运用PCR技术分析显示,患者皮肤上的主要菌种是球形马拉色菌和限制性马拉色菌;并且,脂溢性皮炎与限制性马拉色菌的特定亚型有关。
特应性皮炎以瘙痒、红斑、脱屑,皮肤肥厚为主要特征。好发于婴幼儿、年轻人及青春期后女性,尤其在面颈部多见。遗传因素在其中也起重要作用。国内外一些文献表明,特应性皮炎患者血清中IgE水平升高。大量研究表明,特应性皮炎患者马拉色菌特异性IgE抗体阳性率为20%-100%,马拉色菌为特应性皮炎的病因之一。可考虑加用抗真菌药,但临床应用时需根据具体情况而定。
银屑病主要表现为炎性红色丘疹,约米粒至绿豆大小,后逐渐融合为棕红色斑丘疹及斑块,边界清楚,周围炎性浸润,表面覆盖多层干燥的银白色鳞屑。国外曾报道以灭活的生存的糠秕孢子菌做斑贴实验,在人和兔体表都能引起银屑病样皮损。也有研究发现银屑病患者血清中存在一种抗糠秕马拉色菌抗体,而糠秕马拉色菌的可溶性成分(蛋白质)对银屑病患者的多形核中性粒细胞具备明显的趋化作用,提示糠秕马拉色菌可能参与银屑病的同形反应。
互叶白千层油(商业名称为“茶树油”),主要来自桃金娘科(Myrtaceae)白千层属(MelaleucaL)的数种植物,其最主要的一种称为互叶白千层(Melaleuca alternifolia),次要的植物有包鳞白千层(Melaleuca bracteata)、石南叶白千层(Melaleuca ericifolia)、白油树(Melaleuca quinquenervia)、绿花白千层(Melaleuca viridiflora)等。互叶白千层的新鲜枝叶经水蒸汽蒸馏可得无色至淡黄色的精油。
通过对互叶白千层油化学成分进行研究,鉴定出近60个挥发性成分,其精油组成基本为单萜烯、醇类及倍半萜类化合物,占总油量的99%以上,而主要成分为萜品-4-醇和l,8-桉叶油素。
互叶白千层油主要应用与以下几个方面:卫生消毒剂、防腐剂、空气清新剂、防痤疮(粉刺)清洁膏、霜、水、浴用清洁剂、汽车清洁剂、地毯除臭剂、清新剂、餐具清洁剂、脸用、体用、足用清洁剂、清新剂、保湿剂、除臭剂、香波、宠物用卫生用品等。但目前,尚未见将互叶白千层油作为马拉色菌抑制剂的应用的相关报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供互叶白千层油作为马拉色菌抑制剂的应用,尤其是在制备治疗马拉色菌引起皮肤疾病的药物中的应用。本发明还提供了一种含有互叶白千层油的外用制剂和日化用品。
本发明提供了互叶白千层油作为马拉色菌抑制剂的应用。
其中,本发明所述的互叶白千层油主要来自桃金娘科(Myrtaceae)白千层属(Melaleucal)的数种植物,其最主要的一种称为互叶白千层(Melaleucaalternifolia),次要的植物有包鳞白千层(Melaleuca bracteata)、石南叶白千层(Melaleuca ericifolia)、白油树(Melaleuca quinquenervia)、绿花白千层(Melaleuca Viridiflora)等。
本发明所述的互叶白千层油是由互叶白千层的新鲜枝叶经水蒸汽蒸馏得到的无色至淡黄色的精油。
本发明所述的互叶白千层油的国际标准为折光指数为n20D1.4750-1.4820;相对密度为d20200.885-0.906;旋光为(20C)为+5°~+15°;闪点为56°C(±2°C)。
本发明中,所述的互叶白千层油较佳的购于天津天香生化科技有限公司,纯度为15%。
本发明中,所述的马拉色菌(Pityrosporum)是人类及温血动物皮肤上的常驻菌群,属于嗜脂性担子菌纲酵母属;所述的马拉色菌较佳的为糠秕马拉色菌(Malassezia.furfur)、厚皮马拉色菌(Malassezia.pachydermatis)、合轴马拉色菌(Malassezia.sympodialis)、球形马拉色菌(Malassezia.globosa)、钝形马拉色菌(Malassezia.obtusa)、限制性马拉色菌(Malassezia.restricta)或斯洛菲马拉色菌(Malassezia.slooffiae)。
所述的糠秕马拉色菌(Malassezia furfur)较佳的为糠秕马拉色菌(Malassezia furfur)ATCC44344。
本发明还提供了互叶白千层油在制备治疗马拉色菌引起皮肤疾病的药物中的应用。
较佳的,所述的皮肤疾病为头屑过多、特应性皮炎、脂溢性皮炎或银屑病中的一种。
其中,头屑过多较佳的为单纯糠疹型或脂溢性糠疹型。
本发明还提供了一种外用制剂,其包括互叶白千层油与药物载体;其剂型为喷雾剂、气雾剂或软膏剂。
其中,所述的软膏剂较佳的为乳膏剂。
其中,所述的药物载体为药学上允许的药物载体,较佳的为微球、脂质体或微乳液中的一种。
所述的互叶白千层油占药物载体的质量百分比较佳的为0.1%-99%,更佳的为1%-20%。
本发明还提供了一种日化用品,其含有互叶白千层油和化妆用可接受的载体。
其中,所述的日化用品较佳的为洗发水、护发素、洗手液、沐浴露、乳液或膏霜。
本发明中,所述的外用制剂和/或日化用品的使用方式一般为皮肤外用。
在符合本领域常识的基础上,上述各优选条件,可任意组合,即得本发明各较佳实例。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
本发明的积极进步效果在于:本发明的互叶白千层油可作为马拉色菌抑制剂使用,也可用于制备治疗马拉色菌引起皮肤疾病的药物;同时,还可进一步用于制备日化产品和外用制剂,有广阔的应用前景。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明,但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,按照常规方法和条件,或按照商品说明书选择。
实施例1
互叶白千层油(天津天香生化科技有限公司)抑制马拉色菌抑菌圈实验。
实验菌株:糠秕马拉色菌(Malassezia furfur,ATCC44344);
培养基:马拉色菌固体培养基:葡萄糖40g/L,琼脂14g/L,蛋白胨10g/L,蒸馏水溶解,调节pH为6.8-7.0,在115℃和高压条件下灭菌20min;马拉色菌液体培养基:葡萄糖40g/L,蒸馏水溶解,调节pH为6.8-7.0,在115℃高压条件下灭菌20min。
实验方法:将受试菌在马拉色菌固体培养基上传代培养后,确保菌落的纯化和活力,挑取单克隆至50ml马拉色菌液体培养基,30℃培养24h,用比浊仪(生物梅里埃公司)调整其至麦氏4号比浊管浓度。用培养基稀释菌液,使其最终菌浓度为l06CFU/mL,然后吸取100μl涂在固体培养基上,用牛津杯法测定互叶白千层油在100mg/ml时的抑菌圈大小,以判断互叶白千层油的抑菌活性。
实验结果:
表1互叶白千层油对马拉色菌的抑制作用
从实验中得出,使用一定浓度互叶白千层油就可以形成对马拉色菌较大的抑菌圈平均值,抑菌效果好。
实施例2
互叶白千层油抑制马拉色菌的最小抑菌浓度(MIC值)的测定
实验菌株:糠秕马拉色菌(Malassezia furfur,ATCC44344);
培养基:马拉色菌液体培养基:葡萄糖40g/L,蒸馏水溶解,调节pH为6.8-7.0,在115℃高压条件下灭菌20min。
实验方法:将受试菌在马拉色菌固体培养基上传代培养后,以确保菌落的纯化和活力,挑取单克隆至50ml马拉色菌液体培养基,30℃培养24h,用比浊仪(生物梅里埃公司)调整其至麦氏4号比浊管浓度。直接用马拉色菌液体培养基将互叶白千层油稀释成试验浓度,分别为1000、500、250、125、62.5、31.25μg/ml。在96孔板微孔中加入菌液100μL和药液100μL,同时设不加菌的阴性对照和不加药液的正常生长对照,每种药做3个平行,取平均值。置30℃湿盒孵育,48h后观察结果。由于马拉色菌为嗜脂性的,菌落浮在液体表面,微黄色,薄薄一层漂浮在透明的液基表面,肉眼观察非常清晰,采用直接法读取数据。结果判断的前提是生长对照良好,空白对照无菌生长清晰,其它孔随药物浓度梯度升高而菌的生长受到抑制。
实验结果:
表2互叶白千层油MIC值测定
药物(μg/ml) | 1000 | 500 | 250 | 125 | 62.5 | 31.25 |
互叶白千层油 | - | - | - | - | + | + |
“-”代表无菌生长;“+”代表有菌生长。
由表2可知,互叶白千层油对马拉色菌的MIC值为125μg/ml。
从上述两个实验可以得出低用量的互叶白千层油对马拉色菌具有优良的抑菌效果。
实施例3
护发素的制备:
制备工艺:将A相升温至80-85℃,搅拌均匀。将B相升温至80-85℃,搅拌均匀。将A相加入B相中,均质3min。降温搅拌。3.降温至40℃以下,加入C相,搅拌均匀。
实施例4
洗发水的制备:
制备工艺:去离子水加热到85℃,将A相各组分依次加入,搅拌均匀。降温至60-70℃,加入B相,搅拌均匀。降温至40℃以下,加入C相,搅拌均匀。
实施例5
沐浴露的制备:
制备工艺:去离子水加热到85℃,将A相各组分依次加入,搅拌均匀。降温至60-70℃,加入B相,搅拌均匀。降温至40℃以下,加入C相,搅拌均匀。
实施例6
喷雾剂的制备:
具体操作步骤:将20ml的乙醇,10ml山梨醇和5ml甘油混合均匀,加入0.2g互叶白千层油,补充去离子水至90ml,加入1g香精,1.5gRH-60,0.03gNaF,0.1g苯甲酸钠和适量柠檬酸,加去离子水补充至100ml,混合均匀,灌装。
实施例7
脂质体的制备:
1、原料:
2、制备工艺:
(1)互叶白千层油溶液的配制:称取适量的互叶白千层油,用磷酸盐缓冲液配成5%的混悬液。
(2)称取处方量磷脂、胆固醇于50ml小烧杯中,加无水乙醇1~2ml,置于65~70℃水浴中,搅拌使溶解,旋转该小烧杯使磷脂的乙醇液在杯壁上成膜,用吸耳球轻吹风,将乙醇挥去。
(3)取预热的互叶白千层油混悬液30ml,加至含有磷脂和胆固醇脂质膜的小烧杯中,65~70℃水浴中搅拌水化10min。随后将小烧杯置于磁力搅拌器上,室温,搅拌30~60min,如果溶液体积减少,可补加水至30ml,混匀,即得。
将上述实施例3-6制备的护发素、洗发水、沐浴露和喷雾制剂在具有本文中叙述的由马拉色菌引起的皮肤症状的人群中进行临床使用15-20天,均具有良好的抑制单纯糠疹型和脂溢性糠疹型头屑和银屑病功效;喷雾具有治疗特应性皮炎。
Claims (10)
1.互叶白千层油作为马拉色菌(Pityrosporum)抑制剂的应用。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于:所述的互叶白千层油购买自天津天香生化科技有限公司。
3.如权利要求1所述的应用,其特征在于:所述的马拉色菌(Pityrosporum)为糠秕马拉色菌(Malassezia.furfur)、厚皮马拉色菌(Malassezia.pachydermatis)、合轴马拉色菌(Malassezia.sympodialis)、球形马拉色菌(Malassezia.globosa)、钝形马拉色菌(Malassezia.obtusa)、限制性马拉色菌(Malassezia.restricta)或斯洛菲马拉色菌(Malassezia.slooffiae)。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于:所述的糠秕马拉色菌(Malassezia furfur)为糠秕马拉色菌(Malassezia furfur)ATCC44344。
5.互叶白千层油在制备治疗马拉色菌引起皮肤疾病的药物中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于:所述的皮肤疾病为头屑过多、特应性皮炎、脂溢性皮炎或银屑病中的一种;
其中,头屑过多为单纯糠疹型或脂溢性糠疹型。
7.一种外用制剂,其包括互叶白千层油与药物载体;其剂型为喷雾剂、气雾剂或软膏剂。
8.如权利要求7所述的外用制剂,其特征在于:所述的药物载体为微球、脂质体或微乳液中的一种;
所述的互叶白千层油占药物载体的质量百分比为0.1%-99%,较佳的为1%-20%;
其中,所述的软膏剂较佳的为乳膏剂。
9.一种日化用品,其含有互叶白千层油和化妆用接受的载体。
10.如权利要求9所述的日化用品,其特征在于:所述的日化用品为洗发水、护发素、洗手液、沐浴露、乳液或膏霜。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20130306 |