CN102949434B - 苦味西葫芦提取物在制备抗痛风药物中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物在医学中的新用途，尤其是涉及苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物在制备抗痛风药物中的新用途。本发明的研究发现：苦味西葫芦水提取物或者苦味西葫芦醇提取物能够有效降低尿酸水平，缓解关节肿大程度和改善行动能力，具有抗痛风的功效，无副作用，高效并且不会使通风在停药后产生反弹。因此，苦味西葫芦水提取物或者苦味西葫芦醇提取物可用于制备治疗痛风的药物，进一步地开发了苦味西葫芦的巨大应用潜能。
Description
技术领域
本发明涉及苦味西葫芦提取物在医学中的新用途，尤其是涉及苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物在制备抗痛风药物中的新用途。
背景技术
在人体内有一种叫嘌呤的物质，当它的代谢发生紊乱后就会引起痛风。嘌呤经过一系列代谢变化，最终形成的产物叫尿酸。尿酸在人体里没有什么生理功能，在正常情况下，体内产生的尿酸2／3由肾脏排出，1／3由大肠排出。体内的尿酸是在不断地生成和排泄，因此它在血液中维持一定的浓度。在嘌呤的合成与分解过程中，有多种酶的参与，由于酶的先天性异常代谢发生紊乱，使尿酸的全成增加或排出减少，均可引起高尿酸血症。当血尿酸浓度过高时，尿酸即以钠盐的形式沉积在关节、软组织、软骨和肾脏中，引起组织的异物炎症反应成了引起痛风的祸根。如治疗不彻底可致关节肿大、畸形、僵硬、关节周围瘀斑、结节、并发痛风性肾结石、痛风性肾功能衰竭，痛风性冠心病、高血脂、高血压、泌尿系统结石等脏腑病症威胁患者的生命直致生命的终止。流行病学调查显示,痛风患病率与日俱增。中国疾病预防控制中心最新报告显示,我国人民随着生活水平的提高和生活节奏的加快,痛风的发病率高于世界平均水平,全国痛风患者超过七千万人,全球痛风病患者高达1.3亿。
抗痛风药目前品种不多，临床治疗主要以秋水仙碱、非甾体类抗炎药、激素、促进尿酸排泄药（如丙磺舒、磺吡酮及苯溴马隆）和抑制尿酸合成药（如别嘌呤醇）为主。急性发病期主要应用饮水仙碱、非甾体类抗炎药、激素，缓解期主要应用促进尿酸排泄药、抑制尿酸合成药。这些药物在治疗上都有缺陷。疗效差、副作用大成为其临床应用的瓶颈，而且不能长期使用。现在市场上也常见一些中成药制剂来治疗痛凤，然而由于药效低，很难从根本上冶愈通风性疾病。所以目前急需研制和开发选择性强，无副作用，高效并且不会使通风在停药后产生反弹的全新抗通风新药。
苦味西葫芦(Cucurbita pepo cv Dayangua),别名大烟瓜,是葫芦科南瓜属西葫芦的一个变种,主要分布于内蒙古多伦地区。其果实味苦,当地民间常用于治疗感冒,还有镇痛、止泻等功效。当地兽医还用其治疗羊、猪等的发热感冒和羊的痢疾,对家禽的常见传染性疾病如鸡的瘟疫性疾病、传染性法氏囊炎、传染性支气管炎等有很好的疗效。
现代药理实验研究表明苦味西葫芦提取物具有抗菌、抗病毒、镇痛、增强离体十二指肠兴奋性和消炎解热等方面作用，在学术期刊《动物医学进展》2004年第25卷第5期的《苦味西葫芦粗提物抗炎作用的实验研究》（作者：张艳萍,邓旭明,祝万菊,王学林）、《中兽医医药杂志》2004年第23卷第6期的《苦味西葫芦抗炎作用机理的初步研究》（作者：张艳萍,邓旭明,陈志宝）和《临床医药实践》(下半月刊)2009年第18卷第6期的《苦味西葫芦水提物镇痛作用的实验研究》（作者：高立新）均有相关的记载。
从苦味西葫芦果实中分离得到的化合物分别为：甲级鼠李素的3-芸香糖苷、异鼠李素的3-芸香糖甙-4’-鼠李糖苷、Kaemp ferol-3-O-neohesp-eridoside、Larisiresinal4’-O-β-D-glucopyranoside、(+)-5’-Methoxy-isolarisiresinol3α-O-β-D-glucopyranoside、Lyoniside、Isolariciresinol-9-O-β-D-Xylopyranoside、Oct-1-en-3-ylβ-D-arabinopyranosyl-(1→6)-β-D-Glucopyranoside、葫芦素E-2-O-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-新橙皮糖苷、乙酸蛇麻脂醇酯、β-香树脂醇乙酸酯、isomultiflorenol、isomultiflorenone、(+)-Isolarisiresinol 3α-O-β-D-glucopyranoside、2-O-β-D-葫芦素E葡萄糖苷、D-果糖、硬脂酸三十二烷醇酯、三十三烷、β-谷甾醇、豆甾醇、胡萝卜甙、胡萝卜苷、脑甙、13（18）-齐墩果烯-3-醇；葫芦苷A和葫芦酯。以上所述的关于从苦味西葫芦果实中分离得到的化合物成分的内容，在《中国药学杂志》2002年第37卷第9期的《苦味西葫芦化学成分的研究》（作者：丁艳丽,邓旭明,蔡辉,王芳生,王学林,张聿梅,杨峻山）和《沈阳药科大学学报》2006年第23卷第1期的《苦味西葫芦果实的三萜类化学成分》（作者：葛杉,王大成,向华,祝万菊,邓旭明,吴立军）均有相关的记载。
中国发明专利公开CN102552370A公开了两种广谱抗肿瘤药物，该药物以苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物作为有效成分。该发明成功地将苦味西葫芦水提取物或醇提取物应用于制备抗肿瘤药物，能广泛抑制多种类型的人肿瘤细胞系成长，并进一步诱导肿瘤细胞凋亡。在人肿瘤异种移植模型研究中，苦味西葫芦提取物被证明是一种有效的抗肿瘤剂，能强烈抑制人肝癌、前列腺癌、肺癌等多种癌细胞以及髓母细胞瘤细胞在体内生长。然而，该发明专利并没有发现苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物能够用于制备抗痛风药物。因此，在现有技术水平上，苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物仍然具有巨大的开发潜能。
发明内容
本发明的目的是提供苦味西葫芦提取物在制备抗痛风药物中的新用途。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现：
苦味西葫芦提取物在制备抗痛风药物中的用途，所述苦味西葫芦提取物为苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物。
其中，所述抗痛风药物含有有效量的苦味西葫芦水提取物或者苦味西葫芦醇提取物及可药用载体和/或赋形剂。
进一步地，所述可药用载体和/或赋形剂为羧甲基纤维素钠。
优选地，所述抗痛风药物是含苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物的口服制剂。
优选地，所述抗痛风药物是含苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物的注射制剂。
所述苦味西葫芦水提取物或者苦味西葫芦醇提取物通过以下制备步骤制备得到：
（1）取半成熟的苦味西葫芦瓜果，去皮，然后将果肉切成小块，加入水煮制，制得糊状物；
（2）将所述糊状物捞出，晒干，制得原药干；
（3）将原药干粉碎为原药粉末，在室温下保存；
（4）取原药粉末，溶解在蒸馏水中，摇动萃取，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到苦味西葫芦水提物；取原药粉末，加入乙醇，摇动萃取，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到苦味西葫芦醇提取物。
进一步地，所述苦味西葫芦水提取物或者苦味西葫芦醇提取物通过以下制备步骤制备得到：
（1）取100千克半成熟的苦味西葫芦瓜果，去皮，然后将果肉切成小块，加25千克的水，煮制4个小时，制得糊状物；
（2）将所述糊状物捞出，晒干，制得3.4千克原药干；
（3）将原药干粉碎为原药粉末，在室温下保存；
（4）取100克原药粉末，溶解在1000毫升的蒸馏水中，摇动萃取8个小时，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到11克苦味西葫芦水提物；取100克原药粉末，加1000毫升的95%的乙醇，摇动萃取8个小时，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到10克苦味西葫芦乙醇提取物。
将上述制备步骤得到的苦味西葫芦水提取物或者苦味西葫芦醇提取物分别溶解在0.5%羧甲基纤维素钠溶液中制备成不同浓度的抗痛风药口服制剂，通过对8周龄的BALB/c小鼠进行给药观察和病理分析，结果显示，苦味西葫芦水提取物或者苦味西葫芦醇提取物能够有效降低嗪酸钾诱导的高尿酸小鼠血清尿酸水平，缓解氧嗪酸钾诱导小鼠的关节肿大程度和改善这些小鼠的行动能力。
本发明的有益效果是：苦味西葫芦水提取物或者苦味西葫芦醇提取物能够有效降低尿酸水平，缓解关节肿大程度和改善行动能力，具有抗痛风的功效，无副作用，高效并且不会使通风在停药后产生反弹。因此，苦味西葫芦水提取物或者苦味西葫芦醇提取物可用于制备治疗痛风的药物，进一步地开发了苦味西葫芦的巨大应用潜能。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明做进一步详细的说明，但本发明不限于以下实施例。
实施例1
苦味西葫芦水提取物和苦味西葫芦乙醇提取物的制备。
具体地，所述苦味西葫芦水提取物或者苦味西葫芦醇提取物通过以下制备步骤制备得到：
（1）取100千克半成熟的苦味西葫芦瓜果，去皮，然后将果肉切成小块，加25千克的水，煮制4个小时，制得糊状物；
（2）将所述糊状物捞出，晒干，制得3.4千克原药干；
（3）将原药干粉碎为原药粉末，在室温下保存；
（4）取100克原药粉末，溶解在1000毫升的蒸馏水中，摇动萃取8个小时，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到11克苦味西葫芦水提物；取100克原药粉末，加1000毫升的95%的乙醇，摇动萃取8个小时，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到10克苦味西葫芦乙醇提取物。
实施例2
苦味西葫芦水提取物和苦味西葫芦醇提取物对小鼠的急性毒性分析。
取实施例1制备的苦味西葫芦水提取物和苦味西葫芦醇提取物分别溶解在0.5%羧甲基纤维素钠溶液中制备成不同浓度（苦味西葫芦水提取物浓度为500mg/mL和100mg/mL；苦味西葫芦醇提取物浓度为500mg/mL和100mg/mL）的口服液，对小鼠进行口服给药实验。
取两组8周龄的BALB/c小鼠（美国Charles river公司），每组10只（5只雄性和5只雌性），分别以单次剂量5g/kg和多次剂量1g/kg（QD X15）给予苦味西葫芦水提取物和苦味西葫芦醇提取物，然后分别观察1周和4周。每两天称体重。
试验结束后，将受试小鼠处死，进行病理分析。
实验结果显示，以单次剂量5g/Kg和多次剂量1g/kg（QDX15）给予苦味西葫芦水提取物和苦味西葫芦醇提取物，均未观察到毒性，所有受试小鼠生长良好，无一死亡。
苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物一般口服推荐剂量为每天1g/体表面积（m2）,连续三周，休息一周为一疗程。苦味西葫芦水提取物和苦味西葫芦醇提取物每天总剂量一次于早餐后半小时口服，具体病例可由医师根据病情调整。
实施例3
苦味西葫芦水提取物和苦味西葫芦醇提取物对降低氧嗪酸钾诱导的高尿酸小鼠血清尿酸水平的研究。
取实施例1制备的苦味西葫芦水提取物和苦味西葫芦醇提取物分别溶解在0.5%羧甲基纤维素钠溶液中制备成浓度为5mg/mL和2.5mg/mL的口服液，对小鼠进行口服给药实验。
取5组8周龄的BALB/c小鼠，每组10只雌性BALB/c小鼠，4组受试小鼠分别给25mg/kg和50mg/kg苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物口服液，对照组按同样方法给予安慰剂（0.5%羧甲基纤维素钠溶液）。
小鼠单独饲养，允许自由采食。在最后一次喂药前一小时给BALB/c小鼠腹腔注射280毫克/1公斤体重的氧嗪酸钾制造高尿酸血症模型。造模一小时后分别试验喂药给造模后的小鼠，在最后一次给药4个小时后，采用眼眶取血制备血清样品检测其血清中尿酸的含量。对血液样品中尿酸含量的测定是根据尿酸测定试剂盒制造厂家(美国加洲BioAssay公司)所提供的方法进行的。实验结果请参见表1。
实验结果显示：苦味西葫芦水提取物和苦味西葫芦醇提取物都能有效地降低嗪酸钾诱导的高尿酸小鼠血清尿酸水平，而且显现剂量效应关系。这一结果暗示苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物是一种很有前景的试验性抗痛风新药临床侯选者，值得进一步开发。
表1.苦味西葫芦水提物和醇提物口服液对降低氧嗪酸钾诱导的高尿酸小血清尿酸水平的作用。
实施例4
苦味西葫芦水提取物和苦味西葫芦醇提取物对缓解氧嗪酸钾诱导小鼠的关节肿大程度和改善这些小鼠的行动能力分析。
取实施例1制备的苦味西葫芦水提取物和苦味西葫芦醇提取物分别溶解在0.5%羧甲基纤维素钠溶液中制备成浓度为5mg/mL和2.5mg/ml的口服液。
给8周龄的BALB/c小鼠腹腔注射300毫克/1公斤体重的氧嗪酸钾制造关节肿大模型，挑选出那些出现由于关节肿大而造成其行动不方便小鼠并分成5组，每组10只雌性BALB/c小鼠。
4组受试小鼠分别按照25mg/kg和50mg/kg的剂量喂给苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物口服液，共给药二次，每天一次；对照组按同样方法给予安慰剂（0.5%羧甲基纤维素钠溶液）。给药二次后及时观察受试小鼠关节肿大消失情况和其行动能力的改善状况。试验结果请参见表2。
实验结果显示：苦味西葫芦水提取物和苦味西葫芦醇提取物能有效地缓解氧嗪酸钾诱导小鼠的关节肿大程度和改善这些小鼠的行动能力，而且苦味西葫芦水提取物和苦味西葫芦醇提取物大剂量组八只模型小鼠关节肿大在给药二次全部消失。实验结果进一步验证了苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物具有极佳的抗痛风疗效，是一种极为有效的治疗痛风试验性新药候选者。
表2.苦味西葫芦水提物和醇提物口服液对缓解氧嗪酸钾诱导小鼠的关节肿大程度和改善这些小鼠的行动能力的作用。
而且，本发明还发现苦味西葫芦水提取物和苦味西葫芦醇提取物没有明显的副作用，不会使痛风症状在停药后产生反弹。
上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.苦味西葫芦提取物在制备抗痛风药物中的用途，所述苦味西葫芦提取物为苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抗痛风药物含有有效量的苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物及可药用载体。
3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述可药用载体为羧甲基纤维素钠。
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抗痛风药物是含苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物的口服制剂。
5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抗痛风药物是含苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物的注射制剂。
6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述苦味西葫芦水提取物通过以下制备步骤制备得到：
（1）取半成熟的苦味西葫芦瓜果，去皮，然后将果肉切成小块，加入水煮制，制得糊状物；
（2）将所述糊状物捞出，晒干，制得原药干；
（3）将原药干粉碎为原药粉末，在室温下保存；
（4）取原药粉末，溶解在蒸馏水中，摇动萃取，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到苦味西葫芦水提物。
7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述苦味西葫芦水提取物通过以下制备步骤制备得到：
（1）取100千克半成熟的苦味西葫芦瓜果，去皮，然后将果肉切成小块，加25千克的水，煮制4个小时，制得糊状物；
（2）将所述糊状物捞出，晒干，制得3.4千克原药干；
（3）将原药干粉碎为原药粉末，在室温下保存；
（4）取100克原药粉末，溶解在1000毫升的蒸馏水中，摇动萃取8个小时，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到11克苦味西葫芦水提物。
8.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述苦味西葫芦醇提取物通过以下制备步骤制备得到：
（1）取半成熟的苦味西葫芦瓜果，去皮，然后将果肉切成小块，加入水煮制，制得糊状物；
（2）将所述糊状物捞出，晒干，制得原药干；
（3）将原药干粉碎为原药粉末，在室温下保存；
（4）取原药粉末，加入乙醇，摇动萃取，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到苦味西葫芦醇提取物。
9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，所述苦味西葫芦醇提取物通过以下制备步骤制备得到：
（1）取100千克半成熟的苦味西葫芦瓜果，去皮，然后将果肉切成小块，加25千克的水，煮制4个小时，制得糊状物；
（2）将所述糊状物捞出，晒干，制得3.4千克原药干；
（3）将原药干粉碎为原药粉末，在室温下保存；
（4）取100克原药粉末，加1000毫升的95%的乙醇，摇动萃取8个小时，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到10克苦味西葫芦乙醇提取物。
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