CN116350648B - 一种用于治疗炎症性肠病的多酚-寡糖复合物及其制备和应用 - Google Patents
一种用于治疗炎症性肠病的多酚-寡糖复合物及其制备和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于中药学领域，具体涉及一种用于治疗炎症性肠病的多酚‑寡糖复合物及其制备和应用。该多酚‑寡糖复合物中的活性成分为女贞苷和甘露寡糖，所述女贞苷和甘露寡糖的重量比为1:1～1:1.2。本发明将女贞苷与甘露寡糖结合形成复合物，用于治疗炎症性肠病，能够明显缓解小鼠体重因患病而体重下降的情况、明显缓解小鼠炎症性肠病造成的黏膜损伤、明显缓解小鼠炎症性肠病造成的结肠长度缩短的情况、明显缓解小鼠炎症性肠病的疾病症状，可作为预防、治疗的潜在药物。
Description
技术领域
本发明属于中药学领域，具体涉及一种用于治疗炎症性肠病的多酚-寡糖复合物及其制备和应用。
背景技术
炎症性肠病(Inflammatory Bowel Disease，IBD)是一种慢性肠道疾病，主要包括两种类型：溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis，UC)和克罗恩病(Crohn's Disease，CD)。近年来炎症性肠病在亚洲、非洲等新型工业化国家的发病率逐年上升，炎症患者临床表现包括肠道黏膜的慢性炎症和溃疡形成，常伴有腹泻、腹痛、便血、贫血、体重减轻等。由于炎症性肠病的病因复杂、持续时间长、症状反复发作、难以治愈并且与结肠癌的发生有关而备受关注。
目前，西医对于炎症性肠病的治疗主要针对其发作时期的症状进行治疗，通常以激素和免疫抑制剂治疗为主，如5-氨基水杨酸、糖皮质激素、生物制剂等，但存在药物价格昂贵、药物疗效不稳定、药物依赖性强、存在药物副作用等问题。
益生元、益生菌近来已经成为改善肠菌群和治疗炎症性肠病的研究热点。
多酚类化合物女贞苷(Ligustroside)分布于女贞子、素馨花等药用植物中，是其主要的活性成分，具有抗氧化、抗肿瘤及降脂等多种药理作用。但由于其易氧化、在体内代谢过程中会快速生成多种副产物、组织蓄积作用、较强的亲脂性和首过效应等因素，从而导致其实际应用较窄。
甘露寡糖又称为甘露低聚糖，是从酵母培养细胞壁中提取的一类新型抗原活性物质，能够调节肠道菌群并改善肠道内环境。但单独使用并不能很好地达到效果。
因此需要开发一种新的药物，能够提高女贞苷的稳定性及生物利用度，同时提高甘露寡糖的实际应用效果。
发明内容
本发明旨在解决上述问题，提供了一种用于治疗炎症性肠病的多酚-寡糖复合物及其制备和应用，该复合物由女贞苷与甘露寡糖反应结合而成，能够提高药物的稳定性及生物利用度，用于制备治疗炎症性肠病的药物。
按照本发明的技术方案，所述多酚-寡糖复合物中的活性成分为女贞苷和甘露寡糖，所述女贞苷和甘露寡糖的重量比为1:1～1:1.2。
具体的，该多酚-寡糖复合物即女贞苷-甘露寡糖复合物。本发明将女贞苷与甘露寡糖结合形成复合物，二者通过氢键、疏水相互作用形成复杂稳定的结构，从而有效提高了复合物的稳定性及用于治疗炎症性肠病的生物利用度。
进一步的，所述甘露寡糖选自甘露二糖、甘露三糖(MAN)和甘露四糖中的一种或多种；优选为甘露三糖。
本发明的第二方面提供了上述多酚-寡糖复合物的制备方法，包括以下步骤，
S1：在pH为5～7的条件下，将女贞苷溶液与甘露寡糖溶液混匀，得到混合液；
S2：对所述混合液进行加热处理，分离、干燥，得到所述多酚-寡糖复合物。
进一步的，所述步骤S1中，混匀是在30～50℃条件下磁力搅拌80～120min。
进一步的，所述步骤S1中，女贞苷溶液的浓度为15～60μg/mL，甘露寡糖溶液的浓度为400-600μg/mL，女贞苷溶液中的女贞苷与甘露寡糖溶液中的甘露寡糖的质量比为1:1～1:1.2。
具体的，所述步骤S1的具体操作如下：采用pH为5-7的缓冲液将浓度为0.3mg/mL女贞苷原液(溶剂为水)稀释成浓度为15～60μg/mL的女贞苷溶液；加入浓度为400-600μg/mL的甘露寡糖溶液，在30～50℃条件下磁力搅拌80～120min，得到混合液。
进一步的，所述缓冲液可以为PBS缓冲液(磷酸缓冲盐溶液)。
进一步的，所述步骤S2中，加热处理的温度为30～50℃，时间为14～18h。
进一步的，所述步骤S2中，采用离心的方式进行分离，离心后的上清液即是女贞苷-甘露三糖复合物溶液。
进一步的，所述步骤S2中，干燥的方式为冷冻干燥，时间为30-50h。
进一步的，所述步骤S2中，干燥前还包括预冷的操作，所述预冷的温度为-100～-60℃，时间为20-30h。
具体的，所述步骤S2的具体操作如下：将所述混合液在30～50℃条件下水浴14～18h，完成女贞苷对甘露三糖的吸附；离心，取上清液于-100～-60℃条件下预冷20-30h，再冷冻干燥30-50h，研磨得到所述多酚-寡糖复合物固体。
本发明的第三方面提供了上述多酚-寡糖复合物，或上述制备方法制备得到的含多酚-寡糖复合物的溶液在制备治疗炎症性肠病的药物中的应用。
本发明的第四方面提供了一种治疗炎症性肠病的药物，包含上述多酚-寡糖复合物，或上述制备方法制备得到的含多酚-寡糖复合物的溶液。
本发明的技术方案相比现有技术具有以下优点：本发明将女贞苷与甘露寡糖结合形成复合物，用于治疗炎症性肠病，能够显著缓解DSS诱导的炎症性肠病小鼠的体重下降趋势、降低DAI评分、延长结肠长度、减轻炎症浸润程度。
附图说明
图1为女贞苷(A)、甘露三糖(B)、女贞苷与甘露三糖物理混合物(C)、女贞苷-甘露三糖复合物(D)的DSC图。
图2为本发明中不同组小鼠体重下降趋势；数据以平均值±SEM表示。与对照组相比，*P<0.05和**P<0.01；与DSS组相比，#P<0.05和##P<0.01。
图3为本发明中不同组小鼠结肠组织HE染色病理切片图。
图4为本发明中不同组小鼠结肠长度对比图；数据以平均值±SEM表示。与L-M组相比，*P<0.05和**P<0.01；与DSS组相比，#P<0.05和##P<0.01。
图5为本发明中不同组小鼠DAI疾病评分图。数据以平均值±SEM表示。与L-M组相比，**P<0.05和***P<0.001；与DSS组相比，#P<0.05和##P<0.01。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好地理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。
下述实施例中的材料和仪器如下：
女贞苷(CAS35897-92-8)购买于Shanghai yuanye Bio-Technology Co.,Ltd，相对分子质量525；甘露三糖(CAS13382-86-0)相对分子质量504.44；葡聚糖硫酸钠(D808272M.W40,000)购买于Shanghai Macklin Biochemical Co.,Ltd；雄性C57BL/6小鼠来自江苏集萃药康生物科技股份有限公司(Gempharmatech Co.,Ltd)；
仪器采用冷冻干燥机(美国Labconco公司)、Q-2000型差示扫描量热仪(美国TA公司)。
实施例1女贞苷-甘露三糖复合物的制备
1)女贞苷溶液的配置：称取2mg女贞苷，量取6.67mL纯水，水温20℃超声1.5h，再经过离心、过滤后得到6.67mL、0.3mg/mL的女贞苷原液。用pH为6的PBS缓冲液将女贞苷原液稀释10倍，得到30μg/mL女贞苷溶液。
2)将30mL女贞苷溶液与经处理的、1.9mL、500μg/mL的甘露三糖溶液混合，将其倒入50mL锥形瓶中，在40℃下磁力搅拌1.5h，直至完全混合。
3)然后将锥形瓶置于40℃的水浴中16h，完成女贞苷对甘露三糖的吸附，离心后的上清液即是女贞苷-甘露三糖复合物溶液。
4)放置-80℃冰箱24h后冷冻干燥36h，将其研磨成女贞苷-甘露三糖复合物粉末后冷冻保存，最终得到女贞苷-甘露三糖复合物固体。
实施例2女贞苷-甘露三糖复合物差示扫描量热仪分析(DSC)
2.1、实验条件
精密称取供试品2.5mg置于差示扫描热仪炉体，空白参比选择铝坩埚；气氛N2(流速为50mL·min-1)；温度变化范围为0～400℃，升温速率10.00℃·min-1。分别对女贞苷、甘露三糖、女贞苷与甘露三糖物理混合物、女贞苷-甘露三糖复合物进行DSC分析，结果见图1。
2.1、实验结果
女贞苷(A)在187.61°处出现一个明显的吸热峰；甘露三糖(B)在199.28℃处有一个明显的吸热峰；女贞苷与甘露三糖物理混合物(C)中存在女贞苷的吸热峰和甘露三糖的吸热峰，说明二者仅为简单的物理混合；女贞苷-甘露三糖复合物(D)中的特征峰消失，说明复合物中女贞苷可能以非晶体形式存在，证实了新复合物的生成。
实施例3女贞苷-甘露三糖复合物的应用
动物实验验证药物疗效实验方法
3.1、动物实验小鼠分组
将健康雄性C57BL/6小鼠30只，平均体重为20g(18-22g)，适应饲养1周后，按随机分组表分为6组：
空白组(Control)：50mL高压灭菌水(ddH2O)；
模型组(DSS)：50mL3％DSS(葡聚糖硫酸钠盐)水溶液；
女贞苷组(LIG)：2mg/kg女贞苷；
甘露三糖组(MAN)：2mg/kg甘露三糖溶液；
女贞苷组和甘露三糖组(L+M)：4mg/kg女贞苷-甘露三糖物理混合物溶液；
女贞苷-甘露三糖复合物组(L-M)：4mg/kg女贞苷-甘露三糖复合物溶液。
3.2、炎症性肠病小鼠模型建立
在1-14天，空白组与模型组每天接受200uLPBS溶液灌胃，LIG组每天接受女贞苷溶液(2mg/kg BW)灌胃，MAN组每天接受甘露三糖溶液(2mg/kg BW)灌胃，L+M组每天接受女贞苷-甘露三糖物理混合物溶液(4mg/kg BW)灌胃，L-M组每天接受女贞苷-甘露三糖复合物溶液(4mg/kg BW)灌胃。在第八天开始，DSS组、LIG组、MAN组、L+M组、L-M组连续7天饮用2.5％的DSS溶液。所有小鼠均饲养于江南大学医学院实验动物中心，小鼠每天自由饮食和饮水，饲养条件：12小时明暗循环，控制温度(22±2℃)和湿度(55±5％)，噪声≤60dB。在实验第15天，所有小鼠均被处死。
炎症性肠病疾病模型开始建立后，每日记录小鼠体重、大便性状、大便隐血等情况，然后参考Cooper评分系统方法评定炎症性肠病的疾病活动指数(disease activityindex,DAI)，以量化炎症性肠病的病情程度。
3.3、动物实验处理方案
模型建立后，各组开始治疗处理，
空白组(Control)：50mL高压灭菌水(ddH2O)；
模型组(DSS)：50mL3％DSS(葡聚糖硫酸钠盐)水溶液；
女贞苷组(LIG)：2mg/kg女贞苷；
甘露三糖组(MAN)：2mg/kg甘露三糖溶液；
女贞苷组和甘露三糖组(L+M)：4mg/kg女贞苷-甘露三糖物理混合物溶液；
女贞苷-甘露三糖复合物组(L-M)：4mg/kg女贞苷-甘露三糖复合物溶液。
本次测试实验使用的是实施例1中的复合物。治疗周期7天，每天各组通过官位给药。治疗期间，记录各组小鼠体重、大便性状、大便隐血等情况，然后参考Cooper评分系统方法评定炎症性肠病的疾病活动指数(disease activity index,DAI)，以量化炎症性肠病的病情程度。
实验结束后，首先，利用腹部刺激法手机各组小鼠粪便，并及时储存于-80℃冰箱。然后各组小鼠腹腔注射4％的水合氯醛进行麻醉，利用眼眶取血收集小鼠外周血，在离心机2000rpm转速下离心10min，取上清，测量结肠长度。然后解剖小鼠，取结肠组织(盲肠末端至肛门)，测量结肠长度。最后，获取各组小鼠结肠组织于4％多聚甲醛中固定，石蜡包埋，切成4μm切片，HE染色，在光学显微镜下观察结肠组织的病理变化。
3.4、动物实验结果
3.4.1、本发明的复合物明显缓解小鼠体重因患病而体重下降的情况：
如图2所示，在DSS溶液干预小鼠一周后，小鼠体重显著降低，而女贞苷组(LIG)、甘露三糖组(MAN)、女贞苷组和甘露三糖组(L+M)和女贞苷-甘露三糖复合物组(L-M)，尤其是女贞苷-甘露三糖复合物组(L-M)可减轻这种体重下降的情况。
3.4.2、本发明的复合物明显缓解小鼠炎症性肠病造成的黏膜损伤：
如图3所示，比较空白组(Control)、模型组(DSS)、女贞苷组(LIG)、甘露三糖组(MAN)、女贞苷组和甘露三糖组(L+M)和女贞苷-甘露三糖复合物组(L-M)的小鼠肠道病理组织可以发现，模型组(DSS)组织HE染色显示结肠组织破坏严重，存在明显的炎性细胞浸润，而女贞苷组(LIG)、甘露三糖组(MAN)、女贞苷组和甘露三糖组(L+M)和女贞苷-甘露三糖复合物组(L-M)，尤其是女贞苷-甘露三糖复合物组(L-M)组织HE染色显示结肠组织结构回复症状，炎性浸润减少。
3.4.3、本发明的复合物明显缓解小鼠炎症性肠病造成的结肠长度缩短的情况：
如图4所示，在DSS溶液干预小鼠一周后，小鼠结肠明显缩短，而女贞苷组(LIG)、甘露三糖组(MAN)、女贞苷组和甘露三糖组(L+M)和女贞苷-甘露三糖复合物组(L-M)，尤其是女贞苷-甘露三糖复合物组(L-M)可缓解这种结肠缩短的情况。
3.4.4、本发明的复合物明显缓解小鼠炎症性肠病疾病症状：
DAI评分是评估炎症性肠病小鼠疾病壮壮的指标，该指标包括了小鼠体重变化、粪便松软程度和便血这三个指标。如图5所示，在建模期间，4组中，空白组(Control)的分值最低，与模型组(DSS)相比，女贞苷组(LIG)、甘露三糖组(MAN)、女贞苷组和甘露三糖组(L+M)和女贞苷-甘露三糖复合物组(L-M)，尤其是女贞苷-甘露三糖复合物组(L-M)的分值要低很多，说明本发明的复合物明显缓解了小鼠炎症性肠病疾病症状。
将实施例1和3中的甘露三糖替换为其他甘露寡糖可以到达类似效果。
综上所述，本发明提供了一种可治疗炎症性肠病的女贞苷-甘露寡糖复合物，该复合物能明显缓解小鼠体重因患病而体重下降的情况、明显缓解小鼠炎症性肠病造成的黏膜损伤、明显缓解小鼠炎症性肠病造成的结肠长度缩短的情况、明显缓解小鼠炎症性肠病的疾病症状，可作为防治炎症性肠病的潜在药物，为临床提供一种新的用药选择。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (9)
1.一种多酚-寡糖复合物，其特征在于，所述多酚-寡糖复合物中的活性成分为女贞苷和甘露寡糖，所述女贞苷和甘露寡糖的质量比为1:1~1:1.2；
所述女贞苷的CAS号为35897-92-8，所述甘露寡糖为甘露三糖。
2.一种权利要求1所述的多酚-寡糖复合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤，
S1：在pH为5~7的条件下，将女贞苷溶液与甘露寡糖溶液混匀，得到混合液；
S2：对所述混合液进行加热处理，分离、干燥，得到所述多酚-寡糖复合物。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，混匀是在30~50℃条件下磁力搅拌80~120 min。
4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，加热处理的温度为30~50℃，时间为14~18 h。
5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，采用离心的方式进行分离。
6.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，干燥的方式为冷冻干燥，时间为30-50 h。
7.如权利要求2或6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，干燥前还包括预冷的操作，所述预冷的温度为-100~-60℃，时间为20-30 h。
8.权利要求1所述的多酚-寡糖复合物或权利要求2-7中任一项所述的制备方法制备得到的含多酚-寡糖复合物的溶液在制备治疗炎症性肠病的药物中的应用。
9.一种治疗炎症性肠病的药物，其特征在于，包含权利要求1所述的多酚-寡糖复合物或权利要求2-7中任一项所述的制备方法制备得到的多酚-寡糖复合物。
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Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2015014973A2 (en) * | 2013-07-31 | 2015-02-05 | Institut National De La Recherche Agronomique | Use of specific glycoside phosphorylases for the implementation of phosphorolysis or reverse phosphorolysis reactions |
| WO2017153977A1 (en) * | 2016-03-08 | 2017-09-14 | Salzman Lovelace Investments, Ltd. | Solid formulations of resolvins and uses thereof |
| CN107485615A (zh) * | 2017-08-11 | 2017-12-19 | 中国医学科学院药用植物研究所 | 粗壮女贞苷c及其组合物在制备治疗高脂血症及减肥药物中的用途 |
| WO2018023108A1 (en) * | 2016-07-29 | 2018-02-01 | Stc. Unm | Trim proteins and galectins cooperate and codirect autophagy and are useful in the treatment of autophagy related diseases |
| WO2019082206A1 (en) * | 2017-10-25 | 2019-05-02 | Petiva Private Limited | FORMULATION OF IMPROVEMENT OF SUCROSITY AND TASTE |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7713942B2 (en) * | 2001-04-04 | 2010-05-11 | Nordic Vaccine Technology A/S | Cage-like microparticle complexes comprising sterols and saponins for delivery of polynucleotides |
-
2023
- 2023-03-23 CN CN202310292157.5A patent/CN116350648B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2015014973A2 (en) * | 2013-07-31 | 2015-02-05 | Institut National De La Recherche Agronomique | Use of specific glycoside phosphorylases for the implementation of phosphorolysis or reverse phosphorolysis reactions |
| WO2017153977A1 (en) * | 2016-03-08 | 2017-09-14 | Salzman Lovelace Investments, Ltd. | Solid formulations of resolvins and uses thereof |
| WO2018023108A1 (en) * | 2016-07-29 | 2018-02-01 | Stc. Unm | Trim proteins and galectins cooperate and codirect autophagy and are useful in the treatment of autophagy related diseases |
| CN107485615A (zh) * | 2017-08-11 | 2017-12-19 | 中国医学科学院药用植物研究所 | 粗壮女贞苷c及其组合物在制备治疗高脂血症及减肥药物中的用途 |
| WO2019082206A1 (en) * | 2017-10-25 | 2019-05-02 | Petiva Private Limited | FORMULATION OF IMPROVEMENT OF SUCROSITY AND TASTE |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| Mannose ameliorates experimental colitis by protecting intestinal barrier integrity;Lijun Dong，等;nature communications;第13卷;Article number: 4804 * |
| 女贞子、五味子及其与寡糖配伍对肉鸡免疫功能和抗氧化指标的影响;刘玉芹;河北科技师范学院学报;第23卷(第01期);第7-11页 * |
| 甘露寡糖对高脂饮食小鼠的益生作用;王洪善;张晓娟;李恒;史劲松;许正宏;;食品与发酵工业;第44卷(第11期);第63-68页 * |
| 甘露寡糖的降糖研究和初步机制分析;李恒;郑佳林;虞海惠;邢文慧;陆震鸣;蒋敏;张晓娟;许正宏;史劲松;;中国科学:生命科学;第49卷(第05期);第649-658页 * |
| 粗壮女贞苦丁茶的保健功效研究进展;王瑶;刘银;左浩江;裴晓方;;现代预防医学;第44卷(第03期);第424-427、443页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
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