CN108938704A

CN108938704A - 苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用

Info

Publication number: CN108938704A
Application number: CN201811188084.0A
Authority: CN
Inventors: 张南; 钟荣; 简志光
Original assignee: Individual
Current assignee: Heilongjiang Baiodi Biomedical Technology Co ltd
Priority date: 2018-10-12
Filing date: 2018-10-12
Publication date: 2018-12-07

Abstract

本发明公开了苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用，属于医药技术领域，与现有技术比较，本发明所述苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中降低谷丙转氨酶ALT、谷草转氨酶AST活性及血清一氧化氮NO、肝纤维化指标透明质酸HA、层粘连蛋白LN、Ⅲ型前胶原PCⅢ、Ⅳ型胶原C1V含量及肝匀浆丙二醛MDA和羟脯氨酸HYP含量，提高血清白蛋白ALB、超氧化歧化酶SOD含量，且能调节蛋白代谢、抗脂质过氧化，稳定肝细胞膜，减少一氧化氮产生，调节细胞外基质的代谢，具有保肝、抗纤维化作用。且该药成本低廉，易于被广大肝病患者接受，有较好的市场前景。

Description

苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用。

背景技术

肝硬化是临床常见的慢性进行性肝病，由一种或多种病因长期或反复作用形成的弥漫性肝损害。在我国大多数为肝炎后肝硬化，少部分为酒精性肝硬化和血吸虫性肝硬化。病理组织学上有广泛的肝细胞坏死、残存肝细胞结节性再生、结缔组织增生与纤维隔形成，导致肝小叶结构破坏和假小叶形成，肝脏逐渐变形、变硬而发展为肝硬化。早期由于肝脏代偿功能较强可无明显症状，后期则以肝功能损害和门脉高压为主要表现，并有多系统受累，晚期常出现上消化道出血、肝性脑病、继发感染、脾功能亢进、腹水、癌变等并发症。所以目前急需研制和开发选择性强，无副作用，高效的治疗肝硬化新药。

苦味西葫芦(Cucurbita pepo cv Dayangua),别名大烟瓜,是葫芦科南瓜属西葫芦的一个变种,主要分布于内蒙古多伦地区。其果实味苦,当地民间常用于治疗感冒,还有镇痛、止泻等功效。当地兽医还用其治疗羊、猪等的发热感冒和羊的痢疾,对家禽的常见传染性疾病如鸡的瘟疫性疾病、传染性法氏囊炎、传染性支气管炎等有很好的疗效。现代药理实验研究表明苦味西葫芦提取物具有抗菌、抗病毒、镇痛、增强离体十二指肠兴奋性和消炎解热等方面作用。

中国发明专利CN102949434B公开了苦味西葫芦提取物在制备抗痛风药物中的用途，以苦味西葫芦水提取物或者苦味西葫芦醇提取物作为有效成分，能够有效降低尿酸水平，缓解关节肿大程度和改善行动能力，具有抗痛风的功效，无副作用，高效并且不会使通风在停药后产生反弹。但是，该发明专利并没有发现苦味西葫芦水提取物或苦味西葫芦醇提取物能够用于制备抗肝硬化药物。因此，在现有技术水平上，苦味西葫芦提取物仍然具有巨大的开发潜能。

鉴于上述缺陷，本发明创作者经过长时间的研究和实践终于获得了本发明。

发明内容

为解决上述技术缺陷，本发明采用的技术方案在于，提供苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用。

较佳的，所述药物含有药学上有效量的所述苦味西葫芦水提取物以及药学上可接受的辅料或辅助成分。

较佳的，所述辅料或辅助成分包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、乳化剂、助溶剂、增溶剂、渗透压调节剂、表面活性剂、包衣材料、pH调节剂、抗氧剂、抑菌剂或缓冲剂中的任意一种或至少两种的组合。

较佳的，所述药物被制成任何一种药学上可接受的剂型。

较佳的，所述任何一种药学上可接受的剂型选自混悬剂、乳剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液或注射剂。

较佳的，所述抗肝硬化的临床表现包括谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性降低，血清一氧化氮、肝纤维化指标透明质酸、层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原和丙二醛含量及肝匀浆的丙二醛、羟脯氨酸水平降低，血清白蛋白、超氧化歧化酶含量提高中的一种或一种以上。

较佳的，所述肝硬化包括肝炎后肝硬化、酒精性肝硬化或血吸虫性肝硬化中的一种。

较佳的，所述苦味西葫芦提取物是由苦味西葫芦瓜果经过加工处理后溶解在蒸馏水中，并进行萃取分离后获得的苦味西葫芦水提取物。

较佳的，所述苦味西葫芦水提取物通过以下制备步骤制备得到：

步骤S1，取半成熟的所述苦味西葫芦瓜果，去皮，然后将果肉切成小块，加入水煮制，制得糊状物；

步骤S2，将步骤S1中所述糊状物捞出，晒干，制得原药干；

步骤S3，将步骤S2中所述原药干粉碎为原药粉末，在室温下保存；

步骤S4，取步骤S3中所述原药粉末，溶解在蒸馏水中，摇动萃取，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到所述苦味西葫芦水提物。

步骤S1，取半成熟的所述苦味西葫芦瓜果90-110kg，去皮，然后将果肉切成小块，加入22.5-27.5kg水煮制3-5h，制得糊状物；

步骤S2，将步骤S1中所述糊状物捞出，晒干，制得3.1-3.7kg原药干；

步骤S4，取步骤S3中所述原药粉末90-110g，溶解在900-1100ml蒸馏水中，摇动萃取7-9h，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到10-12g所述苦味西葫芦水提物。

与现有技术比较本发明的有益效果在于：

本发明所述苦味西葫芦水提物作为肝硬化药物能调节蛋白代谢、抗脂质过氧化，稳定肝细胞膜，减少一氧化氮的产生，调节细胞外基质的代谢，具有保肝、抗纤维化作用。由于该药成本低廉，易于被广大肝病患者接受，有较好的市场前景。

具体实施方式

实施例1

苦味西葫芦水提取物的制备。

所述苦味西葫芦水提取物通过以下制备步骤制备得到：

步骤S1，取半成熟的所述苦味西葫芦瓜果90-110kg(本实施例中优选100kg)，去皮，然后将果肉切成小块，加入22.5-27.5kg(本实施例中优选25kg)水煮制3-5h(本实施例中优选4h)，制得糊状物；

步骤S2，将步骤S1中所述糊状物捞出，晒干，制得3.4kg原药干；

步骤S4，取步骤S3中所述原药粉末90-110g(本实施例中优选100g)，溶解在900-1100ml蒸馏水中(本实施例中优选1000ml)，摇动萃取7-9h(本实施例中优选8h)，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到11g所述苦味西葫芦水提物。

所述苦味西葫芦水提取物与药学上可接受的辅料或辅助成分制成抗肝硬化药物。其中，所述辅料或辅助成分包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、乳化剂、助溶剂、增溶剂、渗透压调节剂、表面活性剂、包衣材料、pH调节剂、抗氧剂、抑菌剂或缓冲剂中的任意一种或至少两种的组合，，所述药物被制成任何一种药学上可接受的剂型，可以为混悬剂、乳剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液或注射剂，所述苦味西葫芦水提物作为肝硬化药物能调节蛋白代谢、抗脂质过氧化，稳定肝细胞膜，减少一氧化氮的产生，调节细胞外基质的代谢，具有保肝、抗纤维化作用。由于该药成本低廉，易于被广大肝病患者接受，有较好的市场前景。

实施例2

本实施例以苦味西葫芦水提取物的药理和活性实验及结果来进一步说明本发明。

活性实验情况：

取大鼠120只，平均分成6组，即空白对照组，模型组，苦味西葫芦大、中、小剂量组、肝苏颗粒阳性对照组，其中苦味西葫芦大、中、小剂量组分别为生药1000mg/kg、500mg/kg和250mg/kg，肝苏颗粒阳性对照组用8.00g/kg(相当于临床用量的10倍)，分别对三剂量组、阳性对照组和模型组的大鼠皮下注射40％的四氯化碳油液3mL/kg，每周2次，连续10周，且用药于给四氯化碳4周后开始，模型组和空白对照组给予等容量蒸馏水，每日晨灌胃1次，连续6周，观察动物的一般情况及死亡情况。

检测方法：

当末次给药24h后，将大鼠用1％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，心脏取血做肝功能检测，即测量谷丙转氨酶ALT、谷草转氨酶AST、血清总蛋白TP、血清白蛋白ALB和血清球蛋白GLO的含量，同时检测肝纤维化指标透明质酸HA、层粘连蛋白LN、Ⅲ型前胶原PCⅢ、Ⅳ型胶原C1V、一氧化氮NO、丙二醛MDA、超氧化歧化酶SOD的含量。取肝在冰水中制成10％的匀浆，测定超氧化歧化酶SOD、丙二醛MDA和羟脯氨酸HYP的含量。每只大鼠取同一部位肝脏做病理检查。且肝功能用全自动生化分析仪，其他严格按操作说明做。肝脏病理石蜡包埋，HE染色，并在显微镜下观察拍照。

实验结果：

1、动物的一般情况

实验中观察到，空白组情况良好，模型组第4周出现精神萎靡，被毛蓬松并有死亡，解剖肝脏花斑样改变，苍白、质硬，有的有腹腔积液，死者肛周潮湿，死亡6只。用药组有显著改善，没有动物死亡。

2、苦味西葫芦对肝纤维化肝功能的影响

实验结果见表1，从表1中可看出模型组谷丙转氨酶ALT、谷草转氨酶AST含量明显增高，血清总蛋白TP、血清白蛋白ALB含量明显降低，与空白对照组比较差异有显著性(P<0.05)；而苦味西葫芦水提物三剂量组能降低谷丙转氨酶ALT、谷草转氨酶AST含量，增加血清白蛋白ALB，且呈现剂量性变化趋势，与模型组比较差异有显著性(P<0.05)。

表1各组血清HA、LN、PCIII和ClV的比较(X±s)

3、苦味西葫芦对肝纤维化血清MDA、SOD、NO的影响

实验结果见表2，从表2中可看出模型组血清一氧化氮NO、丙二醛MDA含量明显增加，超氧化歧化酶SOD含量明显降低，与空白对照比较差异有显著性(P<0.05)；而苦味西葫芦水提物三剂量组降低血清一氧化氮NO、丙二醛MDA含量，提高超氧化歧化酶SOD活性，且呈现剂量性变化趋势，与模型组比较差异有显著性(P<0.05)。

表2各组血清MDA、SOD和NO的比较(x±s)

组别	n	MAD(nmol/ml)	SOD(u/mg)	NO(uMol/L)
					空白对照组	20	5.83±1.77	234.12±27.43	18.72±7.45
模型组	14	26.76±4.98	104.85±26.67	68.27±12.21
					苦味西葫芦组(大)	20	10.25±3.93	211.38±25.28	26.89±7.12
苦味西葫芦组中)	20	13.93±3.87	183.78±26.86	37.82±7.27
					苦味西葫芦组(小)	20	16.53±3.73	143.25±23.93	45.58±8.21
阳性对照组	20	17.61±4.78	148.16±24.69	42.79±7.39

4、苦味西葫芦对血清肝纤维化指标的影响

实验结果见表3，从表3中可看出模型组肝纤维化指标透明质酸HA、层粘连蛋白LN、Ⅲ型前胶原PCⅢ、Ⅳ型胶原C1V含量明显增加，与空白对照组比较差异有显著性(P<0.05)。而苦味西葫芦水提物三剂量组能降低肝纤维化指标透明质酸HA、层粘连蛋白LN、Ⅲ型前胶原PCⅢ、Ⅳ型胶原C1V水平，且呈现剂量性变化趋势，与模型组比较差异有显著性(P<0.05)。

表3各组血清HA、LN、PCIII和ClV的比较(X±s)

组别	n	HA(ng/ml)	LN(ng/ml)	PCIII(ng/ml)	CIV(ng/ml)
						空白对照组	20	82.38±15.45	38.34±8.45	108.56±17.12	48.72±11.47
模型组	14	328.33±48.23	265.87±44.98	289.32±38.99	271.63±43.12
						苦味西葫芦组(大)	20	195.12±30.25	98.52±21.54	161.67±23.45	80.46±21.98
苦味西葫芦组中)	20	225.12±32.76	131.67±26.98	191.23±28.36	121.98±25.67
						苦味西葫芦组(小)	20	251.67±31.86	182.56±31.95	227.98±29.87	158.76±22.15
阳性对照组	20	252.15±31.16	168.38±31.96	195.79±38.12	164.36±31.23

5、苦味西葫芦对肝纤维化肝匀浆MDA、SOD、HYP的影响

实验结果见表3，从表3中可看出模型组肝匀浆丙二醛MDA和羟脯氨酸HYP的含量明显增高，超氧化歧化酶SOD含量明显降低，与空白对照组比较差异有显著性(P<0.05)；而苦味西葫芦水提物三剂量组能降低肝匀浆丙二醛MDA和羟脯氨酸HYP的含量，增加超氧化歧化酶SOD含量,且呈现剂量性变化趋势，与模型组比较差异有显著性(P<0.05)。

表4各组肝匀浆MDA、SOD和HYP的比较(X±s)

组别	n	MDA(nmol/ml)	SOD(u/mg)	HYP(ug/mg)
					空白对照组	20	3.09±0.65	187.82±25.67	0.87±0.13
模型组	14	15.93±3.47	81.24±21.12	2.88±0.85
					苦味西葫芦组(大)	20	5.12±1.23	163.23±22.43	1.26±0.35
苦味西葫芦组中)	20	8.21±2.12	135.67±26.43	1.53±0.57
					苦味西葫芦组(小)	20	10.28±2.23	110.67±24.51	1.98±0.79
阳性对照组	20	9.96±2.41	126.92±27.79	1.97±0.89

6、肝组织病理学检查

肉眼观察，模型组与小剂量组颜色灰白，质较硬。显微镜下，空白对照肝细胞结构清楚；无细胞变性、坏死和纤维组织增生。模型组肝组织结构部分破坏、可见肝细胞脂肪变性、水变性及灶性坏死，有较明显纤维组织增生，甚至有部分区域有早期肝硬化表现；苦味西葫芦大、中剂量组脂肪变性轻微，见少许纤维组织增生；苦味西葫芦小剂量组肝组织灶性破坏，肝细胞变性、肝纤维化较模型组稍微；阳性对照组肝组织灶性破坏，肝细胞变性、肝纤维化较模型组稍微。

因此，本实验结果发现在四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化损伤时，谷丙转氨酶ALT、谷草转氨酶AST活性及血清一氧化氮NO、肝纤维化指标透明质酸HA、层粘连蛋白LN、Ⅲ型前胶原PCⅢ、Ⅳ型胶原C1V含量及肝匀浆丙二醛MDA和羟脯氨酸HYP含量明显增加。而血清白蛋白ALB、超氧化歧化酶SOD含量明显降低，与正常对照组比较差异有显著性(P<0.05)，与模型组比较苦味西葫芦水提物三剂量组可降低谷丙转氨酶ALT、谷草转氨酶AST活性及血清一氧化氮NO、肝纤维化指标透明质酸HA、层粘连蛋白LN、Ⅲ型前胶原PCⅢ、Ⅳ型胶原C1V含量及肝匀浆丙二醛MDA和羟脯氨酸HYP含量，提高血清白蛋白ALB、超氧化歧化酶SOD含量，且呈现剂量性变化趋势，差异均有显著性(P<0.05)。病理检查发现苦味西葫芦水提物液能减轻肝脂肪变性，减少纤维组织的增生，苦味西葫芦水提物具有明显保护肝损伤的作用。

因此，本实施例所述苦味西葫芦水提物作为抗肝硬化药物能调节蛋白代谢、抗脂质过氧化，稳定肝细胞膜，减少一氧化氮产生，调节细胞外基质的代谢，具有保肝、抗纤维化作用。且该药成本低廉，易于被广大肝病患者接受，有较好的市场前景。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，对本发明而言仅仅是说明性的，而非限制性的。本专业技术人员理解，在本发明权利要求所限定的精神和范围内可对其进行许多改变，修改，甚至等效，但都将落入本发明的保护范围内。

Claims

1.苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用，其特征在于，所述药物含有药学上有效量的所述苦味西葫芦水提取物以及药学上可接受的辅料或辅助成分。

3.根据权利要求2所述的苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用，其特征在于，所述辅料或辅助成分包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、乳化剂、助溶剂、增溶剂、渗透压调节剂、表面活性剂、包衣材料、pH调节剂、抗氧剂、抑菌剂或缓冲剂中的任意一种或至少两种的组合。

4.根据权利要求3所述的苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用，其特征在于，所述药物被制成任何一种药学上可接受的剂型。

5.根据权利要求4所述的苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用，其特征在于，所述任何一种药学上可接受的剂型选自混悬剂、乳剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液或注射剂。

6.根据权利要求5所述的苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用，其特征在于，所述抗肝硬化的临床表现包括谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性降低，血清一氧化氮、肝纤维化指标透明质酸、层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原和丙二醛含量及肝匀浆的丙二醛、羟脯氨酸水平降低，血清白蛋白、超氧化歧化酶含量提高中的一种或一种以上。

7.根据权利要求6所述的苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用，其特征在于，所述肝硬化包括肝炎后肝硬化、酒精性肝硬化或血吸虫性肝硬化中的一种。

8.根据权利要求1所述的苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用，其特征在于，所述苦味西葫芦提取物是由苦味西葫芦瓜果经过加工处理后溶解在蒸馏水中，并进行萃取分离后获得的苦味西葫芦水提取物。

9.根据权利要求8所述的苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用，其特征在于，所述苦味西葫芦水提取物通过以下制备步骤制备得到：

步骤S1，取半成熟的苦味西葫芦瓜果，去皮，然后将果肉切成小块，加入水煮制，制得糊状物；

步骤S2，将步骤S1中所述糊状物捞出，晒干，制得原药干；

步骤S4，取步骤S3中所述原药粉末，溶解在蒸馏水中，摇动萃取，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到所述苦味西葫芦水提取物。

10.根据权利要求9所述的苦味西葫芦提取物在制备抗肝硬化或肝癌药物中的应用，其特征在于，所述苦味西葫芦水提取物通过以下制备步骤制备得到：

步骤S4，取步骤S3中所述原药粉末90-110g，溶解在900-1100ml蒸馏水中，摇动萃取7-9h，然后进行离心、过滤，得到上清液，再进行浓缩干燥，得到10-12g所述苦味西葫芦水提取物。